四氯化碳综合法制备大鼠肝硬化模型_叶春华
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大鼠肝纤维化模型的制备
中文摘要目的本文通过对SD大鼠腹腔注射四氯化碳以诱导大鼠肝纤维化动物模型。
方法取15只SD大鼠，180—220g，分为A组10只，B组5只，A组为模型组：40%CCL4橄榄油混合液按0.12ml/100g腹腔注射，一周两次，共八周。
B组为对照组：纯橄榄油按0.12ml/100g腹腔注射，一周两次，共八周，八周后，禁食12小时处死全部大鼠，解剖取肝组织。
病理学检测：HE染色，MASSON染色,PAS染色。
基因学检测：1.3.4型胶原蛋白结果八周试验期间B组大鼠全部存活，肝组织标本结构清晰，无异常情况；A组大鼠出现明显的病态，肝组织标本均已达到肝纤维化S3以上，多数标本可见小叶被纤维结构分割包围，假小叶形成，干细胞可见脂肪变性；结论该方法肝损伤明显，死亡率低，周期短，能够成功作为慢性肝损伤，肝纤维化的模型。
关键词肝纤维化，四氯化碳，动物模型AbstractObjective: Established animal model of hepatic fibrosis in rats induced by carbon tetrachloride.Methods: Take 15 SD rats,180-220g, divided into 10 group A, group B 5 只, A group of model group: 40% CCL4 0.12ml/100g by abdominal injection of a mixture of olive oil, twice a week, a total of eight weeks. Group B was the control group: pure olive oil press 0.12ml/100g abdominal injection twice a week, a total of eight weeks, eight weeks later, all rats were fasted for 12 hours were sacrificed, dissected liver tissue. Pathology: HE staining, MASSON staining, PAS staining. Genetics testing: 1.3.4 collagenResults: During the eight-week test group B rats survived, liver tissue specimens clear structure, no exceptions; significant morbidity A rat liver tissue fibrosis S3 have reached above, the majority of samples are split fiber structure visible lobular surrounded pseudo lobule formation, stem cell degeneration visible fat.Conclusion: This method obviously liver injury mortality, the period is short, to be successful as chronic liver damage, liver fibrosis model.Key words: Fibrosis, carbon tetrachloride, animal model前言肝病包括1.慢性病毒性肝炎2.药物性肝炎 3.中毒性肝炎 4.脂肪肝 5.酒精肝 6.肝硬化 7.肝肿瘤 8.肝胆结石 9.肝囊肿大多数肝病伴随着肝纤维化，肝纤维化是威胁人类健康的常见疾病，是各种慢性肝病最重要的病理特征，是发生肝硬化的病理基础，也是原发性肝癌发病的危险因素之一。
