中国黑色素瘤患者 BRAF基因突变分析

肿瘤基因突变检测癌症是一类难以预防的疾病，中晚期癌症治愈的可能性又很小，而早期癌症的治愈率可达65%以上，有些肿瘤可达90%以上，因此，战胜癌症的关键是早期发现癌症。

由于癌症早期常无特殊症状，甚至毫无症状，故癌症的早期发现、早期诊断主要是通过定期健康体检和人群筛查完成。

目前筛查癌症的方法主要是通过化验血肿瘤指标及B超、CT、MRI、PET-CT 等检查，但这些方法的敏感性和特异性均不高，发现有异常时往往已是中晚期。

17种常见高发肿瘤，包括乳腺癌（breast cancer）、结肠癌（colorectalcancer）、子宫癌（endometrial cancer）、脑胶质瘤（glioma）、白血病（leukemia）、肺癌（lungcancer）、淋巴癌（lymphoma）、成神经管细胞瘤（medulloblastoma）、黑色素癌(melanoma)、间皮瘤(mesothelioma) 、多性骨髓瘤(multiple myeloma) 、卵巢癌(ovarian cancer)、胰腺癌(pancreatic cancer) 、真性红细胞增多(polycythemia vera) 、前列腺癌(prostatecancer) 、肾细胞癌(renal cell cancer)和恶性内瘤(sarcoma)，其发病机制涉及与多种肿瘤发生共同相关的肿瘤易感基因群介导的分子改变，参与了肿瘤发生的早期分子事件。

系统寻找和探讨它们在肿瘤发生发展过程中的遗传学变异，对阐明肿瘤早期发生机制及寻找肿瘤早期预警、早期诊断和早期治疗的分子靶标都具有重要的现实意义。

利用高通量分子测序技术平台，可同时开展多个肿瘤基因突变检测项目，如EGFR、K-RAS 、N-RAS、B-RAF、PI3K 、p53、p16、BRCA1、BRCA2等。

K-RAS 基因(K-ras,p21)突变检测KRAS基因（K-ras,p21）检测是目前医生了解大肠癌患者癌基因状况最直接、最有效的方法，通过检测不仅可以深入了解癌基因的情况，更重要的是筛选出针对抗表皮生长因子受体靶向药物治疗有效的大肠癌患者，帮助医生选择对肿瘤病人最有效的治疗方法。

B-RAF 突变最佳治疗方案引言B-RAF（B-Raf proto-oncogene, serine/threonine kinase）是一个重要的信号蛋白，在细胞增殖和存活方面起着关键作用。

