血清脂类测定
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血清总胆固醇测定实验报告
血清总胆固醇测定实验报告血清总胆固醇测定实验报告胆固醇是一种脂类物质，它在人体中起着重要的生理作用。
然而，当胆固醇水平过高时，就会增加心血管疾病的风险。
因此，了解自己的胆固醇水平对于保持健康至关重要。
本实验旨在测定血清中的总胆固醇水平，并通过结果分析对参与者的健康状况进行评估。
实验材料和方法：1. 实验材料：- 血清样本- 高精度血清胆固醇测定试剂盒- 试剂盒使用说明书- 分光光度计- 定量移液器和移液枪- 试管和离心管2. 实验步骤：a. 收集参与者的血液样本，并将其离心分离血清。
b. 根据试剂盒使用说明书，准备所需试剂和标准品。
c. 将标准品和血清样本分别加入试管中，并按照说明书中的步骤进行试剂添加和混合。
d. 使用分光光度计测量各试管中的吸光度，并记录结果。
e. 根据标准曲线计算出各样本中的总胆固醇浓度。
实验结果：通过实验测定，我们得到了参与者血清中的总胆固醇浓度。
根据标准曲线和试剂盒提供的计算公式，我们可以将各样本的吸光度值转换为胆固醇浓度。
根据实验数据，我们将参与者的胆固醇水平分为以下几个等级：1. 理想范围：参与者的胆固醇水平在正常范围内，表明其心血管健康状况良好。
他们应继续保持健康的生活方式，包括均衡的饮食、适当的运动和定期体检。
2. 边缘范围：参与者的胆固醇水平略高于正常范围，但尚未达到危险水平。
他们应该注意饮食结构，减少高胆固醇食物的摄入，并增加运动量。
此外，定期监测胆固醇水平也是必要的。
3. 高风险范围：参与者的胆固醇水平明显升高，表明他们存在心血管疾病的风险。
他们应立即采取行动，改变生活方式，如低脂饮食、戒烟、减少酒精摄入等。
此外，医生可能会建议他们接受进一步的检查和治疗。
实验讨论：通过本实验，我们不仅可以测定参与者血清中的总胆固醇水平，还可以根据结果评估其心血管健康状况。
然而，需要注意的是，本实验只是初步评估，并不能替代专业医生的诊断和建议。
对于高风险范围的参与者，他们应该咨询医生，制定个性化的治疗方案。
《生物化学试验》实验四：血清甘油三酯含量测定
A standard
0.2
M standard = C standard× V standard
正常参考值为10-150 mg/dl。
注意事项
抽提时摇匀静置，待完全分层后才能吸取上层液， 吸取上层液时不能吸入下层液； 选用小试管时试管口径不能太细；
试管使用时必须要干燥；
实验完成后，试管和比色杯必须用皂粉洗干净， 不能有油污，将水甩干，倒置晾干； 枪头必须清洗干净，甩干
组成与含量 总 脂 400~700mg/dl (5 mmol/L) 甘油三酯 10~150mg/dl (0.11 ~ 1.69 mmol/L) 总 磷 脂 150~250mg/dl (48.44 ~ 80.73 mmol/L) 总胆固醇 100~250mg/dl (2.59 ~ 6.47 mmol/L) 游离脂酸 5~20mg/dl (0.195 ~ 0.805 mmol/L)
实验四
血清甘油三酯含量测定
Assay of Triglyceride content
一、目的与要求
1、了解血清(serum)甘油三酯含量测定的 正常值与临床意义
2、掌握血清甘油三酯化学法测定的基本原 理及主要技术方法
BACKGROUND
血浆所含脂类统称血脂， 包括：甘油三酯、磷脂、胆固醇及其酯以及游离脂酸。
PRINCIPLE
甘 FA 油 FA
FA
1、血清脂蛋白中的甘油三酯经正庚烷-异丙醇混合 溶剂抽提(isolated )后，脂蛋白变性，结合的甘 油三酯分离。
2、用氢氧化钾皂化(saponified)，使甘油三酯水解 成脂肪酸和甘油。
3、游离的甘油被过碘酸氧化(oxided)成甲醛，甲 醛与乙酰丙酮在铵离子存在下，缩合成黄色的3, 5-二乙酰-1, 4-二氧二甲基吡啶，
