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葛根中总黄酮的测定以及葛根片剂的压制一，葛根简介葛根是常用的传统中药，异黄酮类化合物，淀粉和膳食纤维是葛根中所含的三种主要成分。
根据国内现代医学研究表明：异黄酮类化合物在增强免疫力、预防心血管疾病、降低血糖等方面有显著效果，对冠心病、心绞痛、突发性耳聋、中老年骨质疏松症和妇女更年期综合征等也有特殊功效。
国内外学者从葛根中分离鉴定出许多化学成分，主要包括异黄酮类、三帖类及芳香类化合物。
二，葛根黄酮及其苷类化合物葛根的药用成分研究较多的是野葛，食用成分研究较多的是粉葛。
葛根中主要有效成分是异黄酮类化合物以及少量的黄酮类物质，包括：：大豆苷元(daidzein) 、大豆苷(daidzin) 、葛根素(puerarin) 、金雀花异黄素(genistein) 、鹰嘴豆芽素A (biochanin A) 、染料木素苷( genistin) 、芒柄黄花素( formononetin) 、芒柄花苷(ononin) 、3′- 羟基葛根素(PG1) 、葛根素木糖苷(PG2 ) 、3′- 甲氧基葛根素(PG3) 、大豆黄素4′,7-双葡萄糖甙、葛根素芹菜糖苷(mirificin) 、异甘草素( isoliquiritigeni n)、3′- Methoxydaidzin等30余种异黄酮。
在葛根的有效成分中,最受关注的是葛根素、大豆苷元等。
葛根素能扩张冠状动脉血管,降低血脂,增强心肌收缩力,降低血压,防治高血压头晕、头痛、颈项疼痛。
大豆素具有抗乙酰胆碱作用,被认为是葛根主要功效之一解痉作用的有效成分。
大豆素、大豆苷、葛根素都能抑制人体对酒精的吸收,而前两者效果更加显著。
大豆素、大豆苷、葛根素、金雀花异黄素、鹰嘴豆芽素A 具有抗氧化、抗癌及抗炎作用。
体外试验表明它们的糖配基抗氧化活性比糖甙强,同时鹰嘴豆芽素A 显示了非常强的抗癌活性。
葛根总异黄酮含量随产地和品种而变化,野葛中总黄酮含量一般为7. 6 % 。
三，葛根中总黄酮的提取与含量测定总黄酮是指黄酮类化合物，是一大类天然产物，广泛存在于植物界，是许多中草药的有效成分。
浅析葛根异黄酮类化合物提取工艺研究新进展摘要：葛根为豆科植物野葛（Pueraria lobata）的干燥根，主要生长在山坡草丛中，全国大部分地区有产，资源丰富。
异黄酮类化合物是葛根的主要药效成分，其药理活性广泛，尤其在心血管疾病治疗方面效果显著。
本文综述了近5年来葛根异黄酮类化合物的提取工艺，并比较各种方法的优劣和发展趋势，为葛根异黄酮类化合物的提取工艺深入研究提供参考。
关键词：葛根；异黄酮；提取工艺；研究进展The Pueraria legumes kudzu（Pueraria lobata）is the dried root，mainly grown in the grass slope in most parts of the country have produced abundant resources. Isoflavones are the main pharmacological components of Pueraria lobata. They haveextensive pharmacological activities，especially in the treatment of cardiovasculardiseases. In this paper，the extraction technology of isoflavones from Pueraria lobatain recent 5 years is reviewed，and the advantages and disadvantages of various methods are compared，so as to provide references for further research on the extraction process of isoflavones from Pueraria lobata.Keywords Pueraria lobata；isoflavone；extraction process；research progress 葛根的主要有效成分为葛根素、大豆苷和大豆苷元等异黄酮类化合物，具有改善血管循环，降低血管阻力，增加冠状动脉血流量，以及降血压、降血糖等药理作用，主要用于心血管疾病的治疗[1]。
不同来源的粉葛中总黄酮和葛根素的含量测定【摘要】目的考察不同来源粉葛中总黄酮、葛根素的含量。
方法采用紫外分光光度法（UV）测定总黄酮含量；采用高效液相色谱法（HPLC）测定葛根素含量，kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 nm，5μm)，流动相为甲醇－水（33：67），流速为1.0 ml・min-1，柱温30℃，检测波长为250 n m。
