高效液相色谱法测定石杉碱甲缓释微丸的含量

高效液相色谱法定量测定中药千层塔提取物中的石杉碱甲张敬彩;魏杰;钟虹敏;郭志谋;张华【摘要】建立了高效液相色谱快速定量测定中药千层塔提取物中石杉碱甲含量的分析方法.千层塔提取物经甲醇/水/甲酸(10/90/0.2,v/v/v)提取并定容后,过滤膜后直接分析.色谱分离选用XCharge C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以水(含0.1％三氟乙酸)和乙腈(含0.09％三氟乙酸)为流动相进行梯度洗脱,流速为2mL/min,于310 nm波长下检测,可在10 min内完成石杉碱甲的快速分离分析.结果表明,石杉碱甲在2.12 ～106mg/L范围内线性关系良好(相关系数为0.9999)；平均加标回收率为102.34％,相对标准偏差(RSD)为0.46％；日内及日间精密度均小于2％,满足定量要求.该方法简便、快速,结果可靠,重现性好,可作为千层塔提取物质量评价的依据.%A high performance liquid chromatographic ( HPLC) method was established to determine the Huperzine A in the extract of Huperzia serrata. After extracted by methanol/ water/formic acid (10/90/0. 2, v/v/v) , the sample was filtered for HPLC analysis. The separation was performed on an XCharge C18 column (150 mm ×4. 6 mm, 5 μm) by gradient elution with water (containing 0. 1% (v/v) trifluoroacetic acid) and acetonitrile (containing 0.09% (v/v) trifluoroacetic acid) as the mobile phases. Rapid separation was achieved within 10 min at a flow rate of 2 mL/min with ultraviolet absorption detection at a wavelength of 310 nm. Under the optimized conditions, good linearity was obtained in the range of 2. 12 - 106 mg/L with the correlation coefficient (R2) of about 0. 999 9. The average recovery was 102. 34% with the relative standard deviation (RSD) of 0.46%. The intraday and interday precisions were all below 2%.The results demonstrate that this method is simple, rapid and accurate with good reproducibility, and can be used to evaluate the quality of Huperzia serrata.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2013(031)001【总页数】4页(P79-82)【关键词】高效液相色谱法;生物碱;石杉碱甲;千层塔;中草药【作者】张敬彩;魏杰;钟虹敏;郭志谋;张华【作者单位】大连理工大学化学学院,辽宁大连116023;中国科学院大连化学物理研究所,辽宁大连116023;大连理工大学化学学院,辽宁大连116023;中国科学院大连化学物理研究所,辽宁大连116023;大连理工大学化学学院,辽宁大连116023【正文语种】中文【中图分类】O658中药千层塔为石杉科石杉属多年生草本植物蛇足石杉Huperzia serrata(Thunb）T.的全草，出自《植物名实图考》，功能主治清热解毒、止血定痛散瘀。

高效液相色谱法测定石杉碱甲胶囊溶出度
郑国钢;李会林
【期刊名称】《医药导报》
【年(卷),期】2009(028)010
【摘要】目的建立石杉碱甲胶囊溶出度的高效液相色谱方法.方法以盐酸溶液(9→1000)100mL为溶出递质,转速为35r·min-1,取样时间为30min,采用溶出度第三法测定.结果石杉碱甲在0.13～1.02μg·mL-1的浓度范围内,线性关系良好.线性方程为:A＝103.95C-0.15(r＝1.0000);平均回收率为98.0%(RSD＝0.7%);4批样品30min平均溶出度均＞80%.结论该方法简便、准确、重现性好,可用于石杉碱甲胶囊的质量控制.
【总页数】3页(P1351-1353)
【作者】郑国钢;李会林
【作者单位】浙江省食品药品检验所,杭州,310004;浙江省食品药品检验所,杭州,310004
【正文语种】中文
【中图分类】R971;R927.1
【相关文献】
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高效液相色谱法测定蛇足石杉中石杉碱甲的含量顾月华;吴庆庆【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2005(21)8【摘要】目的建立了蛇足石杉中石杉碱甲含量的测定方法并比较植物不同药用部位石杉碱甲的含量.方法采用DiamonsilTm C18柱(200 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇:0.08 mol·L-1醋酸铵缓冲液(40:60,pH=6.0),检测波长为308 nm,流速为1.0 ml·min-1,柱温为室温.结果石杉碱甲在5～100 mg·L-1浓度范围线性关系良好(r=0.9997),平均回收率为98.10%,RSD为2.44%(n=5),对蛇足石杉不同药用部位的进行了石杉碱甲含量测定,结果表明,叶中石杉碱甲含量最高,茎次之,根最低.结论本法简便、准确、重复性好.石杉碱甲集中分布在植物的地上部分中.【总页数】2页(P1017-1018)【作者】顾月华;吴庆庆【作者单位】中国科学技术大学生命科学学院,安徽,合肥,230027;中国科学技术大学生命科学学院,安徽,合肥,230027【正文语种】中文【中图分类】R282.71;R284.1;R446.1;R927.2【相关文献】1.LC-MS法测定不同产地蛇足石杉石杉碱甲含量 [J], 李关艳;苏有勇2.UFLC法测定蛇足石杉不同部位的石杉碱甲含量 [J], 张方方;郑雅媗;黄小强;谌赛男;吴水生3.HPLC法测定蛇足石杉及闽浙马尾杉不同部位的石杉碱甲含量 [J], 郑雅媗;刘海元;张方方;吴水生;4.HPLC法测定不同产地蛇足石杉中石杉碱甲含量 [J], 陈燏5.HPLC法测定蛇足石杉中石杉碱甲含量 [J], 孙远明;余红英;杨跃生;杨金易;张明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

