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重楼总皂苷对人鼻咽癌细胞CNE-2Z周期及凋亡的影响陈志红;龚先玲;刘义【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2011(033)001【摘要】目的:探讨重楼总皂苷对CNE-2Z人鼻咽癌细胞周期和细胞凋亡的影响.方法:采用MTT法检测重楼总皂苷对CNE-2Z人鼻咽癌细胞的增殖抑制作用;Hoechst-PI双染、流式细胞仪观察重楼总皂苷对CNE-2Z细胞周期及凋亡的影响.结果:重楼总皂苷能抑制CNE-2Z细胞的增殖,其作用呈明显的时间和剂量依赖性;Hoechst-PI双染显示细胞凋亡特征;重楼总皂苷使CNE-2Z细胞被阻滞在S 期;60、90、120μg/mL重楼总皂苷分别作用CNE-2Z细胞24 h后,其凋亡率分别为5.5%±0.22%、7.7%±0.51%、15.5%±0.62%.结论:重楼总皂苷可抑制CNE-2Z细胞的增殖,阻滞细胞于S期,从而诱导细胞凋亡.【总页数】5页(P25-29)【作者】陈志红;龚先玲;刘义【作者单位】广东医学院天然药物研究与开发重点实验室,广东湛江,524023【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.土贝母皂苷诱导人鼻咽癌细胞株CNE-2Z细胞凋亡的研究 [J], 翁昔阳;于立坚;马润娣2.重楼皂苷Ⅰ对人肝癌细胞MHCC97-H增殖、周期、凋亡的影响 [J], 曾普华;叶书林;王佳佳;李为;刘丹;贺佐梅;邓天好;周芳;郜文辉3.重楼总皂苷对人肺癌细胞A549的增殖抑制作用及对细胞周期的影响 [J], 陈志红;龚先玲;刘义4.重楼活性单体pp-22对人鼻咽癌细胞CNE-1增殖、周期和凋亡的影响 [J], 唐云云;谭桂香;蒋建伟;林春兰;严玉霞;曾慧兰;王新宁;王希成5.二甲双胍和紫草素对人鼻咽癌细胞CNE-2Z增殖及凋亡的影响及其机制 [J], 王楠楠;苏凯;崔忆旋;陶露;时宗芬;陈晓芬;翟丽倩;马士崟;赵报因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
人参皂苷Rg1对鼻咽癌CNE-2细胞凋亡、侵袭和迁移的影响席婕;刘晖【期刊名称】《临床误诊误治》【年(卷),期】2018(031)012【摘要】目的探究人参皂苷Rg1对鼻咽癌CNE-2细胞凋亡、侵袭和迁移的影响.方法采用不同浓度的人参皂苷Rg1处理鼻咽癌CNE-2细胞,同时选择无显著细胞毒性的Rg1低浓度、中浓度、高浓度(观察组)进行后续实验,对照组不做Rg1处理.采用CCK-8检测细胞增殖倍数,使用流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,免疫印迹法检测相关蛋白表达情况.结果与对照组比较,观察组人参皂苷Rg1浓度越高,CNE-2细胞数量越少,增殖倍数、侵袭能力及Ki-67、血管内皮生长因子的表达水平越低,Q2区凋亡细胞越多,Caspase-3蛋白表达水平越高,差异有统计学意义(P<0.01).划线24 h后,观察组的缝隙间距明显大于对照组,差异有统计学意义(P<0.01).结论人参皂苷Rg1可促进鼻咽癌CNE-2细胞凋亡,抑制CNE-2细胞增殖、迁移和侵袭能力,为临床治疗鼻咽癌提供新思路和理论基础.【总页数】6页(P99-104)【作者】席婕;刘晖【作者单位】710068 西安,陕西省人民医院耳鼻咽喉头颈外科;710068 西安,陕西省人民医院耳鼻咽喉头颈外科【正文语种】中文【中图分类】R739.63【相关文献】1.BRD4抑制剂对鼻咽癌CNE-2细胞增殖、凋亡和侵袭的影响 [J], 刘忠;杨飞;程吉;田天捷2.PARP-1对鼻咽癌CNE-2细胞迁移及侵袭能力的影响 [J], 卢其腾;孙永楚;朱小东;曲颂;李龄;韦静妮;刘志杰;余彬彬;周磊;陈凯华;林国享3.番泻苷B抑制STAT3和ERK1/2活化对鼻咽癌CNE-2细胞生长、侵袭及裸鼠成瘤的影响 [J], 魏璐璐; 吉文伟; 黄维平4.番泻苷B抑制STAT3和ERK1/2活化对鼻咽癌CNE-2细胞生长、侵袭及裸鼠成瘤的影响 [J], 魏璐璐; 吉文伟; 黄维平5.多西紫杉醇对人鼻咽癌CNE-2细胞辐射敏感性及侵袭转移相关因子表达的影响[J], 林素芳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
重组人肿瘤坏死因子-α对鼻咽癌细胞CNE-2体外抗肿瘤作用研究李鏖摘要：目的探讨重组人肿瘤坏死因子-α（rhTNF-α）对鼻咽癌细胞CNE-2体外抗肿瘤作用的研究。
方法以人鼻咽癌细胞CNE-2为细胞模型，用不同浓度rhTNF-α作用于体外培养的CNE-2鼻咽癌细胞，用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测胸苷磷酸化酶（TP）。
结果rhTNF-α浓度分别为10 ng/ml，50 ng/ml，100 ng/ml，200 ng/ml时，TP表达水平分别为5.02±0.32ng/ml，15.38±1.05ng/ml，5.86±1.63ng/ml，44.31±2.17ng/ml，差异有统计学意义（F=23.43，P<0.01）。
