第十一章 核酶的结构与功能
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医学生理学期末重点笔记--第十一章-内分泌第十一章内分泌【目的】掌握内分泌系统的概念,内分泌系统在调节主要生理过程中的作用及机理。
内分泌系统与神经系统的紧密联系,相互作用,相互配合的关系。
下丘脑、垂体、甲状腺、肾上腺等的内分泌功能及其调节。
熟悉信号转导机制及其新进展,了解糖皮质激素作用机制的有关进展。
【重点】1.下丘脑-垂体的功能单位,下丘脑调节肽。
2.腺垂体激素的生物学作用及调节。
3.甲状腺的功能、作用机理及调节。
4.肾上腺皮质激素的作用及调节。
第一节概述内分泌系统和神经系统是人体的两个主要的功能调节系统,它们紧密联系、相互协调,共同完成机体的各种功能调节,从而维持内环境的相对稳定。
一、激素的概念内分泌系统是由内分泌腺和散在的内分泌细胞组成的,由内分泌腺或散在的内分泌细胞分泌的高效能生物活性物质,称为激素(hormone),是细胞与细胞之间信息传递的化学媒介;它不经导管直接释放入内环境,因此称为内分泌。
二、激素的作用方式1.远距分泌多数激素经血液循环,运送至远距离的靶细胞发挥作用,称为远距分泌(telecrine)。
2.旁分泌某些激素可不经血液运输,仅通过组织液扩散至邻近细胞发挥作用,称为旁分泌(paracrine)。
3.神经分泌神经细胞分泌的激素可沿神经细胞轴突借轴浆流动运送至所连接的组织或经垂体门脉流向腺垂体发挥作用,称为神经分泌(neurocrine)。
4.自分泌由内分泌细胞所分泌的激素在局部扩散又返回作用于该内分泌细胞而发挥反馈作用,称为自分泌(autocrine)。
三、激素的分类按其化学结构可分为:1.含氮类激素:(1)蛋白质激素,如生长素、催乳素、胰岛素等;(2)肽类激素,如下丘脑调节肽等;(3)胺类激素,如肾上腺素、去甲肾上腺素、甲状腺激素等。
2.类固醇激素:(1)肾上腺皮质激素,如皮质醇、醛固酮等;(2)性激素,如雌二醇、睾酮等。
3.固醇类激素:包括维生素D3、25-羟维生素D3、1,25-二羟维生素D3。
第十一章核糖体名词解释1、氨酰-tRNA合成酶aminoacyl-tRNA synthetase将氨基酸和对应的tRNA的3’端进行共价连接形成氨酰-tRNA的酶。
不同的氨基酸被不同的氨酰-tRNA合成酶所识别。
2、多聚核糖体polyribosome/polysome由多个甚至几十个核糖体串联在一条mRNA分子上进行肽链合成的核糖体与mRNA的聚合体。
3、核酶ribozyme具有催化作用的RNA分子。
4、核糖体ribosome由数种rRNA和50多种核糖体蛋白组成的大分子复合物,具有一个大亚基和一个小亚基,是蛋白质合成的地方。
5、P位点P(peptidyl) site核糖体在延伸多肽链过程中的肽酰tRNA结合位点。
6、r RNA存在于核糖体重的RNA分子,称为r RNA,在原核细胞的核糖体中r RNA包括23S、16S、5S 三条分子,真核细胞中含25-28S、18S、5.8S、5S四种分子。
其主要功能是:具有肽酰转移酶的活性;为t RNA提供结合位点;为多种蛋白质合成分子提供结合位点;在蛋白质合成起始时参与同m RNA选择性地结合以及在肽链的延伸中与m RNA结合。
6、肽酰转移酶peptidyl transferase肽酰转移酶是催化肽键形成的酶。
在蛋白质合成过程中,它催化核糖体A位tRNA上末端氨基酸的氨基与P位肽酰-tRNA上氨基酸的羧基间形成肽键。
其结果,使A位的氨酰-tRNA上的多肽延长了一个氨基酸,而P位的氨酰-tRNA形成脱氨酰-tRNA。
7、SD序列SD sequence是位于原核细胞mRNA起始密码子上有的一段与核糖体小亚基的16S rRNA结合的特殊序列。
在蛋白质合成起始时,它介导mRNA与小亚基的结合。
思考题1、以80S核糖体为例,说明核糖体的结构成分及功能。
真核生物核糖体沉降系数为80S,由40S小亚基和60S大亚基组成,其中大亚基包含49种r 蛋白和28S、5.8S、5S三条rRNA分子,小亚基包括33种r蛋白和18S rRNA分子。
核酶的作用机制
核酶的作用机制是指核酶在催化反应中如何发挥作用的过程。
核酶是一种具有催化功能的RNA分子,通过与底物RNA的特异性结合,在RNA链内部或特定区域进行切割和修饰,从而调控基因的表达。
核酶的作用机制通常包括以下几个步骤:
识别与结合:核酶首先需要识别并结合到特定的底物RNA上,这是催化反应的第一步。
核酶与底物RNA的结合通常具有很高的特异性,保证了反应的准确性。
切割与修饰:结合后的核酶通过催化作用对底物RNA进行切割或修饰。
具体反应机制取决于核酶的种类。
有些核酶仅对底物RNA进行切割,有些则可以催化多种不同类型的反应,如磷酸化、腺苷化等。
产物释放:反应完成后,核酶从底物RNA上释放出来,完成整个催化过程。
这一步通常需要特定的离子或分子参与,以确保反应的顺利进行。
核酶的作用机制非常复杂,涉及多个因素的综合作用。
例如,核酶的构象变化、底物RNA的序列和结构、环境因素等都会对催化反应产生影响。
因此,深入了解核酶的作用机制有助于更好地理解其生物学功能,并为未来的生物技术应用提供新的思路和途径。
第十一章 核酸的生物合成一、填空题1.中心法则是 于 年提出的,其内容可概括为2.所有冈崎片段的延伸都是按 方向进行的。
3.前导链的合成是 的,其合成方向与复制叉移动方向 。
