绵羊肌内前体脂肪细胞的体外培养

农业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology2007,15(4):617~621*基金项目:国家自然科学基金 （No.30471267） 和教育部重点项目 （No.105167） 资助。

**通讯作者。

Author for correspondence.副教授， 主要从事生物化学和分子生物学领域的研究。

Tel:029­87082424； E­mail:<schao@>.收稿日期： 2006­12­27接受日期： 2007­02­03·研究论文·猪前体脂肪细胞与肌卫星细胞体外联合培养 *孙红梅, 杨公社, 孙 超 **（西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室， 杨凌 712100）摘要：利用差速贴壁法分别纯化前体脂肪细胞与肌卫星细胞， 按 1颐 10的浓度比接种混合培养。

以单独两类细胞培养作对 照， 采用油红 O染色和 Desmin免疫组化染色鉴定， 通过形态学观察和 MTT比色绘制生长曲线研究细胞生长规律。

结果表明， Desmin免疫组化染色观察肌细胞阳性率达 97%以上， 油红 O染色计数诱导分化细胞比率大于 60%； 形态学观察发现， 联合培 养细胞接触汇合前形态呈梭形， 接触后不规则重叠交织生长； 充脂细胞呈现较晚， 且数量稀少；HE染色可见多核细胞融合成 肌管样结构； 测定 2～9d细胞生长曲线显示， 联合细胞组增殖比率大于对照组， 经历 2～3d潜伏期、 3～7d指数生长期后， 并 未与对照组同步进入平台期， 而呈持续缓慢上升趋势。

实验初步实现了体外猪前体脂肪细胞与肌卫星细胞的直接联合培养， 并 显示其与对照组生长特性存在差异。

关键词：猪； 前体脂肪细胞； 肌卫星细胞； 联合培养； 生长特性中图分类号: S185 文献标识码:A 文章编号:1006­1304(2007)04­0617­05Co­Culture of Preadipocytes and Myogenic Satellite Cells in PorcineSUN Hong­mei,YANG Gong­she,SUN Chao**()Preadipocytes and myogenic satellite cells were purified by differential attachments,co­cultured in the ratio of1颐 10of preadipocytes against myogenic satellite cells and alone cultured respectively as controls.Preadipocytes and myogenic satellite cells were identified by Oil Red O staining and Desmin immunohislochemistry staining,respectively.The growth pattern was described by morphological changes,MTT and growth curve of co­cultures.Results showed that the purity of myoblasts exceeded to97%by Desmin immunohislochemistry staining test,and more than60%of preadipocytes developed into differentiated adipocytes.Before confluence,the micrography of typical co­cultures was fusiform shape,but changed into irregular with coinciding and interlacing each other after confluence,the filled lipid cells appeared later and fewer than controls.HE staining showed that polykaryocytes fused into myotubes.The result of MTT and growth curves for8days demonstrated that the growth rate of co­cultures was more than controls remarkably,after the delitescence of growth from2nd to3rd day,a rapid growth to7th day is shown the same as the controls,but kepton slow later growth to9thday.porcine;preadipocytes;myogenic satellite cells;co­culture;growth characters脂肪组织和骨骼肌组织在动物体发育过程中通 过自分泌、 旁分泌及内分泌产生相互作用(LeBris ,2005;Kokta ,2004)， 研究这种相互作用将有 助于进一步研究影响脂肪沉积与肌肉发育相关细胞 因子、 营养因子、 激素类及中草药等的作用机理与功 能， 在畜禽肉脂性状调控、 人类代谢疾病机理研究与 药物筛选方面也将发挥重要作用。