B-RAF基因突变已被发现与多种肿瘤的发生和发展密切相关，尤其是在黑色素瘤中突变频率最高。

研究表明，针对B-RAF突变所设计的特定治疗方法可以显著提高治愈率和生存率。

本文将讨论B-RAF突变最佳治疗方案，包括靶向治疗和联合治疗等手段，以期为医生和研究人员提供参考。

B-RAF突变与肿瘤B-RAF基因突变概述B-RAF基因突变是指B-RAF基因中的特定序列发生了改变，导致B-RAF蛋白的功能发生异常。

B-RAF突变在多种肿瘤中都有发现，其中最常见的是BRAFV600E突变。

该突变在黑色素瘤中尤为常见，约占50%的病例。

B-RAF突变与肿瘤的关系B-RAF突变可以促进细胞增殖和生存，抑制细胞凋亡，从而促进肿瘤的发生和发展。

BRAF V600E突变导致B-RAF蛋白的活性增强，进一步激活线粒体MAPK信号通路，从而导致肿瘤细胞的异常增殖。

B-RAF突变的治疗方法靶向治疗由于BRAF V600E突变在黑色素瘤中高度表达，针对该突变设计的靶向治疗成为研究的热点。

当前，已经有多种针对BRAF V600E突变的药物被开发出来，包括BRAF抑制剂和MEK抑制剂。

•BRAF抑制剂：Vemurafenib和Dabrafenib是两种常见的BRAF抑制剂。

这些药物作用于突变的BRAF蛋白，抑制其活性，从而抑制细胞增殖和存活。

临床试验表明，BRAF抑制剂可以显著提高黑色素瘤患者的生存率。

•MEK抑制剂：Trametinib和Cobimetinib是两种常用的MEK抑制剂。

这些药物作用于BRAF突变细胞中的MEK蛋白，抑制其活性，从而抑制细胞增殖和存活。

与BRAF抑制剂相比，MEK抑制剂具有更低的副作用。

联合治疗尽管BRAF抑制剂和MEK抑制剂在单药治疗中表现出良好的疗效，但单药治疗后易出现耐药或复发。

braf突变类型BRAF 突变类型是指癌症中一种常见的基因突变类型，它影响了BRAF 基因的编码。

在肿瘤的发生和发展中，BRAF 突变常常是一个预测性指标，它会影响肿瘤的生长和治疗。

BRAF 是人类基因组中一个重要的基因。

其蛋白质产物是激酶，可以调节多个信号通路，参与调节细胞的生长、分化、凋亡和转移等。

然而，当 BRAF 基因发生突变时，这种调控作用就可能出现问题。

STEP 1：BRAF 突变类型的发现最初，BRAF 突变类型是在黑色素瘤患者中被发现的。

研究人员发现，在黑色素瘤中存在大量的 BRAF 突变。

这些突变使得 BRAF 基因产生了一种特定的蛋白质，称为 BRAFV600E，这种蛋白质不断地激活信号通路，导致细胞不受控制地生长和分裂。

随后，研究团队又发现，BRAF 突变不仅仅在黑色素瘤中出现，还存在于其他多种癌症中。

例如，结直肠癌、大肠癌、甲状腺癌、肾癌等多种癌症中都发现了 BRAF 突变。

STEP 2：BRAF 突变类型的分类目前已知有多种 BRAF 突变类型，其中最常见的是 BRAFV600E突变。

这种突变形式占据了 BRAF 突变总数的 90% 以上，是一种常见的准确性肿瘤诊断指标。

除了 BRAFV600E 突变之外，还存在其他BRAF 突变类型，包括 BRAFV600K、BRAFV600D、BRAFV600G、BRAFV600R 等。

BRAF 突变分类的多样性，不仅影响了癌症的诊断和治疗，还对科学家对癌症基因结构的理解带来了新的启示。

STEP 3：BRAF 突变类型与癌症治疗BRAF 突变类型不仅可以为癌症的早期诊断提供帮助，还可以指导癌症治疗的选择。

在临床上，目前有多种治疗 BRAF 突变的方法，包括 BRAF 抑制剂和 MEK 抑制剂等。

这些药物常常与免疫治疗联合使用，帮助增强治疗效果。

对于 BRAF 突变的患者来说，选择适合的治疗方案，是能够显著提高治疗效果的。

CONCLUSION：总结BRAF 突变类型已经成为癌症诊断和治疗的重要指标。

黑色素瘤发病与基因突变关系研究黑色素瘤是一种恶性皮肤肿瘤，主要由黑素细胞组成，其发病率在全球范围内逐年增加。

黑色素瘤早期诊断和治疗具有非常重要的意义，因为其病程恶性，易于转移、扩散，预后十分不良。