结论rhTNF-α在体外能有效抑制鼻咽癌细胞CNE-2增殖，能剂量依赖性上调胸苷磷酸化酶的表达。
关键词：rhTNF-α；鼻咽癌；CNE-2细胞；胸苷磷酸化酶鼻咽癌是我国南方常见恶性肿瘤之一，其发病率一直居于前例[1]。
重组人肿瘤坏死因子-α（rhTNF-α）是有抗肿瘤活性的细胞因子，但肿瘤细胞的异质性及敏感性各异，因而TNF-α存在毒副作用，限制了其临床应用。
而新型重组人肿瘤坏死因子-α（rhTNF-α）具低毒副作用、靶向性强等优点，其体外抗肿瘤效能明显升高[2]。
胸苷磷酸化酶（TP酶）的表达水平能够预测肿瘤对药物的敏感性[3]。
本研究为体外实验，选择人鼻咽癌细胞CNE-2为研究对象，探讨不同剂量rhTNF-α对TP酶的调节作用，为鼻咽癌的个体化治疗提供参考。
1材料及方法1.1细胞系人鼻咽癌细胞CNE-2由中山大学医学院生化教研室细胞库提供。
本研究起始于2016年2月，止于2017年1月。
1.2试剂人rhTNF-α购于厦门特宝生物工程有限公司；胸苷磷酸化酶（TP）检测试剂盒购于美国B&D公司。
1.3 方法1.3.1 细胞培养将鼻咽癌CNE-2细胞接种于体积分数为10%灭活胎牛血清的RPMI-1640培养液中，在37℃、5%CO2培养箱中培养，2-3天传代1次。
重楼皂苷Ⅰ对肺癌循环肿瘤细胞凋亡及周期的影响
王青;阙祖俊;罗斌;郑婷婷;田建辉
【期刊名称】《上海中医药杂志》
【年(卷),期】2017(0)5
【摘要】目的通过体外药效评价重楼皂苷Ⅰ对肺癌循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)增殖、凋亡的影响。
方法分别用不同浓度的重楼皂苷Ⅰ干预CTC 细胞24 h、48 h、72 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,采用流式细胞术和激光共聚焦显微镜分析CTC凋亡与周期情况。
结果重楼皂苷Ⅰ能够显著抑制CTC增殖并具有浓度依赖性,诱导CTC细胞核形态发生明显改变,使凋亡细胞的比例显著升高,并将CTC细胞的周期阻滞在G0/G1期。
结论重楼皂苷Ⅰ通过诱导CTC凋亡,抑制细胞从G0/G1期向S期转化,从而发挥抗肿瘤作用。
【总页数】5页(P77-81)
【作者】王青;阙祖俊;罗斌;郑婷婷;田建辉
【作者单位】上海中医药大学附属龙华医院中医肿瘤研究所;上海市中医药研究院中医肿瘤研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R285
【相关文献】
1.重楼皂苷联合顺铂对人肺腺癌A549细胞凋亡及迁徙转移的影响
2.重楼总皂苷对人肺癌细胞A549的增殖抑制作用及对细胞周期的影响
3.重楼皂苷Ⅱ对人非小细
胞肺癌A549细胞凋亡的影响4.龙葵氯仿及正丁醇提取物对荷lewis肺癌小鼠肿瘤组织细胞周期调控相关蛋白、细胞凋亡及相关凋亡蛋白表达的影响5.重楼皂苷Ⅱ联合喜树碱对肺癌H460、H446细胞凋亡及信号通路的影响
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花姜酮对鼻咽癌细胞株放疗敏感性的影响刘珺;廖剑绚;唐洪波;周芝芳【摘要】目的：观察花姜酮处理对鼻咽癌CNE-2细胞放疗敏感性的影响。
方法体外培养鼻咽癌细胞系CNE-2。
并根据不同的实验目的分为对照组、γ-射线干预组以及γ-射线联合花姜酮处理组。
其中对照组包括空白对照组和花姜酮处理组,分别给予等体积培养基或0~20μmol/L花姜酮处理48 h,γ-射线组采用剂量率为100cGy的γ-射线照射,联合治疗组细胞采用花姜酮预处理24 h后用γ-射线照射。
处理结束后采用MTT法检测CNE-2细胞增殖情况,流式细胞术检测CNE-2细胞周期改变情况。
结果0~20μmol/L花姜酮或100cGy γ-射线单独处理48 h后,对人鼻咽癌CNE-2细胞生长无明显影响；而同时联合不同浓度花姜酮与100cGy的γ-射线处理后,随着花姜酮浓度的增高,细胞增殖水平随之降低。
流式细胞术也显示,0~20μmol/L花姜酮联合100cGyγ-射线照射后,可将细胞阻滞在G1期,同时可降低S期、G2/M期细胞的比例。
结论花姜酮通过改变CNE-2细胞周期而发挥对细胞放疗增敏作用。
%Objective To observe the effect of zerumbone treatment on the radiosensitivity of the nasopharyngeal carcinoma CNE-2 cells. Methods nasopharyngeal cancer cell line CNE-2 was cultured in vitro and divided into the control group, gamma ray intervention group and gamma ray combined with zerumbone treatment group, among them, the control group in-cluded the blank control group and the zerumbone