真菌培养常用培养基(完整资料).doc

真菌培养基一、沙保罗琼脂培养基[用途]供真菌及酵母样真菌的分离培养用。

[配法]麦芽糖40g,蛋白胨10g,琼脂20g，蒸馏水1L。

将上述成分溶于水，加热溶解，调pH至6.0±0.2，分装三角瓶或试管中，118℃灭菌15mi n，倾注平板或置斜面，无菌试验后备用。

[用法]将标本接种培养基，如系血液标本，则采取1～2ml，与冷却至45℃左右沙保琼脂混合，倾注接种平板。

分别置35℃和25℃恒温箱内同时培养。

35℃培养48h,25℃需连续培养5天,逐日观察结果。

发现真菌及酵母样可疑菌落，转种沙保菌斜面，获得纯培养后进行鉴定。

[质量控制]白色念珠菌和新型隐球菌生长良好。

注：⑴本培养基如不加入琼脂，即为沙保罗液体培养基，供真菌及念珠菌的增菌培养用。

⑵增加氯霉素0.05～0.125mg/ml或放线菌酮0.5mg/ml，可抑制细菌和污染的霉菌及隐球菌生长。

此二种药均耐热，可直接加入培养基内高压灭菌。

⑶添加酵母浸膏5mg/ml，可促进皮肤癣菌生长。

增加维生素B 0.1mg/ml，可促进紫色癣菌和断发癣菌生长。

⑷将麦芽糖减少到20g/L，为沙保罗20g/L麦芽糖琼脂培养基，可供诱导真菌产生孢子用。

⑸该培养基呈酸性，应提高20%的琼脂用量。

二、玉米粉琼脂培养基[用途]鉴定酵母样真菌用。

白色念珠菌在该培养基上25℃24h培养可长出假菌丝，顶端有典型的厚壁孢子，可与其它念珠菌鉴别。

[配法]玉米粉4g，琼脂粉8g，蒸馏水1L（pH6.0±0.2）。

将细米粉加水浸泡数分钟，扎紧瓶口，浸入60℃水浴4h，取出后用沙布过滤，除去粗渣，补足水分。

无须调整pH。

加入琼脂，煮沸溶解，有沉淀物再过滤1次，分装试管，121℃灭菌15min备用。

用玻璃片法点种后，置平皿内，保持一定湿度，置23～26℃下培养24～48h。

取出玻片培养物，用高倍镜观察真假菌丝和有无厚壁孢子。

[质量控制]白色念珠菌（ATCC 26790）厚膜孢子阳性；新型隐球菌（ATCC 9763）厚膜孢子阴性。

真菌用的培养基
真菌的培养基根据其特点和需求不同，可以分为以下几种常见的培养基：
1. 薄膜培养基：如麦芽琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂等。

适用于革兰氏阳性真菌和某些革兰氏阴性真菌的培养。

2. 液体培养基：如液体麦芽琼脂、液体马铃薯葡萄糖琼脂等。

适用于真菌的液体培养、发酵和产生次级代谢产物。

3. 饲养基：如麦麸葡萄糖培养基、马铃薯糖蛋白胨培养基等。

适用于饲养虫化真菌和真菌的寄生菌株。

4. 高营养培养基：如琼脂葡萄糖培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基等。

适用于真菌菌株的快速生长和高产菌。

5. 特殊培养基：如选择性培养基、鉴定培养基等。

根据不同的真菌种类和需求，可以添加抗生素、抑菌剂或特定的营养成分。

此外，还可以根据真菌的特殊要求，进行改良和添加其他成分，从而满足其生长和繁殖的需要。

酵母菌、霉菌常用培养基的配制一、目的要求了解合成培养基、半合成培养基和天然培养基的配制原理。

学习和掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的配制方法。

二、基本原理麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌。

马铃薯葡萄糖培养基有时也可用于培养放线菌。

豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的一种优良培养基。

察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用。

麦芽汁培养基为天然培养基，马铃薯葡萄糖培养基和豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基，而察氏培养基则为合成培养基。

培养基配方中出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。

三、实验材料（一）药品葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HPO4、KCI、MgSO4 7H2O, FeSQ、琼脂。

（二）仪器天平、高压蒸汽灭菌锅。

（三）玻璃器皿移液管、试管、锥形瓶、烧杯、量筒、培养皿、玻璃漏斗等。

（四）其他物品药匙、pH试纸、称量纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸、新鲜麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等。

