芦荟大黄素诱导胃癌细胞株MGC-803细胞凋亡药效学作用研究

对芦荟主要活性成分的研究班级：2008级A班姓名：吴丽仙学号：084110052摘要：通过查阅文献，探究芦荟中芦荟大黄素提取鉴别的方法；总结了芦荟大黄素的药理作用；简述了芦荟中其他有效成分及作用。

关键词：芦荟大黄素；提取鉴别；药理作用1.引言芦荟(Aloe)又称讷会、象胆，原产于地中海、非洲，为被子植(MagoliopHyta)、单子叶植物纲(lil-iopsida) 、天冬门目(Asparagales) 、独尾草(AspHode-laceae) 、芦荟属(Aloe) 的多年生常绿草本植物[1]。

近年来随着对芦荟植物研究的深入，芦荟的应用价值逐渐被人们认识。

人们应用现代科学的手段对芦荟中主要有效成分进行提取分离，对芦荟的药理作用深研究。

本文对芦荟中芦荟大黄素进行提取鉴定，并简述芦荟大黄素的药理作用；总结芦荟中的主要活性成分及作用，为进一步研究芦荟的活性成分提供参考。

2. 芦荟大黄素的提取分离及鉴别芦荟大黄素为芦荟的主要有效成分之一，具有解毒、抗炎、抗胃溃疡、保护肝组织等作用[2]。

可采用氯仿提取，以葡聚糖凝胶分子筛结合层析法精制，选用薄层色谱（TLC）进行鉴别。

2.1芦荟大黄素的提取分离2.1.1提取分离原理芦荟主要的有机活性成分芦荟大黄素为蒽醌类衍生物，在植物体内多通过羟基或羟基结合成镁、钾、钠、钙盐形式存在，为充分提取出蒽醌类衍生物杂质，必须预先加醋酸酸化使之全部游离后再进行提取。

由于蒽醌苷在水中溶解度大大降低，所以在分离滤液过程中常采取趁热过滤的方式。

Sephadex LH-20 适用于脂溶性物质的分离，它是经羟内基化的葡萄糖凝胶，是一种具有三维网状结构的高分子化合物，具有吸附少，分离范围广，流速快的优点。

另外，在通入硫化氢脱铅的过程中，一定要反应充分，否则会有芦荟大黄素与铅形成的络合物残留在沉淀中而丢失。

2.1.2 提取分离过程取中药材芦荟约100 g，纯化水洗涤，粉碎，过2号标准筛，用5％醋酸酸化，至表面皿风干，以除去多余水分。

关于中华芦荟抗肿瘤活性成分的研究 【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。

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 关于中华芦荟抗肿瘤活性成分的研究 作者：李天东，古静燕，罗英，李俊刚 【摘要】目的分离纯化中华芦荟中具有细胞增殖抑制和细胞凋亡诱导活性的活性成分。

方法反复采用硅胶柱色谱、凝胶色谱从芦荟中分离得到4个化合物，根据理化性质及波谱方法鉴定了结构，并以K562肿瘤细胞株采用形态学、流式细胞仪和SRB法分析了化合物的体外抗肿瘤作用。

结果4种化合物分别鉴定为芦荟大黄素①，大黄素甲醚②，大黄酚③和大黄素④。

活性检测结果化合物1有较强的体外抗肿瘤活性[10g/ml时抑制率为(57.13 2.13)% ], 化合物4在10 g /ml时抑制率为(35.17 1.16)%，化合物2、3(均为10 g /ml)的抑制率分别为[(18.14 1.15)%，(21.13 3.11)% ]。

