栗壳抑菌物质的提取及其抑菌作用的研究

山东林业科技　２０１０年第６期　总１９１期　ＳＨＡＮＤＯＮＧ　ＦＯＲＥＳ＇Ｉ、ＲＹ　ＳＣＩＥＮＣＥ　ＡＮＤ　ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ　２０１０．Ｎｏ．６　

文章编号：１００２—２７２４（２Ｏ１０）０６—００５４—０３　

球毛壳抗生物质对板栗疫病菌的抑制作用　

陈海燕　，万　彗。，张志玲。，曹利军。，王庆华　，何帮令。一　

（１．泰安市徂徕山林场，山东泰安２７１０￣０；２．山东农业大学植物保护学院；３．泰安市林业局）　

摘要：通过液体发酵培养球毛壳ＮＤ３５菌株，有机溶剂萃取，旋转蒸发仪浓缩，获得球毛壳抗生物质的粗提物，并对该粗提　物进行了平板抑菌活性检测和板栗水培枝条抑菌活性检测。结果袁明：球毛壳ＮＤ３５抗生物质能有效地抑制板栗疫病菌的菌　丝生长和分生孢子的萌发；板栗离体水培枝条抑菌效果达６６．２９　，与对照相比，在一定程度上降低了发病率，抑制了板栗疫　病菌在枝条上的扩展和定殖。这为将来球毛壳抗生物质在田间应用打下了基础。　

关键词：球毛壳ＮＤ３５；抗生物质；板栗疫病；生物防治　中图分类号：Ｓ６６４．２　文献标识码：Ａ　

板栗疫病Ｃｒｙｐｈｏｎｅｃｔ　ｒｉａ　ｐａｒａｓｉｔｉｃａ（Ｍｕｒｒ．）　

Ｍａｒｒ．，异名为Ｅｎｄｏｔｈｉａ　ｐａｒａｓｉｔｉｃａ（Ｍｕｒｒ．）Ｐ．　

Ｊ．ｅｔ　Ｈ．Ｗ．Ａｎｄｅｒｓｏｎ又称干枯病、胴枯病、溃疡　

病，是重要的经济林病害之一，世界各地均有分　

布　一。目前生产上对该病的防治主要以化学药剂防　

治为主，随着人们对环保意识的增强，化学农药的使　

用将会受到越来越多地限制。因此，迫使我们开发　

环境友好型的生物农药产品。某些拮抗真菌如木霉　

菌产生的抗生物质对植物病原菌有较强的抑制作　

用，已经成为开发新生防产品的重要途径之一。　

球毛壳（Ｃｈａｅｔｏｒｎｉｕｍ　ｇｌｏｂｏｓｕｍ）ＮＤ３５菌株是　

一株分离自健康毛白杨（Ｐｏｐｕｌｕｓ　ｔｏｍｅｎｔｏｓａ）上的　

内生真菌优势菌株，该菌株能对杨树水泡溃疡病菌　

板栗抗氧化活性物质的分离纯化与结构鉴定

随着现代生活节奏的加快，人们越来越注重健康饮食和保健保健。板栗作为一种营养丰富的食材，既可以入菜，也可以作为零食，备受人们的喜爱。除了美食价值，板栗还具有丰富的药用价值，其中板栗抗氧化活性物质是一种重要的保健成分。这些物质能够有效地对抗自由基，达到抗氧化的效果。本篇文章将介绍板栗抗氧化活性物质的分离纯化和结构鉴定。

一、板栗抗氧化活性物质的提取与分离纯化

1. 样品选取与样品准备

首先，需要选取质量较好、成熟度适当的板栗作为样品。将取得的样品进行清洗、晾干、去壳等预处理，然后粉碎成细碎的粉末，为后续步骤的提取作铺垫。

2. 提取

目前常用的板栗抗氧化活性物质提取方法主要有溶剂提取法、超声波提取法、微波辅助提取法等几种。其中，溶剂提取法更为常用，但溶剂的选择和操作条件对提取效果影响很大，需要根据实际情况进行优化。