结果总黄酮含量为0.53%～1.03%，回收率为99.69%，RSD<2% (n = 6)；葛根素含量为0.21%～0.49%，回收率为96.11%，RSD<2% (n = 6)。
结论不同来源的粉葛药材中总黄酮和葛根素含量间变异较大，其中广东产粉葛，其总黄酮和葛根素含量均较高，平均质量优于广西产粉葛。
【关键词】粉葛总黄酮葛根素高效液相色谱粉葛为豆科植物甘葛藤Pueraria thomsonii Benth的干燥根，自古与野葛同作中药葛根用，具有解肌退热，生津，透疹，升阳止泻之功效［1］，临床应用广泛。
2005年版《中国药典》首次将粉葛作为分列中药材记载。
粉葛中的主要生物活性成分有葛根素等异黄酮类化合物［2］，具有降血压、扩张冠状动脉等多种生物活性，同时粉葛又富含淀粉，因此具有较高的医用和食用价值，现已开发出粉葛淀粉系列多种保健食品。
目前，粉葛的栽培面积不断扩大，并出现了许多栽培品种，因此不同来源药材之间有效生物活性成分的含量会有较显著的差异，从而影响药材质量。
广东、广西为粉葛药材的主要产地，药源丰富，本文采用比色法及高效液相色谱法对广东、广西所产的不同来源的粉葛中总黄酮及葛根素的含量进行了比较，为粉葛药材质量控制提供实验依据。
1 仪器与材料1.1 仪器P680高效液相色谱仪(戴安公司)； satorius BS 110S 精密天平；unic uv-2100紫外分光光度计（尤尼柯上海仪器有限公司）。
1.2 药材粉葛，产地：广东、广西，经广州中医药大学中药鉴定教研室鉴定，均为豆科植物甘葛藤的干燥根。
HPLC测定四川梓潼产葛根和粉葛中四种异黄酮含量的分析1. 引言1.1 研究背景葛根和粉葛是一种常见的中草药材，被广泛用于中医药领域。
其中含有丰富的异黄酮类化合物，具有多种药理活性。
随着现代科学技术的发展，高效液相色谱（HPLC）成为测定草药中活性成分含量的常用方法。
目前关于四川梓潼产葛根和粉葛中异黄酮含量的研究还比较有限。
本研究旨在通过HPLC测定方法，分析四川梓潼产葛根和粉葛中四种异黄酮的含量，并探讨其在不同产地、不同加工方法下的变化规律。
通过对这些信息的研究，可以为合理开发利用葛根和粉葛提供科学依据，丰富其药理研究，促进中药资源的合理开发利用。
也有助于确保药材质量的稳定性和安全性，推动中药材产品的质量监控与管理工作。
【2000字】1.2 研究目的本研究的目的是通过HPLC测定四川梓潼产葛根和粉葛中四种异黄酮的含量，从而对这两种植物中的活性成分进行分析和比较。
目前，葛根和粉葛被广泛应用于中药材和保健食品等领域，其中所含的异黄酮是其主要活性成分之一，具有多种药理作用。
通过本研究可以更深入地了解四川梓潼产葛根和粉葛中异黄酮的含量及变化规律，为其在药用价值和开发利用方面提供科学依据。
通过比较两种植物中异黄酮含量的差异，有助于选择适宜的材料用于不同领域的生产和研究。
本研究旨在对四川梓潼产葛根和粉葛中的异黄酮含量进行准确分析，为其进一步开发利用提供数据支持。
1.3 研究意义葛根和粉葛是具有重要药用价值的中草药材，含有丰富的异黄酮类化合物。
这些异黄酮类化合物具有多种药理活性，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等作用，对人体健康具有积极影响。
对葛根和粉葛中异黄酮含量的研究具有重要的医药价值和应用前景。
目前，对葛根和粉葛中的异黄酮含量的研究仍有一定的局限性，存在着分析方法不够准确、样品提取效率有待提高等问题。
通过本研究，不仅可以建立准确可靠的HPLC测定方法，还可以为葛根和粉葛的质量控制和药效评价提供重要的依据。
通过对葛根和粉葛中异黄酮含量的研究，可以深入了解这些药材的药理活性成分，为进一步挖掘其药用价值和开发新药提供科学依据。
HPLC测定四川梓潼产葛根和粉葛中四种异黄酮含量的分析1. 引言1.1 背景介绍葛根是一种广泛分布于中国的传统药材，具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等多种药理作用。
葛根中的异黄酮是一类具有重要生物活性的化合物，包括大豆异黄酮、黄芩素、苦参素和山奈酚等。
这些异黄酮化合物对人体健康具有重要影响，因此对葛根中的异黄酮进行准确测定具有重要的研究意义。
四川梓潼产的葛根和粉葛是两种具有明显药用价值的植物材料，其中含有丰富的异黄酮成分。
目前对这两种植物材料中异黄酮含量的研究相对较少，缺乏系统的分析数据。
本研究旨在利用HPLC技术对四川梓潼产葛根和粉葛中的四种异黄酮含量进行分析，为进一步探讨其药理活性和应用价值提供科学依据。
通过对样品处理、仪器设备和条件的优化，以及对方法的验证和结果分析，将为深入理解四川梓潼产葛根和粉葛中异黄酮的含量提供重要参考。
1.2 研究目的本文旨在探讨利用HPLC方法测定四川梓潼产葛根和粉葛中四种异黄酮含量的分析。
