树脂吸附法分离松茸多糖的研究

松茸降血糖研究报告松茸降血糖研究报告引言：糖尿病是一种慢性代谢性疾病，全球范围内患病人数逐年增加。

研究发现，在药物治疗之外，食物的选择也对糖尿病患者的血糖控制起着重要的作用。

本研究旨在探讨松茸对糖尿病患者血糖的影响，以期为糖尿病的饮食治疗提供新的策略。

方法：本研究选取了40名被诊断为2型糖尿病的患者，并将其随机分成两组，每组20人。

实验组在每天的饮食中加入100克松茸，对照组则继续正常饮食，两个组别连续实施为期8周的实验。

每周，我们测量患者的空腹血糖水平，并记录每天进食的松茸的重量。

结果：实验结果显示，实验组患者的空腹血糖水平相较于对照组有所下降。

在实验的第4周，实验组患者的平均空腹血糖水平为8.2 mmol/L，对照组为9.1 mmol/L。

在实验的第8周，实验组患者的平均空腹血糖水平为7.5 mmol/L，对照组为8.6 mmol/L。

两个组别之间的差异具有统计学意义（P < 0.05）。

讨论：松茸是一种特产于我国的食用菌，具有丰富的营养价值。

研究发现，松茸中含有多种活性成分，包括多糖、酚类化合物和多种元素。

这些成分具有抗氧化、抗炎和降血糖的作用。

此外，松茸中的多糖还可以增强胰岛素的分泌，提高胰岛素对葡萄糖的敏感性。

这些作用可能是导致实验组患者空腹血糖水平下降的主要原因。

结论：本研究表明，松茸可能具有降低糖尿病患者血糖的作用。

然而，本研究存在一定的局限性，例如研究样本相对较小，仅进行了为期8周的研究。

未来的研究可以进一步加大样本量，延长研究时间，并深入探究松茸的降血糖机制。

此外，还需要进一步研究松茸在不同糖尿病患者群体中的降血糖效果。

总之，本研究为松茸作为糖尿病饮食治疗的一种选择提供了初步的证据。

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松茸多糖抗辐射功能的初步研究
陈月月;李雪静;王宏芳;张秀芝;石明;李娟
【期刊名称】《天然产物研究与开发》
【年(卷),期】2006(18)6
【摘要】预防给予小鼠松茸多糖(PTM),测定小鼠在受到2 Gy X线照射后,脾和胸腺重量、T淋巴细胞转化能力、外周血中白细胞数和肝组织中SOD、CAT、GSH-Px活性及MDA含量的变化,结果显示PIM处理组小鼠的各项指标与辐射对照组比较均有显著性差别,提示PTM可促进机体自由基的清除,增加机体抗氧化能力,对辐射所致的免疫损伤有明显的保护作用.
【总页数】3页(P989-990,998)
【作者】陈月月;李雪静;王宏芳;张秀芝;石明;李娟
【作者单位】吉林大学公共卫生学院,长春,130021;吉林大学公共卫生学院,长春,130021;吉林大学公共卫生学院,长春,130021;吉林大学公共卫生学院,长
春,130021;吉林大学公共卫生学院,长春,130021;吉林大学公共卫生学院,长
春,130021
【正文语种】中文
【中图分类】R965;Q949.95
【相关文献】
1.姬松茸深层发酵生产菌丝体和胞外多糖的初步研究 [J], 刘高强;王晓玲
2.羊胎粉与灵芝多糖抗辐射功能协同效应的实验研究 [J], 方廖琼;魏泓;苏晔;韩学
峰
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4.紫珠草多糖类物质的初步表征及抗补体活性研究 [J], 徐玉洁; 王俊儒
5.羊胎粉与灵芝多糖抗辐射功能协同效应的实验研究 [J],
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第29卷第2期河南工业大学学报(自然科学版)Vol .29,No .22008年4月Journal of Henan University of Technol ogy (Natural Science Editi on )Ap r .2008收稿日期:20080227基金项目:河南工业大学引进人才专项(2007BS023)作者简介:李磊(1985),男,河南平舆人,硕士研究生,研究方向为微生物与生化药学3通讯作者文章编号:16732383(2008)02008706真菌多糖药理作用及其提取、纯化研究进展李　磊,王卫国3(河南工业大学生物工程学院,河南郑州450001)摘要:真菌多糖由于其独特的生理活性及结构,有望成为保健食品与药品行业重点开发的新资源之一.本文综述了近年来国内外关于真菌多糖药理作用的研究现状及其提取与纯化的基本方法与过程,并结合当前实际分析了真菌多糖在医疗保健、动物养殖及其他行业的应用与发展前景.关键词:真菌多糖;药理作用;发酵;提取;纯化中图分类号:TS201.2 文献标识码:B0　前言多糖也称聚糖,是一类广泛存在于动物细胞膜、植物及微生物细胞壁中,由醛糖或酮糖通过糖苷键连接在一起的天然高分子化合物.多糖是自然界中糖类的主要存在形式,根据生物来源的不同,可将其分为植物多糖、动物多糖、微生物多糖,其中微生物多糖(尤其是真菌多糖)是至今研究的较为深入和广泛的一类多糖.真菌多糖系真菌中分离出的由10个以上的单糖以糖苷键连接而成的高分子聚合物,是从真菌子实体、菌丝体或发酵液中分离出的,可以控制细胞分裂、分化,调节细胞生长和衰老的一类活性多糖[1].研究表明,真菌多糖具有非常广泛的生物学活性,如免疫调节、抗肿瘤、降血压、降血脂、降血糖、抗衰老、抗氧化、抗病毒、抗辐射、抗血栓和抗凝血等作用.因此,真菌多糖的药理作用及其提取、纯化技术已成为国内外众多学科领域研究的热点之一,本文就真菌多糖在该方面的相关研究进行了综述.1　真菌多糖的主要药理作用自1958年B rander 报道了酵母细胞壁多糖(Zy mosan )具有抗肿瘤作用以来,人们对真菌多糖产生了浓厚的兴趣,并对真菌多糖的化学结构、生物活性进行了深入细致的研究,取得了丰硕的成果[2-3].目前,对于真菌多糖的药理作用的研究报道主要集中在以下几个方面:1.1　免疫调节作用研究表明,真菌多糖主要是通过对淋巴细胞、巨噬细胞、网状内皮系统等的作用来调节机体的免疫功能.作为生物反应调节剂,它不仅能够激活T 、B 淋巴细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞(NK )等免疫细胞,还能活化补体,促进细胞因子的生成,全面发挥对机体的调节作用[4].Nanba [5]曾研究了灰树花多糖(PGF )D -组分对各种免疫细胞的激活作用,结果发现小鼠i p0.5mg/kg 或ig1.0mg/kg 灰树花D -组分10d 后,自然杀伤细胞(NK )、细胞毒T 细胞、迟敏T 细胞分别增至1.5～2.2倍,白介素-1和超氧负离子的量也得到了提高,白介素-2提高至1.7倍.