HPLC法测定千层塔提取物中石杉碱甲的含量1潘见，金日生*，徐涛，周蓓蓓，胡学桥农产品生物化工教育部重点实验室（合肥工业大学），合肥230009*E-mail：rikn@摘要：建立了一种高效液相色谱测定千层塔提取物中石杉碱甲含量的新方法，首次将L－氨基酸引入生物碱高效液相色谱检测流动相。

色谱柱：Agilent Zorbax SB－C18（4.6mm×150mm）；流动相：甲醇－含1mmol/L L－赖氨酸的水溶液（50:50,v/v）；检测波长：310nm；流速：0.6ml/min。

结果表明在2～20µg /ml范围内石杉碱甲的量与其峰面积呈良好的线性关系；平均加样回收率为99.8％。

该方法灵敏、准确、选择性好。

关键词：石杉碱甲，HPLC1．引言石杉碱甲(Huperzin e A,Fig.1)是我国科学家首次从石杉科石杉属植物千层塔[Huperzia serrata (Thunb.) Trev.]中分离得到的一种生物碱[1]，是一种强效的可逆性乙酰胆碱酯酶抑制剂[2]，临床试验证实石杉碱甲对治疗重肌无力[3]和早老性痴呆有显著疗效[4]。

石杉碱甲的含量测定主要采用反相高效液相色谱法检测，对石杉碱甲片[5-7]及石杉碱甲胶囊[8]中石杉碱甲的测定均有良好的效果，当用于测定千层塔及提取物中的石杉碱甲含量[9]，石杉碱甲主峰易受邻峰的干扰难以达到满意分离度。

作者通过在流动相中添加L－赖氨酸，可使主峰与邻峰之间达到高分离度，且该方法简便、灵敏、准确、重现性好。

图1 石杉碱甲结构式Fig.1. The structure of Huperzine A2．实验部分2.1 仪器与试药高效液相色谱仪：Agilent 1100系列及其配套工作站；包括双元泵，在线脱气机，自动进1本课题得到高等学校博士学科点专项科研基金（项目编号：20020359011）资助样器，紫外检测器。

甲醇（色谱级）；三乙胺（AR级）；L－赖氨酸（AR级）；重蒸水；石杉碱甲对照品由本实验室自制；千层塔提取物购自合肥拓峰生物工程有限责任公司。

高效液相色谱法测定石杉碱甲缓释微丸的含量目的: 建立石杉碱甲缓释微丸含量测定方法。

方法:采用反相高效液相色谱法,以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相,乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾(20:80,含0.02 mol/L三乙醇胺)为流动相;检测波长:312 nm;流速:1 ml/min;进样量:20 μl。

结果:利用选定的色谱条件,可使石杉碱甲与其酸、碱分解产物、热分解产物、石杉碱乙等杂质达到有效分离。

石杉碱甲的回收率为99.8%。

在浓度为 5.0～15.0 μg/ml 范围内呈良好的线性关系。

回归方程为:A=2 022.96+16 192.5C,r=0.999 1。

结论:本方法操作简便,准确,重现性好,为该制剂的含量测定提供了依据。

标签：石杉碱甲;微丸;高效液相色谱法;含量石杉碱甲是从石杉科植物蛇足石杉中分离出的生物碱之一。

临床主要应用于治疗老年性痴呆症。

石杉碱甲片剂规格为50 mg/ 片,剂量为1～2 片/次,每天3 次。

为了提高患者的顺应性,更好地发挥药效,笔者将石杉碱甲制成1天服用1次的缓释微丸,使药物作用时间延长,疗效好,患者顺应性提高。

本文在文献基础上,建立了石杉碱甲的RP-HPLC含量测定方法,以方便制剂的研究和质量的控制。

1 仪器与试药HR-120电子天平(日本岛津);TU-1901紫外可见分光光度计(北京普析);高效液相色谱仪,日本岛津LC-10ATVP;石杉碱甲原料(含量:99.5%;浙江温岭制药厂),石杉碱甲精制品(含量:99.7%;浙江温岭制药厂),石杉碱甲缓释微丸(自制);试验中所用试剂均为分析纯。

2 方法与结果2.1 检测波长的确定称取石杉碱甲对照品适量,用甲醇配置成每1毫升中含10 μg的溶液,按紫外分光光度法(《中国药典》2000版二部附录IV A)在200～400 nm波长范围内,绘制紫外光谱,石杉碱甲在231 nm和312 nm处有最大吸收。

空白辅料可能在231 nm 波长有干扰,所以将测定波长确定为312 nm。