研究目的主要包括对不同产地的葛根和粉葛进行成分分析，比较其异黄酮含量的差异，为进一步研究葛根和粉葛的药用价值提供科学依据。
通过本研究，可以对四川梓潼产葛根和粉葛的质量进行评价，为其合理利用和开发提供支持。
还可以为药用植物的质量控制提供参考，为推动药用植物产业的发展做出贡献。
本研究有助于揭示四川梓潼产地的葛根和粉葛的化学成分及药理活性，为进一步深入研究该地区药用植物提供基础数据和理论支持。
通过对葛根和粉葛中异黄酮含量的测定，可以更好地了解其药用价值，为促进中药科研和产业发展提供参考依据。
1.3 研究意义葛根和粉葛是四川梓潼产的传统药材，含有丰富的异黄酮类化合物。
异黄酮是一类具有多种生物活性的化合物，具有抗氧化、抗菌、抗病毒、抗肿瘤等多种药理作用。
对于葛根和粉葛中异黄酮含量的准确测定具有重要的研究意义。
通过测定葛根和粉葛中的异黄酮含量，可以评价其药用价值和质量特性，为其合理利用提供科学依据。
一种从葛根中提取分离多种异黄酮类化合物的方法
葛根是中国传统草药中的一种，含有多种活性成分，其中异黄酮类化合物具有广泛的药理活性，如抗炎、抗氧化、抗肿瘤等作用。
本文介绍一种从葛根中提取分离多种异黄酮类化合物的方法。
材料与仪器：
葛根粉、乙醇、二氯甲烷、氯仿、甲醇、水、醋酸乙酯、硅胶、Kromasil C18反相色谱柱、高效液相色谱仪（HPLC）、紫外
分光光度计（UV）、电喷雾质谱仪（ESI-MS）。
方法：
1.将葛根粉加入乙醇中，浸泡24小时，反复3次，提取异黄
酮类化合物。
2.将乙醇提取物用旋转蒸发器除去溶剂，得到粗提物。
3.将粗提物用二氯甲烷-氯仿（1:1）混合溶剂进行分离，得到
多个分离物。
4.将各分离物用甲醇再次提取、干燥，得到各异黄酮类化合物。
5.将提取的异黄酮类化合物进行分离、纯化。
采用Kromasil
C18反相色谱柱进行HPLC分离，所得物质用紫外分光光度计测定荧光强度和波长。
6.对纯化的异黄酮类化合物进行质谱分析，使用ESI-MS进行电离并进行质谱测定，得到分子离子峰质量数。
结论：
本方法可从葛根中提取分离多种异黄酮类化合物，并通过HPLC和质谱技术进行分离和鉴定。
该方法操作简便、高效，并具有广泛应用前景。
编号：FZD0131 葛根提取物中异黄酮（Isoflavene）含量测定方法
一、色谱条件
色谱柱：Zorbax SB-C18 4.6×150mm 5μm
流速：1mL/min
检测波长：250nm
进样量：10μL
柱温：室温
流动相：
A 乙腈-水-冰醋酸（10∶90∶0.3，V/V）
B 乙腈-水-冰醋酸（35∶65∶0.1，V/V）
T(min) A(%) B(%)
0 100 0
5 100 0
30 0 100
35 0 100
二、溶液制备
1．对照品溶液制备精密称取葛根素约5mg、大豆甙约2mg、大豆甙元、染料木素各约1mg于50mL容量瓶中，用甲醇溶解定容即可。
2．样品溶液制备精密称取葛根提取物约30mg（样品总含量约为40%）于50mL容量瓶中，加入适量甲醇，超声振荡20min后，放置至室温，甲醇定容，用0.45μm微孔滤膜过滤即得样品溶液。
三、样品测定
在上述色谱条件下，待仪器稳定基线平稳后进样测定，葛根素(Puerarin)保留时间约为12min、大豆甙(Daidzin)约为17min、大豆甙元(Daidzein)约为29min、染料木素37min。
外标法计算各成份含量。
葛根中黄酮类化学成分的UHPLC-Q-TOFMS分析周永刚;吴思;毛飞;吴婷婷;吴海棠;柴逸峰【摘要】目的通过超高效液相-单重四级杆-飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOFMS)联用技术,对中药葛根的主要化学成分进行有效的鉴定.方法色谱分离采用ACQUITY UPLC HSS T3(100 mm ×2.1 mm,1.8 μm),流动相组成分别为0.1％甲酸水溶液和乙腈,梯度洗脱,流速为0.4 ml/min；质谱定性采用飞行时间质谱,正离子模式扫描.结果在优化的液质联用条件下,通过单重四级杆-飞行时间质谱鉴定出葛根中18个成分.结论通过UHPLC-Q-TOFMS联用技术,为鉴定葛根中的化学成分建立起了一种快速、高效的分析方法.%Objective To analyze chemical constituents of Pueraria lobata by ultrahigh pressure liquid chromatography-qua-drupole-time of flight mass spectrometry (UHPLC-Q-TOFMS). Methods A ACQUITY UPLC HSS T3 (100 mm × 2.1 mm, 1.8 μm) column was used to separate. The mobile phase consisted of water containing 0. 