斑马鱼的发育历程19页PPT

模式生物-斑马鱼PPT课件

213112036 赵秋萍
1
斑马鱼简历
中文学名：斑马鱼
中文别名：蓝条鱼、花条鱼、蓝斑马鱼、印度鱼、印度斑马鱼
英文名：Zebrafish
界：动物界
Animalia
门：脊索动物门 Chordata
纲：辐鳍鱼纲 Actinopterygii
目：鲤形目 Cypriniformes
科：鲤科
Cyprinidae
揭开谜底，保护人类的毛细胞免受损伤、并推动毛细胞的再生。
9
二、斑马鱼在医学中的应用
3、水质的监测斑马鱼的基因与人类基因相似度达到87％，这意味着在它身上得出的
水质监测结果，多数情况下都适用于人类。香港水务署研发生物感应预警系统，利用斑马鱼配合计算机和互联网作24小时监测和预警，并透过发光菌进行快速毒性检测，60分钟内可甄别逾1000种水中有害物质，每次成本亦只需50元港币。署方估计每年可节省200万元港币的开支。
2、突变鉴别斑马鱼产出单倍体后代的可能性较大，在这样的个体中，许多隐性基因
决定的胚胎表现型都可以暴露出来。也可以快速育成二倍体斑马鱼的同基因品系。因而一些隐性突变仅需一代或两三代就可得到鉴定，由于斑马鱼繁殖一代仅需三个月左右，从而保证隐性突变的快速鉴别，大大节约了时间。利用斑马鱼的这种遗传特点很快就鉴定出许多重要的突变
属：短担尼鱼属
Danio
种：斑马鱼
Danio rerio
分布：分布于孟加拉、印度、巴基斯坦、缅甸、尼泊尔的溪流。
2
特征：斑马鱼起源于印度，为小型热带淡水硬骨鱼，因其体
侧具有5条延伸至尾部的水平蓝色条纹而得名。大多成鱼体长约为3~4厘米，寿命约为2~3年。
成熟的雌鱼每隔一周可产几百粒卵子。卵子体外受精，体外发育，胚胎发育同步，且速度快，在25~31℃之间发育正确，约3个月可达性成熟。

斑马鱼的发育历程

精品课件
囊胚期胚胎正面观。A：256-细胞期（2.5h）；B：高囊胚期（3.3h）；C：高囊胚期和椭形期之间的转变（3.5h）；D：椭形期和球形期之间的转变（3.8h）；E：穹顶期（4.3h）；F：30%-外包期（4.7h）。比例尺=250μm
精品课件
原肠期 (5.25-10h)
外包运动的继续，以及形态发生细胞的内卷（ involution ）、集合（ convergence）和延伸（extension）运动的发生，产生了原始胚层和胚轴。
极外包期腹侧观，观胚盾期，箭头指：示
胚盾外；
E
6h
D
；原：动物极观肠期发育。胚：环期
外：胚盾包期（期（
））；，胚盾标志背：胚环期（侧，）
C
F 70%8h
5.25h B
A 50%-
体节期（10-24h）
此期发生了一些有趣的形态学变化：体节发生、器官原基可见、尾芽更为显著、胚体延长（图15）、AP和DV轴变得明确、第一次出现细胞发生形态分化以及胚体开始运动。此期可称“尾芽期”，因为在此整个时期，尾芽一直存在于不断伸长的胚轴末端。
此期用“实囊胚”（ “stereoblastula”）称之可能更准确，因为
这一术语意味着胚胎还没有形成囊胚腔（blastocoele），而事实正是如此（图8），仅在胚盘深层细胞之间存在不规则的间隙。卵裂取向不确定，比卵裂期亦更不规则。此后卵裂产生的子细胞从整齐的细胞面伸出，不论从侧面还是从顶面观都是如此，因而确定此期分期用细胞大小判断比用细胞位置判断更为有效。从动物极观，胚盘呈轻度椭球形（尤在早期）。
侧；：
外包期（），在一些胚胎中可见尾芽（箭头所

