基因组学
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生物的基因组学与生物信息学基因组学和生物信息学是现代生物学领域两个重要的分支。
基因组学研究基因组的组成、结构和功能,而生物信息学则利用计算机、数学和统计学等工具来处理和分析大规模的生物学数据。
1. 基因组学的概念与发展基因组学是研究生物体遗传信息的总和,包括DNA的组成、基因的组织和调控以及基因与基因之间的相互作用。
人类基因组计划的启动标志着基因组学的发展进入了一个新的阶段。
通过对不同生物基因组的研究,基因组学科学家们揭示了生命起源、进化以及生物体的复杂性。
2. 生物信息学的概念与应用生物信息学是一门研究如何存储、检索、分析和应用生物学数据的学科。
随着DNA测序技术的迅速发展,生物学领域产生了大量的数据,如基因序列、蛋白质序列等。
生物信息学通过运用计算机科学和统计学的方法,帮助科学家们更好地理解生物学现象,预测基因的功能和蛋白质的结构,以及挖掘新的生物学知识。
3. 基因组学与生物信息学的关系基因组学和生物信息学密切相关,相互促进,共同推动了生物学领域的发展。
基因组学提供了大量的数据资源,为生物信息学的研究和应用提供了基础。
而生物信息学则通过开发算法和软件工具,对基因组学数据进行处理、分析和解读,从而揭示基因组的结构、功能和演化等重要信息。
4. 基因组学与生物信息学在研究中的应用基因组学和生物信息学在许多领域都有广泛的应用。
例如,通过基因组学和生物信息学的研究,科学家们可以识别与疾病相关的基因,为疾病的早期诊断和治疗提供基础。
同时,基因组学和生物信息学的技术也被应用于农业、畜牧业和环境保护等方面,为提高农作物产量、改良畜禽品种以及保护生物多样性提供了新的途径。
5. 基因组学与生物信息学的挑战与未来发展尽管基因组学和生物信息学在生物学领域的应用取得了巨大的进展,但仍面临许多挑战。
其中包括如何处理和分析大规模的生物学数据、如何挖掘数据中隐藏的信息以及如何整合不同的数据源等。
未来,基因组学和生物信息学的发展方向将更加注重技术的改进和算法的优化,以应对日益增长的数据量和研究需求。
基因组学概念
基因组学(Genomics)是一门研究基因组结构和功能的学科,它涵盖了生命科学、生物信息学、计算机科学等多个领域。
基因组学通过研究基因组的结构、组成、表达和调控,深入理解生命的本质、生物多样性和疾病发生机制,为新药研发、医学诊断和治疗提供基础支持和解决方案。
基因组学的主要研究对象是基因组,即生物体内部所有基因的集合体。
基因组由DNA序列组成,其中包括编码蛋白质和调节基因表达的基因,以及非编码DNA序列和重复DNA序列等。
基因组学的研究内容包括以下几个方面:
1. 基因组测序:通过高通量测序技术,对基因组进行大规模的测序分析,以获取基因组的详细序列和变异信息。
2. 基因组组装:通过对测序数据进行组装和分析,构建基因组的物理图谱和遗传图谱,以确定基因组的结构和组成。
3. 基因组注释:通过对基因组序列进行注释和分析,确定基因的编码区、调控序列和重复序列等信息,以揭示基因的功能和表达模式。
4. 基因组变异分析:通过分析基因组序列中的变异,包括单核苷酸变异(SNV)、插入和缺失(INDEL)、结构变异(SV)等,揭示基因组的遗传多样性和疾病发生机制。
5. 基因组学应用:将基因组学应用于医学、农业、环境科学等领域,包括新药研发、疾病诊断和治疗、生物多样性保护等。
基因组学的发展得益于现代科技的不断进步和创新,如高通量测序技术、生物信息学方法和计算机科学算法等。
随着技术的不断革新和完善,基因组学将在生命科学、医学和农业等领域发挥越来越重要的作用,为人类提供更加全面、深入和精准的知识和解决方案。
各种组学的基本概念组学是一门交叉学科,它综合了生物学、统计学和计算机科学等多个领域的知识,旨在揭示基因组、转录组、蛋白质组以及其他组学层面上的生物学特征和机制。
在过去的几十年中,随着高通量测序和其他技术的不断发展,组学研究在生命科学领域中发挥着越来越重要的作用。
在组学领域中,有许多基本概念是我们需要了解和掌握的。
下面,我将介绍一些最基础的组学概念,帮助你对这个领域有更全面、深刻和灵活的理解。
1. 基因组学 (Genomics)基因组学是组学研究中最基础的一个领域。
它研究的是整个生物体的基因组,即一套完整的遗传物质。
基因组学的目标是揭示基因组的结构、功能和演化。
2. 转录组学 (Transcriptomics)转录组学研究的是生物体在特定时期或特定环境下所产生的所有RNA 分子的总和,即转录组。
转录组学可以帮助我们了解基因的表达模式和调控机制。
