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抗癫痫药物对新
水迷宫实验：P31-P36开始，①定位航行实验：第2天到第5天每天上下午各2次；②空间探索实验：第6天撤除平台，
旷场试验（OFT ）:P29开始，每只大鼠测试1次/2min/天，共两天
灌胃针喂药，连续给药3周；出生后P8起隔日测镇体重1次
改良Y 迷宫：P37-P38开始，实验分2d 进行，第1d 为训练阶段，第2d 为保持阶段，每天相关蛋白的影响实验免疫组化分析苔藓纤维发芽
収出整脑用冰冷的生理盐水洗净大脑表面血液，有滤纸快速吸干后称重脑农而血液，川滤纸快逨吸r_/ri立即称iR
标本制备：分离出一侧海马，用于检测mRNA表达；另一侧海马取出后用于检测蛋白表达。
琼脂糖凝胶电泳：检测目的基因完整性
Western blot 检测BDNF 、SMAP-25蛋白的表达：海马组织总蛋白提取+蛋白浓度测定免疫组化分析神经发生
荧光实时定量RT-PGR 法分析BDNF 、SNAP-
物对新生大鼠行为及神经影响的癫痫模
两天
每天上下午各2次；②空间
，第2d为保持阶段，每天
有滤纸快速吸干后称重
马取出后用于检测蛋白表达
蛋白提取+蛋白浓度测定。
中山大学研究生学刊（自然科学、医学版）第32卷第2期JOURNAL OF THE GRADUATES VOL.32ɴ22011SUN YAT-SEN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCES、MEDICINE）2011癫痫动物模型的研究进展*汤丽鹏（中山大学中山医学院，广东广州510080）【内容提要】癫痫是一种以大脑局部病灶突发性的异常高频放电并向周围组织扩散为特征的大脑功能障碍，同时可伴随短暂的运动、感觉、意识及自主神经功能异常。
在研究癫痫病理生理改变及筛选抗癫痫药物时，所选择的癫痫模型起到十分重要的作用。
癫痫的疾病模型可大致分为体外模型和整体模型。
前者包括神经元模型和脑片模型；而后者可根据诱发癫痫的时程、遗传背景及药物抵抗性等特点，又可分为急性癫痫模型、慢性癫痫模型、遗传性癫痫模型和抵抗性癫痫模型。
本综述将对不同的癫痫模型的特点进行介绍，及对这些癫痫模型各自所代表的不同人类癫痫类型进行阐述，最后对这些癫痫模型进行比较。
【关键词】癫痫；脑片；急性癫痫模型；点燃癫痫模型；遗传性癫痫模型；药物抵抗性癫痫模型前言癫痫是一种以大脑局部病灶突发性的异常高频放电并向周围组织扩散为特征的大脑功能障碍，可伴有明显脑电图改变，及可能伴随着短暂性的运动、感觉、意识及自主神经功能异常。
据WHO2005年公布的流行病学调查结果显示：世界上有5千万的癫痫患者，且其平均每年发病率为0.5ɢ－1ɢ，可见癫痫是十分常见的神经系统疾病之一。
癫痫模型在癫痫的病理生理研究和抗癫痫药物的研究中发挥着重要的作用。
癫痫模型可分为体外模型和整体模型。
前者包括神经元模型和脑片模型，主要用于抗癫痫药物的筛选，还能有效的探讨抗癫痫药物的量效关系。
而后者通常包括急性癫痫模型、慢性癫痫模型、遗传性癫痫模型和抵抗性癫痫模型。
而这些整体模型又各自代表着不同的人类癫痫发作类型。
下面将简单介绍癫痫体内和整体模型。
*收稿日期：2010－05－08作者简介：汤丽鹏，女，1987年生，广东广州人，中山大学中山医学院2010级药理学专业博士研究生，主要研究方向药物抗癫痫的机制及其研究，电子邮箱：443082052@癫痫动物模型的研究进展1体外模型癫痫的体内模型的类型较少，且其操作相对较为简单。
癫痫实验动物模型 The manuscript was revised on the evening of 2021癫痫是大脑神经元突发性异常高频放电，导致短暂的大脑功能障碍的一种神经系统慢性疾病。
癫痫具有自发性和反复性等特点，由于异常放电的神经元在大脑的部位不同，而有多种多样的表现。
新型抗癫痫药都是通过动物模型验证后应用于临床的。
首次推出最大电休克模型（Maximal Electroshock Seizure，MES)一．利用药物制备癫痫模型（药物建模）注射药物，通过破坏脑部神经递质释放的平衡，阻断兴奋性氨基酸的循环通路，诱发癫痫发生。
1.注射合成红藻氨酸制备大鼠癫痫模型红藻氨酸（kainic acid,KA)是海藻的提取物，可作用于脊椎动物中枢神经系统的谷氨酸受体，可直接兴奋神经元，又可增强钠离子的通透性而使神经细胞去极化，诱发癫痫发生。
