缺血性中风动物模型研究
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缺血性脑卒中的动物模型HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】缺血性脑卒中研究中的动物模型想要进行一项基础研究,动物模型必不可少。
缺血性脑卒中研究如火如荼,动物模型也多种多样,有哪些常用的动物模型,以及它们各自的特点就成了研究人员在选择模型时十分关注的问题。
在缺血性卒中过程中,最终的梗死体积和神经功能预后受到多种因素的影响,例如缺血的持续时间、缺血的严重程度、侧枝循环、系统的血压以及梗死产生的原因和位置。
此外,年龄、性别和相对复杂的药物遗传背景也会对其产生影响。
因为卒中是如此复杂的一个疾病,因而动物模型也往往只能覆盖其中个别方面的特点。
虽然中风是一种复杂的疾病,但其存在一些共同的特点,这使得我们有机会用实验来模拟卒中的发生。
缺血性脑卒中的一个重要特点是进展,这也解释了缺血半暗带的存在。
当血流量降至基线值的15-20%以下时,只要几分钟就会产生不可逆的脑损伤核心,并且迅速相周围发展。
其周围的脑组织血流减少得相对较轻,所以此时神经功能缺失而组织结构却是完整的。
但如果脑血流不能恢复,那么这些所谓的半暗带组织就会被纳入梗死核心区。
最常用的一种模型是啮齿动物的线拴法大脑中动脉闭塞模型(MCA),方法是将普通的血管内缝线或特制的线拴放入大脑中动脉开口处,从而达到阻塞血管造成血流量减少的目的。
这种方法的优点是:不需要开颅的手术,并且通过拔出线拴的方法还可以达到在特定时间再通血管的目的,虽然瞬间的血管开通与人体一般的病理生理过程相去甚远,但与近来应用越来越广泛的机械取栓治疗的病理过程不谋而合。
因此,虽然在模型的制作上存在一些问题,但仍是目前最广受认可的一种脑卒中动物模型。
另一种常用的方法是用各种方式直接地闭塞血管,分为永久地闭塞血管(如凝断)和暂时闭塞血管(如结扎),但大多都需要开颅的手术操作。
使用内皮素-1(一种强血管收缩剂)可以诱导短暂的局灶性脑缺血,其产生的病灶可以分布于脑组织任何位置,常常被用于制作腔隙性梗死的模型制作。
全脑缺血再灌注动物模型建立方法一、引言脑缺血再灌注模型是研究脑缺血再灌注损伤的重要手段,对于深入理解缺血性脑损伤的病理生理机制,探索新的治疗方法具有重要意义。
本文将详细介绍全脑缺血再灌注动物模型的建立方法。
二、准备工作1. 实验动物:选择健康成年小鼠、大鼠或兔,确保其无疾病、无遗传性疾病。
2. 设备:准备好手术器械、显微镜、止血钳、无创血压计、冰冻浴盆、恒温湿毛巾等。
3. 药物:准备适量麻醉剂、抗生素、输液用品等。
三、全脑缺血模型的建立1. 麻醉:使用麻醉剂对实验动物进行全身麻醉。
2. 暴露手术部位:对实验动物进行全身消毒,打开腹腔,暴露手术部位。
3. 制作全脑缺血:使用特制的夹子将实验动物的脑血管夹闭,制造全脑缺血。
具体夹闭部位和时间需要根据实验需求进行调整。
四、再灌注过程的控制1. 解除血管夹闭:缺血时间结束后,缓慢解除血管夹闭,恢复血流。
2. 观察再灌注情况:在再灌注过程中,密切观察实验动物的神态、行为变化,以及脑部颜色、肿胀等情况。
五、模型评估与结果记录1. 评估再灌注效果:再灌注过程结束后,评估实验动物的全脑缺血再灌注效果,记录相关数据。
2. 观察病理变化:对实验动物的大脑组织进行病理学检查,观察缺血再灌注损伤后的病理变化。
3. 结果记录与分析:将观察到的结果进行记录,并对结果进行分析,为后续研究提供基础数据。
六、注意事项1. 麻醉剂的使用要适量,避免对实验动物造成过大的伤害。
2. 手术过程中要保持无菌操作,避免感染。
3. 制作缺血模型时,要确保夹闭的血管部位准确,时间适当,避免影响实验结果。
4. 再灌注过程要缓慢,确保血流的恢复不会对实验动物造成过大的刺激。
5. 病理学检查要取样准确,切片处理要规范,确保检查结果的准确性。
七、总结本文详细介绍了全脑缺血再灌注动物模型的建立方法,包括准备工作、缺血模型的建立、再灌注过程的控制和结果记录等。
该模型可用于研究脑缺血再灌注损伤的病理生理机制和探索新的治疗方法。
