水稻纹枯病菌(Rhizoctoniasolani)原生质体制备与再生技术及优化
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水 稻 纹枯 病 菌 ( R h i z o c t o n i a s o l a n i ) 原 生质体 制 备与再 生 技术及 优化
孔丹 丹 ,阙亚伟 ,闫霞 ,李亚 ,陈卫 良,王政逸
( 浙 江 大 学 生 物 技 术研 究 所 , 杭州 3 1 0 0 5 8 )
摘 要 水稻 纹枯 病 的 病 原 茵是 立 枯 丝 核 茵 ( Rh i z o c t o n i a s o l a n i Kt i h n ) , 其病原茵( R .s o l a n i Ki i h n ) 又 称 为 水 稻 纹 枯 病( r i c e s h e a t h b l i g h t ) 茵, 由立 枯 丝核 茵侵 染 引起 的 水稻 纹 枯 病 是 水稻 上 最 重 要 的病 害之 一 . 为 建 立 高 效 的 水 稻 纹 枯 病 菌 原 生 质体 制 备 技 术 体 系 , 采用0 . 7 mo l / L Na C l 作为渗透 稳定剂 , 对 Gl u c a n e x 、 溶壁 酶( 1 y wa l l z y me ) 、 纤 维 素
KONG Da n d a n,QUE Ya we i ,YAN Xi a ,LI Ya ,CHEN We i l i a n g ,W ANG Z h e n g y i ( I n s t i t u t e o f Bi o t e c h n o l o g y Zh e j i a n g Un i v e r s i t y , Ha n gz h o u 3 1 0 0 5 8 ,Ch i n a)
h t t p: / / www. j o u r n a l s . z j u. e d u . c n / a g r E — ma l : z d x b n s b @z j u . e d u. c n DOI : 1 0. 3 7 8 5 / j . i s s n . 1 0 0 8—9 2 0 9 . 2 0 1 2 . 0 8 . 0 7 1
c u l t i v a t e d r i c e wo r l d wi d e .Un l i k e mo s t o t h e r f u n g a l p a t h o g e n s ,R.s o l a n i f o r ms h e t e r o k a r y o t i c v e g e t a t i v e my c e l i a
关键词
水 稻 纹 枯病 菌 ; 原 生 质 体 ;制 备 ;再 生
中图分类号
S 4 3 5 . 1 1 1
文献标志码
A
Te c h n o l o g y a nd o pt i mi z a t i o n o f p r e pa r a t i o n a nd r e g e ne r a t i o n o f pr o t o p l a s t s f r o m r i c e s he a t h b l i g ht
酶( c e l l u l a s e - R 一 1 0 ) 、 离析 酶 ( ma e e r o z y me — R 一 1 0 ) 、 蜗牛酶 ( s n a i l a s e ) 、 崩 溃酶 ( d r i s e l a s e ) 和裂 解酶( 1 y s i n g e n z y me ) 等 7
f u n g u s Rhi z o c t o ni a s o l an i .J o u r n a l o f Z h e j i a n g Un i v e r s i t y( Ag r i c . & Li f e S c i . ) ,2 0 1 3 , 3 9 ( 3 ) : 2 7 4—2 8 0
Su mma r y Ri c e s h e a t h b l i g h t c a u s e d b y Rh i z o c t o n i a s o l a n i Kf i h n i s o n e o f t h e mo s t i mp o r t a n t d i s e a s e s o n
浙 江 大 学 学报 ( 农业与生命科学版) 3 9 ( 3 ) : 2 7 4 ~ 2 8 0 , 2 0 1 3
J o u r n a l o f Zh e j i a n g Un i v e r s i t y( Ag r i c .& Li f e S c i . )
种 不 同的胞 壁 裂 解酶 降解 水 稻 纹 枯 病 菌 G 【 ) _ 1 l 8茼 株 细 胞 壁 的 作 用进 行 测 定 , 并 对 不 同 酶 组 合 及 其 酶质 量 浓 度 进 行 优 化 筛选 . 结果显示 : G l u c a n e x对 水稻 纹枯 病 菌 细胞 壁 的 降解 效 果 最 好 , 用 2 0 mg / mL G l u c a n e x处 理 1 g茵丝 4 h 后, 可释 放 1 1 8 . 5 ×1 O 个原 生质 体 ; 用1 5 mg / m L G l u c a n e x 和 1 0 mg / mL 1 y w a l l z y me 混合酶处理, 可 高效 降 解 水稻 纹枯病茵细胞 壁 并 获 得 大量 原 生 质 体, 原生质体产量达 3 . 0 9× 1 0 个/ g茵丝 , 再生率达 5 8 ; G l u c a n e x 和 I y wa l l z y me的 混 合 酶 对 不 同 水稻 纹 枯病 菌 菌株 的 细 胞 壁 降 解和 原 生 质 体 释 放 没 有 显 著 差 异 . 可见 , 上述帝 l 备 水稻 纹 枯 病 菌原 生质 体 的 方 法具 有 较 好 的 高效 性 和 适 用 性 , 可 满 足 该 菌 分 子 遗传 研 究 的 需要 .