《绵羊精原干细胞的分离富集与体外培养研究》篇一摘要：本文旨在探讨绵羊精原干细胞的分离富集及体外培养技术。

通过实验研究，我们成功分离并富集了绵羊精原干细胞，并进行了体外培养。

本文详细介绍了实验材料、方法、结果及分析，为绵羊生殖生物学及干细胞研究提供了新的思路和方向。

一、引言随着干细胞研究的深入发展，精原干细胞作为生殖细胞的重要组成部分，在畜牧业和医学领域均具有重要价值。

绵羊作为重要的家畜之一，其精原干细胞的研究对于提高繁殖效率和畜牧产业发展具有重要意义。

本文通过研究绵羊精原干细胞的分离富集与体外培养技术，为进一步应用提供理论基础。

二、材料与方法1. 材料（1）实验动物：成年绵羊。

（2）试剂与仪器：胰蛋白酶、DMEM培养基、离心机、显微镜等。

2. 方法（1）精原干细胞的分离与富集：采用睾丸组织消化法，结合密度梯度离心技术进行分离和富集。

（2）体外培养：将分离富集的精原干细胞接种于培养皿中，使用DMEM培养基进行培养。

三、实验结果1. 精原干细胞的分离与富集通过睾丸组织消化法结合密度梯度离心技术，成功从绵羊睾丸组织中分离出精原干细胞，并实现了其富集。

2. 体外培养将分离富集的精原干细胞接种于培养皿中，使用DMEM培养基进行培养。

在适宜的温度和湿度条件下，精原干细胞得以成功增殖并保持良好的形态。

通过显微镜观察，可见细胞生长良好，无污染现象。

四、结果分析1. 分离富集结果分析通过密度梯度离心技术，成功从绵羊睾丸组织中分离出精原干细胞，且富集效果显著。

该方法具有较高的纯度和效率，为后续实验提供了可靠的细胞来源。

2. 体外培养结果分析在适宜的条件下，精原干细胞得以成功增殖并保持良好的形态。

通过显微镜观察，可见细胞生长旺盛，无污染现象。

这为进一步研究精原干细胞的生物学特性和应用提供了基础。

五、结论本文通过研究绵羊精原干细胞的分离富集与体外培养技术，成功实现了从绵羊睾丸组织中分离出精原干细胞，并进行了体外培养。

该方法具有较高的纯度和效率，为进一步研究精原干细胞的生物学特性和应用提供了基础。

绒山羊肌内前体脂肪细胞的基因表达分析杜琛;付绍印;韩志玲;孟丽云;爱伦高娃;高丽霞;成立新;张文广;李金泉【期刊名称】《畜牧兽医学报》【年(卷),期】2013(044)010【摘要】本研究建立了山羊肌内前体脂肪细胞的体外培养模式,以期深入研究山羊肌内脂肪组织发育和脂肪沉积过程中标志基因的表达情况.试验采集1日龄羔羊背最长肌,Ⅱ型胶原酶消化1.5h后依次通过80目、400目筛网过滤,离心,通过差速贴壁法得到增殖旺盛肌内前体脂肪细胞,观察其形态学变化,油红O染色检测细胞内脂肪含量.实时定量PCR法检测LPL、PPAR、FTO、LIPIN基因的表达量.结果表明:原代培养的细胞成分均一,贴壁生长呈短梭状或棱形,具有肌内前体脂肪细胞的形态特征.通过定量分析,FTO mRNA在早期就有较高表达,在分化5～7 d达到最高水平,之后维持较高水平,11d表达量显著下降(P＜0.05).LIPIN mRNA在加入诱导剂后出现波动现象.PPAR mRNA在整个细胞分化和增殖过程中维持一个较稳定的水平.LPL mRNA在分化早期高表达,随着分化程度的增加表达量逐渐降低.本研究成功建立了山羊肌内前体脂肪细胞原代培养方法,并在体外重现了增殖和分化的过程.基因表达量为FTO＞LPL＞ PPAR＞LIPIN,这可为进一步研究脂肪沉积机制及优化山羊肉品品质奠定基础.【总页数】7页(P1532-1538)【作者】杜琛;付绍印;韩志玲;孟丽云;爱伦高娃;高丽霞;成立新;张文广;李金泉【作者单位】内蒙古农业大学动物科学学院,动物育种与繁殖自治区重点实验室,呼和浩特010018;内蒙古农业大学动物科学学院,动物育种与繁殖自治区重点实验室,呼和浩特010018;内蒙古农业大学动物科学学院,动物育种与繁殖自治区重点实验室,呼和浩特010018;内蒙古农业大学动物科学学院,动物育种与繁殖自治区重点实验室,呼和浩特010018;内蒙古农业大学动物科学学院,动物育种与繁殖自治区重点实验室,呼和浩特010018;内蒙古农业大学动物科学学院,动物育种与繁殖自治区重点实验室,呼和浩特010018;内蒙古农牧业科学研究院,呼和浩特010018;内蒙古农业大学动物科学学院,动物育种与繁殖自治区重点实验室,呼和浩特010018;内蒙古农业大学动物科学学院,动物育种与繁殖自治区重点实验室,呼和浩特010018【正文语种】中文【中图分类】S827;S813.3【相关文献】1.山羊肌内前体脂肪细胞诱导分化过程中内参基因的表达稳定性分析 [J], 许晴;林森;朱江江;王永;林亚秋2.绒山羊不同肌肉组织及肌内脂肪细胞的基因表达分析 [J], 杜琛;李金泉;陈秀娟3.从江香猪肌内前体脂肪细胞分化过程中相关基因的表达研究 [J], 徐敏;许厚强;陈伟;杨洋4.滩羊肌内前体脂肪细胞的分离培养及分化相关基因的表达规律研究 [J], 徐小春;陈文娟;赵瑞;马森5.调控牛CEBPA基因表达的miRNA筛选及对肌内前体脂肪细胞增殖和分化的影响 [J], 黄明捷;陈祥;张勇;陈伟;李俊;陆静;张雄;何琦;吴雨因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

