关于生理学实验红细胞渗透脆性的测定课件

实验九红细胞的渗透脆性1、实验目的（1）学会测定红细胞脆性的方法和配制不同浓度的NaCl溶液,观察比较红细胞在等渗NaCl溶液和等渗尿素溶液中发生的不同情况。

（2）正确判断和记录实验结果，根据结果分析血浆晶体渗透压的生理意义,理解细胞外液渗透张力的相对恒定对维持细胞正常形态与功能的重要性。

2、实验原理将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中，可检查红细胞膜对于低渗盐溶液抵抗力的大小。

开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度，为该血液红细胞的最小抵抗力（正常约为0.40%～0.45%NaCl溶液）；出现完全溶血时的低渗盐溶液浓度，则为该血液红细胞的最大抵抗力（正常为0.30%～0.35%NaCl溶液）。

对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的脆性大，反之表示脆性小。

3、实验用品抗凝血液、小试管、试管架、滴管、1ml吸管、1%NaCl溶液、蒸馏水。

4、方法与步骤（1）取小试管12支，编号排列在试管架上。

（2）按表要求配制10种浓度的低渗盐溶液外加一支蒸馏水、一支1.9%尿素溶液。

（3）将兔心脏取的血液经抗凝处理后，给各式管内各加1滴，混匀后，静置30分钟后观察。

不同浓度的低渗盐溶液的配制1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1%氯化钠0.9 0.65 0.6 0.55 0.5 0.45 0.4 0.35 0.3 0.25蒸馏水0.1 0.35 0.4 0.45 0.5 0.55 0.6 0.65 0.7 0.75溶液浓度0.9 0.65 0.6 0.55 0.5 0.45 0.4 0.35 0.3 0.254、观察实验结果根据各管混合液的颜色和混浊度的不同，判断最大脆性和最小脆性。

（1）未发生溶血的试管：液体下层为混浊红色，上层为无色，表明无红细胞破裂。

（2）部分溶血的试管：液体下层为混浊红色，而上层出现透明红色，表明部分红细胞已破裂，称为不完全溶血。

出现不完全溶血的最大低渗盐溶液，是该血液红细胞的最小抵抗力，表示红细胞的最大脆性。

实验三红细胞脆性试验[实验目的]测定红细胞细胞膜对不同低渗溶液的渗透抵抗力。

亦即测定正常动物红细胞的渗透脆性。

[实验原理]正常的红细胞系混悬于等渗的血浆中，若置于高渗溶液内，则红细胞因失去内部液体而皱缩；反之，置于低渗溶液内，则水分进入红细胞，使红细胞两面凹陷的圆盘形变为球形，如继续膨大，即发生破裂溶解，形成溶血。

