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Bcl-2、Bcl-XL和Bax蛋白在结直肠癌中的表达

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Bcl-2、Bcl-XL和Bax蛋白在结直肠癌中的表达

李玉莉;胡静姿;刘惠敏;余宏宇;何金;朱维健

【摘 要】背景与目的:通过检测结直肠癌与癌旁组织中Bcl-2、Bcl-xL和Bax蛋白的表达,以探讨其在结直肠癌发生发展中的作用.材料与方法:应用免疫组化S-P法检测39例结直肠癌组织与癌旁组织中Bcl-2、Bcl-xL和Bax蛋白表达的情况.结果:Bcl-2、Bcl-xL和Bax的阳性颗粒均主要分布于细胞质/膜,在癌旁组织中,Bcl-2阳性颗粒主要分布于陷窝的底部,Bax主要分布在靠近表面的上皮细胞,Bcl-xL则分布于整个陷窝.Bcl-2蛋白的表达在癌组织和癌旁组织都很低,两者之间差异无统计学意义(Z=0.072,P＞0.05);Bcl-xL蛋白的表达均较高,且癌组织高于癌旁组织(Z=3.157,P＜0.05);Bax蛋白的表达最强,但在癌组织和癌旁组织之间差异无统计学意义(P＞0.05);只有Bcl-2蛋白表达与Dukes分期和TNM分期均成负相关(分别为rs=-0.389,-0.396,P＜0.05),Bcl-xL和Bax蛋白表达与临床病理相关因素(性别、年龄、肿瘤大小、发生部位、组织学类型、分化程度、Dukes分期及TNM分期)均无关(P＞0.05).结论:Bcl-2可能只在结直肠癌发生发展的早期起重要作用,丽后期可能Bcl-xL起更主要的作用,而Bcl-2蛋白表达可能会与预后有关.

【期刊名称】《癌变·畸变·突变》

【年(卷),期】2007(019)001

【总页数】3页(P53-55)

【关键词】结直肠癌;Bcl-2;Bcl-xL;Bax;免疫组织化学;细胞凋亡

【作 者】李玉莉;胡静姿;刘惠敏;余宏宇;何金;朱维健 【作者单位】第二军医大学长征医院病理科,上海,200003;第二军医大学长征医院病理科,上海,200003;第二军医大学长征医院病理科,上海,200003;第二军医大学长征医院病理科,上海,200003;第二军医大学长征医院病理科,上海,200003;第二军医大学长征医院病理科,上海,200003

【正文语种】中 文

【中图分类】R73

结直肠癌是临床最常见的恶性肿瘤之一。大量的研究已表明，肿瘤的发生发展和细胞增殖与凋亡动态平衡受破坏有关［1-2］。Bcl-2家族蛋白是重要的细胞凋亡调节因子，它们中如Bcl-2、Bcl-xL抑制细胞凋亡，Bax、Bak则促进凋亡，这些调节因子表达的改变不仅影响正常细胞的凋亡，还影响肿瘤细胞的凋亡。大多数抗癌药物也是通过诱导肿瘤细胞的凋亡来发挥细胞毒作用。因此，我们检测Bcl-2家族蛋白在该肿瘤中的表达，以期为结直肠癌的治疗提供依据。

1.1 材料

1.1.1 标本来源收集长征医院2004年11月～2005年4月期间术前未经化疗、放疗或免疫治疗的结直肠癌患者手术标本39例，癌组织和癌旁组织（距癌组织超过5 cm）各1份。所有病例均经术后病理诊断明确。

1.1.2 临床资料男性24例，女性15例，年龄27～88（59.43±15.30）岁，直肠癌26例，结肠癌13例。按照新WHO标准（IARC Press，2000）腺癌32例，粘液腺癌6例，未分化癌1例；分化程度高、中、低及未分化分别为9例、18例、11例、1例；DukesA期12例，B期10例，C期14例，D期3例；TNM分期（UICC,2002），I期12例，II期10例，III期13例，IV期4例。