绵羊皮肤前体细胞体外分离培养及特征鉴定绵羊皮肤前体细胞是一种具有多潜能的细胞，可以分化为多个细胞类型，具有很大的应用潜力。

体外分离培养和特征鉴定是研究绵羊皮肤前体细胞特性和应用潜力的重要方法。

本文将详细介绍绵羊皮肤前体细胞的体外分离培养和特征鉴定过程。

1.绵羊皮肤前体细胞的体外分离培养方法组织学方法：1)选择有代表性的绵羊皮肤组织，如胚胎期的皮肤组织。

2)将皮肤组织切割成小块，洗涤去除污物。

3)将组织块用胶酶或胰酶等消化酶进行消化，打乳化，使细胞分散。

4)分离得到的单个细胞通过离心等方法进行分选，获得绵羊皮肤前体细胞。

5)将细胞培养于含有适宜培养基和培养条件的培养皿中。

培养基的选择：培养绵羊皮肤前体细胞的基本培养基包括无血清培养基和有血清培养基。

无血清培养基适合细胞增殖初期，对细胞生长和分化的影响小，适宜于进行体外扩增。

有血清培养基则适合细胞增殖后期，有利于细胞生长和分化，提高细胞的增殖活力。

2.绵羊皮肤前体细胞特征鉴定方法细胞免疫荧光染色：这是一种常用的细胞特征鉴定方法，可用于检测特定细胞标记物的表达情况。

绵羊皮肤前体细胞常用的标记物有K15、K14、P63等。

通过细胞免疫荧光染色，可以观察到这些标记物在细胞表面或细胞核中的分布情况，进而判断细胞是否为绵羊皮肤前体细胞。

细胞增殖能力检测：绵羊皮肤前体细胞具有较高的细胞增殖能力，通过进行细胞增殖实验可以评估其增殖能力。

常用的方法有MTT法、EDU法等。

MTT法通过测定细胞的代谢活力来评估细胞增殖能力；EDU法则通过检测细胞DNA合成来评估细胞增殖能力。

细胞分化能力检测：总结：绵羊皮肤前体细胞的体外分离培养和特征鉴定是研究绵羊皮肤前体细胞特性和应用潜力的重要方法。

通过这些方法，我们可以了解绵羊皮肤前体细胞的分离和培养过程，并对其特征进行准确的鉴定。

这有助于深入研究绵羊皮肤前体细胞的生物学特性、分化潜能以及其在再生医学领域的应用前景。

《绵羊精原干细胞的分离富集与体外培养研究》篇一一、引言随着生物医学技术的飞速发展，干细胞研究已成为当前科研的热点领域。

其中，精原干细胞作为一类具有自我更新和分化潜能的细胞，在动物繁殖和人类疾病治疗等领域具有广阔的应用前景。

绵羊作为重要的家畜之一，其精原干细胞的研究对于畜牧业的改良以及医学研究都具有重要意义。

本文旨在研究绵羊精原干细胞的分离富集及体外培养技术，为进一步应用提供理论依据。

二、材料与方法1. 材料实验所需材料包括：绵羊睾丸组织、培养基、试剂、耗材等。