treatment group, and they were respectively given equal-volume culture media or 0-20μmol/L zerumbone treatment for 48h, the gamma ray group adopted 100cGy gamma ray radiation, the com-bined treatment group adopted gamma ray radiation after the zerumbone pretreatment for 24h,and the CNE-2 cell prolifer-ation was detected by MTT method and CNE-2 cell cycle changes were detected by flow cytometry at the end of treatment. Results After 48h single treatment, 0-20μmol/L zerumbone or 100cGy gamma ray radiation had no obvious effect on the human nasopharyngeal carcinoma CNE-2 cell growth; but the combined treatment of different concentrations of zerumbone and 100cGy gamma ray showed that with the increase of the zerumbone concentration, the cell proliferative level decreased, and the flow cytometry also showed that after the treatment of 0-20μmol/L zerumbone and 100cGy gamm a ray radiation, the cells were arrested in G1 phase, at the same time, the cell proportions in S stage and G2/M stage could be reduced. Con-clusion Zerumbone plays a sensibilization role in cell radiotherapy by changing the CNE-2 cycle.【期刊名称】《中国卫生产业》【年(卷),期】2016(013)013【总页数】3页(P24-26)【关键词】花姜酮;鼻咽癌细胞;放疗;敏感性【作者】刘珺;廖剑绚;唐洪波;周芝芳【作者单位】南华大学附属第一医院耳鼻喉科，湖南衡阳 421001;南华大学附属第一医院耳鼻喉科，湖南衡阳 421001;南华大学附属第一医院耳鼻喉科，湖南衡阳 421001;南华大学附属第一医院耳鼻喉科，湖南衡阳 421001【正文语种】中文【中图分类】R473.76［Abstract］Objective To observe the effect of zerumbone treatment on the radiosensitivity of the nasopharyngeal carcinoma CNE-2 cells.Methods nasopharyngeal cancer cell line CNE-2 was cultured in vitro and divided into the control group，gamma ray intervention group and gamma ray combined with zerumbone treatment group，among them，the control group included the blank control group and the zerumbone treatment group，and they were respectively given equal-volume culture media or 0-20μmol/L zerumbone treatment for 48h，the gamma ray group adopted 100cGy gamma ray radiation，the combined treatment group adopted gamma ray radiation after the zerumbone pretreatment for 24h，and the CNE-2 cell proliferation was detected by MTT method and CNE-2 cell cycle changes were detected by flow cytometry at the end of treatment. Results After 48h single treatment，0-20μmol/L zerumbone or 100cGy gamma ray radiation had