1.1.3 试剂鼠抗Bcl-2单克隆抗体（克隆号100/ D5，即用型）、鼠抗Bcl-xL多克隆抗体（克隆号2H12，1∶20稀释），鼠抗Bax多克隆抗体（克隆号2D2，1∶20稀释）均购自上海长岛生物技术有限公司，S-P试剂盒和DAB显色液购于福州迈新生物技术开发有限公司。

1.2 方法采用S-P法，10%中性福尔马林溶液固定，常规石蜡包埋切片（厚度4μm），贴于涂有多聚赖氨酸的玻片上，常规脱蜡至水，0.3%过氧化氢甲醇溶液灭活内源性过氧化物酶，高温高压修复抗原，其余步骤按试剂盒说明操作，PBS代替一抗作为阴性对照，Bcl-xL、Bax用已知阳性切片作阳性对照，Bcl-2以同一组织切片中的淋巴滤泡为阳性对照。

1.3 结果判定用阳性细胞数量和着色程度两相加权法，阳性细胞数＜5%为0分，5%～25%为1分，25%～50%为2分，＞50%～75%为3分，＞75%为4分；着色程度淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分；两者相加，总分1～2分记为-，3分记为+，4分记为++，≥5分为+++。

1.4 统计学方法应用SPSS 11.5软件进行分析，采用Wilcoxon符号秩检验和Spearman秩相关检验，以α=0.05为检验水准。

2.1 结直肠癌与癌旁组织中Bcl-2、Bcl-xL和Bax蛋白的表达Bcl-2、Bcl-xL和Bax的阳性颗粒均主要分布于细胞质/膜，（图1），在癌旁肠粘膜中，Bcl-2阳性颗粒主要分布于陷窝的底部（图1a）；而Bcl-xL阳性颗粒分布于整个陷窝（图1b）；Bax阳性颗粒主要分布于靠近表面的上皮细胞（图1c）；在癌组织中，Bcl-2表达相对较弱（图1d）；Bcl-xL表达中到强阳性（图1e）；Bax表达强阳性（图1f）。Bcl-2表达强度较弱，Bcl-xL中等，Bax较强，它们在癌与癌旁组织中的表达情况（见表1、2），结果表明只有Bcl-xL在癌与癌旁组织之间的差异具有统计学意义（Z=3.157,P＜0.05）。

2.2 结直肠癌组织中Bcl-2、Bcl-xL和Bax蛋白的表达与临床病理相关因素的关系Bcl-xL和Bax蛋白的表达与性别、年龄、发生部位、组织学类型、分化程度、淋巴结转移与否、Dukes分期及TNM分期都无关（P＞0.05），但Bcl-2蛋白表达与Dukes分期和TNM分期都成负相关（P＜0.05），而与其他因素无关（表3）。

细胞凋亡与肿瘤的关系是近年来的研究热点之一，细胞凋亡调控的失调是导致肿瘤发生发展的重要方面，其中Bcl-2家族备受重视。Bcl-2、Bcl-xL和Bax是该家族中的重要成员，它们主要通过线粒体途径参与凋亡调控，当细胞受到死亡信号刺激，与Bcl-2或Bcl-xL相结合的Bax就会被置换出来，线粒体膜通透性增加，释放出一系列物质，最终导致细胞死亡［2］。

研究证实许多实体肿瘤和血液系统肿瘤中凋亡相关基因表达异常，主要是抑凋亡基因表达上调，促凋亡基因表达下调［1-3］，而且Bcl-2/Bax的比值对于决定细胞接受死亡刺激信号后存活与否起关键性作用［4］。但是有关结直肠癌的报道众说纷纭，有的报道它们的表达情况与其他大多数肿瘤相似［5］，有的则不尽然［6］。

