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水产动物免疫学的基础知识一、鱼类免疫学简史：免疫学技术应用于预防人类和动物的疾病是免疫学的最大成就之一。
许多年来，牛痘接种是个体先前未受该病病原体感染，避免该病的唯一手段。
随同1934年磺胺药和二十世纪40年代抗生素的问世，治疗严重疾病就有了另外的方法。
但即使如今，免疫接种仍是预防疾病的主要方法。
随着人们更多学会控制关于动物的免疫应答和与其保护作用有关的疾病抗原，则可指望免疫接种在将来更为重要。
在了解了免疫学应用于人医和兽医的某些有意义的早期历史之后。
再来看鱼类的免疫。
鱼类的免疫学历史很短，其技术类似人医的经验，不同于抗原给予的方法、抗体试验和保护试验。
鱼类免疫学中使用的技术，随鱼的种类、病原体和环境而定。
医学和兽医学发达国家的大多数居民已普遍接种预防天花，脊髓灰质炎、白喉，有时也接种预防麻疹、斑疹伤寒、破伤风、伤寒和流行性感冒。
最早正式使用牛痘接种技术于人之一的Edward Jenner（1749~1823），首先注意到接触过牛痘的挤奶女工，对可怕的天花病的流行不敏感。
牛痘病毒[一种痘苗病毒（vaccine virus），vaccine一词即源于此]是一种类似于天花病毒的病毒，但牛痘不会造成人的严重疾病，却具有对天花的免疫性。
Jenner也熟悉当地的历史情况，在那，土耳其人划破感染个体的脓疱，涂抹于健康人身上使之产生天花，这样他们对以后该并的攻击就自动获得免疫力。
Jenner的牛痘接种程序证明是很成功的，因此在欧洲一些国家即开始大量种牛痘。
免疫学从此就发展成为一门为人们所确认的科学。
著名的法国微生物学家Louis Pasteur（1822~1895）采用类似Jenner所使用的技术，为一被疯狗咬伤的小孩免除狂犬病患。
Pasteur已知狂犬病病毒通过其非正常寄主的动物组织就变弱或减弱，随后其毒性即减弱。
当毒性减弱的病毒接种至病人时，很快产生能保护病人免遭有毒性病毒伤害的特异性抗体。
Pasteur也研究炭疽[炭疽杆菌（Bacillus anthracis）]，这是那时威胁着牛、羊业的一种细菌性病。
《水产动物免疫学》课程教学大纲一、课程简介二、课程目标《水产动物免疫学》是我校水产养殖学拔尖人才班的专业选修课。
课程主要以水产动物免疫系统、免疫应答、免疫功能等为基础，使学生深刻理解水产动物免疫学的基础知识和基本原理及各类水产动物的免疫特点，能够初步运用免疫学理论和技术，诊断防治水产动物疾病和开展其他相关免疫应用的科学。
在了解水产动物免疫学的新技术与发展趋势的同时，结合国家建设和民族复兴的新时代背景，增强学生家国情怀与文化自信，激发学生使命感和责任心。
通过理论教学达到以下课程目标：三、课程目标与毕业要求对应关系本课程的课程目标对水产养殖学专业毕业要求指标点的支撑情况如表2所示：四、课程目标与教学内容和方法的对应关系五、学时分配各章节的学时分配如表4所示。
六、课程学生成绩评定方法1.课程考核与成绩评定方法课程最终成绩使用百分制；课程最终成绩构成比率：平时占50 %，期末占50 %；理论课程期末考核形式：开卷考试或小论文。
平时成绩至少包含4项考核项目，总占比50%，考核项目包括：课程思政实践（占5%）、课后作业（占15%）、出勤（占10%）、课堂测验（占10%）、课堂互动（占10%）等。
七、教学资源八、课程目标达成情况评价在课程结束后，需要对每一个课程目标（含思政课程目标）进行达成情况进行定性和定量评价，用以实现课程的持续改进。