腹腔注射40%四氯化碳加食用白酒制备肝硬化大鼠模型
腹腔注射40%四氯化碳加食用白酒制备肝硬化大鼠模型发表时间：2017-02-20T16:02:02.513Z 来源：《医药前沿》2017年1月第3期作者：陈菲1 王建美1 盛柳青1 裘颖儿2[导读] 肝硬化是临床最常见的慢性肝病，在欧美等发达国家，因肝硬化致死人数仅次于恶性肿瘤、心血管病。
（1金华职业技术学院医学院浙江金华 321000；2金华食品药品检验所浙江金华 321000）【摘要】目的：腹腔注射40%四氯化碳加食用白酒制备肝硬化大鼠模型。
方法：40只雄性SD大鼠随机分为模型组(n=30)和对照组(n=10)。
模型组按2ml/kg剂量腹腔注射40%四氯化碳食用油溶液，每周2次，连续7周，对照组注射等量生理盐水，分别于4周末和7周末检测模型组大鼠肝功能及组织病理学变化。
结果：模型组大鼠血清肝功能丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶显著增高，至第7周时可观察到大鼠肝组织出现结节状增生的假小叶，为典型肝硬化病理表现。
模型组动物成活率为75%，造模成功率为81%。
结论：该方法可成功地建立大鼠肝硬化实验模型，可用于相关实验研究。
【关键词】四氯化碳；腹腔注射；大鼠；肝硬化；食用白酒【中图分类号】R965.3 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）03-0077-02肝硬化是临床最常见的慢性肝病，在欧美等发达国家，因肝硬化致死人数仅次于恶性肿瘤、心血管病、脑血管病和意外事故，居死亡原因第5位，在美国中年人中则为位居第4位的死亡原因。
国内每年死于肝硬化及并发症的患者达50万，主要原因是病毒性肝炎肝硬化导致[1-2]。
四氯化碳是重要的化工原料和有机溶剂，对肝、肾有严重损害作用，其可在体内转变为自由基，扰乱肝细胞膜上类脂质的代谢，引起肝细胞坏死，是经典的实验性肝损伤动物模型所用外源性化合物。
本实验通过腹腔注射四氯化碳加食用白酒制备肝硬化大鼠模型，以期为研究治疗肝硬化的药物提供实验动物模型。
四氯化碳腹腔注射制备肝纤维化模型的实验研究
四氯化碳腹腔注射制备肝纤维化模型的实验研究
吕鹏
【期刊名称】《胃肠病学和肝病学杂志》
【年(卷),期】2003(12)4
【摘要】目的寻找一种快速、高效地制备CCL4肝纤维化动物模型的方法.方法分别利用CCL4腹腔注射和皮下注射的方法制备大鼠肝纤维化模型.做肝脏病理学检查,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、透明质酸(HA),并与对照组比较.结果CCL4腹腔注射造模组与皮下注射组的存活率、造模时间存在显著性差异.二者的肝脏病理学检查、ALT、HA无显著性差异,但它们的血清ALT、HA均高于对照组.结论制备CCL4肝纤维化动物模型腹腔注射优于皮下注射.
【总页数】2页(P339-340)
【作者】吕鹏
【作者单位】272000,济宁,济宁市传染病医院传染科
【正文语种】中文
【中图分类】R318
【相关文献】
1.腹腔注射四氯化碳建立大鼠肝纤维化模型 [J], 魏晓光;郭辉;陈永珍;张于娟
2.腹腔注射低浓度四氯化碳建立小鼠肝纤维化模型 [J], 李少华;邱玲;程歆琦;李霁;杜顺达;毛一雷
3.四氯化碳皮下注射制备肝纤维化模型的新设计 [J], 马玉珍;韩景田;陈玮;叶路
4.腹腔注射四氯化碳辅以饮食改良制备犬慢性肝纤维化模型 [J], 章雅琴;李丛蕊;骆
雷;胡跃群;容鹏飞;王维
5.四氯化碳皮下注射制备大鼠肝纤维化模型的建立 [J], 文志萍;秦冬梅;曹文江;胡利萍;陈文
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四氯化碳诱导大鼠急性肝功能衰竭动物模型的建立
