透析法去除红细胞渗透性低温保护剂的实验研究
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一、实验目的1. 了解渗透现象的基本原理;2. 掌握渗透实验的方法和步骤;3. 分析渗透实验结果,得出结论。
二、实验原理渗透是指溶液中溶质粒子通过半透膜,从低浓度溶液向高浓度溶液扩散的现象。
半透膜是一种只允许水分子通过,而阻止溶质粒子通过的膜。
本实验采用红细胞的渗透脆性实验来观察渗透现象。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜血液、生理盐水、0.9%氯化钠溶液、1.0%氯化钠溶液、2.0%氯化钠溶液、3.0%氯化钠溶液;2. 仪器:显微镜、试管、滴管、吸管、试管架、记号笔。
四、实验步骤1. 将新鲜血液采集至试管中,加入抗凝剂,轻轻摇匀;2. 将血液分层,取上层血浆放入另一试管中;3. 将血浆分为5份,分别加入不同浓度的氯化钠溶液;4. 观察并记录红细胞在不同浓度氯化钠溶液中的溶血现象;5. 分析实验结果,得出结论。
五、实验结果与分析1. 在0.9%氯化钠溶液中,红细胞未发生溶血现象;2. 在1.0%氯化钠溶液中,红细胞开始出现溶血现象;3. 在2.0%氯化钠溶液中,红细胞溶血现象明显;4. 在3.0%氯化钠溶液中,红细胞完全溶血。
根据实验结果,可以得出以下结论:1. 渗透现象在红细胞渗透脆性实验中得到了体现;2. 红细胞在低浓度氯化钠溶液中具有渗透压,可抵抗渗透压;3. 当氯化钠溶液浓度升高时,红细胞渗透压逐渐降低,直至无法抵抗渗透压而溶血;4. 红细胞在不同浓度氯化钠溶液中的溶血现象与渗透压大小有关。
六、实验总结通过本次实验,我们了解了渗透现象的基本原理,掌握了渗透实验的方法和步骤。
在实验过程中,我们观察到红细胞在不同浓度氯化钠溶液中的溶血现象,从而得出结论。
本次实验有助于提高我们对渗透现象的认识,为今后相关实验研究奠定基础。
红细胞渗透脆性试验一、原理红细胞渗透脆性试验(erythrocyte osmotic fragility test)是检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液抵抗力的一种半定量试验。
在低渗盐溶液中,由于水分渗入细胞内,红细胞会膨胀甚至破裂、溶血。
因此将红细胞加到不同浓度的低渗盐溶液中,观察发生溶血的情况,可判断红细胞对低渗盐溶液的抵抗能力。
红细胞开始出现溶血的低渗盐溶液浓度为开始溶血浓度,红细胞完全溶血的盐溶液浓度为完全溶血浓度。
当某些原因导致红细胞对低渗盐溶液抵抗能力降低时,红细胞容易破碎,发生溶血,称为红细胞渗透脆性增加;反之,称为红细胞渗透脆性降低。
二、检测方法(一)试剂与器材1、器材:分析天平、注射器、针头、无菌小试管等。
2、试剂:1% NaCl溶液:用分析天平称取分析纯 NaCl 1.000g,加少量蒸馏水溶解,于100ml容量瓶中用蒸馏水定容,置于玻璃瓶中灭菌后使用。
(二)操作1、取12支无菌小试管编号,配制不同浓度的 NaCI 溶液。
2、用肝素湿润的注射器抽取待检者血液1ml,向各管中加入1滴(中度以上贫血的标本加2滴)全血,轻轻摇,室温静置2小时后观察结果。
3、结果判断从1号管开始观察溶血情况。
不溶血:上清液透明无红色;开始溶血:上清液刚呈浅红色,管底有较多未溶的红细胞;完全溶血:溶液呈透明红色,管底无红细胞。
三、参考区间开始溶血 NaCl浓度:3.8~4.6g/L;完全溶血 NaCl浓度:2.8~3.2g/L四、注意事项1、NaCl必须干燥,可将分析纯氯化钠于100℃下烘干,置于干燥器中完全冷却后再准确称量使用。
2、所用器具应干燥清洁,避免出现人为溶血。
向试管内滴加血液时须将血液直接注入试剂中,不可沿管壁注入,混匀时动作须轻柔。
3、观察溶血情况时以白色背景为宜。
4、结果不易判断时,可低速短时离心后观察5、每次试验应以相同实验条件做正常对照。
被检者与正常对照开始溶血管的 NaCI浓度相差0.4g/L即有诊断价值。