2. 方法（1）精原干细胞的分离与富集a. 采集绵羊睾丸组织，进行组织处理。

b. 采用酶消化法分离精原干细胞。

c. 通过细胞筛选和纯化技术，富集精原干细胞。

（2）体外培养a. 制备培养基，将富集的精原干细胞接种于培养基中。

b. 调整培养条件，包括温度、湿度、气体比例等。

c. 观察细胞生长情况，定期更换培养基。

三、实验结果1. 精原干细胞的分离与富集结果通过酶消化法和细胞筛选技术，成功分离并富集了绵羊精原干细胞。

在显微镜下观察，富集的细胞具有典型的精原干细胞形态特征。

2. 体外培养结果将富集的精原干细胞接种于培养基中，调整培养条件后开始培养。

在显微镜下观察，细胞生长良好，呈现出典型的干细胞分裂增殖特征。

定期更换培养基后，细胞生长更加旺盛，形态更加稳定。

四、讨论1. 精原干细胞的分离与富集技术精原干细胞的分离与富集是本研究的关键步骤。

采用酶消化法和细胞筛选技术，可以有效地分离并富集绵羊精原干细胞。

然而，该过程中仍存在一定难度，需要严格控制实验条件，以保证实验结果的可靠性。

2. 体外培养技术体外培养技术的成功与否直接影响到精原干细胞的应用价值。

通过调整培养条件，如温度、湿度、气体比例等，可以有效地促进精原干细胞的生长和分裂。

此外，定期更换培养基也有助于维持细胞的稳定性和活力。

然而，在体外培养过程中，仍需注意避免细胞老化、污染等问题。

五、结论本研究成功实现了绵羊精原干细胞的分离富集与体外培养。

绵羊前体脂肪细胞分化过程中HOXC8 DNA甲基化的研究赵弼时，刘建华，乔利英，刘旭莹，王凤，刘文忠*（山西农业大学动物科技学院，山西太谷 030801）摘 要：为阐明小尾寒羊HOXC8 DNA甲基化程度在前体脂肪细胞分化过程中的作用，本研究以小尾寒羊皮下前体脂肪细胞为实验材料，利用生物信息学软件和亚硫酸氢盐测序（Bisulfite Sequencing PCR，BSP）分析HOXC8启动子区和第1外显子区序列的CpG岛和甲基化水平；采用qPCR技术检测在绵羊前体脂肪细胞分化过程中HOXC8的表达水平。

结果显示，HOXC8启动子区和第1外显子区各存在1个CpG岛；HOXC8 mRNA的表达量在绵羊前体脂肪细胞分化前极显著高于分化后；在绵羊前体脂肪细胞分化第0天与第2天，HOXC8启动子区甲基化水平差异不显著，第1外显子区甲基化水平差异显著，且HOXC8第1外显子区甲基化水平均极显著高于启动子区（P<0.001）；对HOXC8第1外显子区甲基化水平与其表达水平进行线性回归分析可知，二者呈高度正相关（r=0.994，P<0.000 1）。