KA的人工合成品即合成红藻氨酸（synthetical kainic acid,SKA)，腹腔注射。
发作阶段性明显，行为学表现规律、稳定，死亡率低，适宜大规模建模。
2.注射氯化锂---匹罗卡品致大鼠癫痫模型近年来一直被认为是研究颞叶癫痫的理想模型。
3.穿刺注射海人酸杏仁核点燃大鼠癫痫模型4.急性氯化铁癫痫模型5.青霉素点燃模型6.戊四唑点燃模型类似人类失神癫痫特征，7.戊四氮（PTZ)诱导的急、慢性癫痫8.杏仁核点刺激点燃模型电极植入，给予连续电刺激。
9.经眼电刺激大鼠癫痫模型二．利用手术制备癫痫模型(手术建模）主要用于模拟外伤后癫痫，机制可能与各神经元细胞之间的突触间连接有关。
外伤后癫痫（posttraumatic epilepsy，PTE）是继发于外伤性颅脑损伤（traumatic brain injury，TBI）的癫痫形式，是常见的最为严重的后遗症。
制作PTE模型要求在体，而非脑片或细胞培养。
颞叶癫痫大鼠海马CA1区超微结构梁建民;崔新明;李秀杰;张淑琴【期刊名称】《吉林大学学报（医学版）》【年(卷),期】2005(031)005【摘要】目的:通过观察颞叶癫痫大鼠海马CA1区超微结构变化,探讨颞叶癫痫的发病机制.方法:以海人酸杏仁核微量注射建立经典的雄性Wistar大鼠颞叶癫痫化学点燃模型,按点燃后第14、21天时间点分为2组,每组5只,观察大鼠海马CA1区神经细胞超微结构,并对突触活性参数量化分析.结果:颞叶癫痫大鼠海马CA1区神经细胞结构受损,神经元突触数密度降低(P＜0.05),突触活性区膜面积缩小(P＜0.05),突触界面曲率降低(P＜0.05),比表面减小(P＜0.05),突触小泡数密度降低(P＜0.05).星形胶质细胞线粒体体积密度增加(P＜0.05),数密度增高(P＜0.05).结论:颞叶癫痫大鼠海马CA1区神经细胞和突触超微结构存在远期损害和活力降低.【总页数】4页(P720-723)【作者】梁建民;崔新明;李秀杰;张淑琴【作者单位】吉林大学第一医院儿科,吉林,长春,130021;吉林大学基础医学院电镜教研室,吉林,长春,130021;吉林大学第一医院儿科,吉林,长春,130021;吉林大学第一医院神经内科,吉林,长春,130021【正文语种】中文【中图分类】Q954.52;R-332【相关文献】1.小剂量地塞米松对颞叶癫痫大鼠海马CA1区超微结构的影响 [J], 梁建民;崔新明;李秀杰;张淑琴;李艳茹2.颞叶癫痫大鼠海马CA1区Sema3C、Np1的表达变化研究 [J], 袁学谦;肖波;李玲;唐铁钰;王康;李蜀渝;李国良3.颞叶癫痫大鼠海马CA1区突触可塑性与空间记忆能力关系的研究 [J], 梁建民;崔新明;李艳茹;张淑琴4.低剂量伽玛刀照射癫痫大鼠颞叶神经元超微结构的改变及线粒体形态计量分析[J], 杨传红;王捷;赖晃文;梁军潮;吴小丽;詹纯列;肖育华;张霭玲5.大鼠癫痫持续状态后海马CA1区锥体细胞层神经元突触CB1R超微结构变化 [J], 孟宪栋;亢君君因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
氯化锂2匹罗卡品致大鼠急性癫痫模型Ξ高旭光,冯体良,王 军(北京大学人民医院神经内科,北京 100044)摘要:目的 建立氯化锂2匹罗卡品化学诱导的大鼠急性癫痫模型。
方法 雄性Wistar大鼠55只,随机分为生理盐水对照组、地西泮组和致痫组。
氯化锂腹腔注射后10～10h后给予匹罗卡品。
结果 生理盐水对照组大鼠均为0级发作,地西泮组中8只大鼠为0级发作,2只出现Ⅰ级发作;致痫组均达到Ⅲ级以上的痫性发作,其中Ⅲ级2只(2/35),Ⅳ级3只(3/35),Ⅴ级30只(30/35)。
致痫组大鼠在匹罗卡品腹注射后10～90min内全部出现急性痫性发作。
结论 氯化锂2匹罗卡品诱导的大鼠急性癫痫模型具有制作方便、致痫成功率高和动物死亡率低等特点,具有同人类癫痫持续状态和颞叶癫痫相似的行为和脑电图改变。
