第四章 植物器官培养(2)
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第四章器官培养植物器官培养主要是指包括离体的根、茎、叶、花器和果实、种子的无菌培养。
以器官作为外植体进行离体培养的植物种类最多,应用的范围也最广,它是植物组织培养中最主要的一个方面。
植物器官培养不仅是研究器官生长、营养代谢、生理生化、组织分化和形态建成的最好材料和方法,而且在生产实践上具有重要的应用价值。
如利用茎、叶和花器培养建立的试管培养物,可在短期内提高繁殖速率,从而实现名、优、特、新品种的快速繁殖;利用茎尖培养可以获得脱毒试管苗,解决品种的退化问题;将植物器官作诱变处理和培养可获得突变株,进行细胞的突变育种。
另外,器官培养也是种质保存的有效手段。
第一节根的培养离体根的培养是进行根系生理和代谢研究最优良的实验体系。
因为根系生长快,代谢强,变异小,加上无菌和不受微生物的干扰,可以通过改变培养基的成分来研究其营养吸收、生长和代谢的变化;在工厂化生物反应器系统中通过工艺调控实现根的大规模培养不受环境和季节的限制,可以随时随地生产离体根的培养物,进行药物、微量活性物质及一系列次生代谢产物的工厂化生产。
另一方面通过根细胞的培养可再生植株,用于生产实践。
一、根无性繁殖系的建立1.外植体根的培养材料一般来自无菌种子发芽产生的幼根或植株根系经消毒处理后的切段。
2.根无性繁殖系的建立将种子消毒后在无菌条件下萌发,待根伸长后从根尖一端切取长1.2cm的根尖(或植株的根系经表面灭菌后)接种于培养基中。
这些根的培养物生长甚快,几天后发育出侧根。
待侧根生长约1周后,即切取侧根的根尖进行扩大培养,它们又迅速生长并长出侧根,又可切下进行培养,如此反复切接就可得到从单个根尖衍生的无性繁殖系。
二、培养方法1.植株的再生培养根离体培养再生出植株的方法是:先诱导离体根形成愈伤组织,再在再分化培养基上诱导芽的分化,进而形成小植株。
如果愈伤组织先分化形成根,则往往抑制芽的形成。
2.固氮培养将具有固氮作用的根瘤菌接种到禾谷类等作物的试管苗根系中,并在诱瘤剂的诱导下使根瘤菌侵入试管苗根部结瘤固氮,从而实现谷物直接利用生物固氮的捷径。
第1篇一、实验目的1. 理解植物组织培养的基本原理和操作步骤。
2. 掌握无菌操作技术,包括消毒、接种等。
3. 学习植物器官培养的过程,包括愈伤组织的诱导、分化以及再生植株的形成。
4. 观察并分析植物器官培养过程中的各种现象,加深对植物生长发育机制的理解。
二、实验原理植物组织培养是利用植物细胞的全能性,通过无菌操作将植物器官、组织或细胞在人工控制的培养条件下进行培养,使其生长发育成完整的植株。
实验过程中,植物激素的添加和培养条件的调控对愈伤组织的形成和器官分化起着关键作用。
三、实验材料与试剂1. 实验材料:小麦种子、香蕉叶片、胡萝卜块根。
2. 试剂:70%乙醇、氯化汞、MS培养基、2,4-D、6-BA、蔗糖、琼脂等。
四、实验方法与步骤1. 无菌操作:将实验材料用70%乙醇和氯化汞消毒后,用无菌水冲洗干净,放置在超净工作台上进行接种。
2. 愈伤组织诱导:a. 将小麦种子接种于MS培养基中,添加2,4-D和6-BA,置于培养箱中培养。
b. 将香蕉叶片切成小块,接种于MS培养基中,添加2,4-D和6-BA,置于培养箱中培养。
c. 将胡萝卜块根切成小块,接种于MS培养基中,添加2,4-D和6-BA,置于培养箱中培养。
3. 愈伤组织分化:a. 当愈伤组织形成后,调整培养基中激素比例,诱导愈伤组织分化成根和芽。
b. 将分化出的芽和根接种于新的培养基中,继续培养。
4. 再生植株形成:a. 当芽和根生长到一定程度后,将其移植到土壤中,培养成完整的植株。
五、实验结果与分析1. 愈伤组织诱导:实验结果表明,在不同植物材料中,愈伤组织的诱导效果不同。
小麦种子和香蕉叶片的愈伤组织诱导效果较好,而胡萝卜块根的愈伤组织诱导效果较差。
2. 愈伤组织分化:在调整培养基中激素比例后,愈伤组织分化成根和芽。
小麦种子愈伤组织分化出较多的根和芽,香蕉叶片愈伤组织分化出较多的芽,而胡萝卜块根愈伤组织分化出的根和芽较少。
3. 再生植株形成:将分化出的芽和根移植到土壤中,大部分植株成功生长。