尿素(UREA)检测标准操作规程

血清尿素的测定标准操作规程【目的】学习血清尿素(Urea)测定方法，了解其意义。

【原理】血清尿素（Urea）是蛋白质的正常代谢产物。

它的测定是常用的衡量肾小球功能的指标之一。

肾性血清尿素含量增加，提示肾小球损伤。

是研究药物肾毒性的重要指标之一。

【器材】兔固定架、注射器、烧杯、可见分光光度计、试管、水浴【药品】0.5%氯化高汞溶液、生理盐水【动物】家兔2只【方法】取家兔2只，1只注射氯化高汞5ml/kg（0.5%氯化高汞溶液1.0ml/kg)，另1只注射等量的生理盐水。

48小时后，从家兔耳静脉取血1ml，制取血清，按血清尿素测定方法测定血清尿素含量。

【结果】记录2只家兔血清尿素含量，比较并分析其差别。

附血清尿素(Urea)测定方法【原理】尿素与二乙酰在酸性反应环境中加热，缩合生成色素原二嗪化合物。

因二乙酰不稳定，不宜直接加入，可由化学反应生成。

通常由反应系统中二乙酰一肟与强酸作用，产生乙二酰。

二乙酰和尿素反应，缩合生成红色的二嗪。

根据颜色深浅确定尿素含量的多少。

【试剂】(1)酸性试剂：在三角烧瓶中加蒸馏水约100ml，然后加入浓硫酸44ml及85%磷酸66ml。

冷至室温，加入硫氨脲50mg及硫酸镉(CdSO4·8H2O)2g。

溶解后用蒸馏水稀释至1L，置棕色瓶中冰箱保存，可稳定6个月。

(2)二乙酰-肟溶液：称取二乙酰-肟20g，加蒸馏水约900ml，溶解后，再用蒸馏水稀释至1L，置棕色瓶中，贮放冰箱内可保存半年。

(3)尿素标准贮存液（100mmol/L）:称取干燥纯尿素(MW=60.06)0.6g，溶解于蒸馏水中，并稀释至100ml，加0.1g叠氮钠防腐，置冰箱内可稳定半年。

(4)尿素标准液应用液(5mmol/L)：取5.0ml贮存液用无氨蒸馏水稀释至100ml.【操作】按表T4-1进行混匀后，置沸水中加热12分钟，置冷水中冷却5分钟后，用分光光度计在波长540nm，以空白管调至零点。

比色读取标准管及测定管的吸光度。

SOP标准操作程序UREA 尿素（货号：OSR6134，OSR6234）一、 目的：规范尿素测定的操作程序，确保尿素测定的结果准确二、 适用范围：在Beckman Coulter AU 分析仪上定量测定人血清中的尿素（UREA ） 三、 临床意义尿素在肝脏中合成，它是蛋白质和氨基酸代谢的最终产物。

因此，尿素合成取决于每日的蛋白质摄入量和内源性蛋白质代谢。

在这些代谢过程中产生的绝大多数尿素通过肾小球过滤消除，40 – 60% 扩散返回血液中（与近端小管中的流速无关）。

远侧小管内的重新扩散取决于尿流，受抗利尿激素调节。

在利尿期间，最少量的尿素重新扩散进入血液，大量尿素被排泄到尿液中，血浆尿素浓度很低。

在抗利尿（在少尿性心力衰竭，缺水状态或口渴中，可能出现这种状况）期间，尿素重新扩散到小管内的速度增加，血浆尿素增加。

在肾前性和肾后性肾衰竭中，小管尿流减少，导致远侧小管中的尿素重新扩散增加，肌酐分泌增加。

在心脏代偿失调、蛋白质分解代谢增加和缺水时，尿素会发生肾前性增加。

尿素水平可能因肾脏因素而升高，例如急性肾小球肾炎，慢性肾炎，多囊肾，肾小管坏死和肾硬化。

尿素的肾后性升高可能由泌尿道梗阻引起。

血浆尿素浓度取决于肾灌注、尿素合成速度和肾小球滤过率 (GFR)，在急性肾功能衰竭，慢性肾衰竭和肾前性氮质血症中，可能会升高。

在透析患者中，尿素浓度代表蛋白质的降解，也是代谢状态的指标。

在肾衰竭终末期，尿毒素病征（特别是与胃肠系统有关的尿毒素病征）与尿素浓度有密切的相关性。

在肾功能的鉴别诊断中，血清尿素和血清肌酐通常会一起测定。

四、 方法原理在水和尿素酶存在的情况下，尿素被水解，产生氨和二氧化碳。

在谷氨酸脱氢酶 (GLDH) 存在的情况下，上一反应中产生的氨与 2-酮戊二酸和NADH 结合，产生谷氨酸盐和 NAD+。

单位时间 NADH 吸光度的降低与尿素浓度成正比。

反应原理五、 标本的采集与处理5.1. 受检者的准备：空腹，采集前静坐5min ，如有输液，应在停止输液3min 后在另一侧肢体静脉采集。

血清尿素UREA测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2 实验原理在下述反应中，NAD+生成速率与样本中尿素（尿素氮）的浓度成正比。

