检验实训配方

试验所用试剂配制氨苄青霉素（10 mg/ml）：0. 1g 氨苄青霉，用蒸馏水定容至10 ml ，0 . 22 µm 滤膜过滤分装，于- 20℃保藏。

X- Gal（2 0 mg / ml ）：0 . 2 g X-Ga l溶于10 ml二甲基甲酰胺（DMF），于-20℃保藏。

IPTG（2 0 0mg / ml ）：2 g IPTG ，用蒸馏水定容至10 ml ，0 . 22 µm 滤膜过滤分装，于- 20℃保藏。

卡那霉素（30 µg/ml）：0 . 3 g卡那霉素，用蒸馏水定容至10 ml ，0 . 2 2 µm滤膜过滤分装，于- 20℃保藏。

.Tr i s -甘氨酸电泳缓冲液：25m mo l / l Tr i s ，250 mmol / l甘氨酸，0.1% SDS，pH 8. 3 1×SDS - PAGE上样缓冲液：5 0 m mo l / l Tr i s - H C l（p H 6 . 8 ），1 0 0 m mo l /l二硫苏糖醇（DTT ），2 % SDS，0 . 1 % 溴酚蓝，1 0 %甘油染色液：0 . 1 gR250，25 ml甲醇，1 0 ml冰乙酸，用蒸馏水定容到100 ml脱色液：37 .5 ml 冰乙酸，2 5 ml甲醇，用蒸馏水定容到500 ml透析液：2 . 4 2 gTr i s，8 . 5 g Na Cl，1 0 0 ml 甘油，用蒸馏水定容到1000 ml，p H 8.0 10 mmo l / l 咪唑结合缓冲液：2. 42 g Tr i s，0 . 68 g咪唑，29 . 25 g NaCl20mmo l / l 咪唑结合缓冲液：2. 42g Tr i s ，1. 36 g咪唑，29 . 25 g NaCl50 mmo l / l 咪唑结合缓冲液：2 . 4 2 g Tr i s ，3 . 4 g 咪唑，2 9 . 2 5 g Na Cl250 mmo l / l 咪唑结合缓冲液：2 . 42 g Tr i s，1 7 g 咪唑，2 9 . 2 5 g Na Cl1.5mol / l Tris - HCl ：181 . 7 g Tr i s 溶于1000 ml 蒸馏水，p H 8 . 81 . 0 mol / l Tr i s - HCl：121 . 1 g Tr i s 溶于1000 ml蒸馏水，p H 6 . 8固定液：90 ml乙醇，4.5 ml冰醋酸，用蒸馏水定容到900 ml染色液：AgNO31 . 4g，甲醛（3 7 % ）6 0 0 µl ，加入去离子水700 ml，甲醛在使用前加入。

书写检验 报告书
处理检验 数据
综合实训二 磺胺嘧啶的质量检验
（三）实训时间 具体实训时间安排可参考表3-2-1。
表3-2-1 磺胺嘧啶的质量检验的实训时间安排
实训内容 仪器准备与清洗
试药准备及 试液、指示液制备
性状 鉴别 检查 含量测定
实训时间（分钟） 20
40
10 40 100 90 300
备注 备齐实训用玻璃仪器，除另有规定外，清洗干净，备用
【鉴别】 （1）取本品约0.1g，加水与0.4%氢氧化 钠溶液各3ml，振摇使溶解，滤过，取滤液，加硫酸铜试 液1滴，即生成黄绿色沉淀，放置后变为紫色。
（2）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。 （3）本品显芳香第一胺类的鉴别反应。 【检查】 酸度 取本品2.0g，加水100ml，置水浴 中振摇加热10分钟，立即放冷，滤过；分取滤液25ml， 加酚酞指示液2滴与氢氧化钠滴定液0.20ml，应显粉红色。
综合实训二 磺胺嘧啶的质量检验
三.实训方案 （一）实训形式 本实训涉及红外分光光度法的内容4人一组，永停滴 定法测定含量2人一组。 （二）实训程序
1.仪器准备与清洗
确定仪器及规格
洗净，备用
2.试药的准备与试液、指示液及滴定液的制备
确定试药及规格， 确定实验用量
按用量制备试液、 指示液及滴定液
作好制备记录， 贴上标签，备用
综合实训二 磺胺嘧啶的质量检验
3.药品的检验
检查检品包装及标签，若 是送检样品，应核对检品 包装及标签与所填请验单 的内容是否相符；检查检 品的数量和封装情况等， 并做详细记录
按照药品质量标准及其方法 和有关SOP进行外观检查、 鉴别、一般杂质检查、亚硝 酸钠法测定含量，记录结果

