慢性间断性缺氧伴二氧化碳潴留小鼠模型的建立

一、实验目的1. 了解病理缺氧的概念和分类；2. 掌握病理缺氧小鼠模型的制作方法；3. 观察病理缺氧对小鼠生理功能的影响；4. 分析病理缺氧的病理生理机制。

二、实验原理病理缺氧是指由于机体供氧不足或组织细胞利用氧障碍，导致组织器官功能紊乱和代谢障碍的病理过程。

本实验通过制作病理缺氧小鼠模型，观察病理缺氧对小鼠生理功能的影响，分析病理缺氧的病理生理机制。

三、实验材料与仪器1. 实验动物：昆明小鼠，体重20-25g；2. 仪器：电子天平、解剖显微镜、生理信号采集系统、血气分析仪、离心机等；3. 试剂：生理盐水、亚硝酸钠、氰化钾、氰化钠等。

四、实验方法1. 实验分组：将实验动物随机分为正常对照组和病理缺氧组，每组10只。

2. 病理缺氧模型制作：（1）亚硝酸钠中毒性缺氧：向病理缺氧组小鼠腹腔注射5%亚硝酸钠溶液0.2ml，正常对照组小鼠腹腔注射等体积生理盐水作为对照。

（2）氰化钾中毒性缺氧：向病理缺氧组小鼠腹腔注射0.1%氰化钾溶液0.2ml，正常对照组小鼠腹腔注射等体积生理盐水作为对照。

3. 观察指标：（1）一般状况：观察小鼠活动、呼吸、皮毛、体位等变化；（2）血气分析：检测小鼠动脉血氧分压（PaO2）、二氧化碳分压（PaCO2）、pH 值等指标；（3）生理信号采集：记录小鼠心电、呼吸等生理信号；（4）组织病理学观察：取小鼠心脏、肝脏、肾脏等组织，进行HE染色，观察组织病理学变化。

五、实验结果1. 一般状况：病理缺氧组小鼠出现精神萎靡、活动减少、呼吸加快、皮毛粗糙、体位异常等症状，与对照组相比，差异显著（P<0.05）。

2. 血气分析：病理缺氧组小鼠PaO2、pH值显著降低，PaCO2显著升高，与对照组相比，差异显著（P<0.05）。

3. 生理信号采集：病理缺氧组小鼠心电、呼吸等生理信号异常，与对照组相比，差异显著（P<0.05）。

4. 组织病理学观察：病理缺氧组小鼠心脏、肝脏、肾脏等组织出现细胞水肿、坏死、出血等病理改变，与对照组相比，差异显著（P<0.05）。

慢性阻塞性肺病动物模型具体方法及步骤原型物种人来源吸烟+LPS致慢性阻塞性肺病模式动物品系SPF级ICR小鼠，雄性，周龄为8w-10w，体重为30g-35g。

实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。

实验周期4-6 weeks建模方法主要试剂：红金龙香烟（湖北中烟工业有限责任公司生产，烤烟型，每支含焦油量9mg、烟气烟碱量0.7mg、烟气一氧化碳量12mg），脂多糖（lipopolysaccharide，LPS，美国Sigma公司），TNF-alpha和IL-18 ELISA试剂盒cloud-clone公司）。

建模方式：SPF小鼠，适应性饲养1周，采用鼻腔滴入LPS加熏香烟的方法建立COPD小鼠动物模型分别于第1、29经鼻腔滴入LPS（30μg/6μL），第2-30天（除第29天）采取熏香烟法，将小鼠放入自制的玻璃熏箱，10支/次，30min/次，5d/周，共4周。

应用n/a一般观察：一般情况空白对照组小鼠无死亡，毛发光泽，呼吸均匀，活动正常；模型对照组小鼠毛发无光泽，部分有脱毛现象，躁动，熏烟时喜扎堆，倦怠蜷缩，汗出，腹部胀大，呼吸急促，出现点头运动，甚者张口呼吸明显。

肺组织形态学检测：腹腔麻醉小鼠后，开胸暴露胸腔：取左侧肺叶固定于10%甲醛溶液24h，常规脱水石蜡包埋，切片行HE染色，光镜下观察。

空白对照组小鼠肺泡结构清晰，肺泡大小均匀，气道黏膜上皮结构完整，纤毛排列整齐；模型对照组小鼠部分肺泡壁塌陷，肺泡不规则扩大并相互融合，形成肺大泡，肺间质内可见不同程度的炎性细胞浸润，支气管黏膜上皮脱落，黏膜皱襞增多，突入管腔，纤毛黏缩，管腔变窄，符合COPD病理改变。

TNF alpha、Il-18检测：最后一次烟熏完后24小时内处死，1%戊巴比妥钠（按0.05mL/10g）腹腔麻醉小鼠，将小鼠腹主动脉取血法取血1mL，室温下放置2h后，2 000r/min离心20min，取血清，-20℃保存备用。

