红参加工过程中人参皂苷化学反应HPLC_MS_MS研究_肖盛元
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高效液相色谱法检测红参中人参皂苷及人参二醇的含量
王飞;蒋俊春;袁力
【期刊名称】《黑龙江医药科学》
【年(卷),期】2022(45)4
【摘要】目的:探讨高效液相色谱法检测红参中人参皂苷及人参二醇的含量。
方法:选用高效液相色谱法,UlitimateXBC18色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,进样量10μL,流速1.00mL/min,柱温30℃,人参皂苷检验波长203nm,人参二醇检测波长230nm。
结果:人参皂苷Rg1、Rg2、Rb1、Rb2、Rc、Rf及人参二醇线性回归方程结果均呈良好的线性关系,七种成分回收率在96.24%~102.10%,符合要求。
结论该方法重复性、稳定性好,精密度高,且方便快捷,适用于人参皂苷及人参二醇的定量检测。
【总页数】2页(P99-100)
【作者】王飞;蒋俊春;袁力
【作者单位】商丘市食品药品检验中心理化一室;河南省食品药品检验所微生物室【正文语种】中文
【中图分类】R917
【相关文献】
1.二醇柱高效液相色谱法测定人参提取液中的人参皂苷
2.反相高效液相色谱法测定含红参组方注射液中人参皂苷3组分含量
3.固相萃取-超高效液相色谱法测定人参
中5种原人参二醇型人参皂苷的含量4.高效液相色谱法-蒸发光散射检测器法测定红参及育精胶囊中人参皂苷Rg_1和Re的含量
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HPLC测定环翠楼高丽红参中人参皂苷compound K的含量黄建军;李桂荣;姜志辉;姜鸿骁;张崇禧【摘要】目的测定环翠楼高丽红参中人参皂苷compound K的含量.方法采用HPLC色谱法.结果环翠楼高丽红参中人参皂苷compound K的含量为0.035%.结论环翠楼高丽红参具有抗癌活性.【期刊名称】《人参研究》【年(卷),期】2016(028)004【总页数】2页(P26-27)【关键词】环翠楼高丽红参;人参皂苷compound K【作者】黄建军;李桂荣;姜志辉;姜鸿骁;张崇禧【作者单位】山东大学(威海)海洋学院,威海264209;山东药品食品职业学院,威海264210;环翠楼红参生物科技股份有限公司,威海264211;山东大学(威海)海洋学院,威海264209;山东大学(威海)海洋学院,威海264209【正文语种】中文人参来源于五加科人参属植物人参Panax ginseng C.A.Mey.的干燥根,主产于我国东北,尤以吉林省产量最大,质量最佳,是我国传统的珍贵药材,人参根据加工方法不同,分为鲜人参、生晒参、红参等产品。
人参是百草之王,红参是人参的熟制品,能大补元气,复脉固脱,益气摄血功效。
红参的加工方法是用人参经过浸润、清洗、分选、蒸制、烘干等工序加工而成。
红参在蒸制过程中,因为热处理会发生化学反应,成份上发生变化,生成红参特有的生理活性物质,例如人参皂苷-Rg3、Rh2、CK等抗癌活性成分,具有抑制癌细胞增长的作用。
在补虚方面红参强于白参,久服红参可以补气、滋阴、益血、生津、强心、健胃、提高人体免疫力、抗疲劳、抗辐射、抑制肿瘤、调整人体内分泌系统。
在癌症手术后,红参还能够减轻放化疗后产生的许多毒副作用[1~4]。
环翠楼高丽红参系由产自韩国的高丽园参的新鲜根经韩国红参加工工艺和中国红参加工技术加工而成。
本文采用HPLC色谱法测定环翠楼高丽红参中人参皂苷compound K的含量,为环翠楼高丽红参抗癌活性提供理论依据。
人参皂甙R_e R_(g1)标准对照品的高效液相色谱制备研究陈波;潘振球;冯家力;王春娥;赖天兵
【期刊名称】《实用预防医学》
【年(卷),期】2001(8)5
【摘要】目的研究制备分离纯化高纯度人参皂甙Re、Rg1(GinsenosideRe、Rg1)标准对照品的高效液相色谱(HPLC)方法 ,为人参类保健食品及中草药中人参皂甙Re、Rg1的标准化定量分析方法提供标准对照品。
方法人参总皂甙制成甲醇溶液 ;干法上柱 ,低压硅胶柱层析 ;步分离 ;真空浓缩 ;HPLC分离制备 ;真空浓缩结晶 ;纯度检测 ;产品。
结果该法所得产品纯度大于 99% (HPLC) ,制备收得率大于 80 %。
结论方法简便 ,生产周期短 ,产品质量高。
【总页数】3页(P333-335)
【关键词】人参皂甙;Re;Rg1;标准对照品;制备型高效液相色谱;中药
【作者】陈波;潘振球;冯家力;王春娥;赖天兵
【作者单位】湖南省疾病预防控制中心
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
【相关文献】
1.超高效液相色谱-串联质谱法测定发酵调味品中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2方法的研究 [J], 杨春林;李佳峻;胡强;吴蔚;吕小艇;李超豪;刘昊