目前的研究表明，黑色素瘤发病与基因突变密切相关。

这里我们将对黑色素瘤的基因突变进行详细探讨。

1. BRAF基因突变BRAF基因是人体中常见的一个基因，编码一种名为B-RAF的蛋白质。

研究表明，BRAF基因突变是导致黑色素瘤发病的最重要的基因因素之一。

BRAF基因启动子区的V600E突变是最常见的一种突变类型，其出现率高达50%以上。

V600E突变可导致B-RAF蛋白质激酶活性增强，从而引起细胞增殖和转移等异常生物学行为。

BRAF基因突变还可以影响诱导凋亡和细胞增殖等多个信号通路的活性，因此在黑色素瘤的发病中起到重要的作用。

2. NRAS基因突变NRAS基因编码一种名为N-RAS的蛋白质，在信号转导通路中具有重要的作用。

研究表明，NRAS基因突变也是导致黑色素瘤发病的一个重要因素之一。

NRAS基因突变是黑色素瘤中第二常见的突变类型，其出现频率约为15%。

这些突变会导致N-RAS蛋白质的激酶活性增强，从而促进细胞增殖、转移等生物学行为。

NRAS基因突变可被视为黑色素瘤恶化的一个征兆。

3. PTEN基因突变PTEN基因编码一种名为蛋白质酪氨酸磷酸酶Pten的蛋白质，是一个非常重要的肿瘤抑制基因。

PTEN基因的突变或丢失与多种肿瘤的形成和进展密切相关，黑色素瘤也不例外。

研究表明，PTEN基因的突变和丢失在黑色素瘤中都非常常见。

PTEN基因突变会抑制PTEN蛋白质的磷酸酶活性，从而使得信号通路不规则地活动，并同样促进细胞增殖和转移。

4. TP53基因突变TP53基因是一个非常著名的肿瘤抑制基因，在多种肿瘤如黑色素瘤中均有发现其突变的现象。

TP53基因突变可影响凋亡、DNA损伤反应和细胞周期等多种生物学行为。

尽管TP53基因的突变频率相对较低，但其在黑色素瘤的发病机制中的作用仍然不容忽视。

盘点黑色素瘤治疗方法及临床进展展开全文在2011年前，转移性黑色素瘤患者的生存时间很短。

近年来，伴随着靶向和免疫治疗的兴起，转移性黑色素瘤几乎无药可用的局面被扭转。

同时，早中期黑色素瘤患者也有了更多选择。

下文将针对近年来靶向及免疫治疗在黑色素瘤领域的临床进展撷英介绍。

Part.1靶向治疗进展1. 与黑色素瘤相关的基因突变一部分黑色素瘤被发现存在基因突变，其中，最常见的就是BRAF 突变。

在国外，近50%的黑色素瘤患者存在BRAF突变，我国也有近1/4的患者携带该突变[1]。

与没有突变的患者相比，携带该突变的患者预后更差——与野生型相比，死亡风险会增加3倍[1]。

BRAF基因位于MAPK通路（即RAS/RAF/MEK/ERK通路）上，它是一条生长因子信号转导通路。

BRAF基因在通路中，负责编码丝氨酸/苏氨酸特异性激酶，能够调控黑色素细胞的生长、分化和死亡。

最常见的BRAF突变为缬氨酸（V）突变为谷丙氨酸（E）（BRAF V600E），其次为缬氨酸（V）突变为赖氨酸（K）（BRAFV600K）。

除了最常见的BRAF突变，其他与黑色素瘤突变相关的突变包括NRAS（突变率为13.25%）、MEK1（6%）、KIT（2.6%）、CTNNB1（2%）、GNA11（2%）、GNAQ（1%）。

有意思的是，黑色素瘤的突变基本都是排他性的，这意味着患者通常只可能发生1种突变[2]。

2. 目前可用的黑色素瘤靶向药BRAF抑制剂＋MEK抑制剂针对BRAF突变的BRAF抑制剂，显著地改善了黑色素瘤患者的生存。

但用药后却难免发生耐药。

随后的研究发现，在BRAF抑制剂的基础上，添加MEK抑制剂，不仅能够显著提高有效率，还能阻止耐药的发生。

目前已获得美国食品与药物管理局（FDA）批准的BRAF抑制剂和MEK抑制剂包括：① BRAF抑制剂：•达拉非尼（商品名：Tafinlar）•维罗非尼（商品名：Zelboraf）•Encorafenib（商品名：Braftovi）② MEK抑制剂：•曲美替尼（商品名：Mekinist）•考比替尼（商品名：Cotellic）•Binimetinib（商品名：Mektovi）这些药及组合方案的获批情况如下表所示。