中风病证结合动物模型制备的现状与思考刘会贤,刘敬霞,刘洋,李娟,李晶晶(宁夏医科大学,银川 750004)摘要:总结中风病证结合动物模型的制备方法,探讨中风病证结合动物模型规范的制备方法。
通过检索中国知网和万方数据库中2001年-2011年相关文献,根据文献筛选标准剔除重复及不规范的文献。
通过阅读发现记载中风疾病动物模型有100多篇;记载证候动物模型的有57篇文献;而记载中风病证结合动物模型的文献有15篇,其中以气虚血瘀型模型为多。
文章就中风各证型病证结合动物模型的制备现状进行综述、评价与思考,为中风各证型的动物模型制备提供理论基础。
关键词:中风;病证结合;动物模型;制备基金资助:宁夏医科大学特殊人才项目(No.XT200911)Current preparing situation and thinking of stroke animal models combined withdisease and syndromeLIU Hui-xian, LIU Jing-xia, LIU Yang, LI Juan, LI Jing-jing(Ningxia Medical University, Yinchuan 750004, China)Abstract: To discuss a reasonable standard method, summarized the existing method of disease and syndrome by queried related articles from Articles Database and National Knowledge Infrastructure (CNKI From 2001 to 2011). According to the literature selection criteria, remove repeated and non-standard articles. By reading these literatures, we found that more than 100 articles recorded animal models of cerebral ischemic; syndrome animal models with 57 articles; cerebral ischemic animal models combined disease and syndrome were only 15 documents, most of these models were Qi defi ciency and blood stasis model types. Therefore, prepare animal models of cerebral ischemic combined with disease and syndrome together have significant implications and further research is needed,at the same time, it also provide theoretical basis for various syndromes of stroke which is about differential treatment.Key words: Cerebral ischemic; Combined disease and syndrome; Animal models;PreparationFund assistance: Special Talents Project of Ningxia Medical University (No.XT200911)脑是主管知觉、运动、思维和记忆的器官[1],而在诸脑病中,缺血性中风在我国人群发病率、患病率、均呈增高趋势[2],是当前严重威胁我国老年人健康与生命的主要疾病。
脑缺血动物模型及进展【摘要】建立一种符合临床脑缺血发病规律的动物模型是研究局灶性脑缺血发生机制及防治措施的基本条件。