2.油茶皂苷对照品制备及高效液相色谱定量法的研究 [J], 赵敬娟;杜先锋
3.高效液相色谱-质谱分析指导下制备黄芩中系列黄酮成分对照品 [J], 郭鹤男;杨学东;刘军;郑文凤
4.制备高效液相色谱分离纯化茶氨酸对照品 [J], 肖伟涛;朱小兰;陈波;姚守拙
5.高效液相制备色谱制备一枝蒿酮酸对照品 [J], 马雁鸣;赵芸;吴韬;斯拉甫;廖立新;阿吉艾克拜尔.艾萨
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红参的炮制工艺与高效液相色谱法对比红参与生晒参的研究翟 宁1,贺 燕2,李玉春2,张语迟2 (1.吉林市食品药品监督管理局稽查分局,吉林 吉林 132011;2.长春中医药大学研究生学院,吉林 长春 130117)[摘 要] 目的:通过总皂苷含量测定与观察外观优选红参最佳的炮制工艺,比较出炮制后红参与生晒参中主要单体皂苷变化。
方法:通过高效液相色谱法对炮制后红参与人参中主要单体皂苷进行比较。
结果:最佳炮制人参的工艺为在一个小时内温度由20℃提升至100℃,在100℃的条件下蒸制3h、蒸制结束后将人参从蒸箱中取出,于50℃条件下烘干。
炮制后人参皂苷Rb1、Rc显著减少,Rg3、20S-Rg3显著增多。
结论:该条件下蒸制出的人参炮制品色泽鲜艳、有光泽,人参皂苷相对较高。
炮制后红参大分子皂苷水解,易生成红参中一些特有的小分子的皂苷成分。
[关键词] 红参;人参总皂苷;人参单体皂苷;高效液相色谱法中图分类号:R283 文献标识码:B 文章编号:1004-0412(2007)17-1852-02 人参蒸制后干燥者称为“红参”,人参药性偏凉,适用于气阴不足,红参药性偏温,适用于气虚阳虚者。
另外红参与人参相比化学成分种类与含量发生了变化[1,2],红参的作用较生晒人参缓和。
现对红参的泡制工艺及以高效液相色谱法对比红参与晒参结果报告如下。
1 资料与方法 1.1 仪器与药品:Varian紫外可见分光光度计;W aters600半制备型高效液相系统;E LS D2000检测器;电子分析天平; K Q2500E型医用数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);人参皂苷Rg1、Re、Rg3、Rb1、Rc、Rb2、Rd、(吉林大学药学院提供);醋酸:Fisher试剂公司(色谱纯)、乙腈Fisher试剂公司(色谱纯),其他试剂为分析纯(北京化工厂)。
水为超纯水(1812MΩ・c m)1.2 方法1.2.1 红参炮制:在蒸制的过程中,将直径在2~3c m的鲜参清洗干净,头稍向下摆放在带有屉布的蒸参箱中,鲜参周围用屉布盖全,以保证气流稳定。
2015版药典人参、西洋参含量测定方法对比研究金建;孙国刚;董新【摘要】研究相同人参、西洋参样品分别采用2015版药典人参、西洋参含量测定方法测定人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量差异变化,分析研究导致结果的差异原因.结论 :相同人参、西洋参样品分别采用2015版药典人参、西洋参含量测定方法测定结果的人参皂苷Rb1含量存在较大差异,分析导致差异的主要原因为供试品制备方法的差异.【期刊名称】《人参研究》【年(卷),期】2018(030)001【总页数】2页(P15-16)【关键词】2015版药典;人参;西洋参;人参皂苷Rg1、Re、Rb1;供试品制备【作者】金建;孙国刚;董新【作者单位】集安人参研究所,集安 134200;集安人参研究所,集安 134200;集安益盛药业股份有限公司,集安 134200【正文语种】中文人参、西洋参是名贵的中药材,均来自于五加科人参属植物,药用为根,现代应用广泛。
人参是五加科植物人参Panax ginseng C.A.Mey的干燥根,其性温、味甘,具有大补元气,强心固脱,补脾益肺、安神生津的功效,用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴等证;现代医学和药理学证明,人参具有提高机体免疫力、消除疲劳、抗癌、护肝等活性。
人参经洗净,自然阴干、晒干或烘干制成的人参商品称为“生晒人参”。
经蒸制而成的人参商品则称为“红参”。
西洋参为五加科植物西洋参Panax quinquefolium L.的根,具有补肺阴,清火,养胃生津的功效,可用于肺虚咳血、潮热、肺胃津亏、烦渴、气虚等;大补元气、强心固脱、安神生津。
人参皂苷是人参、西洋参的主要活性成分之一,人参、西洋参均为2015版药典收载品种,通过对比2015版药典中人参、西洋参含量测定方法的异同,对相同人参样品分别采用人参、西洋参含量测定方法测定,分析测定结果,研究导致差异原因。
1 材料1.1 仪器与试剂安捷伦液相色谱仪1200、色谱柱:Waters Symmetry C185μm。