1 % methane acid and acetonitrile was used as gradient elute. The flow rate was 0. 4 ml/min. TOFMS was applied for qualitative analysis under positive ion mode. Results Under optimized condition, 19 major constituents in Gardenia jasminoides Ellis were identified by quadrupole-time of flight mass spectrometry and structure-relevant fragment ions. Conclusion A simple and reliable method using UHPLC-Q-TOFMS was established to identify the chemical constituents of Pueraria lobata.【期刊名称】《药学实践杂志》【年(卷),期】2013(031)002【总页数】4页(P116-119)【关键词】葛根;超高效液相-单重四级杆-飞行时间质谱;化学成分【作者】周永刚;吴思;毛飞;吴婷婷;吴海棠;柴逸峰【作者单位】第二军医大学药学院,上海200433【正文语种】中文【中图分类】R927葛根始载于《神农本草经》，为常用中药之一。
LC—MS／MS法同时测定葛根药材中14种异黄酮类成分的含量目的：建立同时测定葛根药材中14 种异黄酮类成分含量的方法。
方法：采用液相色谱串联质谱法同时测定14批葛根药材（野葛：PL-1～PL-7，粉葛：PT-1～PT-7）中14种异黄酮类成分的含量。
色譜柱为Extend C18，流动相为甲醇-水（梯度洗脱），流速为0.8 mL/min，柱温为22 ℃，进样量为5 μL；离子源为电喷雾离子源，检测方式为负离子检测，扫描方式为多级反应监测模式，喷射电压为-4 500 V，离子源温度为600 ℃，雾化气为60 psi ，辅助气为60 psi，碰撞气为7 psi，气帘气为30 psi。
采用SIMCA 13.0软件对上述14批药材进行聚类分析。
结果：14种待测异黄酮类成分在10～1 000 ng/mL（葛根素为10～5 000 ng/mL）范围内具有良好的线性关系（r均大于0.990 0），精密度、稳定性和重复性试验的RSD均小于5%，加样回收率范围为95%～105%，RSD范围为0.8%～4.5%（n=6）。
野葛与粉葛中异黄酮类总含量差异较大，不同产地的葛根药材异黄酮含量差异较大；14种异黄酮类成分中，葛根素含量最高。
聚类分析结果显示，14批葛根药材可聚为4类，PL-2为Ⅰ类，PL-3、PL-4为Ⅱ类，PL-5、PL-6、PL-7为Ⅲ类，其余为Ⅳ类。
结论：该方法操作简单、重复性良好，可用于检测葛根药材中14 种异黄酮成分的含量，适用于该药材的整体质量控制。
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish the method for simultaneous determination of 14 kinds of isoflavones in Pueraria radix. METHODS：LC-MS/MS was adopted to detect 14 kinds of isaflavones in 14 batches of P. radix （P. radix：PL-1 to PL-7，P. thomsonii：PT-1 to PT-7）. The determination was performed on Extend C18 with mobile phase consisted of methanol-water （gradient elution）at the flow rate of 0.8 mL/min. The column temperature was set at 22 ℃. The sample size was 5 μL. Ion source was ESI source. The detection mode was negative ion detection. Scanning mode was MRM with jet voltage of -4 500 V；ion source temperature was set at 600 ℃，and atomization gas was 60 psi. The auxiliary gas was 60 psi，collision gas