冰冻红细胞去甘油技术研究新进展袁君; 唐雯; 栾建凤【期刊名称】《《临床输血与检验》》【年(卷),期】2019(021)005【总页数】3页(P558-560)【关键词】冰冻红细胞; 甘油去除技术【作者】袁君; 唐雯; 栾建凤【作者单位】210002 东部战区总医院输血科【正文语种】中文【中图分类】R457.1为了避免低温对红细胞造成的溶液损伤、脱水损伤及胞内外的冰晶损伤,冰冻红细胞制备过程中需要加入低温保护剂。
但是,多数的低温保护剂都具有不同程度的毒性,直接输入人体内会造成巨大的损害[1,2]。
因此,我们在输注冰冻红细胞前需要对其低温保护剂甘油进行清除[3]。
早期,甘油去除方法经历了沉降法、一步离心法、多步稀释离心法、透析法、透析超滤法的发展,但是由于这些方法给红细胞带来的渗透性损伤、机械性损伤以及洗脱时间长、去甘油后的红细胞不符合国家标准等缺点,一种连续去除甘油的微流膜装置于2014年被Ratih E.提出,除了能够降低红细胞的损伤程度以外,还大大缩短了甘油的洗脱时间,约3分钟完成,但是这个装置目前还没有临床应用的报道[4]。
1 沉降法1.1 原理在pH为5.2~6.1的环境中,红细胞膜的脂蛋白能够与血浆中的γ球蛋白形成可逆复合物。
冰冻红细胞液的pH为7,加入非电解质后,离子强度降低使得离子间引力变小,红细胞与球蛋白结合沉降;加入电解质后,pH升高,离子强度升高引力变大,红细胞与球蛋白解离后成为悬浮红细胞[5]。
1.2 方法利用上述原理,1963年,Huggins首先使用沉降法去除冰冻红细胞中的甘油并应用于临床。
他先在冰冻红细胞中加入高渗的50%的葡萄糖溶液进行洗涤,再用10%的蔗糖溶液洗涤,完成上述步骤后用生理盐水洗涤一次将红细胞悬浮在生理盐水中。
之后,日本的偶田幸男[6]也利用高浓度葡萄糖和大分子物质右旋糖酐等作为沉降剂来获得悬浮红细胞,该法红细胞回收率为(89.25±4.17)%。
第1篇一、实验背景腹膜透析(Peritoneal dialysis,PD)是一种通过腹膜作为半渗透膜,利用透析液清除血液中代谢废物及多余水分的肾脏替代疗法。
它适用于各种原因导致的急性或慢性肾功能衰竭患者。
本实验旨在通过模拟腹膜透析过程,探讨腹膜透析疗法在清除血液中代谢废物方面的效果。
二、实验目的1. 了解腹膜透析的基本原理和操作步骤。
2. 探讨腹膜透析在清除血液中代谢废物方面的效果。
3. 评估腹膜透析疗法的可行性和安全性。
三、实验材料与设备1. 实验材料:透析液、葡萄糖溶液、氯化钠溶液、尿素、肌酐、尿酸等模拟血液成分的试剂。
2. 实验设备:透析袋、透析管、注射器、恒温箱、离心机、分光光度计等。
四、实验方法1. 实验分组:将实验对象分为实验组和对照组,每组10只小鼠。
2. 实验操作:a. 将实验组小鼠的腹膜切开,暴露腹膜。
b. 将透析袋通过透析管与腹膜腔相连,向腹膜腔注入透析液。
c. 在恒温箱中维持透析液温度恒定。
d. 对照组小鼠进行常规饲养。
3. 数据采集:a. 实验前,分别采集实验组和对照组小鼠的血液样本,检测血液中尿素、肌酐、尿酸等指标。
b. 实验结束后,再次采集实验组和对照组小鼠的血液样本,检测血液中尿素、肌酐、尿酸等指标。
c. 对实验数据进行分析和处理。
五、实验结果1. 实验组小鼠血液中尿素、肌酐、尿酸等指标较对照组显著降低。
2. 实验组小鼠的生存质量较对照组显著提高。
六、实验分析与讨论1. 腹膜透析疗法能够有效清除血液中的代谢废物,改善肾功能衰竭患者的症状。
2. 实验结果表明,腹膜透析疗法在清除血液中尿素、肌酐、尿酸等代谢废物方面具有显著效果。
3. 腹膜透析疗法操作简便,易于推广和应用。
七、实验结论1. 腹膜透析疗法是一种安全、有效的肾脏替代疗法。
2. 腹膜透析疗法在清除血液中代谢废物方面具有显著效果,可应用于肾功能衰竭患者的治疗。
八、实验建议1. 进一步优化腹膜透析疗法,提高治疗效果。
一、实验目的1. 了解红细胞在不同浓度溶液中的渗透现象。
2. 掌握红细胞脱水现象的观察方法。
3. 分析红细胞在不同浓度溶液中的形态变化。
二、实验原理红细胞在等渗溶液中保持正常形态,在低渗溶液中吸水膨胀,在高渗溶液中失水皱缩。
本实验通过观察红细胞在不同浓度溶液中的变化,了解渗透现象及红细胞脱水现象。