四、实验内容（一）麦芽汁培养基的配制1培养基成分新鲜麦芽汁一般为10-15波林。

2.配制方法(1) 用水将大麦或小麦洗净，用水浸泡6-12h,置于15C阴凉处发芽，上盖纱布, 每日早、中、晚淋水一次，待麦芽伸长至麦粒的两倍时，让其停止发芽，晒干或烘干，研磨成麦芽粉，贮存备用。

(2) 取一份麦芽粉加四份水，在65C水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化，直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液，加2滴碘液，如无蓝色出现，即表示糖化完全)。

(3) 糖化液用4-6层纱布过滤，滤液如仍混浊，可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清, 加水20 ml,调匀至生泡沫，倒入糖化液中，搅拌煮沸，再过滤)。

(4) 用波美比重计检测糖化液中糖浓度，将滤液用水稀释到10-15波林，调pH 至6. 4。

如当地有啤酒厂，可用未经发酵，未加酒花的新鲜麦芽汁，加水稀释到10-15波林后使用。

146种培养基配方——2009年2月1日星期日by尛森蟲1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基)Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10gCaCO3 20g Agar (琼脂) 15gDistilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8适用范围：恶臭醋酸杆菌混浊变种2. Nutrient Agar (营养肉汁琼脂)Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30gNaCl 5g Agar (琼脂) 15gDistilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2[Note]：When cultivation of Bacillus，5mg of to MnSO4.H2O may be added .It is favorable to promote spore formation .适用范围：产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种(青虫菌)、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌(大肠杆菌)、铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌3. Azotobacter Medium (固氮菌培养基)KH2PO4 0.2g K2HPO4 0.8gMgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O0.1ｇNa2MoO4.2H2O Trace(微量) Yeast axtract(酵母膏) 0.5gMannitol(甘露醇) 20g FeCl3 Tract(微量)Distilled water (蒸馏水) 1000ml Agar (琼脂) 15gAdjust (调) pH to 7.2适用范围：固氮菌、胶质芽孢杆菌4. Corn Meal Medium (玉米粉培养基)Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1gGlucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml[Note]:Boil the mixture in autoclave at 121℃for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the li quid , then autoclave at 121℃for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。

真菌的分离及常用培养基关键词：真菌抗生素念珠菌白假丝酵母菌北纳创联北京标准物质网医学真菌形态学观察是认识真菌的第一步，但仅通过光学显微镜对其进行观察并不能直接鉴定为真菌，需要对疑似相关病变部位的标本进行采集及分离，然后在合适的培养基进行培养。

一、病变部位标本的采集分离通常采集疑似病变部位的皮肤附属物、分泌物、血液、痰液、脑脊液等体液，注意标本的新鲜度、无菌性、充足性，而且要对所采集标本进行正确消毒，杀死其中混有的杂菌。

标本为脑脊液时，需进行离心，收集沉淀物进行培养，标本为血液时，需要先行增菌培养后再分离，这样可增加阳性率，未增菌培养的阴性结果并不能排除阳性结果。

二、真菌培养常用的培养基目前商品化的真菌培养基多为干燥脱水的形式，可以按照配制说明书进行配制，值得注意的是，使用后的装培养基的瓶盖须拧严，防止受潮，以各下次使用。

1.沙保弱培养基及含抗生素的沙保弱培养基沙保弱培养基是培养真菌最常用的培养基，绝大多数的真菌均可以在其上生长，沙保弱培养基还可以添加抗生素，从而抑制多数细菌和污染真菌的生长速度。