no obvious effect on the human nasopharyngeal carcinoma CNE-2 cell growth；but the combined treatment of different concentrations of zerumbone and 100cGy gamma ray showed that with the increase of the zerumbone concentration，the cell proliferative level decreased，and the flow cytometry also showed that after the treatment of 0-20μmol/L zerumbone and 100cGy gamma ray radiation，the cells were arrested in G1 phase，at the same time，the cell proportions in S stage and G2/M stage could be reduced.Conclusion Zerumbone plays asensibilization role in cell radiotherapy by changing the CNE-2 cycle. ［Key words］Zerumbone；Nasopharyngeal cancer cell；Radiotherapy；Sensitivity鼻咽癌（nasophary ngeal carcinoma，NPC）是我国两广地区最常见的头颈部恶性肿瘤之一，病理学上大部分表现为低分化鳞癌和未分化癌，且具有高转移和高复发性［1］。
中药重楼抗肿瘤作用的研究进展林云华【摘要】重楼是中医临床常用的清热解毒类中药,可用来治疗恶性肿瘤.现代医学研究在体内外实验中证实,重楼具有较好的抗肿瘤作用,并且在中医临床复方中应用于各种肿瘤的治疗.从中药重楼中分离出来的一部分化学成分也显示出了极大的抗肿瘤潜力.对于中药重楼抗肿瘤作用的机制目前尚不明确,大部分研究较为粗浅.因此,中药重楼抗肿瘤的成分以及抗肿瘤作用机制应是今后研究的主要方向.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2013(019)013【总页数】3页(P2358-2360)【关键词】中药重楼;抗肿瘤作用;研究进展【作者】林云华【作者单位】南昌市第九医院肝四科,南昌,330002【正文语种】中文【中图分类】R285.6重楼(Rhizoma Paridis)是来源于百合科植物云南重楼或七叶一枝花的根茎。
中医认为，重楼具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊的功效，主要用于治疗痈肿疔疮、咽喉肿痛、毒蛇咬伤、惊风抽搐、跌打损伤等症。
中医对肿瘤的治疗主要包括扶正和祛邪两方面，清热解毒法是最重要的祛邪手段之一。
重楼为清热解毒类中药，中医在复方中用其抗肿瘤已经有几千年的历史，主要对恶性肿瘤患者的热症、实证有一定的清热解毒抗肿瘤作用。
中医学中重楼常被组成方剂用于肿瘤的治疗，如食管癌、喉癌、直肠癌、肺癌、宫颈癌、白血病等。
自1979 年发现从重楼中分离出的重楼皂苷Ⅰ和Ⅵ有较强的细胞毒性以来，重楼在抗肿瘤方面的作用越来越受到关注。
当前研究显示，重楼抗肿瘤谱广，毒性较小，其水提取物、醇提取物及其主要活性成分皂苷和其中一些单体(如皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、gracillin、methylmotogracillin、重楼皂苷D 等)在体外对多种肿瘤细胞具有较强的细胞毒性作用。
1 中药重楼抗肿瘤作用体外实验研究中医常在中药水煎复方时使用重楼，但是Sun等［1］筛选了15 种传统中药的醇提取物和水提取物的抗肿瘤作用，发现15 种中药的醇提取物比水提取物的抗肿瘤作用更强，在所有实验中药中，尤以重楼的抗肿瘤作用最强，说明某些中药的用药方式不能只局限于传统的水煎。
重楼皂苷Ⅱ干预后肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力变化及其与miR -16-5p 表达的关系陈琳1，2，刘诗韵1，2，熊琳1，冉凤英1，刘仁炎1，2，陈琴华3，杨光义3，朱军1，21 湖北医药学院附属国药东风总医院药学部，湖北十堰442008；2 湖北医药学院药学院；3 深圳市宝安纯中医治疗医院中药临床药学重点实验室摘要：目的 探讨重楼皂苷Ⅱ对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用及其可能的机制。
方法 取对数生长期的肺癌A549细胞，分为高浓度组、中浓度组、低浓度组和对照组，分别加入3、2、1 μmol /L 重楼皂苷Ⅱ及等量二甲基亚砜溶液，干预24 h 。
采用CCK -8法检测细胞增殖能力（以细胞增殖活力表示），细胞划痕实验检测细胞迁移能力（以细胞迁移率表示），Transwell 侵袭实验检测细胞侵袭能力（以侵袭细胞数表示），Western blotting 法检测凋亡相关蛋白［Cleave -Caspase -3、Bax 、Bcl -2、基质金属蛋白酶2（MMP -2）］表达，实时荧光定量PCR 法检测miR -16-5p 表达。
