第4章药物的鉴别试验依据药典进行的药物分析主要有三大项内容：鉴别、检查和含量测定。
药物的鉴别试验（ldentification test)，是利用药物的分子结构所表现的特殊的化学行为（如进行化学反应、测定药物的理化常数等）或光谱、色谱、生物学等特征，来判断药品的真伪。
药物的鉴别在药品质量检验工作中属首项工作。
只有在药物被鉴别无误、证实被分析的药物是真的后，才有必要接着进行检查和含量测定等分析工作。
药典所收载的药物项下的鉴别试验方法，仅适用于贮藏在有标签容器中的药物，用以证实是否为其所标示的药物。
这些鉴别试验方法虽然具有一定的专属性，但是还不足以用来确证化合物的结构，因而一与分析化学中的定性鉴别有所区别，不能用来鉴别未知物。
因此，《中国药典》（2010年版）凡例中对药品“鉴别”项目的要求是：鉴别项下规定的试验方法，系根据反映该药品某些物理、化学或生物学等特征所进行的药物鉴别试验，不完全代表对该药品化学结构的确证。
本章讲授药物常用的方法和药物的一般鉴别试验，其中以化学鉴别法和仪器鉴别法为重点。
4.1鉴别试验的项目鉴别项下规定的实验方法，仅仅适用于鉴别药物的真伪。
对于原料药，还应该结合“性状”项下的外观和物理常数进行确认。
4.1.1性状（Description)药物的性状反映了药物特有的物理性质，一般包括外观、嗅、味、溶解度以及物理常数等。
性状观测是药品检验工作的第一步，也是不可省略的极其重要的一步。
只有性状符合规定的供试品，方可继续检查杂质限量和测定含量，否则不必进行检查和含量测定。
1．外观所谓药品的外观，是指药品的外表感官和色泽，包括药品的聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。
如《中国药典》（2010年版）对维生素A的描述为“本品为淡黄色溶液或结晶与油的混合物（加热至60℃应为澄清溶液）；无臭；在空气中易氧化，遇光易变质。
”对于维生素AD的描述为“本品或本品内容物为黄色至橙红色的澄清油状液体；无败油臭或苦味”。
2．溶解度溶解度是药物的一种物理性质，在一定程度上反映了药品的纯度。
《中国药典》（2010 年版）采用“极易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、极微溶解、几乎不溶或不溶”来描述药品在不同溶剂中的溶解性能。
溶解度测定方法：称取研成细粉的供试品或量取液体供试品，置于25℃士2℃一定容量的溶剂中，每隔5min强力振摇30 s；观察30min内的溶解情况，如无目视可见的溶质颗粒或液滴时，即视为完全溶解。
如阿司匹林“在乙醇中易溶，在三氯甲烷或乙醚中溶解，在水或无水乙醚中微溶；在氢氧化钠溶液中溶解，但同时分解。
3．物理常数物理常数是评价药品质量的主要指标之一，其测定结果不仅对药品具有鉴别意义，也反映了该药品的纯净度，是检定药品质量的主要指标之一。
《中国药典》（2010年版）收载的物理常数包括：相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值、吸收系数等。
具体内容见4.2.3项下。
4.1.2一般鉴别试验（General identification test)一般鉴别试验是以药物的化学结构及其物理、化学性质为依据，通过化学反应来鉴别药物的真伪的。
对于无机药物，需根据其组成的阴离子和阳离子的特殊反应，并以药典附录项下的一般鉴别试验为依据进行鉴别试验；对于有机药物，经常采用典型的官能团反应鉴别。
阴阳离子鉴别反应的专属性灵敏度都比较高。
所以，简单无机药物只要用阴阳离子分析就可确定其成分。
而有机定性分析也有一定的专属性，把几种有机定性分析反应综合起来进行分析归纳，就可以作出准确结论。