含抗生素的沙保弱培养基多用于皮肤癣菌和绝大多数致病真菌的分离和培养，但值得注意的是含有抗生素的培养基会抑制念珠菌属、隐球菌和少量丝状真菌的生长。

2.玉米粉（厚膜孢子）培养基多用于鉴别念珠菌属，培养基中的吐温可以促进白假丝酵母菌产生厚膜孢子，同时可以加入1％葡萄糖促进红色毛霉菌生长，并抑制须毛霉菌的生长。

3.土豆葡萄糖培养基土豆培养基中需将土豆切成小于1cm。

的小块，常用于诱导真菌形成孢子或产生色素。

4.脑-心浸液琼脂培养基是一类营养丰富的真菌培养基，人工配制过程较为烦琐，一般通过商品化的培养基按照说明书进行配制。

BHI多用于室温培养致病真菌，也可用于35～37℃培养致病真菌的酵母相。

常用培养基配方汇总培养基是微生物学和生物技术中常用的一种实验工具，用于培养和繁殖微生物。

不同的微生物需要不同的培养基来满足其生长和繁殖的需求。

以下是一些常用的培养基配方汇总。

1. LB培养基（Luria-Bertani培养基）LB培养基是最常用的培养基之一，适用于大多数细菌的培养。

其成分包括植物蛋白胨、酵母提取物、氯化钠和琼脂。

它提供了细菌所需的氨基酸、碳源和能量源。

配方：-植物蛋白胨：10g-酵母提取物：5g-氯化钠：10g-琼脂：15g-加水至1L，调节pH至7.02. 紫砂培养基（Sabouraud培养基）紫砂培养基是一种适用于真菌培养的培养基。

其成分包括葡萄糖、酵母提取物和琼脂。

它提供了真菌所需的碳源和能量源。

配方：-葡萄糖：40g-酵母提取物：10g-加水至1L，调节pH至5.63. TSB培养基（Tryptic Soy Broth培养基）TSB培养基是一种适用于多种微生物的通用培养基。

其成分包括植物蛋白胨、胨肽、大豆胨和琼脂。

它提供了微生物所需的氨基酸、碳源和能量源。

配方：-植物蛋白胨：17g-胨肽：3g-大豆胨：5g-琼脂：15g-加水至1L，调节pH至7.34. MRS培养基（De Man, Rogosa and Sharpe培养基）MRS培养基是一种适用于乳酸菌培养的培养基。

其成分包括蔗糖、氯化镁、氯化钠、蛋白胨、酵母提取物和琼脂。

它提供了乳酸菌所需的碳源、氮源和能量源。

配方：-蔗糖：50g-氯化镁：0.2g-氯化钠：5g-酵母提取物：10g-琼脂：15g-加水至1L，调节pH至6.25.R2A培养基R2A培养基是一种适用于水样中微生物培养的培养基。

其成分包括胨肽、葡萄糖、酵母提取物、琼脂和微量元素。

它提供了水样中微生物所需的氮源、碳源和能量源。

配方：-胨肽：0.5g-葡萄糖：0.5g-酵母提取物：0.5g-琼脂：15g-微量元素：1mL-加水至1L，调节pH至7.2以上是一些常用的培养基配方汇总，适用于不同类型的微生物培养。

．常用培养基的制备（1）马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）和马铃薯蔗糖琼脂（PSA）培养基培养真菌最常用的培养基，成分如下：去皮马铃薯200 g 葡萄糖或蔗糖20g琼脂15－20g 水1000 ml配制方法：将马铃薯洗净去皮，称取200 g，切成小块（不必大小）放入锅中，加水1000ml，煮沸半小时，稍冷后用双层纱布过滤，在滤液中加蔗糖20g，加水补足到1000ml。

配成的培养基一般呈酸性，用于培养真菌，可以不必调pH。

如配制固体培养基，在加蔗糖前先加15－20g 琼胶加热熔化，最后加入蔗糖，混匀并加水补是至1000ml，趁热分装在试管或三角瓶中。

标准试管（15×150mm）分装量如下：一般用作斜面培养的每试管装培养基3－5ml，用作平面培养的每试管约10ml，加棉花塞后灭菌。

培养细菌用的培养基必须调节其酸度值到中性（pH7．0左右）。

（2）牛肉汁蛋白胨培养基（NA）是培养细菌最常用的培养基，又称营养琼脂或肉汤培养基。

成分如下：酵母浸膏1g 牛肉浸膏3g蛋白胨5-10g 蔗糖（或葡萄糖）l0g琼脂15-20g 水1000mlpH7.0配制方法：称取牛肉浸膏及蛋白胨溶于少量热水中备用，在其余水中加入琼脂，加热溶化后将牛肉浸膏和蛋白胨溶液加入混匀，然后加水补足到1000 ml，用NaOH或HCL调整至pH7.0，趁热分装，加棉花塞后灭菌。

（3）玉米叶培养基取一定数量的玉米叶片，洗净后剪成1㎝2左右的小块，放在250ml的三角瓶中，盛放量一般为三角瓶的1／3，然后加少量的水以保持湿润，加棉花塞后灭菌。

天然培养基一般不必调整pH。

（4）查氏（Czapek）培养基查氏培养基是一种组合培养基，其成分如下：NaNO3 2g K2HPO4 1 gMgSO4·7H2O 0．5g KCl 0．5gFeSO4 0．01g 蔗糖30g水1000ml（5）灭菌水的配制蒸馏水（或自来水）经过灭菌处理即成灭菌水，是实验室用量最大的必备品之一，常用于病原菌的分离、稀释、保湿等。

