B16F10小鼠黑色素瘤高转移细胞

·论著·构建稳定表达PDL1的B16F10细胞株宁晓敏李冬琨钱莉【摘要】目的通过转染及流式细胞仪（flow cytometry，FCM）筛选出稳定表达小鼠细胞程式死亡配体1（Programmed cell death ligand1，PDL1）的B16F10细胞株。

方法将携带PDL1的真核表达质粒通过脂质体法转染到B16F10细胞株中，经FCM进行多次分选，筛选出稳定表达PDL1的B16F10细胞株，将其与抗CD3/抗CD28抗体活化的CD4+T细胞共培养48h后，FCM检测CD4+T细胞表面CD69以及CD25的表达。

结果建立了稳定表达PDL1的B16F10细胞株，该细胞株表面的PDL1可诱导CD4+T细胞高表达CD25。

结论成功地得到了稳定表达PDL1的B16F10细胞株，为后续研究奠定了物质基础。

【关键词】PDL1；稳定表达；B16F10细胞株［中图分类号］Q23［文献标识码］A DOI：10．3969/j．issn．1002－1256．2020．05．005Construction of a B16F10cell line that stably express PDL1NING Xiao－min．Medical college of YangzhouUniversity，Yangzhou，Jiangsu，225001，China．【Abstract】Objective To establish and screen a stable B16F10cell line expressing mouse programmedcell death ligand1（PDL1）via transfection and flow cytometry（FCM）．Methods The plasmid containing PDL1cDNA was transfected into B16F10cell lines using jetPEI TM DNA transfection reagent．B16F10cell lines thatstable express PDL1were obtained by multiple sorting by FCM．The anti－CD3/anti－CD28activated CD4+T cellswere co－cultured with B16F10cells for48hours and then the CD69and CD25expression on CD4+T cells weredetected by flow cytometry．Ｒesults Stable transfected B16F10cell line expressing PDL1was established and thePDL1on the surface of B16F10cell lines activated CD4+T cells to express high levels of CD25．Conclusions TheB16F10cell line that stable expression of PDL1was successfully obtained and it provided solid experimentalfoundation for further studies．【Key words】PDL1；Stable expression；B16F10cell lines细胞程序性死亡配体1（Programmed cell death ligand1，PD－L1）属于B7超家族成员，主要表达在B 细胞、巨噬细胞等抗原提呈细胞表面［1］。

Ｐ Ｓ溶 液 ０ ２ｍＬ； 验 组 分 别 给 予 槲 皮 素 ２ 、 Ｏ Ｂ ． 实 ５ ５
１ 在 体 内吸 收 试 验 中 ， 性 Ｆｓｈ ｒ大 鼠禁 食 ） 雄 ｉｃ ｅ １ ２ｈ后 灌 胃和 静 脉 给 以［ Ｃ］ Ａ ０ １ ， “ Ｅ ． ９ｍｇ 给药 后
０ ５ｈ或 １ ． ２ｈ处死 动物 ， 即采血 制备血 浆 ， 立 并剥 离 食 管、 肠、 肠、 、 、 ， 小 大 肺 肝 肾 观察 试 药 的 分 布 。２ ）
产 物 （ ＯＥ） Ｄ Ｃ 的 Ｐ 分别 为 ３ ． 、 ９ ５ ４ ． ； ２ ０ ４ ． 、 ７ ４ 上述 ４
Ｅ＇ ］ Ａ在细胞 中 的积 累 。Ｃ ｃ 一 和 ＨＥ １ 细胞 ￣ Ｅ Ｃ ａｏ ２ Ｔ一Ａ 的 ［ Ｃ］ Ａ， Ｂ Ｐ外 ， 接 下来 的 ３ ｎ冲洗 和 ¨ Ｅ 除 Ｓ 在 ０ｍｉ 摄取介 质 中加入 传输抑 制剂 。 反应停 止后 ， 细胞 经 冲 洗、 消化 后测定 ［ ］ Ａ 的量 。采 用 Ｒ Ｐ Ｒ进 行 Ｃ Ｅ Ｔ— Ｃ 总 ＲＮ 分 析 。结果显示 ， Ｅ 灌 胃给 以大 鼠 Ａ 当Ｅ Ｃ］ Ａ ａ ＇
０ ５ｈ后 ， Ａ 在 食 管 和 小 肠 上 皮 组 织 中 的水 平 最 ． Ｅ
用温 缓 冲液 在 ３ ｎ内冲洗 ２次后添 加 １ ￣ ｌＬ ０ｍｉ ０ ｍｏ／ 瘤 ， 片 ， 切 染色 ， 低倍 光镜 观察 、 定肿 瘤毛 细血 管密 测
高 ，２ｈ时在结 肠上皮 组织 中的量最 高 ， １ 肾脏 中也 有
Ｐｈ ｒ Ｐ ａ ｍ ａ ｏ ． ２ ０ ， ０ ６ ５ （ ） 一 ２ １ ２ ９
管 生成 和肿瘤细 胞生 长的作用 。 在体 外实 验 中 ， 将经 过 培养 的人 红一 白细胞癌 和 宫 颈癌 细胞株 接种 于 ９ ６孔板 （ ×１ 孔 ） １ ０／ 培育 ２ ４ｈ