近年来随着实验动物科学的不断发展,该领域的研究已取得了长足的进步。
现就局灶性脑缺血模型的制备及其研究进展作一综述。
【关键词】脑缺血;动物模型;进展脑缺血是以脑循环血流量减少为特征的中枢神经系统疾病,具有发病率高、致残率高和死亡率高的特点,严重地影响人类的生存质量。
据统计,我国脑血管疾病的自然人口发病率为每年 114-187人/10万,患病率为 253-620人/10万,病死率为每年 79-89人/10万。
60岁以上老年人脑血管疾病的平均发病率和病死率更高,分别为 1325.7人/10万和 886.1人/10万。
脑卒中 93%发生在 50岁及以上人群,75%以上为老年人。
目前我国脑血管疾病占人群死亡病因的第二位。
因此,模拟人类缺血性脑血管病的发病过程,建立重复性好、观测指标易于控制的脑缺血动物模型一直是人们普遍关注的课题。
经过研究者的不断努力,实验模型制备技术日臻完善,这为进一步系统研究脑缺血的病理生理、发病机制和防治措施等提供了坚实的基础。
现就局灶性脑缺血模型的制备及其研究进展综述如下。
1 动物模型在脑缺血研究中的价值和意义动物模型是医学研究中的一个重要手段,尤其对于缺血性脑血管病,能即刻制造或模拟血流下降或阻断,只有利用动物模型才能进行,具有方便、快捷、条件可控、脑缺血程度一致等优点。
但一般情况下,活体动物模型的制作多采用健康动物,缺乏人脑缺血前就存在的各种复杂的危险因素和病理生理学过程。
尽管如此,脑缺血动物模型在以下几个方面还是为研究提供了无法替代的价值:(1)不同脑缺血状态下的病理学改变;(2)缺血半暗带的研究;(3)再灌注损伤;(4)缺血本身导致的病理生理学变化;(5)干预治疗对缺血性损害的保护作用;(6)缺血性损害的部分机制。
2 脑缺血动物模型动物的选择2.1 脑缺血模型的动物选择的原则制备脑缺血动物模型一般需遵循一下原则:(1)选用与人体结构、功能、代谢及疾病特征相似的动物;(2)动物的解剖生理特点符合实验目的;(3)注意人与实验动物对同一刺激的反应差异,选用具有明显反应的动物;(4)选用患有类似人类疾病的近亲系或突变系动物;结构功能简单又能反映研究指标;(5)选用与实验设计、技术条件、实验方法等条件相适应的标准化动物;(6)在不影响实验质量的前提下选用易获得、最经济、最易饲养管理的动物。
大鼠MCAO模型制作学习大鼠是常用的实验动物之一,在中风研究中,大鼠的MCAO(脑缺血再灌注)模型被广泛应用。
本文旨在介绍制作MCAO模型的步骤和必要的操作要点,以帮助读者更好地理解和应用该模型进行相关研究。
本文为第二版,相较于第一版,进行了更新和补充,以提供更详尽和准确的信息。
1.实验动物的选取在制作MCAO模型前,需要选择合适的实验动物。
一般情况下,成年雄性大鼠是最常用的模型动物。
选择同一品系和年龄相仿的大鼠,以减小实验结果的差异性。
2.麻醉和固定在操作前对大鼠进行全身麻醉,常用的麻醉药物有:45 mg/kg的氯丙嗪、35 mg/kg的阿托品和5 mg/kg的氯胺酮。
氯胺酮在操作过程中可以作为镇痛药物使用。
麻醉后,将大鼠固定在手术台上。
可以使用特制的外耳道委内瑞拉套和鼻鼻夹来固定大鼠的头部,以保证操作的准确性。
3.手术前准备首先,在头部的横纹上进行刮毛和消毒。
然后,注射青霉素(40,000 U)和伯氨喹(0.02 mg)以预防感染。
同时,使用外科剪刀剪开皮肤,将双眼收敛于外侧,暴露侧枕中动脉和颈内动脉。
4.暴露颈外动脉用外科剪刀剪开皮肤和筋膜,小心地将侧脖肌肉向后收拢,可以使用吸引器来辅助。
将剪开的筋膜用湿纱布或者胶布临时覆盖住。
5.分离颈外动脉和侧脑动脉用显微镊子小心地拉开组织,找到颈外动脉和侧脑动脉,将其两者之间的分支切断。
注意不要损伤到其他周围的组织。
6.模拟大脑缺血使用小血管夹或者线缚住颈外动脉,是的血流中断。
夹或者线的拇指静脉下方位置比较理想,但是要注意不要损伤到其他组织。
7.设定缺血时间一般情况下,将血流中断一小时可以模拟大脑缺血,如果需要模拟更严重的缺血,可以延长血流中断的时间。
8.再灌注当需要终止大脑缺血时,可以通过解开夹子或者拆除线来恢复大脑的血流。
再灌注后,动物会逐渐恢复意识并呈现异常的行为和生理反应,比如抽搐、四肢不协调等。