斑马鱼血管发育ppt课件

B、受精6.5天后，血管造影
C、受精7.5天后，血管造影
（所有面板是面向. 与延髓左侧）
30
受精6~6.5天后：
斑马鱼头部和颅主干约受精6.5天的多层复合图
图纸准备详细五个重建血管的模式。这些图纸不完整的。对
于清晰度，只有主要的动脉和静脉血管和相当部分的连接到他们
的小口径血管在每个图所示。一些比较重大的血管都被省略了一
分支
.
19
2.5~3dpf
• 除头4组Se，其余的不在SeA和SeV间交替 • DLAV在尾端形成网状，并向喙端移动 • DLAVs与头部PHBC,BA相连 • CA→一条新血管→分支→尾端形成循环 • D-V(DA,PCV)开始分离 • CV丛向腹侧浓缩
.
20
• 左PCV→SeV
• AMA →SBA,SIA • SIV，肝血窦，肝门静脉 • PA,PV形成一条线,PA离开DA，
斑马鱼
.
1
• 斑马鱼，人类疾病研究的理想模式动物 • The Vascular Anatomy of the Developing Zebrafish
• 旋转培养
.
2
斑马鱼作模式生物的特点：
1、斑马鱼的基因与人类基因高度的相似性 2、发育周期短，体型小，发育条件易控制 3、繁殖能力强，易于饲养，胚胎透明，易于观察 4、有数以千计的胚胎突变体，是研究胚胎发育分子机制的优良资源
.
9
1~1.2dpf
第一次发育：VA →AA1 →LDA →DA →CA →CV →PVA →CCV/DC
.
10
第二次发育：动脉：LDA←VA →AA1 →PICA
→CaDI
→CrDI →PMBC →PHBC

斑马鱼的软骨发育及其矿化过程

清华大学毕业设计论文摘要斑马鱼，作为发育生物学研究的最佳脊椎动物模型，为人类的相关研究提供了重要的参考依据。

本文主要讨论了斑马鱼幼体的软骨，特别是脊椎软骨的发育过程及其软骨的超微结构特点。

为转基因、基因突变鱼类的研究提供了对比依据。

本文主要讨论了斑马鱼脊椎软骨的发育进程，以及软骨细胞特别是脊索旁软骨的排列，形貌，大小及其显微结构特点和中胚层分化的显微形貌。

斑马鱼脊椎软骨在配卵后2～3天开始发育，围绕在脊索周围，并逐渐向神经管和血管方向延伸。

斑马鱼脊椎软骨沿体节发育，腹部以前的体节在6天已基本分化为软骨细胞，并且随着时间的推移，沿体节向尾部方向的生骨节逐步分化为软骨细胞，在1个半月左右的时间，软骨组织的分化基本完成。

斑马鱼的软骨组织排列整齐，大多数细胞大小在5－20μm范围内。

斑马鱼的软骨组织为透明软骨，胶原纤维为II型胶原，没有典型的周期结构，含量很少。

在TEM的观察中发现，斑马鱼的肌肉组织分化较早，在3天已基本分化完成。

而体干部的脊索旁仍为中胚层的间叶细胞，为软骨细胞的原基，在分化成软骨细胞的过程中，首先是在形状和排列上趋于整齐和规则。

斑马鱼的骨化方式为软骨骨化。

软骨细胞的细胞质中富含大量的线粒体和内质网。

在细胞质中还有大量直径为100-400nm的囊泡，紧密排列在一起，起传输物质的作用。

此外，脊髓处的细胞，其细胞核较大，细胞质很少，有别于软骨细胞。

并且该处细胞有部分已死亡，被其它细胞所代替。

关键词：软骨细胞，发育，显微结构- 1 -清华大学毕业设计论文AbstractZebrafish provides an important referenced foundation for the relative research as the best pattern of vertebrate in developing biology. In this paper the process of development and the ultrastructure of the cartilage especially the parachordal cartilage in zebrafish larva are investigated . And that supply the contradistinctive basis for the research about transgenic and gene mutation fishes.Here we investigate the developing process of parachordal cartilage and chondrocyte arrangements,shapes ,size,and ultrastrcture .In zebrafish parachordal cartilage begin to form at 2-3 days postfertilization ,and surround the notochord and extend gradually to spinal cord and dorsal aorta. Parachordal cartilage develop along somite and at 6 days postfertilization the somite before venter have differentiated and all accomplish differentation on the whole about at one and a half month postfertilization .The chontrocytes arrange regular .The size of chontrocytes is between 5-20μm mostly. In zebrafish the cartilage is hyaline cartilage and the collagen fibrils is predominantly II type fibrils. And that are relatively thin and do not display the characteristic 67nm banding.We discovered that the differentiation of musculature is more earlier than cartilage by TEM and that accomplished basically at 3 days postfertilization. During the differentiation of cartilage the shape and arrangement of mesenchymal cell in mesoblast go to orderliness and regular gradually at first. With the electron microscope ,the active cartilage cell is seen to contain numerous slick endoplasmic reticulum,mitochondria and vesicles which arrange together in order and the diameter of these vesicles is about 100-400nm, transmitting the substance. Furthermore, the nucleolus of spinal cord cells is more larger and we also can observe that some cells have dead.Keywords : cartilage ,development, ultrastrcture- 2 -清华大学毕业设计论文第一章. 前言由于软骨细胞所致的成骨活动发生较早，所以对斑马鱼软骨发育的研究在骨损伤修复过程中对骨力学功能恢复有较大意义。