BRAFV600E基因突变位点一、BRAF基因的作用BRAF基因是编码BRAF蛋白的基因，它在细胞信号传导通路中起着重要作用。

BRAF蛋白是一种激酶，参与调节细胞生长、分化和凋亡。

BRAF基因突变可以引起信号通路的异常激活，导致细胞异常增殖，从而促进肿瘤的发生和发展。

二、BRAFV600E突变位点BRAFV600E突变是BRAF基因中最常见的突变类型。

它主要发生在BRAF基因中的第600位点，即谷氨酸（E）被缬氨酸（V）所替代。

这种突变会导致BRAF蛋白的激酶活性持续增强，使其不受内在的调控而持续处于活跃状态，从而引发细胞的异常增殖。

三、BRAFV600E突变与肿瘤的关系1. 乳腺癌BRAFV600E突变在乳腺癌中并不常见，但一些研究表明，它可能与一些乳腺癌的发生和预后相关。

部分研究发现，BRAFV600E突变与乳腺癌中的浸润性乳腺癌和高级别浸润性乳腺癌相关。

一些临床试验还表明，针对BRAFV600E突变的靶向治疗可能对一些乳腺癌患者有效。

2. 甲状腺癌BRAFV600E突变在甲状腺癌中非常常见，约占甲状腺癌患者的40至50。

该突变与甲状腺癌的临床病理特征、预后及预后不良等紧密相关。

BRAFV600E突变已经成为甲状腺癌的一个重要的分子诊断标志物。

3. 黑色素瘤BRAFV600E突变在黑色素瘤中是最常见的BRAF突变类型，约占患者的50。

该突变不仅与黑色素瘤的发生、发展密切相关，还已成为黑色素瘤的靶向治疗的重要标志。

4. 大肠癌在大肠癌中，BRAFV600E突变约占患者的10。

该突变通常与大肠癌的恶性程度、预后及预后不良相关。

四、BRAFV600E突变的检测针对BRAFV600E突变的检测对临床诊断和治疗具有重要意义。

目前，常用的检测方法包括PCR、基因测序和免疫组织化学染色等。

其中，PCR和基因测序是常用的分子生物学检测方法，通常用于组织或血液标本。

免疫组织化学染色能够直观地显示BRAFV600E突变在肿瘤组织中的存在，对辅助诊断有很大帮助。

非小细胞肺癌的BRAF基因突变及其临床意义黄志敏;吴一龙【摘要】BRAF mutations have been found to be a driver mutation and maybe a therapy target in patients with non-small cell lung cancer. This article reviews the current understanding of BRAF gene, its structure, expression, the signal pathway, as well as its relationship with cancer especially the targeted therapies for non-small cell lung cancer.%BRAF基因是一个驱动基因,可能是靶向治疗非小细胞肺癌的一个靶点.本文就BRAF基因的结构、表达、信号通路调节及研究热点、与肿瘤发生的关系尤其是与非小细胞肺癌的靶向治疗关系加以阐述.【期刊名称】《中国肺癌杂志》【年(卷),期】2012(015)003【总页数】4页(P183-186)【关键词】BRAF突变;肺肿瘤;靶向治疗【作者】黄志敏;吴一龙【作者单位】510080广州,广东省肺癌研究所,广东省人民医院,广东省医学科学院;510080广州,广东省肺癌研究所,广东省人民医院,广东省医学科学院【正文语种】中文【中图分类】R734.2BRAF基因激活突变可发生于多种肿瘤及癌细胞系中，尤其常见于恶性黑色素瘤。

近年来研究提示BRAF基因激活突变可能与肺癌的发生发展及治疗预后有密切的关系。

本文就BRAF基因的结构、表达、信号通路调节及研究热点、与肿瘤发生的关系尤其是与非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）的靶向治疗关系加以阐述。

1 BRAF基因及家族BRAF基因，1988年由Ikawa等[1]首先在人类尤文氏肉瘤中发现并克隆确认，是一个能转染NIH3T3细胞且有活性的DNA序列，因其与CRAF和ARAF具有相当高的同源性，故称其为BRAF。

·５８６·喧废星生瘤堂苤查至Ｑ塑生２旦筮！垒鲞筮Ｚ翅ｇｂｉ望！堕￡！丛型Ｑ旦竺赶：』坠！：至Ｑ塑：：！垒：№：Ｚ研究只包含了极少的亚洲人数据，但仍提示我们亚洲黑色素瘤从基因水平方面就与欧美白种人有很大的区别。

而关于中国人黑色素瘤ＢＲＡＦ基因突变情况目前尚无相关的报道。

因而，我们收集了我院９０例黑色素瘤患者的组织标本，进行了中国人黑色素瘤ＢＲＡＦ基因突变情况的研究，以期发现其与西方白种人所存在的差异。

１资料与方法１．１研究对象收集北京肿瘤医院肾癌黑色素瘤内科２００６～２００８年住院和门诊患者的病灶组织蜡块９０例，均经ＨＥ染色和病理诊断证实。

９０例患者分别为黏膜、肢端和非肢端皮肤黑色素瘤各３０例。

１．２肿瘤基因组ＤＮＡ提取和ＰＣＲ扩增目的基因参照文献”１手动分离石蜡包埋组织中的肿瘤细胞，基因组ＤＮＡ提取按照试剂盒说明书进行（ＱＩＡａｍｐＤＮＡＦＦＰＥＴｉｓｓｕｅＫｉｔ）。

