内分泌调节基因在三倍体雌性虹鳟不同发育阶段的表达分析

虹鳟鱼全雌三倍体制种技术引进与应用可行性研究报告填写说明一、本可行性研究报告（格式）为自治区科技攻关（含重大专项）和重点项目计划、自治区高技术研究发展计划、自治区科技成果转化专项资金项目申报的统一格式。

请严格按要求填写各项内容，具体填报要求如下：1. 总体目标集中、明确；研究任务和内容重点突出；所选的技术路线可行；经费预算根据充分；相关证明文件等附件齐全。

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二、相关填报信息的说明。

申请人：指项目组组长或项目主持人。

申请项目类型：01.重大专项；02.科技攻关项目；03.国际科技合作项目；04.软科学研究项目；05.高技术研究发展项目；06.科技成果转化专项资金项目。

推荐部门：指项目申请单位所属行业部门或所在地州市科技行政管理部门等具有推荐资格的单位。

单位性质：01.事业型研究院所；02.大专院校；03.政府机关；04.群众团体；05.其他事业单位；06.转制为企业的科研院所；07.国有企业；08.集体企业；09.私营企业；10.联营企业、股份有限公司、有限责任公司、股份合作企业；11.其他内资企业。

技术来源：01.国外技术；02.中科院及国家部委属科研院所和高等学校；03.区外属科研院所和高等学校；04.区内属科研院所和高等学校；05.区外企业及所属科技机构；06.区内企业及所属科技机构；07.引进技术本单位消化创新；08.自有技术；09.其他。

技术领域：01.人口与健康；02.资源；03.环境；04.农业；05.能源；06.材料；07.制造业；08.信息产业与现代服务业；09.交通运输；10.城镇化与城市发展；11.公共安全与其他社会事业；12.决策与咨询；13.其他。

虹鳟鱼全雌三倍体制种技术引进与应用（提示：此文档word版本！下载后可任意编辑修改！）一、项目立项的必要性和意某某某某区科学技术发展规划、重大工程建设、重大装备开发、重大技术引进消化某某某某区经济社会发展需求结合的程度）（一）项目立项的必要性1、项目符合产业发展政策随着我国经济的快速发展、农业综合生产能力的不断提升和入世后农某某市场竞争的加剧，以及人民消费水平、观念和结构的变化，整个农某某市场供求质量和种类也趋于优质和多元化，而特色、优质、绿色农产品需求持续增长。

为此，新疆提某某市场需求为导向，某某区域特色农业资源优势，加大特色农产品开发和产业化经营力度，实现新疆农业产业结构优化和农民增收，某某区某某村经济发展的思路。

本项目依托新疆天润赛里木湖渔业科技开发有限公司引进芬兰国家渔业创新中心虹鳟鱼全雌三倍体制种技术，制订产业化制种技术规程，充分利用某某县丰富的地表水资源，尤其是泉水、山溪水、常年流水的冷水资源，大规模应用虹鳟鱼全雌三倍体制种技术，调整某某县农业产业结构，助民增收。

2、稳边富民，转变经济增长方式的迫切需要某某县地处新疆西北边陲，三面环山，与哈萨克斯坦共和国接壤，边境线长达276公里，占博州边境线总长的2/3。

居住着汉、蒙、哈、维、回等19个民族某某县人口7.3万，其中少数民族人口2.9万人，农业人口4.2万人，牧业人口0.56万人，是一个以农业为主，农牧结合的某某县。

受气候条件制约某某县以种植业为主、畜牧业为辅，农业产业结构单一，农牧民收入渠道狭窄，使得农牧民改变传统生产方式、拓宽收入渠道的积极性非常高。

本项目的引进推广，使农民突破土地限制、牧民放下羊鞭，改变传统的经营理念，转变经济增长方式，投入到产值高、效益好的全雌虹鳟鱼养殖业中来，以提高其人均收入。

项目实施完成后，可在某某县6某某镇场27户养殖户的基础上新增20余户，对调某某县农业产业结构和稳边富民有着极为深远的意义。

3、某某市场需求水产品是蛋白质、无机盐和维生素的良好来源，尤其是蛋白质含量丰富，利用率高达85%—90%，而且水产品肌纤维比较纤细，蛋白质的组织结构松软，水分含量较多，所以肉质细嫩，易为人体消化吸收。

专利名称：一种虹鳟全雌三倍体规模化制种方法专利类型：发明专利
发明人：徐革锋,黄天晴,刘恩慧,谷伟,王炳谦,王高超申请号：CN202210194025.4
申请日：20220301
公开号：CN114532259A
公开日：
20220527
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种虹鳟全雌三倍体规模化制种方法，属于鱼类性别调控和倍性育种技术领域。