一般鉴别试验仅供确认药物质量标准中单一的化学药物，如为数种化学药物的混合物或有干扰物质存在时，除另有规定外，应不适用。
此外，通过一般鉴别试验只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物。
例如，经一般鉴别反应的钠盐试验，证实某一药物为钠盐，但不辨认是氯化钠、苯甲酸钠或者是其它某一种钠盐药物。
要想最后证实被鉴别的物质到底是哪一种药物，必须在一般鉴别试验的基础上，再进行专属鉴别试验，方可确认。
根据药物的结构，《中国药典》（2010年版）“附录”项下的“一般鉴别试验”项目分为：丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟化物类、无机金属盐类（钠盐、钾盐、钾盐、钙盐、钡盐、铵盐、镁盐、铁盐、铝盐、锌盐、铜盐、银盐、汞盐、铋盐、锑盐、亚锡盐）、有机酸盐（水杨酸盐、枸橼酸盐、乳酸盐、苯甲酸盐、洒石酸盐）、无机酸盐（亚硫酸盐或亚硫酸氢盐、硫酸盐、硝酸盐、硼酸盐、碳酸盐与碳酸氢盐、醋酸盐、磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物）等。
有关一般鉴别试验的方法和反应的原理、条件、专属性等在下面内容中具体讲授。
1．芳香第一胺类鉴别反应1）鉴别方法：取供试品约50mg，加稀盐酸1ml，必要时缓缓煮沸至溶解，放冷，加0.1mol/L 亚硝酸钠试液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，呈现橙黄色到猩红色沉淀。
2）反应原理：芳香第一胺类药物或水解后、还原后能生成芳香第一胺类的药物均可与亚硝酸钠发生重氮化反应，重氮盐与碱性β-萘酚形成偶氮染料。
（橙黄色～猩红色）2．丙二酰脲类鉴别反应1）鉴别方法：取供试品约0.1g，加碳酸钠试液1ml与水10ml，振摇2分钟，滤过，在滤液中逐滴加入硝酸银试液，即生成白色沉淀，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸银试液，沉淀不再溶解。
取供试品约50mg，加吡啶溶液（1→10)5ml，溶解后，加入铜吡啶试液1ml，即显紫色或生成紫色沉淀。
2）反应原理：司可巴比妥钠、异戊巴比妥、异戊巴比妥钠、苯巴比妥和苯巴比妥钠等原料药及其制剂的分子结构均以丙二酰脲为母体，都能在弱碱性溶液与硝酸银作用生成二银盐的白色沉淀；也能与铜吡啶试液作用而显紫色。
4.2常用鉴别方法4.2.1药物鉴别的目的和特点1．鉴别目的所谓鉴别，就是依据药物的组成、结构与性质通过化学反应、仪器分析或测定物理常数，来判断药物的真伪。
“鉴别”项下规定的试验方法，仅适用于判别药品的真伪，对于原料药还应结合“性状”项下的外观和物理常数进行确认。
2．特点1）为已知物的确证试验。
根据中国药典或局颁标准鉴别药物时，供试品都是已知物，鉴别的日的是确证供试品的真伪，而不是鉴定未知物的组成和结构。
2）鉴别试验是个别分析，而不是系统分析。
其试验项日比较少，一般在四、五个项目以内，有的只做一、两项试验就可以做出明确结论。
3）通常选用药物的化学鉴别反应、红外特征吸收、紫外一可见特征吸收、测定熔点、色谱行为、生物活性、旋光性、折光率或放射性等不同方法鉴别同一种供试品，综合分析实验结果，做出判断。
4）鉴别原料药时，鉴别试验需结合性状项下的外观和物理常数进行确证。
鉴别制剂时，要注意消除辅料的干扰。
鉴别复方制剂中的不同成分时，要注意消除各成分间的干扰。
4.2.2化学鉴别法化学鉴别法系根据药物与化学试剂在一定条件下发生离子反应或官团反应产生不同颜色，生成不同沉淀，放出不同气体，呈现不同荧光，从而做出定性分析结论，是药物分析中最常用的鉴别方法。