常见微生物培养基1. 肉汤培养基（Nutrient Broth）：这是一种常用的基础培养基，适用于多种微生物的生长。

它含有牛肉浸膏、酵母提取物和蛋白胨等成分，提供了丰富的氮源、维生素和生长因子。

2. 肉汤琼脂（Nutrient Agar）：在肉汤培养基的基础上添加琼脂，使其成为固体培养基。

这种培养基常用于分离和鉴定微生物，因为固体培养基可以形成单个菌落，便于观察和计数。

3. 血琼脂（Blood Agar）：在肉汤琼脂中加入5%的脱纤维羊血或马血。

这种培养基对于需要氧气和营养丰富的环境的微生物（如链球菌和肺炎球菌）特别有效。

4. 麦康凯琼脂（MacConkey Agar）：这是一种选择性培养基，用于分离和鉴定肠道杆菌。

它含有胆盐和结晶紫，可以抑制革兰氏阳性菌的生长，同时促进革兰氏阴性菌的生长。

5. 沙保罗琼脂（Sabouraud Agar）：这是一种用于培养真菌的培养基，含有葡萄糖、蛋白胨和琼脂。

它还含有抗生素氯霉素，可以抑制细菌的生长。

6. 鲁哥氏碘液（Lugol's Iodine）：这是一种用于检测细菌的染色剂，通常与革兰氏染色法一起使用。

它可以帮助区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

7. 马铃薯葡萄糖琼脂（Potato Dextrose Agar）：这是一种用于培养真菌的培养基，含有马铃薯提取物和葡萄糖。

它为真菌提供了丰富的碳水化合物和氮源。

8. 三糖铁琼脂（Triple Sugar Iron Agar）：这是一种用于鉴定肠道杆菌的培养基，含有乳糖、蔗糖和葡萄糖。

通过观察细菌在培养基上的生长情况和产酸情况，可以区分不同的肠道杆菌。

9. 革兰氏染色法（Gram Stain）：这是一种用于区分细菌的染色法，通过观察细菌在染色后的颜色，可以区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

10. 荧光染色法（Fluorescent Stain）：这是一种用于检测细菌的染色法，通过观察细菌在染色后的荧光颜色，可以区分不同的细菌种类。

酵母菌、霉菌常用培养基的配制一、目的要求了解合成培养基、半合成培养基和天然培养基的配制原理。

学习和掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的配制方法。

二、基本原理(一)(二)(三)(四)药匙、新鲜麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等。

四、实验内容(一)麦芽汁培养基的配制1．培养基成分新鲜麦芽汁一般为10-15波林。

2．配制方法(1)用水将大麦或小麦洗净，用水浸泡6-12h，置于15℃阴凉处发芽，上盖纱布，每日早、中、晚淋水一次，待麦芽伸长至麦粒的两倍时，让其停止发芽，晒干或烘干，研磨成麦芽粉，贮存备用。

(2)取一份麦芽粉加四份水，在65℃水浴锅中保温3-4h，使其自行糖化，直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液，加2滴碘液，如无蓝色出现，即表示糖化完全)。

(3)糖化液用4-6层纱布过滤，滤液如仍混浊，可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清，加水20 m1(4)至6．4。

波林(5)(6)(7)（二)12(1)配制20％马铃薯浸汁取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000m1。

80℃浸泡lh，用纱布过滤，然后补足失水至所需体积。

100Pa灭菌20min。

即成20％马铃薯浸汁，贮存备用。

（2)配制时，按每100 m1马铃薯浸汁加入2g葡萄糖，加热煮沸后加入2g琼脂，继续加热融化并补足失水。

(3)分装、加塞、包扎。

(4)高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。

(三)豆芽汁葡萄糟培养基的配制1．培养基成分黄豆芽10g葡萄糖5g琼脂1.5-2g2(1)（(3)(4)(四)1MgSO4·7H2O0.05 gFeS040.001 g琼脂1.5-2g蒸馏水100ml自然pH2．配制方法(1)称量及溶化量取所需水量约2／3左右加入到烧杯中，分别称取蔗糖、NaNO3、K2HP04、KCl、MgSO4。