本发明开发了基于体色标记的雌核发育技术，批量化创制全雌种质，再通过性别控制技术批量化诱导全雌种质为性逆转雄鱼(伪雄鱼)，通过伪雄鱼与普通雌鱼杂交获得全雌受精卵，并利用压力处理，限定了受精卵放入压力装置的压力和放入时长，最终达到批量化生产虹鳟全雌三倍体的目的。

本发明有效解决了虹鳟养殖产业的三倍体苗种供给难题，为进口三倍体苗种国产化替代提供了解决方案。

申请人：中国水产科学研究院黑龙江水产研究所
地址：150070 黑龙江省哈尔滨市道里区河松街232号
国籍：CN
代理机构：北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：张换君
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doi: 10.7541/2021.2019.193虹鳟spindlin 基因克隆及不同倍性的表达分析史秀兰1, 2黄天晴2徐革锋2邹作宇3谷 伟2程 琳2刘晨斌2王炳谦2(1. 上海海洋大学, 上海 201306; 2. 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所, 哈尔滨 150076;3. 哈尔滨市农业科学院, 哈尔滨 150028)摘要: spindlin 基因是减数分裂纺锤体相关因子, 为了研究spindlin 基因在二倍体和三倍体雌性虹鳟减数分裂过程中出现的差异, 通过cDNA 末端快速扩增(RACE)技术获得spindlin 基因cDNA 4529 bp(GenBank 登录号:MN378564), 其中3′非编码区(UTR)和5′非编码区(UTR)分别长3662 bp 和141 bp, 开放阅读框(ORF)长726 bp, 编码241个氨基酸, 该蛋白质序列的相对分子量为28.3 kD, 理论等电点值为5.94, 无跨膜结构。

同源性分析表明,虹鳟(Oncorhynchus mykiss )与银大马哈鱼(Oncorhynchus kisutch )同源最高, 高达99.59%。

系统发育进化树显示, 虹鳟与大鳞大马哈鱼(Oncorhynchus tshawytscha )和红点鲑(Salvelinus alpinus ), 聚为一支。

实时荧光定量(RT-PCR)结果显示, spindlin 基因在二倍体雌性虹鳟卵巢、肾、肝、脾、肌、鳃、心、眼、肠和鳍组织中均有表达, 其中, 在卵巢中的表达量极显著高于其他组织(P <0.01)。

对于二倍体雌性虹鳟, 在受精后240—300d (days post fertilization, dpf)发育阶段, spindlin 基因在卵巢组织中的相对表达量显著下降。

对于三倍体雌性虹鳟, 该基因在240—330 dpf 阶段的表达量显著上升。

在同一发育阶段中, spindlin 基因在二倍体雌性虹鳟卵巢中的表达量较三倍体雌性虹鳟相对较高, 且均存在极显著差异(P <0.01)。

三倍体虹鳟鱼发眼卵分批孵化研究简报作者：张丽媛杨春林胡仁云来源：《南方农业·上旬》2017年第04期摘要于2015年11月、2016年1月、2016年3月分3个批次从美国引进4万粒、4万粒、5万粒三倍体虹鳟鱼发眼卵进行孵化试验研究。

孵化设施和步骤相同，孵化条件除孵化时间和孵化水温不同外皆相似或相同，详细记录孵化过程和条件。

发现试验温度5～13℃区间，温度越高，开始破膜和全部破膜天数越短。

9～10℃对应上浮率和生长至3 cm长度成活率最高，12～13℃时最低，5～6℃时居中。

3批次孵化水温中，较理想的水温为9～10℃，对应时间为1月份。

关键词三倍体虹鳟鱼；发眼卵；孵化中图分类号：S917.4 文献标志码：A DOI：10.19415/ki.1673-890x.2017.10.020知网出版网址：http：///kcms/detail/50.1186.s.20170410.2333.008.html 网络出版时间：2017-4-10 23：33：00三倍体虹鳟鱼是四倍体虹鳟鱼和普通二倍体虹鳟鱼杂交产生的全雌性不育虹鳟鱼[1]，是以养殖高档商品鱼为目的而研究出的多倍体虹鳟鱼，相比普通虹鳟鱼，因其体内有3组染色体，无法进行减数分裂，不存在性腺发育现象，具有生长周期短、抗病抗逆能力强、个体大、饲料转化率高、鱼肉品质高等特点，经济价值很高，近年来备受养殖户推崇[2-5]。