关于斑马鱼的发育历程课件

关于斑马鱼的发育历程
合子期卵裂期囊胚期原肠期早幼期孵化期咽囊期体节期
合子期（0-0.75h）
新受精的卵子直至其第一次卵裂发生，称合子期（图3），约受精后 40分钟。受精时形成的合子直径约0.7mm。合子期只含有一个分期，但其间也发生很多变化，可以很容易划分这一时期（见 Hisaoka and Battle,1958）。
=250μm
束时卵黄消失处。比例尺
头示尾芽，尾芽腹侧（即此图左侧）的显著区域显示外包结
9h 10h
J 90%K 90%L
C
F 70%75%-
8.4h
G
）增大为小膨出（箭头所示）；；：：尾芽期（外包期腹
侧）观，，箭前头侧示脊小索膨前出板，（短对箭比
层期在（其一侧）；背：侧观
，外包期（箭头示轴中），在一些胚胎中可见尾芽胚层与中线边界，近轴中胚
5.7h
H I 80%-
8h
；外：包期（外包），期（箭头示腹），侧：薄的排外泄包区ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ ；腹：侧观
内卷运动的开始意味着原肠期的开始，目前可以说是发生于50%-外包时（图 11A）。结果在达到50%-外包后的数分钟内出现了一个增厚的外围区域，称作胚环（germ ring），几乎与此同时完全包围了囊胚边缘（图11B，及C箭头所指）。随后集合运动几乎同样快速地沿胚环产生一个局部的堆积，称胚盾（ embryonic shield , 图11D，及E箭头所指）。在发生这些事件期间，外包暂时中止，但胚盾形成后外包又继续。胚层边缘沿卵黄细胞延伸直至将其完全包绕（图11F-L）。其延伸近乎恒定速度进行，约每小时包绕卵黄细胞的15% ，这也提供了大部分原肠期分期的有用指标（图12）。

斑马鱼的发育历程ppt课件

内卷运动的开始意味着原肠期的开始，目前可以说是发生于50%-外包时（图 11A）。结果在达到50%-外包后的数分钟内出现了一个增厚的外围区域，称作胚环（germ ring），几乎与此同时完全包围了囊胚边缘（图11B，及C箭头所指）。随后集合运动几乎同样快速地沿胚环产生一个局部的堆积，称胚盾（ embryonic shield , 图11D，及E箭头所指）。在发生这些事件期间，外包暂时中止，但胚盾形成后外包又继续。胚层边缘沿卵黄细胞延伸直至将其完全包绕（图11F-L）。其延伸近乎恒定速度进行，约每小时包绕卵黄细胞的15% ，这也提供了大部分原肠期分期的有用指标（图12）。
1.25 h）；D：16-细胞期(1.5 h)；E：32-细胞期（1.75 h）；F：64-细胞期（
2 h）。比例尺=250μm
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囊胚期（2.25-5.25h）
囊胚期指从128-细胞期或第8次止这一段时期。此期
有很多重要事件发生：胚胎进入囊胚中期转变（ midblastula transition, MBT）、卵黄合胞体层（the yolk syncytial layer, YSL）形成、外包（epiboly）开始。外包将一直持续到原肠期。
）
C
F 70%8h
5.25h B
A 50%-
体节期（10-24h）
此期发生了一些有趣的形态学变化：体节发生、器官原基可见、尾芽更为显著、胚体延长（图15）、AP和DV轴变得明确、第一次出现细胞发生形态分化以及胚体开始运动。此期可称“尾芽期”，因为在此整个时期，尾芽一直存在于不断伸长的胚轴末端。
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囊胚期胚胎正面观。A：256-细胞期（2.5h）；B：高囊胚期（3.3h）；C：高