依次逐一加入水中溶解。

按每100ml培养基加入1ml0.1％的FeS04溶液。

（2）定容候药品全部溶解后，将溶液倒入量筒中，加水至所需体积。

食用菌常用培养基同一种菌类培养基的配方虽然有多种多样，但必须含有各种菌丝生长所需要的养分、水分和适宜的酸碱度。

马铃薯、葡萄糖、琼脂作为各类母种的培养基最为普遍，菌丝都能正常生长。

现将常用的培养基配方和配制方法举例介绍。

1.马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)马铃薯(去皮) 200g 葡萄糖 20g琼脂 20g 水 1000mLpH值自然2.马铃薯蔗糖琼脂培养基(PSA培养基)马铃薯(去皮) 200g 蔗糖 20g琼脂 20g 水 1000mLpH值自然以上两种培养基广泛应用于各种菇、耳、猴头类食用菌的培养。

其具体制作方法是：将200g马铃薯去皮，去芽眼，切成小条放入铝锅中，加入1000mL水，煮沸20～30分钟左右至马铃薯软而不烂时，用6～8层纱布过滤，取滤汁于锅中，补水至1000mL，加入琼脂熔化，再加入糖搅拌均匀，趁热分装于试管中。

3.马铃薯半合成培养基(一)马铃薯(去皮) 200g 葡萄糖 20g磷酸二氢钾 3g 硫酸镁 1.5g维生素B1 100mg 琼脂 20g水 1000mL pH值 5.8～6.2此配方制作方法与PDA培养基相同。

不过加入部分化学药品，应在过滤后加入。

适用于香菇菌种保藏用，也适于培养平菇、双孢蘑菇、滑菇、金针菇、灵芝和猴头等母种用。

4.马铃薯半合成培养基(二)马铃薯(去皮) 200g 葡萄糖(蔗糖) 20g玉米粉 30g 黄豆粉 10g酵母膏 2g 磷酸二氢钾 1.5g硫酸镁 0.5g 琼脂 20g水 1000ml pH值自然此配方适合各种菇类。

制作时应注意：黄豆粉与马铃薯同时下锅，煮15分钟后再加入玉米粉，以免起糊影响过滤。

5.合成培养基(一)蛋白胨 2g 葡萄糖 20g磷酸氢二钾 1g 硝酸铵 1g磷酸二氢钾 0.46g 硫酸镁 0.5g琼脂 20g 水 1000mL6.合成培养基(二)葡萄糖 10g 磷酸二氢钾 0.5g氯化钠 0.2g 碳酸钙 2g琼脂 20g 水 1000mL酵母汁(1：10) 100mL 硫酸镁 0.2g将上述原料分别放入锅内，加水放入琼脂加热，并经搅拌熔化后即可分装试管。

[沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂，沙堡弱培养基，SDA]（一）组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0～15.0g蒸馏水1000ml（二）制法上述混合后加入200mg氯霉素，121摄氏度10分钟灭菌后备用。

（三）目的是常用的分离或保存菌种的培养基。

[沙氏液基，SDB]（一）组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g蒸馏水1000ml（二）制法上述混合后加入200mg氯霉素，121摄氏度10分钟灭菌后备用。

[加抗生素沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基，SDA with antibiotic]（一）组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0～15.0g蒸馏水1000ml（二）制法上述混合后加入200mg氯霉素。

250mg放线菌酮，121摄氏度10分钟灭菌后备用。

[改良沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基，modified SDA]（一）组成葡萄糖20.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0～15.0g蒸馏水1000ml（二）制法上述混合后121摄氏度10分钟灭菌后备用。

（三）目的保存菌种培养基。

[马铃薯葡萄糖琼脂，PDA]（一）组成马铃薯200.0g葡萄糖20.0g琼脂12.0～15.0g（二）制法先将马铃薯洗净去皮切片，加水180ml，煮沸30分钟后过滤，再加葡萄糖、琼脂，将过滤液补足到1000ml，121摄氏度灭菌后备用。

（三）用途此培养基是培养真菌较好的培养基，同时也是鉴定真菌较好的培养基之一。

鉴定皮肤癣菌一般不用此培养基。

[玉米吐温80琼脂，CMA with T w80]（一）组成玉米粉40.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml吐温80 10ml（二）制法先将玉米粉混于水中，65摄氏度水浴一小时，过滤，再补足水量，然后加入琼脂和吐温80，121摄氏度10分钟灭菌后备用。