如果供试品的反应现象一与药品质量标准中的鉴别项目的反应相同，则认定为是同一种药物。
化学鉴别法有一定的专属性和灵敏度，且简便易行。
鉴别药品时经常使用的化学鉴别法，中国药典和美国药典均称为一般鉴别试验，英国药典和日本药典称为定性反应。
1．呈色反应呈色反应是指在供试品溶液中加入适量的试剂，在一定条件下进行反应，生成易于观测的有色产物。
在药物鉴别试验中常用的反应类型有以下儿种：1）三氯化铁呈色反应：具有此反应的药物，一般都含有酚羟基或水解后产生酚羟基。
2）异羟肟酸铁反应：具有此反应的药物，一般多为芳酸及其酯类、酞胺类。
3）茚三酮呈色反应：具有此反应的药物，一般在其化学结构中含有脂肪氨基。
4）重氮化-偶合显色反应：具有此反应的药物，一般都有芳伯氨基或能产生芳伯氨基。
5）氧化还原显色反应和其他颜色反应。
2．沉淀生成反应沉淀生成反应是指在供试品溶液中加入适当的试剂，在一定条件下进行反应，生成不同颜色或其特殊形状的沉淀，据此可对药物进行鉴别。
例如，巴比妥类药物和芳酰胺类药物常与重金属离子反应，生成不同形式的沉淀。
生物碱及其盐类，以及具有芳香环的有机碱及其盐类常与硫氰化铬铵（雷氏盐）反应，生成沉淀。
3．气体生成反应1）大多数胺（按）类、酞脉类以及某些酞胺类药物：经强碱处理后，加热、可产生氨气。
2）化学结构中含硫的药物：经强酸处理后，加热，可产生硫化氢气体。
3）含碘有机药物：经直火加热，可生成紫色碘蒸气。
4）含醋酸酯和乙酸胺类药物：经硫酸水解后，加乙醇可产生乙酸乙酯的香味。
4．荧光反应某些药物受紫外光线或可见光照射激发后，能发射出比激发光波长较长的荧光。
物质的激发光谱和荧光发射光谱，可以用做该物质的定性鉴别。
常用的荧光发射形式有以下类型。
1）药物本身能够在可见光下发射荧光。
2）药物溶液加入硫酸使其呈酸性后，在可见光下发射荧光。
3）药物与溴反应后，在可见光下发射荧光。
4）药物与间苯二酚反应或经其他反应后，发射出荧光。
5．焰色反应焰色反应系指某些金属元素在无色火焰中燃烧时，使火焰呈现特征颜色的反应。
焰色反应主要用于鉴别金属盐类药物。
如钾离子的焰色呈紫色，钠离子的焰色呈鲜黄色，钙离子的焰色呈砖红色，钡离子的焰色呈黄绿色，锂离子的焰色呈胭脂红色等。
据此可用于钾盐、钠盐、钙盐、钡盐、锉盐等的鉴别。
4.2.3物理常数鉴别法1．熔点测定法熔点系指一种物质照药典方法测定时，由固体熔化成液体的温度，熔融同时分解的温度，或在熔化时自初熔至全熔的一段温度。
熔点是多数同体有机药物的重要物理常数，因此测定熔点可以区别或检查药品的纯杂程度。
国内外药典均用熔点测定法鉴别有机药物的真伪。
可以测定供试品本身的熔点，也可以将供试品按药典规定制成衍生物后，测定衍生物的溶点。
依据待测物质的性质不同，《中国药典》（2010年版）收载了三种熔点测定方法，其中，如未有特殊注明时，均采用“第一法”进行测定。
测定时根据供试品熔融时同时分解与否，调节传温液的升温速度为2.5~3.0℃／min或1.0~1.5℃／min。
要求报告“初溶”（供试品在毛细管内开始局部液化出现明显液滴时的温度）和全溶（供试品全部液化时的温度）。
如维生索C对熔点的要求：“本品熔点为190~192℃”。
随着红外光谱法和色谱法的逐步推广，熔点测定法有减少的趋势。
2．比旋度测定法平面偏振光通过含有某些光学活性化合物的液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转。
旋转的度数，称为旋光度。
偏振光通过长1dm且每1ml中含有旋光物质1g的溶液，在一定波长与温度下测得的旋光度成为比旋度。
测定比旋度（或旋光度）可以区别或检查某些药品的纯杂程度，亦可用以测定含量。
有些药物（如维生素C、氯霉素及其制剂、硫酸奎尼丁和罗通定片等）用旋光法进行鉴别。