3. 精制

提取得到的板栗抗氧化活性物质往往伴随着其他杂质，需要进行精制处理。目前常用的板栗抗氧化活性物质精制方法有聚集态离子交换层析法、纳滤法、逆流色谱法等。其中，聚集态离子交换层析法是一种较为常用的精制方法，能够充分分离板栗抗氧化活性物质，并保证其纯度。

二、板栗抗氧化活性物质的结构鉴定

1. 红外光谱分析 在分离纯化的过程中，常需要对板栗抗氧化活性物质进行鉴定和分析。红外光谱是一种常用的结构分析手段，通过观察样品吸收红外光时的振动频率和强度来推断不同官能团的存在。板栗抗氧化活性物质的红外光谱可以为后续的结构分析提供基础数据。

2. 液质联用分析

液质联用分析（LC-MS）是一种结构鉴定的高效手段，能够对复杂的化合物体系进行快速、高通量的分析。结合不同的质谱技术，如高分辨质谱技术、串联质谱技术等，可以对板栗抗氧化活性物质进行深入的分析和鉴定。

3. 核磁共振分析

核磁共振分析（NMR）是一种高分辨率的结构分析技术，常用于确定分子结构和分析分子间的相互作用。通过NMR技术，可以得到板栗抗氧化活性物质的分子构型、官能团等信息。

河北科技师范学院学报，２０１７，３１（３）：３０—３３．　Ｊｏｕｍａ１　ｏｆ　Ｈｅｂｅｉ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｖｏ１．３１　Ｎｏ．３　Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２０１７　ＤＯＩ：１０．３９６９／Ｊ．ＩＳＳＮ．１６７２—７９８３．２０１７．０３．００７　

板栗壳的化学成分、生理活性及其应用　

宋磊肖　，范得跃　，李晓菁　，彭　飞。，牛　奎　，解　莹。　（河北科技师范学院１园艺科技学院，２化学工程学院，３分析测试中心，河北秦皇岛，０６６６００）　摘要：对板栗壳的化学成分，板栗壳提取物在抗氧化、抑菌性、降血糖、降血脂、抗肿瘤、抑制胃肠平滑肌等方　面的生理活性，在净化水质、食用菌、食品生产、印染工业等方面的应用进行了综述。对板栗壳提取物研究中　存在的问题及今后的研究方向进行了展望。　关键词：板栗壳；化学成分；生理活性；研究进展　中图分类号：￥６６４．２　文献标志码：Ａ　文章编号：１６７２－７９８３（２０１７）０３—００３０－０４　板栗属于壳斗科栗属植物，不仅具有很高的营养价值，富含蛋白质、淀粉、维生素、脂肪及矿物质元　素，其可供人体吸ｌＩ芟和利用的养分高达９８％…，而且还具有药用价值　，是一种补养治病的保健品。根　据最新数据统计，我国板栗总面积达到１８０万ｈｍ　，年产板栗１９５万ｔ，占世界板栗总产量的８４％　。近　几年，随着板栗深加工技术的不断成熟，对板栗壳的研究越来越广泛。笔者对近几年板栗壳化学成分、　生理活性及其应用等方面的研究进展情况进行了综述，以期为板栗壳的进一步研究提供依据。　１板栗壳化学成分　板栗壳是板栗的种皮，其化学成分有：纤维素、木质素、多糖（或苷类）、有机酸、酚类、内酯、香豆素　（或其苷类）、黄铜（或皂苷类）、植物甾醇（或三萜）和鞣质等化学成分－４　Ｊ。　研究发现，板栗壳主要由Ｃ，０，Ｎ和Ｓｉ等４种元素组成，且板栗壳中纤维素的质量分数相对较高为　０．４８，木质素质量分数为０．２８，且木质素可作为橡胶补强剂　Ｊ。　板栗壳色素为黄酮类物质，质量分数为０．０２２，其棕色素天然无毒、性质稳定、着色力强，因此生产　上一般将其用作染料等；还具有阻断和清除氧化损伤、保护肝脏、调节肾功能、抑菌消炎等功能和价值，　因此生产上一般将其用作保健品等　，ｍ　。　研究发现，在板栗壳中也提取出了原花青素¨　。其是植物中广泛存在的一大类多酚化合物的总　称。具有极强的抗氧化、消除自由基的作用，也参与磷酸、花生四烯酸的代谢和蛋白质磷酸化，保护脂质　不发生过氧损伤；是强有力的金属螯合剂，可螯合金属离子，在体内形成惰性化合物；保护和稳定维生素　Ｃ，有助于维生素Ｃ的吸收和利用。　２板栗壳提取物的生理活性　２．１抗氧化性　研究发现板栗壳提取物中有３种化学成分具有抗氧化活性，分别为鞣质、多酚和色素。郑佳欣　等¨叫对板栗壳中提取物鞣质进行了ｌ，１一二苯基一２一三硝基苯肼（ＤＰＰＨ）自由基清除活性的研究，结果表　明：板栗壳鞣质粗提物具有较强的ＤＰＰＨ自由基清除能力，且随着溶液中粗提物质量浓度的增加，其对　ＤＰＰＩ１自由基的清除能力增强。当溶液中粗提物的质量浓度为０．３　Ｌ时，板栗壳鞣质粗提物对ＤＰＰｔｌ　自由基的清除率达到８５％以上。李金凤等　研究发现，板栗壳多酚在质量浓度为２５～２００　ｍｇ／Ｌ范　围内，其还原能力和清除二苯基苦基肼（ＤＰＰＨ）自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基的能力随质量　浓度升高逐渐增强。李云燕等　’＂　研究了板栗壳色素在猪油中的抗氧化活性，并对其有效的抗氧化活　基金项目：河北省科技厅重点基础研究项目（项目编号：１６９６６３０５Ｄ）；河北省板栗协同创新中心项目（项目编号：３６０—　０８０３一ＹＺＮ４ＢＡＶ）；河北省自然科学基金项目（项目编号：Ｃ２０１５４０７０３６）。　收稿日期：２０１７－０９．１