本实验的结果显示在结直肠癌患者的癌旁组织中Bcl-2表达主要分布在陷窝的底部，而Bax主要分布在靠近表面的上皮细胞，它们在正常肠粘膜组织中的这种分布，对于陷窝基底细胞的正常增殖，表面上皮细胞的正常更新，维持正常粘膜的新陈代谢，防止肿瘤的发生具有重要意义。同时本实验结果也显示在结直肠癌组织和癌旁组织水平中Bcl-2表达均较低，但其蛋白表达水平与肿瘤的Dukes分期和TNM分期呈负相关，而Bcl-xL和Bax的表达均较强，其中Bcl-xL的表达癌组织强于癌旁组织，Bax在两者之间表达无差异，与Maurer等［7］的结论相似，所以我们推测在结直肠癌发展的不同阶段凋亡受抑制的机制是不同的，在肿瘤晚期Bcl-2参与抑制凋亡的作用可能显得不那么重要，而DCC、Bcl-xL等基因的作用反而更突出，本实验结果显示在肿瘤晚期Bcl-xL表达也是很高的，虽然它的表达与肿瘤分期无关。另有一些研究者发现Bcl-2在结直肠腺瘤中呈高表达状态，癌组织中表达就降低了，这些似乎都提示Bcl-2可能只在结直肠癌发生发展的早期起重要作用［7］，而后期Bcl-xL的作用可能更重要，而且已有研究者证实Bcl-xL的抑凋亡作用比Bcl-2强［8］，所以，我们还认为在治疗中应该设计针对Bcl-xL而非Bcl-2靶点的药物。

虽然Bcl-2可能在结直肠癌的发展过程中起的作用不如Bcl-xL，但Bcl-2蛋白在肿瘤早期的病例中表达更高，预示Bcl-2蛋白高表达预后可能更好，而Bcl-xL和Bax则因与肿瘤病理相关因素均无关，不能作为评价临床病理情况的参考指标。当然由于我们的样本比较小和缺乏随访资料，尚有待进一步完善以证实结果的可靠性。

【相关文献】

［1］Groeger AM,Esposito V,De-Luca A,et al.Prognostic value of immunohistochemical

expression of p53,bax,Bcl-2 and Bcl-xL in resected non-small-cell lung cancers［J］.Histopathology,2004，44（1）：54-63.

［2］Cory S,Huang DC,Adams JM,The Bcl-2 family：roles in cell survival and oncogenesis［J］,Oncogene,2003，22（53）：8590-8607.

［3］Gobe G，Rubin M，Williams G，etal.Apoptosis and Expression of Bcl-2,Bcl-XL,and

Bax in Renal Cell Carcinomas［J］.Cancer Invest，2002，20（3）：324-332.

［4］Marzo I,Brenner C,Zamzami N,et al.Bax and adenine nucleotide translocator

cooperate in the mitochondrial control of apoptosis［J］.Science，1998，281（5385）：2027-2031.

［5］王举，忠霞，韩喜春，等.大肠癌及癌旁组织中抑凋亡基因bcl-2和促凋亡基因bax的表达及意义［J］.中国普外基础与临床杂志，2002，9（4）：252-254.

［6］Paradiso A,Simone G,Lena MD,et al.Expression of apoptosis-related markers and

clinical outcome in patients with advanced colorectal cancer［J］.Br J Cancer,2001,84（5）：651-658.

［7］Suzuki Y,Honma T,Hayashi S,et al.Bcl-2 expression and frequency of apoptosis

correlate with morphogenesis of colorectal neoplasia［J］.J Clin Pathol，2002，55（3）：212-216.

［8］Shimizu S，Eguchi Y，Kosaka H，et al.Prevention of hypoxiainduced cell death by

Bcl-2 and Bcl-xL［J］.Nature,1995，374（6525）：811-813.

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拉莫三嗪对癫痫大鼠学习记忆能力及海马组织中Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

拉莫三嗪对癫痫大鼠学习记忆能力及海马组织中Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

・１０・　第３４卷第１期　２０１７年１月　新乡医学院学报　Ｊｏｕｒｎａｌ　０ｆ　Ｘｉｎｘｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｖｏ１．３４　Ｎｏ．１　Ｊａｎ．２０１７　

：。。’。。　。。　。。。。。’。。　。。　。。。。。。。。’。。’。。　。。。。。。。。’。。’。。。。。　。。。。。’。。’。。’。。　。。　。。。。。’。。’。。’。。’。。。。。。。。◆。。◆。。◆。。◆。。。。。。ｏ　本文弓　：磊　莫２０三１７　３４对（嚣１　１　０　１鼠３　Ｄ习ＯＩ　１０　７能６８力３／及ｘｘ海ｙｘ马ｙｘｂ　２织０１　７　０Ｂ１　０和０３－Ｂ　蛋白表达的影　ｏ　【基础研究】　：　响［Ｊ］．新乡医学院学报，　，　）：　一．　：　．．．．　．　・　‘…　…　