四氯化碳诱导大鼠急性肝功能衰竭动物模型的建立赖力英;杨旭;许向青;蒋永芳;童敏【期刊名称】《中国现代医学杂志》【年(卷),期】2005(15)11【摘要】目的不同剂量的四氯化碳可以引起不同的肝脏损害,本试验用四氯化碳灌服制造急性肝功能衰竭的动物模型.方法SD大鼠35只,分5组,1个对照组,4个实验组,实验组四氯化碳灌胃剂量依次为每公斤体重1、3、4和5 mL.观察动物的精神状况、食欲、运动情况、毛发、尿的颜色,检测血清谷丙转氨酶、总胆红素,数据x±s表示,实验组和对照组的动物存活率用x 2检验;各组肝功能指标用单因素方差分析.肝脏组织HE染色后观察病理学改变.结果各组间肝功能损害的差异及动物存活率的差异在统计学上均有极显著性.每公斤体重4 mL四氯化碳组出现急性肝功能衰竭的临床表现以及肝脏病理改变.结论每公斤体重4 mL四氯化碳灌胃可用于SD大鼠急性肝功能衰竭模型的建立.【总页数】3页(P1655-1657)【作者】赖力英;杨旭;许向青;蒋永芳;童敏【作者单位】中南大学湘雅二医院,肝病研究中心,湖南,长沙,410011;中南大学湘雅二医院,肝病研究中心,湖南,长沙,410011;中南大学湘雅二医院,肾病实验室,湖南,长沙,410011;中南大学湘雅二医院,肝病研究中心,湖南,长沙,410011;中南大学湘雅二医院,医学动物实验室,湖南,长沙,410011【正文语种】中文【中图分类】R575.3【相关文献】1.胆管结扎和四氯化碳诱导Wistar大鼠肝纤维化模型的建立及相关指标的对比分析 [J], 刘晓亚;刘瑞霞;崔立建;侯斐;文艳;阴赪宏2.四氯化碳诱导犬急性肝功能衰竭模型的建立 [J], 黄建伟;尹良红3.四氯化碳诱导大鼠肝纤维化进展期和恢复期模型的建立 [J], 张磊;李俊;朱鹏里;黄成;吕雄文4.四氯化碳加乙醇复合法诱导肝硬化大鼠模型的建立及验证 [J], 宾文婷;常加松;吴剑平5.四氯化碳加乙醇复合法诱导肝硬化大鼠模型的建立及验证 [J], 宾文婷;常加松;吴剑平;;;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
复方叶下珠抑制四氯化碳(CCL4)诱导大鼠肝纤维化的实验研究
复方叶下珠抑制四氯化碳(CCL4)诱导大鼠肝纤维化的实验研究目的观察复方叶下珠抑制CCL4诱导大鼠肝纤维化形成的作用效果并探讨其作用机制。
方法采用CCL4诱导的大鼠肝纤维化模型，用高、低两种剂量（50g/kg，25g/kg）的复方叶下珠水提液进行干预治疗，并与秋水仙碱进行对照，检测大鼠ALT、AST、肝组织羟脯胺酸（Hyp）、血清透明质酸（HA）含量及肝脏病理组织学改变。
结果复方叶下珠高、低剂量组谷草转氨酶（AST）显著低于模型组，差异均有显著性意义（P＜0.05）。
复方叶下珠高剂量组大鼠肝组织Hyp和血清HA含量均明显低于模型组，差异均有显著性意义（P＜0.05）；与秋水仙碱组比较，差异均有显著性意义（P <0.01）。
复方叶下珠高、低剂量组肝组织纤维化病变明显减轻，与模型组比较，差异均有显著性意义（P <0.01）。
结论复方叶下珠对CCL4诱导的肝纤维化形成具有明显的抑制作用，其机制与保护肝细胞和抑制胶原纤维合成有关。
标签：复方叶下珠；肝纤维化；CCL4；大鼠复方叶下珠主要由叶下珠、桃仁、苦参等药物组方而成[1]，具有疏肝解毒、活血健脾作用，临床上主要用于慢性乙型肝炎和肝纤维化的治疗，为探讨该复方对实验性肝纤维化形成的抑制作用，我们以Wistar大鼠为实验对象，对CCL4诱导的肝纤维化模型进行干预治疗，观察药物的作用效果并探讨其作用机制。
1材料与方法1.1实验动物Wistar雄性大鼠，体重150～180g 由南方医科大学实验动物中心提供，许可证号2004A068。
1.2药物CCL4购于上海长江化工厂。
复方叶下珠组方药材购于广州中医药大学附属第一医院，水煎2次，混合后浓缩成含生药材5g/ml，用时以蒸馏水配成所需浓度。
秋水仙碱为昆明制药集团股份有限公司生产，规格：1mg/片，批号：20130912，用时以生理盐水溶解。
1.3主要试剂羟脯胺酸（Hyp）检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所，批号为20130609、透明质酸（HA）检测试剂盒由北京北方生物技术研究所提供，批号：20130820。