肿瘤移植(TT)小鼠模型具体方法及步骤原型物种人来源黑色素瘤B16细胞导致的肿瘤肝转移及肺转移模式动物品系SPF级C57BL/6小鼠，健康，雄性，4~6W，体重为18g~20g。

实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。

实验周期4-6 weeks建模方法恶性黑色素瘤(malignant melanoma MM)的发病率较低, 但恶性度高, 转移早而广泛，且对常规放疗有较强抗性，临床治疗颇为棘手，目前尚无有效的治疗方法，其常规治疗主要有免疫治疗、化疗、生物治疗、近距放射疗法和外束放射疗法等。

近年恶性黑素瘤发病率和死亡率明显上升，肿瘤侵袭及转移是其治疗失败的主要原因，很大一部分肿瘤病人在初治时已有微小的或潜在的转移病灶。

为了能彻底治愈癌症，控制肿瘤侵袭和转移是治疗的关键。

黑色素瘤B16细胞株是生长在C57BL/6小鼠耳根部的自发性肿瘤，C57BL/6小鼠的B16移植瘤和转移瘤模型是肿瘤研究的常用模型之一。

小鼠成瘤实验：取对数生长的细胞，胰酶消化后培养基重悬收集细胞，用无菌磷酸盐缓冲液(PBS)调整细胞密度备用。

选用C57BL/6J 小鼠建立B16 细胞肿瘤转移模型，每组10 只。

试验组小鼠尾静脉注射浓度为5×10 6 /L 的B16 细胞悬液0.1ml，每组于接种细胞次日起腹腔注射药物，10 日后改为隔日注射一次。

于第21天，处死动物，取肝脏及肺组织，解剖镜下计数转移的结节数量，数码相机拍照，并对各组小鼠肺转移结节的数目进行统计学分析。

应用肿瘤转移疾病模型模型评价各组小鼠尾静脉注射接种肿瘤细胞后，生长良好，体重无明显变化，组间无明显差异。

第21 天时处死小鼠，取肝脏及肺组织，解剖镜下观察，可发现肝脏及肺组织有明显转移的结节。

解剖镜下计数转移的结节数量，可见给药组小鼠肝脏及肺结节数目明显低于阴性对照组。

取材：1.实验结束后每组取肝组织、肺组织和肿瘤组织，每个组织从瘤体中央分为2份，一份置于甲醛固定；另一份液氮冷冻置于-80度保存，用于分子生物学和WB检测等等。

b16f10细胞的生长要求一、引言：细胞生长是生物体发育、生长、繁殖和代谢的基础。

在科学研究和医学领域，对细胞生长的研究具有重大意义。

本文以b16f10细胞为例，详细介绍其生长要求，为相关领域的研究者提供参考。

二、b16f10细胞的基本特点：b16f10细胞是一种来源于小鼠的恶性黑色素瘤细胞系。

它们具有以下特点：1.恶性程度高，生长速度快；2.具有侵袭性和转移能力；3.对多种化疗药物和放疗敏感；4.表达黑色素瘤相关抗原。

三、b16f10细胞的生长条件：1.合适的培养基：选择专一性培养基，如DMEM、RPMI-1640等；2.适宜的温度：一般为37℃；3.恒定的气氛：95%空气+5% CO2；4.适当的湿度：约90%。