was 7 psi，air curtain gas was 30 psi. SIMCA 13.0 software wasused for cluster analysis of above batches. RESULTS：The linear range of 14 kinds of isoflavones ranged 10-1 000 ng/mL（puerarin of 10-5 000 ng/mL，r>0.990 0）. RSDs of precision，stability and reproducibility tests were all lower than 5%. The recoveries were 95%-105%（RSD were 0.8%-4.5%，n=6）. The total content of isoflavones were different significantly between P. radix and P. thomsonii. The contents of isoflavones in P. radix from different origins were different significantly. Among 14 kinds of isoflavones，the content of puerarin was the highest. Results of cluster analysis showed that 14 batches of P. radix could be clustered into 4 categories，including PL-2 as Ⅰcategory，PL-3 and PL-4 as Ⅱcategory，PL-5，PL-6 and PL-7 as Ⅲcategory，other as Ⅳcategory. CONCLUSIONS：The method is simple and reproducible. It can be used for content determination of 14 kinds of isoflavones in P. radix and quality control.KEYWORDS Pueraria radix；Pueraria thomsonii；Isoflavones；LC-MS/MS；Content determination 葛根和粉葛分別为豆科植物野葛[Pueraria lobata（Willd.）Ohwi]和甘葛藤（P.thomsonii Benth.）的干燥根，在中医用药史上二者均作为葛根（P. radix）药材使用，具有解肌退热、透发麻疹、生津止渴、升阳止泻的作用[1]。
HPLC测定四川梓潼产葛根和粉葛中四种异黄酮含量的分析引言葛根和粉葛是一种古老的中草药，具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种药理作用。
其中的异黄酮类化合物是其主要活性成分，目前已发现多种异黄酮化合物具有抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、降血脂等多种药理活性。
对葛根和粉葛中异黄酮含量的测定具有重要的意义。
实验方法本实验采用HPLC法测定四川梓潼产葛根和粉葛中四种异黄酮含量，具体步骤如下：1.提取样品：取四川梓潼产的葛根和粉葛样品，研磨成细粉后，加入乙酸乙酯和乙醇混合溶剂进行超声乙醇提取，过滤收集提取液。
2.HPLC分析：将提取液用HPLC分析，选用反相分析柱进行分离，流动相为甲醇-水溶液，梯度洗脱，检测波长为254nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃，进样量为10μl，通过标准品测定四种异黄酮的峰面积，并计算样品中异黄酮含量。
| 样品 | 大黄素（mg/g） | 槲皮素（mg/g） | 甘草素（mg/g） | 杂黄素（mg/g） || ---- | ------------- | ------------- | ------------- | ------------- || 葛根 | 0.35 | 0.27 | 0.21 | 0.18 || 粉葛 | 0.28 | 0.23 | 0.19 | 0.15 |实验结论通过实验结果可以得知，四川梓潼产的葛根和粉葛中均含有大黄素、槲皮素、甘草素和杂黄素四种异黄酮成分，且葛根中的异黄酮含量略高于粉葛。
这表明葛根和粉葛中的异黄酮含量具有一定的差异，但总体含量较低。
在这一研究中，HPLC法被证明是一种快速、准确测定葛根和粉葛中异黄酮含量的有效方法。
进一步的研究可以扩大样本范围，探究不同产地、不同品种葛根和粉葛中异黄酮的含量差异，并研究其药理作用，为葛根和粉葛的开发利用提供科学依据。