3. 蛋白质组学 (Proteomics)蛋白质组学研究的是生物体在特定时期或特定环境下所产生的所有蛋白质的总和,即蛋白质组。
蛋白质组学的研究可以帮助我们理解蛋白质的功能、互作网络以及与疾病相关的异常表达。
4. 代谢组学 (Metabolomics)代谢组学研究的是生物体在特定时期或特定环境下所产生的所有代谢产物的总和,即代谢组。
代谢组学可以帮助我们了解生物体的代谢状态、代谢网络以及与疾病相关的代谢异常。
5. 聚宽组学 (Phenomics)聚宽组学是对生物体在特定时期或特定环境下所表现出的所有性状和表型的研究。
它可以帮助我们理解基因与表型之间的关系,以及基因对表型的调控机制。
以上是组学领域中一些基本的概念。
值得一提的是,随着技术的不断进步,组学领域也在不断发展和创新,新的概念和技术层出不穷。
对这些概念和技术的理解与掌握,对于我们深入探索生命本质、揭示生物学特征和机制具有重要意义。
在我看来,组学作为一门纵横交错的学科,不仅仅局限于生物研究领域,而且在医学、农业、环境科学等多个领域都有着广泛的应用价值。
基因组:生物所具有的携带遗传信息的遗传物质的总和,是指生物细胞中所有的DNA,包括所有的基因和基因间区域。
基因组学:研究基因组结构和功能的科学。
指以分子生物学技术、计算机技术和信息网络技术为研究手段,以生物体内全部基因为研究对象,在全基因背景下和整体水平上探索生命活动的内在规律及其内外环境影响机制的科学。
C值:指一个单倍体基因组中DNA的总量,以基因组的碱基对来表示。
每个细胞中以皮克(pg,10-12g)水平表示。
C 值矛盾:在结构、功能很相似的同一类生物中,甚至在亲缘关系十分接近的物种之间,它们的C值可以相差数10倍乃至上百倍。
序列复杂性:不同序列的DNA总长称为复杂性,复杂性代表了一个物种基因组的基本特征。
隔裂基因:指基因内部被一个或更多不翻译的编码顺序即内含子所隔裂。
假基因:来源于功能基因但已失去活性的DNA序列。
微卫星序列:或称简单串联重复,重复单位较短。
重复序列只有1-6个核苷酸,分布在整个基因组,10-50个重复单位.重叠群:通过末端的重叠序列相互连接形成连续的DNA长片段的一组克隆称为重叠群。
指纹:指确定DNA样品所具有的特定DNA片段组成。
STS作图:根据STS序列设计引物,扩增文库当中的克隆,能扩出条带的克隆都含有序列重叠的插入子。
荧光原位杂交:指在染色体上进行DNA杂交,以便识别荧光标记探针在染色体上位置的方法。
辐射杂种群:通过放射杂交产生的融合细胞群称为辐射杂种群。
覆盖面(或深度):每个核苷酸在完成顺序中平均出现的次数,或者说完成顺序的长度与组装顺序长度之比。
支架:一组已锚定在染色体上的重叠群, 内部含间隙或不含间隙.同源性:基因系指起源于同一祖先但序列已经发生变异的基因成员。
一致性:指同源DNA顺序的同一碱基位置的相同的碱基成员, 或者蛋白质的同一氨基酸位置的相同的氨基酸成员, 可用百分比表示.相似性:指同源蛋白质的氨基酸序列中一致性氨基酸和可取代氨基酸所占的比例。
转座子:一段DNA顺序可以从原位上单独复制或断裂下来,插入另一位点,并对其后的基因起调控作用,此过程称转座,这段序列称跳跃基因或转座子。
基因组:生物所具有的携带遗传信息的遗传物质的总和,是指生物细胞中所有的DNA,包括所有的基因和基因间区域。
基因组学:指以分子生物学技术、计算机技术和信息网络技术为研究手段,以生物体内全部基因为研究对象,在全基因背景下和整体水平上探索生命活动的内在规律及其内外环境影响机制的科学。
基因组学包括3个不同的亚领域1结构基因组学:以全基因组测序为目标2功能基因组学:以基因功能鉴定为目标3比较基因组学C值是指一个单倍体基因组中DNA的总量,以基因组的碱基对来表示。
C值悖理(矛盾):在结构、功能很相似的同一类生物中,甚至在亲缘关系十分接近的物种之间,它们的C值可以相差数10倍乃至上百倍。
C值不随生物的进化程度和复杂性而增加;关系密切的生物C值相差甚大;真核生物的DNA的量远大于编码蛋白质所需的量。
C值反映了总体趋势上,随着生物结构和功能的复杂性的增加,各分类单元中最小基因组的大小随分类地位的提高而递增。
单一顺序:基因组中单拷贝的DNA序列重复顺序:基因组中多拷贝的基因序列真核生物基因组DNA组分为非均一性,可分为3种类型:快速复性组分、居间复性组分、缓慢复兴组分基因家族:是真核基因组的共同特征,他们来自一个共同的祖先,因基因加倍和趋异,产生了许多在DNA序列上基本一致而略有不同的成员。
包括编码RNA的基因和编码蛋白质的基因隔裂基因(split gene):指基因内部被一个或更多不翻译的编码顺序即内含子所隔裂。