结论化合物1，2，3，4都具有细胞增殖抑制活性，其中1和4活性较强，2，3的活性较弱。

 【关键词】中华芦荟抗肿瘤细胞增殖抑制 Abstract：ObjectiveTo isolate and purify the active antitumor components from Aloe vera var. chinesis Berg.MethodsUsing silica gel column repeatly ,Sephadex LH-20,four components were islotated from Aloe vera var chinesis Berg. By means of physico -chemical properties and spectral analysis, and their structures were determined . The anti-tumor activities of these compounds were evaluated in vitro by SRB and flowed cytometry using human leukemia carcinoma cell K252.ResultsThese components were identified as Aloe - emodin, physcion,chrysophanol, emodin.It showed that 5 g/ml compound 1, 10 g /ml compound 2,3,4 could resisit cancer cell.ConclusionAll four components can inhibit the growth of the cancer cell. Both aloe - emodin and emodin show strong activity , while physcion and chrysophanol show weak activity. Key words：Aloe vera var. chinesis Berg.; Antitumor; Cell prolifation inhibition 芦荟是百合科芦荟属A loe L.多年生长绿肉质多浆植物，原产于非洲，种类约有五百多种，我国常见库拉索芦荟、中华芦荟、木立芦荟和开普芦荟，多用于观赏植物或是美容保健品[1]。

422019.11基础研究芦荟大黄素抗肿瘤机制研究进展张博文1　赵　伟2　郁哲霏1　姜星羽11.天津中医药大学 天津市 3016172.天津中医药大学中西医结合学院 天津市 301617【摘　要】芦荟大黄素（aloe-emodin，AE）作为一种新型抗癌药物，对于人类不同肿瘤细胞的抑制机理不同，具有多种药理学活性，其在阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖等方面具有显著作用。

笔者对有关机制研究做一综述。

【关键词】芦荟大黄素;肿瘤细胞;综述当今世界，传染性疾病获得有效控制，较严重的非传染性疾病成为全球人群的主要死因。

目前，全球超过一半的癌症死亡病例发生在亚洲，中国的癌症发病率和死亡率更是不断上升[1]。

面对这个世界性问题，各国学者纷纷针对癌症的病因、发病机理、分子机制等展开了相关药物的筛选、药理、药效等研究工作。

《本草纲目》记载“芦荟，气味：苦，寒，无毒。

主治：热风烦闷，胸膈间热气，明目镇心，小儿癫痫惊风，疗五疳，杀三虫及痨病疮瘘，解巴豆毒。

”其中，芦荟大黄素(aloe-emodin ，AE)是芦荟的一种提取物。

由于具有抗肿瘤效果显著、靶点众多、抑制途径广泛、副作用小等特点，受到多国尤其是我国医疗科研工作者的青睐。

笔者现将近些年有关芦荟大黄素在肿瘤体外细胞培养实验中的作用机制作一综述。

1 抑制新生成纤维细胞在肿瘤的生长过程中，肿瘤细胞微环境对于肿瘤的生长发育尤为重要[2]。

其中成纤维细胞为微环境中重要的成分。

癌相关成纤维细胞(CAFs)可促进血管生成，促进肿瘤细胞侵袭和转移[3]。

CAFs 的其中来源之一就是由肿瘤组织中的成纤维细胞转化而来[4]。

研究表明AE 对体外培养成纤维细胞的功能有明显调控作用，可通过抑制胶原蛋白的合成，使成纤维细胞G1期受到影响，从而抑制成纤维细胞增殖[5]。

2 诱导细胞凋亡细胞凋亡是细胞的一种基本生物学现象。

它在生物体的进化、内环境的稳定以及多个系统的发育中起着重要的作用。

大黄素对胃癌细胞BGC—823增殖和凋亡影响的研究目的研究大黄素对胃腺癌细胞BGC-823增殖及凋亡的影响。

方法采用细胞培养技术、四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法、流式细胞技术等试验方法，观察大黄素对BGC-823细胞生长和凋亡的影响。

结论BGC-823细胞在大蒜素作用后生长抑制、凋亡等形态学表现，大黄素对胃癌细胞有明显的抑制作用，且抑制作用与大黄素的浓度和作用时间呈正相关。

结论大黄素可显著抑制体外培养的胃癌细胞的生长，并具有诱导凋亡的作用，其抑制作用具有时效和量效关系。

标签：大黄素；胃癌；凋亡；细胞周期在我国，胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，占全部恶性肿瘤的第3位，占消化道肿瘤的首位。

