植物营养学实习报告
——草坪N 、P 、K 的含量测定
焦志敏 施鹏程 赵娜 冯海燕 陈瑜
梁希07-2
一、 草样的采集
1.选定地点：根据本实验的目的——测定校园内草坪中氮磷钾的含量，以评定草坪的营养状况，选择了主楼前的一片草坪，即东起白皮松、青扦，西到香椿、沙地柏所包括的范围内的草坪（如下图所示）作为实验草样。
2.采集草样：由于采集测定的草样要具有一定的代表性，故采集时按照一定路线多点采集（如上图），在样地中的四个顶点和对角线的中点和交点各取草样，组成平均样品。同时，所采集的草样长势基本一致、未受到病虫害，以及草样顶端新成熟的健壮叶。由于草坪体内各种物质，特别是活动性成分如硝态氮、氨基态氮，还原糖等都处于不断的代谢变化之中，不仅在不同生育期的含量有很大的差别，并且在一日之间也有显著的周期性变化，因此在采样时，选取了同一时间进行。
二、 样品的制备、保存
1.样品的洗涤：由于采取的草样带有泥土或喷洒的肥料药剂，为了避免草样的污染，故样品先进行洗涤，一般用湿布擦净表面的沾染物即可。
2.样品的杀青与保存：测定营养成分常用干燥样品，所以洗净的样品必须尽快干燥，以减少化学和生物的变化。如果延迟过久，细胞的呼吸和霉菌的分解都会消耗组织的干物质而致改变各成分的百分含量、蛋白质也会裂解成较简单的含氮化合物。杀青要有足够的温度，但温度又不能太高，因此，分析用的植物鲜样要分两步干燥，先将鲜样在80—90℃烘箱中烘30分钟，然后，降温至60—70℃，逐尽水分，大约要用12～24小时。
3.样品的研磨、过筛：干燥的样品要用研钵或带刀片的磨样机粉碎，并全部过筛。而筛孔的
香椿沙地柏青杄
选择视称样的大小而定，通常可用圆孔直径为1mm的筛，但本实验称样仅1g左右，故使用0.5mm的筛进行筛选。样品过筛后充分混匀，然后保存于密封的磨口广口瓶中，瓶外贴放一样品标签。
三、样品的消煮及定容
1.样品的称量：称样时将样品充分混匀后多点勺取，使用电子天平（1/1000）称取1g的样品，然后装入100ml开氏瓶底部，并在瓶外注明小组名称，避免混淆。
2.样品消煮：向装有测定样品的开氏瓶中加入1ml水润湿，再加入5ml浓H2SO4（化学纯比重为1.84）摇匀，然后加1滴高氯酸，置于电炉上加热消煮，使固体物消失成为溶液，待H2SO4发白烟、溶液成褐色时，拿下来冷却，再加1滴高氯酸，继续加热消煮约5—10分钟，如此反复一直至溶液呈无色或清亮后，取下冷却，然后用水将消煮液定量地转移到100ml 容量瓶中，定容。
四实验方法与结果
1 N元素的测定：
（1）实验目的：测定草样中的氮元素含量，以此掌握测定植物氮含量的方法
（2）方法原理:
植物样品经开氏消煮、定容后，吸取部分消煮液碱化，使铵盐转变成氨，经蒸馏和扩散，用H3BO3吸收，直接用标准酸滴定，以甲基红—溴甲酚绿混合指示剂指示终点。
（3）试剂 40%(m/v)NaOH溶液
2%H3BO3—指示剂溶液
取标准溶液〔C(HCl或1/2H2SO4)=0.01mol/L〕
碱性溶液
（4）操作步骤：
蒸馏法吸取定容后的消煮液5.00—10.00ml，(V2，含NH4—N约1ml)，用定氮仪蒸馏。（5）结果计算
全N%=C(v-v0)×0.014×100/(m×v2/v1)
式中
C—酸标准溶液浓度，mol/L；0.0093
v—滴定试样所用的酸标准液，ml；
v0—滴定空白所用的酸标准液，ml；
0.014—N的毫摩尔质量，g/mmol；
m—称样量，g；
v1—消煮液定容体积，ml；
v2—吸取测定的消煮液体积ml。
使用凯氏定氮仪：
V=17.981ml
V0=0.868ml
由公式可得：
全氮量=4.97%
2 P元素的测定：
（1）实验目的：测定草样中的磷元素含量，以此掌握测定植物磷含量的方法
（2）方法原理：
植物样品经浓H2SO4消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。待测液中的正磷酸和钼酸能生成蓝色的磷钼杂多酸，其吸光度与磷浓度成正比，可在波长700处用吸光光度法测定磷。实验步骤：吸取定容、过滤或澄清后的消煮液5ml放入50ml容量瓶中，加1滴二硝基酚指示剂，调色，先用碱调无色，再用酸调淡黄色，加5ml钼锑抗显色剂，摇匀，定容。显色30分钟后，比色。
标准曲线或直线回归方程准确吸取5 mg/L标准液0，1，2，4ml分别放入50ml容量瓶中，按上述步骤显色，即得0，0.1，0.2，0.4 mg/L的标准系列溶液，与待测液一起测定，读取吸光度，然后绘制标准曲线或求直线回归方程。
（3）结果计算
标准系列00.10.20.4
读数00.0450.1060.214
P标准曲线
吸收值
0.3
0.2
0.1
00.20.40.6
标准系列的浓度
全P，%＝Ｃ(P)×(v１/m)×(v3/v2)×10－4
式中C(P)—从校准曲线或回归方程求得的显色液中磷浓度，mg/L；
v3—显色液体积，ml；
v2—吸取测定的消煮液体积，ml；
v1—消煮液定容体积，ml；
m—称样量，g；
10－4—将mg/L浓度单位换算为百分含量的换算因数。
数据处理
分光光度计上显示的数据为：1.323
标准曲线斜率：0.535
所测P的浓度为2.47ppm
由公式得，速效磷=4940ppm
即为0.49%