4.引物酶与转录中的RNA 聚合酶之间的差别在于它对 不敏感;后随链的合成是 的。
5.DNA 聚合酶I 的催化功能有 、 、 。
6.DNA 拓扑异构酶有 种类型,分别为 和 ,它们的功能是 。
7.细菌的环状DNA 通常在一个 开始复制,而真核生物染色体中的线形DNA 可以在 起始复制。
8.大肠杆菌DNA 聚合酶III 的 活性使之具有 功能,极大地提高了DNA 复制的保真度。
9.到目前为止,在大肠杆菌中已发现有 种DNA 聚合酶,其中 负责DNA 复制, 负责DNA 损伤修复。
10.大肠杆菌中DNA 指导的RNA 聚合酶全酶的亚基组成为 ,去掉 _因子的部分称为核心酶,这个因子使全酶能识别DNA 上的 位点。
11.在DNA 复制中, 可防止单链模板重新缔合和核酸酶的攻击。
12.DNA 合成时,先由引物酶合成 ,再由 在其3′端合成DNA 链,然后由 切除引物并填补空隙,最后由 连接成完整的链。
13.大肠杆菌DNA 连接酶要求 的参与,哺乳动物的DNA 连接酶要求 参与。
14.原核细胞中各种RNA 是 种RNA 聚合酶催化生成的,而真核细胞核基因的转录分别由 种RNA 聚合酶催化,其中rRNA 基因由 转录,hnRNA 基因由 转录,各类小分子量RNA 则是 的产物。
15.转录单位一般应包括 序列, 序列和 序列。
16.真核细胞中编码蛋白质的基因多为 ,编码的序列还保留在成熟mRNA 中的是 ,编码的序列在前体分子转录后加工中被切除的是 ;在成熟的mRNA 中 序列被拼接起来。
17.限制性核酸内切酶主要来源于 ,都识别双链DNA 中 ,并同时断裂 。
二、选择题(只有一个最佳答案):1.如果一个完全具有放射性的双链DNA 分子在无放射性标记溶液中经过两轮复制,产生的四个DNA 分子的放射性情况是:( )A 、其中一半没有放射性B 、都有放射性C 、半数分子的两条链都有放射性D 、一个分子的两条链都有放射性E 、四个分子都不含放射性2.关于DNA 指导下的RNA 合成的下列论述除了( )项外都是正确的。
可编辑修改精选全文完整版第十一章核糖体核糖体是一种核糖核蛋白颗粒(ribonucleoprotein particle),是细胞内合成蛋白质、没由膜包被的细胞器,其功能是按照mRNA的信息将氨基酸高效精确地合成蛋白质多肽链。
因为富含核苷酸,1958年Roberts建议把这种颗粒命名为核糖蛋白体,简称核糖体(ribosome)第一节核糖体的类型与结构一、核糖体的基本类型与化学组成:生物界有两种基本类型的核糖体:一种是原核细胞核糖体;另一种是真核细胞核糖体。
两种核糖体都有两个大小不同的亚基(subunit)组成,每个亚基都含有rRNA和蛋白质。
原核细胞核糖体沉降系数为70S,相对分子质量为2.5*106,易解离为50S与30S的大小亚基。
真核细胞核糖体沉降系数为80S,相对分子质量为4.8*106,易解离为60S与40S的大小亚基。
rRNA中的某些核苷酸残基被甲基化修饰,甲基化常发生在rRNA序列较为保守的区域。
核糖体大小亚基常常游离于细胞基质中,只有当小亚基与mRNA结合后打牙祭才与小亚基结合形成完整的核糖体。
肽链合成终止后,大小亚基解离,又游离于细胞质基质中。
二、核糖体的结构结构与功能的分析方法表明:(1)离子交换树脂可分离纯化各种r蛋白。
(2)核糖体中r蛋白与rRNA的结构关系:纯化的r蛋白与纯化的rRNA进行核糖体的重组装的过程中,某些蛋白质必须首先结合到rRNA上,其他蛋白才能装配上去,即表现出现后层次。
(3)双功能的交联剂和双向电泳分离:可用于研究r蛋白在结构上的相互关系。
(4)电镜负染色与免疫标记技术结合:研究r蛋白在核糖体的亚单位上的定位。
(5)对rRNA,特别是对16S rRNA结构的研究已十分成熟:①16SrRNA的一级结构是非常保守的②16SrRNA的二级结构具有更高的保守性③16SrRNA可以分为四个结构域:中心结构域,5'端结构域,3'端结构域和主结构域。
蛋白质合成过程中很多重要步骤与50S核糖体大亚单位相关:(1)依赖延伸因子Tu(EF-Tu)的氨酰tRNA的结合;(2)延伸因子G(EF-G)介导的转位作用;(3)依赖于起始因子2的fMet-tRNA的结合;(4)依赖于释放因子的蛋白合成终止作用;(5)应急因子与核糖体结合产生阻断蛋白合成等。
第十一章 RNA的生物合成Chapter 11 RNA Biosynthesis,生物界,RNA合成有两种方式:一是D N A指导的R N A合成,也叫转录,此为生物体内的主要合成方式,也是本章介绍的主要内容。
另一种是R N A指导的R N A合成(R N A-d e p e n d e n t R N A s y n t h e s i s),也叫R N A复制(R N A r e p l i c a t i o n),由R N A依赖的R N A聚合酶(R N A-d e p e n d e n t R N A p o l y m e r a s e)催化,常见于病毒,是逆转录病毒以外的R N A病毒在宿主细胞以病毒的单链R N A 为模板合成R N A的方式。
重点内容掌握不对称转录、模板链和编码链的概念。
(二)掌握原核生物RNA聚合酶的全酶及核心酶的组成;熟悉模板与酶的辨认结合,启动子的概念。
了解-35区、-10区、上游、下游序列等概念,以及两区的作用特点。
(三)熟悉原核生物的转录起始,转录的方向,原核生物的转录终止分两种方式。
了解原核生物RNA合成的过程。
