花生壳总黄酮提取工艺优化及其抑菌活性研究

中国测试CHINAMEASUREMENT&TESTVol.42No.3March，2016第42卷第3期2016年3月

响应面法优化红花酢浆草抑菌活性物质的提取工艺研究

张玉枫1袁张金华1袁黄瑶1袁李开秀1袁杨莉娜2袁王丹1

（1.成都医学院生物医学系，四川成都610500；2.中国科学院环境与应用微生物重点实验室，四川成都610041）

摘要院为建立红花酢浆草抑菌活性物质的最佳提取工艺袁在单因素实验的基础上袁选取提取时间尧乙醇体积分数和

固液比为自变量袁抑菌圈直径为响应值袁建立数学模型袁求解得到最佳提取条件和理论最大抑菌圈并验证遥结果显示袁

红花酢浆草抑菌活性物质的最佳提取工艺为院乙醇体积分数73%袁提取时间78min袁固液比1颐31g/mL遥此时袁红花酢浆

草醇提取物拮抗金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为30.17mm袁较优化前提高67.61%遥响应面优化法不仅效率高袁而且

可靠性强袁可准确预测抑菌圈直径遥同时袁证明红花酢浆草的醇提取物具有较为广泛的抑菌谱遥

关键词院红花酢浆草；抑菌活性；响应面法；抑菌谱；提取工艺

文献标志码院A文章编号院1674-5124渊2016冤03-0053-06

Extractionprocessoptimizationofantibacterialactivesubstancefrom

Oxaliscorymbosabyresponsesurfacemethod

ZHANGYufeng1，ZHANGJinhua1，HUANGYao1，LIKaixiu1，YangLi’na2，WANGDan1

（1.DepartmentofBiomedicine，ChengduMedicalCollege，Chengdu610500，China；2.KeyLaboratoryofEnvironmentalandAppliedMicrobiology，ChengduInstituteofBiology，

ChineseAcademyofSciences，Chengdu610041，China）

亿　与生物互程２０１５，Ｖ。Ｉ．３２　Ｎｏ．０４　ＷＷＷ．ｈｘｙｓｗｇｃ．ｃｏｒｎ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　

马齿苋中总黄酮提取工艺优化及其抗氧化活性研究　

李亚，金晶，杨艳。余爱农　

（湖北民族学院化学与环境工程学院，湖北恩施４４５ＯＯ０）　

摘要：采用直接回流法提取马齿苋中总黄酮，通过单因素实验与正交实验对提取工艺进行了优化；并以芦丁为对　照品，采用分光光度法对马齿苋中的总黄酮含量进行了检测；同时研究了马齿苋总黄酮提取液对羟基自由基（・ＯＨ）和　超氧阴离子自由基（・ＯＥ）的清除效果，并与Ｖｃ的抗氧化活性进行了比较。确定马齿苋中总黄酮最优提取工艺为：提取　时间５０　ｍｉｎ、水浴温度９Ｏ℃、提取溶剂为３Ｏ　乙酸乙酯、田液比１：５Ｏ（ｇ：ｍＬ），在此条件下，马齿苋总黄酮提取率可达　７．１５　ｍｇ・ｇ＿。　当马齿苋总黄酮浓度为Ｏ．１８　ｍｇ・ｍＬ　时，对・ＯＨ的清除率高达７３．１２％，对・ＯＥ的清除率可达　４９．Ｏ２　，相同浓度时，其抗氧化活性低于Ｖｃ。　关键词：马齿苋；总黄酮；提取工艺；自由基；抗氧化活性　中图分类号：ＴＱ　４６０．７２　Ｒ　２８４．１　文献标识码：Ａ　文章编号：１６７２—５４２５（２Ｏｌ５）０４—００３３—０５　

马齿苋（ｐｕｒｓｌａｎｅ）为马齿苋科一年生草本植物，　味酸性寒，具有清热解毒、凉血止血之功效。马齿苋水　提取物对氧化自由基有较好的清除作用［１］，能治疗手　足癣，具有抗肿瘤、抗衰老［２　］的功效，对红细胞膜有保　护作用　］，具有药理和营养保健作用　］。马齿苋含有　多种化学成分，大多为有机酸类、黄酮类、萜类、香豆素　类和生物碱类　］，其黄酮类化合物　］多为结晶性固体，　