进行三倍体虹鳟发眼卵分批孵化试验研究，有助于探索发眼卵最适孵化条件，可在提高上浮率和成活率，降低养殖成本的同时，为养殖户提供优质苗种。

1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 发眼卵于2015年11月、2016年1月、2016年3月直接从美国引进三倍体虹鳟发眼卵，3批次数量分别为4万粒、4万粒、5万粒。

1.1.2 孵化设施孵化设施设在面积约16 m2、有窗帘的室内，由孵化池和孵化槽组成。

孵化池为带流水水泥池，长4.0 m、宽1.0 m、高0.5 m，中间及后部有出水孔，进排水方便。

三倍体雌性虹鳟性腺发育过程中lc3b基因的表达分析黄天晴;王星然;王彦娜;孙慧智;韩英【摘要】旨在证明细胞自噬与三倍体雌性虹鳟性腺败育的关系.利用RT-PCR扩增虹鳟自噬基因lc3b(Microtubule associated protein 1 light chain 3 beta,lc3b)的编码区序列,通过透射电镜观察三倍体雌性虹鳟不同发育阶段性腺中自噬小体的形态,结合不同发育阶段性腺中lc3b基因和蛋白的表达,来证明细胞自噬的发生.结果表明,在200 dpf-270 dpf(Days post fertilization,dpf)这个发育阶段,lc3b基因以及自噬蛋白LC3B-II/LC3B-I的表达处于相对较高的水平,在这个时期内,都观察到了自噬体结构的存在.这些结果证明了性腺细胞自噬为三倍体雌性虹鳟性腺败育的主要原因之一.%This work aims to show a new light on the relationship between autophagy and gonadal regression of triploid female rainbow trout. Autophagy gene lc3b of rainbow trout was cloned by RT-PCR,and its expressions in gonads of triploid female rainbow trout were analyzed at different developmental period in mRNA and protein level. Gonadal ultrastructures were observed under transmission electron microscopy. Results showed clear evidence that lc3b gene was highly expressed in gonads of triploid female rainbow trout during the period of 200dpf to 270 dpf,in which autophagosome structures were identified. In this stage,the conversion of LC3B-I to LC3B-II was greater. These results demonstrated autophagy played pivotal roles in gonadal regression of triploid female rainbow trout.【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2017(033)007【总页数】6页(P179-184)【关键词】三倍体;虹鳟;自噬;LC3B;性腺发育【作者】黄天晴;王星然;王彦娜;孙慧智;韩英【作者单位】东北农业大学动物科学技术学院,哈尔滨 150030;东北农业大学动物科学技术学院,哈尔滨 150030;东北农业大学动物科学技术学院,哈尔滨 150030;东北农业大学动物科学技术学院,哈尔滨 150030;东北农业大学动物科学技术学院,哈尔滨 150030【正文语种】中文虹鳟作为主要冷水性养殖鱼类，其不育的雌性三倍体个体较二倍体具有更多的生长优势，且能够避免生殖死亡而得到广泛应用。

黑龙江所取得虹鳟全雌三倍体制种工艺核心关键技术新突破佚名
【期刊名称】《中国水产》
【年(卷),期】2016(000)003
【摘要】日前,以中国水产科学研究院黑龙江水产研究所育种学科冷水鱼遗传育种研究方向带头人王炳谦研究员为负责人的＂虹鳟选育课题组＂,通过＂十一五＂、＂十二五＂近十年的技术攻关,于近期在制种工艺研发方面取得重大技术突破,建立了
具有自主知识产权的虹鳟全雌二倍体和全雌三倍体制种技术成套解决方案，有望打破欧美渔业发达国家在此方面的技术垄断。

【总页数】1页(P45)
【正文语种】中文
【相关文献】
1.热休克诱导全雌虹鳟三倍体 [J], 王炳谦;徐连伟;贾钟贺;牟振波;范兆廷
2.全雌或三倍体虹鳟网箱养殖技术 [J], 刘力; 康萌
3.全封闭循环水系统中全雌三倍体虹鳟发眼卵孵化及鱼苗培育技术 [J], 杨晨;杨茂源;李梅;王尚;伍仕焱
4.陆基封闭式循环水系统全雌三倍体虹鳟幼鱼养殖效果分析 [J], 杨茂源;王尚;孙建;伍仕焱;李梅
5.黑龙江水产研究所“金鳟全雌三倍体制种技术”取得重要进展 [J], 无
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