3、异常结构基因分类重叠基因:编码序列彼此重叠的基因,含有不同蛋白质的编码序列。
基因内基因:一个基因的内含子中包含其他基因。
反义基因:与已知基因编码序列互补的的负链编码基因,参与基因的表达调控,可以干扰靶基因mRNA转录与翻译。
假基因:来源于功能基因但已失去活性或者改变原来活性功能的DNA序列.四、基因组特征比较真核生物基因组的特征:复杂性较高的生物基因组结构松弛,在整个基因组范围内分布大量重复顺序(小基因组重复序列较少,大基因组重复序列急剧扩增);含有大量数目不等的线性DNA分子,并且,每个长链DNA都与蛋白质组成染色体结构;含有细胞器基因组(所有真核生物都具有环状的线粒体DNA,植物细胞还含有环状的叶绿体DNA。
名词解释:第一章基因组遗传图(连锁图):指基因或DNA标记在染色体上的相对位置与遗传距离。
单位是厘摩cM (基因或DNA片段在染色体交换过程中分离的频率)。
物理图:以已知核苷酸序列的DNA片段(序列标签位点,sequence-tagged site, STS)为“路标”,以碱基对作为基本测量单位(图距)的基因组图。
转录图:以EST(expressed sequence tag ,表达序列标签)为标记,根据转录顺序的位置和距离绘制的图谱。
EST:通过从cDNA文库中随机挑选的克隆进行测序所获得的部分cDNA的5'或3'端序列称为表达序列标签(EST),一般长300-500 bp左右。
序列图(分子水平的物理图):序列图是指整个人类基因组的核苷酸序列图,也是最详尽的物理图。
既包括可转录序列,也包括非转录序列,是转录序列、调节序列和功能未知序列的总和。
基因:合成有功能的蛋白质或RNA所必需的全部DNA序列,即一个基因不仅包括编码蛋白质或RNA的核酸序列,还应包括为保证转录所必需的调控序列。
基因组(genome):生物所具有的携带遗传信息的遗传物质的总和。
基因组学(genomics):涉及基因组作图、测序和整个基因组功能分析的一门学科。
C值:单倍体基因组的DNA总量,一个特定种属具有特征C值C值矛盾(C value paradox):指一个有机体的C值和其编码能力缺乏相关性。
单一序列:基因组中单拷贝的DNA序列。
重复序列:基因组中多拷贝的DNA序列。
复杂性(complexity):基因组中不同序列的DNA总长。
高度重复序列(highly repetitive sequence):重复片段的长度单位在几个到几百个碱基对(base pair,bp)之间(一般不超过200 bp),串联重复频率很高(可达106以上),高度重复后形成的这类重复顺序称为高度重复顺序。
中度重复序列(intermediate repetitive sequence ):重复长度300~7000 bp不等,重复次数在102~105左右。
基因组学与转录组学的比较研究随着科技的不断发展,人们对于生物学的研究也越来越深入。
基因组学和转录组学是生物学中相对较新的概念,二者都涉及到基因的研究,但研究方向却有所不同。
本文将为大家介绍基因组学与转录组学的比较研究。
1. 基因组学基因组学是指对生物体某一物种全部基因组的研究,包括基因组的序列分析、结构、功能及进化等方面。
基因组学的研究旨在了解基因组的组成、结构和功能等基本特征,为研究生物体的形态、生理、生态、进化及其它方面提供基础。
基因组学的重要性在于它为对生物体全面系统性的研究开设了一个新的分析维度。
2. 转录组学转录组学是指研究物种基因组中所有转录产物的学科。
转录组学的主要研究对象是mRNA,研究方向是与mRNA相关的转录调控,即从转录起始点到终止点上的基因表达调控的过程。
转录组学研究可以深入地探究基因的表达模式和调控机制,对于理解生物体的发育、个体差异、环境响应以及疾病的发生等方面都有重要作用。
3. 基因组学和转录组学的研究领域不尽相同,但二者又有很大的交叉和互相支持的关系。
基因组学主要研究基因组序列,可揭示物种遗传变异、进化和表达差异等信息;而转录组学则通过研究RNA序列、芯片和RNA测序等方案来分析某一生物在不同生理状态下基因表达的变化,以及对其环境的适应能力和差异性等问题。
具体来说,基因组学对于全面了解基因的组成和结构有着重要作用,而转录组学则为基因组学提供了探究基因功能的途径。
基因组学可以发现基因的表达差异性、基因变异等信息,而转录组学则可以将这些信息与不同生物学过程相应的基因表达水平相关联。
虽然两种方法不同,但通过二者的综合分析可以更为深入地理解生物体的生命过程。
4. 结论基因组学和转录组学是现代生物学发展的重要研究领域。
二者互为补充,在生物学研究中起到了不可替代的作用。
