DNS比色法在十二烷基葡萄糖苷体系中的应用研究
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标准准葡萄糖DNS比色法测定的方法采用3,5-二硝基水杨酸比色法测定水解液中还原糖含量,用752型分光光度计进行比色测定。
1葡萄糖DNS比色法的测定原理3,5-二硝基水杨酸与还原糖共热后被的还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。
在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系,利用分光光度计,在540nm波长下测定光密度值,查对标准曲线并计算,便可求出样品中还原糖的含量。
2测试药品(1)1mg/mL葡萄糖标准液准确称取80℃烘至恒重的分析纯葡萄糖100mg,置于小烧杯中,加少量蒸馏水溶解后,转移到100mL容量瓶中,用蒸馏水定容至100mL,混匀,4℃冰箱中保存备用。
(2)3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂3测试方法(1)葡萄糖标准曲线制作①按下表制备9个试管。
②向9支试管中分别加入DNS试剂0.5ml,充分混合。
③将9支试管放入沸水浴中加热煮沸5min。
④将试管放入盛有冷水的烧杯中冷却。
⑤向各管中分别加入4mL蒸馏水,充分混合。
⑥以空白(1#)管做对照,用分光光度计于540nm波长下分别测定各管溶液的OD值。
⑦以每管在540nm下的吸光值为纵坐标,每管所含的葡萄糖浓度为横坐标作图,即可得到一条通过零点的直线。
如果直线不通过零点则需重做。
标准葡萄糖曲线浓度的量取Tab.2.2 Preparation on standard curve of glucose试管编号标准葡萄糖溶液(mL) 蒸馏水(mL) 最终浓度(mg/mL)1 0 0.5 02 0.05 0.45 0.13 0.1 0.4 0.24 0.15 0.35 0.35 0.2 0.3 0.46 0.25 0.25 0.57 0.3 0.2 0.68 0.35 0.15 0.7 90.40.10.8(2)测定步骤①样品稀释。
②取2支试管,其中一支做对照,向样品试管中加入稀释后的样品溶液0.5mL ,空白不加。
③向两支试管中分别加入DNS 试剂0.5ml ,于沸水浴中加热5min ,然后冷却。
标准准葡萄糖DNS比色法测定的方法采用3,5-二硝基水杨酸比色法测定水解液中还原糖含量,用752型分光光度计进行比色测定。
1葡萄糖DNS比色法的测定原理3,5-二硝基水杨酸与还原糖共热后被的还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。
在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系,利用分光光度计,在540nm波长下测定光密度值,查对标准曲线并计算,便可求出样品中还原糖的含量。
2测试药品(1)1mg/mL葡萄糖标准液准确称取80℃烘至恒重的分析纯葡萄糖100mg,置于小烧杯中,加少量蒸馏水溶解后,转移到100mL容量瓶中,用蒸馏水定容至100mL,混匀,4℃冰箱中保存备用。
(2)3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂3测试方法(1)葡萄糖标准曲线制作①按下表制备9个试管。
②向9支试管中分别加入DNS试剂0.5ml,充分混合。
③将9支试管放入沸水浴中加热煮沸5min。
④将试管放入盛有冷水的烧杯中冷却。
⑤向各管中分别加入4mL蒸馏水,充分混合。
⑥以空白(1#)管做对照,用分光光度计于540nm波长下分别测定各管溶液的OD值。
⑦以每管在540nm下的吸光值为纵坐标,每管所含的葡萄糖浓度为横坐标作图,即可得到一条通过零点的直线。
如果直线不通过零点则需重做。
标准葡萄糖曲线浓度的量取Tab.2.2 Preparation on standard curve of glucose试管编号标准葡萄糖溶液(mL) 蒸馏水(mL) 最终浓度(mg/mL)1 0 0.5 02 0.05 0.45 0.13 0.1 0.4 0.24 0.15 0.35 0.35 0.2 0.3 0.46 0.25 0.25 0.57 0.3 0.2 0.68 0.35 0.15 0.7 90.40.10.8(2)测定步骤①样品稀释。
②取2支试管,其中一支做对照,向样品试管中加入稀释后的样品溶液0.5mL ,空白不加。
③向两支试管中分别加入DNS 试剂0.5ml ,于沸水浴中加热5min ,然后冷却。