四、影响b16f10细胞生长的因素：1.营养因子：如葡萄糖、氨基酸、脂肪酸等；2.生长因子：表皮生长因子、胰岛素等；3.细胞因子：如IL-2、IL-4等；4.细胞外基质：纤维素、弹性蛋白等。

五、维持b16f10细胞生长的方法：1.定期换液：每2-3天更换一次培养液，以提供新鲜营养；2.观察细胞密度：当细胞密度达到约80%时，进行传代培养；3.细胞贴壁生长：保持适宜的细胞贴壁密度，避免过密生长；4.避免细菌污染：严格无菌操作，定期检测培养液菌落。

六、总结：b16f10细胞在生物医学研究中有广泛应用，了解其生长要求对实验结果具有重要意义。

通过掌握细胞生长条件、影响因素和维持方法，可以有效提高b16f10细胞的生长效率，为相关领域的研究提供有力支持。

本文旨在提供一个全面的b16f10细胞生长要求指南，以供参考。

小鼠黑色素瘤B16F10-Red细胞株的建立与生物学特性分析吴伶俐;孙永强;王建红;何向锋;周玉清;郑丽云;赵文静;陈橼;李国兴【期刊名称】《现代肿瘤医学》【年(卷),期】2016(24)6【摘要】目的:构建表达香菇珊瑚红色荧光蛋白(discosomasp red fluorescent protein,DsRed)的小鼠黑色素瘤B16F10-Red细胞株,并检测其生物学特性.方法:用GenEscortTMⅡ转染试剂将pDsRed质粒导入小鼠黑色素瘤B16F10细胞,G418加压培养联合极限稀释法建立稳定、高水平表达DsRed的单克隆细胞系.FCM检测B16F10和B16F10-Red细胞的细胞周期.比较B16F10-Red和B16F10细胞的克隆球形成能力和小鼠体内致瘤能力.结果:稳定表达DsRed的小鼠黑色素瘤B16F10-Red细胞株基本保持了其亲代细胞的特征,能在C57BL/6小鼠腹部皮下形成肿瘤并继续生长和转移.结论:B16F10-Red细胞株构建成功,其移植瘤模型成瘤率和转移情况同B16F10肿瘤相比无明显差别.【总页数】4页(P861-864)【作者】吴伶俐;孙永强;王建红;何向锋;周玉清;郑丽云;赵文静;陈橼;李国兴【作者单位】东南大学附属中大医院检验科,江苏南京210009;南通大学第二附属医院普外科,江苏南通226001;南通大学附属南通市肿瘤医院内科,江苏南通226361;南通大学附属南通市肿瘤医院内科,江苏南通226361;南通大学附属南通市肿瘤医院内科,江苏南通226361;南通大学附属南通市肿瘤医院内科,江苏南通226361;南通大学附属南通市肿瘤医院内科,江苏南通226361;南通大学附属南通市肿瘤医院内科,江苏南通226361;南通大学附属南通市肿瘤医院内科,江苏南通226361【正文语种】中文【中图分类】R739.5【相关文献】1.重组CCL2小鼠黑色素瘤B-16细胞的建立及生物学活性的鉴定 [J], 胡凯猛;熊俊;冀凯宏;汤淑萍;刘厚奇2.黑色素瘤细胞系HME1的建立及其生物学特性分析 [J], 吴尚辉;黄柏英;顾焕华;彭聪;罗学滨;祝和成3.喉癌顺铂耐药细胞株的建立及干性生物学特性分析 [J], 于锋;龚小蓉;周毅波4.C57BL/6小鼠黑色素瘤B16细胞株在ICR小鼠肿瘤模型的建立 [J], 李桂圆;陈龙邦;臧静;张群5.稳定表达T-钙黏蛋白的黑色素瘤顺铂耐药细胞株的建立及其生物学特性 [J], 陆海涛; 郭健; 何磊; 刘利君; 段昕所因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