9.手术封口待实验结束后,用缝合线或者胶布将切口封闭。
PPARα在小鼠急性局灶性脑缺血中的作用及机制研究的开题报告一、研究背景和意义急性缺血性中风是脑血管病最常见的类型,在中国发病率和死亡率在不断增加。
临床研究表明,缺血后脑组织中能够通过调节一系列基因来防止神经元死亡和细胞凋亡,包括Peroxisome proliferator-activated receptor alpha(PPARα)。
PPARα是一个核受体,在调节脂质代谢和糖代谢方面具有重要作用。
在动物实验中,PPARα拮抗剂GW6471的作用能够抑制Pparα基因的表达和直接干预其功能,从而导致脑缺血后更严重的神经元死亡和细胞凋亡。
另一方面,许多药物如贝特类降脂药(Fibrates)依靠激活PPARα的作用来达到神经保护的效果。
因此,PPARα在脑缺血后神经保护中的作用是值得深入探究的。
二、研究内容和方法1、研究目的本研究旨在探究PPARα在小鼠急性局灶性脑缺血中神经保护作用及其分子机制。
2、研究方法(1)动物模型建立:采用Left middle cerebral artery occlusion (LMCAO)建立小鼠局灶性脑缺血模型,将小鼠随机分为PPARα激活组、PPARα拮抗组和对照组。
(2)药物处理:PPARα激活组注射PPARα激动剂贝特类降脂药(Fibrate),PPARα拮抗组注射PPARα拮抗剂GW6471。
(3)指标测定:测定小鼠神经行为学表现、脑组织病理变化、神经元凋亡水平、炎性因子水平、氧化应激状态和相关信号通路蛋白表达水平,从而探究PPARα在小鼠急性局灶性脑缺血中的作用及机制。
三、研究预期结果预计本研究结果能够揭示PPARα在小鼠缺血后神经保护过程中的作用及其分子机制,为脑缺血病发生、发展机制的研究提供新的实验依据和理论基础。
同时,希望本研究能够为相关药物基础研究及临床应用提供参考和指导。
缺血性中风动物模型研究2013级硕士8班陈林伟南京中医药大学摘要:实验动物或细胞模型完全模拟人类的中风十分困难,动物模型与临床的拟合具有重要意义。
脑缺血动物模型为研究脑缺血后病理过程.病理生理机制及评价潜在的治疗干预效果等提供了极其重要的手段。
关键词:缺血性中风;动物模型;大脑中动脉闭塞脑卒中,俗称中风,包括脑出血、脑血栓和脑梗塞等。
缺血性中风是由大脑主动脉或其分支血栓形成,或内栓子阻塞引起,且多为大脑中动脉(MCA)栓塞。
利用实验动物或细胞模型完全模拟人类的中风十分困难,过去二十年,经动物模型研究证明有效的700多种药物中,除一种新自由基消减剂(NXY-059)外,其余全都未能在三期临床得到阳性结果,从而无法证明其有效性,故研究建立与人类发病机理相近、可长期观察、结果稳定可靠、便于操作、价格低廉而实用的符合人类中风的动物模型成为一个迫切需要解决的问题。
1 实验动物的选择在新药研发与脑缺血基础工作中,选择恰当的动物模型是非常重要的。
缺血性中风动物模型中使用的实验动物有两大类:即灵长类和啮齿类。
对于中风的生理病理的了解,最初来源于中风患者。
因此,灵长类动物对中风的基础研究具有重要作用。
与人类相似的多脑回灵长类动物种属(如猕猴),在行为和感觉运动整合方面与人类有密切的相似性,是中风基础研究、探索性研究和临床前评价的最佳动物模型。
利用非人灵长类动物制备模型,已有了几十年的经验积累,如狒狒。
STAIR会议提出,药物一旦用小动物做出阳性结果,应该在较高的物种进行验证,然后才能开始临床试验[1]。
最近报道,利用狨猴模型发现了神经保护药物氯美噻唑。
国内也有学者采用光化学法成功造成树鼩局部脑缺血模型呤[2],其造模方法亦被多人借鉴采纳。
但是,到目前为止,尚无标准化的、被广泛接受的灵长类动物中风模型。
与灵长类较大的动物相比,啮齿类动物模型,如大鼠和小鼠,具有价格便宜、来源充足、品种纯化、制作模型方法简单、存活率高、脑血管解剖和生理较接近于人类、易于监测生理参数,脑标本制作容易等多面的优势[3]。
但是啮齿类动物的大脑与人和非人灵长类动物的大脑存在差异,对于相同的缺血损伤的反应可能不同。
如何将动物的给药方案扩大到人体一直是个难题,包括给药剂量和疗程。