图1 人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Re、Rg1混和对照品高效液相色谱图图2 朝鲜红参样品高效液相色谱图注:1.人参皂苷Rg1;2.人参皂苷Re;3.人参皂苷Rb1;4.人参皂苷Rb2;5.人参皂苷Rb32.1.2 对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Re、Rg1适量,用甲醇配制成浓度分别为200µg·ml-1、200µg·ml-1、4µg·ml-1、200µg·ml-1、200µg·ml-1的混和对照品溶液,即得。
2.1.3 供试品溶液的制备取样品适量,粉碎,过四号筛,取约2g,精密称定,置具塞三角瓶中,精密加入70%甲醇100ml,密塞,称定重量,加热回流2小时,放冷,再称定重量,用70%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,弃去初滤液,精密量取续滤液50ml,置蒸发皿中蒸干,残渣加水溶解并转移至5ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置已处理好的OASIS-C18小柱,依次用水、25%甲醇、70%甲醇各5ml洗脱,收集70%甲醇洗脱液,蒸干,残渣加甲醇溶解并转移至2ml量瓶中,加甲14批朝鲜红参中人参皂苷Rb 1、Rb 2、Rb 3、Re 、Rg 1含量依次为2.0~10.3mg •g -1,0.6~2.9 mg •g -1,0.1~1.3mg •g -1,0.4~2.4mg •g -1,1.1~5.9mg •g -1,基本情况为含量人参皂苷Rb 1>Rg 1>Rb 2>Re>Rb 3,规格为天>人>地,每个规格个体大(即规格号小)的>个体小(即规格号大)的。
本研究同时测定了4批国产红参的含量,结果所含皂苷类成分基本与朝鲜红参一致。
3.2 本研究将14批朝鲜红参各规格之间相互匹配,结果除地30因含量低外,其它规格相似度均大于0.90,将14批样品与生成的对照指纹图谱相比较,结果同样除地30外,相似度均大于0.90,说明各规格之间相似度较高。
人体肠内厌氧细菌对人参皂苷-Re 的代谢(摘要)赵 锐1,程克棣2,李向高3(1.大连市医药科学研究所,大连 116013;2.中国医学科学院药物研究所,北京 100050;3.吉林农业大学中药材学院,吉林 130118)中图分类号:R284 文章编号:1006-0111(2000)05-0355-1A 本文利用人体肠内厌氧细菌,在中国国内首次对人参中主要单体皂苷———人参皂苷-Re 的化学成分进行了生物修饰的研究。
作者从人参皂苷-Re 的人体肠内厌氧细菌培育物中分离得到了七个单体化合物,即人参皂苷-Re 人体肠内厌氧细菌代谢产物MC -Ⅰ、MC -Ⅱ、MC -Ⅲ、MC -Ⅳ、MC -Ⅴ、MC -Ⅵ和MC -Ⅶ。
这些化合物中,除MC -Ⅶ为代谢底物外,其余均为人体肠内厌氧细菌的次生代谢产物,其中的MC -Ⅱ、MC -Ⅳ和MC -Ⅴ为国内外首次从人参皂苷-Re 的肠内细菌培养中分离得到的单体化合物。
作者应用FT -IR (KBr )、FAB -MS 、EI -MS 、1HNM R 、13CNMR 、DEPT 、1H -1HCOSY 、1H -1HTOCSY 、NOESY 、HETCOR 、HMQC 、HMBC 等现代化的化学结构检测方法,通过对获得的科学数据进行综合分析,并参考国内外有关文献报道,准确地鉴定了各个代谢产物的化学结构。
即:MC -1为(3β-6 α-12 β-3,12-二羟基达玛-24(25)-烯-6,20-β-D -吡喃葡萄糖苷,MC -Ⅱ为(3β,6α,12β)-3,12-二羟基达玛-24(25)-烯-6,20-β-D -吡葡萄糖苷,MC -Ⅲ为(3β,6α,12β)-3,12-二羟基达玛-24(25)-烯-6,20-β-D -吡喃葡萄糖苷,MC -Ⅳ为20,,25-环-达玛-3β,6α,12β。
-三醇,MC -Ⅴ为6α-氧-[2-氧-(α-L -吡喃鼠李糖)-β-D 吡喃葡萄糖]-达玛-3β,12β,20(R ),25-四醇,MC -Ⅵ为达玛-24-烯-3β,6α,12β,20(S )四醇,MC -Ⅶ为6α-氧-[2-氧-(α-L -吡喃鼠李糖)-β-D -吡喃葡萄糖]-20(S )-β-D -吡喃葡萄糖达玛-24-烯-3β,12β-二醇。
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红参加工过程中人参皂苷化学反应HPLC/MS/MS研究肖盛元,罗国安(清华大学化学系,北京 100084)摘 要:目的 研究红参加工过程中人参皂苷的变化机制。
方法 采用HPL C/M S/M S方法对生晒人参中主要皂苷类成分进行结构推测。
用HPL C/M S方法对生晒人参和红参中的二醇型、三醇型和齐墩果酸型人参皂苷进行比较。
结果 在红参加工过程中丙二酸单酰人参皂苷酯键水解产生相应的人参皂苷,脱羧产生相应的糖乙酰化人参皂苷。