四氯化碳致大鼠肝损伤情况下肝细胞凋亡的病理研究
四氯化碳致大鼠肝损伤情况下肝细胞凋亡的病理研究四氯化碳（CCl4）是一种强烈的致毒物质，被广泛用于动物模型中的肝损伤研究。
在多次使用CCl4诱导大鼠致肝损伤模型时，发现肝细胞凋亡出现的情况越来越普遍。
因此，在深入了解CCl4致肝损伤机制前，我们需要对肝细胞凋亡在CCl4致大鼠肝损伤中的病理研究进行探讨。
一、肝细胞凋亡的定义和机制肝细胞凋亡是指细胞通过编程性死亡的方式消失，不同于坏死，它在发生时能够控制住细胞裂解并同时避免炎症的产生。
肝细胞凋亡主要通过启动凋亡程序和通过细胞外刺激信号路途中的活化协调因子来实现。
具体来说，凋亡程序的启动可能是通过线粒体和死亡受体及其应答关联配体的激活进行的。
另一方面，复杂的细胞外刺激如细胞应力、损伤刺激或药理学作用，能够在无需死亡受体参与时促进凋亡的发生。
二、CCl4致大鼠肝损伤中的肝细胞凋亡欧洲老鼠在经过CCl4处理数小时后可见到凋亡细胞的产生。
虽然美国老鼠处理后不一定能见到显而易见的细胞凋亡，但它们的肝内明显存在TUNEL阳性细胞，这些细胞说明通过扫描的显微镜可见肝细胞的核染色质浓缩典型的凋亡外泌叛道死亡中。
导致CCl4致大鼠肝细胞凋亡的机制尚不是很清楚，但是已有研究表明，CCl4致肝内细胞凋亡的可能机制是通过氧化应激和胱硫酸盐，通过细菌毒素和吡咯烷的激活发生的。
三、CCl4致大鼠肝细胞凋亡的病理学研究CCl4处理对大鼠的肝脏组织产生了强烈的肝细胞损伤，这种损伤是由细胞内自由基的生成和膜脂质过氧化所引起的。
肝脏组织损伤的发生率与CCl4给药的浓度和时间成正比，而肝细胞凋亡和坏死的发生率则与CCl4给药浓度与时间的剂量成正比，可以推断出CCl4会在肝脏细胞内诱导细胞凋亡和坏死。
在CCl4致大鼠肝细胞凋亡研究中，常用的方法是采用TUNEL染色法来判断凋亡细胞的个数和比例。
TUNEL染色法可以在凋亡细胞中染上呈阳性颜色的核酸末尾，这意味着细胞核内的DNA发生断裂是的凋亡细胞，在显微镜下呈现出较明显的核染色质浓缩和形变，较少形态改变。
四氯化碳诱导肝硬化动物模型的相关影响因素
【 关键词】 四氯化碳 ； 肝硬化 ； 动物模型 ； 影响因素 【 中图分类号 】 Ｒ ５ ７ ５ 【 文献标志码】 Ａ ［ 文章 编号】 １ ０ ０ ８ — ８ １ ９ ９ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ９ － ０ ９ １ ０ － ０ ５ 【 Ｄ Ｏ Ｉ 】 １ ０ ． １ ６ ５ ７ １ ／ ｊ ． ｃ ｎ ｋ ｉ ． １ ０ ０ ８ ． ８ １ ９ ９ ． ２ ０ １ ５ ． ０ ９ ． ０ ０ ３
１ ５ ０ ０ ８ １ ， Ｈ ｅ ｉ ｌ ｏ ｎ ｇ ｊ ｉ ａ ｎ ｇ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
［ Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ］ ｏ ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｌ ｉ ｖ ｅ ｒ ｃ ｉ ｒ ｒ ｈ ｏ ｓ ｉ ｓ ｍ ｏ ｄ ｅ ｌ ｉ ｎ ｇ ｗ ｉ ｔ ｈ ｃ ａ ｒ ｂ ｏ ｎ ｔ ｅ ｔ ｒ ａ ｅ ｈ ｌ ｏ ｒ ｉ ｄ ｅ（ Ｃ Ｃ Ｌ ４ ） ｍ ａ ｙ ｂ ｅ ｉ ｎ ｆ ｌ ｕ ｅ ｎ ｃ ｅ ｄ ｂ ｙ ｍ ａ ｎ ｙ ｆ ａ ｃ ｔ ｏ ｒ ｓ ， ｓ ｕ ｃ ｈ ａ ｓ
大鼠肝硬化 ， 分别有给药途径 、 药物浓度、 给药时 间 ３个 因素 ， 其 中给药 途径 因素包括皮下注射 、 腹腔注射 、 灌 胃等 ３个水平 ， 药
物浓 度因素包 括 ３ ０ ％、 ５ ０ ％ ２个水平 ， 给药时间因素包括 ８ 、 １ ０ 、 １ ２周等 ３个水平 ， 共计 ｌ ８个 处理组 。各组动 物按各 自不同 的