采用巢式ＰＣＲ扩增ＢＲＡＦ基冈外显子１１和１５。

引物序列如下：外显子１１：外侧上游引物，５’一ＣＡＣＧＴＡＡＣＣＡＴ‘ｒＴＡ”一ＴＧＴＴＣＴＣＴ－３’，外倾０下游弓ｌ物，５’一ＴＧＧＡＡＣＡＡＡＡ—ＣＡＡＡＧＧＡＡＧＣ一３’；内侧上游引物，５’一ＡＡＣＣＡＴＴＴ—ＡＴＴＴＧＴＴＣＴＣＴＣＴＣＣＡ－３’，内倾４下游弓Ｉ物，５’一ＧＡＡ—ＣＡＡＡＡＣＡＡＡＧＧＡＡＧＣＣＡＣＴ－３’。

外显子１５：外侧上游引物与内侧上游引物相同，５’一ＴＴＡＴＴＧＡＣＴＣＴ—ＡＡＧＡＧＧＡＡＡＧＡＴＧＡＡＧ一３’，外侧下游引物，５’一Ｔ—ＧＡＴＴＴＴＴＧＴＧＡＡＴＡｃＴＧＧＧＡＡＣ一３’，内倾０下游引物，５’一ＧＧＣＣＡＡＡＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＧＴＧＧＡ－３’。

由于黑色素的存在会抑制ＤＮＡ的扩增，故依据文献”１在反应体系中加入小牛血清蛋白（ＢＳＡ）减少这种抑制效应，ＢＳＡ的加入量为１５斗ｇ／２５Ｉｘｋ。

ＰＢＳ代替模板为阴性对照。

反应条件为：初始变性９５０Ｃ５ｍｉｎ；９５℃６０ｓ，５７０Ｃ１ｍｉｎ，７２０Ｃ１ｍｉｎ，３２个循环；７２０Ｃ延伸１０ｍｉｎ。

43例中国人眼部恶性黑色素瘤cKit和BRAF基因突变分析孔燕;梁龙;斯璐;代杰;俎明;张虔男;郭军【摘要】Objective To investigate the frequency of cKit/BRAF mutations in Chinese patients with ocular melanoma. Methods Forty-three ocular melanomas (30 choroidal melanomas, 13 conjunctival melanomas) were analyzed for mutations in exons 9,11,13 ,17 and 18 of cKit and in exon 15of BRAF in genomic DNA by PCR amplification and sanger sequencing. Results In the choroidal and conjunctival melanoma subtypes, the frequency of cKit mutations was 16. 7% (5/30) and 7. 7% ( 1/13) , respectively. A single conjunctival melanoma harbored BRAF mutation and choroidal melanoma lack BRAF mutation. Conclusions The frequency of cKit mutations is higher in Chinese patients with choroidal melanoma and the cKit inhibitor may play their roles in Chinese patients with choroidal melanoma.%目的分析中国人眼部恶性黑色素瘤中cKit和BRAF基因突变情况.方法收集43例中国眼部恶性黑色素瘤患者组织标本(脉络膜恶性黑色素瘤30例,结膜恶性黑色素瘤13例),采用巢式PCR扩增和基因测序的方法检测cKit基因第9、11、13、17和18外显子以及BRAF基因第15外显子突变情况.结果 cKit基因在脉络膜恶性黑色素瘤患者中突变率达16.7％ (5/30),而在结膜恶性黑色素瘤中突变率仅为7.7％ (1/13)；在结膜恶性黑色素瘤中检测到1例BRAF基因突变(1/13),在脉络膜恶性黑色素瘤中未检测到BRAF基因突变.结论 cKit基因在中国脉络膜恶性黑色素瘤患者中突变率较高,提示以cKit为靶标的靶向药物未来有可能为中国脉络膜恶性黑色素瘤患者带来新的希望.【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2012(032)002【总页数】4页(P154-157)【关键词】眼部恶性黑色素瘤;cKit;BRAF;基因突变;靶向治疗【作者】孔燕;梁龙;斯璐;代杰;俎明;张虔男;郭军【作者单位】北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所肾癌黑色素瘤内科恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室,北京100142;北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所肾癌黑色素瘤内科恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室,北京100142;北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所肾癌黑色素瘤内科恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室,北京100142;北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所肾癌黑色素瘤内科恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室,北京100142;北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所肾癌黑色素瘤内科恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室,北京100142;北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所肾癌黑色素瘤内科恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室,北京100142;北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所肾癌黑色素瘤内科恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室,北京100142【正文语种】中文【中图分类】R739.7#对本文有相同贡献眼部恶性黑色素瘤的发病率在国外居眼内肿瘤的首位，在国内居眼内肿瘤的第2位。