在加工过程中达玛烷型人参皂苷主要发生20位糖苷键水解和异构化。
齐墩果酸型皂苷发生酯苷键和醚苷键的水解。
结论 人参加工成红参后皂苷类成分发生较大的变化,人参加工可能产生红参的特异成分。
关键词:人参;炮制;人参皂苷中图分类号:R284 文献标识码:A 文章编号:02532670(2005)01004004C hemical reactions of ginsenosides in red ginseng processing by HPLC/MS/MSX IAO Sheng-y ua n,LUO Guo-a n(Cente r of Analysis,Depa rtment o f Chemistry,T sing hua U niv ersity,Beijing100084,China) Abstract:Objective To study the reaction m echa nism o f ginseno sides in red ginseng processing. Methods The ma jo r constituents o f ginseno sides w ere assigned by HPLC/M S/M S data.Ginseno sides (including pro topanax adiol,pro to panax atriol,a nd olea nolic acid ty pe)of white g inseng and red ginseng w ere co mpared by HPLC/M S data.Results Ginsenosides w ere produced from esterolysis of cor respo nding malonyl ginsenosides in red ginseng processing.Ano ther reaction of malonyl ginsenosides in red ginseng pro cessing w as decarbo xy lated to pro duce co rrespo nding acetyl ginsenosides.Hydro lysis of g lycosidic bo nd at C20and iso merous reaction of C20w ere the m ain reaction of damma ra ne ty pe ginsenoside. High deg ree of estero lysis and glycosidic bond hydroly sis of olea nolic acid ty pe ginsenosides all occur red during the red ginseng processing.C onclusion Great changes of ginseno sides hav e been obviously fo und in processing ginseng to red ginseng.Special constituents of red ginseng could be produced in ginseng processing.Key words:Panax ginseng C.A.Mey;pro cessing;ginsenosides 人参是五加科植物人参Panax ginseng C.A. Mey的干燥根,其性温、味甘,大补元气、强心固脱、安神生津。
现代医学和药理学证明,人参具有提高机体免疫力、消除疲劳、抗癌[1]、护肝[2,3]等活性。
人参皂苷是人参的主要活性成分之一。
人参经洗净,自然阴干、晒干或烘干制成的人参商品称为“生晒人参”。
经蒸制而成的人参商品则称为“红参”。
生晒人参“性温,大补”,而红参的作用较生晒人参缓和。
所以,中医临床上广泛应用红参对虚脱病人进行补益而不用生晒人参。
人参炮制的过程中化学成分会发生相应变化。
红参中麦芽酚[4],焦谷氨酸[5],甾醇脂肪酸酯和甘油糖酯均高于生晒人参。
皂苷类成分在加工过程中会发生酯键和糖苷键的降解[6~8]。
本实验采用HPLC/M S方法对红参和生晒参的皂苷类成分进行了比较,对加工过程中皂苷类成分的变化途径进行了研究。
1 材料与方法1.1 试剂与仪器:生晒人参和红参均购自吉林农业大学院内参茸市场,经清华大学肖盛元博士鉴定。
色谱纯甲醇,醋酸铵为分析纯。
Agilent1100LC/M SD Tra p,操作系统为Agilent Chem staton,数据处理系统为Agilent LC/M SD Data analysis4.2。
1.2 方法1.2.1 色谱条件:色谱柱:phenom enex Prodig y C18柱(250mm×4.6m m,5μm);流动相:A相为0.1 mm ol/L醋酸铵水溶液(加氨水调至p H8.0),B相为乙腈。