实验性黑色素瘤肺转移模型的制备
模型建立方法：
将体外原代培养处于对数生长期的B16-F10黑色素瘤细胞，胰酶消化，用RPMI-1640培养液洗2遍，调至1×106/ml悬浮于RPMI-1640培养液中（台盼兰染色检测活性95％以上）。

经眼球后静脉丛每鼠注射0.1ml含0.1ml 1×105个B16-F10黑色素瘤细胞悬液。

模型特点及功用：
可用于研究黑素瘤肺转移的治疗研究。

模型建立和使用注意事项：
1、本课题组选用两种肿瘤细胞株建立了实验性肺转移及自发肺转移模型，发现：眼球后静脉注入2.5×104以上B16黑色素瘤活细胞/鼠是建立实验性肺转移模型的最适剂量；足掌注射2～5×105个Lewis肺癌（LLC）活细胞/鼠是建立自发转移模型的最佳接种方式和剂量范围。

2、近交系C57BL/6小鼠是比较好的选择。

DOI: 10.3969/j.issn.1673-713X.2021.01.010·综述·GPNMB与肿瘤靶向治疗翟小田，苗庆芳非转移性黑色素瘤糖蛋白B（glycoprotein non-metastatic melanoma protein B，GPNMB）是一种高度糖基化的I 型跨膜糖蛋白，定位于细胞膜或贮存于内涵体及溶酶体中。

膜结合型GPNMB 可被金属蛋白酶如ADAM 10 裂解，释放出可溶性形式。

该蛋白最初被发现于非转移性黑色素细胞而得名，后来还被发现在其他多种正常组织和癌组织中均有表达[1-2]。

因此，GPNMB 又名造血生长因子诱导的神经激肽 1 型（HGFIN）、树突状细胞肝素整合蛋白配体（DC-HIL）以及骨激活素（osteoactivin，OA）[3-7]。

相比于正常组织，GPNMB 在癌组织中的表达量更高。

其正常生理功能包括抗炎、神经保护、参与黑色素体合成等；而在肿瘤组织中，GPNMB 可促进多种癌细胞的生长增殖以及转移侵袭，并且还可以促进癌组织周边血管生成[4, 8-11]。

因此，GPNMB 已成为黑色素瘤、乳腺癌、骨肉瘤等多种癌症治疗的潜在靶点，但目前针对该靶点在研药物品种相对较少。

本文拟对GPNMB 的结构、生理及病理功能和相关药物的研发进展进行综述，为以其为靶点的药物研发提供参考和依据。

1 GPNMB 的结构GPNMB 是一种跨膜糖蛋白，主要由胞外区、跨膜区、胞质尾三部分构成[12-13]（图1）。

GPNMB 的胞外区，主要由整合素识别区（integrin-recognition motif，RGD）、多囊肾病结构域（polycystic kidney disease domain，PKD）、脯氨酸富集重复域（proline-rich repeat domain，PRRD）三种亚结构[14-15]构成。