医学实验技术用到的试剂配制方法
实验中用到的试剂配方
一、WB实验
1.电转液（PH=8.3）
甘氨酸 14.5g
Tris 2.9g
甲醇 200ml
蒸馏水至 1000ml
先用蒸馏水溶甘氨酸，最后加甲醇，室温保存，2-3次可用，最好4度保存，可配制成2x转移缓冲液，稀释后可用。

2.TBS缓冲液
1mol/L Tris-HCL （PH=7.5） 10ml
NaCl 8.8g
蒸馏水至 1000ml
可配制成10x转移缓冲液，稀释后可用。

3.TBST缓冲液
20%Tween 1.65ml
TBS 700ml
混匀后即可使用，最好现用现配。

二、免疫染色相关实验
5.多聚甲醛溶液（4%）
多聚甲醛 40g
1×PBS 定容至1L
6.柠檬酸盐抗原修复液（1×）
柠檬酸三钠 3g
柠檬酸 0.4g
dH2O 定容至1L
PH调至6.0
7.盐酸酒精（1%）
浓盐酸 2.5ml
75%乙醇定容至250ml
8.氨水（1%）
氢氧化铵 2.5ml
dH2O 定容至250ml
三、其他
4.红细胞裂解液
NH4CL 2g
KHCO3 0.25g
ddH2O 250ml
0.5M EDTA 250ul
最后用除菌过滤器过滤，待用。

2、碱石灰 白色固体，呈碱性。它由氧化钙粉末 加入氢氧化钠溶液，经充分混和后置铁皿中于200～ 250℃下干燥而成。可以干燥氨、胺等气体。常用于避 免水或二氧化碳进入反应系统的装置中。
3、硅胶 半透明，内表面很大的多孔性固体，对 水有强烈的吸附作用。可干燥氧、氮、氨、胺等气体。 常用于干燥器中。含有钴盐的硅胶，叫变色硅胶，干
六、生理盐水
1.各类动物实验常用的生理盐水 两栖类生理盐水
是0.65%的氯化钠溶液;鸟类是0.75%的;哺乳类和人是
0.9%。
2.任氏(Ringer's)生理盐水 先把6.5g氯化钠、
0.14g氯化钾、0.2g碳酸氢钠和0.01g磷酸二氢钠分别
溶解在少量蒸馏水中，混和后用蒸馏水稀释到980mL。
加入1mL10%氢氧化钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如
果有蛋白质，会出现紫色反应。
4.鉴定脂肪的试剂 苏丹IV溶液的配制：取0.2g苏
丹IV，放入无水乙醇中，加热，使它充分溶解，成为
饱和乙醇溶液。过滤后倒迸试剂瓶内密闭保存备用。
苏丹Ⅲ溶液的配制：0.1g苏丹Ⅲ粉末加入95%乙醇
100mL待全部溶解后便可使用。
2.乙醇(C2H5OH) 有强烈的杀菌作用，渗透力较
大，但固定效果不及甲醛溶液。可使蛋白质凝固，并
有较强的脱水作用，因此，单纯用乙醇固定的材料会
产生硬化和收缩，而使体积变小。对含水量多的材料，
固定应从低浓度开始，逐步转入高浓度。从经济和效
果来考虑，乙醇宜与甲醛等固定液混和使用。常用的
乙醇固定液或保存液浓度都是70%左右。
取0.12g氯化钙溶解在20mL的蒸馏水中，把氯化钙溶
液逐滴加入到上述溶液中，边滴边搅拌，以免产生不
溶性的磷酸钙沉淀。常用于变温动物，如两栖类。