生化基础物质检测—脂类检测
主 要 试 TG试剂盒 剂 蒸馏水
主
采血器材
要
微量加样器
器
吸量管
材
恒温水浴箱
分光光度计
实验步骤
第一步
制备合格样本
第二步
反应液制备
第三步
混匀水浴测定
第四步
计算
第一步
用真空负压管采血，离心，待 用
第二步
取试管3支试管编号，按下表依次加样。
加入物 (μl) 蒸馏水 标准液 血清 工作液
空白管
20 － － 2000
第二步
洗板，阴性对照孔每孔加入PBS 50μl， 样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔 抗人AIF抗体工作液50μl。
第二步
每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀 10s，置37℃暗处反应15-20min。每孔 加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
第二步
分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光 值W2，最终测得的OD值为两者之差 （W1-W2），以减少由容器上的划痕或 指印等造成的光干扰。
误差分析
实验原理
空腹血浆脂蛋白主要为低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL），PTA-Mg2+具有选择性 沉淀载脂蛋白为 apoB 的脂蛋白 LDL，则上清液为 HDL，HDL 以 HDL-C 表示含量。
胆固醇酯酶
胆固醇酯+H2O————→胆固醇+RCOOH
胆固醇氧化酶
胆固醇+O2————→△4-胆甾烯酮+H2O2
试剂和器材
主 要 apoa试剂盒 试 校准液 剂 蒸馏水
主
采血器材
要
微量加样器
器
吸量管
材
恒温水浴箱
血清总脂含量的测定实验报告
血清总脂含量的测定实验报告一、实验目的1.掌握香草醛法测定总脂的原理和方法；2.了解正常动物正常的血清总脂含量。
二、实验原理1.血清总脂指血清中各种脂类的总和。
测定方法有称量法，比色法等。
本实验采用的香草醛法，属于常用的比色法。
2.血清中的脂类，尤其是不饱和脂类与浓硫酸共热作用，经水解后生成碳正离子。
试剂中的香草醛与浓磷酸的羟基作用生成芳香族的磷酸脂，由于改变了香草醛分子中的电子分配，使醛基变成活泼的羰基。
此羰基可与碳正离子起反应，生成红色的醌化合物，其强度与碳正离子成正比。
反应式略三、实验仪器与试剂6mg/ml胆固醇标准液，显色剂，浓硫酸，浓磷酸四、实验步骤取4支洁净试管编号空白管标准管测定管1 测定管2血清－－0.02 0.02标准液－0.02 －－浓硫酸 1.0 1.0 1.0 1.0充分混匀，放置沸水浴中10min，使脂类水解，冷水冷却向各管中均加入显色剂4.0ml，搅匀放置20min后，在525nm波长处比色，以空白管调节“0”点，分别读取各管吸光度。
五、实验结果玌分析血清总脂含量（mg/ml）=（测定管吸光度/标准管吸光度）*胆固醇标准液空白管标准管测定管1 测定管2测定读数：0.000 0.994 0.479 0.449血清总脂含量（mg/ml）＝（0.479+0.449）/(2*0.994)*6（mg/ml）=2.8（mg/ml）分析：正常的动物血清总脂含量约在5~8（mg/ml）。
本实验所求得的血清总脂含量为2.8（mg/ml），在正常值范围外，造成误差的原因可能是：①取0.02ml血清样品时，没有摇匀，导致血清中的总脂含量不均匀，就在提取前摇匀；②本实验中采用胆固醇作标准的测定方法本身存在误差，导致最后测量存在误差；③加入浓硫酸时，每组把握滴定的速度不同，可能有些组放置过快，导致试剂过多附着于管壁而造成误差，所以实验时就缓慢滴加浓硫酸；④不同仪器存在误差，同时把样品放入比色皿时，也要摇匀，减少误差。
临床生化检验：5-血清甘油三酯和总胆固醇的测定
生活小知识