HOXC8可能主要在绵羊前体脂肪细胞分化前发挥作用，在分化过程中HOXC8在转录水平的表达受第1外显子区甲基化的正调控。

关键词：HOXC8；甲基化；绵羊；前体脂肪细胞分化中图分类号：S826.2 文献标识码：A DOI编号：10.19556/j.0258-7033.20200519-05脂肪组织在能量代谢中具有重要作用[1]。

绵羊作为世界上主要的肉类家畜资源之一，过多的白色脂肪堆积会影响其胴体品质[2]。

同源框基因（Homeobox，HOX）家族编码一类重要的发育转录因子。

绵羊HOX 基因家族有39个成员，分属于HOXA、HOXB、HOXC 和HOXD 4个基因集群[3]。

该家族的许多成员参与脂肪形成[4-5]。

HOXC8作为HOX家族的一员，在调控细胞成肌[6]、成骨[7]以及成脂分化等生物过程中发挥重要作用。

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201711464097.1(22)申请日 2017.12.29(71)申请人 山西农业大学地址 030800 山西省晋中市太谷县太洛路(72)发明人 赵俊星　张婷　秦旭泽　李戡　王建新　(74)专利代理机构 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350代理人 汤东凤(51)Int.Cl.C12N 5/077(2010.01)(54)发明名称一种绵羊脂肪前体细胞的分离方法(57)摘要本发明公开了一种绵羊脂肪前体细胞的分离方法，通过对绵羊脂肪的清洗、消毒、清理、破碎、消化和离心分离等步骤，得到绵羊脂肪前体细胞，并储放在恒温培养箱中；本发明与常规分离技术相比，分离纯度高、不易污染、保留细胞原有的活力，而且分离费用低，分离后的最佳培养环境易于制造，保证分离后的细胞不分化，保证细胞体外增殖速度，促进了对干细胞研究的发展，适合推广使用。

权利要求书1页 说明书2页CN 108085297 A 2018.05.29C N 108085297A1.一种绵羊脂肪前体细胞的分离方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、将绵羊清洗干净并牵至无菌室中，再使用酒精清洗2-3次，然后将绵羊颈部处死，取出腹股沟脂肪组织5-12g，放入酒精中浸泡10-20s，再放入无菌硫化铅溶液中；S2、取出脂肪组织并置入D -Hanks液中漂洗3-6次，去除结缔组织和血管，再清洗1-2次，置于无菌烧杯中；S3、将S2中处理后的脂肪组织切碎，体积不大于1mm 3，切碎后加入到恒温培养基中，加入0.07-0.08%的I型胶原酶，并将恒温培养基置于37℃的恒温培养箱中，控制培养箱内二氧化碳的浓度的5%；S4、使S3中处理后的脂肪组织碎片消化1-2h，完全消化后加入相同体积的完全培养液，终止消化，再通筛网筛除杂质，得到消化后的液体；S5、将S4中获取的液体置于离心管中，设定转速为2000-2200rpm，时间为6-8min，去除上层漂浮的脂肪细胞和上清液，再用完全培养液清洗2-3次后悬重沉淀；S6、取4-8ml悬重液放到培养皿中，加入12-20ml的完全培养液，混合均匀并置于37℃的恒温培养箱中。