拉莫三嗪对癫痫大鼠学习记忆能力及海马组织中Ｂａｘ和Ｂｃｌ－２蛋白　

表达的影响　

石景鹤　，高静　，王家勤　

（１．新乡医学院第三附属医院儿科，河南新乡４５３００３；２．郑州市儿童医院神经内科，河南郑州４５１０００；３．郑州　

市儿童医院内分泌科，河南郑州４５１０００）　

摘要：　目的探讨拉莫三嗪对戊四氮致癫痫大鼠认知功能及海马组织中Ｂａｘ、Ｂｃｌ－２蛋白表达的影响。方法　

将健康雄性Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠１００只随机分为正常组、模型组及拉莫三嗪低、中、高剂量组，每组２Ｏ只。模型组及　

拉莫三嗪低、中、高剂量组大鼠每天腹腔注射戊四氮３５　ｍｇ・ｋｇ　进行造模；正常组大鼠腹腔注射同体积生理盐水。　

造模成功后，正常组大鼠继续每日腹腔注射生理盐水；其余４组大鼠继续腹腔注射戊四氮，在此基础上，拉莫三嗪低、　

中、高剂量组大鼠分别给予拉莫三嗪２０、３０、６ｏ　ｍｇ・ｋｇ。。・ｄ　灌胃，模型组大鼠给予生理盐水，共２周。用Ｍｏｒｒｉｓ水　

迷宫实验评价大鼠的认知功能，免疫组织化学方法检测大鼠海马组织中Ｂａｘ、Ｂｃｌ－２蛋白表达。结果与正常组比较，　

模型组大鼠各时间点逃避潜伏期显著延长（Ｐ＜０．０５）；拉莫三嗪低、中、高剂量组大鼠各时间点逃避潜伏期均短于模　

bcl-2、Ki-67和bax蛋白在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中的表达及临床意义

bcl-2、Ki-67和bax蛋白在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中的表达及临床意义

2008年01月第3卷第2期中国医疗前沿ChinaHealthcareInnovationJanuary,2008Vol,3No.2

作者简介王晓琴,四川省广汉市人民医院妇产科。肿瘤的发生发展与肿瘤细胞的凋亡密切相关[1],细胞凋亡是由基因调控的细胞程序性死亡[2]。bcl-2和bax是重要的细胞凋亡调节分子,在肿瘤的发生发展中起着重要作用。Ki-67参与细胞周期的调节,从理论上讲,与肿瘤发生也可能有密切的关系。本实验采用免疫组化检测技术检测68例宫颈上皮内瘤变、55例宫颈癌及癌旁组织中bcl-2、Ki-67和bax蛋白的表达,旨在探讨其在宫颈癌发病机制中的作用及其临床意义。1材料和方法1.1样本原发性宫颈癌、宫颈上皮内瘤变(CIN)和癌旁组织均来自泸州医学院附属医院病理科,所有病例均经过病理组织学证明。宫颈癌55例,病例年龄33～68岁,平均49.6岁,按国际妇产科联盟(FIGO)宫颈癌分期标准进行分期:Ⅰ期13例,Ⅱ期25例,Ⅲ期17例。CIN68例,CINⅠ级(轻度不典型增生)18例,CINⅡ级(中度不典型增生)29例,CINⅢ级(重度不典型增生)21例。癌旁组织作对照分析。所有患者术前均未进行化疗和放疗。所有标本均经过10%的福尔马林中性溶液浸泡,常规脱水、透明、侵蜡,然后石蜡包埋。1.2免疫组织化学染色鼠抗人bcl-2、Ki-67和bax多克隆抗体和免疫组化试剂盒均购于上海晶美生物技术有限公司。采用免疫组织化学SP法染色,基本步骤严格按试剂盒说明书进行。用已知的食管癌阳性切片作为阳性对照,PBS代替一抗作为阴性对照。1.3结果判定bcl-2以细胞膜及细胞浆显示棕黄色或棕褐色颗粒为阳性,Ki-67阳性表现为细胞核内出现棕黄色颗粒,bax表达阳性为细胞浆呈棕黄色或棕褐色颗粒。选取5个不同高倍视野(×100),计算阳性细胞的百分率。阴性(-):阳性细胞数<10%;阳性(+):阳性细胞数≥10%。