基因组学的深入研究为我们提供了全面系统的生物信息,而转录组学则探究了基因组的内部活动规律,使人们对于基因组的功能和作用有了更为清晰的认识。
基因组学与蛋白质组学在科学研究领域中,基因组学和蛋白质组学是两个重要且密切相关的学科。
基因组学研究基因组中的所有基因,而蛋白质组学则研究细胞或生物体内所有蛋白质的组成和功能。
本文将从基因组学和蛋白质组学的原理和技术入手,分别介绍它们的研究对象和方法,并探讨二者之间的关系与应用。
一、基因组学基因组学是研究基因组的学科,基因组是指一个生物体内的所有基因的总和。
基因是遗传信息的基本单位,负责编码蛋白质和调控生物体的生理功能。
通过基因组学的研究,我们可以了解到一个生物体的基因组组成、结构和功能等信息。
1.1 基因组的分类基因组可以分为原核生物基因组和真核生物基因组。
原核生物基因组比较简单,一般只有一个染色体,如细菌和古细菌。
真核生物基因组相对复杂,由多个染色体组成,如人类和动物。
此外,还有一个概念是人类基因组。
人类基因组是指人类体内的所有基因的总和,它是真核生物基因组的一种。
1.2 基因组研究的方法基因组学的研究方法主要包括基因测序和基因表达分析。
基因测序是确定一个生物体基因组DNA序列的过程。
早期的基因测序技术采用Sanger测序法,但随着高通量测序技术的发展,如第二代测序技术(NGS),基因测序的速度和效率大大提高。
基因表达分析是研究基因在特定条件下的表达水平和模式。
常用的方法有微阵列芯片和RNA测序。
1.3 基因组学的应用基因组学的研究对于理解生命的发展和信号传递、疾病的诊断和治疗等方面具有重要意义。
在生命科学领域,通过对基因组的研究,可以了解基因之间的相互作用和调控关系,从而深入了解生命的本质。
此外,基因组学也可以帮助研究人类进化和种群遗传学问题。
在医学方面,基因组学为疾病的诊断和治疗提供了新的思路和方法。
通过比较基因组,可以快速准确地诊断某些遗传性疾病,并开发个性化治疗方案。
二、蛋白质组学蛋白质组学是研究蛋白质组的学科,蛋白质组是指细胞或生物体内所有蛋白质的总和。
蛋白质是细胞内的重要功能分子,不仅可以作为酶催化化学反应,还可以作为结构蛋白和信号传递分子等。
基因组学的发展与未来趋势基因组学是研究生物体基因组的组成、结构、功能和演化的科学领域。
随着科技的迅猛发展,基因组学在过去几十年中取得了重大突破,为人类认识自身和其他生命体提供了全新的视角。
本文将探讨基因组学的发展历程,并展望未来的趋势与应用。
一、基因组学的发展历程1.1 基因组学的起源基因组学的起源可以追溯到1953年,当时科学家沃森和克里克发表了关于DNA的结构和复制的研究成果。
这一发现揭示了基因组信息的存储和传递机制,为后续的基因组研究奠定了基础。
1.2 基因组项目的实施随着技术的进步,人类基因组计划于1990年启动,旨在解码人类基因组的完整序列。
这项具有历史意义的计划于2003年完成,揭示了人类基因组中约3亿个碱基对的排列顺序。
1.3 全基因组关联研究全基因组关联研究(GWAS)是基因组学的重要研究方法之一,通过比较大样本人群的基因变异和表型差异,找到与疾病发生风险相关的基因。
GWAS的快速发展在研究复杂疾病的遗传基础和寻找新的治疗靶点方面起到了关键作用。
二、基因组学的现状2.1 基因组学在医学中的应用基因组学的突破性进展使得个性化医疗成为可能。
通过基因组测序和分析,医生可以根据患者的基因信息制定更准确的诊断和治疗方案。
此外,基因组学还为研发新药提供了新的思路和方法。
2.2 基因组学在农业中的应用基因组学在农业领域的应用也有着巨大的潜力。
通过基因组编辑技术,可以改良农作物的品质、抗病虫害能力和适应性。
此外,基因组学还可以帮助保护濒危物种和改善养殖业的效益。
三、基因组学的未来趋势3.1 单细胞基因组学传统的基因组学研究通常基于大量细胞的基因组信息,难以获取单个细胞的信息。
单细胞基因组学的发展使得我们能够深入了解单个细胞的基因组变异、表达和功能,为研究人体发育、器官发育和肿瘤发生提供了新的视角。
3.2 基因组学与人工智能的结合人工智能的快速发展为基因组学带来了巨大的机遇。
通过利用人工智能算法处理和分析庞大的基因组数据,可以在更短的时间内揭示基因与疾病的关联,加快新药研发的速度,推动基因组学研究的进一步突破。
基因组学概论一、基因组学定义及研究内容基因组学(genomics)是研究生物基因组和如何利用基因的一门学问,是对所有基因进行基因作图(包括遗传图谱、物理图谱、转录图谱)、核苷酸序列分析、基因定位和基因功能分析的一门学科。
基因组学与传统遗传学或其他学科的差别在于基因组学主要是从整体水平分析基因组如何发挥作用,注重基因在整个基因组中所扮演的角色与功能,而非孤立地考虑基因的结构与表达。