一、实验背景缺氧是生物体在氧气供应不足的情况下产生的一系列生理和生化反应。

为了研究缺氧对小鼠生理功能的影响，本实验采用低氧环境模拟技术，对小鼠进行缺氧处理，观察其生理指标的变化，探讨缺氧对小鼠的影响。

二、实验目的1. 观察缺氧对小鼠生理指标的影响；2. 分析缺氧对小鼠免疫系统、神经系统及代谢系统的影响；3. 探讨缺氧对小鼠生长发育的影响。

三、实验方法1. 实验动物：选取健康雄性C57BL/6小鼠40只，体重（20±2）g，随机分为4组，每组10只，分别为正常对照组、缺氧模型组、低氧预处理组和高氧预处理组。

2. 缺氧模型制备：将缺氧模型组小鼠置于低氧舱中，氧浓度为10%，持续处理4小时；低氧预处理组小鼠在缺氧前1小时给予低氧预处理，氧浓度为10%，持续处理1小时；高氧预处理组小鼠在缺氧前1小时给予高氧预处理，氧浓度为30%，持续处理1小时；正常对照组小鼠置于正常氧气环境中。

3. 生理指标检测：实验结束后，检测各组小鼠的心率、呼吸频率、体温、血糖、血清生化指标等生理指标。

4. 免疫系统检测：检测各组小鼠的淋巴细胞转化率、血清溶菌酶活性等免疫指标。

5. 神经系统检测：检测各组小鼠的学习记忆能力、神经递质水平等神经指标。

6. 代谢系统检测：检测各组小鼠的肝糖原、血清甘油三酯等代谢指标。

四、实验结果1. 生理指标：缺氧模型组小鼠的心率、呼吸频率、体温均显著低于正常对照组（P<0.05）；低氧预处理组和高氧预处理组小鼠的心率、呼吸频率、体温与正常对照组相比无显著差异（P>0.05）。

2. 免疫系统：缺氧模型组小鼠的淋巴细胞转化率、血清溶菌酶活性均显著低于正常对照组（P<0.05）；低氧预处理组和高氧预处理组小鼠的淋巴细胞转化率、血清溶菌酶活性与正常对照组相比无显著差异（P>0.05）。

3. 神经系统：缺氧模型组小鼠的学习记忆能力、神经递质水平均显著低于正常对照组（P<0.05）；低氧预处理组和高氧预处理组小鼠的学习记忆能力、神经递质水平与正常对照组相比无显著差异（P>0.05）。

慢性阻塞性肺病动物模型具体方法及步骤原型物种人来源吸烟+LPS致慢性阻塞性肺病模式动物品系SPF级ICR小鼠，雄性，周龄为8w-10w，体重为30g-35g。

实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。

实验周期4-6 weeks建模方法主要试剂：红金龙香烟（湖北中烟工业有限责任公司生产，烤烟型，每支含焦油量9mg、烟气烟碱量0.7mg、烟气一氧化碳量12mg），脂多糖（lipopolysaccharide，LPS，美国Sigma公司），TNF-alpha和IL-18 ELISA试剂盒cloud-clone公司）。

建模方式：SPF小鼠，适应性饲养1周，采用鼻腔滴入LPS加熏香烟的方法建立COPD小鼠动物模型分别于第1、29经鼻腔滴入LPS（30μg/6μL），第2-30天（除第29天）采取熏香烟法，将小鼠放入自制的玻璃熏箱，10支/次，30min/次，5d/周，共4周。

应用n/a一般观察：一般情况空白对照组小鼠无死亡，毛发光泽，呼吸均匀，活动正常；模型对照组小鼠毛发无光泽，部分有脱毛现象，躁动，熏烟时喜扎堆，倦怠蜷缩，汗出，腹部胀大，呼吸急促，出现点头运动，甚者张口呼吸明显。

肺组织形态学检测：腹腔麻醉小鼠后，开胸暴露胸腔：取左侧肺叶固定于10%甲醛溶液24h，常规脱水石蜡包埋，切片行HE染色，光镜下观察。

空白对照组小鼠肺泡结构清晰，肺泡大小均匀，气道黏膜上皮结构完整，纤毛排列整齐；模型对照组小鼠部分肺泡壁塌陷，肺泡不规则扩大并相互融合，形成肺大泡，肺间质内可见不同程度的炎性细胞浸润，支气管黏膜上皮脱落，黏膜皱襞增多，突入管腔，纤毛黏缩，管腔变窄，符合COPD病理改变。

TNF alpha、Il-18检测：最后一次烟熏完后24小时内处死，1%戊巴比妥钠（按0.05mL/10g）腹腔麻醉小鼠，将小鼠腹主动脉取血法取血1mL，室温下放置2h后，2 000r/min离心20min，取血清，-20℃保存备用。

COPD造模方法1. 引言慢性阻塞性肺疾病（Chronic Obstructive Pulmonary Disease，COPD）是一种常见且严重的呼吸系统疾病，主要特征是气流受限和进行性呼吸困难。