斑马鱼的发育历程参考幻灯片

正因为囊胚期没有囊胚腔，原肠期既没有消化道（archenteron），也没有胚孔（blastopore）。DEL细胞在胚层边缘进行内卷，因而发挥了胚孔的作用。内卷通过将胚层向后折叠形成胚环。因此，胚环内由两个胚层：位于上方的称上胚层（epiblast），在整个原肠期继续给位于下方的下胚层（hypoblast ）提供细胞。注意到上、下胚层这些术语可同样描述鸟类胚层结构，但所命名的胚层在这两种脊椎动物中似乎完全不同。
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囊胚期胚胎正面观。A：256-细胞期（2.5h）；B：高囊胚期（3.3h）；C：高囊胚期和椭形期之间的转变（3.5h）；D：椭形期和球形期之间的转变（3.8h ）；E：穹顶期（4.3h）；F：30%-外包期（4.7h）。比例尺=250μm
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原肠期 (5.25-10h)
外包运动的继续，以及形态发生细胞的内卷（ involution ）、集合（ convergence）和延伸（extension）运动的发生，产生了原始胚层和胚轴。
此期用“实囊胚”（ “stereoblastula”）称之可能更准确，因为这一
术语意味着胚胎还没有形成囊胚腔（blastocoele），而事实正是如此（图8），仅在胚盘深层细胞之间存在不规则的间隙。卵裂取向不确定，比卵裂期亦更不规则。此后卵裂产生的子细胞从整齐的细胞面伸出，不论从侧面还是从顶面观都是如此，因而确定此期分期用细胞大小判断比用细胞位置判断更为有效。从动物极观，胚盘呈轻度椭球形（尤在早期）。
C
F 70%8h
包期（），箭头示腹侧薄的排泄区；：
外包期（
：
外包期（
），：
外包期腹侧观，：

模式生物斑马鱼PPT课件

2、斑马鱼的受精及发育都在母体外进行，胚胎发育时间短，易进行观察和操作。
小鼠属于胎盘动物，胚胎操作时不能离开母体；实验分析时就需要大量推论。在小鼠胚胎发育期间对其进行物理性操作难度较大，要观察胚胎必须将母体处死，胚胎也随之死亡。小鼠的胚胎从受精到出生需要20d，早期胚胎间的发育往往是不同步的。
斑马鱼的发育分为6个阶段：卵裂期，囊胚期，原肠胚期、分裂期、成形期和孵化期。
第2页/共12页ຫໍສະໝຸດ 能够作为模式生物的主要原因：
1、价格便宜，容易获得。成年斑马鱼的体长仅4cm左右，而且能承受高密度饲养—每升水
中最多可容纳5尾，意味着容易饲养大量群体，管理饲养易行。相比之下，小鼠需要的空间要大，而且花费相对要高。
第5页/共12页
一、斑马鱼在发育生物学中的应用
3、饱合诱变分析用化学诱变剂处理成熟的雄性个体，然后用诱变了的精子与卵子受
精，产生的个体通过三代繁育来筛选发育异常的胚胎。因为发育过程是由一系列的分子事件控制，要想解析完整的发育过程，必须要筛选到影响一系列事件的全部基因或几乎全部基因，这就需要大量的动物个体进行筛选。胚胎在子宫中发育，胚胎期受到影响的突变体无法呈现，因而限制了其研究范围。斑马鱼卵子体外受精和胚胎体外发育的特征则解决了这一难题。
是左鼻子。日本名古屋市立大学研究人员报告说，随着斑马鱼发育，大脑中负责嗅觉的基因只在左脑中强烈发挥作用，因此左鼻就成了主要发挥作用的鼻子。研究人员堵住斑马鱼的左鼻后，它就不再朝着散发它喜欢气味的方向游动，从而证明是左鼻负责分辨气味。对斑马鱼的深入研究，未来有利于人们弄清人脑中产生左右差异的机制。
可以揭开谜底，保护人类的毛细胞免受损伤、并推动毛细胞的再生。
第8页/共12页