• 将每100克食物中胆固醇含 量为100～200毫克的食物称为 中度胆固醇食物
如草鱼、鲫鱼、鲢鱼、黄 鳝、河鳗、甲鱼、蟹肉、猪排、 鸡肉等；
生活小知识
将每100克食物中胆固醇含 量为200～300毫克的食物称高 胆固醇食物
如猪肾、猪肝、猪肚、蚌 肉、蛀肉、蛋黄、蟹黄等。
吃什么可以降低胆固醇？
血清甘油三酯和总胆固醇的测定
实验目的
• 1.掌握甘油磷酸氧化酶法测定血清甘油三酯 和胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇的基本 原理。
• 2.熟悉甘油磷酸氧化酶法测定血清甘油三酯 和胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇操作方 法。
• 3.了解血清甘油三酯和总胆固醇 测定的临床意义。
实验原理
甘油三酯+H2O CEH 甘油+脂肪酸 甘油+ATP 甘油激酶 甘油-3-磷酸+ADP
生活小知识
• 人体中的脂类大部分从食物中 来，所以甘油三酯高的人饮食 应有节制，主食之中应搭配部 分粗粮，副食品以鱼类、瘦肉、 豆及豆制品、各种新鲜蔬菜、 水果为主。
生活小知识
• 有助降甘油三酯的食物，如： 沙丁鱼、大马哈鱼、甜杏仁、 马齿苋，还有豆类，大蒜等。
• 还有一些利于降低血脂防治动 脉硬化的食物：海带、紫菜、 木耳、金针菇、香菇、洋葱等 可常吃。
生活小知识
• 饮牛奶宜去奶油，不加糖。蛋 类原则上每日不超过1个，烹 调食物用素油，少吃油煎食物。 少吃花生，因其中含油甚多， 但可以食用核桃肉、瓜子仁、 果仁等。
生活小知识
• 将每100克食物中胆固醇 含量低于100毫克的食物 称为低胆固醇食物
如鳗鱼、娼鱼、鲤鱼、 猪瘦肉、牛瘦肉、羊瘦肉、 鸭肉等；
甘油-3-磷酸+O2 甘油磷酸氧化酶 磷酸二羟酮+H2O2 H2O2+酚+4-氨基安替吡啉 POD 红色醌亚胺+H2O
血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)测定及临床意义
血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)测定及临床意义
【正常参考值】
LDL-C水平随年龄上升,中、老年人平均约2.7~3.1 mmol/L(105~120 mg/dL)我国《血脂异常防治建议》提出的判断标准
理想范围:<3.12 mmol/L(<120 mg/dL)
边缘水平:3.15~3.61mmol/L(121~139 mg/dL)
升高:>3.64 mmol/L(>140 mg/dL)
NCEP,ATPⅢ提出的医学决定水平:
理想水平:<2.58 mmol/L(<100 mg/dL)
接近理想:2.58~3.33mmol/L(100~129 mg/dL)
边缘增高:3.64~4.11mmol/L(130~159 mg/dL)
增高:4.13~4.88 mmol/L(160~189 mg/dL)
很高:≥4.91 mmol/L(≥190 mg/dL)
【临床意义】
LDL升高是动脉粥样硬化发生发展的主要脂类危险因素。
过去只检测TCH估计LDL-C水平,但TC水平也受HDL-C水平的影响,故最好采用LDL-C代替TCH作为动脉粥样硬化性疾病的危险因素指标。
血清脂质和脂蛋白检测以及方法
每升高1mg使冠心病危险性增加1%～2% 高脂血症、甲减、肾病综合症、糖尿病等 减低：肝脏疾病、甲亢、贫血等
血清脂质与脂蛋白检测和 方法
（三）血清载脂蛋白检测
载脂蛋白分为： ApoA、ApoB、ApoC、ApoE、Apo（a） ApoA是HDL的主要蛋白结构，间接反映 HDL水平。 ApoB是LDL的主要蛋白结构，间接反映 LDL水平。
• 原理 测定HDL-C含量来反映HDL水平
• 参考范围 0.91 ~ 1.56mmol/L
血清脂质与脂蛋白检测和 方法
高密度脂蛋白胆固醇测定
临床意义 判断发生冠心病的危险性 其 水平与动脉管腔狭窄程度、冠心病发病率呈负相关