大黄素（Emodin，EM）是从大黄中提取的一种天然蒽醌类衍生物，是大黄、虎杖、何首乌、虎杖等多种中药的有效活性成分。

其具有多种生物学功能，如抗菌、抗炎、抗肿瘤、免疫抑制、降血脂、保肝利胆等。

本研究探讨大黄素对人胃癌细胞BGC-823细胞体外增殖和凋亡的影响，初步探讨大黄素用于胃癌治疗的可行性。

1 资料与方法1.1一般资料1.1.1细胞系人胃癌细胞BGC-823购自中国科学院上海细胞生物研究所。

1.1.2主要试剂及仪器胎牛血清购自杭州四季青公司，RPMI 1640购自Gibco 公司；大黄素（西安天丰生物科技有限公司），噻唑蓝（MTT）、二甲基亚砜（DMSO）、谷氨酰胺均为美国Sigma公司产品；AnnexinⅤ-FITC/PI细胞凋亡试剂盒购自Molecular Biology&Chemical公司。

酶联免疫检测仪（Bio-Rad公司），流式细胞仪（Beckman Coulter，美国贝克曼公司），离心机（Eppendorf公司），倒置显微镜（Olympus公司），CO2培养箱（日本三洋公司）。

1.2方法1.2.1细胞培养人胃癌细胞株BGC-823培养于含10%的胎牛血清、100U/mL 青霉素和100U/mL链霉素的RPMI1640培养液中，培养条件为37℃、5%CO2/95%空气，相对湿度为98%的环境，单层生长，取对数生长期细胞用于实验。

1 引言芦荟大黄素（AE）是蓼科植物掌叶大黄的根和块茎中含有的一种活性成分,也是芦荟中含有的重要的药理成分羟基蒽醌衍生物中的一种[1]。

其作为中药中的一种重要的活性成分，已经发现了很多的药理作用，对诱导癌细胞凋亡，与DNA作用、对免疫细胞的增殖都有一定的作用。

人们对它的研究已经从分离提取等方法的研究逐步上升到在医学领域的应用作用。

本文就近些年有关芦荟大黄素的提取方法、测定方法以及其应用进行了简单综述。

2芦荟大黄素的性质芦荟大黄素的分子式C15H10O5，分子量270.2 ，结构式如图1，其为橙色针状结晶(甲苯中), 或土黄色结晶粉末。

熔点223～224°，易升华。

可溶于乙醛、苯、热乙醇、稀氨水、碳酸钠和氢氧化钠水溶液。

在乙醚及苯中呈黄色, 氨水及硫酸中呈绯红色。

在酸性溶液中被还原则生成蒽酚及其互变异构体的蒽酮。

图1 芦荟大黄素的化学结构式Fig1 Chemical structure of aloeemodin3 芦荟大黄素的提取方法3.1一般萃取陈伟[2]等以无水乙醇为萃取剂，从芦荟叶片和渗出汁液中提取芦荟大黄素。

把熟库拉索芦荟叶片切割成10片，清洗干净后，收集渗出来的汁液，水浴加热蒸干，得到黄色的芦荟大黄素的粗产品，把产品放置在烧杯中，每次用5ml的无水乙醇提取4次，过滤，即可得到芦荟大黄素。

3.2超临界CO2流体萃取卢智[3]等采用最常用的等温降压技术，在此过程中，芦荟萃取物和夹带剂随CO2流出萃取釜，然后流入低压的分离釜。

压力降到二氧化碳临界压力以下时，会极大地降低芦荟大黄素在CO2的溶解度，最后芦荟大黄素和夹带剂会被留在分离釜中，进而达到分离提取的目的。

3.3 微波辅助萃取马稳等[4]利用微波辅助正交实验法研究芦荟中芦荟大黄素的最佳提取工艺，考察微波辐射功率、乙醇浓度、料液比及辐射时间等单因素对提取率的影响，进行正交实验。

