鲮鱼“红鳃病”病原的分离鉴定与药物敏感性试验研究
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３ 药 物敏 感 性 试 验 ． 在得 到病 原芮 的纯 培 养后 ，采片 １种 药敏 纸 片测定 】５ 细 菌对 各种 抗 菌药物 的敏 感性 ，抑 茼 直 径小 于 １毫米 ０
化后的菌株分别进行节兰氏染色、氧化酶试验 ，根据其
特性分别对菌株进行生化编码鉴定。 ４ 人 工回感试验 ． 筛选出来的鲮鱼在实验审水族箱中斩养 １ 周以上 ，
果。
、
材料 与方离鉴 定 ． 从 患 病鲮 鱼 Ｅ ］ ￣ ０ — — 、０ 一 ２ ９ ６ Ｓ 离 Ｊ９ ６ ０ － ］ ｌ ９ ６ Ｏ 、０ ～ — ０ 、０ — ４ ４ 菌 株 ，经 感 染０ ２ 株和 Ｏ 一 ３ ９６０ 株 ９ ６０ 荫 ｇ ６－
３ 病原 菌分 离 ．
病 菌编 Ａ Ｉ０ 鉴定 结 果 检 索结 果 Ｉ ２Ｅ ０ １ ９６ｔ ０ ｌ０５ ３ ２ ５７ 水 生 拉恩 菌
０ ２ ９ ６ Ｏ ０ —３ ９６０ ７ ，３ ５ ２６ ０ １ ２ ００ ， ２３ ０ ｉ Ⅱ 水 气 胞 菌 荐 荧 光似 单胞荫
对 从 患病 鲮 鱼 分 离 到 的Ｏ — １ ９６ Ｏ 、Ｏ— ｇ ６０ 、０ 一 ２ ９
６ ０ 、０ —４ ４ — ３ ９ ６ ０ 林菌株采用创伤浸泡和浸泡感染二种
方式进 行 人工 感 染试 验 ，其 中Ｏ一 —２ ｇ６０ 蔺株 和 Ｏ － ３ ｇ ６０ 茼 株 经 同感表 现 ｝较 强 的致 痫 力 ，并有 比较 显 的病 症特 ｝ ｝
表 １ 生 化鉴 定编码检 索结 果
革兰氏阴性杆 菌增菌液、碱性蛋白胨水、普通营养 琼脂培养基、Ｔ Ｂ培养基、药敏纸片购于杭州天和微牛 ＣＳ 物试剂有限公司；Ｒ 培养基、１脱脂奶蔗糖胰 蛋［胨琼 ｓ ％ ＿ Ｉ 脂购于北京陆桥技术有限公司；Ａ Ｉ２Ｅ Ｐ ０微量检测试剂 条购于法 国梅里埃 公司。
箱 ，２ ｄ 时增菌培养后分别接种 ｊ Ｃ Ｓ Ｓ ４＇ Ｂ 、Ｒ琼脂和营养 Ｔ 琼脂，选择典型优势茼落进行纯化和鉴别培养，选取纯
点，而 ｆ与原发病特点一致，而另外两株没有明显的致 １ ＿ 病 。对感染发病特征明 的鲮伍再作病原菌分离、鉴 定。 同样分离到啃水气 ． 胞蔺和荧光假 ． 胞茼。
２ ．实验 试 剂
Ｏ 菌株具有较强的致病性 。Ｏ —一 ２ ３ ９ ６Ｏ 芮株茼溶形态表现 为：革 氏染色阴性 ， 杆菌，菌落形态为：淡黄色，
标 点 状 ， ｎ透镜 状 突 起 ，边 缘 完整 ；０ ３ ９ ６０ 菌株菌 落
形态表现为：革兰 氏染色阴性， 杆菌，菌落形态为： 白色，尉形，挚状突起，边缘完整。生化特性略。生化 鉴定编码检索结果见表１ 。
的研 究 ，希望 能 为鲮 鱼的 养殖 捉 供一 定 的治疗 指 导。
一
为：选取经２ 小时培养的新鲜培养物 ，Ｈ牛 盐水稀 ４ ｊ 释 ，比浊牟Ｏ ５ ． 麦氏管 （． ×１。 毫 ‘，采用杭州天 １５ ０个／ ） 和微生物试制有限公司的药敏纸片检测病原菌对各种抗
菌 药 物 的敏 感性 试 验 ，３ ℃ 孵 育 １ ～２ 小 时 ，读 取 结 ５ ６ Ｏ
湾、闽江、澜沧江和沅汀。 江 ： 养殖鲮鱼主要作为鳜
鱼的饵料龟。 日 前对鲮鱼的研究主要集中在补偿生 长、 遗传多样性等方面，在病害方 面的研究国 内尚＿ 见报 术