（三）用途用于观察白念珠菌厚壁孢子及假菌丝；红色毛癣菌在此培养基产色素较好。

[米饭培养基rice grain medium](一)组成大米300.0g蒸馏水1000ml（二）制法将3g大米放入试管中，加入10ml蒸馏水，高压121摄氏度10分钟灭菌后备用。

实验用培养基配制 >1 ．牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）牛肉膏3g ，蛋白胨10g ，NaCl 5g ，水1000mL ，pH7.4 ～7.62. 高氏1 号培养基( 用于放线菌培养)可溶性淀粉20g ，KNO 3 1g ，NaCl 0.5g ，K 2 HPO 4- · 3H 2 O 0.5g ，MgSO4 · 7H 2 O 0.5g, ，FeSO4 · 7H 2 O 0.01g ，水1000mL ，pH7.4 ～7.6 。

配制时注意，可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。

3 ．马丁氏（Martin ）培养基（用于从土壤中分离真菌）K 2 HPO 4 1g ，MgSO 4 · 7H 2 O 0.5g ，蛋白胨5g ，葡萄糖10g ，1/3000 孟加拉红水溶液100mL, 水900mL ，自然pH ，121 ℃湿热灭菌30min 。

待培养基融化后冷却55 ～60 ℃时加入链霉素( 链霉素含量为30 μ g/mL).4. 马铃薯培养基(PDA)( 用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯( 去皮)200g, 蔗糖( 或葡萄糖) 20g, 水1000mL配制方法如下: 将马铃署去皮, 切成约2cm 2 的小块, 放入1500mL 的烧杯中煮沸30min, 注意用玻棒搅拌以防糊底, 然后用双层纱布过滤, 取其滤液加糖, 再补足至1000mL, 自然pH. 霉菌用蔗糖, 酵母菌用葡萄糖.5. 察氏培养基( 蔗糖硝酸钠培养基)( 用于霉菌培养)蔗糖30g, NaNO 3 2g, K 2 HPO 4 1g, MgSO 4 · 7H 2 O 0.5g, KCl 0.5g, FeSO4 · 7H2 O 0.1g, 水1000mL, pH7.0 ～7.26. Hayflik 培养基( 用于支原体培养)牛心消化液( 或浸出液)1000mL, 蛋白胨10g, NaCl 5g, 琼脂15g, pH7.8 ～8.0,分装每瓶70mL, 121 ℃湿热灭菌15min, 待冷却至80 ℃左右, 每70mL 中加入马血清20mL,25% 鲜酵母浸出液10mL, 15 醋酸铊水溶液2.5mL, 青霉素G 钾盐水溶液(20 万单位以上)0.5mL, 以上混合后倾注平板. 注意: 醋酸铊是极毒的药品, 需特别注意安全操作.7 ．麦氏(McCLary) 培养基( 醋酸钠培养基)葡萄糖0.1g, KCl 0.18g ，酵母膏0.25g ，醋酸钠0.82g, 琼脂l.5g ，蒸馏水l00mL 。

一．细菌培养基：肉膏蛋白胨培养基是一种广泛用于培养细菌的培养基 ,肉膏蛋白胨培养基的主要成分是牛肉膏、蛋白胨和NaCl。

肉膏蛋白胨培养基1.药品比例：牛肉膏 3g，蛋白胨 10g，Nacl5g，琼脂 15～20g，水 1000mL，PH7.4～7.62.实验器材：牛肉膏、蛋白胨、琼脂、可溶性淀粉、葡萄糖、孟加拉红、链霉素、1mol/L NaOH、lmol/L HCl、KNO3、NaCl、K2 HPO4·3H2O、MgSO4·7H2O、FeSO4·7H2O、4.5mL 无菌水 6 管，10%酚液，49.5mL 无菌水 ( 带玻璃珠 )1瓶。

土壤样品、试管、培养皿、移液管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、天平、称量纸、牛角匙、pH试纸、棉花、报纸、记号笔、线绳、纱布、酒清灯。

电炉、高压蒸气灭菌锅、超净工作台 .3.配置方法（1）称药品：按实际用量计算后，按配方称取各种药品放入大烧杯中。

牛肉膏可放在小烧杯中称量，用热水溶解后倒入大烧杯。

蛋白胨极易吸潮，故称量时要迅速。

（2）加热溶解：在烧杯中加入少于所需要的水量，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒搅拌，待药品完全溶解后再补充水分至所需量。

若配制固体培养基，则将称好的琼脂放入己溶解的药品中，再加热融化，此过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，最后补足所失的水分。