其中课程目标达成情况的定量评价算法如下：1、使用教学活动（如课程思政实践、课后作业、课堂测验、课堂互动等等）成绩或期末考试部分题目得分率作为评价项目，来对某个课程目标进行达成情况的定量评价；2、为保证考核的全面性和可靠性，要求对每一个课程目标的评价项目选择超过两种；3、根据施教情况，评价项目可以由教师自行扩展，权重比例可以由教师自行设计；4、对某一个课程目标有支撑的各评价项目权重之和为1；5、使用所有学生（含不及格）的平均成绩计算。
●课程分目标达成度计算公式如下（参照教学计划，本课程分目标一共有4个）：δi=αi*A/100+χi*B/100 (i=1-4)●其中：A、B分别对应平时考核和期末考核的平均成绩（百分计）；各考核环节分目标权重系数如下表：分目标序号平时考核分目标权重系数αi期末考核分目标权重系数χi 目标1 0.5 0.5目标2 0.5 0.5目标3 0.5 0.5目标4 0.5 0.5●注：平时考核、期末考核各占50%。
水产动物营养免疫学在过去的20 多年里，包括我国在内的许多国家特别是发展中国家的水产养殖业有了较大发展，水产品的产量有了大幅度提高，水产养殖业在这些国家社会经济领域中的地位也越来越重要。
然而，在最近的10 多年里，随着水产养殖业的迅速发展和养殖规模的不断扩大，养殖集约化程度的不断提高，水产养殖动物的病害频繁发生，给水产养殖业造成了巨大损失。
为了减少经济损失，在养殖过程中人们经常投放各种化学药物治疗和控制病害。
•但是，经常使用药物防治疾病则会使病原体对某些药物产生抗药性，使得宿主动物的细胞免疫和体液免疫功能下降；而且药物在水中的积累极易污染水体，造成水体生态平衡的破坏，更为严重的是药物在水产动物体内的残留直接威胁到人类的食品安全与健康。
面对这种情况，较多学者将目光投向营养物质的免疫学作用这一新的研究领域。
•研究表明，饵料和水体中的营养素种类与数量不仅影响水产动物的生长发育与繁殖，而且还影响其免疫功能、抗逆能力与健康状况。
不含抗生素和激素的全价优质配合饲料既可以全面保证水产动物的营养需求，满足水产动物对生长、发育、繁殖和代谢的需要，又不会形成任何药物残留；同时，还可增强机体的免疫力，提高抗逆抗病力，促进健康生长。
可见，营养与免疫的关系显著影响水产动物的产量与品质。
上述研究成果为水产动物营养免疫学这一交叉学科的建立奠定了基础，为其进一步发展创造了条件。
•水产动物营养免疫学是研究营养物质对水产动物细胞免疫、体液免疫功能和抗逆抗病力影响的一门科学。
一方面，它对深刻揭示营养物质对水产动物的免疫学作用具有重大的理论意义。
另一方面，对水产饲料业和水产养殖业的技术升级与跨越式发展具有现实的指导意义，对“无公害食品行动计划”的实施和绿色水产品的生产及水产养殖业的可持续发展也必将产生深远的影响。
一、维生素A 的免疫作用•维生素A（VA ）是水产动物细胞代谢和亚细胞结构必不可少的重要成分。
V A 有促进生长发育和维护骨骼健康的作用，可促进新生细胞的生长，对维持眼和鳃的正常结构及功能非常重要，并有助于提高免疫力和抗感染力。
•在饲料中添加高剂量的V A可使大西洋鲑（Salmo salar ）的免疫能力提高，对气单胞菌（A. salmonicida ）的抵抗力增强(Thompson等，1994)。
V A还可降低鱼体对一些传染性疾病的易感性，强化巨噬细胞的功能（Blazer，1992）。
投喂含V A（150和300 mg/kg ）的饵料后，金鲷（Sparus auratu ）的呼吸爆发活性提高；而饲喂含高剂量V A（300 mg/kg）的饵料后，其白细胞髓过氧化酶（MPO）含量提高（Cuesta等，2002）。
•Thompson等（1995）试验不同配方的V A和虾青素对虹鳟（Salmo gairdneri ）免疫活性影响时，发现饲喂同时缺乏VA和虾青素的饵料（A-Ax-）后，该组虹鳟血清的抗蛋白酶总活力明显比其他三组要低，同时其血清补体活力有受抑制的倾向；另外饲喂了不含V A（A-Ax-和A-Ax+）饲料的实验组其白细胞迁移减少。