结果表明微波辅助萃取使得芦荟大黄素的提取率为1.25%，与传统醇提法相比，该法省时、提取率高。

《芦荟大黄素衍生物的合成及其抗肿瘤活性的研究》一、引言近年来，肿瘤治疗的研究已经取得了显著的进展，但仍然需要寻找新的治疗方法以提高疗效和降低副作用。

芦荟大黄素（Aloe-emodin）作为一种天然化合物，因其具有抗肿瘤、抗炎等生物活性而备受关注。

本研究旨在合成芦荟大黄素衍生物，并研究其抗肿瘤活性，以期为肿瘤治疗提供新的选择。

二、芦荟大黄素衍生物的合成1. 材料与方法（1）原料与试剂实验所需的芦荟大黄素、有机溶剂、催化剂等均为市售产品，纯度符合实验要求。

（2）合成步骤以芦荟大黄素为原料，通过酯化、酰胺化等反应，合成一系列芦荟大黄素衍生物。

具体步骤如下：首先，将芦荟大黄素与酸酐进行酯化反应，生成酯类化合物；然后，将酯类化合物与胺类化合物进行酰胺化反应，生成目标化合物。

2. 结果与讨论通过优化反应条件，成功合成了一系列芦荟大黄素衍生物。

利用红外光谱、核磁共振等手段对化合物进行结构表征，确认了其结构。

同时，通过单晶X射线衍射等技术手段，进一步了解了化合物的晶体结构。

三、抗肿瘤活性研究1. 材料与方法（1）细胞株与试剂选用人胃癌细胞株、人肝癌细胞株等作为实验细胞。

MTT法、流式细胞术等实验方法。

（2）实验方法采用MTT法检测芦荟大黄素衍生物对肿瘤细胞的增殖抑制作用；利用流式细胞术研究化合物对肿瘤细胞周期、凋亡等生物学行为的影响。

2. 结果与讨论实验结果显示，合成的一系列芦荟大黄素衍生物对肿瘤细胞具有显著的增殖抑制作用。

其中，某些衍生物的抑制作用明显强于芦荟大黄素本身。

流式细胞术结果显示，这些衍生物能够诱导肿瘤细胞发生周期阻滞、凋亡等生物学行为的变化。

进一步的研究表明，这些衍生物的作用机制可能与调控肿瘤细胞内相关信号通路有关。

四、结论本研究成功合成了一系列芦荟大黄素衍生物，并研究了其抗肿瘤活性。

实验结果表明，这些衍生物对肿瘤细胞具有显著的增殖抑制作用，并能够诱导肿瘤细胞发生周期阻滞、凋亡等生物学行为的变化。

大黄素芦荟大黄素大黄酸诱导肿瘤细胞凋亡的信号转导通路刘贵忠;杨文修;王新宇;陈立君
【期刊名称】《哈尔滨师范大学自然科学学报》
【年(卷),期】2004(020)004
【摘要】以大黄素、芦荟大黄素、大黄酸的药理作用为基础,综合分析了它们诱导多种肿瘤细胞凋亡的信号转导通路.并且对有关问题给予说明.结论是:大黄素、芦荟大黄素、大黄酸可诱导多种肿瘤细胞的凋亡响应,但仍有许多细节有待于进一步探讨.
【总页数】4页(P95-98)
【作者】刘贵忠;杨文修;王新宇;陈立君
【作者单位】德州学院;德州学院;南开大学;南开大学
【正文语种】中文
【相关文献】
1.芦荟大黄素诱导肿瘤细胞凋亡的研究进展 [J], 史朋;段开文
2.HPLC法同时测定肿痛外擦酊中大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量 [J], 李子君;牟晓崟
3.高效液相色谱法测定新保肾片中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量 [J], 乔立业;方李;曹燕丽;陆崟;苏华;王曙东
4.芦荟大黄素在体外诱导人舌癌及肺癌肿瘤细胞凋亡的初步研究 [J], 史朋;段开文rn;欧炯光
5.HPLC法同时测定蒙药给喜古讷-6中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量 [J], 文花; 刘燕; 董武; 白玉霞
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芦荟大黄素抑制胃癌细胞生长与细胞周期阻滞的关系肖丙秀;郭俊明;刘东海;张顺;刘琼【期刊名称】《中草药》【年(卷),期】2008(39)5【摘要】目的探讨芦荟大黄素抑制胃癌细胞生长与细胞周期阻滞的关系。