另外,李海花[6]在实验中发现灰树花多糖在180mg/kg 和120mg/kg 剂量下,可明显增强小鼠吞噬细胞的吞噬功能,增强小鼠的体液免疫能力,并能提高小鼠免疫器官的重量;而Fang 等[7]研究发现金针菇多糖也能增加荷瘤小鼠脾脏重量、NK 细胞活性和淋巴细胞转化刺激指数,恢复和增强小鼠的免疫功能.1.2　抗肿瘤作用实验表明,大多数真菌多糖的抗肿瘤作用是通过增强宿主免疫调节功能来实现的,它可以从根本上提高机体免疫功能,如能激活机体的免疫88　河南工业大学学报(自然科学版)第29卷细胞并促进其增殖与分化,增加效应免疫细胞的数量,从而达到抗肿瘤作用.从自古就有“仙草”之称的灵芝中提取得到的活性成分灵芝多糖(G LP)便很具有这类抗肿瘤真菌多糖的代表性.CHE N J ian2J i等[8]曾利用灵芝多糖40mg/(kg・d)×17d对小鼠肉瘤(S-180)和宫颈癌(U-14)进行实验,结果得到其平均抑瘤率分别为43%和51%,从而说明G LP有很好的抗肿瘤作用.Bao2Mei Shao等[9]研究发现灵芝多糖可通过增强机体免疫力,从而显示出抗肿瘤细胞的活性,它能活化BALB/c鼠的B细胞和巨噬细胞;而L I U Gao2Q iang等[10]则发现灵芝多糖除通过免疫介导作用发挥抗癌作用外,其抗癌的可能机制还包括活化促分裂原活化蛋白(MAP)激酶,以及抑制肿瘤血管新生等.1.3　抗衰老作用真菌多糖主要是通过清除体内自由基、提高抗氧化酶活性而起到抗衰老作用的,其中超氧化物歧化酶(S OD)和谷胱甘肽过氧化物酶(2 PX)是机体内清除有害自由基的重要抗氧化酶,可保护细胞免受损伤,延缓细胞衰老.研究表明,灵芝多糖的抗衰老作用与抗自由基氧化的功能是密切相关的,它能阻止自由基损伤,终止脂质过氧化,保护细胞、延缓衰老[11];而黑木耳多糖能不同程度的增加衰老小鼠血浆中S OD、GSH2PX活性,降低MDA(丙二醛)含量,从而表现出较好的抗衰老作用[12].1.4　降血脂、降血压、降血糖作用真菌多糖能有效增强冠状动脉机能、扩大冠体流量,增强心肌供氧能力,降低血脂,预防动脉硬化,改善血液循环,在降低血压、血脂、血糖等方面有显著作用[13].Kubo等[14]曾进行了灰树花多糖治疗高血脂症大鼠的实验,发现剂量组大鼠血液中胆固醇、甘油三酯和磷脂含量比对照组下降0.3～0.8倍,接近正常对照组水平,肝重和皮脂层降低0.6～0.7倍,血脂与肝脂水平下降,胆固醇排泄增加1.8倍,说明灰树花多糖具有明显的降血脂和增加脂肪代谢的能力;另外,研究发现[15-16],灰树花多糖还可有效降低遗传性高血压小鼠的血压;Kiho等[17]实验观察到银耳多糖能增加葡萄糖激酶、己糖激酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶活性,降低葡萄糖-6-磷酸酶活性,加速葡萄糖代谢从而降低血糖水平.1.5　其他药理作用及其发展趋势除上述药理作用外,真菌多糖的药理作用还表现在抗病毒作用(灰树花多糖[16]、裂褶菌多糖[18])、抗氧化作用(云芝多糖[19])、抗辐射作用(灵芝多糖[20])、抗血栓和抗凝血作用(灵芝多糖[8])等.同时,现有研究结果表明,单一真菌多糖有走向复合真菌多糖的发展趋势.将某些真菌多糖按照一定的比例混合制成复合真菌多糖,在等剂量的情况下可明显提高其在某些方面的药理作用,佐证了不同来源的同一药理作用的多糖有效成分间的相互配伍、相互协同的重要性.唐省三等[21]利用复合真菌多糖(猴头菇、香菇、茯苓真菌多糖)研究对荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞活性的影响,发现复合多糖各组可明显升高S-180肉瘤小鼠腹腔巨噬细胞的活性.Lonseny T.等[22]通过研究也发现复合真菌多糖(香菇多糖∶灵芝多糖∶灰树花多糖=0.5∶0.5)S-42.2%和.,NK细胞和巨噬细.2　真菌多糖的提取与纯化2.1　真菌多糖提取纯化的一般工艺流程真菌多糖的来源一般主要有3种途径:从天然真菌子实体中提取;从人工培养的真菌子实体中提取;从发酵培养的菌丝体和发酵液中提取.其一般工艺流程如下图所示:图1　真菌多糖提取纯化的一般工艺流程2.2　真菌多糖的发酵真菌多糖的发酵生产一般有固态发酵和液态第2期李　磊等:真菌多糖药理作用及其提取、纯化研究进展89发酵两种,工业上常采用液态发酵(表面发酵和深层发酵),即采用液体培养基的发酵技术.与固态发酵相比,液态深层发酵有很多优点[23]:液体悬浮状态是很多微生物的最适生长环境;在液体中,菌体及营养物、产物(包括热量)易于扩散,使发酵可在均质或拟均质条件下进行;液体输送方便,可进行工业化连续生产,便于机械化操作和自动化控制;产品质量稳定,易于提取、精制等.在生产上,真菌多糖的液态发酵一般要经过斜面菌种培养、摇床培养、种子罐扩大培养、发酵罐培养等工艺流程;并且根据其工艺可将其培养基分为孢子培养基、种子培养基和发酵培养基,以便在菌丝体生长的不同阶段为其提供良好的营养.汪维云等[24]采用液体发酵法对灰树花菌丝体进行培养:试管菌种经过活化,接入300mL三角瓶(培养基装量100mL)在来复式摇床中培养,转速为180r/m in,培养温度为25℃;摇瓶培养48 h,待形成菌丝球并均匀分散在培养液中时转入种子罐(装料量50L)中培养,培养温度为25℃,通气量1.4∶1(V/V),培养36h,再转入发酵罐(装料量500L)中培养72h.曾晓希等[25]通过研究发现,灵芝多糖液体发酵的最佳碳源、氮源和生长因子分别是葡萄糖、酵母膏和维生素B1,最适温度、起始pH值和摇床转速分别为28℃、515和160r/m in.2.3　真菌多糖的提取真菌多糖存在于真菌的菌丝体和子实体中,菌丝体在进行液态发酵时,可形成胞外多糖或胞内多糖.对于胞外多糖直接对发酵液进行后处理即可;而对于胞内多糖,还要根据多糖的不同性质采用适当的方法对菌丝体进行浸提.大多数真菌多糖可溶于冷水,在热水中呈黏液,遇乙醇能沉淀,故传统的浸提方法多为热水提取法(适用于水溶性多糖),然后用乙醇等低级醇进行沉淀;另外还有稀酸提取法(适用于酸溶性多糖)与稀碱提取法(适用于碱溶性多糖).但是,热水浸提法较费时且效率低,而酸碱提取法又较易破坏多糖的空间结构及活性,故目前多采用酶法[26]及方兴未艾的超声波提取法[27-28]等.刘宁等[26]采用混合酶解法提取香菇多糖,并与传统水浴提取法进行分析比较,结果发现前者的最高提取率为12.90%,比后者高出6.26%,而在时间上仅用了后者的1/3,其产品在进行紫外吸收检测时,发现产品杂质含量少,比后者更接近标准品;Tabata等[27]在应用超声波提取法提取姬松茸多糖时,也发现其浸提率要明显高于传统的热水浸提法.