腹腔注射组 Ｒ值 ＜ 皮下注射组 和灌 胃组 ， ５ ０ ％Ｃ Ｃ １ 油剂组 Ｒ值 ＜３ ０ ％Ｃ Ｃ １ 油剂组 ， 随着给药时 间的延长 Ｒ值呈降低趋势 ， 析
因方差分析结果显示 ３种 因素主效 应 均有 统计 学意 义 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） ， 给 药方 式 与给 药时 间 、 药 物浓 度之 间有 相 互关 系 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） 。Ｌ Ｆ Ｓ Ｓ析因分析结果 表明腹腔 注射 组 Ｌ值 ＞皮下注射组 、 灌 胃组 ， ５ ０ ％ Ｃ Ｃ Ｌ ４ 油剂组 Ｌ值 ＞３ ０ ％ Ｃ Ｃ ｌ 油剂组 ， １ ２周组 Ｌ 值 ＞１ ０周组 ＞８周组 ， 析 因方差分析结果显示 ３种 因素主效应均有 统计学 意义 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） ， 给药方式 和给 药时 间及 给药方 式 和药物浓度组之 间无相互关 系（ Ｐ＞０ ． ０ ５ ） 。３ ０ ％、 ５ ０ ％Ｃ Ｃ １ 腹腔注射 、 皮 下注射 、 灌 胃组 的死 亡率依 次升高 （ 分别 为２ ５ ． ３ ３ ％、 ３ ７ ． ７ ８ ％、 ３ ８ ． ３ ７ ％和 ４ ２ ． ９ ７ ％、 ４ ７ ． ８ ５ ％、 ５ １ ． ８ ８ ％） ， ５ ０ ％ Ｃ Ｃ １ 组死 亡率 高于 ３ ０ ％ Ｃ Ｃ １ ４ 组 。但经 ｌ ｏ ｇ — ｒ ａ ｎ ｋ检 验 比较各 组生存 曲 线， 不同给药方式组及药物浓度组之间差异并无统计学意义 （ Ｐ＞ ０ ． ０ ５ ） 。 结论 射 和灌 胃方法 。３种给药方法都随药物浓度及给药时间 的延长提高造模效果 。 腹腔注射给药肝硬化模 型效 果优于皮下 注
四氯化碳加乙醇复合法诱导肝硬化大鼠模型的建立及验证
Corresponding author: Chang Jia-song, Master, Associate professor, Department of Human Anatomy and Histoembryology, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210023, Jiangsu Province, Chi第1，2 周5%； 第3，4 周7.5%； 第5-9 周10%。
检测： (1)体质量； (2)存活情 况； (3)组织病理 学：假小叶形 成情况； (4)血清丙氨 酸氨基转移 酶 和天门冬 氨酸氨基转 移酶。
提示： 改 良 的 CCl4 加乙醇复合 法造模的大 鼠肝硬化模 型死亡率低， 成模率高。
DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.0813
ORCID: 0000-0002-7979-6683(宾文婷)
文章快速阅读：
四氯化碳加乙醇复合诱导肝硬化大鼠模型
3 mL/kg 50%CCl4 橄 榄油液(首剂 5 mL/kg)， 4 d 一次。
50%CCl4 橄榄油液， 头 4 次及末 3 次剂量 5 mL/kg，余为3 mL/kg， 4 d 一次(头 4 次注射 CCl4 后隔 1 周注射第 5 次)。
单因素模型包括四氯化碳ccl4诱导肝硬化模型酒精诱导肝硬化模型血吸虫性肝硬化模型同种或异种血清诱导肝硬化模型致癌物二甲基亚硝胺诱导肝硬化模型硫代乙酰胺诱导肝硬化模型及胆汁性肝硬化模型等213其优点是容易操作方法简便针对性强对制造出特定病因模型的肝硬化病因学研究探寻某个因素导致肝硬化的机制研究适用于此方法其缺点多为耗时长死亡率高14
《中国组织工程研究》 Chinese Journal of Tissue Engineering Research
检测： (1)体质量； (2)存活情 况； (3)组织病理 学：假小叶形 成情况； (4)血清丙氨 酸氨基转移 酶 和天门冬 氨酸氨基转 移酶。
提示： 改 良 的 CCl4 加乙醇复合 法造模的大 鼠肝硬化模 型死亡率低， 成模率高。
DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.0813
ORCID: 0000-0002-7979-6683(宾文婷)
文章快速阅读：
四氯化碳加乙醇复合诱导肝硬化大鼠模型
3 mL/kg 50%CCl4 橄 榄油液(首剂 5 mL/kg)， 4 d 一次。
50%CCl4 橄榄油液， 头 4 次及末 3 次剂量 5 mL/kg，余为3 mL/kg， 4 d 一次(头 4 次注射 CCl4 后隔 1 周注射第 5 次)。
单因素模型包括四氯化碳ccl4诱导肝硬化模型酒精诱导肝硬化模型血吸虫性肝硬化模型同种或异种血清诱导肝硬化模型致癌物二甲基亚硝胺诱导肝硬化模型硫代乙酰胺诱导肝硬化模型及胆汁性肝硬化模型等213其优点是容易操作方法简便针对性强对制造出特定病因模型的肝硬化病因学研究探寻某个因素导致肝硬化的机制研究适用于此方法其缺点多为耗时长死亡率高14
《中国组织工程研究》 Chinese Journal of Tissue Engineering Research
四氯化碳制备肝硬化腹水模型方案的分析与比较
四氯化碳制备肝硬化腹水模型方案的分析与比较戴瑶瑶;范兴良;祝峻峰【摘要】四氯化碳(CCl4)是制备肝硬化腹水模型的经典造模方案.本文从不同给药途径和不同造模方案概述和评析以CCl4为主制备肝硬化腹水模型的方案,分析每种造模方案的优劣势,总结较优制备模型方案,为实验研究提供参考,同时也为深入研究肝硬化腹水奠定基础.【期刊名称】《胃肠病学和肝病学杂志》【年(卷),期】2017(026)001【总页数】5页(P5-9)【关键词】肝硬化腹水;四氯化碳;动物模型【作者】戴瑶瑶;范兴良;祝峻峰【作者单位】上海中医药大学附属市中医医院肝病科,上海201203;上海中医药大学附属市中医医院肝病科,上海201203;上海中医药大学附属市中医医院肝病科,上海201203【正文语种】中文【中图分类】R575.2腹水是肝硬化最常见、最早发生的并发症之一。
研究[1]表明，代偿期肝硬化患者10年内约有50%进展为腹水，与无腹水形成的肝硬化失代偿期患者相比，有腹水形成的患者死亡率明显升高，50%的腹水患者在5年内死亡[2]。
构建能够模拟人肝硬化腹水过程的理想动物模型是探索疾病早期诊断、寻找及时有效治疗、改善病情和预后的关键。
目前有四氯化碳(CCl4)造模法、乙醇造模法及免疫造模法等肝硬化动物模型制备方法[3]。
CCl4造模法是经典的肝硬化腹水制备模型方法，广泛应用于动物模型肝毒性研究[4]。
随着研究的深入，CCl4制备肝硬化腹水模型的方案得到不断优化。
综合文献报道，发现各造模方法比较集中的问题主要是给药方式、药物浓度、时间及造模后持续时间尚未确定，现将近年来以CCl4为主不同造模方法的优缺点作一比较，并对该领域的前景作一概述。
CCl4制备肝硬化腹水模型的主要给药途径包括灌胃、皮下注射、腹腔注射、吸入等。
实验人员通过长期探索研究，相互比较，对造模给药途径各有看法，概述如下。
腹腔注射具有操作简便、动物吸收快、肝药物浓度高、成模时间短、毒副反应降低等优点，死亡率为20%～35%[5]。
40%四氯化碳大鼠慢性肝损伤模型稳定性的研究
40%四氯化碳大鼠慢性肝损伤模型稳定性的研究
林琳;刘汉锋
【期刊名称】《广西医学》
【年(卷),期】2009(031)007
【摘要】目的研究40%四氯化碳(CCl4)致大鼠慢性肝损伤模型病理变化过程,探讨该模型的稳定性并予以完善.方法雌性Wistar大鼠60只,用随机数字表法分为两组:对照组30只,腹腔注射玉米油0.1 ml/100 g,2次/周,实验组30只,腹腔注射40%CCl4,0.1 ml/100 g,2次/周;于实验第2、4、6周染毒48 h后分别将动物处死,取肝组织作常规HE染色,光镜下观察病理变化.结果实验组染毒2周后,肝细胞脂肪变性,小叶结构破坏,少量纤维组织增生;染毒4周后,明显的肝纤维组织增生,呈肝硬化改变;染毒6周后重度肝硬化,假小叶形成.结论 40%CCl4使肝组织严重坏死,第6周出现明确肝硬化.