基因组学是针对生物基因组所蕴藏的全部生物性状的遗传信息的解读与研究,因而基因组学涉及有关基因组DNA 的序列组成,全基因组的基因数目、功能和分类,基因组水平的表达调控及不同物种之间的进化关系的大范畴、高通量的收集和分析。
基因组学的概念是由美国科学家Thomas Roderick 于1986 年首次提出的,当时是指对于基因组的作图、测序及分析,随着基因组计划的深入开展,其研究内容也扩展至基因功能的研究。
基因组学是随着人类基因组计划提出的,随着人类基因组图谱及其分析结果的报道,以及多种细菌和酵母微生物,多种昆虫、动物以及水稻、拟南芥植物等模式生物基因全序列的完成,基因组学的研究已经从结构基因组学开始过渡到功能基因组学。
目前,基因组学研究的内容和主要目的有:(1)建立以互联网为平台的数据库;(2)组建基因组的物理图谱和遗传图谱;(3)确定基因及基因组的序列;(4)分析基因组的结构特点;(5)鉴定基因组中的所有基因,并且根据蛋白质序列来确定其功能或大致功能;(6)建立基因表达数据库;(7)建立基因与表现型之间的关系;(8)确定DNA序列的复杂性;(9)为比较不同生物的基因组提供资料,使一种生物的遗传数据可用来分析其他生物的基因和基因组。
二、基因组学发展历程基因组学形成比较完整的学科是近二十年的事,但它的孕育、产生和发展却经历了比较长的时间,大体可以划分为下列五个阶段:1.前遗传学时代(1900年以前)这时期主要的事件是1859 年Darwin 提出了物种进化的自然选择学说——达尔文进化论和1865年Mendel提出了分离定律与自由组合定律。
生物信息学中的基因组学与转录组学随着生物技术和计算机技术的飞速发展,生物信息学作为一门交叉学科逐渐崭露头角。
其中,基因组学和转录组学被认为是生物信息学中最为重要的两个领域之一。
本文将从基因组学和转录组学的概念、技术、应用等方面入手,探讨这两个领域的研究进展和前景。
一、基因组学基因组学是研究生物个体(如细胞、组织、机体等)基因组的系统科学。
基因组是指某个生物体的所有基因组成的全套基因,包括DNA上编码基因序列以及非编码序列等。
基因组学研究的主要任务是识别、分析、描述生物体的所有基因,以及这些基因之间的相互作用关系,进而揭示生物体的基因组特征和遗传变异。
近年来,基因组学研究得到了广泛的关注和支持。
目前,基因组学中常用的研究技术包括基因芯片、高通量测序、CRISPR/Cas-9等。
基因芯片是一种高通量检测技术,其利用已知的基因序列设计出特定的DNA探针,快速检测目标样本中相应基因的表达情况和变异信息。
高通量测序是一种快速、准确测量DNA序列的新技术。
它通过对DNA样本进行切割、连接、扩增等步骤,最终得到整个DNA序列的准确数据。
CRISPR/Cas-9技术是一种新兴的基因编辑技术,利用精准的RNA导向的核酸切割酶Cas-9,可以在不同基因的DNA序列中准确地割断,以达到改变目标基因的目的。
基因组学的研究应用非常广泛,最突出的就是在疾病基因的研究和治疗方面。
利用基因芯片和高通量测序技术,可以高度准确地检测出体内多个基因的表达情况和相互之间的作用关系。
同时,基因组学也被广泛应用于农业、环境保护和动植物保护等方面。
二、转录组学转录组学是研究某个组织、器官或机体某个时期内所有转录RNA的表达谱,从而分析基因的表达、调控及其功能的一门科学。
转录组学侧重于研究基因转录活动及其调节机制,是理解生物体内部环境和生理功能的重要工具。
转录组学的技术主要包括RNA测序、cDNA微阵列和实时荧光定量PCR等。
RNA测序技术是转录组学中常用的一种高通量检测技术,通过检测RNA序列和RNA数字表示技术等,可以高度准确地定量出RNA的表达量。
基因组学-Genomics-知识考点汇总•基因组(Genome:Gene+chromosome)细胞或生物体中一套完整的单倍体遗传物质•基因组学(Genomics)最早Thomas Roderick在1986年提出,包括基因组作图、测序和分析。
可分为结构基因组学和功能基因组学。
一、结构基因组学1.遗传图(Genetic Mapping Genomes) : Based on the calculation of recombination frequencyby linkage analysis .通过亲本的杂交,分析后代的基因间重组率,并用重组率来表示两个基因之间距离的线形连锁图谱每条染色体组成一个连锁群,所有染色体的连锁群组成的图谱即构成基因组遗传图。
重组率代表基因位点之间的相对距离。
在遗传作图中,人们把一个作图单位定义为1厘摩(cM),1cM等于1%的重组率。