RGD 区能够与整合素受体结合，介导细胞间的粘连[4, 10, 16]。

b16细胞b16细胞是一种具有重要生物学意义的细胞类型，广泛应用于细胞生物学和癌症研究领域。

b16细胞最早来源于小鼠黑色素瘤，具有一系列特定的细胞特征和功能。

本文将介绍b16细胞的来源、特征、应用以及未来展望。

来源b16细胞最初来源于小鼠黑色素瘤组织，是一种体细胞株。

通过细胞培养和传代培养，b16细胞已经得到了广泛的脱附和扩增，成为研究人员研究癌症生物学和治疗的有用工具。

特征b16细胞具有黑色素瘤细胞的特征，包括高度的增值能力、侵袭性和转移性。

这些特征使得b16细胞成为研究癌症发展、转移机制和治疗策略的理想模型。

另外，b16细胞还具有较高的稳定性和易于维持的特点，使得其在实验室中应用较为广泛。

应用b16细胞在癌症研究领域有着重要的应用价值。

研究人员可以利用b16细胞模拟黑色素瘤的生长和转移过程，探索癌症细胞的生物学特征以及潜在的治疗靶点。

此外，b16细胞还可以用于评估抗癌药物的疗效和毒性，为临床治疗策略的制定提供重要参考。

未来展望随着癌症治疗领域的不断发展，b16细胞作为一个重要的实验模型将继续发挥重要作用。

未来，研究人员可以进一步探索b16细胞在肿瘤免疫治疗、靶向治疗等方面的应用，为癌症治疗带来新的突破。

同时，更深入地研究b16细胞的特性和机制，有助于揭示癌症发展的新机制，为精准医学和个性化治疗提供理论支持。

综上所述，b16细胞作为一种重要的细胞模型，在癌症研究领域发挥着不可替代的作用，将继续为癌症治疗的进步贡献力量。

我们相信，通过对b16细胞的深入研究和应用，将会有更多的科学发现和治疗创新涌现。

感谢您阅读本文，希望对b16细胞及其在癌症研究中的应用有更深入的了解。

P -选择素对黑色素瘤细胞整合素β1表达的影响目的:研究P-选择素对黑色素瘤细胞整合素β1表达的影响,探讨P-选择素在肿瘤转移中的作用。

方法:培养黑色素瘤细胞B16F10,在加或不加p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂SB203580的情况下,用P-选择素蛋白进行刺激,用蛋白质印迹(Western Blot)检测刺激后B16F10细胞整合素β1蛋白表达及p38 MAPK信号分子磷酸化水平的改变,用MTT法检测黏附细胞数目的变化。

结果:P-选择素刺激B16F10细胞导致p38 MAPK磷酸化水平增高,整合素β1表达上调,用特异性阻断剂阻断p38 MAPK活化可以抑制P-选择素的诱导作用。

MTT检测结果显示P-选择素刺激可增加细胞与整合素β1配基纤维粘连蛋白的黏附能力,说明细胞整合素β1表达增高。

结论:P-选择素可以通过激活p38 MAPK途径诱导黑色素瘤B16F10细胞整合素β1的表达,提高肿瘤细胞的黏附能力,这可能是其促进肿瘤转移的机制之一。

[Abstract] Objective: To investigate the effects of P-selectin on the expression of integrin β1 and the phosphorylation of p38 MAPK in melanoma cell line B16F10. Methods: B16F10 cells were treated with P-selectin in the presence or absence of SB203580, an inhibitor of p38 MAPK. The protein expression of integrin β1 and the phosphorylation level of p38 MAPK were determined by Western Blot. Cell adhesion was detected by MTT assay. Results: P-selectin significantly enhanced the expression of integrin β1 in B16F10 cells and the phosphorylation level of p38 MAPK. Inhibit p38 MAPK by SB203580 suppressed P-selectin-induced integrin β1 expression. Treated with P-selectin also enhanced the adhesion of B16F10 cells to fibronectin. Conclusion: P-selectin might effectively up-regulated integrin β1 expression in melanoma cells via p38 MAPK pathway, which may contribute, in part at least, to the tumor metastasis.[Key words] P-selectin; Integrin β1; p38 MAPK; Tumor转移是肿瘤患者死亡的主要原因,寻找和研究与肿瘤转移密切相关的分子是防治肿瘤转移的关键[1]。

ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ． Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ： Ｍｏ ｕ ｓ ｅ Ｂ１ ６ ｍｅ ｌ ａ ｎ ｏ ｍａ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ｄ ／ ７ ， ｖ ｉ ｔ ｒ ｏ ． Ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｉ ｎ ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ ｗｅ ｒ ｅ ｔ ｒ ｅ ａ ｔ ｅ ｄ ｗ ｉ ｔ ｈ ａ ｎ ｄ ｗ ｉ ｔ ｈ ｏ ｕ ｔ ａ ｃ ｅ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ — ｃ ｏ ｎ ｃ ｅ ｎ ｔ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ
ＭＭＰ 一 ９的活性促进肿瘤细胞侵袭 ， 其分子机 制可能与 Ｎ Ｆ — Ｋ Ｂ信号通路 的激 活相 关。 关键词 Ｉ Ｌ 一 ２ ３ ； Ｂ １ ６细胞 ， 黑 色素瘤 ； 基质金属蛋白酶； 侵袭 ； Ｎ Ｆ — Ｋ Ｂ； 小鼠
文献标志码 Ａ 中 图分 类 号 Ｒ ７ ３ ０ ． ２ ３ ＋ Ｒ ７ ３ ９ ． ５
理组肿瘤 细胞核转 录因子 Ｋ Ｂ Ｐ ６ ５ （ Ｎ Ｆ — Ｋ Ｂ Ｐ ６ ５ ） 的表达水平 。结果 ： 与 对照组相比 ， Ｉ Ｌ 一 ２ ３处理组 Ｂ １ ６ Ｆ Ｉ Ｏ细胞穿膜数明显增 多 （ Ｐ ＜ ０ ． ０ １ ） ； 肿 瘤细胞 ＭＭ Ｐ 一 ２和 Ｍ ＭＰ 一 ９的表 达活性增强（ Ｐ ＜ ０ ． ０ １ ） ； 核转 录因子 Ｎ Ｆ — Ｋ Ｂ Ｐ ６ ５的表达 水平显著提 高（ Ｐ ＜ ０ ． ０ １ ） ； Ｂ １ ６ 细胞 的增殖能力未见 明显 变化 （ Ｐ ＞ Ｏ ． ０ ５ ） 。结论 ： Ｉ Ｌ 一 ２ ３对 黑 色素瘤 Ｂ１ ６ Ｆ １ ０细胞 的增殖能 力无影响 ，可通过上调 ＭＭＰ 一 ２和
ｅ ｘ ｐ ｅ ｉｍｅ ｒ ｎ ｔ ． Ｔ ｈ ｅ ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ｉ ｔ ｉ ｅ ｓ ｏ ｆ ＭＭＰ一 ２ ａ ｎ ｄ ＭＭＰ－ ９ ｗｅ ｒ ｅ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｚ ｅ ｄ ｂ ｙ Ｇ ｅ ｌ ａ ｔ ｉ ｎ Ｚ ｙ ｍｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ ａ ｎ ｄ ＮＦ－ Ｋ Ｂ ｐ ｈ ｏ ｓ ｐ ｈ ｏ ｙｌ ｒ ａ ｔ ｅ ｄ Ｐ ６ ５

b16f10细胞的生长要求（原创版）目录1.引言2.B16F10 细胞的概述3.B16F10 细胞的生长要求4.B16F10 细胞在科研和医学领域的应用5.结论正文【引言】近年来，随着科学技术的快速发展，细胞生物学研究在医学领域取得了显著的成果。

其中，B16F10 细胞作为黑色素瘤细胞的代表，已成为研究肿瘤发生、发展及治疗策略的重要工具。

本文将对 B16F10 细胞的生长要求进行探讨，并简要介绍其在科研和医学领域的应用。

【B16F10 细胞的概述】B16F10 细胞系源于一种黑色素瘤，是一种具有高度恶性的肿瘤细胞。

它们具有快速生长、无限制传代和易于培养等优点，使其成为研究肿瘤生物学和开发抗肿瘤药物的理想模型。

【B16F10 细胞的生长要求】B16F10 细胞的生长要求相对较高，需要满足以下几个方面：1.适宜的温度和湿度：B16F10 细胞需要在恒定的温度和湿度下生长，通常温度应在 37℃左右，湿度在 50%-70% 之间。

2.合适的气体环境：细胞需要一定比例的氧气和二氧化碳。

通常情况下，细胞培养需要 5% 的 CO2 气氛。

3.营养充足的培养基：B16F10 细胞需要富含营养物质的培养基，如DMEM（Dulbecco"s Modified Eagle"s Medium）等，还需加入 10% 的胎牛血清以提供足够的营养。

