多糖类化合物提取及分离纯化方法

蒲公英多糖的提取、分离纯化、鉴定及其生物活性的初步研究蒲公英多糖的提取、分离纯化、鉴定及其生物活性的初步研究引言蒲公英（Taraxacum officinale）是一种常见的野生草本植物，广泛分布于全球各地。

它富含营养成分和生物活性物质，特别是多糖类化合物，对人体健康具有重要作用。

尽管已有部分研究关注蒲公英多糖的提取和生物活性，但对于其分离纯化和鉴定等方面的研究仍然相对较少。

因此，本研究旨在对蒲公英多糖进行提取、分离纯化、鉴定，并评估其生物活性。

一、材料与方法1.1 材料采集新鲜的蒲公英，来自于上海市郊区的草地。

材料干燥后研磨成粉末，在60°C下干燥保存。

1.2 提取蒲公英多糖将蒲公英粉末与10倍体积的80%乙醇混合搅拌，过夜静置。

然后使用离心机以3000 rpm的速度离心10分钟，收集上清液，过滤并浓缩，得到蒲公英醇提取物。

1.3 分离纯化蒲公英多糖将蒲公英醇提取物溶于适量的纯水，利用葡萄糖处理蒲公英醇提取物，在60°C水浴中水解1小时。

随后，使用活性炭吸附和甲醇沉淀来去除杂质。

最后，通过酒精沉淀分离纯化蒲公英多糖。

1.4 鉴定蒲公英多糖采用凝胶渗透色谱（GPC）和红外光谱（IR）进行蒲公英多糖的鉴定。

GPC可确定多糖的分子量分布，而IR可以分析其官能团。

1.5 评估生物活性通过体外实验，评估蒲公英多糖的抗氧化和抗肿瘤活性。

抗氧化活性通过DPPH自由基清除法进行测定，抗肿瘤活性通过MTT法测定细胞的增殖。

结果与讨论经过提取、分离纯化和鉴定，得到了蒲公英多糖。

凝胶渗透色谱结果显示多糖具有多种不同的分子量，分子量范围在100 kDa至500 kDa之间。

红外光谱显示多糖中存在羟基、甲基和羧基等官能团。

在抗氧化活性评价中，蒲公英多糖表现出了显著的自由基清除能力。

浓度为1 mg/ml的蒲公英多糖对DPPH自由基的清除率达到了60%。

这表明蒲公英多糖具有潜在的抗氧化活性。

在抗肿瘤活性评估中，蒲公英多糖在不同浓度下对人类肝癌细胞株HepG2的生长具有抑制作用。

2022年8月Aug.2022第46卷第4期Vol.46,No.4热带农业工程TROPICAL AGRICULTURAL ENCINEERING海南桥头地瓜硒多糖的提取、分离和分析①郭利芳1)②苏鹏2)周树权1)（1海南职业技术学院海南海口570216；2海南省商业学校海南海口570100）摘要通过分离等步骤探索海南澄迈县桥头镇地瓜硒多糖结构特征。

以桥头地瓜为原料进行硒多糖提取，以蛋白托出率为考察指标进行脱蛋白工艺优化。

实验表明，蛋白脱出率达89.71%，硒含量为1.5μg/g 。

对硒多糖进行纯化，采用红外光谱等手段对组分分析，包括理化性质、糖苷键类型等，结果表明，纯化后硒多糖为不定型状态，以条状等不规则形式存在。

关键词桥头镇；地瓜；硒多糖；提取分离分析中图分类号S531Extraction Separation and Analysis of Selenium Polysaccharide from Sweet Potato inQiaotou,HainanGUO Lifang 1)SU Peng 2)ZHOU Shuquan 1)(1Hainan College of Vocation and Technique,Haikou,Hainan 570216;2Hainan Business School,Haikou,Hainan 570100)Abstract The structural characteristics of selenium polysaccharide of sweet potato in Qiaotou Town,Chengmai County,Hainan Province were explored through separation and other steps.The selenium poly ‐saccharide was extracted from Qiaotou sweet potato,and the deproteinization process was optimized with protein elution rate as the investigative index.The results show that the protein removal rate is 89.71%and the selenium content is 1.5μg/g 。

植物多糖的分离纯化一、植物多糖的提取1 溶剂提取法1．1 水提法水对植物组织的穿透力强，提取效率高，在生产上使用安全、经济。

用水作溶剂来提取多糖时，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提。

一般植物多糖提取采用热水浸提法，该法所得多糖提取液可直接或离心除去小溶物；或者利用多糖不溶于高浓度乙醇的性质，沉淀提纯多糖；但由于不同性质或不同相对分子质量的多糖沉淀所需乙醇浓度不同，它也可以用于样品中不同多糖组分的分级分离；还可按多糖不同性质在粗分阶段利用混合溶剂提取法对植物中不同的多糖进行分离；其中，以乙醇沉淀最为普遍。

