血清酶类测定
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血清α淀粉酶(AMS)(EPS-G7法)测定1. 实验原理AMS测定采用酶动态比色测定法。
所用底物为4,6-亚乙基-α,D-麦芽七糖苷-对硝基苯酚(EPS-G7)。
样品中α-淀粉酶分解底物EPS-G7,生成对硝基苯酚(PNP),在405nm处比色,吸光度的上升速率与样品中α-淀粉酶的活力成正比。
2 亚乙基-G5 + 2 G2PNP5EPS-G7+5H2O α-淀粉酶 2 亚乙基-G4 + 2 G3PNP亚乙基-G3+ G4PNPα-葡萄糖苷酶2G2P N P+2G3P N P+G4P N P+14H2O5P N P+14G (反应式中PNP:对硝基苯酚;G:葡萄糖)2. 标本采集与处理:2.1 病人准备:无特殊要求。
2.2 标本类型:血清、肝素或EDTA处理的血浆、尿液。
2.3 血清分离血清或血浆应在收集后尽快分离出来。
未酸化的尿液,随机或限时收取。
3. 标本存放:不要用嘴吸取标本或对标本吹气,以免唾液污染标本唾液中的淀粉酶使结果升高。
血清淀粉酶在20~25℃稳定一个星期,避免微生物降解作用;在2~8℃时稳定一个月。
尿液样品在2~8℃可稳定10天,在15~25℃可稳定2天。
对于尿液,酸性pH值可使淀粉酶的稳定性减弱,因此,储存前pH值应调至大约7.0。
4. 标本运输:常温条件下运输5. 标本拒收标准:细菌污染、溶血的不能做测定。
6. 实验材料:6.1 AMS测定试剂盒(试剂1 6×64 ml +试剂2 6×16 ml)6.1.1 试剂组成试剂1:GOOD’S 缓冲液p H 7.1 100mmol/L氯化钠50mmol/L氯化镁10mmol/Lα-葡萄糖苷酶≥23KU/L试剂2:EPS-G73mmol/L6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存:原试剂避光保存于2~8℃,若无污染,可稳定至失效期。
试剂有效期为24个月。
6.1.4变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染则试剂不能使用。
血清谷丙转氨酶实验报告血清谷丙转氨酶实验报告血清谷丙转氨酶(Alanine Aminotransferase,简称ALT)是一种存在于肝脏细胞中的酶类物质,它在肝脏功能评估中起着非常重要的作用。
通过检测血液中的ALT水平,可以帮助医生判断肝脏是否受损或存在疾病。
一、实验目的本次实验的目的是通过测量血清中ALT的含量,了解被检测对象的肝脏功能是否正常。
通过对实验结果的分析,可以初步判断是否存在肝脏疾病,并为进一步的诊断和治疗提供参考依据。
二、实验方法1. 实验前准备:准备好实验所需的血清样本、试剂和仪器设备,确保实验环境清洁卫生。
2. 采集血清样本:选择合适的部位,用无菌针头采集被检测对象的静脉血液。
注意遵守无菌操作规范,避免外界污染。
3. 血清分离:将采集到的血液样本放置于离心管中,以适当的转速离心一段时间,使血液分离成血清和红细胞。
4. ALT检测:将分离得到的血清样本转移至ALT检测仪器中,按照仪器操作说明进行操作。
仪器会自动测量ALT的含量,并显示结果。
三、实验结果根据实验测得的结果,ALT的含量可以分为正常范围和异常范围。
正常范围通常是男性10-40 U/L,女性7-35 U/L。
如果实验结果显示ALT的含量超出正常范围,可能意味着肝脏受损或存在疾病。
四、结果分析1. ALT升高的原因:ALT升高可能是由于肝脏炎症、肝细胞坏死、肝损伤等原因导致。
常见的疾病如肝炎、脂肪肝、肝硬化等都会引起ALT的升高。
2. ALT降低的原因:ALT降低可能是由于肝脏功能减退或肝细胞受损导致。
例如,肝功能衰竭、肝癌等情况下,ALT的含量通常会降低。
五、临床意义ALT作为肝脏功能的指标之一,对于肝脏疾病的早期诊断和治疗具有重要意义。
通过检测ALT的含量,可以帮助医生判断肝脏是否受损,并及时采取相应的治疗措施。
六、实验注意事项1. 实验操作要规范:在实验过程中,要严格遵守无菌操作规范,避免外界污染。
同时,仪器操作要按照说明书进行,确保结果准确可靠。
血清丙氨酸氨基转移酶测定1.实验原理国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。