(四)熟悉真核生物的RNA聚合酶的分类,作用特点以及各自相应的产物;了解真核生物转录过程。
(五)掌握断裂基因、内含子、外显子的概念;(六)熟悉真核生物mRNA,tRNA的修饰过程。
复制与转录的相同点:①都是酶促的核苷酸聚合过程②以DNA为模板③遵循碱基配对原则④都需依赖DNA的聚合酶⑤聚合过程都是生成磷酸二酯键⑥新链合成方向为5’→3’原核生物转录的模板和酶Section 1 Templates and Enzymes in Prokaryotic Transcription原核生物转录的模板DNA分子上转录出RNA的区段,称为结构基因(structural gene)。
转录的这种选择性称为不对称转录(asymmetric transcription),它有两方面含义:在DNA分子双链上,一股链用作模板指引转录,另一股链不转录;模板链并非总是在同一单链上。
第十一章-细胞的信号转导习题集及参考答案一、名词解释1、细胞通讯2、受体3、第一信使4、第二信使5、G蛋白6、蛋白激酶A二、填空题1、细胞膜表面受体主要有三类即、、和2、在细胞的信号转导中,第二信使主要有、、、和3、硝酸甘油之所以能治疗心绞痛是因为它在体内能转化为,引起血管,从而减轻的负荷和的需氧量。
三、选择题1、能与胞外信号特异识别和结合,介导胞内信使生成,引起细胞产生效应的是()。
A、载体蛋白B、通道蛋白C、受体D、配体2、下列不属于第二信使的是()。
A、cAMPB、cGMPC、DGD、CO3、下列关于信号分子的描述中,不正确的一项是()。
A、本身不参与催化反应B、本身不具有酶的活性C、能够传递信息D、可作为酶作用的底物4、生长因子是细胞内的()。
A、结构物质B、能源物质C、信息分子D、酶5、肾上腺素可诱导一些酶将储藏在肝细胞和肌细胞中的糖原水解,第一个被激活的酶是()。
A、蛋白激酶AB、糖原合成酶C、糖原磷酸化酶D、腺苷酸环化酶6、()不是细胞表面受体。
A、离子通道B、酶连受体C、G蛋白偶联受体D、核受体7、动物细胞中cAMP的主要生物学功能是活化()。
A、蛋白激酶CB、蛋白激酶AC、蛋白激酶KD、Ca2+激酶8、在G蛋白中,α亚基的活性状态是()。
A、与GTP结合,与βγ分离B、与GTP结合,与βγ聚合C、与GDP结合,与βγ分离D、与GDP结合,与βγ聚合9、下面关于受体酪氨酸激酶的说法哪一个是错误的A、是一种生长因子类受体B、受体蛋白只有一次跨膜C、与配体结合后两个受体相互靠近,相互激活D、具有SH2结构域10、在与配体结合后直接行使酶功能的受体是A、生长因子受体B、配体闸门离子通道C、G蛋白偶联受体D、细胞核受体11、硝酸甘油治疗心脏病的原理在于A、激活腺苷酸环化酶,生成cAMPB、激活细胞膜上的GC,生成cGMPC、分解生成NO,生成cGMPD、激活PLC,生成DAG12、霍乱杆菌引起急性腹泻是由于A、G蛋白持续激活B、G蛋白不能被激活C、受体封闭D、蛋白激酶PKC功能异常13下面由cAMP激活的酶是A、PTKB、PKAC、PKCD、PKG14下列物质是第二信使的是A、G蛋白B、NOC、GTPD、PKC15下面关于钙调蛋白(CaM)的说法错误的是A、是Ca2+信号系统中起重要作用B、必须与Ca2+结合才能发挥作用C、能使蛋白磷酸化D、CaM激酶是它的靶酶之一16间接激活或抑制细胞膜表面结合的酶或离子通道的受体是A、生长因子受体B、配体闸门离子通道C、G蛋白偶联受体D、细胞核受体17重症肌无力是由于A、G蛋白功能下降B、蛋白激酶功能异常C、受体数目减少D、受体数目增加18、PIP2分解后生成的何种物质能促使钙离子的释放A、IP3B、DAGC、CaMD、PKC19下面关于PKA的说法错误的是A、它是G蛋白的效应蛋白B、它由4个亚单位组成C、它由cAMP激活D、它可导致蛋白磷酸化四、判断题1、NO作为局部介质可激活靶细胞内可溶性鸟甘酸环化酶。
第十一章代谢调节一、知识要点代谢调节是生物在长期进化过程中,为适应外界条件而形成的一种复杂的生理机能。
通过调节作用细胞内的各种物质及能量代谢得到协调和统一,使生物体能更好地利用环境条件来完成复杂的生命活动。
根据生物的进化程度不同,代谢调节作用可在不同水平上进行:低等的单细胞生物是通过细胞内酶的调节而起作用的;多细胞生物则有更复杂的激素调节和神经调节。
因为生物体内的各种代谢反应都是通过酶的催化作用完成的,所以,细胞内酶的调节是最基本的调节方式。
酶的调节是从酶的区域化、酶的数量和酶的活性三个方面对代谢进行调节的。
细胞是一个高效而复杂的代谢机器,每时每刻都在进行着物质代谢和能量的转化。
细胞内的四大类物质糖类、脂类、蛋白质和核酸,在功能上虽各不相同,但在代谢途径上却有明显的交叉和联系,它们共同构成了生命存在的物质基础。
代谢的复杂性要求细胞有数量庞大、功能各异和分工明确的酶系统,它们往往分布在细胞的不同区域。
例如参与糖酵解、磷酸戊糖途径和脂肪酸合成的酶主要存在胞浆中;参与三羧酸循环、脂肪酸β-氧化和氧化磷酸化的酶主要存在于线粒体中;与核酸生物合成有关的酶大多在细胞核中;与蛋白质生物合成有关的酶主要在颗粒型内质网膜上。
细胞内酶的区域化为酶水平的调节创造了有利条件。
生物体内酶数量的变化可以通过酶合成速度和酶降解速度进行调节。
酶合成主要来自转录和翻译过程,因此,可以分别在转录水平、转录后加工与运输和翻译水平上进行调节。
在转录水平上,调节基因感受外界刺激所产生的诱导物和辅阻遏物可以调节基因的开闭,这是一种负调控作用。