COPD对患者的生活质量和健康状态造成了巨大的影响，因此准确预测和评估COPD的发展趋势对于制定个体化治疗方案至关重要。

为了更好地理解COPD的发展机制并提供有效的治疗策略，科学家们使用了多种造模方法来模拟COPD的发展过程。

本文将介绍几种常用的COPD造模方法，并分析其优缺点。

2. COPD造模方法2.1 动物模型动物模型是最早被使用来研究COPD的方法之一。

通过将实验动物（如小鼠、大鼠、猪等）暴露在有害气体（如烟草烟雾、二氧化硫等）中，可以模拟出类似于人类COPD的肺损伤和气流受限情况。

优点： - 可以控制实验条件，提高实验的可重复性和可比性。

- 可以在动物模型中进行各种生物学、遗传学和药理学研究，为COPD的机制研究提供了有力的工具。

缺点： - 动物模型无法完全反映人类COPD的复杂性，因为人类COPD受到多种因素（如遗传、环境、生活方式等）的影响。

- 伦理问题：使用动物模型进行实验会引发伦理争议。

2.2 细胞模型细胞模型是通过培养人类肺相关细胞（如气道上皮细胞、巨噬细胞等）来研究COPD的方法。

这些细胞可以被暴露在有害气体、炎症因子或其他刺激物中，从而模拟COPD发展过程中的炎症反应和肺损伤。

优点： - 可以更直接地观察和分析细胞水平上的变化，揭示COPD的发展机制。

- 可以通过基因编辑技术等手段对特定基因或信号通路进行干预和研究。

缺点： - 细胞模型无法模拟整个生物系统的复杂性，不能完全反映人体内其他器官对COPD的影响。

- 需要大量的细胞培养和实验操作，工作量较大。

2.3 数学模型数学模型是一种通过建立数学方程来描述COPD发展过程的方法。

这些方程可以基于已有的实验数据和理论知识，预测COPD的发展趋势和患者的病情变化。

一、实验目的1. 复制小鼠缺氧模型，了解缺氧对机体的影响。

2. 观察缺氧对呼吸系统、中枢神经系统及血液的影响。

3. 分析影响缺氧耐受性的因素。

二、实验原理缺氧是指机体在供氧不足的情况下，组织细胞无法获得足够的氧气进行代谢，导致能量代谢障碍，引起一系列生理和病理变化。

本实验通过模拟不同类型的缺氧，观察缺氧对小鼠的影响，以期为临床治疗缺氧相关疾病提供理论依据。

三、实验材料1. 实验动物：健康小白鼠10只，体重20-25克。

2. 实验仪器：缺氧箱、呼吸机、显微镜、离心机、电子天平等。

3. 实验试剂：生理盐水、亚硝酸钠、氰化钾、钠石灰等。

四、实验方法1. 缺氧模型制备（1）低张性缺氧：将小白鼠放入缺氧箱中，箱内氧气浓度控制在5%以下，持续30分钟。

（2）一氧化碳中毒性缺氧：将小白鼠放入一氧化碳发生装置中，持续吸入一氧化碳30分钟。

（3）氰化钾中毒性缺氧：将小白鼠腹腔注射氰化钾50mg/kg，观察动物中毒症状。

2. 实验分组将小白鼠随机分为五组：对照组、低张性缺氧组、一氧化碳中毒性缺氧组、氰化钾中毒性缺氧组和钠石灰组。

3. 指标检测（1）呼吸频率：观察并记录实验前后小鼠的呼吸频率。

（2）中枢神经系统功能：观察并记录小鼠的行为变化，如兴奋、抑制、抽搐等。

（3）血液指标：检测小鼠血红蛋白、血氧饱和度等指标。

（4）组织学观察：取小鼠脑组织、肺组织等，进行光镜和电镜观察。

五、实验结果1. 低张性缺氧组（1）呼吸频率明显下降，表现为呼吸困难。

（2）中枢神经系统功能受到影响，出现兴奋、抑制等症状。

（3）血红蛋白和血氧饱和度明显降低。

（4）组织学观察：脑组织出现水肿、神经元变性等。

2. 一氧化碳中毒性缺氧组（1）呼吸频率明显下降，出现紫绀。

（2）中枢神经系统功能受到影响，出现昏迷、抽搐等症状。

（3）血红蛋白和血氧饱和度明显降低。

（4）组织学观察：肺组织出现水肿、肺泡出血等。

3. 氰化钾中毒性缺氧组（1）呼吸频率明显下降，出现紫绀。

一、实验目的1. 了解缺氧对小鼠生理功能的影响。

2. 掌握缺氧实验的操作方法。

3. 分析缺氧对小鼠生理指标的影响。

二、实验原理缺氧是指机体在一定时间内，由于供氧不足而导致的生理功能障碍。