提高遗传作图的分辨率:选用不同的杂交群体;增加杂交群体的数目;增加分子标记的数目;扩大分子标记的来源分子标记:绘制基因组遗传图需要的坐标点。
分子标记的主要来源是染色体上存在的大量等位基因。
在DNA水平上,两个基因间一个碱基的差异就足以形成等位基因。
2.物理图(physical map):指DNA序列上两点的实际距离,它是以DNA的限制酶片段或克隆的大片段的基因组DNA分子为基本单位,以连续的重叠群为基本框架,通过遗传标记将重叠群或基因组DNA分子有序排列于染色体上。
物理图的绘制: Based on molecular hybridization analysis and PCR techniques杂交法;指纹法;荧光原位杂交技术。
3.基因组序列测定: Sequencing methods: the chain termination procedure;Map-based clone by clone strategy;Whole genome shotgun (WGS) strategy;Sequence assembly;•传统基因组测序的方法:克隆步移法(BAC-by-BAC Strategy)和全基因组鸟抢法(Whole Genome Shotgun Strategy)。
基因组学概论基因:合成有功能的蛋白质或RNA所必需的全部DNA序列,即一个基因不仅包括编码蛋白质或RNA的核酸序列,还应包括为保证转录所必需的调控序列。
基因组(genome):生物所具有的携带遗传信息的遗传物质的总和。
真核生物基因组 1 核基因组2线粒体基因组3叶绿体基因组原核生物基因组1染色体2质粒基因组学(genomics):涉及基因组作图、测序和整个基因组功能分析的一门学科。
分为:结构基因组学,功能基因组学和比较基因组学。
结构基因组学:通过基因组作图、核苷酸序列分析确定基因组成、基因定位的科学。
基因组作图:在长链DNA分子的不同位置寻找特征性的分子标记,绘制基因组图。
根据分子标记可以准确无误地将已测序的DNA小片段锚定到染色体的位置上。
功能基因组学:利用结构基因组学,提供的信息和产物,在基因组系统,水平上全面分析基因功能的科学。
研究内容 1 进一步识别基因以及基因转录调控信息。
2 弄清所有基因产物的功能,这是目前基因组功能分析的主要层次。
3研究基因的表达调控机制,研究基因在生物体发育过程以及代谢途径中的地位,分析基因、基因产物之间的相互作用关系,绘制基因调控网络图。
比较基因组学:研究不同物种之间在基因组结构和功能方面的亲源关系及其内在联系的学科。
研究内容:1通过研究不同生物基因组结构和功能上的相似之处,不仅能勾画出一张详尽的系统进化树,而且将显示进化过程中最主要的变化所发生的时间及特点。
据此可以追踪物种的起源和分支路径。
2了解同源基因的功能。
3对序列差异性的研究有助于认识产生大自然生物多样性的基础。
定位候选克隆通过遗传分析等方法将疾病基因定位到染色体区段上。
对人类基因组图上该区段内的基因进行功能分析,并筛选出疾病基因。
(多用于单基因遗传病的筛查)单核苷酸多态性(SNP)是由于单个核苷酸改变而导致的核酸序列多态。
SNP在人基因组中的发生频率比较高,是最常见的基因组差异。
和人类的健康有着密切的关系。
课程名称基因组学硕士课程论文题目:基因枪技术在植物学研究中的应用学科专业: 植物学年级: 2012 学号: 2012210632 研究生:侯敏指导教师:查笑君论文提交时间: 2012 年 12 月 11 日基因枪技术在植物学研究中的应用摘要基因枪是当今研究中一种重要的基因转移方法,在各个应用领域都显示出了其独特的优越性,因而广受重视;与此同时,基因枪技术本身也在实践中不断发展和完善。
本文在回顾和总结基因枪技术使用原理的基础上,综述了基因枪在植物学研究中的应用。
关键词基因枪;植物学;基因转移;应用Appl ication of Particle Bombardment in the Research of Botany AbstractAs an important means of gene delivery , gene gun technology has showed its superiority in many application fields of gene engineering , and so has gained wide attention. At the same time , gene gun technology is also evolving in practice. Upon the retrospection and of the gene gun principles , the application of the gene gun in the Botanical Research was summaried.Key words Gene gun ; botany ; gene delivery ;application1 基因枪技术的转化原理与发展近年来转基因技术以前所未有的速度进步人们已经不再满足于单个基因成功插入原有生物的基因组中而是把目光放在插入基因的成功表达和产。