三、实验材料1. 实验器材:显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、离心管、移液器、微量吸管、酒精灯、酒精棉球、蒸馏水、生理盐水、0.9%NaCl溶液、1.2%NaCl溶液、1.5%NaCl 溶液、2%NaCl溶液、3%NaCl溶液、4%NaCl溶液、5%NaCl溶液。
2. 实验试剂:生理盐水、0.9%NaCl溶液、1.2%NaCl溶液、1.5%NaCl溶液、2%NaCl溶液、3%NaCl溶液、4%NaCl溶液、5%NaCl溶液。
四、实验步骤1. 将载玻片用酒精棉球擦拭干净,待干燥。
2. 分别取0.9%、1.2%、1.5%、2%、3%、4%、5%NaCl溶液各1滴于载玻片中央,用微量吸管分别滴加生理盐水1滴于各浓度NaCl溶液中央。
3. 将盖玻片轻轻覆盖在溶液上,避免气泡产生。
4. 将载玻片置于显微镜下,观察红细胞在不同浓度溶液中的变化。
5. 将红细胞在生理盐水中的形态作为对照组,分别记录红细胞在低渗溶液(0.9%NaCl溶液)和高渗溶液(5%NaCl溶液)中的形态变化。
6. 对比分析红细胞在不同浓度溶液中的脱水现象。
五、实验结果与分析1. 在生理盐水中,红细胞形态正常,呈两面凹的圆饼状。
2. 在0.9%NaCl溶液中,红细胞吸水膨胀,边缘开始出现皱褶。
3. 在1.2%NaCl溶液中,红细胞进一步膨胀,皱褶明显。
4. 在1.5%NaCl溶液中,红细胞形态变化较大,皱褶增多,细胞膜开始出现破裂。
5. 在2%、3%、4%、5%NaCl溶液中,红细胞逐渐失水皱缩,细胞膜破裂,细胞内容物外溢。
六、实验结论1. 红细胞在不同浓度溶液中存在渗透现象,即红细胞在低渗溶液中吸水膨胀,在高渗溶液中失水皱缩。
实验名称:细胞冷冻复苏实验实验日期:2023年11月10日实验人员:张三、李四、王五一、实验目的1. 熟悉细胞冷冻和复苏的操作步骤。
2. 掌握细胞冻存过程中的保护剂选择和浓度控制。
3. 了解不同冷冻复苏方法对细胞活力的影响。
二、实验原理细胞冷冻复苏技术是将细胞置于超低温环境中,使细胞代谢活动减缓或停止,从而实现长期保存的技术。
复苏过程是将冻存的细胞恢复到正常生理状态,使其重新生长和分裂。
三、实验材料1. 细胞:小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)2. 培养基:DMEM培养基3. 保护剂:二甲基亚砜(DMSO)4. 冻存管:无菌冻存管5. 液氮:液氮罐6. 移液器:移液器、枪头7. 培养箱:细胞培养箱8. 显微镜:倒置显微镜9. 台盼蓝染色液四、实验方法1. 细胞培养:将MEF细胞接种于培养皿中,置于培养箱中培养至对数生长期。
2. 细胞冻存:(1)将细胞用DMEM培养基洗涤2次,收集细胞。
(2)用移液器将细胞重悬于含有10% DMSO的DMEM培养基中,使细胞浓度为1×10^6个/mL。
(3)将细胞悬液转移至无菌冻存管中,每管1.5 mL。
(4)将冻存管置于-80℃冰箱中过夜。
(5)将冻存管转移至液氮罐中,长期保存。
3. 细胞复苏:(1)将冻存管从液氮罐中取出,置于37℃水浴中快速融化。
(2)将细胞悬液转移至培养皿中,加入适量DMEM培养基,置于培养箱中培养。
4. 细胞计数:用血球计数板对复苏后的细胞进行计数。
5. 细胞活力检测:用台盼蓝染色法检测细胞活力。
五、实验结果1. 细胞冻存:冻存后细胞形态正常,无死亡。
2. 细胞复苏:复苏后细胞形态正常,生长良好。
3. 细胞计数:复苏后细胞数量为1.2×10^6个。
4. 细胞活力检测:台盼蓝染色结果显示,复苏后细胞活力为95%。
六、实验讨论1. 细胞冻存过程中,选择合适的保护剂和浓度对细胞活力至关重要。
本实验中,使用10% DMSO作为保护剂,可有效保护细胞免受冷冻损伤。
维持性血液透析患者红细胞寿命及相关危险因素的临床研究杜文慧;闫国胜;王梦凡;周亚;万静怡;张宏涛【期刊名称】《中国血液净化》【年(卷),期】2024(23)1【摘要】目的了解维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者红细胞寿命及其影响因素。
方法选取2023年2月—2023年5月就诊于河南省人民医院血液净化中心的MHD患者为研究对象,记录其一般资料及临床指标。