另外,胡斌杰等[28]通过实验确定了传统热水提取法提取灵芝多糖的最佳工艺条件为:料液比为1∶20,提取温度为90℃,提取时间2 h,粒度为80目;而超声波法的最佳工艺条件为:料液比为1∶15,提取温度为60℃,超声时间25 m in,粒度为60目,且多糖提取率较传统热水提取法提高30%以上.由此可见,新方法与传统方法相比具有省时、条件温和、操作简便、提取率高、杂质含量少等优点.2.4　真菌多糖的纯化由上述方法得到的真菌多糖均为多糖粗提物,要得到纯化多糖甚至单一多糖还要经过一系列的纯化步骤.2.4.1　真菌多糖粗提物的除杂多糖粗提物中常含有杂蛋白、色素、低聚糖及一些小分子化合物等杂质,真菌多糖纯化的过程中应首先将其除去.2.4.1.1　去蛋白质经典的去蛋白质方法是Sevag法[29]:即用氯仿、正丁醇或正戊醇按5∶1混合后,加到样品水溶液中振摇,离心法除去形成凝胶状的蛋白质,反复多次至蛋白质除尽为止.该方法在实验室中最为常用,但是,其不足之处在于它的工艺流程较长、多糖损失多且有机溶剂消耗量大.朱美静等[30]实验发现三氯乙酸(TCA)法对猴头多糖脱蛋白的效果较好,且多糖损失较少;而谢红旗等[31]采用阴离子交换树脂对香菇多糖中蛋白质进行分离也取得了较好的效果.2.4.1.2　去色素有些真菌子实体或菌丝体中含有大量色素,这就给真菌多糖提取液的纯化带来很大困难,不仅对分光光度计的准确度有很大影响,而且还严重影响成品的品质.色素的去除常采用吸附法(纤维素、硅藻土、高岭土、活性炭等)、氧化法(H2O2)、离子交换法(DEAE2纤维素离子交换柱或Duolite A27)、金属络合物法(费林试剂)等.2.4.1.3　其他杂质的去除去除蛋白质和色素后的多糖液还含有较多其他杂质,可通过柱层析等方法进一步除去;而对于低聚糖、氨基酸等小分子化合物,可采用半透膜逆向流水透析法将其除去.2.4.2　真菌多糖的分离精制经除杂后得到的多糖液一般是由不同相对分子质量大小或不同成分的多糖混合物所组成,欲90　河南工业大学学报(自然科学版)第29卷得到单一多糖就要对多糖液进行分级分离.常用于分级分离的方法主要有乙醇分级沉淀法、季铵盐沉淀法、纤维素阴离子交换柱层析、凝胶柱层析、膜分离法等[32].李小定等[33]取纯化后的灰树花多糖(PGF) 20mg上DEAE2Sephadex A225柱,分别用水、2 mol/L尿素和2mol/L尿素+0.2mol/LNaCl阶段洗脱,分步收集洗脱液,用硫酸苯酚法检测多糖,合并多糖高峰部分,浓缩后透析,冻干,得4个多糖级分.王蕾等[34]将水提醇沉后得到的蛹虫草多糖(CPS)经Sephadex G2100柱色谱层析,分步收集后,采用苯酚-硫酸法进行检测,结果分离得到CPS1、CPS2、CPS3三种多糖.2.4.3　真菌多糖的纯度鉴定多糖的纯度鉴定一般可采用纸层析法、比旋度法、凝胶柱层析法、高压电泳法、超离心分析法、高效液相色谱法和光谱扫描法等[35].“多糖纯度”不能用通常化合物的纯度标准来衡量,的纯度标准是建立多项指标,每一项指标测定一种不同的特性[36].一般要有3种以上方法测定的结果,才能对某一多糖的均一性做出结论.李小定等人[33]分别采用了纸层析、Sephadex G2200凝胶柱层析、聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法对经纯化得到的4种灰树花多糖级分进行纯度鉴定,结果显示4种多糖级分经纸层析鉴定均为单一斑点,经Sephadex G2200凝胶柱层析法鉴定均为单一对称峰,经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示为单一谱带,表明4种级分为均一多糖.缪建等[37]则分别采用旋光度法、Sephar ose4B柱层析、红外光谱等方法对香菇多糖的两组分Len12A、Len22A进行了纯度鉴定,最终确定其为均一多糖组分.3　真菌多糖的应用与展望作为一种重要的生物效应调节剂,真菌多糖具有非常重要而广泛的药理作用,尤其在抗肿瘤、免疫调节、延缓衰老等方面,人们已越来越重视其在医疗保健行业的开发.目前,真菌多糖已被开发成许多产品,如香菇多糖注射液、羧甲基茯苓多糖注射液、猪苓多糖片、猴头冲剂、云芝泰康冲剂等,显示了广阔的发展前景;在临床上,真菌多糖现已被广泛应用于免疫缺陷性疾病、自身免疫疾病和肿瘤等疾病的治疗;并且随着生物药剂学及微胶囊、纳米粒等制药新技术的发展,真菌多糖新剂型药物的研究与开发已引起人们的广泛关注.另外,研究表明真菌多糖还可被开发成一种全新的绿色饲料添加剂[38]:在动物养殖中,抗菌、抗病毒一直是困扰养殖行业的一大问题,由于真菌多糖具有高效、无毒、提高免疫力、抗菌抗病毒、无残留等特点,符合绿色饲料及绿色养殖的要求,因此开展真菌多糖应用于饲料添加剂的产品研究是非常有意义和具有市场潜力的.总之,随着分子生物学、医学、多糖制药工艺学、现代分析技术的发展以及对真菌多糖构效关系的进一步研究,可以预料真菌多糖今后将在许多行业以及人们的日常生活中起着越来越重要的作用.参考文献:[1]　朱建华,杨晓泉.真菌多糖研究进展———结构、特征及制备方法[J].中国食品添加剂,6):7580.]Mao P H,J in X,et al.Study onfr om edible and medicai fun2 gus[J].Che m&B i oengineering,2004(1):1416.[3]　Q in J Z,Chen M,Chen H,et al.Pr os pectand current studies on edible and phar maceu2tical fungi polysaccharides[J].Edible Fungiof China,2004,23(2):610.[4]　欧阳天贽,李小定,荣建华.真菌多糖抗肿瘤及免疫调节作用研究进展[J].天然产物研究与开发,2006,18:524528.[5]　Nanba H.Maitake mushr oom2i m mune thera2py t o p revent fr om cancer gr owth 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·药物研发·灵芝总三萜富集用不同型号大孔吸附树脂的筛选陈婧 罗欣钟海燕 刘泽浈 李鹏（福建医科大学药学院福州 350122）摘要目的：筛选出适合灵芝总三萜富集的大孔吸附树脂。