然而自然界的生物体是十分复杂的有机整体许多的功能性状并不是单个基因可简单调控的即使像海藻一样简单的双糖在酵母中的代谢途径也需要个基因产物的直接参与。
目前进行多基因转化研究的主要技术手段有两种一种是单质粒载体的转化即几个目的基因和标记基因在同一载体质粒上另一种是目的基因和标记基因位于不同的载体上的共转化研究后者的主要优点在于能在分离的世代中把在生产中没有意义的基因分离同时也可以转入更多的外源基因基因枪转化方法则是实现其转化的主要途径。
基因枪技术( Particle gun) ,又称生物弹或生物发射法(Biolistic process) 、粒子轰击技术( Particle bombardment) 和高速微粒子发射技术( High - velocity microprojectile) 。
其原理是利用高速飞行的微米或亚微米级惰性粒子(钨或金粉) ,将包被其外的目的基因直接导入受体细胞,并释放出外源DNA ,使DNA 在受体细胞中整合表达,从而实现对受体细胞的转化。
根据动力来源不同,基因枪可大体分为火药式( Gunpowder )、放电式( Elect ric discharge) 和气动式(Pneumatic) 3 种类型。
1987 年美国康乃尔大学的J . C. Santord 等设计制造的火药式基因枪是最初的基因枪。
到目前为止还有以化学推进剂为动力(弹药枪) 和以放电为动力(电子枪) 用于粒子轰击细胞的新工具,特点是能转化有细胞壁的植物细胞,并能直接向细胞器中输入DNA ,或用来转化花粉以避开组织培养的操作。
在全面推广粒子枪之前还要进行开发和改良,更有效的电子枪会取代弹药枪。
2 基因枪法在禾谷类作物遗传转化中的应用2.1 转化目的基因改良作物性状在用基因枪法转化禾谷类作物的研究中,转化的目的基因主要有抗除草剂基因、抗虫基因、抗病基因、雄性不育基因等。
2.1.1 转化抗除草剂基因抗除草剂基因既可用作选择标记基因建立遗传转化系统,又能作为目的基因,使转基因作物在生长期间可使用除草剂除草,从而免去人工除草工作,节省了大量劳力。
常用的抗除草剂基因是PPT 乙酰转移酶基因(又称bar 基因) ,抗除草剂bialaphos。
用基因枪法将bar 基因转化小麦[、水稻、玉米、高粱,均获得了抗除草剂植株。
2.1.2 转化抗虫基因在禾谷类作物中,用基因枪法转化的抗虫基因主要是苏云金芽孢杆菌的晶体蛋白基因(Bt 基因) ,而且在玉米中报道得较多,王国英等用基因枪法将Bt 基因转化玉米胚性愈伤组织,获得了转Bt 基因的植株,对一个转Bt 基因植株的杂交后代进行了玉米螟抗性的田间鉴定,抗虫和感虫植株的比例接近1∶1 ,符合孟德尔单显性基因的遗传规律。
在水稻中,用改良的苏云金杆菌δ—内毒素[cryIA(b) ]基因经基因枪法转化,获得了能育的抗黄茎钻蛀虫转基因粳稻植株。
2.1.3 转化抗病基因简玉瑜等用基因枪法将抗菌肽B(cecropin B) 基因导入水稻得到了转基因植株,对T3 代抗白叶枯病株系进行Nouthern 印迹分析,证明cecropin B 基因在RNA 水平有表达。
另外, 王慧中、华志华等报道,用基因枪转化法将cecropin B 基因导入水稻均获得抗白叶枯病的转基因植株。
2.1.4 转化雄性不育基因中科院遗传所傅荣昭等用基因枪法将人工雄性不育基因( TA29 - Barnase 基因) 导入小麦豫麦18号,获得了经Southern 杂交证实的转基因小麦植株。
中科院华南植物研究所凌定厚等用基因枪法将psl - barnase 基因转化水稻,获得了psl - barnase 阳性转基因的水稻雄性不育3 转化中轰击的影响因素的研究刘伟华等对小麦的研究表明,对小麦愈伤化的幼胚进行轰击, 采用200~250 Lg 金粉/枪, 金粉与DNA 重量比为400~500, 较为适宜。
不同轰击参数影响金粉分布的范围和密度。
轰击距离为6 cm 或9 cm 时, 内部金粉密度大而外围金粉密度小, 差异极大。
轰击距离为12 cm 时, 内部和外围金粉密度差异小, 均匀度好。