通过在340 nm处测定固定时间间隔内吸光度的下降速率，即可测得样本中尿素（尿素氮）的浓度。

尿素酶尿素 + 2H2O 2 NH4＋ + 2 HCO3－谷氨酸脱氢酶NH4＋+α-酮戊二酸+NADH+H+ L-谷氨酸+NAD＋+H2O3 标本：3.1 病人准备：血清无特殊要求。

要留取24小时尿样。

3.2 类型：血清、血浆（不可使用肝素铵）、新鲜尿液。

无溶血和凝块的血清，如果必须使用血浆，建议使用无铵离子的抗凝血剂，如EDTA和肝素钠。

用新鲜尿液作样品时，用蒸馏水作1:100稀释。

3.3标本存放：血清或血浆稳定性：4～25℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1年。

尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1个月。

3.4 标本运输：常温条件下保存运输。

3.5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。

4 实验材料4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司UREA试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成试剂1（R1）：α-酮戊二酸7.5mmol/L谷氨酸脱氢酶＞800U/LNADH 0.35mmol/L二磷酸腺苷 1.5mmol/L Tris缓冲液115mmol/L试剂2（R2）：Tris缓冲液115mmol/L尿素酶＞40000 U/L α-酮戊二酸7mmol/L4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存：在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月。

4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

4.1.5 注意事项：试剂中含有防腐剂叠氮化钠，可能存在一定的刺激作用，请勿直接接触皮肤、眼睛。

1.目的：规范尿素检验操作，保证尿素的质量。

2.范围：适用于本公司车间用尿素的检验。

3.责任：质量管理科、中心化验室主任、检验员对本规程的实施负责。

4.检验依据：GB2441.1-20015.取样依据：按《原辅料取样标准操作规程》取样。

6.内容:6.1 外观：无色结晶或白色结晶性粉未。

6.2 鉴别◆溶剂：硝酸为分析纯；水为纯化水；◆测定方法：取本品0.1g, 加水1ml溶解后，加硝酸1ml，即生成白色结晶性沉淀。

6.3 含量◆试剂与溶液3%硫酸铜溶液、硫酸、20%NaOH溶液、4%硼酸溶液、甲基红指示液、0.2mol/L 盐酸标准液、锌粒◆仪器与设备电子天平、凯氏烧瓶、蒸馏瓶、冷却器、电炉、锥形瓶、滴定管◆操作方法取本品约0.15g，精密称定，置凯氏烧瓶中，加水25ml、3%硫酸铜溶液2ml与硫酸8ml；缓缓加热至溶液呈澄明的绿色后，继续加热30分钟，放冷，加水100 ml，摇匀。

沿瓶壁缓缓加20%氢氧化钠溶液75ml，自成一液层，加锌粒0.2g，用氮气球将凯氏烧瓶与冷凝管连接，并将冷凝管的末端伸入盛有4%硼酸溶液50ml的500ml锥形瓶的液面下；轻轻摆动凯氏烧瓶使溶液混合均匀，加热蒸馏，俟氨馏尽，停止蒸馏；馏出液中加甲基红指示液数滴，用盐酸标准液(0.2mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。

每1ml的盐酸液(0.2mol/L)相当于6.006mg的CH4N2O。

◆计算公式含量%= (V样－V空)·C×0.03003×F ×100%G式中：C——盐酸标准液之摩尔浓度(mol/L)V空——空白所耗标准液之体积(ml)V样——样品所耗标准液之体积(ml)G——样品重(g)F——力价◆结果判定若测得的结果不低于95.0%,则判定为符合规定;否则,判定为不符合规定。

7.文件变更历史:。

迪信泰检测平台
尿素检测
尿素（Urea），又称碳酰胺（Carbamide)，是哺乳动物和某些鱼类体内蛋白质代谢分解的主要含氮终产物，也是目前含氮量最高的氮肥。

作为一种中性肥料，尿素适用于各种土壤和植物。

它易保存，使用方便，对土壤的破坏作用小，是目前使用量较大的一种化学氮肥。

工业上用氨气和二氧化碳在一定条件下合成尿素。

迪信泰检测平台采用液相质谱联用(LC-MS)的方法，使用Thermo Scientific的
U3000快速液相色谱对样品进行分离，Thermo Scientific™ Q Exactive™对样品进行鉴定，可高效、精准的检测尿素的含量变化。