红细胞脆性试验就是测定红细胞对低于0.9％NaCl 溶液的耐受能力。

耐受力高者，红细胞不易破裂，即脆性低。

反之，耐受力低者，红细胞易于破裂，即脆性高。

凡上层液开始微呈淡红色，而极大部分红细胞下沉，称开始溶血或最小抗力（红细胞的最小抵抗力）。

凡液体呈均匀红色，管底无红细胞下沉，则称完全溶血或最大抗力（红细胞的最大抵抗力）。

正常红细胞的最小渗透抵抗力为0.4~0.5NaCl%溶液，最大渗透抵抗力为0.3~0.35%NaCl 溶液。

一般说，刚成熟的红细胞膜的渗透脆性较小，而衰老的红细胞膜的渗透脆性较大。

生理学上将与血浆渗透压相等的溶液称为等渗溶液；而将能维持红细胞正常形态、大小和悬浮于其中的溶液称为等张溶液。

等渗溶液不一定是等张溶液（如1.99%的尿素溶液），但等张溶液一定是等渗溶。

[实验动物]鸡[器材及药品]试管，试管架，吸管，新鲜血（或去纤维蛋白血），1％NaCl，蒸馏水。

[方法与步骤]1．先将试管分别排列在试管架上，按下表把1%NaCl稀释成不同浓度的低渗溶液，每管溶液均为2毫升。

2．采取血液，并在上列各管中各加入大小相等的血液l滴，然后用拇指堵住试管口，将试管慢慢倒置一、二次，使血液与管内盐水混合均匀。

3．在室温下静置~21小时，观察结果。

4．依下列标准判定出有无溶血、不完全溶血或完全溶血的氯化钠百分比浓度。

（1）试管内液体下层为浑浊红色，上层为无色或极淡色的液体，说明红细胞没有溶解。

（2）小试管内液体下层为浑浊红色，说明有未溶解的红细胞，而上层出现透明红色，说明有部分红细胞破坏和溶解，称为不完全溶血。

红细胞渗透脆性实验Measuring for erythrocyte osmotic fragility【教学对象与学时】一、教学对象：五年制本科二、学时：4学时【预习要求】预习红细胞生理特性【目的要求】一、操作：学习用试管法测定红细胞渗透脆性二、理论：1.了解红细胞渗透脆性实验的原理。

2. 观察红细胞对不同渗透张力的细胞外溶液的抵抗力，进一步理解细胞外液渗透张力对维持红细胞正常形态与功能的重要性。

【重点和难点】一、重点1. 准确配制不同渗透张力的溶液，掌握正确的红细胞渗透脆性测量方法。

2. 理解红细胞渗透脆性实验的原理。

二、难点1. 准确配制不同渗透张力的溶液。

2. 掌握正确的红细胞渗透脆性测量方法。

【教学过程设计】1.课前提问和预习检查。

2.讲解红细胞渗透脆性实验的原理。

3.介绍不同渗透张力溶液的配制法和抗凝血液的制备。

4. 学生分组进行实验，观察红细胞对蒸馏水、1.9%尿素溶液和不同浓度的NaCl溶液的抵抗力。

5.实验结束前汇总全班实验结果，讨论实验结果，理解实验结果出现的原因。

【课前预习检查或提问】一、何谓红细胞渗透脆性？其正常值是多少？二、影响红细胞渗透脆性的因素有哪些？【课前讲解】一、实验设计的原理将红细胞悬浮于低渗盐溶液中，水将在渗透压的作用下渗入细胞，于是红细胞发生膨胀，由正常的双凹圆碟形(图1A)变成球形（图1B），并开始破裂而发生溶血。

红细胞在低渗盐溶液中发生膨胀破裂的现象称红细胞渗透脆性。

但红细胞对低渗盐溶液具有一定的抵抗力，这种抵抗力的大小可作为衡量红细胞渗透脆性的指标。

对低渗盐溶液抵抗力小，表示渗透脆性高；相反，则表示渗透脆性低。

同一个体的红细胞对低渗盐溶液的抵抗力并不相同。

将血液滴入不同浓度的低渗NaCl溶液中可检测其抵抗力的大小，刚开始出现溶血的NaCl溶液浓度为该血液中红细胞的最小抵抗力；出现完全溶血溶液浓度，为该血液中红细胞的最大抵抗力。

前者代表红细胞的最大渗透脆性，后者代表红细胞的最小渗透脆性。

二、影响红细胞渗透脆性的因素有哪些？红细胞自身因素;凡能影响红细胞表面积/体积的因素均可影响红细胞渗透脆性，如珠蛋白数量不足或完全缺乏、遗传性球形细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血伴继发球形细胞增多、缺铁性贫血、红细胞寿命、等实验因素：血液放置时间较长（一般不能超过6小时）、低渗盐溶液的浓度不准确、实验器具未清洁干燥、试管编号错误、向试管内滴加血液或混匀含红细胞的液体时动作用力过大、有凝血、抗凝剂用量过多、等【课前讲解】一、实验设计的原理将红细胞悬浮于低渗盐溶液中，水将在渗透压差的作用下渗入细胞，于是红细胞发生膨胀，由正常的双凹圆碟形变成球形，并开始破裂而发生溶血。

红细胞在低渗盐溶液中发生膨胀破裂的现象称红细胞渗透脆性。

但红细胞对低渗盐溶液具有一定的抵抗力，这种抵抗力的大小可作为衡量红细胞渗透脆性高低的指标。

对低渗盐溶液抵抗力小，表示渗透脆性高；相反，则表示渗透脆性低。

同一个体的红细胞对低渗盐溶液的抵抗力并不相同。

将血液滴入不同浓度的低渗NaCl溶液中可检测其抵抗力的大小，刚开始出现溶血的NaCl溶液浓度为该血液中红细胞的最小抵抗力；出现完全溶血溶液浓度，为该血液中红细胞的最大抵抗力。