ALTL-丙氨酸+ -酮戊二酸丙酮LDH(乳酸脱氢酶)酸+ L-谷氨酸丙酮酸+ NADH + H+L-乳酸+ NAD++ H2O 上述偶联反应中,NADH的氧化速率与`样品中ALT的活力成正比,在340nm处NADH呈现特性吸收峰,而NAD+则没有。
因此,可在340nm监测吸光度的下降速率(-△A/min),计算出ALT的活性单位。
2. 标本:2.1 病人准备:12小时禁食。
2.2 类型:血清,肝素或EDTA血浆。
3. 标本存放:3天内的活性损失:2~8℃保存:<10%;15~25℃保存:<17%;标本稳定性:-20℃保存至少可稳定4周。
4. 标本运输:常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准:标本溶血、细菌污染的标本。
6. 实验材料6.1 试剂欧泰克ALT测定试剂盒6.1.1 试剂组成Tris缓冲液pH 7.4 80mmol/LL-丙氨酸800mmol/LLDH(乳酸脱氢酶)≥1200U/La-酮戊二酸18mmol/LNADH 0.18mmol/L6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂保存于2~8℃,若无污染,可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。
6.1.5 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防腐剂。
不可入口!避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的预防措施使用试剂。
6.2 校准品:使用罗氏公司提供的校准品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。
6.3 质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。
7. 仪器:日立7060生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数:参见生化检验日立7060生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2 仪器操作步骤:参见生化检验日立7060生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。
血清淀粉酶AMY测定1.实验原理α-Amylase5ethylidene-G7PNP+5H2O ————→2ethylidene-G5+2G2PNP+2ethylidene-G4+2G3PNP+ethylidene-G3+G4PNPα-glucosidase2G2PNP +2G3PNP + G4PNP + 14H2O—————→14G + 5PNP在405nm的波长下, PNP的增加速率与AMY的活性成正比。
2. 标本:2.1 病人准备:新鲜血清,采血后应及时分离,避免溶血。
2.2 类型:血清、肝素或EDTA血浆,应避光保存。
3. 标本存放:15~25℃保存可稳定2天;2~8℃保存可稳定7天;-20℃保存可稳定3个月,如冰冻保存,不可反复冻融!。
4. 标本运输:冰冻条件下保存运输。
5. 标本拒收标准:标本溶血、细菌污染、脂血等存运输的标本。
6. 实验材料6.1 试剂:亚太淀粉酶试剂盒(H012 091020 试剂1+试剂2)6.1.1 试剂组成6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2~8℃,若无污染,可稳定至失效期。
试剂有效期为12个月。
试剂必需避光保存。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示:当试剂空白吸光率A405nm(1.0cm)>0.1,或有混浊和可见颗粒时,请不要再使用。
6.1.5 注意事项:试剂请勿直接接触皮肤、眼睛,如有接触,请用大量清水清洗。
请勿吞服。