方法人胃癌SGC-7901细胞用2．5、5、10、20、40μmol／L芦荟大黄素处理1～5d。

分别用MTT方法和流式细胞术检测细胞增殖情况和细胞周期的变化，然后用Western blotting方法检测细胞周期相关调控蛋白周期蛋白（cyclin）和周期蛋白依赖性激酶（cyclindependent kinase，CDK）的变化。

结果芦荟大黄素以剂量依赖方法抑制胃癌细胞的生长；芦荟大黄素引起细胞阻滞在G2／M期；其分子机制为引起cyclin A和CDK2的表达水平下降、cyclin B1和CDK1的表达水平上升。

结论芦荟大黄素抑制胃癌细胞生长的机制之一是阻滞细胞周期，说明芦荟大黄素在胃癌治疗方面有潜在的临床价值。

【总页数】4页(P729-732)【关键词】芦荟大黄素;胃癌细胞SGC-7901;细胞周期【作者】肖丙秀;郭俊明;刘东海;张顺;刘琼【作者单位】宁波大学医学院【正文语种】中文【中图分类】R286.91【相关文献】1.新型转录抑制因子ZHX1通过诱导细胞周期阻滞和凋亡抑制胃癌细胞生长 [J],2.异丹叶大黄素下调膀胱癌细胞的细胞周期蛋白D1表达并诱导G0/G1细胞周期阻滞 [J], 方勇;侯琦;卢瑜3.芦荟大黄素抑制人胃癌细胞株SGC-7901增殖研究 [J], 张承玉;富泽龙;郑学芝;刘晓霓4.芦荟大黄素对人胃癌细胞株SGC-7901的增殖抑制作用 [J], 富泽龙;刘晓霓;张承玉;金秀东;郑学芝5.芦荟大黄素抑制人胃癌BGC-823细胞增殖及对Wnt通路的影响 [J], 王毅;饶尚锐;孙伟;王中林;黄节;潘忠良因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

姜黄素诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡的机制丁峰杨夙1王巍孙宏治白光（辽宁医学院附属第一医院普外科，辽宁锦州121001）〔摘要〕目的通过体外实验探讨姜黄素诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡的作用机制。

方法取人胃癌细胞系MGC-803培养至对数生长期，按姜黄素作用的不同浓度分组：3.12、6.25、12.5、25.0、50.0μmol /L ，作用的不同时间分组：24、48、72h ，采用四甲基耦氮唑蓝（MTT ）计算细胞抑制率；应用吖啶橙荧光染色观察细胞的形态学改变；流式细胞仪检测细胞周期的变化；使用琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA 片段化作用。

结果（1）利用MTT 比色分析法，发现MGC-803细胞分别用含不同浓度姜黄素溶液培养24、48、72h 后，细胞增殖受到明显的抑制，且与浓度和时间呈正相关；（2）通过吖啶橙染色发现，在姜黄素作用下，部分细胞明显变圆，体积缩小，荧光增强，核染色质固缩，呈新月形、肾形在核膜周边聚集；（3）流式细胞仪分析结果显示，姜黄素主要使细胞周期阻滞于S 期，G 1期细胞数减少，G 2/M 期细胞数变化不明显；（4）DNA 琼脂糖凝胶电泳显示，12.5、25.0、50.0μmol /L 浓度处理组作用48h 后出现典型的DNA 断裂的梯子样外观。

结论姜黄素能明显抑制人胃癌细胞MGC-803的增殖并诱导凋亡，其作用机制可能与细胞的S 期阻滞有关。

〔关键词〕姜黄素；胃癌；凋亡；〔中图分类号〕R735.2〔文献标识码〕A〔文章编号〕1005-9202（2012）12-2549-04；doi ：10.3969/j.issn.1005-9202.2012.12.048基金项目：辽宁省科技厅科学计划项目（No.2010225034）1辽宁医学院附属第三医院消化内科通讯作者：白光（1960-），男，主任医师，教授，主要从事肝胆疾病基础与临床研究。

第一作者：丁峰（1981-），男，硕士，医师，主要从事肝胆疾病基础与临床研究。