中国农学通报2017,33(15):144-149Chinese Agricultural Science BulletinDNS法定量测定还原糖的波长选择廖祥兵1,2,陈晓明1,2,肖伟1,3,张祥辉1,田甲1(1西南科技大学生命科学与工程学院,四川绵阳621010;2国民核生化灾害防护国家重点实验室,北京102205;3核废物与环境安全国防重点学科实验室,四川绵阳621010)摘要:为研究3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法定量检测还原糖的最佳测定波长。
采用紫外可见分光光度计对样品进行扫描,将每个波长下不同浓度显色液的吸光值与还原糖浓度进行线性拟合并分析,另通过对同一样品的10次扫描结果的RSD进行分析以验证波长选择是否合理。
结果发现:葡萄糖在520nm 处线性相关系数R2520≈R2max,在520~580nm范围内R2稳定在0.9998且在范围内斜率随波长增大而减小。
半乳糖在520nm处线性相关系数也存在R2520≈R2max,而在520~580nm范围内R2及斜率随波长增大而减小。
对同一样品的相对标准偏差(RSD)进行分析,发现RSD520≈RSD min。
此外,在480~580nm波长范围内对照组吸光值都较为稳定,而试验组吸光值在该范围短波长区域波动明显,且波长越小波动越大。
结果表明在520nm处既可达到很好的线性关系,又可实现较好的分辨率,同一样品的验证实验很好的验证了该结论。
试验组吸光值在较短波长处的波动表明选择较短波长是不合理的,同时说明新生成的氨基化合物的光吸收基团和DNS原有的光吸收基团为不同基团。
关键词:DNS;还原糖;波长选择;葡萄糖;半乳糖中图分类号:Q503文献标志码:A论文编号:casb17020094The Wavelength Selection of Reducing Sugar Quantitatively Determined by DNS MethodLiao Xiangbing1,2,Chen Xiaoming1,2,Xiao Wei1,3,Zhang Xianghui1,Tian Jia1(1College of Life Science and Engineering,Southwest University of Science and Technology,Mianyang Sichuan621010;2State Key Laboratory of NBC Protection,Beijing1022053The Key Laboratory of Fundamental Science on Nuclear Wasters and Environment Safety,Mianyang Sichuan621010) Abstract:The aim is to get the optimum determination wavelength of reducing sugar quantitatively determined by DNS method.The samples were scanned by UV visible spectrophotometer,and then the absorbance and the concentration of reducing sugar were linearly fitted and analyzed at each wavelength.And to verify whether the wavelength selection is reasonable,the RSD of10-time scan results of the same sample was analyzed.The results showed that the linear correlation coefficient(R2)of glucose was very close to R2max at520nm(R2520≈R2max).In the range of520-580nm,R2was stable at0.9998and the slope decreases with the increase of wavelength.R2of galactose was also very close to the R2max at520nm(R2520≈R2max).In the range of520-580nm,R2and the slope also decreased with the increase of wavelength.The results of RSD analysis of the基金项目:国民核生化灾害防护国家重点实验室开发基金项目“铀污染的牧草-微生物联合修复”(SKLNBC2015-04);核废物与环境安全国防重点实验室基金“铀污染的生物预警及修复”(15yyhk05);校博士基金项目“可视化重金属(铀)污染微生物预警体系的构建与应用”(16ZX7113)。
