哮喘模型大鼠支气管平滑肌肌球蛋白轻链激酶的表达

哮喘大鼠肺组织Akt蛋白表达上调对IL-4，IL-12和IL-13的影响作者：徐慧,戴元荣,夏晓东,吴成云作者单位：温州医学院附属第二医院呼吸内科，浙江温州【摘要】目的：研究Akt蛋白对支气管哮喘大鼠IL-4，IL-12和IL-13表达的影响。

方法：雄性SD大鼠24只，随机分为3组：对照组(C组)、哮喘组(A组)、渥曼宁青霉素组(Wortmannin，W组)，每组8只。

以卵白蛋白(OVA)致敏和激发建立大鼠哮喘模型。

各组大鼠于末次激发后24 h，放血处死。

酶联免疫吸附试验(ELISA)测定BALF中IL-4，IL-13和IL-12的浓度;免疫组化法测定肺组织中p-Akt蛋白的表达;Western blot测定肺组织匀浆中p-Akt蛋白的含量。

结果：A组p-Akt蛋白的表达明显高于C 组，W组p-Akt蛋白的表达低于A组，但仍高于C组;BALF中IL-4，IL-13的含量A组明显高于C组，W组IL-4，IL-13的含量低于A组，但仍高于C组，BALF中IL-12的含量A组明显低于C组，W组IL-12的含量低于C组，但仍高于A组。

结论：哮喘大鼠模型中出现了Akt蛋白的激活，细胞因子失衡可能与Akt蛋白的激活有关。

【关键词】哮喘;细胞因子;磷脂酰肌醇3激酶;蛋白激酶BEffect of up-regulation of protein Akt in lung tissue of asthmatic rat on IL-4，IL-12 and IL-13 XU Hui，DAI Yuan-rong，XIA Xiao-dong，WU Cheng-yun，HE Jian-bo. Department of Respi-ratory Medicine，the Second Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College，Wenzhou，325027Abstract: Objective: To study the effect of protein Akt in asthma airway inflammation of asthmatic rats on the cytokine IL-4，IL-13 and IL-12. Methods: Twenty-four male adult Sprague-Dawley (SD) rats were randomly divided into the control group (C)，the asthma group (A) and Wortmannin group (W). The rats’ asthma models were established，in which rats were sensitized with OVA and Al (OH)3，and repeatedly exposed to aerosolized ovalbumin. The rats were sacrificed at 24 hours afer last challege，Meanwhile the concentration of IL-4，IL-13 and IL-12 in BALF were measured with ELISA. The expressions of p-Akt protein were detected with Immuno-histochemistry (IHC). The level of p-Akt in lung homogenate was measured with Western blot. Results: The expressions of p-Akt protein of lung tissues in the group A were higher than thosein group C，and the expressions of p-Akt protein of group W were lower than that of group A，but higher than that of group C. The concentration of IL-4 and IL-13 in BALF of group A were significantly higher than that of group C and those of group W were lower than those of group A but higher than those of group C. The concentration of IL-12 in BALF of group A was significantly lower than that of group C and that of group W was lower than that of group C，but higher than that of group A. Conclusion: The protein Akt is activated in the asthmatic rats model，and the imbalance of cytokine and the airway inflammation in the asthmatic rats model maybe regulated by activation of Akt.Key words: asthma;cytokine;PI3K;PKB/Akt细胞因子是参与非特异性免疫反应、炎症反应的一组小分子多肽和糖蛋白。

TNF-α对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖及ERK12活性的影响的开题报告一、研究背景及意义哮喘是一种慢性气道炎症性疾病，其主要特征为气道狭窄和过度反应，导致呼吸困难和咳嗽等症状。

TNF-α是一种促炎症因子，在哮喘的发病机制中起着重要作用，研究发现TNF-α的水平与哮喘的严重程度有关，能够刺激气道平滑肌细胞增殖。

气道平滑肌细胞增殖会导致气道平滑肌的增厚，从而加剧哮喘的病情。

因此，研究TNF-α对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖及ERK12活性的影响，对于探究哮喘的发生发展机制，及为临床治疗提供新的思路和方法具有重要的理论和实际意义。

二、研究目的研究 TNF-α是否对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖及 ERK1/2 活性有影响，探讨其机制。

三、研究内容及方法1. 建立哮喘模型大鼠：采用雌性 Sprague-Dawley 大鼠，给予鸡蛋白致敏和二氧化硫吸入制备哮喘模型。

2. 分组治疗：随机将大鼠分为PBS 组、TNF-α组和 PD98059 组，每组 10 只大鼠。

3. 采集气道平滑肌细胞：将大鼠气道切成小块，加入酶消化液，并用胶原酶和 DNA 酶处理使平滑肌细胞分离。

4. 测定细胞增殖及 ERK1/2 活性：采用 MTT 方法测定细胞增殖，Western blotting 检测 ERK 1/2 蛋白在不同组之间的相对表达量。

四、预期结果1. TNF-α可促进哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖。

2. TNF-α可激活 ERK 1/2 信号通路，提高气道平滑肌细胞增殖的活性。

3. PD98059 能够抑制ERK1/2 活性，降低气道平滑肌细胞增殖活性。

五、研究价值本研究可以为进一步探究 TNF-α在哮喘发病机制中的作用和气道平滑肌细胞增殖的调控机制提供新的思路与方法。

同时，研究结果也可以为临床治疗提供新的目标和方法。

IL-17在哮喘中的研究进展尹秀志(综述);曲书强(审校)【期刊名称】《临床肺科杂志》【年(卷),期】2016(000)001【总页数】5页(P155-159)【作者】尹秀志(综述);曲书强(审校)【作者单位】150086 黑龙江哈尔滨，哈尔滨医科大学附属第二医院儿内科;150086 黑龙江哈尔滨，哈尔滨医科大学附属第二医院儿内科【正文语种】中文哮喘长期以来被认为是一种同质性疾病，其主要特点是慢性持续性气道炎症和气道高反应，导致反复的喘息、气促、胸闷、咳嗽。