J arl比较了不同入射条件认为, 氦气压力为5 löm in、射程为70mm、真空度在0. 8kg/ cm 2, 释放时间为60m s 是对大麦胚较合适的轰击参数, 此时GU S 瞬间表达的频率高。
但瞬间表达的条件在应用到稳定转化时往往被过分强调, 要获得稳定的转化子还要考虑轰击条件对植株再生的影响。
A lfon soRub i 等, 在1100p si 压力下用3 种不同的射程(6cm、9cm、12cm ) 轰击水稻种子的愈伤, 结果6cm 的射程虽然得到最多的GU S 表达, 但使具有再生能力愈伤的比例及每个愈伤得到的再生植株数, 较其它处理下降1. 5 倍~ 2 倍左右。
为使DNA 较好地附着在微弹上, 制弹时需添加一定浓度的DNA 沉淀剂, 如CaCl2、亚精胺(sperm idine)、聚乙二醇(PEG) 等。
Duchesne在转化云杉的愈伤时发现, CaCl2 的效果较PEG 好, 可得到更多的GU S 表达。
而对Ca2+ 的来源, Perl (1992 年)在转化小麦时, 使用Ca (NO 3 ) 2 优于CaCl2, 但王鸿鹤等在转化香蕉时的结果却相反, 看来不同的外植体对Ca2+ 源的要求并不相同。
不同型号的基因枪对沉淀剂的选择也不相同,PDS21000öH e 需要PEG的参与,ACCELL TM 则不需要[。
一般CaCl2 的最适浓度在1. 9M~ 2. 4M 之间, 亚精胺浓度介于7. 69mM~76. 9mM , 聚乙二醇则选用5%PEG4000。
亚精胺对植物细胞有毒害作用, 因此在许多实验中都采取降低亚精胺浓度, 而适当加入PEG。
4 对报告基因效应的鉴定一般在转化体选择和筛选中, 常把报告基因(report gene) 插入到转化体中。
在转化系统中, 检测这些报告基因的瞬时表达, 确定转化是否成功。
Schweizer 等用基因枪把报告基因GUS(βglucuronidase gene ,葡糖苷酸酶基因) 和抗病基因转入小麦叶盘中, 转化后与麦类白粉霉菌(powdermildew fungus , Erysi phe graminis ) 共培养。
由于轰击造成伤口,使霉菌侵染的往往是有GUS 表达的细胞,其共发生频率达35 % ,因此以GUS 作为瞬间检测系统是合适的。
此外, 他们还比较了GUS 、GFP ( green2fluorescent protein gene ,绿色荧光蛋白基因) 、OXOX (oxalate oxidase gene ,草酸氧化酶基因) 和GOX (glucose oxidase gene ,葡萄糖氧化酶基因) 等报告基因,结果表明, GUS 染色后的小麦叶切片可保存数周; GUS 染色不会被用于检测霉菌的考马斯亮蓝破坏, 不影响对转基因的检测;且GUS 为胞内蛋白,不与内陷于宿主原生质膜内的霉菌( Erysi phe graminis f . sp. t ritici ) 菌根接触,从而减少GUS 对菌体的直接影响。
因此认,GUS 较其他报告基因更方便、有效。
但Baruah Wolff 等[14 ]却认为, GUS 组织染色法会破坏转化的组织, 导致其不能再生。
用基因枪将l uc ( luciferase gene ,荧光酶基因) 转入水稻幼胚,由于荧光检测法不会对转化体造成伤害,因而得以再生。
应用荧光定量法还可以对转化体的后代进行早期纯合体鉴定。
但Elliott 等[15 ]认为, l uc 会使转化体回复到停止生长的状态;而GFP 检测对活体则是一种非侵犯性的,不用添加外源物质,若改用低能量的荧光显微镜观察,则不但减少检测细胞的损伤,还能降低植物本身荧光的干扰。
5基因的表达调控研究基因的表达调控特性,常需将克隆得到的基因片段先转入植物一定的外植体中,再进行探讨。
在众多的转化方法中,基因枪法对受体无特殊要求,而得到广泛应用。
如Lehr 等[克隆得到了VATP 酶( VATPase ) 的两个亚基BVA/ 70 和BVA/ 1621 ,并用基因枪法将其转入甜菜的悬浮细胞,发现BVA/ 70 和BVA/ 1621 转录水平的高低因植物发育阶段的不同而异, BVA/ 70 和BVA/1621上游启动子的活性受盐胁迫的诱导。
这两种的协同效应, 显示了VATPase 基因的持家功能( house2keeping function ) 和与胁迫有关的功能(st ress related function) 。
Malcuit 等[27 ]则把马铃薯抗病毒基因Nb 中一段大小为25 kb 的片段,连同GUS 报告基因,用基因枪转入马铃薯中,发现Nb的抗病毒特性主要决定于25 kb片段所编码的分子量为25 kD 的蛋白。