•β-胡萝卜素作为V A的前体物质也可影响水生经济动物的免疫功能。
研究表明，饵料中的β-胡萝卜素可明显提高虹鳟的血清补体活性和血浆免疫球蛋白的总量（Amar等，2000）。
此外，β-胡萝卜素和虾青素能提高虹鳟的体液免疫因子如血清补体和溶菌酶的活性以及细胞免疫因子如吞噬细胞活性和非特异性细胞毒性（Amar等，2001）。
二、维生素C 的免疫作用•维生素C（Vc）是水产动物维持正常生长和生命活动所必需的营养物质，把它作为免疫刺激物也有较多的研究。
Vc在生物体内参与氧化还原反应，在胶原蛋白的合成过程中作为脯氨酸羟化酶的辅酶，直接影响胶原蛋白的合成；Vc还具有防止低价铁的氧化，促进肠道对铁的吸收，增强水生动物的抗病力等生理功能（赵文，1995）。
•饵料中添加Vc能明显降低受副溶血弧菌感染的中国对虾的死亡率（王伟庆和李爱杰，1996）。
配合饵料中添加Vc还能增强中国对虾的抗低氧能力并降低发病率与死亡率2（王安利等，1996a ）。
实验表明，摄取含高剂量Vc（3000 mg/kg）饵料的斑点叉尾鮰（Ictalurus punctatus ）在感染爱德华氏菌后其死亡率为零（Li 和Lovell，1985）。
另据报道，饵料中添加的Vc达50 mg/kg 即可使斑点叉尾鮰正常生长和抗病（Li等，1998）。
•Vc 可以通过影响细胞免疫和体液免疫来提高水产动物的免疫功能。
给虹鳟体内注射Vc 后，淋巴细胞增生明显高于未注射的各组，并且巨噬细胞活化因子（MAF ）的分泌量也比饵料中Vc 少的一组高得多（Hardie 等，1993 ）。
•Waagbo 等（1993 ）给大西洋鲑注射细菌（Aermonas salmoniciola ）后，饵料中VC 含量高的组存活率提高，同时鱼体内的溶菌酶活性也增强。
在饵料中添加维生素C 多聚磷酸酯（LAPP ）能增强对虾血细胞对金黄色葡萄球菌的吞噬能力及对虾的免疫抵抗力，且随着饵料中LAPP 浓度的升高，其吞噬百分率升高，吞噬作用增强（王伟庆和李爱杰，1996 ）。
•饵料中缺乏Vc 时，斑点叉尾鮰巨噬细胞迁移的平均数量下降；而添加高剂量Vc （3000 mg/kg ）后，其巨噬细胞的迁移数量显著提高（Lim 等，2000 ）。
投喂高Vc 含量的饵料时虹鳟的补体活化旁路和巨噬细胞活性均明显增强，若饵料中还含有葡聚糖则虹鳟在接种疫苗后的特异性免疫抗体反应就会增强（Verlhac 等，1996 ）。
•实验表明，青石斑鱼（Epinephelus awoara ）血清溶解羊红细胞（SRBC）的能力随饲料中Vc添加量的增加而提高，与只投喂冰冻小杂鱼的对照组相比，添加量为2000 mg/kg 组的溶血活性提高1倍多（秦启伟等，2000）。
另外补充Vc可提高大菱鲆（Scophthalmus maximus ）血细胞的吞噬能力以及血清溶菌酶的水平（Roberts等，1995）。
•Navarre 等（1989 ）报道，当饵料中Vc 含量为100 mg/kg （最适生长需求量）时，不影响幼虹鳟抗体的产生；当Vc 加入量为其最适生长需求量的 5 倍和10 倍时，均能明显促进抗体的产生，并在10 倍时产生最多。
另外，VC 对水产动物免疫机能的作用效果还与Vc 源有关。
尽管Vc 及其四种衍生物均能提高斑节对虾幼虾的免疫活性，但与摄食其他Vc 源饵料的对虾相比，摄食含足量Vc 单磷酸酯镁和多聚磷酸酯化Vc 饵料的对虾其超氧阴离子（O2- ）产生率和酚氧化酶（PO ）活性都要高（Lee 等，2002 a ）。
•但在饵料中添加Vc对大西洋鲑头肾巨噬细胞吞噬SRBC或产生O2-的能力无明显作用（Hardie等，1991）。
美洲河鲶对爱德华氏菌的吞噬和杀灭作用不受VC的影响（Li，1985）。