例如啮齿类动物模型在中风后的第一周就可恢复,而人类中风后恢复需要较长的时间,可能需要几个月。
给药剂量也存在同样的问题。
一些全身给药的药物可根据体重进行校正,而一些蛋白质和生长因子类药物,必须脑内注射给药,可根据大脑表面积或体积进行推算。
如果没有灵长类动物模型,以及相应的过渡步骤,从啮齿类动物向人体转换将很困难。
2模型评价标准与造模方法由于病因不同、持续时间长短不一、梗死位置的变化、缺血严重程度的差异,以及并发的其他系统性疾病的不同,造成了中风临床症状的多样性。
建立一个完全理想的缺血性脑中风模型,几乎是不可能的。
因此,选择动物中风模型,最重要的是该模型与中风临床表现的匹配度是多少。
应该基本符合以下标准[4]: 1、缺血过程和病理生理反应与人类中风相似;2、缺血性病灶大小重现性强;3、建模的技术相对容易的,创伤小;4、可以监测生理变量,并可维持在正常范围内;5、可方便获取脑样品,进行病理组织学,生物化学和分子生物学研究;6、费用合理。
缺血性中风动物模型分为局灶性脑缺血模型和全脑缺血模型两大类。
全脑缺血模型(global ischemia)的组织病理学和所观察到的行为障碍显著不同,重现性差。
目前基础研究中主要采用局灶性脑缺血模型。
局灶性脑缺血模型又分为永久性和暂时性缺血模型两种。
无论是永久性还是暂时性缺血,缺血性病灶大小差异都很大,而超过3 h的局部脑缺血是不可逆的[5]。
永久中风模型用来研究没有再灌注作用的脑缺血,而暂时性脑缺血模型的闭塞动脉再灌模型,所产生的后果(即再灌注损伤)非常接近人类中风缺血部位再灌注,用于较系统地研究缺血性中风发生后的病理变化、药物的作用机理,以及研制开发新的治疗方法,是目前使用最为广泛的动物模型。
目前局灶性大脑中动脉缺血模型的制备方法包括:1、开颅机械闭塞法;2、光化学诱导血栓形成法;3、微栓子栓塞阻断法;4、内皮素-1灌注诱导血管收缩法;5、化学刺激诱导血栓性闭塞法;6、血管内线栓阻断法等。
其中以血管内线栓阻断法应用最为广泛。
无论使用何种动物,采用何种方法,如何减少组间、个体内差异,都是评价模型成功与否的关键。
3局灶性脑缺血模型3.1大脑中动脉电凝阻断模型通过将雄性SD大鼠小颅窗暴露大脑中动脉起始部,在大脑中动脉靠近颈内动脉处将其电凝阻断,造成供应区缺血。
为常用的永久性局灶性脑缺血模型。
缺血成功率高,重复性好;但手术较复杂,且须开颅,破坏了颅腔完整性,如操作不当,可直接损伤脑组织。
理论上可制成再灌注模型,但实际操作较困难[6]。
3.2大脑中动脉线栓法再灌注模型首次描述了线栓法阻塞大鼠大脑中动脉,将尼龙线自雄性SD大鼠的颈外动脉插入,然后将线引入颈内动脉,使其穿过大脑中动脉起始部,阻断大脑中动脉,造成大脑中动脉供应区血流中断,导致局灶性缺血。
缺血一定时间后,将栓线慢慢抽出,恢复血流进行再灌注。
此法诱发的缺血再灌注和永久性缺血性损伤程度有所差别,永久性缺血后梗死体积较短暂性缺血要大。
本法无需开颅避免了手术操作对脑组织的直接刺激作用。
方法简单易行,适于对再灌注损伤的病理生理机制研究。
目前该法已逐渐取代开颅法而成为最流行的方法。
优点是无需开颅,属相对非侵入的方法。
缺点是需要一定的手术技巧,在以往复杂的操作中常出现动物死亡率高、脑出血或蛛网膜下腔出血、梗死大小不衡定等情况。
另外个体差异较大,死亡率高[7]。
线栓法不利之处包括:1、血管破裂和随后蛛网膜下腔出血;2、体温过高;3、不适当的大脑中动脉阻塞。
栓线的有机硅涂层和激光多普勒引导下插线可以减少蛛网膜下腔出血的发生。
自发高热的产生,被认为发生在大多数动物大脑中动脉阻塞持续2h或更长时间,是与下丘脑损伤有关[8]。
在Longa法的基础上进行了改进,使得制作方法简便,提高了造模的成功率和可重复性,制成稳定均一的MCAO模型[9]。
具体方法为大鼠麻醉后,分离颈总动脉(CCA)和颈外动脉(ECA),将鼠头沿长轴方向扭转向左侧45。
,拉直ECA与颈内动脉的夹角。
使用头端3 mm硅胶包埋制成0.26-0.3 mm膨大的线栓,插入自CCA与ICA分叉点18 mm。