但以根茎为主的植物体,细胞壁多糖含量高,热水直接提取率不高。

此时为破坏细胞壁,增加多糖的溶出，有两种处理方法:一为酶解,二为弱碱溶解。

1．2酸碱提法有些多糖适合用稀酸提取，并且能得到更高的提取率。

但酸提法只在一些特定的植物多糖提取中占有优势，目前报道的并不多。

而且即使有优势，在操作上还应严格控制酸度，因为酸性条件下可能引起多糖中糖苷键的断裂。

有些多糖在碱液中有更高的提取率，尤其是提取含有糖醛酸的多糖及酸性多糖。

采用的稀碱多位为0．1mol／L氢氧化钠、氢氧化钾，为防止多糖降解，常通以氮气或加入硼氢化钠或硼氢化钾。

同样，碱提优势也是因多糖类的不同而异。

与酸提类似，碱提中碱的浓度也应得到有效控制，因为有些多糖在碱性较强时会水解。

另外，稀酸、稀碱提取液应迅速中和或迅速透析，浓缩与醇析而获得多糖沉淀。

1．4 生物酶提取法酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一项生物技术，在多糖的提取过程中，使用酶可降低提取条件，在比较温和的条件中分解植物组织，加速多糖的释放或提取。

此外，使用酶还可分解提取液中淀粉、果胶、蛋白质等的产物，常用的酶有蛋白酶，纤维素酶，果胶酶等。

1．5 超声提取法超声波是一种高频率的机械波，其主要原理是利用超声波产生的“空化作用”对细胞膜的破坏，有利用植物有效成分的释放，而且超声波能形成强大的冲击波或高速射流，有效地减小、消除与水相之间的阻滞层，加大了传质效率，有助于溶质的扩散。

枸杞中枸杞多糖的提取及分离纯化工艺的研究石油化工与工艺 05160111 倪宜海指导教师：史高峰教授摘要本文主要对枸杞黄酮类化合物的微波辐射辅助提取取枸杞粉末和提取最佳工艺进行研究。

取得的主要研究成果如下：加入一定料液比(1：8、1：10、1：12)的水溶液，放入微波搅拌器中放置一定时间（40-100min)，温度70-100摄氏度之间，功率（300-600w）。

取出过滤，取其溶液放置旋转蒸发仪中进行蒸馏。

枸杞渣滓放回搅拌器中进行二次提取，提出多糖混合液醇沉冷冻干燥后，为褐色絮状粉末固体。

确定最佳工艺：提取温度90 ℃；料水比1∶10(W∶V)，提取时间2h，功率600。

得出多糖再进行Sevage法脱蛋白，冷冻干燥后，为乳白色絮状粉末固体粗多糖。

在最佳条件下枸杞粗多糖提取率可达12.23%。

枸杞粗蛋白含量6.98%关键词：微波搅拌，冷冻干燥，Sevage法脱蛋白，分离纯化AbstractIn this paper, the main flavonoids of Lycium barbarum's the microwave-assisted extraction of radiation from wolfberry extract powder and the best technology for research. The main research results obtained are as follows: by adding some liquid ratio (1:8,1:10,1:12) aqueous solution into the microwave stirrer placed a period of time (40-100min), the temperature between 70-100 degrees Celsius , power (300-600w). Remove the filter, select the solution placed in Rotary Evaporator distillation. Barbarum waste back into the blender in the second extract, the polysaccharide mixture of freeze-drying alcohol, in order to brown flocculent solid powder. To determine the optimum process: extraction temperature 90 ℃; feed water ratio 1:10 (W: V), extraction time 2h, Power 600. Polysaccharide derived from another protein Sevage law, after freeze-drying for white flocculent powder Polysaccharide solid. Under the best conditions in barbarum Polysaccharide extraction rate of 12.23%. Barbarum 6.98% crude protein content.KEY WORDS: microwave mixing, freeze-drying, Sevage method of removing protein, purification 1.前言枸杞中的化学成分比较复杂，主要包括蛋白质、氨基酸、微量元素、糖类、脂肪、脂肪酸、菇类、甾醇类、维生素、色素类、生物碱类。