饵料Vc对青石斑鱼细胞吞噬金黄色葡萄球菌或头肾细胞吞噬乳胶颗粒的活动也无影响（秦启伟等，2000）。
导致上述研究结果不一致的原因，究竟是VC添加剂量不足，还是动物种间差异所致，目前尚不清楚，由此可见Vc对水产动物免疫功能的作用机制还须进一步研究。
三、维生素E 的免疫作用•维生素E（VE）主要分布在生物膜上，在膜上发挥其抗氧化作用，阻止不饱和脂肪酸氧化成水合过氧化物，从而保护生物膜的结构与功能。
VE可以防止红细胞破裂溶血，延长红细胞的寿命；还可以使巯基不被氧化，以保护某些酶的活性。
VE作为免疫增强物质在饵料中适量添加后，可以促进水生动物巨噬细胞增殖，加强吞噬作用，增强体液免疫活性。
•Blazer 和Wolke （1984 ）指出摄食缺乏VE 饵料的虹鳟，在感染鲁氏耶尔森氏菌（Yersinia ruckeri ）后其T 淋巴细胞和B 淋巴细胞的功能下降。
缺乏VE 还能降低美洲河鲶腹膜巨噬细胞的吞噬功能（Wise 等，1993 a,b ）。
另外，缺乏VE 还可降低大西洋鲑的血清补体活力（Hardie 等，1990 ）以及金鲷替代性补体途径的活性（Montero 等，1998 ）。
•Hardie 等（1990 ）指出摄食高VE 含量饲料的大西洋鲑在感染气单胞菌（ A. Salmonicida ）后的死亡率显著低于VE 含量低的饲料组。
补充VE 似乎能提高虹鳟抵抗鲁氏耶尔森氏菌（Y. ruckeri ）的抗体产生（Ndoye 等，1990 ）以及提高比目鱼吞噬细胞的活力（Pulsford 等，1995 ）。
饵料中添加适量的VE （1200mg/kg ）能刺激金鲷的非特异免疫系统，提高血清溶血活性和前肾血细胞的吞噬能力（Ortuno 等，2000 ）。
•VE 提高水产动物免疫抗病的效果还受到其他因素的影响包括饲料中其他营养物质的影响等。
例如，用含不同剂量VE 和硒的饵料投喂自然感染分枝乳酸杆菌的大鳞大麻哈鱼（Oncrhynchus tschawytscha ），结果发现高VE 和高硒饲料组没有死亡，低VE 高硒或高VE 低硒饲料组鱼的死亡率分别为31% 和3% （Thorainsson 等，1994 ）。
•但另一些研究发现，大西洋鲑对疥疮病的非特异性抵抗力、抗体水平及血清补体反应的杀菌能力与饲料中维生素E含量（0~25mg/kg ）无关，注射灭活菌（A. Salmonicida ）的试验鱼一个月后的体液免疫反应在饲料处理间也未见差异（Lall等，1988）。
Hardie等（1990）也支持上述结果，认为VE对大西洋鲑的体液免疫无影响。
四、多糖的免疫作用•多糖又称多聚糖，是生物有机体内普遍存在的一类生物大分子。
它不仅参与组织细胞的构成，而且是多种内源性活性分子的重要组成成分。
人们研究发现，多糖及糖缀合物(如糖蛋白和糖脂等)参与了细胞各种生命活动的调节，如免疫细胞间信息的传递和接收，这与细胞表面的多糖体的介导有密切关系。
多糖又是细胞表面各种抗原与药物的受体，同时还参与细胞的转化和分裂再生等各种生理过程的调节（田庚元，1994）。
•多糖被认为是一种广谱的非特异性免疫促进剂，能够增强机体的细胞免疫和体液免疫功能，可激活巨噬细胞，促进抗体的形成，激活补体及诱导产生干扰素等（李光友，1995 ）。
利用免疫多糖可提高养殖动物的免疫功能和机体防御能力从而达到防病抗病的目的，已经为越来越多的研究工作者所重视。
王雷等（1994 ）利用富含多糖、生物碱和氨基酸等成分的数种免疫物质制成的饵料对中国对虾进行投喂，发现中国对虾的发病率和死亡率显著降低，体内的抗菌溶菌活力及PO 等免疫指标均有所提高。
•王安利等（1996b ，1998）用富含多糖和有机酸的免疫增强剂作为添加剂制成配合饵料，可使中国对虾的PO活力、吞噬细胞活力和抗菌溶菌活力显著提高。