蛋白纯化年度工作总结汇报蛋白纯化是一项关键的科学研究工作,常用于生物医药领域的蛋白质结构与功能研究、新药研发和疾病诊断治疗等领域。
在过去的一年里,本实验室团队针对蛋白纯化的各个环节,进行了深入的研究和实践。
本文将对我们的年度蛋白纯化工作进行综述和总结。
1. 研究目标和背景首先,让我们回顾一下我们的研究目标和背景。
我们团队的主要目标是通过蛋白纯化技术,获得高纯度的蛋白样本,以进行相关的研究。
我们的研究重点是一种与肿瘤发生和发展密切相关的蛋白质,该蛋白质在肿瘤细胞中扮演着重要角色。
2. 选择合适的纯化方法在蛋白纯化的过程中,选择合适的纯化方法是至关重要的。
我们首先进行了蛋白质的整体性质分析,包括分子量、等电点和亲水性等特性。
根据这些特性,我们选择了亲和层析和离子交换层析作为蛋白纯化的关键方法。
我们使用了Ni-NTA亲和树脂用于结合靶蛋白,而离子交换树脂则用于分离目标蛋白与其他杂质的混合物。
3. 优化纯化条件为了提高蛋白纯化的纯度和产率,我们进行了大量的优化实验。
我们改变了各种条件,如洗脱缓冲液的PH值、盐浓度和洗脱浓度,以找到最适宜的条件。
此外,我们还测试了不同洗涤剂的效果,包括甲基-β-硫代半乳糖苷(β-甲基硫代葡萄糖苷酸)和十二烷基葡萄糖苷(十二烷基葡萄糖苷),以及多肽酶抑制剂的添加。
4. 结果和讨论经过多次实验和优化,我们成功地获得了高纯度的目标蛋白样本。
通过SDS-PAGE检测和Western Blot验证,我们确定了目标蛋白的存在,并排除了其他杂质的干扰。
此外,我们还使用质谱法对纯化蛋白进行了验证,并与已知质谱数据进行了比对。
5. 蛋白样本的应用最后,我们对获得的高纯度蛋白样本进行了一系列的功能性研究。
我们在细胞实验中检测了蛋白的生物活性,并评估了其对细胞功能的影响。
此外,我们还进行了一系列的结构研究,利用X射线晶体学和核磁共振技术,探索了蛋白的三维结构和相互作用。
综上所述,我们的年度蛋白纯化工作取得了可喜的成果。
DNS法测定D-氨基葡萄糖含量方法的研究刘玥;刘晓兰;周利敏;郑喜群【期刊名称】《中国调味品》【年(卷),期】2014(000)010【摘要】建立了DNS法测定调味品中色素D-氨基葡萄糖含量的方法。
研究了反应的测定波长、DNS试剂用量、反应时间、反应温度、反应液体积以及反应产物在5h 内的显色稳定性对测定结果的影响。
结果表明:DNS法测定D-氨基葡萄糖含量的最适波长为520 nm,D-氨基葡萄糖浓度在100~300μg/mL时,DNS 试剂用量为1.0 mL,沸水浴反应8 min,反应液体积4 mL,反应产物在5 h内显色性质稳定,该方法精密度良好,RSD为0.08%,回收率为98.86%。
【总页数】5页(P89-93)【作者】刘玥;刘晓兰;周利敏;郑喜群【作者单位】齐齐哈尔大学食品与生物工程学院,黑龙江齐齐哈尔 161006; 农产品加工黑龙江省普通高校重点实验室,黑龙江齐齐哈尔 161006;齐齐哈尔大学食品与生物工程学院,黑龙江齐齐哈尔 161006; 农产品加工黑龙江省普通高校重点实验室,黑龙江齐齐哈尔 161006;齐齐哈尔大学食品与生物工程学院,黑龙江齐齐哈尔 161006; 农产品加工黑龙江省普通高校重点实验室,黑龙江齐齐哈尔161006;齐齐哈尔大学食品与生物工程学院,黑龙江齐齐哈尔 161006; 农产品加工黑龙江省普通高校重点实验室,黑龙江齐齐哈尔 161006【正文语种】中文【中图分类】TS245.4【相关文献】1.HPLC示差折光分析法测定D-氨基葡萄糖盐酸盐中的N-乙酰-D-氨基葡萄糖 [J], 王英锋;晏利芝;郭雪清2.滴定分析法和分光光度法测定保健食品中D-氨基葡萄糖盐酸盐含量 [J], 骆治琼3.紫外可见分光光度法测定胶囊剂中D-氨基葡萄糖盐酸盐的含量 [J], 刘士团;张芳;刘春霖4.高效液相色谱法测定2-氯-4-硝基苯基-β-D-半乳糖苷和2-氯-4-硝基苯基-N-乙酰基-β-D-氨基葡萄糖苷含量及其稳定性的研究 [J], 王玉洁;张莉5.滴定分析法和分光光度法测定保健食品中D-氨基葡萄糖盐酸盐含量的研究 [J], 陈金东;李蔚因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定五味子还原糖含量的适宜条件江建丽
【期刊名称】《海峡药学》
【年(卷),期】2014(26)1
【摘要】目的探讨3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定还原糖含量的适宜条件,建立五味子还原糖的提取及测定方法.方法以DNS为显色剂,以葡萄糖为对照品,考察测定波长对还原糖测定过程中各因素的影响;比较不同五味子饮片中水提法还原糖的含量.结果以葡萄糖为对照的适宜波长为530nm,五味子饮片中还原糖含量有一定差别.结论本法简便、准确、可靠,可用于五味子还原糖的含量测定.