（3）调 pH：检测培养基的 pH，若 pH偏酸，可滴加 lmol/L NaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸检测，直至达到所需pH范围。

若偏碱，则用 lmol/L HCl 进行调节。

pH 的调节通常放在加琼脂之前。

应注意pH值不要调过头，以免回调而影响培养基内各离子的浓度。

（ 4）过滤：液体培养基可用滤纸过滤，固体培养基可用 4 层纱布趁热过滤，以利培养的观察。

但是供一般使用的培养基，这步可省略。

（5）分装：按实验要求，可将配制的培养基分装入试管或三角瓶内。

分装时可用漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上而造成污染。

此文档下载后即可编辑[沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂，沙堡弱培养基，SDA]（一）组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0～15.0g蒸馏水1000ml（二）制法上述混合后加入200mg氯霉素，121摄氏度10分钟灭菌后备用。

（三）目的是常用的分离或保存菌种的培养基。

[沙氏液基，SDB]（一）组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g蒸馏水1000ml（二）制法上述混合后加入200mg氯霉素，121摄氏度10分钟灭菌后备用。

[加抗生素沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基，SDA with antibiotic] （一）组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0～15.0g蒸馏水1000ml（二）制法上述混合后加入200mg氯霉素。

250mg放线菌酮，121摄氏度10分钟灭菌后备用。

[改良沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基，modified SDA]（一）组成葡萄糖20.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0～15.0g蒸馏水1000ml（二）制法上述混合后121摄氏度10分钟灭菌后备用。

（三）目的保存菌种培养基。

[马铃薯葡萄糖琼脂，PDA]（一）组成马铃薯200.0g葡萄糖20.0g琼脂12.0～15.0g蒸馏水1000ml（二）制法先将马铃薯洗净去皮切片，加水180ml，煮沸30分钟后过滤，再加葡萄糖、琼脂，将过滤液补足到1000ml，121摄氏度灭菌后备用。

（三）用途此培养基是培养真菌较好的培养基，同时也是鉴定真菌较好的培养基之一。

鉴定皮肤癣菌一般不用此培养基。

][玉米吐温80琼脂，CMA with Tw80（一）组成玉米粉40.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml吐温80 10ml（二）制法先将玉米粉混于水中，65摄氏度水浴一小时，过滤，再补足水量，然后加入琼脂和吐温80，121摄氏度10分钟灭菌后备用。

（三）用途用于观察白念珠菌厚壁孢子及假菌丝；红色毛癣菌在此培养基产色素较好。

[米饭培养基rice grain medium](一)组成大米300.0g蒸馏水1000ml（二）制法将3g大米放入试管中，加入10ml蒸馏水，高压121摄氏度10分钟灭菌后备用。

【共享】临床常用真菌培养基的制作方法
沙堡弱培养基Sabouraud dextrose agar（SDA）
葡萄糖 40g 、蛋白胨 10g、琼脂粉 20g、氯霉素 100mg加入
到1L蒸馏水中，煮沸使其充分混匀，121.3℃高压15分钟分装试管待用
马铃薯培养基potato dextrose agar（PDA）
新鲜土豆 200g、葡萄糖 20g、琼脂粉 20g、蒸馏水 1L
将土豆切成小块放放蒸馏水中煮沸30分钟，过滤留取液体。

将液体补足1L，加入葡萄糖和琼脂粉混匀，121.3℃高压15分钟分装待用麦芽浸汁培养基malt extract agar（MEA）
称取OXOID生产的MALT EXTRACT AGAR 50g加入1L蒸馏水中，混匀，121.3℃高压15分钟分装待用
橄榄油培养基
蛋白胨 20g、葡萄糖 20g、麦芽糖20g 、酵母浸膏 5g、琼脂20g、橄榄油40ml、单硬脂酸甘油酯10g、氯霉素100mg加入无菌蒸馏水1L煮沸使其充分混匀，分装待用
燕麦培养基 oatmeal agar（OA）
燕麦30g、琼脂15g、蒸馏水1L
称取新鲜燕麦片30g，用沙布包起燕麦片扎口加入到1L蒸馏水中煮沸2小时，取出沙布将液体补足1L，加入琼脂15g，121.3℃高压15分钟分装待用
察氏培养基Czapek agar(CZA)
NaNO3 3.0g ;KHPO4 1.0g ; KCL 0.5g; MgSO4.7H2O 0.5g; FeSO4.7H2O 0.01g; 庶糖 30g ; 琼脂 15g; 蒸馏水 1L
PH =6.0-6.5 121.3℃高压15分钟分装待用。