此外，我们还提供其他极性小分子系列检测服务，以满足您的不同需求。

LC-MS测定尿素样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。

周期：2~3周。

项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。

2. 相关参数（中英文）。

3.质谱图片。

4. 原始数据。

5. 尿素含量信息。

迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。

三级文件定标准操作程序第2页共3页生效日期：目的：规范血清尿素/尿素氮(Urea/BUN)测定标准操作规程。

范围：适用于血清尿素/尿素氮(Urea/BUN)测定的标准操作。

职责：生化部检验人员对本规程的实施负责。

规程：1 测定方法：采用动力学紫外法，定量测定血清中血清尿素/尿素氮(Urea/BUN)的含量。

2 测定原理脲酶尿素 + H2O 2NH+4 + CO2谷氨酸脱氢酶2NH+4 + α-酮戊二酸 + NADH + H+ L-谷氨酸 + 2NAD+ + H2O3 标本血清，肝素或EDTA抗凝血浆（不要用肝素铵的抗凝剂），处理方法见标本准备。

稳定性：20-25℃ 7天2 - 8℃ 7天-20℃ 1年4 试剂4.1试剂来源：ROCHE配套试剂（详见试剂说明书）。

贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2－8℃储存至效期末R1：打开后机上稳定28天R2：打开后机上稳定28天准备：直接使用。

4.2 校准物来源：ROCHE配套校准物, 符合SRM916a标准，具体如下：S1：生理盐水S2：C.f.a.s贮存条件：校准物在2-8℃保存可保存至有效期。

准备：直接使用。

定标频率：A试剂盒在仪器上放置42天后B 试剂批号更换后C 由质控结果决定4.3 质控物来源：Precinorm (罗氏正常值质控)Precipath (罗氏病理值质控)其它适合的质控品贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。

准备：直接使用。

质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。

质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。

三级文件定标准操作程序第3页共3页生效日期：5 上机操作见GS200全自动生化分析仪操作维护保养程序。

6 参考范围6.1 尿素：10－50mg/dL6.2 血清/血浆：成人（18－60岁）：8－20mg/dL7 性能指标本法线性范围为血液：：5-400mg/dl ，不准确度允许范围X±9%，不精密度CV=3.4%，尿液：CV=1.9%，灵敏度5mg/dl。

尿素（UREA）检测的标准操作程序一、目的规范在罗氏cobas c311生化分析仪上定量检测人血清、血浆中的尿素，确保检测结果的准确性及重复性。

二、范围检验科生化室检验人员。

三、该SOP变动程序本标准操作程序的改动可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准:专业组长，科室主任。

四、授权操作人检验科经过培训并被授权发报告的人员均可操作。

五、实验原理酶动力学法尿素 + H2O 尿酶 2NH+4+ CO22NH+4 + α-酮戊二酸 + NADH + H+ 谷氨酸脱氢酶 L-谷氨酸 + 2NAD+ + H2ONADH浓度降低的速率与样本中的BUN的浓度成正比，在340nm下进行检测。

六、标本1、标本类型：血清：使用标准取样试管或含分离胶的试管采集。

血浆：肝素、EDTA-K3 、枸橼酸钠或氟化钠/草酸钾抗凝均可。

2、样本稳定性：标本在2－8 度可稳定2 天，15－25度可稳定8小时，-20 度可稳定6 个月。

只能冻融一次。

七、仪器与试剂1、仪器：罗氏cobas c311生化分析仪2、试剂：罗氏原装配套尿素试剂，试剂无需任何处理，可直接使用3、试剂稳定性：未开封试剂盒按要求保存可稳定至有效期末，已开封试剂盒在仪器上可稳定8周八、校准1、校准物：S1:0.9%NaCl，S2:C.f.a.s(罗氏通用校准品，复溶后使用)。

2、校准方法：两点校准。

3、校准频率：每批试剂必须用新鲜试剂和校准一次。

另外，以下情况需要再次校准：校准过期:批校准稳定28天，盒校准7天。

九、操作程序1.每日开机准备：1.1仪器处于关机状态1.1.1检查供水、排水系统是否正常1.1.2接通仪器左侧电源开关, 以及电脑控制电脑的开关1.1.3登陆：输入用户名mjt及密码123，仪器初始化后进入待机状态1.2仪器处于休眠状态：1.2.1仪器在进入睡眠时指定的时间自动唤醒，或单击[[唤醒]]唤醒仪器；1.2.2系统退出睡眠状态至登录界面，输入用户名及密码，仪器初始化后进入待机状态。