前者代表红细胞的最大渗透脆性，后者代表红细胞的最小渗透脆性。

生理学上将渗透压与血浆的渗透压相等的溶液称为等渗溶液；能使悬浮于其中的红细胞保持正常体积和形态的溶液称为等张溶液。

等渗溶液不一定是等张溶液，如1.9%的尿素溶液虽是等渗溶液，但不是等张溶液；而等张溶液溶液一定是等渗溶液，如浓度为0.85%的NaCl 溶液既是等渗溶液又是等张溶液。

成败关键（注意事项）1. 血液最好新鲜制备。

2. 准确配制不同浓度的低渗盐溶液。

3. 所有玻璃器皿要求干燥清洁。

4. 向试管内滴加血液时不可用力挤压，不可将血泡沫注入试管。

混匀含红细胞的液体时动作应轻，以免造成溶血。

5. 观察溶血情况时以白色为背景。

6. 为使各管加血量相同，加血时持针角度应一致。

红细胞渗透脆性试验[实验目的]：学习测定红细胞渗透脆性的方法[实验原理]：将红细胞放置于等渗溶液中，红细胞的形态不发生改变。

放置于高渗和低渗盐溶液中红细胞的形态均出现改变，置于高渗液中，红细胞出现皱缩；置于低渗液中则发生膨胀，最后破裂，细胞内容物溢入血浆或溶液，这种现象称为溶血。

将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中，可以检查红细胞对低渗溶液的抵抗力。

开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度，为该血液红细胞的最小抵抗力（约0.40%~0.45%NaCl 溶液），而完全溶血则为该血液红细胞的最大抵抗力（约0.30%~-0.45%NaCl溶液）。

对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的脆性大，反之表示脆性小，最大抵抗力到最小抵抗力的范围，称脆性范围。

[实验对象]家兔[实验器材]试管架、5 ml试管十支、2 ml吸管两支、注射器、1%NaCl溶液、蒸馏水、枸椽酸钠。

[实验步骤]（一）低渗盐溶液的配制取试管十支，洗净烤干，用玻璃铅笔编号，排在试管架上，参照下表向各试管中加入1%NaCl溶液，然后再加入蒸馏水，每管溶液均2 ml。

试管号1 2 3 4 5 6 7 8 9 10试管蒸馏水（ml）0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 1.10 1.20 1.30 1.40 1.50 NaCl浓度（%）0.70 0.65 0.60 0.55 0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25（二）枸椽酸钠血的制备家兔颈部解剖，剥离颈总动脉，插管，将血放入烧杯内，烧杯内事先加入3.8%枸椽酸钠溶液，血与枸椽酸钠溶液的比例为9:1，轻摇烧杯使之混匀。

[观察项目]用注射器向每个试管内加入兔血一滴，用拇指堵住试管口，将试管颠倒2~3次（不要用力振荡以免溶血），在室温下静置1小时，然后观察各试管的透明度以判断是否溶血。

1、试管内下层为混浊红色，上层为无色或淡黄色液体，说明红细胞尚未破坏。

2、试管内下层为混浊红色，上层为透明淡红色，则表明红细胞部分溶解，才出现溶血的低渗盐溶液的浓度，为红细胞的最小抵力（最大脆性）。

实验三红细胞脆性试验[实验目的]测定红细胞细胞膜对不同低渗溶液的渗透抵抗力。

亦即测定正常动物红细胞的渗透脆性。

[实验原理]正常的红细胞系混悬于等渗的血浆中，若置于高渗溶液内，则红细胞因失去内部液体而皱缩；反之，置于低渗溶液内，则水分进入红细胞，使红细胞两面凹陷的圆盘形变为球形，如继续膨大，即发生破裂溶解，形成溶血。