本实验通过建立小鼠缺氧模型，观察缺氧对小鼠生理指标的影响，从而了解缺氧对小鼠生理功能的影响。

三、实验材料1. 实验动物：昆明种小鼠，体重18-22g，雌雄不限。

2. 仪器设备：缺氧箱、电子秤、离心机、显微镜、酶标仪等。

3. 试剂：生理盐水、血红蛋白测定试剂盒、血糖测定试剂盒、乳酸测定试剂盒等。

四、实验步骤1. 实验动物分组将昆明种小鼠随机分为三组，每组10只，分别为正常对照组、缺氧模型组和缺氧干预组。

2. 缺氧模型建立（1）将缺氧箱内氧气浓度调至10%。

（2）将缺氧模型组小鼠放入缺氧箱内，保持箱内氧气浓度为10%，持续2小时。

（3）缺氧干预组小鼠在缺氧箱内放入时，给予氧气吸入，保持氧气浓度为21%，持续2小时。

3. 实验指标检测（1）血红蛋白测定：采用比色法，测定各组小鼠血红蛋白含量。

（2）血糖测定：采用葡萄糖氧化酶法，测定各组小鼠血糖水平。

（3）乳酸测定：采用乳酸脱氢酶法，测定各组小鼠乳酸水平。

（4）组织切片：取小鼠肝脏组织，进行HE染色，观察组织形态学变化。

4. 数据分析采用SPSS软件对实验数据进行统计分析，比较各组小鼠血红蛋白、血糖、乳酸水平及肝脏组织形态学差异。

五、实验结果1. 血红蛋白水平：缺氧模型组小鼠血红蛋白水平显著低于正常对照组和缺氧干预组（P<0.05）。

2. 血糖水平：缺氧模型组小鼠血糖水平显著高于正常对照组和缺氧干预组（P<0.05）。

3. 乳酸水平：缺氧模型组小鼠乳酸水平显著高于正常对照组和缺氧干预组（P<0.05）。

4. 肝脏组织形态学：缺氧模型组小鼠肝脏组织出现明显水肿、脂肪变性，缺氧干预组小鼠肝脏组织形态学改善。

六、实验结论1. 缺氧可导致小鼠血红蛋白、血糖、乳酸水平升高，提示缺氧对小鼠生理功能有显著影响。

一、实验名称肿瘤缺氧实验二、实验目的1. 探究肿瘤细胞在缺氧环境下的生长和代谢特点。

2. 分析缺氧对肿瘤细胞增殖、凋亡和血管生成的影响。

3. 评估缺氧诱导因子（HIF）在肿瘤细胞缺氧适应过程中的作用。

三、实验材料1. 实验动物：肿瘤小鼠模型2. 细胞：肿瘤细胞系3. 试剂：缺氧模拟剂、细胞培养试剂、凋亡检测试剂盒、血管生成检测试剂盒、PCR引物、RT-qPCR试剂盒等4. 仪器：细胞培养箱、显微镜、PCR仪、RT-qPCR仪、凝胶成像系统等四、实验方法1. 肿瘤小鼠模型的建立：采用手术或基因工程方法构建肿瘤小鼠模型。

2. 缺氧模拟：将肿瘤细胞置于缺氧模拟环境中培养，模拟肿瘤组织中的缺氧状态。

3. 细胞增殖实验：通过MTT法检测肿瘤细胞在缺氧环境下的增殖能力。

4. 细胞凋亡实验：采用Annexin V-FITC/PI双染法检测肿瘤细胞在缺氧环境下的凋亡情况。

5. 血管生成实验：采用CD31免疫组化法检测肿瘤组织中的血管生成情况。

6. HIF表达检测：通过Western blot和RT-qPCR检测缺氧环境下肿瘤细胞中HIF的表达水平。

五、实验结果1. 缺氧环境下肿瘤细胞增殖能力下降，与正常细胞相比，增殖速度减慢。

2. 缺氧环境下肿瘤细胞凋亡率增加，与正常细胞相比，凋亡细胞数量增多。

3. 缺氧环境下肿瘤组织中血管生成减少，与正常组织相比，血管密度降低。

4. 缺氧环境下肿瘤细胞中HIF表达水平升高，与正常细胞相比，HIF蛋白和mRNA 水平增加。

六、实验讨论1. 缺氧环境下肿瘤细胞生长受到抑制，可能与细胞增殖能力下降、凋亡率增加有关。

2. 缺氧环境下肿瘤组织中血管生成减少，可能是由于缺氧诱导因子HIF的激活，导致血管生成相关基因表达下调。

3. HIF在肿瘤细胞缺氧适应过程中发挥重要作用，可能通过调节细胞增殖、凋亡和血管生成等途径影响肿瘤的生长和侵袭。

七、结论1. 缺氧环境下肿瘤细胞生长受到抑制，凋亡率增加，血管生成减少。

机能实验学实验报告实验项目名称：不同类型缺氧模型小鼠制备1.实验目的①了解缺氧的分类，了解和复制不同类型缺氧模型（本次实验的缺氧模型包括低张性缺氧模型及血液性缺氧模型）；②了解不同类型缺氧的表现特征，观察缺氧时呼吸节律和皮肤粘膜颜色的变化规律。