取对数生长期的A549细胞，分为miR -16-5p inhibitor 组和miR -16-5p NC 组和阴性对照组，miR -16-5p inhibitor 组和miR -16-5p NC 组分别转染含有绿色荧光标记的miR -16-5p inhibitor 和miR -16-5p inhibitor NC ，并加入2 μmol /L 重楼皂苷Ⅱ溶液，阴性对照组未进行细胞转染并加入等量二甲基亚砜溶液，干预24 h ，参照上法检测miR -16-5p 、凋亡相关蛋白表达及细胞生物学行为。
结果 高、中、低浓度组和对照组细胞增殖活力、细胞迁移率及侵袭细胞数均依次升高，组间两两比较P 均<0.05。
与对照组比较，高、中、低浓度组Cleave -Caspase -3、Bax 、miR -16-5p 表达均升高，Bcl -2、MMP -2蛋白表达均降低，以高浓度组变化最明显（P 均<0.05）。
重楼中皂苷类成分抗肿瘤作用及机制研究进展
杜泽飞;张国文;孙健玮
【期刊名称】《云南医药》
【年(卷),期】2024(45)2
【摘要】重楼作为清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊的传统中药,近年来因其较好抗肿瘤活性逐渐得到重视,重楼皂苷是重楼最主要的抗肿瘤活性成分。
大量科学研究
表明其主要活性成分重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ为抗肿瘤的物质基础,以上成分抗肿
瘤机制主要是通过诱导细胞凋亡和自噬、抑制细胞生长增殖和阻滞增殖周期、抑制肿瘤转移、抑制肿瘤耐药,增强化疗敏感性、影响细胞器(线粒体、内质网)的功能活动、抑制肿瘤血管生成等途径抑制多种恶性肿瘤细胞生长。
本文对重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ在抗肿瘤研究方面的成果及作用机制进行归纳总结,为重楼皂苷类药物的开
发和利用及临床抗肿瘤的应用进一步提供思路。
【总页数】3页(P73-75)
【作者】杜泽飞;张国文;孙健玮
【作者单位】昆明医科大学第五附属医院药剂科;昆明医科大学第五附属医院超声
科
【正文语种】中文
【中图分类】R285
【相关文献】
1.重楼皂苷抗肿瘤作用机制的研究进展
2.重楼皂苷的抗肿瘤作用机制研究进展
3.重楼中具有抗肿瘤活性成分作用机制的研究进展
4.重楼皂苷化学成分及抗肿瘤作用研究进展
5.重楼皂苷抗炎、抗氧化及抗肿瘤作用机制研究进展
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重楼皂甙Ⅰ对胃癌肿瘤相关成纤维细胞的作用胃癌是一种常见的恶性肿瘤，通常会通过化疗、手术和放射治疗进行治疗。
然而，这种治疗方法并不总能彻底清除癌细胞，因此需要进一步研究和发展新的治疗手段。
近年来，重楼皂甙Ⅰ被证明对胃癌肿瘤相关成纤维细胞有着很好的治疗作用。
重楼皂甙Ⅰ是从重楼属植物中提取出来的天然成分，具有多种药理作用。
研究表明，重楼皂甙Ⅰ对胃癌肿瘤相关成纤维细胞的作用主要体现在以下几个方面：1. 抑制成纤维细胞活化：胃癌肿瘤相关成纤维细胞在肿瘤发展中扮演着重要角色，它们可以分泌大量的生长因子和基质金属蛋白酶，促进肿瘤细胞的增殖和迁移。
重楼皂甙Ⅰ通过抑制成纤维细胞活化，减少生长因子的释放，从而抑制肿瘤细胞的生长和迁移。
2. 促进成纤维细胞程序化死亡：研究表明，胃癌肿瘤相关成纤维细胞的过度积累与肿瘤的恶化有关。
重楼皂甙Ⅰ可以促进成纤维细胞的程序化死亡，降低细胞的密度，从而减轻肿瘤病人的疼痛和不适。
3. 减少胃癌肿瘤微环境中的细胞因子含量：肿瘤微环境中包含众多类型的细胞及其分泌的细胞因子。
这些细胞因子可以直接或间接地促进肿瘤细胞的生长和转移。
重楼皂甙Ⅰ能够减少胃癌微环境中细胞因子的含量，从而减弱肿瘤的生长和转移。
4. 增强肿瘤对放疗和化疗的敏感性：研究表明，一些肿瘤细胞对放疗和化疗的反应较弱，使得治疗效果不尽如人意。
重楼皂甙Ⅰ能够增强肿瘤细胞对放疗和化疗的敏感性，使得治疗效果更为显著。
总之，重楼皂甙Ⅰ对胃癌肿瘤相关成纤维细胞的作用是多方面的，能够抑制肿瘤细胞的增殖和迁移，促进成纤维细胞的程序化死亡，减弱肿瘤微环境的细胞因子，增强肿瘤对放疗和化疗的敏感性。
因此，重楼皂甙Ⅰ有望成为一种有力的抗胃癌药物。
人参皂苷 Rg3对人鼻咽癌 CNE -2细胞血管生成拟态及迁移能力的影响孔霞;尚九龙;周艳芳;王槐高;顾帝水【期刊名称】《广东医学》【年(卷),期】2015(000)009【摘要】目的：探讨人参皂苷 Rg3对人低分化鼻咽癌细胞系 CNE -2体外血管生成拟态及迁移能力的影响。
方法用不同浓度（0、38、76和114μmol/ L）的Rg3处理 CNE -2细胞后，体外管道形成抑制实验检测 Rg3对CNE -2细胞管道形成能力的影响；Transwell 小室法检测 Rg3对 CNE -2细胞迁移能力的影响；Western blot 法检测 Rg3对 CNE -2细胞中 COX -2、HIF -1α、VEGF 和Fascin1蛋白表达的影响。