在约1/5的黑色素瘤患者中NRAS突变导致MAPK通路组成型激活。

鉴于直接靶向NRAS 和识别RAS激活的下游效应存在困难，已经探索了MEK抑制剂作为抑制NRAS突变型黑色素瘤MAPK通路的一种治疗选择。

比美替尼，一种MEK 1/2抑制剂，在NRAS突变型黑色素瘤中20%患者适度缓解，所有患者部分缓解。

在未经治疗或免疫治疗疾病仍进展的IIIC期或IV期NRAS突变型黑色素瘤3期试验中，402例患者按照2:1比例随机接受比美替尼（每日两次口服45 mg）或标准达卡巴嗪静脉注射治疗。

比美替尼治疗组缓解率为15%(包括1%的完全缓解)，中位PFS为2.8个月，达卡巴嗪治疗组中位PFS为1.5个月(HR 0.62, 95% CI 0.47-0.80, P< 0.01)。

两组中位总生存期相似。

先前接受免疫治疗的患者应答率相似（16%）。

比美替尼可能是一线免疫治疗后进展期患者的一种治疗选择，特别是在未靶向其他突变或可获得临床试验的情况下。

KIT突变型黑色素瘤BRAF突变型黑色素瘤通常见于非慢性阳光损伤皮肤处。

这些突变在黑色素瘤的其他组织学亚型中不常见，包括肢端雀斑样痣型，黏膜型以及那些在慢性阳光损伤皮肤处产生的突变。

Curtin及其同事分析了来自这些位点的102个原发性黑色素瘤，发现在染色体4q12的窄带内有扩增，识别出K642E突变，这是已知的致癌基因。

在胃肠道间质瘤（GIST）中也发现了这种情况。

这些标本中KIT蛋白（III型跨膜RTK）也有所升高，从而确定了KIT突变与黑色素瘤发展之间的联系。

众所周知，KIT突变可引起粘膜、肢端、阳光损伤皮肤处黑色素瘤。

据报道，21%黏膜黑色素瘤、11%肢端黑色素瘤、16.7%慢性日光损伤型黑色素瘤和15%肛门黑色素瘤患者KIT激活突变。

Bcr-abl酪氨酸激酶特异性抑制剂甲磺酸伊马替尼治疗GIST 和慢性粒细胞白血病有效。

大约70％的KIT突变发生在近膜区，这是对伊马替尼反应的预测指标。

74中国美容医学2018年1月第27卷第1期 Chinese Journal of Aesthetic Medicine. Jan. 2018.Vol.27.No.1•基础研究• •论 著•不同来源黑色素瘤BRAF V600E基因突变分析高正君1，谢沛霖1，司小强1，杨国虎1，薛晓东1，徐靖宏2(1.甘肃省人民医院整形美容科 甘肃 兰州 730000；2.浙江大学附属第一医院整形美容科 浙江 杭州 310003)[摘要]目的：探讨BRAF V600E基因突变与黑色素瘤源于非色素痣或色素痣的相关性。

方法：应用PCR和DNA测序法对62例非色素痣来源和22例色素痣来源的黑色素瘤标本中BRAF V600E位点是否突变进行检测。

结果：非色素痣来源黑色素瘤突变率为45.2%；先天性小痣来源黑色素瘤突变率为11.1%；后天痣来源黑色素瘤突变率为15.4%，组间比较差异有统计学意义（χ2=6.972，P ＜0.05）。