6.2 校准品:使用Cfas提供的专用校准品对自动分析仪进行校准,参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品:参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器:奥林巴斯AU640生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数:参见生化检验奥林巴斯AU640生化分析仪项目测定参数.SOP文件。
8.2仪器操作步骤:参见生化检验奥林巴斯AU640生化分析仪操作规程.SOP文件。
9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。
血清脂肪酶的检测原理血清脂肪酶是一种重要的生物标志物,可以用于评估人体脂代谢情况和脂肪相关疾病的发展程度。
血清脂肪酶的检测原理是基于酶促反应的测定方法。
本文将从血清脂肪酶的定义、功能、检测原理和临床应用等方面进行阐述。
血清脂肪酶是一种酶类物质,也被称为脂肪酶、脂肪酯酶或胆固醇酯酶。
它主要存在于肠道、胰腺和肝脏等组织中,参与脂肪的消化和吸收过程。
血清脂肪酶可将脂肪酯水解为甘油和游离脂肪酸,从而促进脂肪的代谢。
血清脂肪酶的检测原理是基于酶促反应的测定方法。
具体而言,常用的检测方法是通过测定血清中的甘油水平来间接评估脂肪酶的活性。
测定过程中,首先将血清样品与试剂中的底物反应,脂肪酶催化底物水解生成游离甘油。
然后,使用特定的检测试剂将游离甘油与酶反应生成有色产物,其颜色的强度与甘油的浓度成正比。
最后,通过测定产物的光密度或吸光度,可以计算出血清中甘油的浓度,从而间接评估脂肪酶的活性。
血清脂肪酶的检测原理具有一定的临床应用价值。
首先,它可以用于评估人体脂代谢情况。
脂肪代谢紊乱是导致肥胖、高血脂和代谢综合征等疾病的主要原因之一。
通过检测血清脂肪酶的活性,可以了解脂肪代谢的状况,为脂肪相关疾病的早期诊断和治疗提供依据。
血清脂肪酶的检测原理可应用于脂肪相关疾病的评估。
例如,血清脂肪酶活性的增加常见于非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)和胰腺炎等疾病。
这是因为这些疾病的发生与脂肪酶活性的改变密切相关。
通过检测血清脂肪酶的活性,可以评估疾病的严重程度和预后,并为治疗方案的制定提供参考。
血清脂肪酶检测还可用于监测治疗效果。
一些药物如胰岛素增敏剂和脂肪酶抑制剂等可以影响脂肪酶的活性。
通过定期检测血清脂肪酶的活性变化,可以评估治疗效果,并及时调整治疗方案,提高治疗的准确性和有效性。
血清脂肪酶的检测原理是基于酶促反应的测定方法。
通过测定血清中的甘油水平来间接评估脂肪酶的活性,从而了解脂肪代谢情况和脂肪相关疾病的发展程度。
血清脂肪酶的检测原理在临床上具有重要的应用价值,可以用于脂肪代谢的评估、脂肪相关疾病的诊断和治疗效果的监测。
血清淀粉酶(AMY)的检测及临床意义一、概述1、淀粉酶(AMY)是催化多糖化合物1,4-糖苷键水解的一组酶,可催化淀粉、糊精和糖原水解。
2、淀粉酶存在于体内的多个器官和组织中,主要由外分泌腺的胰腺和唾液腺产生。
3、淀粉酶相对分子量小,可以从肾小球滤过出现在尿液中,其中50%被肾小管重吸收,随尿液排出的淀粉酶,称尿淀粉酶,淀粉酶是唯一能在正常时出现于尿液中的血清酶。
二、检测方法血清淀粉酶测定曾出现众多方法,目前应用最多的以经修饰的麦芽七糖为底物的方法。
三、参考区间成人(20~79岁)血清淀粉酶:35~135U/L。
四、临床意义1、急性胰腺炎在急性胰腺炎中,淀粉酶、脂肪酶、弹性酶和胰蛋白酶同时被释放到血液中。
血清淀粉酶水平通常在6~12 h内升高,24~48 h达到峰值,在随后的3~7 d内降至正常或接近正常水平。
脂肪酶在4~8 h 内上升,24 h达到峰值,在接下来的8~14 d内下降到正常或接近正常水平。
血清脂肪酶被认为是比血清淀粉酶更可靠的急性胰腺炎诊断生物学标记物。
在急性胰腺炎中,约75%的患者在发病后24小时内淀粉酶升高超过正常值上限3倍。
在急性胰腺炎时尿淀粉酶升高较晚,发病后12~14小时开始升高,下降缓慢,可持续1~2周(尿淀粉酶值会受患者尿量的影响)。
因此在急性胰腺炎病程早期检测血清淀粉酶更加灵敏,而在病情后期血清淀粉酶降至正常时,还可通过检测尿淀粉酶辅助诊断。
2、淀粉酶活性高低与病情不呈相关性,血清淀粉酶是否降至正常不能作为判断病情程度或患者是否恢复饮食的依据。
3、急性阑尾炎、肠梗阻、胰腺癌、胆石症、溃疡病穿孔及吗啡注射后等均可引起血清淀粉酶增高,但一般低于500U/L。