由两名有经验的病理科医生进行盲法判读。1.4统计学处理数据分析采用确切概率法(Fisher’sExactTest)或X2检验,应用SPSS11.5软件包完成,以P<0.05具有统计学意义。2结果2.1bcl-2、Ki-67和bax在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变组织中的表达bcl-2在宫颈癌、CIN、癌旁正常组织中阳性表达率分别为56.4%(31/55)、33.8%(23/68)和14.5%(8/55),各组间阳性表达率差异有显著性(P<0.05)。Ki-67在宫颈癌、CIN、癌旁正常组织中阳性表达率分别为49.1%(27/55、)、42.6%(29/68)和12.7(7/55),阳性表达率差异有显著性(P<0.05)。bax在宫颈癌、CIN、癌旁正常组织中阳性表达率分别为16.4%(9/55)、36.8%(25/68)和58.2%(32/55),差异有显著性(P<0.05)。2.2各组宫颈癌和宫颈上皮内瘤变组织中bcl-2、Ki-67和bax的表达bcl-2在宫颈癌和CIN中的表达均随着病变的进展阳性率增加,在宫颈癌Ⅲ期阳性率为70.6%,但在Ⅰ期仅为38.5%,在CINⅢ级为42.9%,在CINⅠ级为27.8%,Ki-67在宫颈癌Ⅲ期阳性率比Ⅰ期高,在CINⅢ级中阳性率比CINⅠ级高,bax在宫颈癌Ⅰ期阳性率比Ⅲ期高,在CINⅠ级阳性率比CINⅢ级高,但差异无显著性。(见表1)。3讨论Ki-67参与细胞周期的调控网络,理论上,可作为诊断和预测肿瘤对治疗的敏感度及其结局等方面的标志物,在肿瘤的分级、增生程度、预后的预测中均有一定的意义。bcl-2和bax是bcl-2家族的重要成员,对细胞凋亡的调控起着重要作用,bcl-2可以抑制多种组织的细胞凋亡,延长细胞生存而参与肿瘤的发生,是目前公认的抗凋亡基因,bax是一个水溶性蛋白,它能与bcl-2形成二聚体,具有抑制bcl-2,促进细胞凋亡的作用。研究发现宫颈癌组织中阳性表达率为56%,比文献报道低[3],在IN中表达率为33%,在正常宫颈上皮组bcl-2、Ki-67和bax蛋白在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中的表达及临床意义王晓琴1戴穹2杨志惠3(1广汉市人民医院妇产科,四川广汉618300;2泸州医学院人体解剖学教研室,四川泸州646000;3泸州医学院附属医院病理科,四川泸州646000)[摘要]目的检测bcl-2、Ki-67和bax蛋白在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌组织中的表达情况,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化检测bcl-2、Ki-67和bax蛋白在68例宫颈上皮内瘤变及55例宫颈癌及癌旁组织中的表达情况。结果Ki-67、bcl-2和bax蛋白在宫颈癌组织中的阳性表达率分别为49.1%、56.4%和16.4%,在宫颈上皮内瘤变(CIN)中阳性率分别为42.6%、33.8%和36.8%,而在癌旁组织中的阳性表达率分别为12.7%、14.5%和58.2%,差异有显著性(P<0.05)。bcl-2和Ki-67蛋白的表达在从子宫颈正常组织→上皮内瘤变→宫颈癌发展过程中呈逐渐上升的趋势。结论Ki-67和bcl-2蛋白可能参与前宫颈癌的发生发展,有望成为宫颈癌诊断和判断预后的分子标志物。[关健词]宫颈上皮内瘤变宫颈癌bcl-2Ki-67bax[中图分类号]R446.8;R737.33[文献标识码]A27