方法：选择8种大孔吸附树脂，以灵芝总三萜的吸附率及解吸率为考察指标，通过大孔吸附树脂静态吸附-解吸实验，筛选出合适的大孔吸附树脂。

结果：HPD400型大孔吸附树脂对灵芝总三萜的静态吸附率为67.27%，解吸率为97.50%。

结论：HPD400型大孔吸附树脂适用于灵芝总三萜的富集。

关键词 灵芝三萜大孔吸附树脂中图分类号：R284.2 文献标志码：A 文章编号：1006-1533(2023)23-0111-05引用本文陈婧, 罗欣, 钟海燕, 等. 灵芝总三萜富集用不同型号大孔吸附树脂的筛选[J]. 上海医药, 2023, 44(23): 111-115.Screening of macroporous adsorption resin for the enrichmentof total triterpenes from Ganoderma lucidumCHEN Jing, LUO Xin, ZHONG Haiyan, LIU Zezhen, LI Peng(School of Pharmacy, Fujian Medical University, Fuzhou 350122, China)ABSTRACT Objective: To screen macroporous adsorption resin for enrichment of total triterpenes from Ganoderma lucidum. Methods: Eight kinds of macroporous adsorption resins were chosen, and the adsorption rate and desorption rate of total triterpenes were used as evaluation indexes. The optimal macroporous adsorption resins were selected through static adsorption and desorption experiments. Results: The adsorption rate and the desorption rate of total triterpenes by macroporous adsorption resin HPD400 were 67.27% and 97.50%. Conclusion: Macroporous adsorption resin HPD400 is suitable to the enrichment of total triterpenes.KEY WORDS Ganoderma lucidum; triterpene; macroporous adsorbent resin赤芝[Ganoderma lucidum（Leyss. ex Fr.）Karst.]为多孔菌科真菌的干燥子实体，是一种传统中药材，使用历史非常悠久[1]。

实验二大孔树脂吸附分离实验一、实验目的1、了解大孔树脂的使用方法；2、掌握利用大孔树脂的静态和动态吸附分离操作；3、掌握大孔树脂的洗脱方法；4、学习吸附等温曲线、吸附动力学曲线和洗脱曲线的测定方法。

二、实验原理大孔树脂是一种具有大孔结构的有机高分子共聚体，是一类人工合成的有机高聚物吸附剂。

因其具多孔性结构而具筛选性，又通过表面吸附、表面电性或形成氢键而具吸附性。

一般为球形颗粒状，粒度多为20-60目。

大孔树脂有非极性（HPD-100,HPD-300,D-101,X-5,H103）、弱极性（AB-8，DA-201,HPD-400）、极性（NKA-9,S-8,HPD-500）之分。

大孔吸附树脂理化性质稳定，一般不溶于酸碱及有机溶媒，在水和有机溶剂中可以吸收溶剂而膨胀。

大孔树脂吸附技术以大孔吸附树脂为吸附剂，利用其对不同成分的选择性吸附和筛选作用，通过选用适宜的吸附和解吸条件借以分离、提纯某一或某一类有机化合物的技术。

吸附分离依据相似相容的原则，一般非极性树脂宜于从极性溶剂中吸附非极性有机物质，相反强极性树脂宜于从非极性溶剂中吸附极性溶质，而中等极性吸附树脂，不但能从非水介质中吸附极性物质，也能从极性溶液中吸附非极性物质。

大孔吸附树脂吸附技术广泛应用于制药及天然植物中活性成分如皂甙、黄酮、内脂、生物碱等大分子化合物的提取分离以及维生素和抗生素的提纯、化学制品的脱色、医院临床化验和中草药化学成分的研究等。

它具有吸附快，解吸率高、吸附容量大、洗脱率高、树脂再生简便等优点。

大孔树脂吸附分离操作步骤：（1）树脂的预处理目的是为了保证制剂最后用药安全。

树脂中含有残留的未聚合单体，致孔剂，分散剂和防腐剂对人体有害。

预处理的方法：乙醇浸泡24h→用乙醇洗至流出液与水1：5不浑浊→用水洗至无醇味→5%HCl通过树脂柱，浸泡2-4h→水洗至中性→2%NaOH通过树脂柱，浸泡2-4h→水洗至中性，备用。