梯度条件:0~15min B相线性梯度上升到40%,15~60min维持B相为40%,60~75min B收稿日期:2004-03-22基金项目:国家自然科学基金资助项目(90209035)*通讯作者 Tel:(010)62781685 E-mail:luoga@mail.tsingh 相上升为100%;进样量:20μL 。
1.2.2 质谱条件:调谐:雾化气30Psi ,干燥气8L /min,干燥气温度350℃;目标质量900,化合物稳定性50%,离子阱驱动水平100%。
Icc :目标30000,最大累积时间50μs,扫描范围:全扫描,m /z 700~1250;质谱/质谱,400~1250。
自动质谱/质谱参数:强度阈值5000,母离子数2,分离宽度2.0,碰撞能量1.00eV ,能量自动调整范围30%~200%。
1.2.3 样品处理:分别取生晒人参和红参,40℃烘干,粉碎,过100目筛,备用;分别称取生晒人参、红参粉末0.4992g 和0.4830g ,于5m L 量瓶中,加甲醇3.5m L ,超声振荡5min ,过夜,再用超声波处理两次,每次10min,中间间隔1h ,加甲醇至刻度,放置1h 后,取上清液,4000r /min 离心,取上清液备用。
2 结果与讨论2.1 主要信号的HPLC /M S /M S 二级质谱归属与定性:生晒人参HPLC /M S /M S 数据及归属见表1。
表1 生晒人参中主要皂苷类成分的H PLC /MS /MS 数据分析Table 1 HPLC /MS /MS data of major ginsenosides in white ginseng保留时间/min 相对分子质量M S /M S鉴定 16.0988987/945/927/799m Re 18.3962961/799/783/637/619/475N -R 319.4932931/799/783/637/619/475N -R 121.5946945/799/783/637/619/475/391Re 21.6800799/637Rg 128.2956955/835/793/613/569/523Ro 31.111941193/1150/1107/945/783m Rb 133.311641163/1119/;1119/1077/1059m R c33.411941194/1149/945;1149/1107/108933.6794793/673/631/613/56936.111641163/1119;1119/1059m Rb 237.411641163/1119/1059m Rb 2[9]38.3800799/631/475Rf 39.410321031/1009/987/945/927;945/783/621m R d 40.710321031/987;987/945/927/78341.4770769/637/619/475N-R 243.111081107/945Rb 144.3784783/637/619/475/391Rg 245.510781077/945Rc 48.010781077/945Rb 248.610781077/945Rb 3[10]50.711501149/1107/1089aRb 153.5946945/783/621/459Rd55.911201119/1077/1059aRc /Rs 162.8988987/945/927/799aRe 69.1988987/945/927/783aRd m-丙二酰基,a-乙酰基,N-三七 m-malonyl,a-acetyl,N-notoginseng2.2 生晒人参与红参中二醇型人参皂苷相对响应值比较:分别以生晒人参与红参的提取离子流色谱(ex tracted ion chroma tog ram,EIC)的各色谱峰积分面积占总积分面积的百分比作为相对响应值。
生晒人参与红参的二醇型皂苷相对响应值比较见图1。
白色-生晒人参 黑色-红参white-w hite gins eng black-red ginseng 1-mRb 1 2-m Rc 4-m Rb 2 7-m Rd 11-Rb 114-Rc 15-Rb 2 16-Rb 3 18-Rd 20-R g 3图1 生晒人参和红参中二醇型皂苷相对响应值的比较Fig .1 Comparison of relat ive response value in panaxadiol type ginsenosides of white and red ginsengs2.2.1 丙二酸单酰人参皂苷在加工过程中的变化:从图1可以看出,二醇型人参皂苷的糖衍生物在加工过程中有较大的变化。
丙二酸单酰人参皂苷Rb 1(1)、丙二酸单酰人参皂苷Rc (2)、丙二酸单酰人参皂苷Rb 2(4)、丙二酸单酰人参皂苷Rd (7)的相对响应值分别为生晒人参相应皂苷的22.1%、26.1%、28.1%和28.5%。