③熟练掌握小鼠的抓取、灌胃、腹腔注射、注射器使用及颈椎脱臼处死技术；2.材料与方法（1）实验动物成年昆明种小鼠，10只，体重18～22g，雌雄不拘，由南方医科大学实验动物中心提供。

（2）实验器材与试剂器材：密封广口瓶，一氧化碳发生装置，酒精灯，注射器及针头，灌胃器，塑料盆，量杯等药品：钠石灰，甲酸，浓硫酸，5%亚硝酸钠，1%亚甲蓝，生理盐水（3）实验方法与步骤A.小鼠乏氧性缺氧模型的制备1）实验步骤①观察记录小白鼠正常呼吸频率、深度和皮肤、粘膜颜色等指标；②抓取小白鼠并放入装有钠石灰广口瓶中，观察，记录；③塞紧瓶塞，计时，拍摄，每3min重复观察上述指标1次，如有其它变化，随时记录，直至动物死亡，记录其存活时间。

2）注意事项①主要通过爪部、尾部观察皮肤颜色，通过口唇部观察粘膜颜色。

②诱导小鼠进入广口瓶时，将广口瓶平放，向后拉拽小鼠尾部，使小鼠本能前进进去广口瓶，当小鼠全头进入时将广口瓶直立；B.小鼠血液性缺氧模型的制备——一氧化碳中毒性缺氧1）实验步骤①准备一氧化碳发生装置；②将1只小白鼠放入广口瓶中，观察其正常表现后与一氧化碳发生装置连接；③用量杯取甲酸3ml放于试管内，沿试管壁缓慢加入浓硫酸2ml，塞紧瓶塞；④计时，拍摄并记录各项指标直至死亡。

2）注意事项①加液先加入甲酸，后加入浓硫酸，防止酸入水飞溅，造成危险；②大试管橡皮塞应迅速盖紧，并注意室内通风，防止一氧化碳中毒。

③若试管内无明显气泡冒出，可以使用酒精灯加快反应速度；同时应注意CO气体不宜产生过快，小鼠缺氧死亡过速不便观察个体状态和皮肤、黏膜颜色。

24C.小鼠血液性缺氧模型的制备——亚硝酸钠中毒性缺氧1）实验步骤①选取体重相近的小白鼠2只，观察正常指标；②腹腔注射5％亚硝酸钠0.3 ml/只；③立即取其中1只，腹腔内注入l％亚甲蓝溶液0.3 ml；另1只立即注入生理盐水0.3 ml为对照；④计时，拍摄并记录各项指标，比较2只小白鼠的表现及死亡时间。

病理生理学实习指导一、缺氧模型的实验性复制㈠目的与原理通过给动物低氧环境，影响 Hb 的带氧能力及使组织不能利用氧等方法，复制不同类型 缺氧模型，经呼吸、机能状态、皮肤粘膜颜色等指标，显示了其不同症状与特征， 制模型的方法及原理又有大概的了解， 有利于深入和研究各缺氧症的发生、律。

低张性缺氧 一氧化碳中毒 氰化钾中毒1低氧性缺氧⑴将小白鼠至于250ml 广口瓶（内装钠石灰吸收二氧化碳）中观察上述指标。

⑵:将瓶塞紧，同时记录时间，每 5min 重复观察上述指标一次（如有变化则随时记录）直到动物死亡为止。

2•—氧化碳中毒性缺氧⑴如图8-3-1装好一氧化碳发生装置。

⑵）将小白鼠一只放入瓶中，观察上述指标。

⑶取甲酸3ml 放入试管内，加入浓硫酸2ml ,塞紧。

如气泡产生较少，可用酒精灯加热， 加速一氧化碳的产生（但不可过热以至液体连续沸腾， 因一氧化碳产生过快，动物迅速死亡， 血液颜色改变不明显）。

⑷在整个过程中，注意观察上述指标。

（注）：一氧化碳产生原理：H 2SO 4HCOOHCOT +H 2O△3•氰化钾中毒性缺氧⑴称小白鼠体重，观察上述指标，预先准备1%亚硝酸钠及10%硫代硫酸钠各10ml Kg -1, 以备急救用。

同时对复 发展和转归的规㈡实验对象 小白鼠。

㈢器材与药品缺氧瓶（装有管道瓶塞的和2ml 刻度吸管，粗天平（附砝码）钠石灰（氢氧化钠、氧化钙） 10%硫代硫酸钠溶液。

㈣步骤与观察250ml 广口瓶），酒精灯，一氧化碳发生器, ，剪刀，普通镊。

，甲酸，浓硫酸，0.125%氰化钾溶液, 1ml 注射器，5ml 1%亚硝酸钠溶液,表 8-3-1 观察指标呼吸（频率、幅度）机能状态 （活动度）皮肤粘膜颜色图8-3-1 一氧化碳发生装置⑵腹腔注射0.125%氰化钾9ml Kg-1，立即观察上述指标。