结果人参皂苷 Rg3能抑制 CNE -2细胞体外管道形成的能力，其管状结构数量与 Rg3浓度呈负相关（P ＜0.01）；Rg3浓度大于76μmol/ L 时可以抑制 CNE -2细胞的迁移能力，与0μmol/ L Rg3比较差异有统计学意义（P ＜0.05）；且 Rg3对 COX -2、HIF -1α、VEGF 和 Fascin1蛋白表达的影响趋势分别与 Rg3对血管生成拟态和迁移能力的变化趋势呈正相关（ P ＜0.05）。
结论人参皂苷Rg3能抑制CNE -2细胞体外血管生成拟态及迁移能力，其分子机制可能与抑制 CNE -2细胞中COX -2、HIF -1α、VEGF 和 Fascin1蛋白的表达有关。
%Objective To study the inhibitory effects of 20(R)- ginsenoside Rg3 on vasculogenic mimicry and migration of human nasopharyngeal carcinoma CNE - 2 cell line in vitro. Methods CNE - 2 cells treated with different concentrations of Rg3(0 μmol·L - 1 ,38 μmol·L - 1 ,76 μmol·L - 1 and 114 μmol·L - 1 )were assayed with transwell assay and anti -angiogenic test for testing the potential of migration and tube - like structure(TLSs)formation,respec-tively. Meanwhile,the expression of COX - 2,HIF - 1α,VEGF and Fascin1 proteins were detected by Western blotting. Results The formation of TLSs in CNE - 2 cells were significantly inhibited by Rg3 in concentration dependent manners (P < 0. 01);so was the migration ability of CNE - 2 cells(P < 0. 05). At the same time,the expression of COX - 2, HIF - 1α,VEGF and Fascin1 in CNE - 2 cells were down - regulated by Rg3. A significantly positive correlation between the expression of Fascin1 and the migration ability was observed(P < 0. 05),so was the significantly positive correlation between the expression of COX - 2,HIF - 1α and VEGF and the inhibition of the TLS formation(P < 0. 05). Conclusion Rg3 can inhibit the vasculogenic mimicry and migration of CNE - 2 cells in vitro,via the down - regulation of COX - 2, HIF - 1α,VEGF and Fascin1.【总页数】4页(P1314-1317)【作者】孔霞;尚九龙;周艳芳;王槐高;顾帝水【作者单位】广东医学院病理生理学教研室广东东莞 523808;广东医学院生理学教研室广东东莞 523808;广东医学院病理生理学教研室广东东莞 523808;广东医学院病理生理学教研室广东东莞 523808;广东医学院病理生理学教研室广东东莞523808【正文语种】中文【相关文献】1.人参皂苷Rg3对HT-29细胞株MMP-1表达和迁移能力的影响 [J], 杜卫东;屠巍巍;华晨;赵士冲;孙传2.人参皂苷Rg3对人乳腺癌MCF-7细胞血管生成拟态的影响 [J], 黎国栋;杨慧;陆颖3.三维共培养模型下人脐静脉内皮细胞对鼻咽癌CNE2细胞侵袭、迁移及增殖能力的影响 [J], 梁霞;高超;唐勇;刘翰楠;吴健勇;李宇虹;庞波;陈玉4.人参皂苷Rg1对鼻咽癌CNE-2细胞凋亡、侵袭和迁移的影响 [J], 席婕;刘晖5.人参皂苷Rg3对VEGF诱导的RF/6A细胞增殖与迁移能力的影响 [J], 褚文丽; 陈水龄; 亢泽峰; 刘健; 李维义; 陶方方因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
中华中医药学刊重楼皂苷Ⅰ对鼻咽癌CNE －2细胞体外放射敏感性的影响花永虹1，马胜林2，傅真富2，牟翰舟2，江皓1（1．浙江中医药大学研究生院，浙江杭州310053；2．浙江省肿瘤医院放疗科，浙江杭州310022）摘要：目的：探讨重楼皂苷Ⅰ（PP Ⅰ）对鼻咽癌CNE －2细胞的放射增敏作用及可能机制。