4、正常人血清中淀粉酶主要由肝脏产生,因此血清与尿中淀粉酶同时减低主要见于肝炎、肝硬化、肝癌及急性和慢性胆囊炎等。
肾功能严重障碍时,血清淀粉酶升高,但尿淀粉酶降低。
五、注意事项1、血清淀粉酶比较稳定,室温下可保存4天,4℃下2周,-20℃以下可保存数年。
血清酶在临床诊断上的应用一.血清酶的来源、去路与分类1.血浆特异酶2.外分泌酶3.细胞酶4.酶的去路(1)尿排(2)肝或网状内皮系统的清除(3)在血管内失活和分解(4)转入其他体液二.血清酶的正常值及生理差异1.酶的活力常用单位来表示,但因一种酶可有几种不同的方法来测定,不同方法所规定的酶单位的含义不同,所以其正常值也有较大的差别。
酶的质量测定法,利用酶的抗原性,通过抗原,抗体反应,直接测定酶的质量,此免疫学方法灵敏度与特异性高,不受体液其它物质的影响,特别是激活剂与抑制剂的影响。
2.酶活力的正常差异(1)进食(2)性别(3)年龄(4)运动(5)妊娠三.疾病时酶活力改变的机制1.酶合成异常2.酶从损伤细胞中释放增加—主要机制3.酶在细胞外间隙的分布和运送4.酶的清除5.其他四.血清酶测定在诊断肝胆疾病中的应用1.反映肝细胞损伤的酶类AST ALTChE LCAT2.反映胆道梗阻的酶类ALP γ-GT 5’-NT3.反映肝纤维化的酶MAO五.血清酶测定在诊断心梗中的应用1.CK及其同工酶CK酶法测定参考范围: 38-174U/L, 女性低于男性CK同工酶电泳法测定正常人血清: CK-MM 94-96%, CK-MB<5%,CK-BB极微量CK-MB1 & CK-MB2CK-MB2/CK-MB1 > 1.5 CK-MB2升高,提示急性心梗2.LDH与LDH同工酶连续监测法测定参考范围: 104-245U/LLDH同工酶电泳法测定正常情况: LDH2>LDH1>LDH3>LDH4>LDH5临床意义:AMI时: LDH1>LDH2, LDH2/LDH1<1.0肝胆疾病时: 肝细胞坏死LDH5升高,LDH5>LDH4; 阻塞性黄疸时,LDH4>LDH5 肿瘤影响至肝脏时,LDH4,LDH5升高; 白血病往往有LDH3,LDH4的升高恶性贫血,LDH极度升高,LDH1升高,且LDH1>LDH23. 心肌蛋白检测(1)cTnTELISA法: cTnT>0.2ug/L 为诊断临界值临床意义:AMI 发病后3-6小时升高,10-24小时达峰值,10-15天恢复,其特异性优于CK-MB & LDH不稳定型心绞痛,骨骼肌疾病或肾脏衰竭时也会升高(2)cTnIELISA法: cTnI>1.5ug/L为诊断临界值临床意义:AMI 发病后3-6小时升高,14-20小时达峰值,5-7天恢复,其特异性为93-99% (3)MbELISA法: 50-85ug/L , >75ug/L为诊断临界值临床意义:AMI发病后0.5-2.0小时升高超过参考值上限,诊断灵敏度为50-60%, 是AMI早期诊断指标;急性肌损伤,肾衰竭,心力衰竭等也升高(4)FABP临床意义:与Mb都是AMI早期诊断的标志物六.血清酶测定在诊断胰腺疾病中的应用1.淀粉酶(AMS)酶法测定参考范围: 20-115 IU/LAMS同工酶免疫抑制法: 血清S型45-70%, P型30-55%临床意义:急性胰腺炎发病6-12小时血清AMS升高,3-5天后恢复,尿液AMS发病后12-24小时升高,3-10天恢复;慢性胰腺炎,胰腺癌,胰管阻塞也有AMS升高S型AMS升高见于腮腺炎,肺癌,卵巢癌,P型AMS升高见于急性胰腺炎2.脂肪酶(LPS)比色法,浊度法,滴定法临床意义:急性胰腺炎时升高,与AMS同测可提高敏感性,特异性较AMS为高胰腺癌,慢性胰腺炎,胆总管结石,肿瘤,十二指肠溃疡等可升高3.胰蛋白酶原七. 其他血清酶检测1.酸性磷酸酶(ACP)PAP(前列腺酸性磷酸酶)可被酒石酸抑制非前列腺酸性磷酸酶不被酒石酸抑制临床意义:前列腺癌,前列腺肥大,前列腺炎骨病如骨肿瘤,恶性肿瘤骨转移,Paget病,MM,骨质疏松症肝癌,肝硬化,肝炎白血病,霍奇金病等2.胆碱酯酶(CHE)真性胆碱酯酶(AchE)假性胆碱酯酶(SchE)AchE为SchE的1.5-2.5倍临床意义:有机磷中毒,两种都降低,以SchE降低为诊断依据,分轻度,中度,重度中毒,经治疗后,SchE可上升肝实质损害,如急慢性肝炎,肝硬化,肝昏迷,血吸虫病,肝癌等,SchE降低进行性系统性硬化症,老年性痴呆等可升高3.超氧化物歧化酶(SOD)临床意义:高血压,冠心病,高血脂等升高肝硬化,肝癌,免疫病,老年人可降低引起血清酶活力增高的重要疾病。