而分解代谢阻遏作用通过调节基因产生的降解物基因活化蛋白(CAP促进转录进行,是一种正调控作用,它们都可以用操纵子模型进行解释。
操纵子是在转录水平上控制基因表达的协调单位,由启动子(P、操纵基因(O和在功能上相关的几个结构基因组成;转录后的调节包括,真核生物mRNA 转录后的加工,转录产物的运输和在细胞中的定位等;翻译水平上的调节包括,mRNA 本身核苷酸组成和排列(如SD序列,反义RNA的调节,mRNA 的稳定性等方面。
文档收集于互联网,已重新整理排版.word版本可编辑,有帮助欢迎下载支持.第十一章核糖体一、核糖体的结构及功能核糖体是体积较小的无膜包围的细胞器,在光镜下看不到。
1958年才把这种含有大量RNA的能合成蛋白质的关键装置定名为核糖核蛋白体ribosome,简称为核糖体。
(一)核糖体的一般性质1、存在与分布核糖体存在一切生物的细胞中,包括真核细胞和原核细胞。
这是有别于其它细胞器的特点。
在真核细胞中,有些核糖体是游离分布在细胞质基质中,也有许多是附着在rER膜及核膜外表。
此外,还有核糖体是分布在线粒体和叶绿体的基质中。
在原核细胞内,大量核糖体游离在细胞质中,也有的附着在质膜内侧面。
细菌的核糖体占总重量的25—30%2、形态和大小一般直径为25—30nm,由大、小两亚单位构成,通常是以大亚单位附在内质网膜或核膜外表。
当进行蛋白质合成时,小亚单位先接触mRNA才与大亚单位结合,而合成完毕后又自行解离分开。
另外,多个核糖体还可由mRNA串联成多聚核糖体polyribosome(=polysome),每个多聚核糖体往往由5-6个核糖体串成,但也有多至50个以上的(例如肌细胞中合成肌球蛋白的多聚核糖体是由60—80个串联而成)。
3.数量和分类细胞中的核糖体数量多少不一。
一般来说,增殖速度快的细胞中偏多,分泌蛋白质的分泌细胞中也较多。
例如分泌胆汁的肝细胞中为6X 106个,大肠杆菌中为1500—15000个。
在不同类型生物细胞之中,核糖体大小及组分都有一定差1文档来源为:从网络收集整理.word版本可编辑.文档收集于互联网,已重新整理排版.word版本可编辑,有帮助欢迎下载支持.异。
一般可分为两大类:80S型和705型。
大亚单位60S真核生物核糖体80S v小亚单位40S大亚单位50S原核生物核糖体70S一小亚单位30S(“S”是沉降系数的衡量单位。
大、小亚单位组成核糖体, 并非由其两者的S值直接相加,这是因为S值变化其实是与颗粒的体积及形状相关的。
第十一章分子生物学常用技术及其应用一、名词解释1.DNA重组 2.基因工程3.限制性核酸内切酶 4.基因组DNA文库5.cDNA文库 6.聚合酶链反应(PCR)7.载体 8.转化9.感染 10.核酸分子杂交11.Southern印迹杂交 12.Northern印迹杂交13.斑点印迹 14.原位杂交15.DNA芯片 16.基因诊断17.基因治疗二、选择题A型题:1.限制性核酸内切酶作用特点不包括:A.在对称序列处切开DNA B.DNA两链的切点常不在同一位点C.酶切后产生的DNA片段多半具有粘性互补末端 D.DNA两链的切点常在同一位点E.酶辨认的碱基一般为4~6个2.限制性核酸内切酶:A.可将单链DNA任意切断 B.可将双链DNA序列特异切开C.可将两个DNA分子连接起来 D.不受DNA甲基化影响E.由噬菌体提取而得3.cDNA文库包括该种生物的:A.某些蛋白质的结构基因 B.所有基因组C.结构基因与不表达的调控区 D.内含子和调节区E.内含子和外显子4.下列关于建立cDNA文库的叙述哪项是错误的:A.从特定组织或细胞中提取mRNAB.将特定细胞的DNA用限制性核酸内切酶切割后,克隆到噬菌体或质粒中C.用逆转录酶合成mRNA的对应单股DNAD.用DNA聚合酶,以单股DNA为模板合成双链DNAE.加S-腺苷甲硫氨酸(SAM),以使新生的DNA双链甲基化5.限制性核酸内切酶的通常识别序列是:A.粘性末端 B.RNA聚合酶附着点C.回文对称序列 D.聚腺苷酸E.甲基化“帽”结构6.pUC系列是指:A.经人工改造的大肠杆菌质粒 B.天然的大肠杆菌质粒C.天然的酵母质粒 D.经人工改造的大肠杆菌噬菌体E.经人工改造的酵母质粒7.用于转染哺乳类细胞的常用载体是:A.质粒 B.噬菌体C.逆转录病毒RNA D.结构基因E.乳糖操纵子8.转化常指:A.噬菌体感染 B.基因的转位C.摄取外来DNA,引起细胞生物学类型的改变 D.产生点突变E.产生移码突变9.基因工程的操作程序可简单地概括为:A.载体和目的基因的分离、提纯与鉴定 B.分、切、接、转、筛C.将重组体导入宿主细胞,筛选出含目的基因的菌株 D.将载体和目的基因接合成重组体E.限制性核酸内切酶的应用10.用于基因治疗较为理想的载体是:A.质粒 B.噬菌体C.经改造的逆转录病毒 D.人类DNAE.酵母质粒11.常用质粒有以下特性:A.是线形双链DNA B.插入片段的容量比λ噬菌体DNA大C.含有抗生素抗性基因 D.含有同一限制性核酸内切酶的多个切口E.不随细菌繁殖而进行自我复制12.在重组体中切出插入片段最常用的方法是:A.以重组时所用限制性核酸内切酶将其切出 B.用其它限制性酶将其切出C.用S1核酸酶将其切出 D.用DNA酶将切出E.用多种限制性内切酶将其切出13.利用PCR扩增特异DNA序列主要原理之一是:A.反应体系内存在特异DNA片段 B.反应体系内存在特异RNA片段C.反应体系内存在特异DNA引物 D.反应体系内存在特异RNA引物E.反应体系内存在的TaqDNA聚合酶具有识别特异DNA序列的作用14.