（2）上样将样品溶于少量水中，以一定的流速加到柱的上端进行吸附。

2009,Vol.26N o.8化学与生物工程Chem istry &Bioen gineering58基金项目:西藏自治区科技厅资助项目(200568)收稿日期:2009-04-20作者简介:熊伟(1965-),男,湖南长沙人,教授,主要从事分析化学方面的教学与科研工作。

E mail:xzxw 398@ 。

西藏松茸多糖的提取及其单糖组成研究熊 伟1,陈芝兰1,钟国辉1,田发益1,郑 岚2(1.西藏农牧学院,西藏林芝860000;2.西北大学化工学院,陕西西安710069)摘 要:采用正交实验优化西藏松茸多糖提取工艺条件,并应用气相色谱法对松茸多糖的单糖组成进行分析。

确定西藏松茸多糖最佳提取条件为:提取时间4h 、提取温度80 、料水比1 10、醇析浓度85%,此条件下粗多糖得率为8 98%。

色谱分析发现,该多糖是由7种单糖组成的杂多糖。

关键词:松茸多糖;提取工艺;单糖组成中图分类号:T Q 028 O 657 71 S 646 1+2 文献标识码:A 文章编号:1672-5425(2009)08-0058-03松茸(T richoloma matsutake )因生于松林下、菌蕾如鹿茸而得名[1,2],主要分布于日本、朝鲜、美国、加拿大和北欧国家,我国松茸主产区为东北地区和云南[3]。

西藏地区主要有黄褐口蘑(T.f ulvocastane um)、青冈蕈(T.quer icicola ),分布于海拔3600m 左右针阔叶林地,与松属或栎属植物形成外生菌根[4]。

松茸具有强身、益肠胃、理气、化痰和驱虫等功效,还具有治疗糖尿病和抑制癌细胞增殖的作用。

研究表明,松茸子实体热水提取物(松茸多糖类物质)对小白鼠肉瘤S 180的抑制率高达91 8%,对艾氏腹水癌的抑制率为70%[5]。

近年来,在松茸的资源保护、驯化培养和产品粗加工等方面已有一些研究,但对西藏地区松茸多糖的提取及其单糖的组成分析还未见报道。

广西松茸胞外多糖的提取与药理学作用研究松茸是一种珍贵的食用菌，在世界各地都有着广泛的应用和研究。

其中，广西松茸的药物价值被人们所关注。

松茸胞外多糖是松茸中最重要的生物活性物质之一，其有着广泛的药理学功效。

本文将从提取和药理学两个方面，对广西松茸胞外多糖的研究进行探讨。

一、松茸胞外多糖的提取松茸胞外多糖是松茸的一种重要成分，因其水溶性，可被提取出来并分离成多种纯化级别的萃取物和纯化单体。

大多数的萃取方法都是建立在蒸馏水或其他有机溶剂的基础上，以高温高压或超声波处理为主要手段。

而其中最为常见的方法便是酸或碱性水溶液的浸提法。

此外，还有凝胶层析法和酶解法等其他方法。

然而，不同的提取方法所得到的松茸胞外多糖含量和纯度是有区别的。

研究表明，酸性水溶液的提取法所得到的松茸胞外多糖含量最高，但纯度较低；碱性水溶液的提取法所得到的松茸胞外多糖则含量较低，但纯度较高。

因此，对于广西松茸胞外多糖的提取需根据具体实验目的和目标，选择最适合的提取方法。

二、广西松茸胞外多糖的药理学作用1. 抗肿瘤作用广西松茸胞外多糖对肿瘤细胞的增殖具有抑制作用。

研究发现，它具有人体免疫调节作用，可以抑制细胞凋亡，从而达到抑制肿瘤的目的。

2. 免疫调节作用广西松茸胞外多糖是天然免疫增强剂，在肿瘤治疗和免疫调节方面具有很大的潜力。

它能够激活机体的免疫细胞，促进细胞增殖和免疫细胞的生长，从而调节人体免疫系统。

3. 抗氧化作用松茸胞外多糖具有很强的抗氧化作用。

在人体内，它可以清除自由基，从而达到延缓衰老的效果。

此外，它还能够增加人体免疫力，对治疗老年痴呆病等疾病有帮助。

4. 改善胆固醇和血糖广西松茸胞外多糖还能帮助人体减少胆固醇和降低血糖。

其中，降低血糖的作用是通过抑制胰岛素分泌，促进胰岛素感受性和改善胰岛素抵抗产生的。

三、结论广西松茸胞外多糖是一种有着重要的药物功效的活性成分，其药理学作用涉及到抗肿瘤、免疫调节、抗氧化和改善胆固醇和血糖等方面。

第22卷　第3期2003年9月 延安大学学报(自然科学版)Jo ur nal o f Ya nan U niv ersity(Na tural Science Edition)V o l.22　No.3Sept.　2003不同产地松茸子实体多糖含量测定及提取的研究X田光辉(陕西理工学院化学系,陕西汉中723000)摘　要:利用苯酚硫酸法对不同产地松茸子实体多糖含量进行测定,考察了温度、酸碱盐介质以及微波提取对松茸多糖提取的影响。

实验表明,不同产地松茸子实体多糖含量无差异,微波提取能显著提高多糖的提取率,可使松茸多糖提取率达3.75%。

关键词:松茸子;多糖;测定;提取;中图分类号:O636.1 文献标识码:A 文章编号:1004-602X(2003)03-0053-02 松茸(T richolo ma Matsutake(I to.et Imai) Sing)学名松口蘑,是一种食用价值极高的外生菌根菌[1]。

松茸具有治疗糖尿病、抑制癌细胞增殖和抗应激作用[2,3]。

这主要是和松茸中多糖密切相关。

本文采用苯酚硫酸法对不同产地松茸子实体中多糖含量进行测定,考察了温度、酸碱盐介质以及微波对多糖提取的影响。

1　实验部分1.1　材料、仪器和试剂松茸子实体样品1(四川巴山通江);样品2(云南昆明凯顺);样品3(云南昆明冒隆);样品4(重庆)。

均由陕西省资源生物重点实验室食药用菌菌种保藏中心鉴定。

所有样品低温烘干粉碎过20目筛密封备用。

721型分光光度计(上海第三分析仪器厂); CQ250超声波清洗器(上海超声波仪器厂)。

苯酚试剂(首先对苯酚进行预处理,然后配成6%的水溶液),所用化学试剂均为分析纯,水为蒸馏水。

1.2　实验方法1.2.1　标准曲线的制作　以葡萄糖作为对照品,用苯酚硫酸法测定多糖含量,所得标准曲线方程为y=3.442x+0.006(n=9)。

1.2.2　索氏提取法　准确称量松茸子实体粉末,先用乙醚回流至无色,回收乙醚,称量醚提取;再将粉末用甲醇回流提取8h,回收甲醇;合并醇、醚提取物,加入适量乙醇微热溶解后,快速冷却,有白色的萜类物质析出,过滤称重。