关键词:氯化锂2匹罗卡品;癫痫持续状态;大鼠;急性癫痫模型中图法分类号:R74211 文献标识码:A 文章编号:1009-881X(2003)04-0308-02Lithium2pilocarpine induced rat model of acute epilepsyG AO Xu2guang,FENG Ti2liang,WANG Jun(neurologic department of Peking University People’s H ospital,Beijing100044)Abstract:Objective T o establish the lithium2pilocarpine induced rat m odel of acute epilepsy.Methods 55Wis2 tar male rats were divided into the m ormal saline control group,diazepam group and seizure2induced group randomly.Pilo2 carpine was injected intraperitoneally(ip)after the10～18hours of the lithium chloride ip.R esults No seizure was found in the normal saline control group,and8rats were stage0attack,2rats were stageⅠin diazepam group.In seizure2induced group,all was above stageⅢ,2rats were stageⅢ(2/35),stageⅣin3rats(3/35),stageⅤin30rats (30/35).All of the seizure2induced rats has presented acute epileptic attack after pilocarpine intraperitoneal injection within10～90minutes.Conclusion Lithium2pilocarpine2induced rats m odel of acute epilepsy was characterized easy building,with high success ful rate and lower m ortality of the animal;This m odel has mimic features of human status epilepticus and tem poral epilepsy in seizure behavior and electroencephalographic findings.K ey w ords:Lithium2pilocarpine;status epilepticus;rat;acute epileptic m odel 氯化锂2匹罗卡品大鼠癫痫模型是H onchar等于1983年首次报道,该模型使匹罗卡品的用量减少,降低了因匹罗卡品毒副作用所造成的动物死亡率。
动物模型建立及评价方法综述动物模型在生命科学研究中扮演着重要的角色，可以帮助科学家们更好地理解和预测人类疾病的发展过程，在药物研发和治疗方法的探索中也起到了关键的作用。
本文将综述动物模型的建立及评价方法，旨在帮助读者更好地了解和使用这些科学工具。
一、动物模型的建立方法1. 选择合适的动物物种在建立动物模型之前，首先需要根据研究的目的选择合适的动物物种。
一般来说，小鼠、大鼠和猪常被用作疾病模型的研究对象，因为它们与人类在基因组、生理学和疾病发展等方面存在相似性。
然而，不同的研究目的需要选择不同的动物物种，例如神经系统研究通常使用小鼠，心血管系统研究则常用猪作为模型。
2. 建立疾病模型为了模拟人类疾病的发展过程，科学家们通常需要采用各种方法来建立相应的动物模型。
例如，可以通过基因敲除、基因编辑、化学诱导和生物学干预等手段来制造疾病模型。
这些方法可以使动物产生与人类疾病相似的症状和生理变化，从而更好地研究疾病的机制和治疗方法。
3. 考虑伦理问题在进行动物模型研究时，科学家们也需要充分考虑伦理问题和动物福利。
他们需要确保动物的生活质量，并采取必要的措施来减少动物的痛苦和病情。
二、动物模型的评价方法1. 临床相关性评价在评价动物模型时，首先需要考虑它与人类疾病的相关性。
即模型产生的症状和生理变化是否与人类疾病一致，并能够预测治疗方法的疗效。