表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是:A.大肠杆菌表达体系 B.原核表达体系C.酵母表达体系 D.昆虫表达体系E.哺乳类细胞表达体系15.限制性核酸内切酶切割DNA后产生:A.3′-磷酸基末端和5′-羟基末端 B.5′-磷酸基末端和3′-羟基末端C.3′-磷酸基末端和5′-磷酸基末端 D.5′-羟基末端和3′-羟基末端E.3′-羟基末端和5′-羟基末端及磷酸16.下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是:A.小型环状双链DNA分子 B.携带有某些抗生素抗性基因C.在细胞分裂时恒定地传给子代细胞 D.具有自我复制功能E.获得目的基因17.在分子生物学领域分子克隆主要是指:A.DNA的大量复制 B.DNA的大量转录C.DNA的大量剪切 D.RNA的大量剪切E.RNA的大量反转录18.在分子生物学领域重组DNA技术又称:A.酶工程 B.蛋白质工程C.细胞工程 D.发酵工程E.分子克隆技术19.在重组DNA技术中不涉及的酶是:A.限制性核酸内切酶 B.DNA聚合酶C.DNA连接酶 D.反转录酶E.DNA解链酶20.多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为:A.平端末端 B.3′突出末端C.5′突出末端 D.粘性末端E.缺口末端21.可识别DNA的特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶为:A.限制性核酸外切酶 B.限制性核酸内切酶C.非限制性核酸外切酶 D.非限制性核酸内切酶E.DNA内切酶22.cDNA是指:A.在体外经反转录合成的与RNA互补的DNA B.在体外经反转录合成的与DNA 互补的DNAC.在体外经转录合成的与DNA互补的RNA D.在体外经反转录合成的与RNA 互补的RNAE.在体外经反转录合成的与DNA互补的RNA23.基因组代表一个细胞或生物体的:A.部分遗传信息 B.整套遗传信息C.可转录基因 D.非转录基因E.可表达基因24.在基因工程中通常所用的质粒存在于:A.细菌染色体 B.酵母染色体C.细菌染色体外 D.酵母染色体外E.病毒DNA外25.就分子结构而论质粒是:A.环状双链DNA分子 B.环状单链DNA分子C.环状双链RNA分子 D.线状双链DNA分子E.线状单链DNA分子26.聚合酶链式反应可表示为:A.PEC B.PERC.PDR D.BCRE.PCR27.在已知序列信息的情况下,获取目的基因的最方便方法是:A.化学合成法 B.基因组文库法C.cDNA文库法 D.PCRE.差异显示法28.重组DNA的基本构建过程是将:A.任意两段DNA接在一起 B.外源DNA接入人体DNA C.外源基因插入宿主基因 D.目的基因接入适当载体E.目的基因接入哺乳类DNA29.EcoRⅠ切割DNA双链产生:A.平端 B.5′突出粘端C.3′突出粘端 D.钝性末端E.配伍末端30.催化PCR的酶是:A.DNA连接酶 B.反转录酶C.末端转移酶 D.碱性磷酸酶E.TaqDNA聚合酶31.将PstⅠ内切酶切割后的目的基因与用相同内切酶切割后的载体DNA连接属:A.同聚物加尾连接 B.人工接头连接C.平端连接 D.粘性末端连接E.非粘性末端连接32.重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是:A.DNA聚合酶 B.RNA聚合酶C.DNA连接酶 D.RNA连接酶E.限制性核酸内切酶33.以质粒为载体,将外源基因导入受体菌的过程称:A.转化 B.转染C.感染 D.转导E.转位34.最常用的筛选转化细菌是否含重组质粒的方法是:A.营养互补筛选 B.抗药性筛选C.免疫化学筛选 D.PCR筛选E.分子杂交筛选35.α互补筛选法属于:A.抗药性标志筛选 B.酶联免疫筛选C.标志补救筛选 D.原位杂交筛选E.免疫化学筛选36.下列常用于原核表达体系的是:A.酵母细胞 B.昆虫细胞C.哺乳类细胞 D.真菌E.大肠杆菌37.在对目的基因和载体DNA进行同聚物加尾时,需采用:A.反转录酶 B.多聚核苷酸激酶C.引物酶 D.RNA聚合酶E.末端转移酶38.在分子生物学领域分子克隆专指:A.细胞克隆 B.RNA克隆C.DNA克隆 D.抗体克隆E.mRNA克隆39.用于重组DNA 的限制性核酸内切酶,识别核苷酸序列的:A.正超螺旋结构 B.负超螺旋结构C.α螺旋结构 D.回文结构E.锌指结构40.在基因工程中通常所用的质粒是:A.细菌染色体DNA B.细菌染色体以外的DNA C.病毒染色体DNA D.病毒染色体以外DNAE.噬菌体DNA41.构建基因组DNA文库时,首先需要分离细胞的:A.染色体DNA B.线粒体DNAC.总mRNA D.tRNAE.rRNA42.DNA连接酶是从T4 噬菌体感染大肠杆菌中分离的,这种连接酶:A.只能催化平末端连接,而不能催化粘性末端连接B.即能催化单链DNA连接又能催化粘性末端双链DNA连接C.双链DNA中不需一条完整的单链D.单链中的切口位点可缺少几个核苷酸E.切口存在相邻的5′-磷酸和3′-羟基末端,使其以磷酸二酯键连接43.末端转移酶是合成酶类:A.作用时不需模板 B.是从小牛胸腺中分离C.能催化单链核苷酸转移到5′-磷酸上 D.需要带有5′-端磷酸的末端的ssDNA E.需要有延伸5′-端磷酸的末端dsDNA44.