分光光度法测定铁的含量文库

湖 南 大 学 实 验 报 告

课程

实 验 者

名 称

页数（ ）

专业

年级、班

同组者姓名

级别

姓 名

实验 日 期

年

月

日

日期 署教员 签 一、实验目的：

1．了解朗伯-比尔定律的应用，掌握邻二氮菲法测定铁的原理；

2．了解TU1901分光光度计的构造；

3．掌握TU1901分光光度计的正确使用；

4．学会吸收曲线的绘制和样品的测定原理。

二、实验原理

邻菲啰啉是测定微量铁的较好试剂。在pH＝2～9 的条件下，邻菲啰啉与Fe2+生成稳定的橙红色配合物，其lgK形＝21.3，摩尔吸光系数ε510 = 1.1×104，其反应式如下：

本方法的选择性很高，相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-，20倍Cr3+、Mn2+、V(V)、PO43-，5倍Co2+、Cu2+等均不干扰测定。

显色前首先用盐酸羟胺把Fe3+还原为Fe2+。

4 Fe3+ + 2NH2OH = 4 Fe2+ + N2O + H2O + 4H+

三、仪器及试剂

1. TU1901紫外可见分光光度计

2、铁标准溶液：含铁0.01mg/mL。

3、0.1%邻菲罗啉水溶液；

4、1%盐酸羟胺水溶液；

5、醋酸-醋酸钠缓冲溶液（pH4.6）：

四、实验步骤

湖 南 大 学 实 验 报 告

课程

实 验 者

分光光度法测铁的标准曲线

分光光度法是一种常用的分析技术，用于测量溶液中特定物质的浓度。

实验目的：

通过建立铁的标准曲线，使用分光光度法测量未知样品中铁的浓度。

实验原理：

分光光度法基于物质溶液对特定波长的光的吸收程度与溶液中物质浓度成正比的原理。铁离子（Fe2+）在特定波长下对光有吸收作用，其吸光度与铁的浓度成正比。

实验步骤：

1.准备一系列浓度不同的铁溶液，例如0.2mg/L，0.4mg/L，0.6mg/L，0.8mg/L和1.0mg/L。

2.使用分光光度计，选择适当的波长，通常为510nm。

3.将分光光度计调至零点，使用纯溶剂进行基线校准。

4.依次测量每个铁溶液的吸光度，并记录下吸光度值。

5.绘制铁的浓度与吸光度的标准曲线图。

6.使用标准曲线，测量未知样品中铁的浓度。

实验结果：

通过测量一系列铁溶液的吸光度，并绘制标准曲线，得到了如下

的结果（见下图）。吸光度与铁的浓度呈线性关系，R²值为0.99，表示标准曲线的拟合度较好。

实验讨论：

本实验使用分光光度法测量铁的浓度，通过建立标准曲线，可以准确地测量未知样品中铁的浓度。实验结果显示，吸光度与铁的浓度呈线性关系，这意味着分光光度法在铁的浓度测量中是可靠的。

需要注意的是，本实验中使用的是Fe2+的铁离子。在实际应用中，可能存在其他形态的铁离子，如Fe3+。因此，在测量未知样品时，可能需要进行前处理步骤，如还原Fe3+为Fe2+，以确保测量结果的准确性。

结论：

本实验成功建立了分光光度法测量铁的标准曲线。通过标准曲线，可以准确测量未知样品中铁的浓度。分光光度法是一种常用且可靠的分析技术，在环境监测、食品安全等领域具有广泛应用前景。

分光光度法测定微量铁

分光光度法是指利用物质吸收和透过不同波长的可见光或紫外线，对试样中的成分进行测定的方法。微量铁是指含铁浓度较低的样品。本文将介绍如何利用分光光度法测定微量铁的原理、仪器、操作步骤及数据处理方法。

一、原理

铁离子在紫外-可见吸收光谱中有很强的特征吸收峰。在波长范围为200-800nm处，铁离子的最强吸收峰位于400-500nm区域内。因此，利用紫外-可见分光光度法测定铁离子可以选定适当的波长进行测定。

对于微量铁的测定，常采用1，10-菌落素橙（1，10-phenanthroline orange）作为配合剂，形成铁离子和1，10-菌落素橙配合物，从而实现铁离子的高选择性分析。配合物的吸收峰位于510～530nm，可以通过分光光度法进行测定。

二、仪器

分光光度计

三、操作步骤

1、制备标准曲线：将铁标准溶液分别加入一系列标准量瓶中，其浓度可控制在0-1.2μg/mL之间，然后分别加入一定量的1,10-菌落素橙溶液，通常为1mL。用去离子水稀释至刻度线，搅拌均匀。最后在分光光度计上，以510-530nm为波长进行测定吸收度，根据标准曲线计算出所测样品中铁的浓度。

2、取待测样品：取适量的待测样品，加入足够的1,10-菌落素橙溶液，在水浴中加热混合溶液，待其冷却后取1mL加入10mL容量瓶中，用去离子水稀释至刻度线，搅拌均匀即可。

3、测量：在分光光度计上以510-530nm为波长进行测定吸收度，记录读数。

四、数据处理方法

1、标准曲线的绘制：以铁标准溶液的浓度为横坐标，以吸收度为纵坐标，绘制浓度-吸收度曲线。

2、计算未知样品的铁浓度：根据标准曲线计算出所测样品中铁的浓度。

3、参考范围：根据不同的样品类型和所测铁的含量确定参考范围。

27 实验十 铁的分光光度测定

1. 实验目的

1.1 熟悉分光光度法测定Fe3+含量的原理和方法。

1.2 了解分光光度计的使用。

2．实验方法

当单色光通过溶液时，光被吸收而减弱，光的减弱程度与溶液的浓度（c）、液层厚度（L）的关系符合Lambert-Beer定律，即 Ig=I0/I=KCL 或A =KCL

I0为入射光强度，I为透射光强度，A为吸光度，K为吸光系数

根据Lambert-Beer定律，当入射光、吸光系数、液层厚度不变时，吸光度与溶液浓度成正比。分光光度计就是根据这一原理设计的。

Fe3+的分光光度测定，可用磺基水杨酸为显色剂，它在pH为5的缓冲溶液中能与Fe3+后成橙色的配合物。测定时，先配制一系列不同溶液的Fe3+ 标准溶液，显色后，在分光光度计上分别测定各标准溶液的吸光光度，然后以吸光度（A）为纵坐标，浓度（C）为横坐标绘制标准曲线。在同样条件下将待测溶液的试样溶液显色并测定其吸光度，即可从标准曲线上查出对应的浓度。

3．实验器材和药品

721型分光光度计、容量瓶（50ml）、量筒（50ml）、刻度吸管（5ml）

药品：标准Fe3+溶液（0.1mg/ml）10%磺基水杨酸、缓冲溶液（pH=5）、待测试样

电源插座 电源开关

4．实验步骤 28 4.1标准溶液系列和待测溶液的配制

取50ml容量瓶8只按下表配制标准溶液和待测溶液。

空白 （1） （2） （3） （4） （5） （6） 未知

标准Fe3+溶液（ml） 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 1.00(未知铁样)

10%磺基水杨酸 5.00 5.00 5.00 5.00 5.00 5.00 5.00 5.00

pH=5的缓冲溶液 每个容量瓶均稀释至50ml刻度线

4.2 准备与测定

4.21用 “λ”旋钮将测定用波长调至466nm。