红细胞脆性试验就是测定红细胞对低于0.9％NaCl 溶液的耐受能力。

耐受力高者，红细胞不易破裂，即脆性低。

反之，耐受力低者，红细胞易于破裂，即脆性高。

凡上层液开始微呈淡红色，而极大部分红细胞下沉，称开始溶血或最小抗力（红细胞的最小抵抗力）。

凡液体呈均匀红色，管底无红细胞下沉，则称完全溶血或最大抗力（红细胞的最大抵抗力）。

正常红细胞的最小渗透抵抗力为0.4~0.5NaCl%溶液，最大渗透抵抗力为0.3~0.35%NaCl 溶液。

一般说，刚成熟的红细胞膜的渗透脆性较小，而衰老的红细胞膜的渗透脆性较大。

生理学上将与血浆渗透压相等的溶液称为等渗溶液；而将能维持红细胞正常形态、大小和悬浮于其中的溶液称为等张溶液。

等渗溶液不一定是等张溶液（如1.99%的尿素溶液），但等张溶液一定是等渗溶。

[实验动物]鸡[器材及药品]试管，试管架，吸管，新鲜血（或去纤维蛋白血），1％NaCl，蒸馏水。

[方法与步骤]1．先将试管分别排列在试管架上，按下表把1%NaCl稀释成不同浓度的低渗溶液，每管溶液均为2毫升。

2．采取血液，并在上列各管中各加入大小相等的血液l滴，然后用拇指堵住试管口，将试管慢慢倒置一、二次，使血液与管内盐水混合均匀。

3．在室温下静置~21小时，观察结果。

4．依下列标准判定出有无溶血、不完全溶血或完全溶血的氯化钠百分比浓度。

（1）试管内液体下层为浑浊红色，上层为无色或极淡色的液体，说明红细胞没有溶解。

（2）小试管内液体下层为浑浊红色，说明有未溶解的红细胞，而上层出现透明红色，说明有部分红细胞破坏和溶解，称为不完全溶血。

生理学实验讲义实验三影响红细胞渗透脆性及血液凝固的因素一、影响红细胞渗透脆性的因素【实验目的】1、本实验学习测定红细胞渗透脆性的方法。

2、加深对细胞外液渗透张力在维持红细胞正常形态与功能重要性方面的理解。

3、观察不同因素对红细胞渗透脆性的影响。

【实验原理】将红细胞悬浮于等渗NaCI液中，其形态不变。

若置于低渗NaCI溶液中则发生膨胀破裂，此现象称为红细胞渗透脆性。

但红细胞对低渗盐溶液具有一定抵抗力，其大小可用NaCI溶液浓度的高低来表示。

将血液滴入不同浓度的低渗NaCI溶液中，开始出现溶血现象的NaCI溶液浓度为该血液红细胞的最小抵抗力（正常为0.42-0.46%NaCI溶液）。

出现完全溶血现象时的NaCI溶液浓度为该红细胞的最大抵抗力（正常为0.28-0.32%NaCI溶液）。

前者代表红细胞的最大脆性（最小抵抗力），后者代表红细胞最小脆性（最大抵抗力）。

生理学上将能使悬浮于其中的药细胞保持正常形态的溶液称为等张溶液，不能跨过细胞膜的微粒所形成的力，但等渗溶液并不一定是等张溶液（如1.9%的尿素溶液）。

【材料与方法】一、实验对象家兔二、器械药品：试管架、小试管45支、载玻片、盖玻片、注射器、8号注射针头、棉签，1%NaCI 溶液、0.85%氯化钠溶液、蒸馏水，1.9%尿素溶液、地塞米松、皂甙。

三、方法与步骤（一）配制不同浓度的低渗NaCI溶液取口径相同的干洁小试管36支，分别编号排列在三个试管架上，按下表分别向各试管内加入1%NaCI溶液和蒸馏水混匀，配制从0.68-0.24%12种不同浓度的NaCI低渗溶液，每管总量均为2.5ml。

表7-1 不同浓度低渗氯化钠溶液的配制试剂试管编号1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 121%NaCl(ml) 1.7 1.6 1.5 1.4 1.3 1.2 1.1 1.0 0.9 0.8 0.7 0.6蒸溜水（ml） 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9NaCl浓度% 0.68 0.64 0.60 0.56 0.52 0.48 0.44 0.40 0.36 0.32 0.28 0.24实验结果皂甙（ml）另取9支小试管，在三个试管架中分别编号13-15，分别加入0.85%NaCI溶液、1.9%尿素和蒸溜水2.5ml。