在基因工程中可用碱性磷酸酶:A.防止DNA的自身环化 B.同多核苷酸激酶一起进行DNA3′-羟基末端标记C.制备突出的3′-末端 D.特异切除DNA或RNA的3′-末端羟基E.水解特异的核苷酸片段45.以下哪种酶作用时需要引物:A.限制性核酸内切酶 B.末端转移酶C.反转录酶 D.DNA连接酶E.碱性磷酸酶46.S1核酸酶的功能是:A.切割双链的DNA B.切割单链的RNA C.切割发夹环 D.切割单链DNA E.以上有两项是正确的47.在cDNA技术中所形成的发夹环可用:A.限制性核酸内切酶切除 B.用3′外切酶切除C.用S1核酸酶切除 D.用5′外切酶切除E.碱性磷酸酶切除48.下面有关限制性内切酶的叙述正确的是:A.限制酶是外切酶而不是内切酶B.限制酶在特异序列(识别位点)对DNA进行切割C.同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的D.一些限制酶在识别位点稍有不同的点切割双链DNA,产生粘性末端E.一些限制酶在识别位点相同的位置切割双链DNA,产生平末端49.限制性核酸内切酶可以特异识别:A.双链DNA的特定碱基对 B.双链DNA的特定碱基序列C.特定的三联码 D.双链RNA的特定碱基序列E.双链RNA的特定碱基对50.DNA聚合酶的主要用途:A.利用它的3′→5′聚合活性,合成ds-DNA第二条链B.对DNA的5′-端进行填补或末端标记C.大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ用于缺口平移,制作DNA标志探针D.DNA聚合酶Ⅱ可用于DNA测序E.TaqDNA聚合酶用于PCR51.反转录酶:A.是依赖于DNA的RNA聚合酶 B.用于真核DNA反转录生成mRNA C.用于RNA探针的制备 D.用于RNA序列测定E.是依赖于RNA的DNA聚合酶52.基因工程中作为载体应具备以下特点:A.能在宿主细胞中复制繁殖 B.容易进入宿主细胞C.具有多克隆位点 D.容易从宿主细胞中分离出来E.以上均是53.下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大:A.质粒 B.粘粒C.酵母人工染色体 D.λ噬菌体E.cDNA表达载体54.pUC是一种改造型质粒,含有:A.乳糖操纵子调节基因、启动子 B.多克隆位点C.lacZ′基因 D.氨苄青霉素抗性基因E.以上均有55.质粒具有以下特点:A.是位于细菌染色体外的RNA B.不能自主复制C.为单链环形DNA D.大小在2~300kb之间E.以上都不对56.粘粒是一种人工建造的载体不具有以下特点:A.可借cos位点将多个粘粒串联成大环 B.本身约4~6kb之间C.进入受体细胞后可进行复制 D.可克隆DNA大片段E.以上都不是57.下面关于多克隆位点的描述不正确的是:A.仅位于质粒载体中 B.具有多种限制性内切酶识别的位点C.不同酶的识别序列可以重叠 D.一般是人工合成后添加到载体中E.可位于不同载体中58.下列筛选重组体的方法中不属于遗传学方法的是:A.限制性内切酶图谱法 B.PCRC.Northern印迹法 D.Southern印迹法E.抗药性标记基因59.利用基因工程可以进行:A.建立染色体基因文库 B.分析基因的结构与功能C.疾病的发生、发展及治疗的分子机制 D.疾病的诊断和基因治疗E.以上均可以60.Southern印迹的DNA探针杂交:A.只与序列完全相同的RNA片段 B.可与任何含有相同序列的DNA片段C.可与任何含有互补序列的DNA片段 D.可与用某些限制性核酸内切酶切成的DNA片段E.只与含有互补序列的RNA片段61.下列哪个不是Southern印迹法的步骤:A.用限制性核酸内切酶消化DNA B.DNA与载体连接C.用凝胶电泳分离DNA片段 D.DNA片段转移至硝酸纤维素膜上E.用一个标记的探针与膜杂交62.下列哪个不是Northern印迹法的步骤:A.从细胞和组织中提取RNA B.用凝胶电泳分离RNAC.将RNA转移到支持物上 D.与核酸探针进行杂交E.将RNA反转录合成DNA63.原位杂交具有以下特点:A.不需从组织或细胞中提取核酸 B.对靶序列有很高的灵敏度C.可完整保护组织与细胞的形态 D.准确反映出组织细胞的相互关系及功能状态E.以上均是64.下列哪项不是探针的特点:A.要加以标记 B.应是双链DNAC.只与靶核酸序列杂交 D.探针长度可以是十几个碱基到几千个碱基不等E.高灵敏度65.探针的种类包括:A.基因组DNA探针 B.cDNA探针C.寡核苷酸探针 D.RNA探针E.以上均是66.下面哪一步不是获得基因组DNA探针的步骤:A.从基因组文库筛选得到特定基因 B.克隆、扩增C.纯化 D.连入表达载体E.切取插入片段67.RNA探针具有以下特点,但除外:A.采用反转录方法可以得到 B.单链、杂交效率高C.杂交体系稳定 D.不存在高度重复序列E.特异性高68.下面哪一步不是cDNA探针的步骤:A.从相应组织细胞直接中分离特异的cDNA B.从相应组织细胞中分离特异的mRNA C.反转录合成cDNA D.与载体连接E.切割cDNA,分离纯化69.常用的标记物有,但除外:A.放射性核素 B.生物素C.荧光素 D.地高辛E.NTP70.用于标记核酸探针的放射性核素主要有,但除外:A.32P B.35SC.3H D.125IE.14C71.放射性核素标记物具有,但除外:A.检测时间短 B.灵敏度和特异性高C.可检出样品少于1000个分子的核酸量 D.