少数（如黄酮苷类）为无定形粉末，溶解度因结构及存　

在状态（主要是指苷或苷元、糖苷等）不同而有很大差　

异。马齿苋总黄酮具有广泛的生理活性，如保护心血　管系统作用、抗肝脏毒作用、抗炎作用、雌性激素样作　

黄芩总黄酮提取技术及其抑菌活性研究

【摘要】 目的研究黄芩中的黄酮提取方法和抗菌活性。方法利用超声波技术通过正交实验提取黄芩中的黄酮，杯碟法对其进行抗菌活性的研究。结果超声波最佳的提取条件为功率235 W，60%乙醇，料液比为1∶20，提取时间为9 min，黄酮提取率为10.35%。该提取液对金色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌、黑曲霉、青霉都有明显的抑菌效果，最低抑菌浓度分别为：1.0，2.0，1.0，0.5，1.0

mg・ml-1；最小杀菌浓度为：1.0，2.0，2.0，2.0，1.0 mg・ml-1。结论超声波技术是提取黄芩黄酮的高效方法，黄芩具有较强的抗菌活性。

【关键词】 超声波提取 黄芩 黄酮 抑菌活性

黄芩Scutellaria baicalensis Georgi为常用中药之一，是唇形科植物黄芩的干燥根［1］。其有效成分主要为黄酮类化合物。据报道，黄芩黄酮是一类生物活性较强的天然产物，具有抗菌、抗病毒、抗炎、抗氧化、抗肿瘤、降血压等作用［2，3］。超声波具有加速药材中有效成分溶解、缩短提取时间、提高有效成分的提取率等优点［4］，因此，本文通过正交实验探讨超声波提取黄芩黄酮的最佳提取条件，为大规模高效生产黄芩黄酮提供了有力的理论依据。黄芩黄酮的体外抗菌的研究较少，本研究将最佳提取条件下的黄酮提取液对一些细菌和真菌进行了抑菌实验，旨在开发一种天然的抑菌剂，并为临床用药提供理论依据。

1 材料

黄芩购于湖南长沙康尔佳药店，粉碎过40目筛，80℃烘干备用。芦丁对照品购于中国上海医药化学试剂公司；供试菌种金色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌、黑曲霉、青霉由本实验室保存并培养。

2 方法

2.1 提取方法

超声波提取法：称取黄芩粉5.0 g，采用L9（34）按表1方法进行超声波提取，提取液过滤，合并滤液，定容至100 ml，摇匀备用。表1 因素水平（略）

对比实验：①煎煮法：称取黄芩粉5.0 g，加水100 ml，浸泡30 min，煮沸后，文火煎60 min，过滤，共煎煮两次，合并滤液，定容至100 ml，摇匀备用。②连续回流提取法：称取黄芩粉5.0 g，加60%乙醇100 ml，水浴回流90

畜牧与饲料科学　Ａ　ｎｉｍａｌ　Ｈｕｓｂａｎｄｒｙ　ａｎｄ　Ｆｅｅｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　

诃子的提取工艺优化与抑菌活性研究　

张　蕊　（首都博物馆，北京１０００４５）　

摘要：『目的］为了研究优化诃子中抑茵有效成分鞣质的提取工艺以及提取液的抑茵活性。［方法］采用正交　试验设计法．研究了浸渍法和回流法提取诃子中抑茵有效成分鞣质时水的用量、浸渍时间、浸渍温度、回流　时间和回流次数对提取液中鞣质含量的影响。通过抑菌试验研究提取液的抑菌活性。［结果］综合分析正交　试验的直观分析和方差分析结果。浸渍法提取诃子时最优提取工艺为１２倍水量２０℃浸渍１．０　ｈ；回流法提　取时最优提取工艺为６倍水量回流１次，持续１．５　ｈ。［结论］２种提取液对具有代表性的革兰氏阳性茵和革　兰氏阴性茵都有一定的抑茵活性，浸渍法提取液对３种试验茵株的抑制效果普遍优于回流法提取液。　关键词：诃子；鞣质；正交试验；抑菌活性　中图分类号：Ｒ２８４．２　文献标识码：Ａ　文章顺序编号：１６７２—５１９０（２０１３）０５—０ｏ１３—０４　

Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｔｉｃ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　Ｆｒｕｃｔｕｓ　

ｃｈｅｂｕｌａｅ　

ＺＨＡＮＧ　Ｒｕｉ　（Ｃａｐｉｔａｌ　Ｍｕｓｅｕｍ，Ｂｅｒｉｎｇ　１０００４５，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：［Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ］Ｔｈｅ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ａｉｍｅｄ　ｔｏ　ｏｐｔｉｍｉｚｅ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ　ｔａｎｎｉｎｓ　ｆｒｏｍ　Ｆｒｕｃｔｕｓ　ｃｈｅｂｕｌａｅ　ａｎｄ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｔｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔ．［Ｍｅｔｈｏｄ］Ｕｓｉｎｇ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｗａｔｅｒ　ｄｏｓａｇｅ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｒｅｆｌｕｘ　ｔｉｍｅ　ａｎｄ　ｒｅｆｌｕｘ　ｔｉｍｅｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｔａｎｎｉｎｓ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄｉｅｄ　ｗｈｅｎ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ　ｔａｎｎｉｎｓ　ｗｅｒｅ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｃｈｅｂｕｌａｅ　ｂｙ　ｄｉｐｐｉｎｇ　ｍｅｔｈｏｄ　ａｎｄ　ｒｅｆｌｕｘ　ｍｅｔｈｏｄ．Ａｎｄ　ｔｈｅ　ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｔｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｗａｓ　ｓｔｕｄｉｅｄ　ｂｙ　ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｔｉｃ　ｔｅｓｔ．［Ｒｅｓｕｌｔ］Ｔｈｅ　ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｉｎｔｕｉｔｉｖｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ａｎｄ　ｖａｒｉａｎｃｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｉｎｄｉｃａｔｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ｔａｎｎｉｎｓ　ｆｒｏｍ　ｃｈｅｂｕｌａｅ　ｂｙ　ｄｉｐｐｉｎｇ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗｅｒｅ　ａｓ　ｆｏｌｌｏｗｓ：ｄｉｐｐｉｎｇ　ｗｉｔｈ　１２　ｔｉｍｅｓ　ｏｆ　ｗａｔｅｒ　ｄｏｓａｇｅ　ａｔ　２０℃ｆｏｒ　ａｎ　ｈｏｕｒ．Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ｔａｎｎｉｎｓ　ｆｒｏｍ　ｃｈｅｂｕｌａｅ　ｂｙ　ｒｅｆｌｕｘ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗｅｒｅ　ａｓ　ｆｏｌｌｏｗｓ：ｒｅｆｌｕｘｉｎｇ　ｗｉｔｈ　６　ｔｉｍｅｓ　ｏｆ　ｗａｔｅｒ　ｄｏｓａｇｅ　ｆｏｒ　１．５　ｈｏｕｒｓ．［Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ］Ｂｏｔｈ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｈａｄ　ｃｅｒｔａｉｎ　ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｔｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｔｏ　ｔｙｐｉｃａｌ　ｇｒａｍ—ｎｅｇａｔｉｖｅ　ａｎｄ　ｇｒａｍ—ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｂａｃｔｅｒｉａ．Ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｂｙ　ｄｉｐｐｉｎｇ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｎ　ｔｈｒｅｅ　ｔｅｓｔ　ｂａｃｔｅｒｉａ　ｗｅｒｅ　ｂｅｔｔｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｂｙ　ｒｅｆｌｕｘｍｅｔｈｏｄ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｆｒｕｃｔｕｓ　ｃｈｅｂｕｌａｅ；ｔａｎｎｉｎｓ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ；ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｔｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