道 ，但 实 际生产 中，鲮鱼 的养 殖业 存在 较大 的病 害损
（） ２ 浸泡感 染 选择体表尢损伤的健康试验鱼，置
（） １ 患病鲮鱼来源十江都 市水产养殖场 ，主 要症
状 ：鳃盖 出血，部分病 龟鳍 条出血 ，对外部刺激小敏 感，不摄食，经解剖 叮见肠道无食。 （） ２ 人工回感试验龟为鲮鱼 ，采集 于江都 市水产养
殖场 ，暂养 一 周后外 观 、搬 食、活 力 常者用 十 人工 同 感试验 。
裕定 值 １ 合率 符 ７ ％ ｉ ． ０ ８ ５ ｌＯ
９ ｝０ ６ ９８ ．４
现场采集有典型病症 的鲮鱼 ，无菌蒸馏水体表冲
洗 。用 无菌 工 具分 别取 鳃 、 肝 、肌 肉， 置 灭 菌匀 浆器
０— —４ ９ ６— — ０
０ ７０ ０ ４６ ２
８ ． ％ ｉ０ ７ ００ ７ 普通 变形 杆 蔚 ９ ％ ｌ ． ５ ９ ９ ０ ９
２ 人 工 回 感 试验 ．
中３２ Ｊ 毫升无菌生理盐水匀浆后， 取匀浆液分别于革 Ｈ
氏 阴 性 杆 菌 增 菌 液 （ ｈ）和 碱 性 蛋 白胨 水 ＧＮＢｒｏｔ （ ｌ ａ ｅ Ｐ ｐ ｏ ｅ Ｗ ｔ ｒ 增 茼 ，置 恒 温 ３ ℃培 养 Ａ ｋ ｌｎ ｅ ｔ ｎ ａ ｅ ） ｉ ５
菌 悬液 中浸 泡 感染 ；同时 设无 菌液浸 泡 的对 照组 。
５ 药敏 试验 ．
待 确 定 致病 菌 后 ，对 致 病 茼 进 行药 敏 试 验 ，方 法
失，２０ 年我省江都市水产养殖场养殖 的两干多亩鲮鱼 ０９ 发生了大向积的死 ，为指导养殖生 用药，本中心对 发病鲮鱼进行了病原茼的分 离鉴定 以及药物敏感性试验
每 ５ １ ，同时 设平行 组 。将 已鉴 定菌株 在 ３ ￣ Ｆ 养 条 组 ０ 培 Ｃ
２ ｄ时 。用无菌生理盐水制成浓度 为２ ４ ０个／ ４， ． ×１９ 毫升
为 敏感，１ ￣２毫米为中度敏感 ，大十２毫米为高度 ６ ０ ０ 敏感。 根据试验结果可 以看出，２ 株分离悄对药物的敏感
哑
塑盟 周
鲮鱼 ¨ 红鳃病钳溺 廉的分离 鉴遂 与药物敏 感性试验研究
鲮 鱼 属鲤科 、野鲮 科 、鲮 属 ，是一种 生活 在气 候 温 暖 地 带 的龟 类 ，主 要 分布 在 珠 江 水 系 、 海 南 岛 、 台
（） １创伤感染 将试验龟体袭Ｊ划破 ，胃 悬液 中 支
浸 泡感 染 ； 同时设 无菌 液 浸泡 的 对照 组 。
化后的菌株分别进行节兰氏染色、氧化酶试验 ，根据其
特性分别对菌株进行生化编码鉴定。 ４ 人 工回感试验 ． 筛选出来的鲮鱼在实验审水族箱中斩养 １ 周以上 ，
果。
、
材料 与方离鉴 定 ． 从 患 病鲮 鱼 Ｅ ］ ￣ ０ — — 、０ 一 ２ ９ ６ Ｓ 离 Ｊ９ ６ ０ － ］ ｌ ９ ６ Ｏ 、０ ～ — ０ 、０ — ４ ４ 菌 株 ，经 感 染０ ２ 株和 Ｏ 一 ３ ９６０ 株 ９ ６０ 荫 ｇ ６－
３ 病原 菌分 离 ．
病 菌编 Ａ Ｉ０ 鉴定 结 果 检 索结 果 Ｉ ２Ｅ ０ １ ９６ｔ ０ ｌ０５ ３ ２ ５７ 水 生 拉恩 菌
０ ２ ９ ６ Ｏ ０ —３ ９６０ ７ ，３ ５ ２６ ０ １ ２ ００ ， ２３ ０ ｉ Ⅱ 水 气 胞 菌 荐 荧 光似 单胞荫
对 从 患病 鲮 鱼 分 离 到 的Ｏ — １ ９６ Ｏ 、Ｏ— ｇ ６０ 、０ 一 ２ ９