半衰期短,稳定性差E.污染环境72.非放射性核素标记物包括,但除外:A.生物素 B.地高辛C.荧光素 D.酶E.核酸73.非放射性核素标记物具有,但除外:A.灵敏度高于放射性核素 B.稳定C.经济 D.实验周期短E.安全、无污染74.PCR反应体系包括,但除外:A.基因组DNA(模板) B.引物C.dNTP D.TaqDNA聚合酶E.T4DNA连接酶75.PCR技术主要应用于:A.目的基因的克隆 B.基因表达与调控C.DNA微量分析 D.遗传病与传染性疾病的诊断E.以上均可以76.以DNA为模板的PCR反应,具备以下条件:A.反应体系一般选用50-100μl B.引物、TaqDNA聚合酶C.4种dNTP、模板DNA D.缓冲液E.以上均是77.以mRNA为模板的PCR反应,具备以下条件:A.需将mRNA反转录生成cDNA B.反应体系一般选用20μl体积、4种dNTP、引物C.需要RNA酶抑制剂、反转录酶 D.TaqDNA聚合酶E.以上均是78.关于PCR停滞的原因,取决于很多因素,但除外:A.样品模板的拷贝数 B.PCR扩增效率C.DNA酶种类及活性 D.dNTP的大量消耗E.非特异性的竞争因素79.用于核酸分子杂交的探针可以是放射性核素标记的:A.核糖体 B.RNAC.抗体 D.抗原E.以上都不是80.Southern印迹是用DNA探针检测DNA片段,而Northern印迹则是:A.用RNA探针检测DNA片段 B.用RNA探针检测RNA片段C.用DNA探针检测RNA片段 D.用RNA探针检测蛋白片段E.用DNA探针检测蛋白片段81.用免疫化学筛选重组体的原理是:A.根据外源基因的表达 B.根据载体基因的表达C.根据mRNA与DNA的杂交 D.根据DNA与DNA的杂交E.根据RNA与RNA的杂交82.原位杂交包括:A.转膜杂交 B.斑点杂交C.菌落杂交或噬菌斑杂交 D.直接对染色体或组织的杂交E.以上均有83.外源性DNA进入菌体的方式是:A.转化 B.转录C.翻译 D.半保留复制E.以上都不是84.要将无粘性末端的两种平端DNA片段结合在一起,可在:A.两种片段上都接上聚(dT)尾部 B.一种片段接聚(dT)尾部,另一种接聚(dA)尾部C.两种片段都接上聚(dA)尾部 D.反应液中加以T4DNA连接酶E.有两项是对的85.用原核生物表达真核生物的基因存在的问题是:A.大肠细菌只能表达克隆的cDNA B.细菌不能切除原始转录物中相当于内含子的核苷酸序列C.缺乏翻译后加工机制 D.表达的蛋白质常形成不溶性包涵体E.以上都正确86.常用载体有:A.质粒 B.噬菌体C.病毒DNA D.大肠杆菌基因组DNAE.有3项是正确的87.构建cDNA文库时,首先需分离细胞的:A.染色体DNA B.线粒体DNAC.总mRNA D.tRNAE.rRNA88.构建DNA文库时,首先需分离细胞的:A.染色体DNA B.线粒体DNAC.总mRNA D.tRNAE.rRNA89.设计PCR的引物时,应考虑引物与模板的:A.5ˊ端特定序列互补 B.5ˊ端任意序列互补C.3ˊ端特定序列互补 D.3ˊ端任意序列互补E.中间序列互补90.用于鉴定转化子细胞是否含重组DNA的最常用方法是:A.抗药性选择 B.分子杂交选择C.RNA反转录 D.免疫学方法E.体外翻译91.下列哪一步是DNA芯片技术的最关键的环节:A.样品的准备与标记 B.芯片的制备C.信号的检测 D.数据分析处理E.杂交92.基因诊断常用的技术方法有:A.核酸分子杂交 B.单链构象多态性分析C.DNA序列测定 D.DNA芯片技术E.以上均是B型题:A.基因从原来位置转到基因组的另一位置 B.噬菌体或病毒DNA进入细胞中繁殖C.外来DNA引起细胞生物学特性的改变 D.移码突变 E.非移码突变1.感染是指:2.转化是指:3.转位是指:4.结构基因中3个核苷酸的插入或丢失是指:5.结构基因中1个核苷酸的插入或丢失是指:A.抗药性选择 B.分子杂交选择 C.RNA转录 D.免疫学方法 E.体外翻译6.用于鉴定是否有质粒转入受体菌的一般方法是:7.用于鉴定转化子细胞是否含目的基因的常用方法:8.利用目的基因表达产物的特异抗体来筛选含目的基因的转化子细胞的方法是:A.限制性核酸内切酶 B.DNA连接酶 C.反转录酶 D.TaqDNA聚合酶 E.碱性磷酸酶9.识别DNA回文结构并对其双链进行切割的是:10.用于聚合酶链式反应的是:11.将目的基因与载体DNA进行连接的酶是:12.特异切除DNA或RNA5ˊ端磷酸的酶是:13.mRNA转录合成cDNA的酶是:A.支原体 B.衣原体 C.噬菌体 D.细菌 E.酵母14.常用作原核表达体系的是:15.常用作真核表达体系的是:A.基因组文库 B.cDNA文库 C.mRNA文库 D.tRNA文库 E.rRNA 文库16.分离细胞染色体可制备:17.分离细胞总mRNA可制备:A.抗药性选择 B.RNA反转录 C.免疫化学方法 D.体外翻译E.PCR18.对重组体内基因进行直接选择的方法是:19.通过鉴定基因表达产物筛选重组体的方法是:A.RNA聚合酶 B.末端转移酶 C.碱性磷酸酶 D.反转录酶 E.核苷酸酶20.切除DNA末端磷酸基需要用:21.在DNA3′羟基末端进行同聚物加尾需要用:22.合成cDNA需要用:A.同聚物加尾连接 B.人工接头 C.粘性末端连接 D.缺口末端连接 E.平端连接23.外源基因和载体DNA经限制性酶切后的连接属于:24.在外源基因和载体DNA末端添加同聚物序列后再进行连接属于:25.