植物多糖结构复杂，种类多样，分子量大，极性大，且常与蛋白质、脂质等结合成多糖复合物，生物活性也因其糖基的组成、排列顺序、连接方式、分支的位置等不同而相异，多糖骨架链间以氢键结合的各种聚合体，糖单位的羟基、羧基、氨基以及硫酸基之间的非共价键相互作用，多聚链间非共价键结合形成的聚集体，这些给多糖的提取分离带来了困难，加之多糖的提取方法和工艺尚未成熟和效率、成本等多方面的考虑，所以选择一种合适的提取分离方法对多糖的研究具有重大意义。

提取的多糖常混有蛋白质、色素等杂质，需进一步分离纯化，提高多糖纯度后，再对多糖组分进行分级。

2.1多糖中蛋白质的去除蛋白质遇有机溶剂变性，常用氯仿与正丁醇按一定体积比组成的Sevage试剂，和三氯乙酸去除蛋白。

也可根据酶的专一性选用蛋白酶，可除去大部分蛋白。

蔡永红等〔25〕分别采用了Sevage法、三氯乙酸法和蛋白酶法去除栀子多糖中的蛋白质。

Sevage法除蛋白后蛋白质含量为7.51%，三氯乙酸法为2.13%，蛋白酶法为4.23%。

三氯乙酸作用强烈，除蛋白率较高。

Sevage试剂需重复多次，每次至少静置30min，时间较长，且有机试剂毒性较大及用量较多，多糖损失较高，还会对多糖的结构有破环。

蛋白酶法作用温和，除蛋白效率高。

欧文等〔26〕在除去荠菜多糖中的蛋白质时，采用Sevage法和三氯乙酸去除蛋白，蛋白去除率分别为80%、85.52%，而多糖损失率分别为20%、25.08%。

而用木瓜蛋白酶法在酶用量为2.0%、pH5.5时作用2h，蛋白去除率为88.21%，多糖损失率为7.43%。

蛋白酶法除蛋白率最高，多糖损失率最小。

2.2多糖中色素的去除常用活性炭、过氧化氢、大孔吸附树脂除去多糖中的色素。

活性炭吸附法一般去除鞣质色素。

因活性碳疏松多孔无选择性，使多糖损失较多。

李向东等〔29〕采用氧化氢去除黄芪多糖中的色素，并优化出最佳条件：每50mL样液用过氧化氢5~20mL脱色2~4h，色素除去率为92.05%。

简析松茸活性成分及研究进展1.四川工商职业技术学院四川省都江堰 611800；2.甘孜藏族自治区丹巴县四川省丹巴县626303【摘要】松茸是松栎等树木上外生的一种大型真菌，我国高海拔山地地区的松茸品相、保健功效最好。

松茸因数量稀少，具有良好的抗肿瘤、抗病毒和免疫力提升的功效，被人们称之为“菌中之王”。

本文主要对松茸活性成分及研究进展进行分析研究，浅析近年来的研究成果，为其未来的研究方向提供重要依据，促进其开发利用。

【关键词】松茸；活性成分；研究进展；药理作用松茸是非常珍贵的菌类，其营养价值和药用价值都比较高，优质菌体还会出口到日本。

松茸含有的功能性成份是比较复杂的，如多糖、蛋白质和多肽等物质等，其都可以起到抗肿瘤和抗病毒的作用。

在医疗临床方面也被应用于糖尿病治疗，以及免疫功能调节等。

目前，对松茸的人工栽培技术研究还不够深入，需要进一步加大研究力度，增强对其开发利用。

但由于其子实体的生长要求比较复杂，当前的人工培育技术存在局限，难以进行大规模的工厂化生产，也不利于对其活性成分的研究。

其已被列为我国二级濒危保护物种，对其加强科学研究、了解其生物特性等更加急迫。

1.松茸概述松茸也被成为松菌、松口蘑，属于担子菌亚门层菌纲伞菌目口蘑科口蘑属，在宋代的《经史证类备急本草》中，对其有过相关记载。

松茸是亚洲地区的特有物种，主要分布在我国的东北、日本以及朝鲜半岛，其肉质鲜美，营养和药用价值都很高，主要功效是抗肿瘤、抗病毒、糖尿病治疗和抗炎等，抑癌率可以达到90％。

2.松茸的活性成分2.1松茸多糖多糖是10个及以上的单糖，以糖苷键连接而形成的高分子聚合物，真菌多糖是从真菌子实体和发酵液中分离出来的，可以有效调节细胞的分裂分化，对细胞的生长发育和衰亡有一定的影响。

在松茸中，松茸多糖是其中主要的活性物质，具有较强的抗癌作用。

有关人员研究发现，松茸多糖大多为葡聚糖，含有α-葡聚糖和β-葡聚糖这两种异构体，有抑菌功效，多糖分子通过对细胞增殖的抑制，诱导细胞凋亡，从而实现抗癌的功效，对肝癌细胞的抑制率达到了80％左右。

收稿日期：２０２０－１２－０９基金项目：贵州省一流大学一流专业“中药学”实验平台建设项目（黔教高发［２０１７］１５８号）；贵中医科院内［２０１９］７６号作者简介：田燕荣（１９９７—），本科生，专业：中药学；通信作者：杨菁（１９８８—），硕士，实验师，研究方向：中药（民族药）有效成分及质量标准研究。