一．细菌培养基：肉膏蛋白胨培养基是一种广泛用于培养细菌的培养基,肉膏蛋白胨培养基的主要成分是牛肉膏、蛋白胨和NaCl。

肉膏蛋白胨培养基1.～7.6 2.、6管，10%3.（1速。

（2）加热溶解：在烧杯中加入少于所需要的水量，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒搅拌，待药品完全溶解后再补充水分至所需量。

若配制固体培养基，则将称好的琼脂放入己溶解的药品中，再加热融化，此过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，最后补足所失的水分。

（3）调pH：检测培养基的pH，若pH偏酸，可滴加lmol/LNaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸检测，直至达到所需pH范围。

若偏碱，则用lmol/LHCl进行调节。

pH的调节通常放在加琼脂之前。

应注意pH值不要调过头，以免回调而影响培养基内各离子的浓度。

（4）过滤：液体培养基可用滤纸过滤，固体培养基可用4层纱布趁热过滤，以利培养的观察。

但是供一般使用的培养基，这步可省略。

（5）分装：按实验要求，可将配制的培养基分装入试管或三角瓶内。

分装时可用漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上而造成污染。

分装量：固体培养基约为试管高度的l/5，灭菌后制成斜面。

分装入三角瓶内以（6（7（8（9（10）无菌检查：将灭菌的培养基放入37℃温箱中培养24～48h，无菌生长即可使用，或贮存于冰箱或清洁的橱内，备用。

二.放线菌培养基:高氏合成一号培养基是一种用于培养放线菌的合成培养基,培养基中的可溶性淀粉作为碳源和能源，KNO3作为氮源，K2HP04、MgSO4和FeS04作为无机盐等高氏合成一号培养基1.药品比例：可溶性淀粉20gNaCI 0．5gKNO31gK2HPO4MgSO4FeSO4琼脂水pH2.3.成分，并依次溶化，对微量成分FeSO4．7H2O可先配成高浓度的贮备液，按比例换算后再加入。

待所有试剂完全溶解后，补充水分到所需的总体积。

配制固体培养基时，将称好的琼脂放入已溶的试剂中，在加热融化，最后补充所损失的水分。

一．细菌培养基：肉膏蛋白胨培养基是一种广泛用于培养细菌的培养基,肉膏蛋白胨培养基的主要成分是牛肉膏、蛋白胨和NaCl。

肉膏蛋白胨培养基1.～7.6 2.、6管，10%3.（1速。

（2）加热溶解：在烧杯中加入少于所需要的水量，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒搅拌，待药品完全溶解后再补充水分至所需量。

若配制固体培养基，则将称好的琼脂放入己溶解的药品中，再加热融化，此过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，最后补足所失的水分。

（3）调pH：检测培养基的pH，若pH偏酸，可滴加lmol/LNaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸检测，直至达到所需pH范围。

若偏碱，则用lmol/LHCl进行调节。

pH的调节通常放在加琼脂之前。

应注意pH值不要调过头，以免回调而影响培养基内各离子的浓度。

（4）过滤：液体培养基可用滤纸过滤，固体培养基可用4层纱布趁热过滤，以利培养的观察。

但是供一般使用的培养基，这步可省略。

（5）分装：按实验要求，可将配制的培养基分装入试管或三角瓶内。

分装时可用漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上而造成污染。

分装量：固体培养基约为试管高度的l/5，灭菌后制成斜面。

分装入三角瓶内以（6（7（8（9（10）无菌检查：将灭菌的培养基放入37℃温箱中培养24～48h，无菌生长即可使用，或贮存于冰箱或清洁的橱内，备用。

二.放线菌培养基:高氏合成一号培养基是一种用于培养放线菌的合成培养基,培养基中的可溶性淀粉作为碳源和能源，KNO3作为氮源，K2HP04、MgSO4和FeS04作为无机盐等高氏合成一号培养基1.药品比例：可溶性淀粉20gNaCI 0．5gKNO31gK2HPO4MgSO4FeSO4琼脂水pH2.3.成分，并依次溶化，对微量成分FeSO4．7H2O可先配成高浓度的贮备液，按比例换算后再加入。

待所有试剂完全溶解后，补充水分到所需的总体积。

配制固体培养基时，将称好的琼脂放入已溶的试剂中，在加热融化，最后补充所损失的水分。