《环境微生物检测》PPT课件

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试验中的培养基中加入了酸碱指示剂紫色的溴甲酚紫，产 酸时指示剂变黄，同时培养基中口朝下放置了装满同样培 养基的小试管，产气时小试管中会封闭一段气体，被作为 培养中是否产气的依据。
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B.平板分离
目的：鉴定产酸产气菌的染色特征、好氧与否、 芽孢特征。
根据：大肠菌群在固体培养基上可以在空气生 长，革兰氏染色呈阴性和不生芽孢的特性
传播方式：除了饮水不卫生外，更多的是通过食物以及 昆虫血液传播
如疟疾是蚊子传播，食用生肉感染肉类寄生虫等
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11.2.2 水质指示微生物——大肠菌群
大肠菌群是人肠道中正常的寄生菌，是 一群需氧和兼性厌氧的，能在37℃，24h内 使乳糖发酵产酸产气的革兰阴性无芽孢杆 菌，又称总大肠菌群。
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中国水质标准中规定的大肠菌群数(个／L)
饮用水
≤3
游泳池水
≤ 100
地表水 第一级 ≤ 500
第二级 ≤ 10000
第三级 ≤ 50000
Hale Waihona Puke PTP课件1811.2.2.1 大肠菌群检测的目的和原理
(一) 生理习性与肠道病原菌类似，即在外界的生存 时间基本一致；（代表性）
(二) 在粪便中的数量较多；（比病原菌多，不会漏 检）
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11.1.2 空气微生物污染的控制
控制空气微生物污染，必须减少空气 中微生物的来源，特别是微生物污染严重 的医院，肉类加工等行业废水废物的处理 消毒工作；搞好室内外环境卫生。减少微 生物滋生；绿化造林也是净化市气、除尘、 杀菌和吸收有害气体的重要途径；另外空 气消毒和空气净化器对净化空气也起一定 的作用。
大肠菌群作为水体被粪便污染的指标， 也是饮水、食品等的细菌学常规检验指标 之一，通常用“大肠菌群指数”和“大肠 菌群值”表示。
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这些寄生菌通常与人体构成互利共生关系， 当人体免疫力下降时，他们则有可能成为引起肠 炎的致病菌，他们中的个别变种还会变为极具毒 性的病菌。
如大肠埃希氏菌可引起幼儿腹泻，引起美国 和日本传染病流行的O-157也是大肠埃希氏菌的 变种菌株。
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(3)过滤法
过滤法是在负压下抽滤空气，使空气 通过经灭菌的微孔滤膜，空气中细菌被截 留在膜上，然后将膜转移到培养基上，使 滤膜与培养基完全贴紧，倒置于37℃恒温 箱培养24h。通过计平板上的菌落数，测定 空气中细菌的数量。
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空气中微生物总数目前用CFU／m3， 计量。即每立方米空气落下的细菌数，一 般以室内空气中细菌总数500－1000 CFU ／m3以作为空气污染指标。
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在此阶段，先将上 一试验产酸的菌种 移植于品红亚硫酸 钠培养基(远藤氏培 养基)或伊红美蓝培 养基表面（划线接 种是为了分离出单 菌落，防治菌落不 纯干扰结果），这 一步氧气可以阻止 厌氧芽抱杆菌的生 长，而上述培养基 所含染料物质也有 抑制许多其它细菌 生长的作用。
远藤氏培养基 划线分离单菌落
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(2) 自然沉降法
自然沉降法是靠重力的作用将空气中 携带微生物的悬浮颗粒沉陷到直径9cm的 营养琼脂培养基平皿上，经37℃，48h培养 后计生长的细菌菌落数。
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由于沉降法是被动采样，会造成很大的误差。 通过前苏联奥梅梁斯基公式换算出。
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通常设置5个采样点，即室内墙角对角 线交点为1个采样点，该交点与四墙角连续 的中点为另外4个采样点。采样高度为1.2～ 1.5m。采样点心远离墙壁1m以上，并避开 空调、门窗等空气流通处。检测点数越多 越准确，以20～30个测点数为宜，最少测 点数为5～6。
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日本建议的评价空气清洁程度的标淮见表
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11.2 水的微生物检测及控制 11.2.1 水质的细菌学检测
我国《生活饮用水卫生标准》GB5749-85关于 饮用水中的细菌标准与大肠菌群数量标准为
1．细菌总数≤100个/ml 2．大肠菌群≤ 3 个/L
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一、伤寒杆菌
症状：轻型病例中， 只造成腹泻。
在较严重或较典
型的病例中，除腹泻
外，症状还包括呕吐、
“米汤样”大便、腹
疼和昏迷等。病程短，
严重的常常在症状出
现后12h内死亡。
电镜照片使用的是结晶紫
单染色，若革兰氏染色则
为阴性红色
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四、寄生虫
真菌一般通过接触传染，不通过水传播，
引起疾病的原生动物和小型后生动物也由水传播，通常 称为寄生虫。在目前发现的几千种原生动物中只有20种 能引起人类疾病
病症：伤寒或副伤寒。 表现：持续发烧，牵涉
到淋巴组织，脾脏肿大， 躯干上出现红斑，胃肠
壁溃疡产生腹泻。
伤寒沙门氏菌
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二、痢疾杆菌
痢疾杆菌可引起 细菌性痢疾(与阿 米巴痢疾不同)， 症状为急性腹泻， 通常大便中有血 及粘液，某些病 例中有发烧。
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三、霍乱弧菌
病症：霍乱
(三)检验技术较简单;（操作方便）
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11.2.2.2 大肠菌群的检测方法
常用的大肠菌群的检测方法有多管发酵法 与膜滤法。 1．多管发酵法（即最大可能数法， MPN ） 发酵法是大肠菌群测定的国家标准方法。分为 三步。 A．初发酵 目的：水中大肠菌群存在与否的初步判断。
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A.初发酵
方法为将水样置于糖类液 体培养基中，在一定温度 下，经一定时间培养后， 观察有无酸和气体产生， 即有无发酵，而初步确定 有无大肠菌群存在。如采 用含有葡萄糖或甘露醇的 培养基，则包括副大肠杆 菌；如不考虑副大肠杆菌， 则用乳糖培养基。由于水 中除大肠菌群外，还可能 存在其它发酵糖类物质的 细菌，所以培养后如发现 气体和酸并不一定能肯定 水中含有大肠菌群，还需 根据这类细菌的其它特性 进行下两阶段的检验。
第11章 环境微生物检测
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11.1 空气中微生物的检测与控制
11.1.1 空气中微生物的检测方法
(1)撞击法
撞击法是采用撞击式空气微生物采 样器，通过抽气动力作用，使空气通过狭 缝或小孔而产生高速气流，使悬浮在空气 中的带菌轮子撞击到转动的营养琼脂培养 基平皿上。经37℃、48h培养，计算出每 立方米空气中所含的细菌菌落数。