。 临床血清总胆固醇正常而HDL-C降低是冠心病的先兆
； 在估计心血管病的危险因子中，HDL-C比TC和TG的意
（一）总胆固醇测定
降低
严重肝脏疾病：急性肝坏死或肝硬化 严重的贫血：再障、溶贫、缺铁贫 营养不良 甲亢
血清脂质与脂蛋白检测和 方法
（二）甘油三酯测定
原理：由肝、脂肪组织及小肠合成 主要存在于前β-脂蛋白和乳糜颗粒中 参与胆固醇及胆固醇酯的合成 为细胞提供能量和贮存能量 是动脉粥样硬化的重要因素之一
血清脂质与脂蛋白 检测和方法
血清脂质与脂蛋白检测和方法
一、血清脂质与脂蛋白检测
血脂：血浆脂类物质的总称 ：胆固醇（TC）、甘油三酯 (TG）
磷脂（PL）、游离脂肪酸（FFA） 脂蛋白：脂质与蛋白质结合的复合物 载脂蛋白：脂蛋白中的蛋白部分
血清脂质与脂蛋白检测和 方法
一、血清脂质与脂蛋白检测
脂蛋白分类
女 0.8～1.55g/L 临床意义 升高水平与动脉粥样硬化、冠心病发病呈正相关
Apo-B100上升较LDL和CHO的上升对冠心病风险度 的预测更有意义
血清脂质与脂蛋白检测和 方法
（三）血清载脂蛋白检测
载脂蛋白分为： ApoA、ApoB、ApoC、ApoE、Apo（a） ApoA是HDL的主要蛋白结构，间接反映 HDL水平。 ApoB是LDL的主要蛋白结构，间接反映 LDL水平。
• 原理 测定HDL-C含量来反映HDL水平
• 参考范围 0.91 ~ 1.56mmol/L
血清脂质与脂蛋白检测和 方法
高密度脂蛋白胆固醇测定
临床意义 判断发生冠心病的危险性 其 水平与动脉管腔狭窄程度、冠心病发病率呈负相关
。 临床血清总胆固醇正常而HDL-C降低是冠心病的先兆
； 在估计心血管病的危险因子中，HDL-C比TC和TG的意
（一）总胆固醇测定
降低
严重肝脏疾病：急性肝坏死或肝硬化 严重的贫血：再障、溶贫、缺铁贫 营养不良 甲亢
血清脂质与脂蛋白检测和 方法
（二）甘油三酯测定
原理：由肝、脂肪组织及小肠合成 主要存在于前β-脂蛋白和乳糜颗粒中 参与胆固醇及胆固醇酯的合成 为细胞提供能量和贮存能量 是动脉粥样硬化的重要因素之一
血清脂质与脂蛋白 检测和方法
血清脂质与脂蛋白检测和方法
一、血清脂质与脂蛋白检测
血脂：血浆脂类物质的总称 ：胆固醇（TC）、甘油三酯 (TG）
磷脂（PL）、游离脂肪酸（FFA） 脂蛋白：脂质与蛋白质结合的复合物 载脂蛋白：脂蛋白中的蛋白部分
血清脂质与脂蛋白检测和 方法
一、血清脂质与脂蛋白检测
脂蛋白分类
女 0.8～1.55g/L 临床意义 升高水平与动脉粥样硬化、冠心病发病呈正相关
Apo-B100上升较LDL和CHO的上升对冠心病风险度 的预测更有意义
血清脂类检测在诊断老年动脉粥样硬化及冠心病的意义
血清脂类检测在诊断老年动脉粥样硬化及冠心病的意义目的分析血清脂类检测在诊断老年动脉粥样硬化及冠心病的意义。
方法回顾分析2016年1月～2017年1月在我院诊治的56例老年动脉粥样硬化及冠心病患者，将其定义为观察组，选取同期在我院体检健康者30例为对照组，两组患者均行进行血清脂类测定。
结果观察组患者高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、载脂蛋白A1（ApoA1）/载脂蛋白B（ApoB）的比值明显低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；观察组患者血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）与对照组对比，差异无统计学意义（P>0.05）；观察组患者HDL-C/TC比值明显低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；观察组患者低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、ApoB明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；脂蛋白a〔Lp（a）〕明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。