【总页数】4页(P57-60)
【作者】江建丽
【作者单位】福建省南平市药品检验所,南平,353000
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
【相关文献】
1.3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定甘蔗茎节总糖和还原糖含量 [J], 王俊刚;张树珍;杨本鹏;陈萍;吴转娣;胡军喻
2.响应面法对3,5-二硝基水杨酸比色法测定水果中还原糖含量条件的优化 [J], 李志霞;聂继云;闫震;李静;匡立学;沈友明
3.3,5—二硝基水杨酸(DNS)比色法在分析棉花纤维还原糖含量中的应用研究[J], 范玲;郑春霞;等
4.3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法测定马铃薯还原糖含量的研究 [J], 朱海霞;石瑛;张庆娜;陈伊里
5.3,5-二硝基水杨酸法测定蔓菁中还原糖和总糖含量 [J], 高文军; 李卫红; 王喜明; 乔丽芳
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
十二烷基葡萄糖苷定量鉴定十二烷基葡萄糖苷是一种重要的表面活性剂,广泛应用于洗涤剂、个人护理品和医药领域。
本文将从十二烷基葡萄糖苷的定义、制备方法、性质以及应用领域等方面进行详细介绍。
一、定义:十二烷基葡萄糖苷是一种非离子型表面活性剂,由葡萄糖和十二烷基醇通过酯键结合而成。
其化学结构如下图所示:二、制备方法:十二烷基葡萄糖苷的制备方法多种多样,常见的方法有以下几种:1. 酸催化法:将葡萄糖和十二烷基醇在酸性条件下反应,生成十二烷基葡萄糖苷。
2. 酶催化法:利用酶催化作用,将葡萄糖和十二烷基醇在适宜的温度和pH条件下反应,生成十二烷基葡萄糖苷。
3. 高压法:利用高压反应器,在高温高压条件下,将葡萄糖和十二烷基醇反应,生成十二烷基葡萄糖苷。
三、性质:1. 表面活性性质:十二烷基葡萄糖苷具有良好的表面活性性质,能够降低液体的表面张力,使水与油相互分散并稳定。
2. 温和性:十二烷基葡萄糖苷具有温和性,对皮肤和黏膜刺激小,适合用于个人护理品和医药领域。
3. 降解性:十二烷基葡萄糖苷在环境中容易被微生物降解,对环境影响较小。
四、应用领域:1. 洗涤剂:十二烷基葡萄糖苷可用作洗涤剂的成分,具有良好的去污能力和稳定性,对皮肤无刺激性,广泛应用于洗衣液、洗手液等产品中。
2. 个人护理品:十二烷基葡萄糖苷可用作洗发水、沐浴露等个人护理品的成分,能够温和清洁皮肤和头发,不会破坏皮肤的天然保护层。
3. 医药领域:十二烷基葡萄糖苷可用作药品的辅助溶剂,能够提高药物的溶解度和稳定性,增强药物的吸收。
4. 其他领域:十二烷基葡萄糖苷还可用于农药、油田化学品等领域,起到增溶、乳化、分散等作用。
十二烷基葡萄糖苷作为一种重要的表面活性剂,在洗涤剂、个人护理品和医药领域有着广泛的应用。
随着人们对环境友好型产品的需求增加,十二烷基葡萄糖苷作为一种温和、降解性好的表面活性剂,将会有更加广阔的发展前景。
DNS法测定还原糖含量时最适波长的确定王俊丽,聂国兴,李素贞,谢艳敏,曹香林(河南师范大学生命科学学院,河南新乡453002)摘要:探讨DNS法测定还原糖含量时的最适波长。
以DNS为显色剂,用分光光度法分析测定了木糖和葡萄糖显色液的最大吸收波长和最适测定波长。
结果表明,木糖和葡萄糖与DNS显色剂反应后,均在490nm处有最大吸收峰。
标准曲线糖含量范围为0~40mg/L时,OD值在520nm处的R2最接近于1,精确度和回收率均较高。
提示DN S法测定还原糖含量时,520nm为最适测定波长。
关键词:还原糖;木糖;葡萄糖;DNS法;最适波长中图分类号:Q503 文献标识码:A 文章编号:1004-3268(2010)04-0115-04 Optimal Wavelength for Determining the Content ofReducing Sugar by DNS M ethodWANG Jun-li,N IE Guo-xing,LI Su-zhen,XIE Yan-m in,CAO Xiang-lin(Co llege of L ife Sciences,Henan No rmal U niver sity,Xinx iang453002,China)Abstract:In this study,the OD values of x ylose and glucose under different w avelength w ere de-termined.T he r esults show ed that the DNS r eaction so lution of xy lose and g lucose hav e the same maxim um absorption w aveleng th(490nm)and the sam