红细胞的渗透脆性的实验报告一、实验目的1、理解红细胞渗透脆性的概念及其在生理学和病理学中的意义。

2、掌握测定红细胞渗透脆性的实验方法和操作技能。

3、观察不同浓度的低渗溶液对红细胞的影响，绘制红细胞渗透脆性曲线。

二、实验原理正常红细胞在等渗的血浆中能够保持其形态和功能的完整性。

但当红细胞处于低渗溶液中时，水分子会通过细胞膜进入细胞内，导致红细胞膨胀甚至破裂，这种现象称为红细胞的溶血。

红细胞对低渗溶液具有一定的抵抗力，其抵抗能力的大小可以用红细胞渗透脆性来表示。

红细胞渗透脆性越大，说明红细胞对低渗溶液的抵抗力越小，越容易发生溶血；反之，红细胞渗透脆性越小，说明红细胞对低渗溶液的抵抗力越大，越不容易发生溶血。

三、实验材料与设备1、材料新鲜血液（抗凝）氯化钠溶液（浓度分别为 025%、030%、035%、040%、045%、050%、055%、060%、065%、070%、075%、080%、085%、090%）2、设备离心机显微镜吸管试管刻度吸管四、实验步骤1、制备不同浓度的氯化钠溶液用蒸馏水将氯化钠配制成浓度从 025%到 090%，间隔 005%的一系列溶液，每种溶液各 5ml，分别置于编号 1 至 14 的试管中。

2、采集血液用消毒过的注射器从健康人的静脉中抽取 2ml 新鲜血液，注入抗凝管中，轻轻摇匀。

3、稀释血液用吸管吸取 02ml 抗凝血液，加入到 2ml 生理盐水中，制成 1:10 的稀释血液。

4、加样用刻度吸管吸取 02ml 稀释血液，分别加入到上述 14 支装有不同浓度氯化钠溶液的试管中，轻轻摇匀。

5、静置将所有试管置于室温下静置 30 分钟。

6、离心选择适当的转速和时间对各试管进行离心。

7、观察结果取出离心后的试管，轻轻倾斜，观察上清液的颜色和透明度，判断是否有溶血现象发生。

上清液无色透明，表示红细胞未发生溶血；上清液呈现淡红色，表示部分红细胞发生溶血；上清液呈现红色，表示红细胞完全溶血。

红细胞的渗透脆性一、实验目的及原理目的：测定动物的红细胞对低渗溶液的脆性。

原理：将红细胞放置于等渗溶液中，红细胞的形态不发生改变。

放置于高渗和低渗盐溶液中红细胞的形态均出现改变，至于高渗液中，红细胞出现皱缩；置于低渗液中则发生膨胀，最后破裂，细胞内容物溢入血浆或溶液，这种现象称为溶血。

将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中，可以检查红细胞对低渗溶液的抵抗力。

开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度，为该血液红细胞的最小抵抗力（约0.40％~0.45％ NaCl溶液），而完全溶血则为该血液红细胞的最大抵抗力（约0.30％~0.35％ NaCl溶液）。

对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的脆性大，反之表示脆性小，最大抵抗力到最小抵抗力的范围，称脆性范围。

二、实验准备1.实验对象：家兔2.实验药品：1％氯化钠、蒸馏水3.实验器材：5ml试管10支、2ml滴管2支、5ml注射器、试管架、棉签4.环境：安静的实验室三、实验学时1学时四、实验方法1.低渗盐溶液的配制取试管10支，洗净烤干，编号后依次排列于试管架上，参照下图向各试管中加入1％ NaCl溶液，然后再加入蒸馏水，每管溶液均2ml。

2.采血从家兔颈总动脉取血2ml，立即向每个试管各加血液1滴，轻摇试管，使血液与盐溶液充分混合。

静置30分钟。

3.实验观察按各试管液体颜色和透明度判断是否溶血、部分溶血或完全溶血。

①未发生溶血试管内下层为混浊红色，上层为无色或淡黄色液体，说明红细胞尚未破坏。

②部分溶血试管内下层为混浊红色，上层为透明淡红色，表示红细胞部分溶解，最先出现部分溶血的盐溶液为红细胞的最大脆性（即最小抵抗力）。

③完全溶血试管内溶液呈透明红色，管底无红细胞，说明红细胞全部破裂。

最先出现完全溶血的盐溶液为红细胞的最小脆性（即最大抵抗力）。

五、实验结果认真完成实验，将实验结果记录于下表。

红细胞的渗透脆性观察项目试管编号未发生溶血部分溶血完全溶血六、思考1.什么是红细胞的渗透脆性？红细胞的渗透脆性一般是指红细胞，在低渗溶液中发生溶血的性能，称为渗透脆性。