多糖分离纯化简介多糖又称多聚糖，是由10个以上的单糖通过苷键连接而成的，具有广泛生物活性的天然大分子化合物。

多糖是由多个单糖分子缩合、失水而成，是一类分子结构复杂且庞大的糖类物质。

凡符合高分子化合物概念的碳水化合物及其衍生物均称为多糖。

多糖在自然界分布极广，亦很重要。

其广泛分布于自然界高等植物、藻类、微生物与动物体内。

多糖是细胞中一类非常重要的大分子物质。

糖类是细胞膜上受体分子的重要组成成分，是细胞识别和信息传递等功能的参与者，是一类非特异性广谱免疫调节剂和重要的生命物质材料，广泛参与各项生命活动。

近年来的研究表明，多糖在免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化和降血糖等方面显示出良好的应用前景，是现代医学和食品功能化学共同关注的焦点。

天然多糖来源广泛且化学成分复杂，粗多糖中通常伴随着一些蛋白质、脂肪和色素等物质，不利于多糖的结构鉴定及后续活性分析，因此需要进行分离纯化：即除杂和组分分离。

多糖类物质结构复杂，由不同分子质量的中性或酸性糖混合组成，具有微观不均一性，其分析和结构解析一直是糖组学和糖生物学研究的重点。

多糖分离纯化的核心是获得低分散性、电荷均一的多糖，以适宜后续结构解析和活性功能的深入分析，故多糖需分离纯化才能得到均一性多糖。

百欧泰经过多年技术积累，建立了完善的多糖提取和纯化平台。

样本经研磨粉碎后、热水提取、醇沉、除蛋白、脱色、脱脂等一系列成熟的工艺后得到粗多糖，粗多糖经离子交换色谱及凝胶色谱分离纯化后可获得对应单一、均一的多糖组分。

此外根据原料中多糖特性，针对性地选择预处理和分离纯化方法（柱层析、膜分离法或者分级沉淀法等），可高效分离纯化各种中性多糖、酸性多糖和黏多糖以及糖复合物等。

多糖分离纯化服务多种方法1 柱色谱法纤维素柱层析法：实现分级解离；但流量小、耗时长阴离子交换柱层析法：可用于中性和酸性多糖的分离，以及不同中性多糖的分离凝胶柱层析法:实现连续进样、在线监测、重复性好，样品收集和纯化效率高2 分级沉淀法操作原理：不同的多糖组分在低醇或酮中有不同的溶解度3 盐析法操作原理：不同分子量的多糖组分在一定浓度的盐溶液中其溶解度不同4 超声波辅助提取法利用超声波的机械效应和空化作用破坏细胞壁、细胞膜等生物组织。

植物多糖的提取和分析方法鲁瑞娟【摘要】多糖是由很多单糖分子通过糖苷链相连而形成的天然高分子化合物,多糖结构复杂,种类繁多,并且常与脂质和蛋白质结合成多糖复合物,提取和分析困难.植物多糖常用的提取方法有溶剂提取法、超滤法、酶解法、超声辅助提取法、超临界流体萃取法、微波辅助提取法、闪式提取法和高压蒸煮法等.多糖的检测方法可分为两大类,直接测定多糖包括高效毛细管电泳法、气相色谱法、高效液相色谱法和酶法等,利用单糖的性质进行测定,其中利用单糖缩合反应而建立的方法最多,如滴定法,比色法.本文重点介绍植物多糖的提取方法和分析方法,旨在促进植物多糖的开发利用.【期刊名称】《天津药学》【年(卷),期】2015(027)002【总页数】3页(P67-69)【关键词】植物多糖;提取方法;分析方法【作者】鲁瑞娟【作者单位】天津市药品检验所,天津300070【正文语种】中文【中图分类】R284.2多糖是由单糖聚合成的天然生物大分子，结构复杂，分子量大，极性大。

随着人们对多糖研究的深入，越来越多的多糖被分离出来，并且发现这些多糖具有很多的生物学活性和潜在的应用价值[1，2]。

但多糖结构复杂，种类繁多，并且常与脂质和蛋白质结合成多糖复合物，这给植物多糖的提取和分析带来不少困难。

本文对植物多糖的提取方法和分析方法进行简要综述。

植物多糖常用的提取方法有溶剂提取法、超滤法、酶解法、超声辅助提取法、超临界流体萃取法、微波辅助提取法、闪式提取法和高压蒸煮法等[3-10]。

1.1 溶剂提取法溶剂提取法是提取多糖的最常用的方法。

常用的粗多糖的提取方法有水提取、碱提取和酸提取。

水提法是多糖传统的提取方法，因为酸法和碱法提取中，易破坏多糖的结构，增加多糖损失。

李艳红[11]提取山楂多糖采用传统热水法的最佳条件为：提取时间6 h，温度80 ℃，液固比15∶1，山楂多糖的提取率为1.67%。

Ai等[12]用水在70 ℃提取3 h得到水溶性苹婆籽多糖，残渣再使用0.05 mol/L NaOH溶液采用40 ℃提取2 h，得到碱溶性多糖，碱提取的浓度不应太高，太高会破坏多糖的结构增加多糖的损失。