⑶待小白鼠出现共济失调或竖尾时，将准备好的急救药注入腹腔。

⑷重复步骤⑵，不予抢救。

⑸⑸将三种缺氧实验动物尸体打开腹腔，比较血液或肝脏颜色。

copd造模方法摘要：一、引言二、CPOD造模方法概述1.动物选择2.烟雾暴露方法3.环境因素控制4.模型评估三、CPOD造模的具体操作步骤1.动物适应期2.烟雾暴露设备与流程3.环境参数设置4.烟雾暴露时间与频率5.模型观察与评估四、CPOD造模的优缺点1.优点2.缺点五、我国CPOD研究现状与展望1.研究现状2.存在问题3.发展展望六、结论正文：一、引言慢性阻塞性肺病（Chronic Obstructive Pulmonary Disease，简称CPOD）是一种常见的呼吸系统疾病，严重影响患者的生活质量和预期寿命。

为了更深入地研究CPOD的发病机制、病理生理特征和治疗策略，动物模型在其中发挥着重要作用。

本文将介绍CPOD造模方法，以期为相关研究提供参考。

二、CPOD造模方法概述1.动物选择CPOD造模动物主要有大鼠、小鼠、豚鼠等。

选择适合的动物模型需考虑实验目的、实验资源及实验成本等因素。

2.烟雾暴露方法将动物置于特定的烟雾暴露设备中，通过燃烧烟草、煤油等物质产生烟雾，使动物暴露在含有有害物质的烟雾中。

3.环境因素控制在暴露过程中，需严格控制温度、湿度、通风等环境因素，以保证实验的可靠性和可重复性。

4.模型评估通过观察动物的呼吸功能、病理变化、炎症因子水平等指标，评估CPOD 模型是否成功。

三、CPOD造模的具体操作步骤1.动物适应期在正式进行烟雾暴露前，让动物适应实验环境，减少实验偏差。

2.烟雾暴露设备与流程选用合适的烟雾暴露设备，按照预先设定的时间、频率和剂量进行烟雾暴露。

3.环境参数设置根据实验要求，设置适当的环境温度、湿度和通风条件。

4.烟雾暴露时间与频率根据实验设计，合理安排烟雾暴露时间，一般为每周暴露多次，持续数周至数月。

5.模型观察与评估观察动物的行为、呼吸状况等，通过肺功能检查、病理切片、分子生物学检测等方法评估模型效果。

四、CPOD造模的优缺点1.优点（1）较好地模拟了人类CPOD的发病过程。

\篇二：缺氧缺氧动物模型复制及中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响【摘要】目的：本实验学习复制乏氧性缺氧和血液性缺氧的动物模型方法，观察缺氧过程中呼吸的反应及血液色泽和全身一般情况的变化，并了解温度和中枢神经系统机能状态对缺氧耐受的影响以及对照实验和控制实验条件重要性。

方法：通过复制缺氧动物模型，观察不同类型缺氧过程中呼吸、黏膜和血液色泽的变化。

通过测定耗氧量和小鼠的存活时间来观察中枢神经系统机能抑制和低温对缺氧的影响。

结果：中枢神经系统功能抑制和低温对动物耐受缺氧的影响与对照组相比，存活时间和总耗氧率有显著性差异；复制不同原因造成的不同缺氧类型小鼠都表现出了不同的呼吸频率和存活时间的变化。

结论：给小鼠注射氯丙嗪、冰浴降温可显著降低总耗氧率，延长其存活时间（p&lt;0.01）。

co中毒、亚硝酸盐可显著缩短小鼠存活时间，降低呼吸频率。

美兰可以缓解亚硝酸盐对小鼠的作用，已定程度延长小鼠存活时间，延缓呼吸频率的下降。

【关键词】缺氧氯丙嗪总耗氧率 co 亚硝酸盐美兰存活时间当供应组织的氧不足，或组织利用氧障碍时，机体的机能和代谢可发生异常变化，这种病理过程称为缺氧。

根据缺氧的原因不同可将缺氧分为低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织中毒性缺氧四种类型，不同类型的缺氧，机体的代偿适应性反应和症状表现有所不同。

1.材料和方法1.1实验动物：小白鼠（雌性）。

1.2 药品：氯丙嗪(chlorpromazine) 、钠石灰（soda lime)，亚硝酸钠（ sodium nitrite ) 、亚甲基蓝(美蓝）（methylene blue，mb）、 0.9％nacl (physiological saline solution) 、co(carbon monoxide)。

1.3 器材：100、500ml广口瓶和测耗氧装置。

1.4 方法1.4.1 中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响取2只性别相同体重相近的小鼠，准确称取体重，并随机分为生理盐水组和氯丙嗪组。