【总页数】3页(P922-924)
【作者】林琳;刘汉锋
【作者单位】广西医科大学一附院肿瘤内科,南宁市,530021;广西医科大学一附院肿瘤内科,南宁市,530021
【正文语种】中文
【中图分类】R575;R965
【相关文献】
1.四氯化碳诱导大鼠慢性肝损伤模型方法的探讨 [J], 张海燕;温韬;卢静;李胜利;王晶晶;朴正福
2.肝复康颗粒对大鼠四氯化碳慢性肝损伤模型的作用研究 [J], 谈发金;喻嵘;魏云
3.左旋虾青素对四氯化碳致大鼠慢性肝损伤保护作用的研究 [J], 罗文基;张坤水;陈逸生;黄丽娟;蔡小连
4.40%四氯化碳大鼠慢性肝损伤模型的研究 [J], 杨开选;程薇波;王文冬;沈圣
5.疏肝颗粒对大鼠四氯化碳慢性肝损伤的药理研究 [J], 戴虹
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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·论著·四氯化碳综合法制备大鼠肝硬化模型叶春华 刘浔阳(中南大学湘雅三医院普外科,湖南 长沙 410013) [摘要]【目的】探讨建立一种理想的大鼠肝硬化模型的复制方法并加以评价,为下一步探索肝硬化门脉高压症治疗方法提供可靠、稳定的模型动物。
【方法】90只雄性SD大鼠随机分为两组:实验组(70只)采用四氯化碳(CCl4)+苯巴比妥钠+食用白酒进行诱导,诱导期间CCl4浓度在一定范围内逐步增加,并用食用白酒替代医用乙醇溶液;对照组(20只)给与普通饮水和饲料,频度及剂量同实验组。
同时采用一系列的检查方法加以评估。
【结果】实验组70只大鼠造模结束时,死亡9只,死亡率12.86%。
实验结束时,按照成模标准,造模成功大鼠共61只,均可观察到肝硬化结节及镜下假小叶形成,成模率87.14%。
实验组门静脉压力比对照组明显增高(P<0.05);血清总胆红素、谷丙转氨酶及谷草转氨酶较正常对照组明显升高(P<0.05),而血清白蛋白较之正常对照组明显降低(P<0.05)。
对照组20只全部存活。
【结论】该方法可形成稳定的肝硬化门脉高压症模型,可用于肝硬化门脉高压症方面的相关研究。
此模型制作周期短(仅需9周),成模率高,死亡率低,具有简便、快捷、高效的优点,适于大批量制作。
[关键词] 肝硬化,实验性; 疾病模型,动物; 大鼠; 四氯化碳Study on Method of Inducing Hepatic Cirrhosis Model in Rats by Carbon Tetrachloride Y E Chun-hua, LIU X un-yang(Department o f General Surgery,the T hird X iangy a Hosp ital,CentralSouth University,Changsha,410013,China) [Abstract]【Objective】T o dev elo p and evalua te an ideal means to induce cir rhotic model in rats for nex tstudy o n live r cir rhosis with po r tal hypertension trea tment.【M ethods】N inety male SD rats we re randomly di-vided into two gr oups,T he e xperiment g roup(n=70)wa s treated with CCl4,PBS and ea table alcoho l and theco ncentra tion of CCl4and eatable alcohol were increased stage by stag e in a ce rtain range during the ex peri-ment.T he co nt rol g roup(n=20)wa s trea ted w ith common drinking w ater and animal feeds,the f requencyand do se w ere the same a s the experime nt g ro up,meanwhile evalua ted by a se ries of check methods.【Results】Af te r being induced w ith above means,the ra t mor tality of the ex periment gr oup w as12.86%,and the fo rma-tion rate of liver cir rhosis false lobe was87.14%.T he po rtal v eno us pressure of the e xperiment g roup w ashigher than the co ntrol g ro up(<0.05),ST B,G PT,G O T we re higher than the co ntro l g roup,but SA B de-crea sed(P<0.05).T he contro l g r oup w as all surv iv al.【Co nclusio n】T he pro cedure is fair ly stable and relia-ble,the model is useful for resea rch in liv er cir rhosis w ith po rtal hy pe rtension.T he cy cle time of inducing cir-rhosis model is shor t the mor ta lity is low. [Key words] liver cir rho sis,ex pe rimental; disesase models,animal; rats; carbon tetr achloride[中图分类号] R575.2 [文献标识码] A [文章编号] 1671-7171(2005)05-0619-04 由于病毒性肝炎、酒精性肝病等原因造成的慢性肝病和肝硬化患者有增多的趋势,近十年来有关门脉高压症的研究成为消化学界的热点。