《绵羊精原干细胞的分离富集与体外培养研究》篇一摘要：本文旨在探讨绵羊精原干细胞的分离富集方法以及体外培养条件。

通过研究不同分离富集技术对干细胞纯度及活性的影响，以及体外培养条件对干细胞增殖和分化的影响，为绵羊生殖生物学研究及畜牧业发展提供理论依据。

一、引言随着生物技术的发展，干细胞研究已成为生命科学领域的重要研究方向。

精原干细胞作为生殖系统的重要组成，其分离富集与体外培养技术对于研究动物生殖生物学、遗传育种及医学治疗具有重要意义。

绵羊作为重要的家畜动物，其精原干细胞的分离富集与体外培养研究具有重要的应用价值。

二、材料与方法1. 材料选取健康成年绵羊作为实验动物，采集其睾丸组织。

实验所需试剂、培养基及其他耗材均符合相关标准。

2. 方法（1）精原干细胞的分离富集采用组织块法、酶消化法及流式细胞术等方法对绵羊睾丸组织中的精原干细胞进行分离富集。

（2）体外培养将分离得到的精原干细胞接种于培养板中，采用适宜的培养基及培养条件进行体外培养。

（3）检测与评估通过流式细胞术、免疫荧光染色、PCR等技术对分离富集的精原干细胞进行检测与评估。

三、实验结果1. 精原干细胞的分离富集通过不同方法对绵羊睾丸组织中的精原干细胞进行分离富集，结果显示流式细胞术结合酶消化法能够获得较高纯度的精原干细胞。

2. 体外培养在适宜的培养基及培养条件下，精原干细胞能够良好地增殖与分化。

通过调整培养条件，如添加生长因子、调整温度等，可促进干细胞的增殖与分化。

3. 检测与评估流式细胞术、免疫荧光染色及PCR等检测结果显示，分离得到的精原干细胞具有较高的纯度与活性，且在体外培养过程中能够保持良好的增殖与分化能力。

四、讨论本实验研究了绵羊精原干细胞的分离富集与体外培养技术，通过不同方法对干细胞进行分离富集，得到了较高纯度的精原干细胞。

在体外培养过程中，通过调整培养条件，促进了干细胞的增殖与分化。

这些研究结果为进一步研究绵羊生殖生物学、遗传育种及医学治疗提供了重要的理论依据。

《绵羊精原干细胞的分离富集与体外培养研究》篇一一、引言随着生物医学技术的飞速发展，干细胞研究已成为当前科研领域的热点之一。

其中，精原干细胞作为生殖细胞的重要来源，其分离、富集及体外培养技术对于动物育种、人类生殖医学等领域具有重要意义。

本文以绵羊精原干细胞为研究对象，对其实验过程及技术进行了深入探讨。

二、材料与方法2.1 实验材料本实验采用健康成年绵羊作为实验对象，并收集其睾丸组织。

此外，还需准备相关的实验试剂、培养基及仪器设备等。

2.2 实验方法2.2.1 绵羊精原干细胞的分离与富集首先，将收集到的睾丸组织进行预处理，然后采用酶消化法对组织进行消化，分离出精原干细胞。

接着，通过密度梯度离心法对细胞进行纯化和富集。

2.2.2 体外培养将富集后的精原干细胞接种到培养基中，调整适宜的培养条件（如温度、湿度、气体浓度等），进行体外培养。

在培养过程中，需定期观察细胞的生长情况，并进行相应的处理。

三、实验结果3.1 绵羊精原干细胞的分离与富集结果通过酶消化法和密度梯度离心法，成功分离并富集了绵羊精原干细胞。

在显微镜下观察，细胞形态良好，纯度较高。

3.2 体外培养结果在适宜的培养条件下，绵羊精原干细胞在体外成功增殖，并保持了其干细胞的特性。

通过定期观察，发现细胞生长良好，无污染及异常现象。

四、讨论4.1 绵羊精原干细胞分离富集技术绵羊精原干细胞的分离富集是本研究的重点之一。

酶消化法和密度梯度离心法是常用的干细胞分离技术，通过这两种方法的结合，可以有效提高细胞的纯度和活性。

在实验过程中，需注意掌握好酶的浓度、消化时间等关键参数，以避免对细胞造成损伤。

4.2 体外培养技术体外培养是干细胞研究的关键环节。