慢性阻塞性肺病（COPD）小鼠模型的建模方法建立COPD小鼠模型的方法有多种，下面将介绍几种常用的方法。

1.烟雾暴露法：这种方法是目前使用最广泛的建立COPD小鼠模型的方法之一、实验室通常使用香烟烟雾暴露小鼠。

首先，将小鼠放置在封闭的暴露室内，通过吸入烟雾的方式进行长时间的暴露。

这个过程可以持续数周至数月。

通过吸入烟雾，小鼠会暴露在各种有害的化学物质和有害气体中，从而导致肺部炎症和肺组织损伤。

这种方法模拟了吸烟引起COPD的机制。

2.蚊香暴露法：与烟雾暴露法类似，蚊香暴露法也可以用来建立COPD小鼠模型。

这种方法通过将小鼠放置在有烧蚊香的空间中，让小鼠长时间暴露在蚊香燃烧产生的有害气体和颗粒物中。

这种方法相对较简单，容易实施。

3. Elastase注射法：Elastase注射法是另一种常用的建立COPD小鼠模型的方法。

在这个方法中，通过将弹性蛋白酶注射到小鼠的气道中，从而使气道发生肺组织损伤和炎症反应。

这种方法可以使小鼠快速地出现类似COPD的病理改变，并且相对较容易控制。

4.气管插管加吸烟暴露法：这种方法结合了吸烟暴露和气管插管两种方法，以更好地模拟COPD的慢性疾病过程。

首先，小鼠的气管会被插入插管，以模拟气管不适或损伤的情况。

然后，小鼠被暴露在烟雾中，以模拟吸烟引起的COPD。

这种方法可以更有效地模拟COPD的病理过程。

在建立COPD小鼠模型后，科学家们可以通过一系列方法对其进行评估和鉴定，例如通过肺功能测试、组织病理学评估、炎症标志物的检测等，进一步验证模型的有效性和研究COPD的发病机制。

总之，建立COPD小鼠模型的方法有多种，每种方法都有其优缺点。

科学家们应根据研究目的和实验条件选择最合适的方法。

建立有效的COPD小鼠模型对于研究COPD的发病机制和开发新的治疗方法具有重要意义。

小鼠-缺氧试验指导(2021)试验三试验性缺氧【试验目的】1.把握各型（低张性和血液性）缺氧动物模型复制的方法，了解缺氧的分类。

2.观看不同类型缺氧时机体的变化（活动状况、呼吸、粘膜及肝脏的颜色）及存活时间；3.观看不同年龄和中枢兴奋状态对机体缺氧耐受性的影响，理解条件因素在缺氧发病中的重要性。

4.把握各型缺氧的发生气制及特点。

5.了解常见血液性缺氧的解救措施。

【试验原理】导致低张性缺氧最常见的缘由包括吸入气氧分压过低和外呼吸功能障碍。

本试验将小鼠放置于加入钠石灰的密闭广口瓶内，随着小鼠的呼吸消耗，广口瓶中氧气含量渐渐降低，模拟外环境氧分压过低引起的低张性缺氧。

观看低张性缺氧时机体的变化（活动状况、呼吸、粘膜及肝脏的颜色）及存活时间。

影响机体对缺氧耐受性的因素许多，除缺氧时间、速度、类型和程度外，还与缺氧时中枢功能状态和年龄等因素有关。

本试验通过应用药物转变小鼠的中枢兴奋状态及选择不同年龄的小鼠，观看不同条件下低张性缺氧小鼠的活动状况和存活时间。

血液性缺氧是由于血红蛋白的数量削减或性质转变从而降低血液携氧力量或血红蛋白结合的氧不易释出所引起的缺氧。

本试验将复制两种常见血液性缺氧模型：一氧化碳中毒和亚硝酸盐中毒引起的血液性缺氧。

一氧化碳可与血红蛋白结合，形成碳氧血红蛋白而失去结合氧的力量，从而导致血液携氧力量降低而引起机体缺氧。

亚硝酸钠是强氧化剂，可使血红蛋白分子内二价Fe2+氧化成为三价Fe3+而形成高铁血红蛋白，高铁血红蛋白同样失去携氧力量而引起血液性缺氧。

【试验对象】成年小鼠（性别、年龄、体重近似、雌雄不拘）、新生小鼠【试验药品和器材】3.75%尼可刹米、0.25%氯丙嗪、生理盐水、钠石灰、5%亚硝酸钠、1%亚甲兰、浓硫酸、草酸。

缺氧瓶带气压平衡装置、耗氧量测定装置（图1）、1 ml注射器、5 ml注射器、电子天平、纱布、滤纸、眼科剪、眼科镊、小烧杯、酒精灯、火柴、CO发生装置（图2）、气囊袋。