4.定期的传代和换液：B16F10 细胞需要定期传代以保持细胞活力，同时要定期更换培养液以清除代谢废物和细胞分泌物。

5.观察细胞形态和活力：在培养过程中，需要定期观察细胞的形态和活力，以确保细胞生长良好。

【B16F10 细胞在科研和医学领域的应用】B16F10 细胞在科研和医学领域具有广泛的应用，如下所述：1.研究肿瘤发生机制：通过研究 B16F10 细胞的生长、分化和侵袭特性，可以揭示肿瘤发生、发展的分子机制。

2.药物筛选：利用 B16F10 细胞系可以筛选和评估抗肿瘤药物的疗效，为肿瘤治疗提供新思路。

104C1 转化的豚鼠胎体细胞143TK 人胸腺激酶缺陷性细胞系1590 人乳腺癌细胞系16HBE 人支气管上皮细胞208F 大鼠成纤维细胞22RV1 人前列腺癌细胞293 人胚肾细胞293A 人胚肾细胞系293AV 人胚肾细胞-用于腺病毒包装A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞293EE 转化人胚肾293细胞293ET ET转化人胚肾293细胞293FT 人胚肾细胞-用于慢病毒包装A2780细胞[人卵巢癌细胞] 293KB KB转化人胚肾293细胞293T SV40转化的人胚肾上皮细胞293TN 人胚肾细胞--用于慢病毒包装A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞2B4 人前列腺癌细胞2BS 人胚肺成纤维样细胞2V6.11 人胚肾细胞311 果蝇胚胎细胞A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞35.1 杂交瘤细胞抗CD23AO 人卵巢癌细胞A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞3T3 小鼠胚胎瘤成纤维细胞3T3-E1 鼠胚成骨细胞3T3-L1 小鼠脂肪细胞3T3-Swiss albino 小鼠胚胎成纤维细胞3T6-Swiss albino 小鼠胚胎成纤维细胞A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞4179 长尾绿猴胚胎细胞4647 长尾绿猴肾细胞4T1 小鼠乳腺癌细胞A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞5637 人膀胱癌细胞6T-CEM 人T细胞白血病细胞769-P 人肾癌细胞系786-O 人肾透明细胞腺癌细胞A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞7WCY1.0 人APP-PS1双基因转染细胞株(CHO)7WD10 人APP基因转染细胞株(CHO))7WML6.0 人APP-PS1(M146L)双基因转染细胞株(CHO)7WPS1 人APP-PS1双基因转染细胞株(CHO)801-D 人巨细胞性肺癌细胞810-D 人巨细胞性肺癌细胞95-C 人低转移肺癌细胞A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞95-D 人高转移肺癌细胞973 人肺腺癌细胞9L 小鼠胶质瘤细胞A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞9L-B 人前列腺癌细胞9L-E 人前列腺癌细胞A cc-3 人涎腺腺样囊性癌细胞A172 人胶质母细胞瘤细胞A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞A2 人腺样囊性癌细胞A-204 人横纹肌肉瘤A2780 人卵巢癌细胞A3 人T淋巴细胞白血病细胞A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞A-375 人恶性黑色素瘤细胞A375.S2 人黑色素瘤细胞A-431 人表皮癌细胞A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞A498 人肾癌细胞A549 人肺腺癌细胞A549/DDP A549耐药细胞A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞A673 人横纹肌癌细胞A7d 野生型人C-KIT受体细胞株A7r5 大鼠胸大动脉平滑肌细胞A875 人黑色素瘤细胞A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞A9 小鼠皮下结缔组织细胞AAV-293 人胚肾细胞Acc-2 人涎腺腺样囊性癌细胞Acc-3 人涎腺腺样囊性癌细胞A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞ACC-M 人唾液腺性肺癌高转移细胞ACHN 人肾癌细胞系AE-1 杂交瘤细胞抗AChEA2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞AE-2 杂交瘤细胞抗AChEAGS 人胃腺癌细胞A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞AL7P/HL-60R 原髓细胞白血病细胞ALAV 人前列腺癌细胞AM 人腺样囊性癌细胞(高转移)AMS3(SCF3) 人干细胞因子单克隆抗体细胞株A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞AN3 CA 人子宫内膜腺癌细胞AnA-1 小鼠巨噬细胞Anglne 人卵巢癌细胞系APP-PS1 人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293)APRE-19 人视网膜上皮细胞AR42J 大鼠胰腺外分泌细胞A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞AsPC-1 人转移胰腺腺癌细胞AtT-20 小鼠垂体瘤AZ-521 人胃癌细胞B16 小鼠黑色素瘤细胞A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞B16BL6 小鼠黑色素瘤细胞B16-F1 鼠黑色素瘤细胞系B16F1 小鼠黑色素瘤细胞B16F10 小鼠黑色素瘤高转移细胞A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞B16-Fo 鼠黑色素瘤细胞系B6YH4 杂交瘤细胞支原体阳性B82 鼠细胞系A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞B95-8 绒猴EBV转化的白细胞BA/F3 小鼠原B细胞(B类)BALB/3T3 clone A31 小鼠胚胎成纤维细胞BALL-1 人B淋巴细胞急性白血病细胞A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞BB7.2 小鼠杂交瘤B淋巴细胞BC-1 人lymphoma B 淋巴细胞Bcap-37 人乳腺癌细胞A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞BE(2)C 人神经母细胞瘤细胞BEAS-2B 人正常肺上皮细胞。