斑马鱼的发育历程

原肠期发育。A：50%-外包期（5.25h）；B：胚环期（5.7h ）；C：动物极观胚环期 D：胚盾期（6h），胚盾标志背侧，是胚环左侧增厚区域；E：动物极观胚盾期，箭头指示胚盾；F：70%-外包期（7.7h），G：70%-外包期腹侧观，H： 75%-外包期（8h），箭头示腹侧薄的排泄区；I：80%-外包期（8.4h）背侧观，箭头示轴中胚层与中线边界，近轴中胚层在其一侧；J：90%-外包期（9h），在一些胚胎中可见尾芽（箭头所示）；K：90%-外包期腹侧观，前侧脊索前板（对比G）增大为小膨出；L：尾芽期（10h），箭头示小膨出，短箭头示尾芽，尾芽腹侧（即此图左侧）的显著区域显示外包结束时卵黄消失处。比例尺=250μm
此期用“实囊胚”（ “stereoblastula”）称之可能更准确，因为这
一术语意味着胚胎还没有形成囊胚腔（blastocoele），而事实正是如此（图8），仅在胚盘深层细胞之间存在不规则的间隙。卵裂取向不确定，比卵裂期亦更不规则。此后卵裂产生的子细胞从整齐的细胞面伸出，不论从侧面还是从顶面观都是如此，因而确定此期分期用细胞大小判断比用细胞位置判断更为有效。从动物极观，胚盘呈轻度椭球形（尤在早期）。
此期的命名注意到了咽弓原基，其早期存在但不易分辨出。咽弓在此第二天从耳囊腹侧可见约耳囊两倍长的原基区域迅速发育。七个咽弓均由此原基发育，其间一个显著的边界（图31箭头）出现于咽弓2和3之间。此边界甚为重要，因为随后其前面的咽弓（颚（mandibular）、舌（hyoid）弓）将形成下颌（jaws）和腮盖（operculum），而其后面的咽弓（腮（branchial）弓）将形成腮（gills ）。
内卷运动的开始意味着原肠期的开始，目前可以说是发生于50%-外包时（图 11A）。结果在达到50%-外包后的数分钟内出现了一个增厚的外围区域，称作胚环（germ ring），几乎与此同时完全包围了囊胚边缘（图11B，及C箭头所指）。随后集合运动几乎同样快速地沿胚环产生一个局部的堆积，称胚盾（ embryonic shield , 图11D，及E箭头所指）。在发生这些事件期间，外包暂时中止，但胚盾形成后外包又继续。胚层边缘沿卵黄细胞延伸直至将其完全包绕（图11F-L）。其延伸近乎恒定速度进行，约每小时包绕卵黄细胞的15% ，这也提供了大部分原肠期分期的有用指标（图12）。

斑马鱼学习小结PPT课件

静态法试验期间不更换试验药液。
半静态法
试验期间每隔一定时间更换一次药液，以保持试验药液的浓度不低于初始浓度的80%。
流水式试验期间药液连续更新。
第16页/共19页
试验步骤
➢ 斑马鱼急性毒性试验的实验设计 ➢ 斑马鱼急性毒性试验结果的记录 ➢ 急性毒性试验结果的分析 ➢ 农药生态安全性评估
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体色：银或金色，覆有蓝或紫色的横纹，背部呈浅橄榄黄色。食性：杂食性，可摄食人工饲料和各种天然活饵料如水蚤。
第3页/共19页
斑马鱼的发展历程
斑马鱼是重要的模式生物。广泛应用于生命科学、毒理学、环境和农业科学等领域。 1972年，美国俄勒冈大学George Streisinger首先利用斑马鱼研究了脊椎动物发育生物学和建立模式动物。
第17页/共19页
Thanks Any Question？
谢谢观看
第18页/共19页
感谢您的观看。
第19页/共19页
斑马鱼的挑选：
鱼龄6-12月，体长>3cm，健康、活力强，性腺发育IV期以上；
斑马鱼繁殖用水要求：
pH6.5-7.5，硬度6-8，水温25-26℃。
配对：
按雌雄比例1:1或1:2鱼置于交配缸内，保持环境安静；使其自然产卵和受精。放养密度为1对/1.5L。
受精卵收集：
一般头天晚上放入，第二天上午可收集受精卵，种鱼捞出另养。斑马鱼的繁殖周期约7天，一年可连续繁殖6-7次。
➢斑马鱼简介。 ➢斑马鱼品系及鉴定。 ➢斑马鱼的养殖。 ➢斑马鱼的繁殖。 ➢斑马鱼在生态毒理学中的应用。
第1页/共19页
➢斑马鱼简介。 ➢斑马鱼品系及鉴定。 ➢斑马鱼的养殖。 ➢斑马鱼的繁殖。 ➢斑马鱼在生态毒理学中的应用。

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