不同来源的黑色素瘤患者的不同性别及发病部位（肢端、非肢端、黏膜）基因突变率比较，差异无统计学意义（P ＞0.05）。

结论：BRAF V600E基因突变与黑色素瘤来源于非色素痣或先天痣或后天痣关系密切，而与性别、发病部位无明显相关性。

[关键词]黑色素瘤；BRAF V600E基因；痣；色素[中图分类号]R739.5 [文献标志码]A [文章编号]1008-6455（2018）01-0074-03Analysis of BRAF Gene Mutation of Melanoma Derived from Different SourcesGAO Zheng-jun 1，XIE Pei-lin 1，SI Xiao-qiang 1，YANG Guo-hu 1，XUE Xiao-dong 1，XU Jing-hong 2(1.Department of Plastic Surgery,Gansu Provincial Hospital,Lanzhou 730000,Gansu, China;2.Department of Plastic Surgery,theFirst Affiliated Hospital of Zhejiang University,Hangzhou 310003,Zhejiang,China)Abstract: Objective To investigate the relationship between BRAF V600E gene mutation and melanoma derived from non pigmented nevus or pigmented nevus. Methods The melanoma tissue specimens in 62 Patients from non pigmented nevus and 22 patients from melanocytic nevus were collected ,PCR and DNA sequencing were used to detect the mutation of V600E locus in BRAF gene. Results The BRAF gene mutation rates respectively was 45.2% in the melanoma derived from non pigmented nevus ,11.1% in the melanoma derived from congenital small nevi and 15.4% in the melanoma derived from acquired melanocytic nevus, there was a significant difference(χ2=6.972,P ＜0.05). There is no significant difference in the gene mutation rate of the different sex and locations (acromelic, non acromegaly, mucous membrane) in melanoma derived from different sources(P ＞0.05). Conclusion BRAF V600E gene mutation appear to be closely related with the origins of melanoma derived from non pigmented nevus or congenital nevus or acquired nevus, but uncorrelated with gender and lesion sites.Key words: melanoma; BRAF V600E gene; nevus; pigment基金项目：甘肃省卫生行业科研项目(GSWSKY2017-54)第一作者：高正君，甘肃省人民医院整形美容科，主治医师；研究方向：体表肿瘤，创面愈合，瘢痕形成；E-mail:yg-777@黑色素瘤（Melanoma，M）是起源于神经嵴的黑素细胞恶性肿瘤，恶性度极高。

519一、 前言黑色素瘤是临床上较为常见的恶性肿瘤之一，也是发病率增长最快的恶性肿瘤之一，年增长率为3~5%，全球每年黑色素瘤新发病例199 627例，死亡例数为46 372例。

黑色素瘤在我国发病率较低，但近年来成倍增长，2000年发病率统计仅为 0.2/10万，2005-2007年我国发病率约1/10万，每年新发病例约2万人。

因此，黑色素瘤已经成为严重危及我国人民健康的疾病之一，然而在我国黑色素瘤这种疾病长期不被人们认识，甚至对一般的医疗工作者来说也很陌生，为了推动我国临床肿瘤学事业的发展，提高黑色素瘤多学科规范化综合治疗和研究水平，积极学习和应用国内、外的符合循证医学原则的高级别证据，制定符合我国国情的黑色素瘤临床实践指南，临床肿瘤学协作专业委员会（CSCO ）于2007年5月成立了CSCO 黑色素瘤专家委员会，并组织多学科专家参与，于2008年制定了“中国黑色素瘤专家共识第一版”，后于2009年经过多次专家研讨会，修订为“中国黑色素瘤诊治指南2009版”，此次再次经专家研讨会并反复广泛征求意见，制定了本“中国黑色素瘤诊治指南2011版”。

二、 本指南更新内容（与2009年版比较）（一） 流行病学：①新增：皮肤和黏膜黑色素瘤为中国黑色素瘤的主要病理亚型；②新增：中国黑色素瘤患者的原发灶厚度较厚，多数合并溃疡；③新增：分期、厚度为中国黑色素瘤患者的预后不良因素，皮肤黑色素瘤预后好于黏膜黑色素瘤。

④新增：KIT 基因和BRAF 基因突变为皮肤黑色素瘤独立预后不良因素，KIT 基因突变为黏膜黑色素瘤的独立预后不良因素。

（二） 病理：①新增：根据基因特点进行的新分型，即肢端型、黏膜型、慢性阳光损伤型和非慢性阳光损伤型（含原发灶不明型）；②新增：中国黑色素瘤基因突变情况：BRAF V600突变率为25.9%，87.3%为V600突变，CKIT 突变率为10.8%，扩增率为7.4%。