bcl-2和bax蛋白在颈椎稳定性异常小鼠脑组织中表达的变化及其意义

bcl-2和bax蛋白在颈椎稳定性异常小鼠脑组织中表达的变化及其意义

信息记录材料２　０１　６年１　２月第１７卷第６期　ｂｃ卜２和ｂａｘ蛋白在颈椎稳定性异常小鼠脑组织中　表达的变化及其意义　。　赵丽华　（白城医学高等专科学校　吉林　白城　１　３　７　０　０　０）　【摘要】颈椎病是开始于单个或多个颈椎间盘的进行性退行性病变，并可导致周围骨和软组织的结构改变，影响相　关血管、神经根或（和）脊髓，　所以患者常伴头痛、血压升高、心率增快，特别老年病人常伴记忆力减退、嗜睡、乏力、　行为异常等组织器官衰老病症　【关键词】颈椎病；颈椎间盘；生物学机制　【中图分类号】Ｒ９６５　【文献标识码】Ａ　【文章编号】１００９－５６２４（２０１６）０６—０１７０－０３　１。引言　颈椎病是开始于单个或多个颈椎间盘的进行性退行性　病变，并可导致周围骨和软组织的结构改变，影响相关血　管、神经根或（和）脊髓，所以患者常伴头痛、血压升高、　心率增快，特别老年病人常伴记忆力减退、嗜睡、乏力、　行为异常等组织器官衰老病症。为深入探讨颈椎稳定性异　常导致脑细胞凋亡的机制，采用免疫组化、逆转录聚合酶　链反应和Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ观察ｂｃｌ一２和ｂａｘ蛋白在小鼠颈　椎稳定性异常病理模型ｎ　脑组织中的表达变化，探讨颈　椎稳定性异常与ＡＤ发病的分子生物学机制。　２。试剂配制和方法　２．１主要试剂配制　０．ＯＩＭ柠檬酸缓冲液：３ｇ柠檬酸三钠＋０．４ｇ柠檬酸溶　入ｉＯ００ｍ］蒸馏水，用０．：ＩＭ　ＮａＯＨ溶液调定至ｐＨ　６　０。　４％多聚甲醛溶液：４０ｇ　多聚甲醛溶予ｌＯ００ｍｌＰＢＳ溶液　中，加热溶解。　盐酸乙醇：７０％乙醇１００ｍｌ＋１％盐酸Ｉｍ］　混合均匀。　ＤＡＢ配制：１ｍ１蒸馏水中加入一滴浓缩缓冲液，混合　均匀；滴加ＤＡＢ溶液和浓缩过氧化氢溶液各一滴，再次混　匀。避光保存，３０分钟内使用。　Ｈａｍｓ苏木素染色液：用２００ｍｌ蒸馏水加热溶解１５ｇ硫　酸铝钾　用ｉＯｍｌ无水乙醇溶解１ｇ苏木精，再倒入已溶解　的硫酸锚钾蒸馏水中，煮沸１分钟后，稍冷却，慢慢加入　０．５ｇ红色氧化汞，继续加热至染液变为紫红色，用纱布　盏瓶口，用前滤纸过滤后每１００ｍｌ加冰醋酸ｌＯｍｌ。　２。２取材方法　８月龄ＩＣＲ小鼠６０只，随机分为３组，即模型Ａ组、　模型Ｂ组和正常对照组，模型组第一与第二颈椎关节囊被　膜周围分别注射３０％乳酸溶液，模型Ａ组１５　ｉ／次，１次　／日，连续注射３周。模型Ｂ组３Ｏ　ｕ　ｌ／次，１次／周，连　续注射３周。正常组未经任何处理　造模三个月时，经行为学检测后，将动物眼球取血处　死、取脑，部分放入１０％甲醛，经蜡块包埋留做病理观察，　部分投入液氮中１分钟速冻，然后置一８０＂Ｃ冰箱内保存。　２．３　ＲＴ－ＰＣＲ和琼脂糖凝胶电泳　提取脑组织总ＲＮＡ，通过逆转录得到ｃＤＮＡ，然后进行　ＰＣＲ扩增，观察ｂｃｌ一２和ｂａｘ的基因表达情况。　２．３．１总ＲＮＡ提取　每组取双侧海马和皮层组织各　１００ｍｇ（每组４只小鼠，每只鼠取２５ｍｇ）置５ｍｌ离心管中，　加预冷的异硫氰酸胍变性溶液ｌｍｌ，匀浆。加０．１ｍｌＮａＡＣ　卫生相关的法律法规明确规定的相关义务。要不断提高卫生　监督机构的执法能力。监督体制机制改革后，非专业背景的　监督员可能担当执法者，且有的放射卫生监督员分管多项工　作，有待提高其执法的力度、处罚的力度、发现和纠正问题　的力度，同时要加强职业与放射卫生监督的制度、能力和诚　信机制建设，充分利用“互联网＋”宣传职业与放射卫生监　督法律法规，不断提高放射卫生监督质量。　《国务院办公厅关于推广随机抽查规范事中事后监管　的通知》和卫生计生综合监督领域《开展随机抽查规范事　中事后监管的实施方案》是我国深化行政体制改革，加快　政府职能转变，进一步推进简政放权、放管结合、优化服　务的重要举措。随着“双随机”抽查和事中事后ｊ监督管理　机制的实施和逐步规范，应采用适宜的统计方法定量评价　不同时期不同地区放射卫生监督工作质量。在应用ＴｏｐＳ　ｉ　Ｓ　法客观公正地对某市各区县放射工作质量进行排序分析的　同时，应用基于秩和比的分档法或可信区间法同时对其进　１７０　行综合评价，比文献Ⅲ提供了更为丰富的信息和相对较为　客观而真实的评价结果，为更好地指导和提高区县开展放　射卫生监督工作及其质量提供重要的理论基础和数据支持。　【参考文献】　［１］汪莹，于信波，阮水富，等．运用ＴＯＰ　ｓ　ｉ　Ｓ法对放射卫生　监督工作质量进行多指标综合评价【Ｊ］．中国卫生监督杂志，　２０１６，２３（３）：２２８－２３１。　【２］孙爱峰．秩和比法在不同地区人体蛔虫感染现状调查结果综　合评价中的应用【Ｊ】．中国医药指南，２０１ｌ，９（３１）：２２６－２２７．　［３］高儒，孙爱峰，孙齐蕊．秩哥口比法在传染病防控综合保障能力　综合＿评价中的应用［Ｊ］＋中国卫生产业，２０１６，１３（１）：Ｉ１９－￣２１．　【４】国家卫生计生委人事司组织编写．国家卫生计生委壬锋　员　必备手册［Ｍ］．北京：中国人口出版社，２０１４．　［５］王红，孙爱峰．秩和比法在吉林省２０１０－２０］２年孕产妇死亡率　综合评价中的应用（Ｊ】．中国妇幼保健，２０１４，２９（３０）：４９２０－４９２１．

凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax在生后小鼠肾发育中的表达

凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax在生后小鼠肾发育中的表达

ＣＨＩＮＥＳＥ　ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＡＮＡＴＯＭＹ　Ｖｏ１．３６　Ｎｏ．６　２０１３　解剖学杂志２０１３年第３６卷第６期　

凋亡相关蛋白Ｂｃｌ一２和Ｂａｘ在生后小鼠肾发育中的表达　

宋小峰张萍　

（辽宁医学院组织学与胚胎学教研室，锦州　１２１００１）　

摘要　目的：探讨小鼠生后肾发育中抗凋亡蛋白Ｂｃｌ一２和促凋亡蛋白Ｂａｘ的表达规律。方法：选取生后１、３、５、７、１４、２１　ｄ的　昆明小白鼠，应用免疫组织化学并结合体视学分析方法观察树脂切片上小鼠生后肾不同发育时期Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ的表达。结　果：生后小鼠肾发育过程中，Ｂｄ一２和Ｂａｘ的表达主要位于近端小管，而且，越成熟的近端小管表达越强烈，而远端小管的表　达很微弱。Ｂｃｌ－２／Ｂａｘ的比值在Ｐ３　ｄ开始升高，Ｐ７　ｄ时达到顶峰，随后降低。结论：在生后小鼠的肾发育中成熟的近端小　管有较强的生长及更新能力，Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ在近端小管与远端小管的不同表达，可能与线粒体的不同功能状态有关。　关键词Ｂｃｌ一２；Ｂａｘ；生后肾；近端小管；远端小管　

Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｂｃｌ一２　ａｎｄ　Ｂａｘ　ａｐｏｐｔｏｔｉｃ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　

ｐｏｓｔｎａｔａｌ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｍｏｕｓｅ　ｋｉｄｎｅｙ　

Ｓ０ｎｇ　Ｘｉａｏｆｅｎｇ，Ｚｈａｎｇ　Ｐｉｎｇ　（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｅｍｂｒｙｏｌｏｇｙ，Ｌｉａｏｎｉｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｊｉｎｚｈｏｕ　１２１００１，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｅｘｐｌｏｒｅ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｂｃｌ一２　ａｎｄ　Ｂａｘ　ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｐｏｓｔｎａｔａｌ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｍｏｕｓｅ　ｋｉｄｎｅｙ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：　Ｔｈｅ　３０　ｍｉｃｅ　ｆｒｏｍ　ｐｏｓｔｎａｔａｌ　ｄａｙ　１，３，５，７，１４　ａｎｄ　２１　ｗｅｒｅ　ｃｈｏｓｅｎ　ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｂｃｌ一２　ａｎｄ　Ｂａｘ　ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｐｏｓｔｎａｔａｌ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｋｉｄｎｅｙ　ｗｉｔｈ　ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ　ａｎｄ　ｓｔｅｒｅｏｌｏｇｉｃａｌ　ｍｅｔｈｏｄｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｐｏｓｔｎａｔａｌ　ｒｅｎａｌ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｏｕｓｅ　ｋｉｄｎｅｙ，ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｓｔａｉｎｉｎｇ　ｏｆ　Ｂｃｌ－２　ａｎｄ　Ｂａｘ　ｗａｓ　ｍａｉｎｌｙ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｘｉｍａｌ　ｔｕｂｕｌｅｓ．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ｔｈｅ　ｍｏｒｅ　ｗｅｌｌ—ｇｒｏｗｎ　ｐｒｏｘｉｍａｌ　ｔｕｂｕｌｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ，ｔｈｅ　ｍｏｒｅ　ｓｔｒｏｎｇｅｒ　ｔｈｅｙ　ｗｅｒｅ：Ｗｈｉｌｅ　ｗｅａｋ　ｒｅａｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｆｏｕｎｄ　ｉｎ　ｄｉｓｔａｌ　ｔｕｂｕｌｅｓ．Ｔｈｅ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　Ｂｃｌ一２／Ｂａｘ　ｓｔａｒｔｅｄ　ｔｏ　ｉｎｃｒｅａｓｅ　ａｔ　Ｐ３　ｄ，ａｎｄ　ｒｅａｃｈｅｄ　ｔｏ　ｓｕｍｍｉｔ　ａｔ　Ｐ７　ｄ，ｗｈｉｌｅ　ｒｅｄｕｃｅｄ　ｓｏｏｎ　ａｆｔｅｒ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｐｏｓｔｎａｔａｌ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｋｉｄｎｅｙ，ｔｈｅ　ｆｕｌｌ—ｇｒｏｗｎ　ｐｒｏｘｉｍａｌ　ｔｕｂｕｌｅ　ａｃｑｕｉｒｅｄ　ｔｈｅ　ｍｏｒｅ　ｓｔｒｏｎｇｌｙ　ａｂｉｌｉｔｙ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｒｅｎａｌ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｂｃｌ＿２　ａｎｄ　Ｂａｘ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｘｉｍａｌ　ｔｕｂｕｌｅｓ　ａｎｄ　ｄｉｓｔａｌ　ｔｕｂｕｌｅｓ　ｍａｙ　ｃｏｎｃｅｒｎ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｓｔａｔｕｓ　ｏｆ　ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　Ｂｃｌ一２；Ｂａｘ；ｐｏｓｔｎａｔａｌ　ｋｉｄｎｅｙ；ｐｒｏｘｉｍａｌ　ｔｕｂｕｌｅｓ；ｄｉｓｔａｌ　ｔｕｂｕｌｅｓ