采用一氧化碳(CO)呼气法检测患者红细胞寿命,分为红细胞寿命正常组与红细胞寿命缩短组,统计血液透析患者红细胞寿命缩短的发生率,比较2组各项指标,对红细胞寿命与相关因素进行统计学分析。
结果①共纳入83例MHD患者,其中男性56例(占67.47%),年龄(51.55±10.08)岁,透析龄(45.80±28.20)月,原发病以糖尿病肾病居首位,占37.34%。
②MHD患者的红细胞寿命为29~126天,平均(60.83±29.66)天。
83例MHD患者发生红细胞寿命缩短49例,发生率为59.03%。
③多元线性回归结果显示血清白蛋白(β=0.163,P=0.048)、中性粒细胞淋巴细胞比值(β=-0.284,P=0.044)、甲状旁腺激素(β=-0.054,P=0.018)是红细胞寿命的独立影响因素。
结论MHD患者平均红细胞寿命缩短,红细胞寿命与中性粒细胞淋巴细胞比值、血清甲状旁腺激素及血清白蛋白水平独立相关。
【总页数】4页(P26-29)【作者】杜文慧;闫国胜;王梦凡;周亚;万静怡;张宏涛【作者单位】河南大学人民医院河南省人民医院肾内科、河南省肾脏病免疫重点实验室、河南省肾病临床医学研究中心;郑州大学人民医院、河南省人民医院肾内科;阜外华中心血管病医院肾内科【正文语种】中文【中图分类】R459.5【相关文献】1.维持性血液透析患者红细胞体积分布宽度及相关影响因素研究2.维持性血液透析患者脑梗死相关危险因素临床研究3.维持性血液透析患者CRP、Alb、Hb与感染的相关性及死亡危险因素调查研究4.维持性血液透析患者透析中低血压及相关危险因素的临床研究因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
红细胞膜通透性实验及分析一、本文概述Overview of this article本文旨在探讨红细胞膜通透性的实验方法及其分析。
红细胞作为血液中数量最多的细胞类型,其膜通透性的研究对于理解红细胞的功能、生理过程以及疾病机制具有重要意义。
通过深入研究红细胞膜的通透性,我们可以对血液疾病如溶血性贫血、红细胞增多症等有更深入的理解,从而为疾病的预防和治疗提供新的思路和方法。
This article aims to explore the experimental methods and analysis of red blood cell membrane permeability. As the most abundant cell type in the blood, the study of red blood cell membrane permeability is of great significance for understanding the function, physiological processes, and disease mechanisms of red blood cells. By conducting in-depth research on the permeability of red blood cell membranes, we can gain a deeper understanding of blood diseases such as hemolytic anemia and polycythemia, providing new ideas and methods for disease prevention and treatment.在本文中,我们将首先介绍红细胞膜的基本结构和功能,然后详细描述红细胞膜通透性实验的设计和实施过程,包括实验原理、实验材料、实验步骤以及实验结果的分析方法。
红细胞膜通透性的实验及分析一、准备材料:1.新鲜的全血样本2.生理盐水3.透析袋4.恒温水浴5.离心机6.吸光度计二、实验步骤:1.取适量全血样本,加入相等体积的生理盐水,轻轻混匀,得到稀释后的全血样本。
2.取一只透析袋,将稀释后的全血样本倒入袋中,确保袋子内不含气泡,并将袋口扎紧。
3.取一定量的生理盐水,使透析袋完全浸没在生理盐水中。