天然药物多糖的主要生物活性及分离纯化方法一、本文概述天然药物多糖是一类具有广泛生物活性的天然高分子化合物，其独特的结构和功能使得它们在医药、食品、化妆品等多个领域具有广阔的应用前景。

本文旨在全面概述天然药物多糖的主要生物活性以及分离纯化方法，以期为相关领域的研究和应用提供有价值的参考。

我们将深入探讨天然药物多糖的主要生物活性，包括其免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、降血糖等多方面的药理作用。

这些生物活性使得天然药物多糖在预防和治疗多种疾病方面具有独特的优势。

我们将详细介绍天然药物多糖的分离纯化方法。

由于天然药物多糖的来源广泛，结构复杂，因此其分离纯化过程往往具有一定的挑战性。

我们将从样品的采集、预处理、提取、分离、纯化以及结构鉴定等方面，系统地介绍天然药物多糖的分离纯化流程，以期为相关实验提供技术指导和参考。

通过本文的阐述，我们期望能够为读者提供全面而深入的天然药物多糖知识，进一步推动其在医药、食品、化妆品等领域的应用和发展。

二、天然药物多糖的主要生物活性天然药物多糖作为一大类生物活性物质，具有多种独特的生物活性，这些活性使其在医药、保健品、食品等领域具有广泛的应用前景。

以下将详细介绍天然药物多糖的几种主要生物活性。

免疫调节作用：许多天然药物多糖具有显著的免疫调节作用，能够激活并增强机体的免疫功能。

它们可以促进免疫细胞的增殖与分化，提高免疫细胞的活性，从而增强机体的免疫力，对预防和治疗免疫相关疾病具有重要意义。

抗肿瘤作用：许多研究表明，天然药物多糖具有抑制肿瘤细胞生长、诱导肿瘤细胞凋亡、增强抗肿瘤药物疗效等作用。

这些作用使得天然药物多糖成为肿瘤治疗中的重要辅助药物，具有广阔的应用前景。

抗氧化作用：天然药物多糖中的许多成分具有显著的抗氧化活性，可以清除体内的自由基，减轻氧化应激损伤，保护细胞和组织免受氧化损伤。

这对于预防和治疗氧化应激相关疾病具有重要意义。

降血糖作用：部分天然药物多糖具有降低血糖的作用，可以通过提高胰岛素敏感性、促进胰岛素分泌、抑制肝糖原分解等途径来调节血糖水平。

中图分类号：ＴＳ２３；文献标识码：Ａ；文章篇号：１００７－２７６４（２００４）０３－００１４４－０５５　多糖的提取、分离与纯化叶凯贞　黎碧娜　王奎兰　谭志伟　（广东工业大学轻工化工学院，广州　５１００９０）　摘 要：介绍了动物，植物和菌类多糖的提取方法，并针对粗多糖中所含的杂质不同，采用不同的方法加以去除，以达到多糖与杂质的分离。

　关键词：多糖；提取；分离；纯化　Extraction and Separation of PolysaccharideYe Kaizhen, Li Bina, Wang Kuilan, Tan Zhiwei(Faculty of Chemical Engineering and Light Industry GDUT., Guangzhou 510090)Abstract: The extraction methods of polysaccharide from animals, plants and fungus were introduced in this paper. According to the impurities of every kind of polysaccharide, different ways of removal of those impurities adopted to gain purified polysaccharide were discussed.Key words: polysaccharide; extraction; separation; purification多糖(polysaccharides,PS)又称多聚糖。

其存在于动物、高等植物、微生物(细菌和真菌)及海藻等机体中。

多糖具有复杂、多方面的生物活性和功能,可作为广谱免疫促进剂，具有免疫调节功能，如多糖能治疗风湿病、慢性病毒性肝炎、癌症等免疫系统疾病，甚至能抗AIDS病毒[1]；还具有抗感染、抗放射、抗凝血、降血糖、降血脂作用；促进核酸与蛋白质的生物合成作用；能控制细胞分裂和分化，调节细胞的生长与衰老，而且多糖作为药物其毒性极小，因而多糖的研究已引起人们的极大兴趣。