结论HDL-C、LDL-C、ApoB、Lp（a）及HDL-C/TC、ApoA1/ApoB的异常均为动脉粥样硬化及冠心病的风险因子，临床对老年人血清脂类的检查，尤其是HDL-C、LDL-C、ApoB、Lp（a）、HDL-C/TC、ApoA1/ApoB检测异常时，可以作为临床诊断老年动脉粥样硬化及冠心病的重要指标。
标签：血清脂；动脉粥样硬化；冠心病冠状动脉粥样硬化性心脏病是指冠状动脉粥样硬化，使血管腔变狭窄或者阻塞，或因冠状动脉功能性改变引起心肌缺血、缺氧而引起的心脏病，将其统称为冠状动脉性心脏病（CHD）[1]。
由于CHD是动脉粥样硬化导致器官病变的最常见类型，并且也是严重危害人们健康的常见疾病，而脂质代谢作为动脉粥样硬化最重要的危险因素，所以对老年动脉粥样硬化及冠心病的诊断同样具有重要的意义。
本文作者结合2016年1月～2017年1月在我院诊治的56例老年动脉粥样硬化及冠心病患者临床资料，分析血清脂类测定在诊断老年动脉粥样硬化及冠心病中的意义，现报告如下。
血清胆固醇测定实验报告
血清胆固醇测定实验报告引言胆固醇是一种脂类物质，它在我们的身体中起着重要的生理功能。
然而，高胆固醇水平与心血管疾病等许多健康问题相关联。
因此，准确测定血清中的胆固醇水平对我们的健康至关重要。
本实验旨在介绍一种常用的方法来测定血清中的胆固醇浓度。
实验目的本实验的目的是测定血清中的胆固醇浓度。
通过使用一种简单而又可靠的实验方法，我们将能够获得准确的结果。
实验原理血清中的胆固醇可以通过一种酶法测定。
在这种方法中，我们使用一种叫做胆固醇酸酯酶的酶来催化胆固醇的水解反应。
在反应中，胆固醇酸酯被水解成为胆固醇和脂肪酸。
通过测定产生的脂肪酸的浓度，我们可以间接地确定血清中胆固醇的浓度。
实验步骤1.首先，准备实验所需的材料和试剂，包括血清样本、胆固醇酸酯酶、试剂盒中提供的标准溶液等。
2.将试剂盒中提供的标准溶液分别加入试管中，每个标准溶液加入不同浓度。
3.分别取一定量的血清样本加入试管中。
4.加入一定量的胆固醇酸酯酶。
5.将试管放置在恒温水浴中，在37摄氏度下反应一定时间。
6.反应结束后，用甲醛试剂停止反应，并加入硫酸试剂。
7.将试管摇匀，使反应液混合均匀。
8.使用分光光度计测定吸光度。
根据吸光度和标准曲线，计算出血清样本中胆固醇的浓度。
实验结果通过实验测定，我们得到了血清样本中胆固醇的浓度。
根据不同样本的吸光度和标准曲线，我们可以得出血清样本中胆固醇的浓度范围。
实验讨论本实验使用了一种常用的酶法来测定血清中的胆固醇浓度。
该方法简单而又可靠，可以在临床实验室中广泛应用。
然而，该方法也存在一些局限性。
例如，反应时间和温度对结果的影响可能会导致一定的误差。
此外，该方法对于某些特殊样本可能不适用，需要进一步研究和改进。
结论通过本实验，我们成功地测定了血清样本中胆固醇的浓度。
准确地测定血清中的胆固醇水平对于评估健康状况和预防心血管疾病非常重要。
本实验提供了一种简单而又可靠的方法来测定血清中的胆固醇浓度，为临床实验室提供了有益的参考。
磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯PPT课件
甘油三酯
LPL
甘油+酯肪酸
ATP 甘油激酶GK
ADP
3-磷酸甘油
磷酸甘油氧化酶GPO
磷酸二羟丙酮+H2O2
4-氨基安替比林（4-AAP） 对氯酚/ESPAS
过氧化物酶POD
醌亚胺染料
三、试剂
1. 酶试剂：
GOOD′s缓冲液（pH7.2） ≥ 30mmol/L
甘油激酶
≥ 1KU/L
脂蛋白酯酶
≥ 3KU/L
实验四 磷酸甘油氧化酶法测定血清 甘油三酯
临床生物化学实验室
一、实验目的