血清碱性磷酸酶ALP测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。
2 实验原理本试剂以国际临床化学会(IFCC)推荐方法为基础,所采用的反应原理与反应式如下。
ALP对-硝基苯磷酸盐 + H2O ----------- 对硝基酚 + 磷酸在上述反应中,对-硝基苯酚的生成速率与样本中碱性磷酸酶的活力成正比。
通过在405 nm处监测吸光度的上升速率,即可测得样本中碱性磷酸酶的活性。
3 标本采集与处理:3.1 病人准备:无特殊要求。
3.2 标本类型:标本最好是无溶血的血清。
3.3 血清分离:应在收集后两小时内分离出来。
避免使用含EDTA或草酸盐的血浆。
3.4 标本存放:2~3天内的活性损失:15~25℃保存:<10%;标本稳定性:4~8℃保存稳定7天;-20℃保存至少可稳定2个月标本。
如果分析延迟8小时以上,最好把血清冷藏。
冷冻的血清在融解后会表现出血清值的显著降低。
3.5 标本运输:常温条件下运输3.6 标本拒收标准:细菌污染的不能做测定。
4 实验材料:4.1 试剂:上海复星长征医学科学有限公司ALP试剂盒(沪食药监械(准)字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014)4.1.1 试剂组成试剂1(R1):乙酸镁3.0mmol/L硫酸锌 1.5mmol/LHEDTA 3.0mmol/LAMP缓冲液420mmol/L试剂2(R2):对-硝基苯磷酸盐81.5mmol/LAMP缓冲液420mmol/LHEDTA5.0mmol/L4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存:在2~8℃避光、密封的储存条件下,试剂(盒)自生产之日起有效期为12个月。
试剂启用后,在2~10℃避光的条件下可稳定14天。
4.1.4 变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。
4.1.5 注意事项:试剂中含有稳定剂,可能存在一定的刺激作用或毒性,请勿直接接触皮肤、眼睛。
第1篇一、实验名称血清酶活性检测二、实验目的1. 掌握血清酶活性检测的基本原理和方法。
2. 学会使用生化分析仪进行血清酶活性检测。
3. 了解血清酶活性检测在临床诊断中的应用。
三、实验原理血清酶活性检测是通过测定血清中某种酶的活性来反映该酶在体内的代谢状况。
酶活性测定通常采用比色法、电化学法等方法,其中比色法是最常用的方法。
本实验采用比色法检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)的活性。
四、实验材料1. 试剂:丙氨酸转氨酶(ALT)试剂盒、天冬氨酸转氨酶(AST)试剂盒、缓冲液、磷酸盐缓冲盐溶液(PBS)、硫酸钠、氢氧化钠、盐酸、三氯乙酸等。
2. 仪器:生化分析仪、离心机、移液器、比色皿等。
3. 样品:血清样本。
五、实验步骤1. 样本处理:取血清样本,按照实验要求进行离心处理,分离出血清。
2. 丙氨酸转氨酶(ALT)活性检测:(1)按照试剂盒说明书配置反应体系,加入血清样本。
(2)将反应体系放入生化分析仪中,按照仪器操作步骤进行测定。
3. 天冬氨酸转氨酶(AST)活性检测:(1)按照试剂盒说明书配置反应体系,加入血清样本。
(2)将反应体系放入生化分析仪中,按照仪器操作步骤进行测定。
4. 结果记录与分析:记录实验数据,与正常值范围进行比较,分析实验结果。
六、实验结果1. 丙氨酸转氨酶(ALT)活性检测结果:实验测得的ALT活性为30 U/L,正常值范围为10-40 U/L。
2. 天冬氨酸转氨酶(AST)活性检测结果:实验测得的AST活性为25 U/L,正常值范围为15-35 U/L。
七、讨论与分析1. 丙氨酸转氨酶(ALT)活性检测:ALT主要存在于肝脏细胞中,其活性升高可反映肝脏损伤。
本实验中ALT活性检测结果在正常范围内,说明受试者肝脏功能正常。
2. 天冬氨酸转氨酶(AST)活性检测:AST广泛存在于人体各组织中,但以肝脏细胞中的含量最高。
AST活性升高可反映心肌损伤、肝脏损伤等。