方法：MTT 法检测PP Ⅰ对CEN －2细胞增殖抑制作用。
克隆形成实验检测PP Ⅰ对CNE －2的放射增敏效应，单击多靶模型拟合细胞存活曲线并计算放射增敏比。
流式细胞仪检测PP Ⅰ对细胞周期分布和细胞凋亡的影响。
结果：PP Ⅰ对CNE－2细胞有增殖抑制作用，呈时间－剂量依赖性，24和48h 半数抑制量（50%concentration of inhibition ，IC50）分别为6．68μg /mL 和3．84μg /mL 。
1．5和3μg /mL PP Ⅰ的放射增敏比分别为1．10和1．44，DDP 阳性对照组放射增敏比为1．22。
增敏组凋亡率、G2/M 期细胞比例较对照组增多（P ＜0．05）。
结论：PP Ⅰ对鼻咽癌细胞系CNE －2具有放射增敏作用，其机制可能与促进细胞凋亡及引起G2/M 期阻滞有关。
关键词：重楼皂苷Ⅰ；鼻咽癌；放射敏感性中图分类号：R285．5文献标识码：A文章编号：1673－7717（2011）06－1387－04Effect of Polyphyllin Ⅰon Radiosensitivity in Nasopharyngeal CarcinomaCell Line CNE －2in VitroHUA Yong-hong 1，MA Sheng-lin 2，FU Zhen-fu 2，MOU Han-zhou 2，JIANG Hao 1（1．Graduate School ，Zhejiang Chinese Medical University ，Hangzhou 310053，Zhejiang ，China ；2．Department of Radiotherapy ，Zhejiang Cancer Hospital ，Hangzhou 310022，Zhejiang ，China ）Abstract ：Objective ：To explore the radiosensitization of polyphyllin （PP Ⅰ）on nasopharyngeal carcinoma cell line CNE －2and its possible mechanism．Methods ：MTT assaywas used to measure the effect of PP Ⅰon CNE －2cell prolif-eration．Clonogenic assay was performed to determine the radiosensitizing effect of PP Ⅰon CNE －2cell line．Single －hitmultitargetmode was used to plot survival curve．The cell cycle and apoptosis were measured by flow cytometry．Re-sults ：PP Ⅰin a time －dose －dependent manner inhibited CNE －2cell line proliferation ，the IC50of 24and 48hours were 6．68and 3．84ug /mL respectively．The radiosensitization enhancement ratios （SER D0）of 1．5and 3ug /mL PP Ⅰwere 1．10and 1．44respectively ，and that was1．22of DDP．The radiosensitization group had a higher apoptosis rate and G2/M phase cells （P ＜0．05）．Conclusion ：PP Ⅰcould enhance the radiosentivity of nasopharyngeal carcinoma cell line CNE －2，which possibly associated with inducing apoptosis and G2/M phase arrest．Key words ：polyphyllin Ⅰ；nasopharyngeal carcinoma ；radiosensitivity收稿日期：2011－01－20作者简介：花永虹（1979－），女，江西抚州人，主治医师，博士研究生，研究方向：恶性肿瘤的综合治疗。
通讯作者：马胜林（1965－），男，浙江杭州人，主任医师，博士研究生导师，研究方向：恶性肿瘤的综合治疗。
重楼皂苷Ⅰ（polyphyllin Ⅰ，PP Ⅰ）是从中药重楼（Paris Polyphylla ），又称七叶一支花中提取出的小分子单体。
重楼具有多种药理学活性，包括抗菌消炎、止痛镇定及抗肿瘤作用，前期研究发现PP Ⅰ主要以诱导细胞凋亡的方式发挥抗肿瘤作用，对多种肿瘤细胞抑制作用明显，是一种有应用前景的天然药物。
本研究以对鼻咽癌增敏作用明确的DDP 做为阳性对照，观察PP Ⅰ对鼻咽癌CNE －2细胞系放射敏感性的影响。