掌握：磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯的基 本原理。
熟悉：磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯的基 本操作。
了解：血清甘油三酯测定对于家族性脂类代谢紊 乱等疾病诊断的临床意义。
二、实验原理
• 血清中甘油三酯(TG)经脂蛋白酶(LPL)作用， 可水解为甘油和游离脂肪酸，甘油在ATP和甘油激 酶的作用下生成3-磷酸甘油，再经磷酸甘油氧化 酶作用生成磷酸二羟丙酮和H2O2，H2O2与4-APP和 ESPAS 在过氧化物酶作用下，生成红色醌类化合 物，其显色程度与TG的浓度成正比。
1500
测定管
U1
U2
15
15
—
—
—
—
1500 1500
混匀， 37℃水浴5min后，在波长546nm处用 "B"管调零，测定各管吸光度值。
五、结果计算
TG(mmol/L)＝ĀU/ĀS×Cs（2.26 mmol/L） 参考范围：血清TG:0.565－1.695 mmol/L
六、注意事项
1. 本法使用的酶试剂在4℃避光保存，至少可稳定 3-7天，出现红色时不可再用，试剂空白的吸光度 应≤0.05。
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血清脂类测定血浆中的脂类包括胆固醇、胆固醇脂、甘油三酯、磷脂和非酯化脂肪酸等。
目前，对有关脂类代谢疾患的诊断和治疗过程，均必须检测血浆（清）中的脂类，通过其含量的变化，对临床疾患提供协助诊断的依据。
有关医学科研工作，脂类的定量检测也是一项必备的研究项目。
1．胆固醇测定血浆中胆固醇及其酯的含量检测，从方法学上可分为两大类：一类是化学法包括抽提法和直接测定法，这类方法目前仍在沿用；另一类是酶法测定，方法敏感特异快速，并能自动化分析，已常规应用。
化学测定法种类多，由于显色反应的特异性不同，其结果有一定的差异。
目前公认的参考方法是Abell-Kendall(L-B反应)法。
另外，三氯化铁-硫酸反应法（Zak法）具有显色稳定法、操作简便、灵敏度约5倍于L-B反应法，胆固醇酯与游离胆固醇显色程度比较接近等优点，缺点是特异性差，干扰因素比L-B法多，如冰醋酸中含有的乙醛酸，血清样品中的血红蛋白，胆红素以及硫酸的质量等因素均可影响Zak方法的准确性，Zak法更适合于科研使用。
酶法测定血清胆固醇的方法已被广泛采用，国产试剂已能满足临床的需要。
胆固醇测定用的标准品，按美国国家标准局（NBS）出品纯度达99.8%,是国际公认的参考物，国内李健斋等已纯化制成符合这一要求的胆固醇纯品，已供临床检测血清胆固醇使用。
2．甘油三酯测定血浆甘油三酯的测定，目前多以化学法和酶法定量。
化学法测定甘油三酯是以脂蛋白变性，水解成甘油，并以甘油为计算依据。
酶法是以特异酶水解甘油三酯，除去脂肪酸，再测定甘油，方法特异，准确而快速，临床广为应用。
目前甘油三酯测定的方法主要以定量甘油为依据，然而血清样品中存在有游离甘油，如何从反应过程中的总甘油中减去游离甘油，多年来一直在研究讨论这一问题。
若不减去，其测定值将会高于血清样品中的真值，如果要减去，就必须先测出血清样品中的游离甘油，甘油三酯的测定方法将增加一个繁杂的步骤，实际工作中难以做到。
有报道血清样品中的游离甘油实际量是0.07～0.13mmol/L，相当于甘油三酯的0.5～6.0mmol/L，为此建议，实测的甘油三酯量减去一个校正系数即：甘油三酯（mmol/L）=[0.98×总甘油（mmol/L）]-0.07（mmol/L）。
这一校正系数也仅适用于健康人，对临床病人并不一定适用。
据报道，血清样品的游离甘油一直是个未知数，无法测准。
为此，目前临床测定血清甘油三酯时，基本上未考虑游离甘油，因为其含量很少，暂且忽略不记。
甘油三酯测定的参考物，推荐三油酸甘油酯和三软脂酸甘油酯混合物（2：1，W/W），此参考物适用于化学法。
在酶法测定中，仍以高纯度的三油酸甘油酯为参考物。