在外源基因和载体DNA末端添加短核苷酸序列,人为制造粘性末端再进行连接属于:26.需用适当的酶将DNA突出末端削平或补齐的连接属于:A.将单链DNA任意切断 B.将双链DNA序列特异切开 C.将两个DNA分子连接起来D.将缺口末端连接 E.切除DNA末端磷酸基团27.限制性内切酶的作用是:28.DNA连接酶作用是:29.碱性磷酸酶作用是:A.某些蛋白质的结构基因 B.所有基因结构 C.不表达的调控区D.内含子和调节区 E.外显子和调节区30.cDNA文库包括:31.DNA文库包括:32.真核mRNA包括:A.DNA聚合酶 B.RNA聚合酶 C.DNA连接酶D.RNA连接酶 E.限制性核酸内切酶33.切除特异DNA片段:34.连接两个DNA片段:35.大量扩增DNA片段:A.反转录酶 B.多聚核苷酸激酶 C.引物酶 D.RNA聚合酶 E.末端转移酶36.催化ATP的磷酸转移到DNA或RNA的5ˊ端羟基上:37.催化单核苷酸转移到DNA的3ˊ端羟基上:38.合成cDNA:C型题:A.将含有目的基因的噬菌体感染细菌 B.将含有目的基因的质粒导入细菌进行表达C.两者都是 D.两者都不是1.转化:2.感染:A.cDNA文库 B.基因组文库 C.两者都是 D.两者都不是3.含内含子:4.含结构基因:A.将含有目的基因的噬菌体感染细菌 B.将含有目的基因的质粒导入细菌进行表达C.两者都是 D.两者都不是5.转化:6.转位:A.cDNA文库 B.基因组文库 C.两者都是 D.两者都不是7.含转录调控区:8.较易表达:A.cDNA文库 B.基因组文库 C.两者都是 D.两者都不是9.制备目的基因可在真核生物体系中表达:10.几乎含有人的全部基因:A.cDNA文库 B.基因组文库 C.两者都是 D.两者都不是11.具有组织特异性:12.可在原核生物体系中表达:A.光介导原位合成 B.压电打印合成 C.两者都是 D.两者都不是13.原位合成芯片:14.DNA微集阵列:A.喷墨打印 B.针式打印 C.两者都是 D.两者都不是15.原位合成芯片:16.DNA微集阵列:A.光介导原位合成 B.喷墨打印 C.两者都是 D.两者都不是17.原位合成芯片:18.DNA微集阵列:A.压电打印合成 B.针式打印 C.两者都是 D.两者都不是19.原位合成芯片:20.DNA微集阵列:A.DNA序列测定 B.突变分析 C.两者都是 D.两者都不是21.DNA芯片技术可用于:22.PCR技术可用于:A.基因表达 B.DNA的微量分析 C.两者都是 D.两者都不是23.DNA芯片技术可用于:24.PCR技术可用于:A.药物研究 B.基因诊断 C.两者都是 D.两者都不是25.PCR技术可用于:26.核酸分子杂交:A.目的基因克隆 B.基因结构研究 C.两者都是 D.两者都不是27.DNA芯片技术可用于:28.PCR技术可用于:A.DNA与DNA的杂交 B.DNA与RNA杂交 C.两者都是 D.两者都不是29.Southern印迹杂交:30.斑点杂交:A.DNA与RNA杂交 B.DNA与DNA的杂交 C.两者都是 D.两者都不是31.原位杂交:32.Northern杂交:A.遗传性疾病的诊断 B.感染性疾病的诊断 C.两者都是 D.两者都不是33.分子杂交技术可用于:34.PCR技术可用于:A.肿瘤 B.个体鉴别 C.两者都是 D.两者都不是35.PCR技术可用于:36.DNA芯片技术可用于:三、问答题1.简述基因工程的主要过程。
第十一章代谢调节一、练习题目(一)名词解释1.限速步骤反应 2.关键酶 3.时序调节和适应调节 4.诱导作用 5.诱导物 6.诱导酶 7.阻遏作用 8.辅阻遏物 9.阻遏物 10.阻遏酶 11.操纵子 12.组成酶 13.组成突变体 14.超阻遏突变体 15.启动子 16.操纵基因 17.结构基因 18.调节基因 19.降解物基因活化蛋白 20.降解物阻遏 21.酶分子的修饰 22.共价修饰调节 23,级联系统 24.反馈抑制 25.累积反馈抑制 26.顺序反馈抑制 27,协同反馈抑制 28.前馈激活 29.前馈抑制 30.反馈激活 3l,交叉调节 32.能荷(二)问答题1.代谢调节的生物学意义是什么?2.生物体在哪几种水平上进行代谢调节?3.对酶促反应来说,可以在哪些方面进行调节?4.底物供应调节的限制因素有哪些?5.酶水平调节包括哪些方面?6.举例说明酶合成的诱导和阻遏现象。
7.操纵子学说的基本内容有哪些?8.酶活性调节的方式有哪些?9.糖元磷酸化酶和糖元合成酶活性是如何联系、调节的?10.根据能荷公式,解释能荷大小对物质代谢的调节作用。
11.真核生物细胞器的分化对代谢调节起什么作用?12.总结各物质代谢相互间的关系。
(三)填空题1.诱导酶的合成是由于___________与由调节基因所产生的__________结合,使_________变构 __________便不能与________基因结合,结构基因不被关闭的缘故。
2.由DNA分子的调节基因编码的蛋白质称为_________。
3.酶合成的调节是__________水平调节,是________调。
4.酶活性的调节是酶分子_________上的调节,是__________调。
5.真核细胞内基因表达的调节因子是___________。
6.糖元磷酸化酶被磷酸基团修饰后,该酶呈___________状态,磷酸基团来自于__________。
7.大肠杆菌乳糖操纵子包含有__________、___________和__________DNA区段。