这需要进行大量的比较研究和数据分析，从而确保动物模型的可靠性和有效性。
2. 生物学特性评价动物模型的生物学特性评价是评估其可靠性和适用性的重要指标之一。
例如，模型的遗传特性、生理指标和器官功能等是否与人类相似，是否能够模拟人类疾病的发展过程等，这些都是评价动物模型生物学特性的关键要素。
3. 可重复性和稳定性评价科学研究的可靠性和稳定性是评价动物模型的重要指标。
因此，在模型建立后，科学家们需要进行多次重复实验来验证实验结果的稳定性和可重复性。
只有在这些实验中得出一致的结果，并能够预测人类疾病的发展过程，才能认为动物模型是可靠的。
抑制miR-134治疗大鼠癫痫持续状态实验研究王小木;贾瑞华;姜曌;王津存;夏峰【摘要】目的探讨微小核糖核酸-134(miR-134)在癫痫持续状态发生中的作用.方法①构建大鼠miR-134抑制慢病毒载体;②建立大鼠氯化锂-匹罗卡品癫痫持续状态模型,观察miR-134抑制对大鼠发作潜伏期,癫痫持续状态时间,发作严重程度,脑电图功率以及海马神经元凋亡的影响.结果①将一段362 bp的包含2个miR-134竞争结合位点的脱氧核糖核酸(DNA)片段经XhoI和EcoRI酶切后插入质粒pCDH-CMV-MCS-EG(R) FP-MCS中EG(R) FP序列的下游,该片段转录产物与miR-134互补形成稳定的复合物,从而阻止了miR-134对靶信使核糖核酸(mRNA)的降解或翻译抑制,得到大鼠miR-134抑制慢病毒载体.②立体定向注射miR-134抑制慢病毒于大鼠海马并放置海马电极,2w后建立氯化锂-匹罗卡品大鼠癫痫持续状态模型,进行脑电图监测,结果提示miR-134抑制慢病毒组较相应对照病毒组V 级发作潜伏期延长(P＜0.01),脑电图总功率降低(P＜0.001),癫痫持续状态时间缩短(P＜0.05).癫痫持续状态后3d制备脑片进行免疫荧光染色,结果提示miR-134抑制慢病毒组海马齿状回(DG)、CA1及CA3区较相应对照病毒组神经元核(NeuN)染色阳性细胞数增多,末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记(TUNEL)阳性细胞减少.结论抑制大鼠海马miR-134能够减轻癫痫持续状态发作并具有神经保护作用.【期刊名称】《中华神经外科疾病研究杂志》【年(卷),期】2018(017)004【总页数】5页(P327-331)【关键词】癫痫持续状态;微小核糖核酸-134;慢病毒;海马【作者】王小木;贾瑞华;姜曌;王津存;夏峰【作者单位】空军军医大学西京医院神经内科,陕西西安710032;解放军457医院神经内科,湖北武汉430012;空军军医大学西京医院神经内科,陕西西安710032;空军军医大学西京医院神经内科,陕西西安710032;空军军医大学西京医院神经内科,陕西西安710032【正文语种】中文【中图分类】R651癫痫持续状态(status epilepticus, SE)的年发病率为10/10万～40/10万，为神经内科中仅次于急性脑血管病的急危重症。
氯化锂诱导大鼠癫痫模型构建方法
1、材料
SD大鼠
一次性注射器
水合氯醛
氯化锂
溴甲东莨菪碱
匹罗卡品
2、造模方法
癫痫是一种以大脑局部细胞突发性的异常放电并向周围组织扩散为特征的大脑功能障碍，同时伴随暂时性运动、感觉、意识及自主神经功能异常。
临产表现为强直阵挛。
目前常用的急性化学致痫模型机制均是作用于神经元，通过对CNS递质的作用来诱发癫痫。
大鼠腹腔注射氯化锂（LiCl）（127mg/kg，溶于水）进行诱导，24h后腹腔注射溴甲东莨菪碱（1mg/kg），30min后再以匹罗卡品（40mg/kg）腹腔注射，癫痫发作在注射匹罗卡品10到30分钟后开始。
如果癫痫发作持续时间30min以上的给予10%水合氯醛3ml/kg 腹腔注射以中止发作，如果没有效果，可以反复注射10%水合氯醛直至发作停止。
（PMID: 31306773）
2.1痫性发作分级Racine标准
0级：正常行为学
Ⅰ级：凝视、面部抽动、头摆、咀嚼；
Ⅱ级：节律性点头伴随口角咀嚼；
Ⅲ级：前肢阵挛；
Ⅳ级：双前肢阵挛，后肢站立如袋鼠样；
Ⅴ级：全身惊厥，失去平衡并跌倒。
3．实验结果
以上为各组脑电的变化。
癫痫的动物模型一、简介癫痫症是最常见的神经系统疾病之一，其患病率在一般人口中每1000人约有5人。