在培养过程中，需严格控制培养条件，如温度、湿度、气体浓度等，以保证细胞的正常生长和繁殖。

此外，还需定期观察细胞的生长情况，及时处理异常现象，以确保实验的顺利进行。

五、结论本研究成功分离并富集了绵羊精原干细胞，并在体外成功进行了培养。

《绵羊精原干细胞的分离富集与体外培养研究》篇一一、引言近年来，干细胞研究在生物学和医学领域引起了广泛关注。

精原干细胞（SSCs）作为一类特殊的干细胞，具有自我更新和分化为成熟精子的能力，因此其研究具有重要的科学意义和应用价值。

本文以绵羊精原干细胞为研究对象，对其分离富集与体外培养进行研究，旨在为动物生殖生物学和畜牧业提供理论依据和技术支持。

二、材料与方法1. 材料（1）实验动物：选取健康的成年绵羊作为实验动物。

（2）试剂与仪器：细胞培养基、胰酶、血清、显微镜、离心机、培养箱等。

2. 方法（1）精原干细胞的分离与富集a. 采集绵羊睾丸组织，经过机械破碎和酶解法处理，获得单细胞悬液。

b. 通过密度梯度离心法分离出精原干细胞，并进行纯度鉴定。

c. 采用流式细胞术对精原干细胞进行富集。

（2）体外培养研究a. 将富集的精原干细胞接种到培养基中，置于适宜温度和湿度的培养箱中培养。

b. 观察细胞生长情况，定期更换培养基，并进行细胞活性检测。

c. 通过免疫荧光法检测精原干细胞的分化情况。

三、实验结果与分析1. 精原干细胞的分离与富集结果通过密度梯度离心法和流式细胞术，成功分离出纯度较高的精原干细胞，并对其进行富集。

通过显微镜观察和流式细胞术检测，发现富集后的精原干细胞数量明显增加，纯度得到进一步提高。

2. 体外培养研究结果（1）细胞生长情况在适宜的培养条件下，精原干细胞在培养基中呈现出良好的生长状态，细胞形态清晰可见，生长速度较快。

通过定期更换培养基，可保持细胞的活性。

（2）细胞活性检测结果通过细胞活性检测实验发现，培养的精原干细胞具有较高的活性，表明培养条件适宜，细胞状态良好。

（3）分化情况检测结果通过免疫荧光法检测发现，精原干细胞在体外培养过程中可分化为不同类型的细胞，包括精子细胞和支持细胞等。

这表明精原干细胞具有多向分化的潜能。

四、讨论与结论本研究成功实现了绵羊精原干细胞的分离富集与体外培养。

通过密度梯度离心法和流式细胞术的联合应用，成功提高了精原干细胞的纯度和数量。

《绵羊精原干细胞的分离富集与体外培养研究》篇一摘要：本文旨在探讨绵羊精原干细胞的分离富集方法以及体外培养的条件与效果。

通过研究，我们成功建立了绵羊精原干细胞的分离、富集及体外培养的完整技术流程，为进一步研究其生物学特性和应用提供了基础。

一、引言随着生物医学的不断发展，干细胞的研究已成为生命科学领域的前沿课题。

精原干细胞作为具有高度自我更新能力和多向分化潜能的细胞类型，在畜牧养殖和医学领域具有广泛的应用前景。

本研究的目的是通过对绵羊精原干细胞的分离、富集及体外培养的深入研究，为进一步开发其潜在应用价值提供技术支持。

二、材料与方法1. 材料实验所用的绵羊精液、培养基、试剂等均采购自正规生物试剂供应商，并经过严格的质量控制。

2. 方法（1）精原干细胞的分离与富集：采用密度梯度离心法结合特定细胞表面标记的免疫磁珠法进行绵羊精原干细胞的分离与富集。

（2）体外培养：将分离富集后的精原干细胞接种于特定培养基中，通过调整培养条件，观察其生长、增殖及分化情况。

三、实验结果1. 绵羊精原干细胞的分离与富集通过密度梯度离心法结合免疫磁珠法，成功地从绵羊精液中分离出精原干细胞，并实现了较高的富集率。

2. 体外培养结果（1）生长与增殖：在特定的培养条件下，绵羊精原干细胞呈现出良好的生长与增殖能力，细胞形态清晰，无污染。