一、实验背景缺氧是指机体组织在氧气供应不足的情况下，导致细胞代谢和功能受到影响的一种病理状态。

为了研究缺氧对小鼠生理和生化过程的影响，本实验通过人为制造缺氧环境，观察小鼠在不同缺氧条件下的生理反应和生化指标变化，从而分析缺氧的机制。

二、实验目的1. 复制不同类型的缺氧模型，如乏氧性缺氧、血液性缺氧和组织中毒性缺氧。

2. 观察缺氧对小鼠呼吸系统、中枢神经系统的影响。

3. 分析缺氧对小鼠血液颜色、耗氧量等生化指标的影响。

4. 探讨影响缺氧耐受性的因素。

三、实验方法1. 缺氧模型的复制：- 乏氧性缺氧：将小鼠放入密闭容器中，逐渐降低容器内的氧气浓度。

- 血液性缺氧：通过腹腔注射亚硝酸钠或氰化钾等物质，降低血液中氧合血红蛋白的含量。

- 组织中毒性缺氧：通过注射一氧化碳等物质，阻断组织细胞对氧气的利用。

2. 观察指标：- 呼吸频率和深度- 中枢神经系统功能（如翻正反射、肌肉紧张度等）- 血液颜色变化- 耗氧量3. 数据分析：- 通过记录小鼠在不同缺氧条件下的生理和生化指标变化，分析缺氧的机制。

四、实验结果1. 呼吸系统：- 乏氧性缺氧和血液性缺氧条件下，小鼠呼吸频率和深度明显增加，以增加氧气摄入和二氧化碳排出。

- 组织中毒性缺氧条件下，小鼠呼吸频率和深度无明显变化。

2. 中枢神经系统：- 乏氧性缺氧和血液性缺氧条件下，小鼠出现翻正反射减弱、肌肉紧张度降低等中枢神经系统功能障碍。

- 组织中毒性缺氧条件下，小鼠中枢神经系统功能无明显变化。

3. 血液颜色：- 乏氧性缺氧和血液性缺氧条件下，小鼠血液颜色变暗，呈紫红色，提示血液中氧合血红蛋白含量降低。

- 组织中毒性缺氧条件下，小鼠血液颜色无明显变化。

4. 耗氧量：- 乏氧性缺氧和血液性缺氧条件下，小鼠耗氧量明显增加，以维持生命活动。

- 组织中毒性缺氧条件下，小鼠耗氧量无明显变化。

五、机制分析1. 呼吸系统：- 缺氧条件下，呼吸中枢兴奋，导致呼吸频率和深度增加，以提高氧气摄入和二氧化碳排出。

课程名称：机能实验学教研室：病理生理学教研室任课教师：张彩华授课章节：缺氧与普鲁卡因对神经干的作用授课专业和年级：2005级医疗授课学时：8学时授课时间：2007年3-7月实验题目：缺氧实验目的：1.观察原因和条件在疾病发生发展中的作用2.复制几种类型缺氧的模型，观察血液颜色的特点，分析其机制根据大纲要求：掌握概念：缺氧、低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织性缺氧，紫绀、肠源性紫绀。

熟悉并理解原因和条件在疾病发生发展中的作用。

熟悉氧代谢的四个环节（摄取、携带、运输和利用）及反映血氧情况的一些指标(氧分压、氧含量、氧容量、氧饱和度，动静脉血氧含量差)。

掌握各型缺氧发生的原因及主要发病机制，掌握各型缺氧的特征（血氧变化的特点和皮肤黏膜颜色变化）。

实验原理：1.现代病因学认为，疾病是由于原因和条件综合作用的结果。

原因是引起疾病所不可缺少的因素，并且往往决定疾病的特异性，它与相应的疾病有着必然的因果关系；而条件则不是疾病所不可缺少的因素，它往往是通过作用于致病因子或改变机体反应性，对疾病的发生发展起促进或阻碍作用。

2.缺氧是指任何原因引起的供氧不足或利用氧障碍引起组织细胞发生功能代谢和形态结构异常变化的病理过程。

根据不同的病因，可以把缺氧分为四种类型：低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧、组织性缺氧。

不同类型的缺氧具有不同的病因以及不同的血液颜色和血氧变化特点。

实验对象：小鼠实验器械和药品：电子秤、注射器、钠石灰、小鼠缺氧瓶、测耗氧量装置、剪刀、镊子、滤纸、苦味酸、一氧化碳包；生理盐水、1.25%尼可刹米、2%水合氯醛、5%亚硝酸钠、0.1%氰化钾实验方法：一、原因和条件作用的分析1.取3只小鼠称重，编号1、2、3，用苦味酸做好标记2.注射及处理：1号：生理盐水，0.2ml/10g ，腹腔注射2号：1.25%尼可刹米，0.2ml/10g ，腹腔注射3号：2%水合氯醛，0.2ml/10g ，腹腔注射给药后分别放入三个缺氧瓶中，密闭计时，观察动物活动情况至死亡。