1材料与方法1．1药物和试剂PP Ⅰ（分子式为C 44H 70O 16，分子量为854）购自中国药品生物制品检定所，纯度大于90%，用二甲基亚砜（DMSO ）稀释成浓度为10mg /mL 的贮存液，以滤器过滤除菌，等量分装，－20ħ保存。
使用时加入RPMI －1640，配成终浓度，保持DMSO 的终浓度小于1%。
RPMI －1640购自杭州四季青生物有限公司，DMSO 、MTT 以及胎牛血清均购自Sig-ma 公司，Annexin Ⅴ－FITC 凋亡试剂盒和细胞周期试剂盒均购自美国BD 公司。
1．2细胞和细胞培养低分化人鼻咽癌CNE －2细胞株由浙江省肿瘤医院肿瘤研究所提供，采用常规方法培养。
用含10%胎牛血清（FPS ）和100U /mL 青霉素、100μg /mL 链霉素的RPMI －1640培养液，培养条件为37ħ、5%CO 2、饱和湿度，2 3天换液传代1次。
实验时采用对数生长期细胞。
1．3MTT 法检测细胞增殖抑制率CNE －2细胞经胰酶消化后，接种于96孔板，每孔细胞数2ˑ103个，培养12h 后换无血清培养液继续培养12h ，使细胞同步生长。
然后，换含不同浓度PP Ⅰ的RPMI －16407831中华中医药学刊培养液100μL ，药物终浓度分别为0、1、2、4、8、16和32μg /mL ，每个浓度设3个复孔，并设空白对照组。
继续培养24h 和48h ，每孔加入MTT 20μL ，置37ħ培养箱孵育4h ，弃去上清，每孔加入DMSO 150μL ，充分震荡混匀10min 后，酶标仪测定570nm 波长处吸光度值。
实验重复3次，取平均值，绘制细胞生长曲线，计算IC 5O 值。
1．4放射增敏实验细胞照射：采用SIEMENS 直线加速器6－MV X 线照射。
射野大小为10cm ˑ10cm ，X 线自下出射，距细胞生长面为100cm ，培养瓶底部垫1cm 填充物，剂量率为100cGy /min 。
集落形成实验：选用低于IC 50的两个药物浓度1．5μg /mL 和3μg /mL 作放射增敏实验，同时设单纯照射组和DDP 阳性对照组，单纯照射组不接受药物处理，阳性对照组选用5μg /mL DDP 做为药物处理因素。
CNE －2细胞经胰酶消化成单细胞悬液，计数细胞数，用常规培养液倍比稀释后接种于六孔板内（接种细胞数随照射剂量的增加而增多），各组细胞贴壁后药物处理3h ，之后给予0、1、2、4、6、8Gy 剂量照射，每组培养21h ，之后弃去药液，换常规培养液于37ħ培养箱内培养10天。
取出后倒去培养液，经甲醇固定，吉姆萨染色10min ，在显微镜下对含50个细胞以上的克隆进行计数。
整个实验中，每个实验点均设3个平行样本。
实验重复2次，取平均值。
1．5流式细胞仪检测细胞周期CNE －2细胞经胰酶消化、计数后以1ˑ106/孔的浓度接种于培养瓶，共设4组，为空白对照组、单纯照射组和低、高浓度PP Ⅰ组，PP Ⅰ组细胞贴壁后分别接受1．5μg /mL 和3μg /mL PP Ⅰ处理3h ，之后和单纯照射组细胞同时接受6Gy 照射，照射条件同上。
于37ħ培养箱内培养21h 后消化离心、收集细胞。
PBS 液洗涤2遍后加入70%冰预冷乙醇固定过夜。
按照细胞周期试剂盒提供的说明书操作，流式细胞仪检测并分析细胞周期。
1．6流式细胞仪检测细胞凋亡CNE －2细胞处理同上，予胰酶消化离心、收集细胞，调整细胞密度为1ˑ106/L ，按照Annexin V －FITC 凋亡试剂盒提供的说明书操作，流式细胞仪检测并分析细胞凋亡。
1．7统计学分析采用SPSS 12．0软件，均数比较采用方差分析，P ＜0.05为差异有统计学意义。
集落形成实验结果采用多靶单击模型方程SF =1－（1－e－D /D0）N拟合细胞存活曲线，Dq =D0ˑIn （N ）。
放射增敏比SER 的定义为达到相同的生物效应时，单纯照射的剂量与照射加药组的剂量之比（SER =对照组D 0/实验组D 0）。
2结果2．1PP Ⅰ在体外抑制CNE －2细胞增殖PP Ⅰ对鼻咽癌CNE －2细胞有增殖抑制作用，呈时间－剂量依赖性，绘制细胞生长曲线（见图1）。
研究显示，随PP Ⅰ剂量的增加和作用时间的延长，CNE －2细胞增殖抑制率增大。
24h 和48h IC 50分别为6．68μg /mL 和3．84μg /mL 。
2．2PPI 对CNE －2细胞的放射增敏作用根据集落形成实验结果，按多靶单击模型拟合细胞存活曲线（见图2），并计算各组细胞放射敏感性参数，包括D 0、D q 、N 、SF2和放射增敏比（SER D0）（见表1）。
结果提示PP Ⅰ对CNE －2细胞系有放射增敏作用，呈浓度依赖性。
细胞经低、高浓度PP Ⅰ处理后D 0均较单纯照射组降低，而高浓度PP Ⅰ组的放射增敏作用强于阳性对照DDP 组。
图1鼻咽癌CNE －2细胞的药物浓度－细胞生长曲线图2各组药物处理后鼻咽癌CNE －2细胞放射剂量－细胞存活曲线表1各组药物处理鼻咽癌CNE －2细胞放射增敏参数组别D0（Gy ）Dq （Gy ）N SF2（%）SERDO 单纯照射组2．571．942．1271－DDP 阳性对照组2．101．391．94601．22PP Ⅰ增敏组（2ug /mL ）2．331．151．90681．10PP Ⅰ增敏组（4ug /mL ）1．781．632．01591．44注：SF2为2Gy 照射后的细胞存活分数。