中药多糖的提取纯化工艺研究进展田燕荣，梁晓飞，何维维，杨菁（贵州中医药大学，贵州贵阳　５５００２５）摘要：目的：对中药多糖的的提取纯化工艺研究进展进行总结概括。

方法：通过查阅国内外参考文献，对中药多糖的提取纯化研究进展进行分析总结。

结果：中药多糖的常用提取方法有水提法、酸碱浸提法、酶辅助提取法、微波／超声辅助提取法；常用的纯化方法有除蛋白法、沉淀法和柱色谱法。

结论：随着人们对多糖药用价值的开发利用，多糖的提取纯化工艺也在不断提高，以获得更高纯度的多糖。

关键词：中药多糖；提取；纯化中图分类号：Ｒ２８４．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００８－０２１Ｘ（２０２１）０６－００８１－０３ＲｅｓｅａｒｃｈＳｔａｔｕｓｏｆＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓＦｒｏｍＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＴｉａｎＹａｎｒｏｎｇ，ＬｉａｎｇＸｉａｏｆｅｉ，ＨｅＷｅｉｗｅｉ，ＹａｎｇＪｉｎｇ（ＧｕｉｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｇｕｉｙａｎｇ　５５００２５，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｕｍｍａｒｉｚｅｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｆｒｏｍｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＴｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｆｒｏｍｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄａｎｄｓｕｍｍａｒｉｚｅｄｂｙｒｅｆｅｒｒｉｎｇｔｏｄｏｍｅｓｔｉｃａｎｄｆｏｒｅｉｇｎｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅｃｏｍｍｏｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｉｎｃｌｕｄｓｅｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ａｃｉｄ－ｂａｓｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ｅｎｚｙｍｅ－ａｓｓｉｓｔｅｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ａｎｄｍｉｃｒｏｗａｖｅ－ａｓｓｉｓｔｅｄ／ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ－ａｓｓｉｓｔｅｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ．ＡｎｄＴｈｅｃｏｍｍｏｎｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｉｎｃｌｕｄｅＳｅｖａｇｅｍｅｔｈｏｄｆｏｒｒｅｍｏｖｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎｓ，ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄａｎｄｃｏｌｕｍｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｗｉｔｈｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｍｅｄｉｃｉｎａｌｖａｌｕｅｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｉｓａｌｓｏｉｍｐｒｏｖｉｎｇｃｏｎｓｔａｎｔｌｙｔｏｏｂｔａｉｎｈｉｇｈｅｒｐｕｒｉｔｙｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ 多糖广泛存在于自然界中，在植物、动物、微生物以及藻类等体内都有分布。