e optimal determining w avelength (520nm).When determ ine the content of x ylose and gluco se under the w aveleng th o f520nm, the precision and recollectio n rate are comparatively high and the line rang e o f reducing sug ar is 0~40m g/L.Key words:Reducing sug ar;Xylose;Glucose;DNS method;Optimal w aveleng th收稿日期:2009-11-15基金项目:河南省重点科技攻关项目(092102210127);河南省水产养殖学重点学科经费资助项目作者简介:王俊丽(1971-),女,河南汝南人,副教授,硕士,主要从事糖生物化学研究。
DNS比色法测还原糖标准曲线绘制及测定Tr21培养液中初始和最终还原糖及总糖含量实验报告1.研究背景木霉菌在发酵过程中,利用碳源导致发酵液中糖含量的变化,其中还原糖是一个主要的反映参数。
还原糖与3,5-二硝基水杨酸(DNS)在碱性条件下生成棕红色物质(3-氨基-5-硝基水杨酸),在一定范围内,棕红色物质颜色深浅的程度与还原糖的含量呈一定的比例关系。
糖含量的不同变化一定程度上体现着Tr21不同的生长阶段,从而为控制及优化发酵过程提供科学依据。
2.实验目的3,5-二硝基水杨酸比色法测定Tr21发酵液中还原糖含量,利用糖含量这个参数,控制发酵过程。
3.实验原理在NaOH和丙三醇存在下,3,5-二硝基水杨酸(DNS)与还原糖共热后被还原生成氨基化合物。
在过量的NaOH碱性溶液中此化合物呈桔红色,在540nm 波长处有最大吸收,在一定的浓度范围内,还原糖的量与光吸收值呈线性关系,利用比色法可测定样品中的含糖量。
黄色桔红色4.实验材料发酵液(5天):Tr121(A2)实验材料:3,5-二硝基水杨酸,氢氧化钠,苯酚,亚硫酸钠,酒石酸钾钠,葡萄糖,蒸馏水实验器材:可见分光光度计,电子天平,真空干燥箱,数显恒温水浴锅,离心机,移液器,枪头,500ML容量瓶,试管,500 ml 烧杯,1000ml量筒5.实验方法5.1试剂配制(1)1 mg/ml葡萄糖标准溶液:准确称取干燥恒重的葡萄糖100mg,加少量蒸馏水溶解后,以蒸馏水定容至100ml,即含葡萄糖为1.0mg/ml。
(2)3,5—二硝基水杨酸试剂:称取6.3 g 3,5—二硝基水杨酸并量取262 ml 2mol/L NaOH加到酒石酸钾纳的热溶液中(182 g酒石酸钾纳溶于500 ml水中),再加5 g结晶酚和5 g亚硫酸氢钠溶于其中,搅拌溶解,冷却后定容到1000 ml贮于棕色瓶中。
(3)碘-碘化钾溶液:称取5g碘,10g碘化钾溶于100ml蒸馏水中。
(4)6N NaOH:称取120g NaOH溶于500ml蒸馏水中。
基于DNS原理的还原糖测定仪高广恒;周万里;朱思荣;毕春元;赵晓华;史建国【摘要】We designed a DNS based reducing sugar detector. It has such advantages as low-concentration reducing sugar detection, convenient operation, easy maintenance, high accuracy and good repeatability. It employs colorimetry to detect the differential light absorption value of dye liquor before and after heating and then to calculate the content of reducing sugar in a sample. We discover that the content of reducing sugar is proportional to the light absorption value. Glucose of 0.1% is used to calibrate measurement. The linear rate of more than 0.99 exists whenthe concentration range is between 0% and 0.1%. The detector can stably detect the content of reducing sugar in beer, sorbitol and ferment.%设计了一种利用DNS原理来检测还原糖的测定仪,该测定仪可以检测低浓度的还原糖,操作方便、维护简单、精度高、重复性好。
利用比色法检测加热前后染液的吸光值差值来计算样品中还原糖的含量,得到还原糖含量和吸光值成比例关系。