（2）分化能力：经过一定时间的培养，部分精原干细胞表现出向其他类型细胞分化的能力，这为后续研究提供了更多可能性。

四、讨论本研究成功建立了绵羊精原干细胞的分离、富集及体外培养的完整技术流程。

这一技术的成功应用，不仅为进一步研究绵羊精原干细胞的生物学特性和应用提供了基础，还为畜牧养殖业提供了新的可能。

例如，通过大规模培养和分化诱导，可以获得更多具有特定功能的细胞类型，用于疾病治疗或动物模型研究等。

此外，绵羊作为模式生物，其精原干细胞的研究也可能为其他哺乳动物干细胞的研究提供借鉴。

五、结论本研究通过对绵羊精原干细胞的分离、富集及体外培养的研究，证实了该技术的可行性和有效性。

《绵羊精原干细胞的分离富集与体外培养研究》篇一摘要：本文针对绵羊精原干细胞的分离、富集以及体外培养进行研究。

通过对相关技术的综合应用，实现了精原干细胞的成功分离和体外培养，为进一步研究其生物学特性和应用领域提供了重要依据。

一、引言随着生物技术的不断发展，干细胞研究已成为当前生物医学领域的热点。

精原干细胞作为一类具有重要生物学特性的细胞，在畜牧养殖、医学治疗和生物科学研究等领域具有广泛的应用前景。

绵羊作为一种重要的家畜动物，其精原干细胞的研究具有重要的实际意义。

因此，开展绵羊精原干细胞的分离富集与体外培养研究具有重要的科学价值和实际应用价值。

二、材料与方法1. 材料（1）动物样品：选用健康的成年绵羊作为研究对象。

（2）实验试剂与器材：包括培养基、血清、离心管、显微镜等。

2. 方法（1）精原干细胞的分离：通过睾丸组织解剖，采用酶消化法分离精原干细胞。

（2）富集纯化：利用细胞培养技术对分离的细胞进行纯化和富集。

（3）体外培养：采用特定的培养基和条件进行体外培养，观察细胞的生长和分化情况。

三、实验结果1. 精原干细胞的分离与鉴定通过酶消化法成功分离出绵羊睾丸组织中的精原干细胞，经显微镜观察和细胞学鉴定，证实为精原干细胞。

2. 精原干细胞的富集与纯化利用细胞培养技术对分离的细胞进行纯化和富集，得到了高纯度的精原干细胞。

3. 体外培养与观察在特定的培养基和条件下，精原干细胞在体外培养中呈现出良好的生长状态，能够正常分裂和分化。

通过显微镜观察，记录了细胞的生长过程和形态变化。

四、讨论本研究成功实现了绵羊精原干细胞的分离、富集与体外培养。

在实验过程中，我们注意到培养基的成分、血清的种类和浓度、细胞的密度等因素对精原干细胞的生长和分化具有重要影响。

此外，为了保证实验的准确性和可靠性，我们采用了多种细胞学鉴定方法对分离和纯化的细胞进行鉴定。

绵羊精原干细胞的研究具有重要的实际应用价值。

在畜牧养殖方面，可以通过该技术提高绵羊的繁殖效率和改良品种；在医学治疗方面，精原干细胞具有潜在的治疗作用，可用于治疗不育症和生殖系统疾病；在生物科学研究方面，精原干细胞的研究有助于深入了解其生物学特性和机制，为其他类型干细胞的研究提供借鉴。

家畜原代前体脂肪细胞离体培养模式研究
段彦龙;杨公社
【期刊名称】《中国牛业科学》
【年(卷),期】2001(027)003
【摘要】本文阐明了家畜原代前体脂肪细胞离体培养模式及其特点、家畜原代前体脂肪细胞有血清培养模式与无血清培养模式、家畜原代前体脂肪细胞离体培养模式中激素、生长因子和细胞因子调控脂肪细胞分化的作用及脂肪细胞离体培养的分化过程以及脂肪细胞分化的鉴定.
【总页数】4页(P51-54)
【作者】段彦龙;杨公社
【作者单位】西北农林科技大学畜牧兽医学院;西北农林科技大学畜牧兽医学院【正文语种】中文
【中图分类】Q487
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