4.将装有透析袋和生理盐水的容器放入恒温水浴中,保持温度为37℃,并进行一段时间的孵育(一般为20分钟以上)。
5.取出透析袋,尽量沥干袋外的生理盐水,并将袋内的红细胞溶解,使溶液均匀。
6.将溶液转移到离心管中,进行离心,以除去残留的红细胞膜碎片并得到透析液。
7.取出透析液,利用吸光度计检测样本的光密度,记录吸光度值。
三、实验结果分析:通过测定透析液的吸光度,我们可以对红细胞膜的通透性进行分析。
吸光度值反映了透析袋中红细胞内部成分的渗透性。
在实验中,溶剂(生理盐水)中的水分子可以自由通过红细胞膜进入透析袋中的红细胞。
如果红细胞膜具有较好的渗透性,那么红细胞内的溶液成分也可以通过膜自由渗透至透析袋中,导致透析液的吸光度较高。
相反,如果红细胞膜渗透性差,那么溶液成分则不易透过膜,透析液的吸光度较低。
实验结果的具体分析可以根据吸光度值进行比较。
一般来说,吸光度值高的样本表明红细胞膜通透性较好,而吸光度值低的样本表明红细胞膜通透性较差。
除了比较吸光度值,还可以通过控制组进行进一步分析。
例如,可以将不同处理后的红细胞样本分为实验组和对照组,实验组为处理后的样本,对照组为未处理的样本。
通过比较两组样本的吸光度值,可以进一步确定红细胞膜通透性的变化。
此外,实验结果还可以与相关指标进行关联分析,如血液中溶质的浓度、渗透压等指标。
通过对相关指标的测量与实验结果进行对比分析,可以更加全面地了解红细胞膜通透性的情况。
总之,红细胞膜通透性实验是一种简单且常见的实验方法,通过测定透析液的吸光度可以初步判断红细胞膜的通透性,并可以与其他指标进行关联分析,更加全面地了解红细胞膜通透性的情况。
- 62 -①蚌埠医学院第一附属医院 安徽 蚌埠 233000洗涤红细胞和去白悬浮红细胞输注治疗自身免疫性溶血性贫血的效果朱翔① 许珣① 吴静①【摘要】 目的:探讨洗涤红细胞和去白悬浮红细胞输注治疗自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的效果。
方法:回顾性选取2020年3月—2023年3月蚌埠医学院第一附属医院收治的64例AIHA 患者作为研究对象。
根据治疗方法的不同将其分为试验组和对照组,各32例。
对照组输注去白悬浮红细胞,试验组输注洗涤红细胞。
比较两组输血后24 h 临床疗效,输血前、输血后24 h 相关指标,输血反应。
结果:试验组总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。
输血后24 h,两组血红蛋白(Hb)、红细胞计数(RBC)升高,网织红细胞百分比(Ret)、总胆红素(TBIL)水平降低,试验组Hb、RBC 高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。
两组输血反应发生率比较,差异无统计学意义(χ2=1.016,P >0.05)。
结论:对AIHA 患者而言,在输血治疗中输注洗涤红细胞的总体有效率高于输注去白悬浮红细胞,并且Hb 和RBC 的提升效果更加明显。
【关键词】 自身免疫性溶血性贫血 洗涤红细胞 输血 doi:10.14033/ki.cfmr.2024.02.016 文献标识码 B 文章编号 1674-6805(2024)02-0062-04 Effect of Transfusion of Washed Red Blood Cells and Removing White Suspended Red Blood Cells in the Treatment of Autoimmune Hemolytic Anemia/ZHU Xiang, XU Xun, WU Jing. //Chinese and Foreign Medical Research, 2024, 22(2): 62-65 [Abstract] Objective: To investigate the effect of transfusion of washed red blood cells and removing white suspended red blood cells in the treatment of autoimmune hemolytic anemia (AIHA). Method: Sixty-four AIHA patients admitted to the First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College from March 2020 to March 2023 were retrospectively selected as the study objects. According to the different treatment methods, they were divided into experimental group and control group, 32 cases in each group. The control group was transfused with removing white suspended red blood cells and the experimental group was transfused with washed red blood cells. The clinical efficacy 24 h after blood transfusion, relevant indexes before and 24 h after blood transfusion, and transfusion reaction were compared between the two groups. Result: The total effective rate of experimental group was higher than that of control group, and the difference was statistically significant (P <0.05). At 24 h after blood transfusion, hemoglobin (Hb) and red blood cell count (RBC) were increased, reticulocyte percentage (Ret) and total bilirubin (TBIL) levels were decreased, and Hb and RBC in experimental group were higher than those in control group, the differences were statistically significant (P <0.05). There was no significant difference in the incidence of blood transfusion reaction between the two groups (χ2=1.016, P >0.05). Conclusion: For AIHA patients, compared with transfusions of removing white suspended red blood cells, transfusions of washed red blood cells have a higher overall effective rate in transfusion therapy, and the effect is more obvious in the improvement of Hb and RBC. [Key words] Autoimmune hemolytic anemia Washed red blood cells Blood transfusion First-author's address: The First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College, Bengbu 233000, China 自身免疫性溶血性贫血(AIHA)发生机制较复杂,与人体免疫调节异常有关,当免疫功能紊乱后,机体会释放大量自身抗体,最终引发自身免疫性溶血性贫血。