3．磷脂测定血清磷脂包括卵磷脂、溶血卵磷脂、神经磷脂、脑磷脂和其他少量磷脂。
如需要分别检测各种磷脂，可以通过薄层层析法、柱层析法和高压液相色谱法。
目前，临床仅测定血清磷脂总量。
血清磷脂总量的测定方法有化学方法和酶法两大类。
化学法是以磷脂中的磷为定量依据，因为每磷脂分子中都含有一个磷酸根，故将磷脂的磷称为脂性磷。
由于血清中磷脂大部分为卵磷脂，其分子量中磷约占4%，故将脂性磷换算成磷脂的系数，一般为25。
由于化学法均需要抽提，再测抽提液中的磷脂的磷，血清中的磷酸盐不可能混入抽提液中，因此血清中的磷酸盐对磷脂测定的干扰很少。
酶法是利用磷脂酶进行定量测定。
生物体中磷脂酶包括磷脂酶A1、A2、C和D四种。
磷脂酶D特异性差，均可水解卵磷脂、溶血卵磷脂和神经磷脂，三者约占血清总磷脂的95%，临床多用含磷脂酶d 的试剂进行磷脂的定量测定。
4．游离脂肪酸测定游离脂肪酸属于未酯化的一类脂肪酸，故又称为非酯化脂肪酸，其量很少，采用方法必须是灵敏的方法，还需要避免脂肪水解产生脂肪酸的干扰。
测定方法有：①滴定法需要微量滴定装置，因为要通过肉眼观察颜色，难免会有主观因素的影响，所以难以测定准确，很难用于常规；②光度法，以铜皂法常用；③酶法，主要采用特异性不强的脂肪酶D进行检测，方法特异，快速准确，已常规应用于临床。
第一节胆固醇测定血清中胆固醇包括CE和FC，酯型的CE占70%，FC占30%。
CE中的C3的-OH在LCAT作用下，可分别结合亚油酸（43%）、油酸（24%）、软脂酸（10%）、亚麻油酸（6%）、花生四烯酸（6%）、硬脂酸（3%）等脂肪酸结合而成。
血清中胆固醇在LDL中最多，其次是HDL和VLDL、CM最少。
血清总胆固醇测定方法分为化学法和酶法两大类。
1．化学法化学法一般包括：①抽提；②皂化；③毛地黄皂苷沉淀纯化；④显色比色四个阶段。
代表性的方法有Sperry-Webb法，通过①～④步骤操作过程。
常规操作中多采用省去了②、③。
或者用省去②、③步骤的Zak-Henly法及省去③步骤的Abell-Kendall法，现将此法作为标准参考方法予以引用。
2．酵法测定CE在胆固醇酯酶（cholesterolesterase）作用下水解成FC和NFFA，TC再经胆固醇氧化酶（cholesterol oxidase,COD）氧化成△4胆甾烯酮和H2O2。
再分别定量O2的消耗或者H2O2的生成量，或者△4胆甾烯酮生成量,以作为TC的定量依据。
该法是目前常规的应用方法，快速准确，标本用量少，便于自动生化分析仪作批量测定。
一、Abell-Kendall改良法1．原理血清加入醇溶性氢氧化钾，使胆固醇从脂蛋白中分离出来，同时使胆固醇酯加水分解成游离胆固醇，加石油醚振摇、抽提，使胆固醇移入石油醚层，分离并取一定量的石油醚层，蒸发至干，再进行Liebermann-Burchard 显色反应，620nm比色定量。
该法可用于基本功训练及组织细胞胆固醇的提取定量。
2．试剂组成*：在三角烧瓶内，加入无水醋酸，于冰水中冷至10℃以下，再慢慢加入浓硫酸，混合，静置10min，又加冰醋酸混匀，备用。
3．操作图15-1 血清胆固醇（Abell法）测定操作图按图15-1操作。
4．计算标准总胆固醇浓度=E SA/E ST×5.17(mmol/L)二、酶法（CEH、COD-POD法）首先将血清中胆固醇酯在胆固醇酯酶（CEH）水解为游离胆固醇和脂肪酸，胆固醇在胆固醇氧化酶（COD）作用下，生成△4-胆甾烯酮和H2O2，再H2O2经过氧化物酶（POD）作用在4-氨基安替比林（4-AA-P）及N-乙基-N-（3-磺基醋酸）-3甲氧基苯胺（N-ethyl-N-(3-sulfopropyl)-manisidine,ESPAS）参与下，生成红色醌亚胺色素。
H2O2+ESPAS+4-氨基安替比林→红色醌亚胺色素（一）手工测定法1．试剂组成*混匀，调pH至6.70±0.10(25℃)，或购买试剂盒。
酶以活性单位表示。