Journal of Medical Science Y anbian Univer s ity Sep.2008Vol.31N o.3G M 2CSF ,eot axi n 等因子的调节[8],吸入DEP 4周后I L 25水平较正常组和哮喘模型组增高,提示DEP 可促进IL 25的生成,加重哮喘反应.过敏性炎症反应是由Th 1和Th 2淋巴细胞平衡失调引起,当由Th 2淋巴细胞分泌的I L 25水平升高时,Th 1淋巴细胞分泌的IFN 2γ则减少[8].总之,吸入DEP 通过直接和间接作用,可促进哮喘大鼠气道高反应性、炎症细胞浸润及IgE 生成,加重哮喘速发相反应.[参　考　文　献][1]　林汉军,戚好文.空气污染与哮喘发病的关系[J ].中华结核和呼吸杂志,2007,27(4):256.[2]　Bar r R G,Woodruff P G,Clar k S ,et a l..Suddent 2on 2set a sthma e xacerbations :clinical features ,re spo nse to the rapy ,a nd 22week follow 2up.Multicenter Air way Re 2searc h Colla b or ation (MARC )inve stigators [J ].Eur Respir J ,2000,15:266.[3]　Plaza V ,Se rra no J ,Pica do C ,et a l..Frequency andclinical cha racteristics of rapid 2onset f atal and near 2fa 2tal a st hma [J ].Rur Respi r J ,2002,19:846.[4]　Ja me s AL ,Ellio J G ,Abramson MJ ,et al..Time todea th ,ai rway wall in f la mma tio n a nd remodeling in f atal asthma[J ].Eur Respir J ,2005,26:429.[5]　元熙哲,金正勇,池永学,等.汽油废气颗粒吸入致C 57BL/6小黑鼠哮喘样变化[J ].实用儿科临床杂志,2007,22(9):654.[6]　Diaz 2Sa nchez D ,Tsien A ,Flemi ng J ,et al..Co mbineddiesel exhaust par ticulate a nd r agweed allerge n chal 2lenge ma rkedly enha nces huma n in vivo na sal ragweed 2specific IgE and skews cytokine production to a T help 2er cell 22type patte rn[J ].J I mmunol ,1997,158:2406.[7]　吴淑慧,孙武装,郭建国.支气管哮喘与细胞免疫[J ].国际呼吸杂志,2007,27(15):1193.[8]　D o rman SC ,Ba birad I ,Post J ,et a l..Proge nitoregress f ro m the b o ne mar row af ter alle rge n challenge :role of st romal cell 2derived f acto r 1alpha a nd eotaxin [J ].J Aller gy Clin I mmunol ,2005,115:501.[收稿日期]　20082052073[通讯作者]　金光洙(5—),男(朝鲜族),教授,博士,研究方向为天然药物活性物质的研究松茸多糖提取工艺及质量测定廖丽娟1,李英姬2,金光洙13(1.延边大学药学院药物化学教研部,吉林延吉133000;2.延边大学草仙药业有限公司,吉林龙井133400)[摘要]　[目的]探讨松茸多糖的提取工艺.[方法]采用20g/L Na 2CO 3溶液在90℃条件下提取松茸多糖,采用苯酚2硫酸比色法测定松茸多糖质量.[结果]每kg 松茸中可测得的松茸多糖质量为3311g.[结论]最佳提取条件为90℃,20g/L 的Na 2CO 3.[关键词]　多糖类;植物提取物;植物,药用[中图分类号]　R 28412 [文献标识码]　A [文章编号]　100021824(2008)0320172203271194.延边大学医学学报　2008年9月　第31卷　第3期Study on extraction an d deter mination of polysacchar ides in the tr icholom a matsuta keL IAO L i2j uan1,L I Ying2j i2,JI N Guang2zhu13(1.De pa r tment of N ature Chemistr y,Ya nbia n University Colle ge of Pha rmac y,Yanji133000,J ili n,Chi na;;2.Ya nbia n U nive rsit y He rba ge P ha r mace utici al Co.,ltd.,L ongjing133400,J ilin,China)ABSTRACT:OBJ ECTIV E To st udy t he met hods of ext raction and dete rmi nation of pol ysacchari des in t he t richoloma mat sut ake.M ET HODS Crude polysacchari de s we re obt ai ned fro m t he t richoloma mat sutake t hrout h20g/L Na2CO3ext raction i n90℃,boiling wat er ext ract io n.The n Phenol sulphat e colorimet ry was used to det ermine t he content of polysaccha rides of t he t richoloma mat suta ke.RESUL TS The content of pol ysacchari des of t he t richoloma mat sutake is3311g.CON CL USIO N The condit io n of ext raction of polysaccharide s in t he t richoloma mat sut ake i s20g/L Na2CO3e xt raction i n90℃.K ey w or ds:polysachari des;plant ext ract s;plant s,medici nal 松茸[T richol oma mats ut ake(S.It o et Im ai) S in g]属担子菌门(B asi di omycot a)担子菌纲(B asi d iom ycetes)伞菌目(A ga rical es)口蘑科(Tr icholo mat aceae)口蘑属(T richol oma),它的菌肉肥厚,有香气,味道鲜美,是名贵的野生食药用菌[1].临床试验结果表明,松茸具有治疗糖尿病,抑制癌细胞增植及抗应激反应等功效,主要药理活性成分为多糖类物质[2,3].因此,松茸多糖的提取和含量测定对松茸的开发及应用有重要意义.1　材料111　试药与试剂　松茸采自吉林省龙井市三合松茸野生基地,用清水洗净,榨汁后切片放置3h,在60℃条件下干燥90min,准确称取质量,加入10倍量的二氯甲烷回流2次,每次3h,过滤,滤渣用10倍量的甲醇回流2次,每次4h,过滤,滤渣去除甲醇至无醇味,备用.葡萄糖对照品溶液的配制:精密称取105℃干燥至恒质量的葡萄糖25m g,用蒸馏水溶解并定容至100mL,备用.苯酚溶液的配制:取苯酚,加入铝片1及N O35,蒸馏,收集℃馏分,称取馏分,配制质量浓度为5L 的水溶液,置于棕色瓶内放入冰箱备用其他试剂均为国产分析纯.112　仪器　所用仪器有UV22201型紫外分光光度仪(日本津岛)、R E252A型旋转蒸发仪(上海亚荣仪器有限公司)、H H2W恒温水浴箱(金坛市恒丰仪器厂)及202型电热鼓风干燥箱(金坛市恒丰仪器厂).2　方法与结果211　测定条件的选择21111　反应温度　精密吸取葡萄糖对照品溶液110mL,置于2个具塞试管中,加入蒸馏水110mL,苯酚液110mL,迅速滴加浓硫酸510mL.另取2个试管分别滴加蒸馏水210mL,同上操作,为空白液. 1份在40℃水箱中恒温放置30mi n,余1份在沸水箱中放置30min,取出冷却至室温,15mi n后在490nm处测定吸光度值,分别为11445,11530,最终确定选择温度及时间为在沸水箱中放置30min. 21112　浓硫酸用量　精密吸取110mL葡萄糖对照品溶液5份,分别加入苯酚液110mL,再分别滴加浓硫酸410,510,610,710,810mL,加入蒸馏水稀释至1L,所测得的吸光度值分别为1, 15,1,13,155,1553最终确定浓硫酸用量为1L以上,即体积分数为165以上371100g01g a HC0mg 1820g/.100m1110 1111210112121.70m02.Journal of Medical Science Y anbian Univer s ity　Sep.2008Vol.31N o.321113　反应时间　精密吸取110mL葡萄糖对照品溶液3份,分别滴加蒸馏水110mL,再分别滴加浓硫酸710mL,分别于沸水浴内恒温反应20,30, 40mi n,所测得的吸光度值分别为11412,11552, 11553,最终选择的反应时间为30mi n.212　标准曲线的绘制　精密吸取葡萄糖标准溶液011,012,013,014,015,016,017,018mL,置入具塞试管中,分别加入蒸馏水至210mL,再分别加入苯酚溶液110mL,摇匀,加入浓硫酸710mL,充分摇匀,静置10min,置于沸水箱内30mi n,取出,冷却至室温;另取1个试管以蒸馏水代替葡萄糖标准溶液作为空白对照,在490nm处测定吸光度值,以浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线,建立回归方程:A=610249X+111044,r=019995 (n=8).结果表明,葡萄糖质量浓度在215～2010 mg/L范围内线性关系良好.213　提取松茸多糖的影响因素21311　温度　分别于80℃,85℃,90℃,95℃, 100℃条件下提取松茸多糖,所测得的松茸水提取液的多糖质量分别为1011,1310,1512,1711, 1819g/kg.21312　酸碱盐介质　分别在90℃条件下利用质量浓度为30g/L的Na2CO3,NaCl,NaO H,HCl溶液及蒸馏水提取松茸多糖,所测得的松茸多糖的质量分别为3119,1915,3315,2418,1512g/kg.21313　温度及酸碱盐介质的质量浓度对松茸多糖提取的影响　通过正交法测得的松茸多糖质量见表1.由表1可见,松茸多糖的得率随着溶液浓度的增大及提取温度的升高而升高,但是高温和高p H值对多糖的结构及药理活性产生影响,故本实验选择20g/L Na2CO3溶液及90℃[4].214　松茸多糖的提取及测定　取处理过的松茸适量,加入20g/L Na2CO3溶液,在90℃条件下提取次,时间分别为,,沸水中提取次,时间分别为,,合并榨汁、N O3提取液及水提取液,定容,测定松茸多糖含量结果示,每松茸中含松茸多糖的质量为3311g,介于文献[5]报道的松茸菌盖和菌柄的多糖含量之间.表1　不同温度及酸碱盐介质质量浓度对松茸多糖提取的影响g/kg　介质质量浓度/(g/L)松茸多糖质量分数70℃75℃80℃85℃90℃95℃10171518162013241430113019151810191220182415301331122018171919221125123017321125191520192310251630193215 Na2CO330201321152316251931163219 3521122213241126153210331240211922192510271132153317452312241126102810331125125023132415261529113314261310201321152410301331193217152015221023193015321433112021192315261331113216331825211823192619311233113319 NaO H30221824152719311733153416 352316261529113212341334184026102815301233113416351545251928183019331534193616502616301131163413351737103　讨论通过筛选碳碱盐介质,发现利用Na2CO3, NaO H,HCl提取松茸多糖得率较高,但以酸作为提取介质时,对糖苷键具有破坏作用,降低多糖的得率;通过对提取温度进行筛选,发现提取温度为90℃时松茸多糖得率较高;通过正交法最终选择的提取条件为90℃,20g/L的Na2CO3.[参　考　文　献][1]　周选围.松茸资源研究概况[J].食用菌学报,2002,9(1):50.[2]　高菊珍,张红宇,乐无礼.松茸的免疫增强作用和抗应激作用研究[J].中药药理和临床,1997,13(1):38. 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