６ ０ 、０ —４ ４ — ３ ９ ６ ０ 林菌株采用创伤浸泡和浸泡感染二种
方式进 行 人工 感 染试 验 ，其 中Ｏ一 —２ ｇ６０ 蔺株 和 Ｏ － ３ ｇ ６０ 茼 株 经 同感表 现 ｝较 强 的致 痫 力 ，并有 比较 显 的病 症特 ｝ ｝
表 １ 生 化鉴 定编码检 索结 果
革兰氏阴性杆 菌增菌液、碱性蛋白胨水、普通营养 琼脂培养基、Ｔ Ｂ培养基、药敏纸片购于杭州天和微牛 ＣＳ 物试剂有限公司；Ｒ 培养基、１脱脂奶蔗糖胰 蛋［胨琼 ｓ ％ ＿ Ｉ 脂购于北京陆桥技术有限公司；Ａ Ｉ２Ｅ Ｐ ０微量检测试剂 条购于法 国梅里埃 公司。
箱 ，２ ｄ 时增菌培养后分别接种 ｊ Ｃ Ｓ Ｓ ４＇ Ｂ 、Ｒ琼脂和营养 Ｔ 琼脂，选择典型优势茼落进行纯化和鉴别培养，选取纯
点，而 ｆ与原发病特点一致，而另外两株没有明显的致 １ ＿ 病 。对感染发病特征明 的鲮伍再作病原菌分离、鉴 定。 同样分离到啃水气 ． 胞蔺和荧光假 ． 胞茼。
２ ．实验 试 剂
Ｏ 菌株具有较强的致病性 。Ｏ —一 ２ ３ ９ ６Ｏ 芮株茼溶形态表现 为：革 氏染色阴性 ， 杆菌，菌落形态为：淡黄色，
标 点 状 ， ｎ透镜 状 突 起 ，边 缘 完整 ；０ ３ ９ ６０ 菌株菌 落
形态表现为：革兰 氏染色阴性， 杆菌，菌落形态为： 白色，尉形，挚状突起，边缘完整。生化特性略。生化 鉴定编码检索结果见表１ 。
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一
为：选取经２ 小时培养的新鲜培养物 ，Ｈ牛 盐水稀 ４ ｊ 释 ，比浊牟Ｏ ５ ． 麦氏管 （． ×１。 毫 ‘，采用杭州天 １５ ０个／ ） 和微生物试制有限公司的药敏纸片检测病原菌对各种抗
菌 药 物 的敏 感性 试 验 ，３ ℃ 孵 育 １ ～２ 小 时 ，读 取 结 ５ ６ Ｏ
湾、闽江、澜沧江和沅汀。 江 ： 养殖鲮鱼主要作为鳜
鱼的饵料龟。 日 前对鲮鱼的研究主要集中在补偿生 长、 遗传多样性等方面，在病害方 面的研究国 内尚＿ 见报 术
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（） ２ 浸泡感 染 选择体表尢损伤的健康试验鱼，置
（） １ 患病鲮鱼来源十江都 市水产养殖场 ，主 要症
状 ：鳃盖 出血，部分病 龟鳍 条出血 ，对外部刺激小敏 感，不摄食，经解剖 叮见肠道无食。 （） ２ 人工回感试验龟为鲮鱼 ，采集 于江都 市水产养
殖场 ，暂养 一 周后外 观 、搬 食、活 力 常者用 十 人工 同 感试验 。
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每 ５ １ ，同时 设平行 组 。将 已鉴 定菌株 在 ３ ￣ Ｆ 养 条 组 ０ 培 Ｃ
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鲮鱼 ¨ 红鳃病钳溺 廉的分离 鉴遂 与药物敏 感性试验研究
鲮 鱼 属鲤科 、野鲮 科 、鲮 属 ，是一种 生活 在气 候 温 暖 地 带 的龟 类 ，主 要 分布 在 珠 江 水 系 、 海 南 岛 、 台
（） １创伤感染 将试验龟体袭Ｊ划破 ，胃 悬液 中 支
浸 泡感 染 ； 同时设 无菌 液 浸泡 的 对照 组 。