术后2 h进行神经功能评分,均为2分,造模均一性好;术后20 h行TTC染色,示大鼠大脑中动脉(MCA)皮层分布区产生梗死灶,梗死比为(19.066±1.556)%,水肿比为(1.031±0.024)。
造模成功率为93.75%,死亡率为6.25%(2/30,尸检结果显示蛛网膜下腔出血)。
线栓法MCAO模型的制备方法,也适用于小鼠[10],如转基因和基因敲除小鼠突变体[11];在非鼠动物也成功地制备了MCAO模型,如兔;另外探讨非人灵长类动物的MCAO 模型的制备方法也十分需要[12]。
3.3光化学法诱导模型本法通过将光敏染料孟加拉红经尾静脉注入后,采用特定光波在颅骨表面做定向照射,形成大脑皮质区梗死[13]。
注入体内的光敏染料在特定光波的作用下发生光化学反应,引起内皮细胞过氧化,释放自由基,导致血管内皮损伤,诱发血小板聚集而形成血栓。
用该法后梗死部位可任选,不限于大脑中动脉供血区;操作方便、重复性好;该模型适于研究抗血小板药、抗血栓药及内皮细胞保护剂。
但其造成永久性闭塞,无法再灌注。
此模型创伤小,动物存活率高,梗死部位及大小易于控制,适合老年卒中患者相关基因及干预治疗的研究。
3.4局灶血栓注入法1982年Kudu等[14]引将血凝块分段并注入颈内动脉,不仅导致了颅内栓塞,而且也引起了颅外栓塞。
这可能是由于血凝块弥散到作为颈内动脉主要分支的翼突腭动脉所引起。
为防止颅外栓塞,Overguarll等[15]对该模型进行了改良,结扎了翼突腭动脉、甲状腺动脉、枕骨动脉,将血凝块注入颈总动脉。
但这些步骤并不能防止对侧半球栓塞,因为凝血块可通过Wills环到对侧半球。
血栓栓塞性中风模型比其他脑缺血模型更接近人类中风,大多数的人类中风是血栓栓塞引起的。
另外,血栓模型具有测试溶栓剂的潜力,可更好地评估经历了溶栓的缺血性病变,为研究联合疗法提供了可能,如溶栓剂和神经保护药物[16]。
血栓栓塞缺血的诱导最常见的是由自体血栓进入到颅外动脉达到更远端颅内动脉。
在早期血栓模型,人体血液凝块,或悬浮的同源小血块碎片被用来产生栓塞。
Wang等[17]改良了微栓子栓塞阻断法,他们将导管插入颈内动脉,将不同容积的凝血酶注入微导管,在导管内制备血凝块,然后将血凝块注入颈总动脉,阻塞MCA,诱导产生不同体积的大脑缺血性损伤。
这种方法不仅使外科手术步骤更为简便,而且与临床局灶性脑缺血更为接近。
因为临床上大多数患者在单纯脑中风事件中很少有大脑血栓栓塞伴两侧颈总动脉阻塞。
这种栓塞性脑梗死模型成功率高,手术创伤较小,但也存在不能控制再通、对侧亦可能受累以及可能导致外源物质引起的炎症反应等缺点。
凝块状血栓栓子技术,用大脑中动脉中血小板自然形成的凝块或者中动脉中凝血酶形成的凝块可直接模拟人体中凝块诱导的脑缺血。
但由于栓子的随机性,无法预测栓塞的部位和大小,侧支循环的影响使组织缺血程度不一,不利于神经症状观察和组织定量分析。
4 制备脑缺血动物模型注意事项及观察指标选择术前应对实验者进行培训,通过动物手术测试和动物伦理委员会后方可进行实验手术,包括如何饲养、管理动物;如何操作动物;如何减少动物的数量,如何减少动物的疼痛,如何将动物进行安乐死等。
注意动物饲养室、观察室的标准化。
手术前12h动物禁食,不禁水。
在实验时,麻醉措施的选择和呼吸机的应用亦极为重要;同时应维持生理指标,如体温、系统血压、血糖和血气的正常水平。
由于麻醉剂、pH、血气和血压可影响实验性脑缺血的病理生理过程,因此,选择麻醉剂和观察生理指标时要特别注意。
Zausinger等[18]观察了不同麻醉方法,包括腹腔内注射水合氯醛、自主呼吸下通过面罩给予氟烷和气管插管机械通气下给予氟烷,对维持SD大鼠生理指标和脑缺血后病理结果的影响,发现除气管插管机械通气下给予氟烷麻醉方法外,其它两种麻醉方法均可引起血气水平波动较大、血碳酸过多症、乳酸中毒和低血压;同时,脑缺血后动物死亡率较高,梗死体积明显增大。
Theodorsson等[19]观察到通过气管插管和氟烷混合气体麻醉可明显减少实验大鼠的死亡率。
因此,在利用小动物进行脑缺血研究应通过气管插管机械通气下给予麻醉。
应建立标准化的手术过程,同时手术的时间应尽量相同,即每天的同一时间进行手术。
动物分组应以随机分组为原则;同时建立排除实验动物的标准。