本实验通 [作者简介] 叶春华(1967-),男,湖南安乡人,博士,主治医师,主要从事肝胆外科临床工作。
[收稿日期] 2005-04-01过腹腔内注射四氯化碳(CCl4)加饮用苯巴比妥钠和食用酒精,探讨建立一种理想的肝硬化模型的方法。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 实验动物 90只Sprag ue-Daw ley鼠(简称SD大鼠),全部雄性,体重180～220g,普通大鼠饲料,均购于中南大学湘雅医学院实验动物中心。
1.1.2 动物分组 20只大鼠作为对照组,其余70只构建肝硬化门脉高压模型。
1.1.3 试剂 乙醚,75%医用酒精,10%甲醛,10%硫化钠,蒸馏水,生理盐水,肝素,CCl4(分析纯,浓度99.5%,批号XK13-001-0969-16)均购自苏州市第二化工研究所,苯巴比妥钠(0.1g/ml)购自深圳晶美生物工程有限公司。
市售食用白酒(乙醇体积分数为45%)。
1.1.4 实验准备 ①将CCl4(分析纯,浓度为99.5%)与中性菜籽油溶液混合配制成40%,50% CCl4中性菜籽油溶液(即5份CCl4+5份中性菜籽油溶液,混匀),②大鼠购回后应在新环境中适应性饲养3d后再开始实验。
大鼠喜暗,白天休息、夜间进食,食量大、对营养缺乏敏感,尤其是对维生素A 和蛋白质。
食物缺乏和供水不足的情况下会互相撕杀、啃食同类,所以食物和饮水要供应充足,一笼内饲养大鼠5只。
1.2 方法1.2.1 构建肝硬化模型 将实验大鼠分为试验组和对照组,模型制备分为两期。
诱导期和成模期。
①诱导期:实验动物在诱导前以每升蒸馏水中含0.35g苯巴比妥钠的溶液作为大鼠的惟一饮用水,时间为1周。
饲料使用普通大鼠饲料。
②成模期:实验组:按0.5m l/100g剂量予以腹腔注射40% CCl4中性菜籽油溶液,每周2次,持续4周;同时以10%乙醇溶液(由上述食用白酒加蒸馏水配制,下同)为其惟一饮用水。
第5周开始改为用50%CCl4中性菜籽油溶液,以0.5ml/100g标准腹腔注射,每周2次,持续4周;同时改为以30%乙醇溶液为其惟一饮用水至实验结束。
对照组:按0.3m l/100g体重予以腹腔注射生理盐水,每周2次,对照组给与普通饮水和饲料,频度及剂量同实验组。
制备肝硬化门脉高压症大鼠模型时间共计9周。
1.2.2 实验组成模标准 ①门静脉穿刺测压大于对照组的门脉压力区间;②以肉眼观察到肝硬化结节形成及肝脏组织切片要求能够看到假小叶的形成。
1.2.3 检测指标 成模后开腹测门静脉压力(PVP),取其血液检测肝功能:血清总蛋白(TS P)、白蛋白(SAB)、球蛋白(SG)、总胆红素(STB)、谷丙转氨酶(GPT)及血液细胞:血色素(H B)、血小板(PLT)、红细胞(RBC);肝组织送病理切片。
1.3 统计学分析方法 采用统计分析软件SPSS 10.0中文版,统计方法采用独立样本t检验。
2 结果2.1 一般情况 大体观察:大部分实验动物在诱导过程中活动减少,精神萎靡,食欲不振,每日饮水约20ml,对外界刺激反应迟钝,动物皮肤无光泽,体重下降明显。
2.2 实验组病理切片 肝内假小叶广泛形成,假小叶内可见纤维再分隔现象,同时伴有明显的肝细胞再生结节。
2.3 肝硬化模型的制作成功率及死亡率情况 实验组70只大鼠造模结束时,死亡9只,死亡原因为注射CCl4过量引起中毒所致,存活大鼠61只,死亡率12.86%。
实验结束时,按照成模标准,造模成功大鼠共为61只,成模率87.14%。
对照组20只全部存活。
2.4 两组大鼠门静脉压力变化 对此两组大鼠开腹穿刺测压结果表明:对照组(8.58±2.02)m mH g、实验组(15.72±2.76)m mH g;两组比较差异有显著性(P<0.05)。
2.5 两组大鼠血液细胞和肝功能的检测 见表1。
表1 实验组与对照组大鼠肝功能及血液细胞比较(x±s)组别TS P(g/L)S AB(g/L)S G(g/L)HB(g)RBC(×109/L)PLT(×109/L)S TB(umol/L)GPT(u/L)正常组71.17±4.2734.03±2.1736.25±2.43168.96±6.376.83±1.27802.27±79.21.25±1.4145.98±10.1试验组50.25±4.0822.51±2.1437.02±2.02140.11±5.633.7±1.32558.69±99.09.54±2.3570±27.42 P值<0.05<0.05>0.05<0.05<0.05<0.05<0.05<0.053 讨论肝硬化门脉高压动物模型在探求此种疾病的病理生理,治疗等方面的重要性是不言而喻的。
实验性肝硬化模型已有较多报道,CCl4诱发肝硬化动物模型是一个较为经典的方法,染毒方法有口服、腹腔注射等,均以小动物大鼠为多。