（三） 放疗：新分为辅助放疗原则和姑息放疗原则。

braf 病理诊断分类BRAF基因突变是一种常见的肿瘤病理诊断分类，特别是在黑色素瘤和乳腺癌中。

本文将从BRAF基因的功能、突变类型以及相关肿瘤的病理特征等方面进行阐述。

BRAF基因是人类基因组中的一个重要成员，它编码的蛋白质是一种酪氨酸激酶。

BRAF蛋白激活了细胞信号传导通路中的下游分子，参与细胞增殖、分化和存活等生物学过程。

然而，BRAF基因的突变会导致其蛋白质的功能异常，进而影响细胞的生理状态。

BRAF基因突变主要分为V600E型和非V600E型两大类。

其中，V600E型突变最为常见，占据了大部分的BRAF突变情况。

这种突变导致BRAF蛋白质中的氨基酸第600位的氨基酸从原来的谷氨酸（Valine，V）突变为谷氨酸（Glutamic acid，E），从而改变了蛋白质的结构和功能。

而非V600E型突变则包括其他位置的突变，如K601E、G469A等。

根据研究，BRAF基因突变在不同的肿瘤类型中表现出不同的病理特征。

以黑色素瘤为例，研究表明，约50%的黑色素瘤患者存在BRAF基因的突变。

而且，携带BRAF突变的黑色素瘤具有一些特殊的临床和病理特征，如早发性、多发性、青年发病、颜面部病变、弥漫性浸润生长等。

此外，BRAF突变还与黑色素瘤的预后相关，携带BRAF突变的黑色素瘤患者预后相对较差。

除了黑色素瘤，乳腺癌中也存在BRAF基因突变。

研究发现，BRAF 突变在乳腺癌中的发生率约为3%-5%。

而且，与其他类型的乳腺癌相比，携带BRAF突变的乳腺癌在病理特征上也有所不同。

BRAF 突变的乳腺癌通常表现为较小的肿瘤大小、低级别的肿瘤分级、低分子亚型以及较好的预后等。

BRAF突变还与其他一些肿瘤类型的发生相关，如结直肠癌、甲状腺癌等。

在结直肠癌中，BRAF突变通常与微卫星不稳定性（MSI）相关。

而在甲状腺癌中，BRAF突变则与乳头状癌的发生密切相关。

BRAF基因突变作为一种重要的肿瘤病理诊断分类，与多种肿瘤的发生和发展密切相关。

braf基因突变丰度参考值1.引言1.1 概述概述部分的内容可以从如下角度展开：在肿瘤研究领域中，基因突变是一种重要的生物标记物，它们能够揭示肿瘤的发病机制、预后情况及治疗反应等关键信息。

其中，Braf基因突变在许多癌症类型中具有重要的临床意义，如甲状腺癌、黑色素瘤等。

Braf 基因突变通常导致其编码的蛋白激酶的过度激活，从而促进癌细胞的增殖和生存，此情况为患者提供了特定的靶向治疗选择。

然而，单纯检测Braf基因是否突变并不能满足临床应用的需要。

由于Braf基因突变存在多个突变位点以及突变的丰度差异，临床医生需要准确的突变丰度参考值来辅助诊断和治疗决策。

突变丰度参考值是指在一定样本中Braf基因突变所占比例的参考标准，它可用于判断突变的严重程度、预测治疗效果等。

因此，本文旨在探讨Braf基因突变丰度参考值的重要性以及确定方法，以期为临床医生提供准确、可靠的参考依据。

首先，我们将介绍Braf基因突变的意义，包括其在肿瘤发生、发展中的作用。

接着，我们将探讨目前常用的Braf基因突变检测方法，以及它们的优缺点。

最后，我们将重点关注Braf基因突变丰度参考值的重要性，并介绍不同的确定方法及其应用前景。

通过本文的阐述，我们希望能够对Braf基因突变丰度参考值有一个全面的了解，促进其在临床实践中的应用以及为患者提供更为个性化、精准的治疗方案。

1.2文章结构文章结构是一个文档的组织框架，它帮助读者理清文章的脉络和逻辑顺序。

在本文中，我们将按照以下结构展开讨论Braf基因突变丰度参考值的相关内容：1. 引言1.1 概述1.2 文章结构1.3 目的2. 正文2.1 Braf基因突变的意义2.2 Braf基因突变的检测方法3. 结论3.1 Braf基因突变丰度参考值的重要性3.2 Braf基因突变丰度参考值的确定方法在引言部分，我们将概述Braf基因突变丰度参考值的研究背景和意义。

接着，我们将详细介绍文章的结构，包括各个章节的内容和组织方式。