第24卷 第9期 农 业 工 程 学 报 Vol.24 No.9 298 2008年 9月 Transactions of the CSAE Sep. 2008

板栗壳色素的提取、纯化及稳定性

李永祥1，詹少华2，蔡永萍1※，林 毅1，樊洪泓1

（1．安徽农业大学生命科学学院，合肥 230036； 2．皖西学院化学与生命科学系，六安 237012） 摘 要：该文以板栗壳为材料，研究板栗壳色素的提取、纯化工艺及纯化色素的稳定性，为板栗壳色素的推广应用提供理论基础和实验数据。结果表明，板栗壳色素易溶于碱性水溶液，不溶或难溶于非极性溶剂。用1%的NaOH提取色素，石油醚和乙酸乙酯分别萃取3次后获得粗提色素，粗提色素经醇沉、酸沉及重结晶法三种方法纯化后通过薄层层析证明色素纯度较高。紫外-可见光谱分析表明，纯化色素的0.01%水溶液在223 nm和264 nm处有明显吸收峰，0.01%甲醇溶液在218 m和264 nm处有明显吸收峰，推测板栗壳色素含有苯环及酚羟基。纯化色素的稳定性试验表明，色素264 nm处吸光度对pH值较敏感，510 nm处吸光度在pH为2.0至6.0时，呈逐渐增加的趋势，在pH为8.0至14.0时变化不大，pH=10.0条件下测定510 nm处吸光度可以作为色素定量的方法；不同金属离子对色素有不同影响；色素对光、热、氧化剂及还原剂的耐受力较强。 关键词：色素，稳定性，UV光谱，板栗 中图分类号：TS202.3 文献标识码：B 文章编号：1002-6819(2008)-9-0298-05

李永祥，詹少华，蔡永萍，等. 板栗壳色素的提取、纯化及稳定性[J]. 农业工程学报，2008，24(9)：298－302. Li Yongxiang, Zhan Shaohua, Cai Yongping, et al. Extraction, purification and stability of the pigment of chestnut shells[J]. Transactions of the CSAE, 2008,24(9)：298－302.(in Chinese with English abstract)