心房钠尿肽在基因敲除小鼠黑色素瘤肺转移中的作用亓翠玲;曹静桦;何亚军;李倩明;李梦诗;杨扬;王丽京【摘要】目的探讨心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide, ANP)对黑色素瘤肺转移的作用.方法将体外培养的黑色素瘤B16F10细胞株通过尾静脉注射到心房钠尿肽敲除小鼠( ANP-/ -小鼠)和C57BL／6J小鼠的体内,建立黑色素瘤肺转移模型,模型建立后第21天计数转移到肺表面的结节数目,并把肺组织包埋固定、切片、HE 染色后,确定肺转移结节并计数.结果 ANP敲除小鼠肺表面转移的黑色素瘤结节数明显比C57BL／6J小鼠少,差异有显著性;ANP敲除小鼠肺微转移结节数目也明显比C57BL／6J小鼠少,差异有显著性.结论 ANP敲除显著抑制了黑色素瘤的肺转移.%Objective To investigate the role of atrial natriuretic peptide (ANP) in lung metastasis of melanoma. Methods Melanoma B16F10 cells were intravenously injected into ANP knockout mice and C57BL／6J mice. After three weeks, the mice were sacrificed, and the lungs were removed, embedded, and examined by pathology using HE staining. The numbers of metastatic foci on the lung surface and micrometastatic foci in the lung tissues were counted. Results The ANP knockout mice displayed fewer metastatic foci on the lung surface and less micrometastatic foci in the lung tissues of ANP knockout mice than in the C57BL／6J mice. Conclusions ANP deletion significantly suppresses the metastasis of melanoma in the lung of mice.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2018(028)006【总页数】3页(P1-3)【关键词】心房钠尿肽;基因敲除小鼠;黑色素瘤;肺转移瘤【作者】亓翠玲;曹静桦;何亚军;李倩明;李梦诗;杨扬;王丽京【作者单位】广东药科大学,基础学院血管生物学研究所,广州 510006;广东药科大学,基础学院血管生物学研究所,广州 510006;广东药科大学,基础学院血管生物学研究所,广州 510006;广东药科大学,基础学院血管生物学研究所,广州 510006;广东药科大学,基础学院血管生物学研究所,广州 510006;广东药科大学,基础学院血管生物学研究所,广州 510006;广东药科大学,基础学院血管生物学研究所,广州 510006【正文语种】中文【中图分类】R-33钠尿肽(atrial natriuretic peptide, ANP)家族是人们在心和脑中发现的一种与水钠代谢有关的肽类激素家族，包括心房钠尿肽[1]、脑钠肽(BNP)[2]、C-型尿钠肽(CNP)[3]和树眼镜蛇性利尿钠肽(DNP)[4]。