根据世界卫生组织的定义，癫痫症是由先天或后天不同因素所引起的慢性脑疾病，其特征是反复性惊厥发作，伴随不同的临床和脑电图的表现。
因此，癫痫症(epilepsy)是一反复发作的临床症候群，而因一过性异常的一次脑细胞放电所引起的神经系统功能失常称为惊厥(Seizure)，惊厥是临床的行为活动，一次惊厥发作不一定表示有癫痫症。
目前，国内所用的癫痫分类方法是以国际抗癫痫联盟(ILAE)1981年和1985年的分类法。
但为了兼顾临床和实验室研究，本章所讨论的癫痫现象主要根据1981年的分类，此分类法主要以临床表现及EEG为依据将癫痫分为：全身性和部分性癫痫。
迄今研究人类癫痫的发病机理仍主要依靠动物实验，癫痫产生机制的探讨及最新进展亦多直接或间接来于动物模型研究。
目前已有数十种动物模型应用于癫痫研究，选择适宜的实验模型取决于所需解决的问题、所需的癫痫类型，与临床发作的一致性以及是否简单可靠。
因此，选择适当、有价值的癫痫动物模型是有效研究癫痫机制及治疗的捷径。
现已发展并建立了类似临床癫痫类型的多种癫痫模型(表I)，包括整体与离体、脑片与细胞模型，为探讨癫痫形成的机制及观察药物治疗疗效提供了有利的工具。
然而，如何合理、适当地应用这些动物模型是我们进行研究时首先应当考虑的，否则既浪费时间、精力与钱财，又不能得到可靠的结果。
以下分别介绍各种类型癫痫动物模型的利与弊。
表I：癫痫的动物模型1. 急性简单部分性 3. 复杂部分性 6. 脑组织表面致惊剂卡因酸海马脑片青霉素Tetanus toxin 原代分离细胞培养荷包牡丹碱点燃人类神经组织印防已毒 4. 全身强直－阵挛7. 癫痫持续状态士的宁遗传性胆碱能药物光敏狒狒急性电刺激听源性惊厥小鼠去除GABA Totterer 和E1 小鼠新皮层脑片遗传性癫痫易感大鼠2. 慢性简单部分性蒙古沙土鼠皮层埋置金属最大电休克氢氧化铝化学致惊剂钴代谢性derangements钨铁 5. 全身性失神冷冻损伤神经节苷脂抗体注射静脉注射致痫剂二、急性简单部分性癫痫模型这类模型是一组急性皮层损伤所致的惊厥放电。
- 31 -检识及其对小鼠肠推进和胃排空的影响[J].药物评价研究，2017，40（9）：1259-1264.[11]张毅宏，杨国莉，付莹，等.西药联合理气中药对糖尿病大鼠胃排空延迟的影响及其机制研究[J].天津中医药，2016，33（6）：363-367.[12]周莉江，严鑫，季宁平，等.醋制香附不同提取部位对肝郁型胃肠功能紊乱大鼠胃肠运动的影响[J].中药材，2016，39（1）：174-177.[13]邱琳.中药对胃肠道动力调节作用的研究概况[J].中医临床研究，2015，7（35）：147-148.[14]李舒婷，卢棉，梁寻杰，等.黄秋葵水提液对胃肠运动功能的影响及其机制研究[J].广西中医药，2017，40（6）：60-63.[15]茹丽，郭起岳，李其凤，等.保济丸粉辐照前后对家兔离体肠平滑肌运动作用的影响[J].中国处方药，2018，16（1）：31-32.[16]黄永毅，罗世顺，罗莹，等.木蝴蝶水提物对家兔离体肠平滑肌活动的影响[J].右江民族医学院学报，2019，41（6）：605-609.[17]王慧，张海娟，李志东.忍冬藤提取物对兔离体肠平滑肌的舒张作用及其机制[J].中国农业科学，2017，50（2）：372-379.[18]陈钟权，符春茹，符凤亲，等.胡椒碱对槟榔碱促进家兔离体小肠平滑肌运动的影响[J].世界华人消化杂志，2019，27（1）：20-28.[19]向德标，阳漾，刘小娟，等.地锦草醇提物对兔离体小肠平滑肌作用及机制研究[J].中国医院药学杂志，2015，35（15）：1371-1375.[20]吴悦，钟雯雅，倪陆桥，等.桃仁提取液对家兔小肠收缩运动影响的研究[J].浙江中医杂志，2018，53（3）：178-180.（收稿日期：2020-07-14） （本文编辑：姬思雨）*基金项目：广州市卫生计生科技一般引导项目（20181A011023）①广州市红十字会医院（暨南大学附属广州红十字会医院）广东 广州 510220通信作者：张素平氯化锂-匹罗卡品癫痫模型中海马神经元钾通道Kv1.1的表达变化*祝萍萍① 范红星① 梁瑞华① 陈江瑛① 谭燕萍① 张素平①【摘要】 目的：研究A 型钾通道亚型Kv1.1在癫痫大鼠海马神经元中的蛋白表达和电生理功能变化，初步探讨Kv1.1在癫痫发生中的作用和意义。