2．操作按图15-2操作。
3．计算标准总胆固醇浓度=E SA/E ST×5.17(mmol/L)（二）自动化分析仪测定以CL-7200型全自动生化分析仪检测为例。
1．试剂组成A液：CEH、POD、抗坏血酸氧化酶等。
B液：COD、4-氨基安替比林等。
图15-2 血清胆固醇测定（酶法）操作图2．上机参数3．操作过程4．计算以△A=A2-A1，根据同样处理之标准或质控物计算，打印结果。
5．注意事项（1）试剂与样本量可根据分析仪要求按比例改变。
（2）试剂在有效内2～8℃避光食保存。
（3）胆固醇含量超过200mmol/L，需用生理盐水稀释再测。
第二节甘油三酯测定甘油三酯又称中性脂肪，由于其甘油骨架上分别结合了3分子脂肪酸、2分子脂肪酸或1分子脂肪酸，相应称为甘油三酯（TG）、甘油二酯（DG）和甘油一酯（MG）。
血清中90%～95%是TG，TG 中结合的脂肪酸分别为油酸（44%）、软脂酸（26%）、亚油酸（16%）和棕榈油酸（7%）。
血清TG测定方法一般分为物理化学法、化学法及酶法三大类。
血清中TG的化学组成并不单一，准确求其分子较为困难。
因标准不同，测定结果存在差异。
化学法多采用三棕榈精（软脂精）（分子量807.3）、三油精（分子量895.4）为标准，按摩尔浓度计算。
酶法测定以三油精为标准物进行换算。
1．化学法化学测定法包括：①TG的抽提分离；②皂化；③甘油糖的氧化；④氧化生成甲掌显色定量等四个阶段。
操作较为繁杂，影响测定因素太多，本法准确性差，一般很少用。
2．酶法测定酶法测定包括：①TG的抽提与皂化；②加水分解生成甘油糖定量等二个阶段。
目前常规检测应用的方法有甘油激酶（glycerolkinase,GK）法和甘油氧化酶（glycerol Oxidase,GOD）法。
操作简便，快速准确，并能在自动化生化分析仪上进行批量测定。
一、乙酰丙酮法1．原理血清中加入异丙醇抽提取甘油三酯，经KOH皂化使甘油三酯水解生成甘油及脂肪酸，甘油在过碘酸作用下氧化成甲醛，在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色的3，5二乙酰，1，4二氢甲基吡啶，其颜色的深浅与甘油三酯的含量成正比，420nm测定定量。
该法可用于基本功训练及组织细胞TG的提取测定。
2．试剂组成3．操作按图15-3操作。
图15-3 血清甘油三酯（乙酯丙酮法）测定操作图4．计算血清TG浓度=E SA/E ST×1.13(mmol/L)二、酶法（GK-GPO-POD比色法）血清中甘油三酯经脂肪酶水解为甘油和脂肪酸，甘油在甘油激酶（GK）及ATP存在下，生成3-磷酸甘油，尔后，在磷酸甘油氧化酶（GPO）作用氧化成磷酸二羟丙酮并生成H2O2，H2O2与底物4-氨基安替比林和ESPAS在过氧化物酶（POD）作用下，生成红色亚醌化合物（quinoneimine），比色（500nm），其颜色深浅与甘油三酯含量成正比。
（一）手工测定法1．试剂组成*：一般采用商品试剂盒图15-4 血清甘油三酯测定法（酶法）操作图2．操作按图15-4操作。
3．计算血清TG浓度=E SA/E ST×2.26(mmol/L)（二）生化分析仪检测全自动生化分析仪测定操作（以CL-7200型为例）。
1．试剂A液：GK，GPO，4-AA-P、抗坏血酸氧化酶等。
B液：POD，Lipase,ESPAS等。
标准液：甘油三油酸酯 200mg/dl(2.26mmol/L)。
2．上机参数3．操作过程4．计算以△A=A2-A1并根据同样之标准或质控物计算，自动打印结果。
5．注意事项①试剂与样本量可根据分析仪要求按比例改变。
②试剂在有效期内2～8℃避光保存。
③样本中甘油三酯含量超过11mmol/L需用生理盐水稀释后再测。
第三节磷脂测定磷脂（PL）并非单一的化合物，其分子内含有磷酸基的多种脂质，磷脂是这一类物质的总称。
血中PL包括：①卵磷脂占60%和溶血卵磷脂占2%～10%；②磷脂酰乙醇胺等，占2%；③鞘磷脂，占20%。