然而，大量的队列研究分析表明，根据哮喘的临床和功能特点，区分了哮喘不同的临床表型[1]。

目前，口服糖皮质激素(OCS)、吸入性糖皮质激素(ICS)、长效支气管扩张剂是所有哮喘的基本治疗方案。

但是有一部分患者对于激素治疗不敏感或部分敏感，所以，应该将哮喘患者进行准确的分类，才能更好地靶向治疗[2,3]。

既往提出的Th2依赖性的过敏性气道炎症，曾是主要的发病机理，治疗效果理想，同时应用抗单克隆抗体(IgE、IL-5、IL-13、IL-4或者它们的受体)也可以有效控制该类型哮喘。

然而，对于Th2Low 型哮喘患者对于现有治疗方案效果不佳[4]。

Th2Low 表型发病机制仍然不明，但是这些患者主要表现为中性粒细胞性炎症。

IL-17是Th17细胞关键的促炎细胞因子，在哮喘中，有募集中性粒细胞炎症和参与气道重塑的作用。

该综述主要对IL-17在中性粒细胞性气道炎症、激素抵抗、气道重塑等几个方面做以下说明。

作者单位：150086 黑龙江哈尔滨，哈尔滨医科大学附属第二医院儿内科IL-17在1995年首次被克隆，是一种具有促炎作用的细胞因子。

IL-17家族包括6个成员的配体(IL-17A、B、C、D、E、F)和5个受体(IL-17RA、IL-17RB、IL-17RC、IL-17RD和SEF)。

其中发挥主要作用的为IL-17A即IL-17。

Zrioual等研究显示IL-17A与17F结构和氨基酸序列很相似，同时在染色体上的基因位点也相似，因此推测两者可能共享相同的受体，并存在相似的生物学效应，在体内外发挥着强大的致炎效应。

支气管哮喘大鼠模型的建立与气道反应性的测定吉宁飞;卞涛;陈力;符晓苏;殷凯生【期刊名称】《南京医科大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2006(026)011【摘要】目的:为了探讨支气管哮喘的发病机制,建立一种由卵蛋白(0VA)致敏并诱发的支气管哮喘大鼠模型.方法:24只SPF级SD大鼠随机分为正常对照组和哮喘模型组,每组12只.予卵蛋白腹腔注射并雾化吸人制作SD大鼠支气管哮喘模型.予乙酰胆碱(Ach)行支气管激发试验;以动物呼吸机测定呼气相气道阻力(Re);以病理图像分析系统测定支气管壁厚度、支气管平滑肌厚度和支气管黏膜和黏膜下炎性细胞数.结果:比较2组大鼠Re以及支气管壁厚度、支气管平滑肌厚度和支气管黏膜和黏膜下炎性细胞数,结果显示造模成功;相关分析显示,在80～160 μg/kg浓度梯度的Ach激发后,哮喘模型组Re值与其病理形态学改变正相关(P＜0.01).结论:该方法能制备支气管哮喘大鼠模型;通过80～160 μg/kg浓度梯度的Ach激发后,Re的倍增可直接代表造模的成功.【总页数】4页(P1018-1020,封2)【作者】吉宁飞;卞涛;陈力;符晓苏;殷凯生【作者单位】江苏省老年医院干部保健科,江苏,南京,210024;南京医科大学第一附属医院呼吸科,江苏,南京,210029;江苏省老年医院干部保健科,江苏,南京,210024;江苏省老年医院干部保健科,江苏,南京,210024;南京医科大学第一附属医院呼吸科,江苏,南京,210029【正文语种】中文【中图分类】R562.25【相关文献】1.支气管哮喘小鼠气道反应性无创检测方法的建立 [J], 李斌恺;赖克方;洪燕华;王法霞;陈如冲;林少建;钟南山2.支气管哮喘小鼠气道反应性无创检测方法的建立 [J], 李斌恺;赖克方;洪燕华;王法霞;陈如冲;林少建;钟南山3.慢性烟曲霉暴露对支气管哮喘大鼠气道高反应性、气道炎症及气道重构的影响[J], 汪泽;高艳艳;刘永全;高福生4.缓解期支气管哮喘行气道反应性测定临床价值研究 [J], 林嘉镖;王桂兰;黄东明;黄娟;刘翔腾5.喘复康合剂对抗原致敏支气管哮喘大鼠气道高反应性的影响 [J], 王志强;王莉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

血管内皮生长因子及其受体2与哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖关系的研究邹晖;徐永健;张珍祥【期刊名称】《中国组织化学与细胞化学杂志》【年(卷),期】2010(019)004【摘要】目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)及其受体2(Flk-1)存哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)中表达变化及其对ASMC增殖的影响.方法 SD大鼠18只,随机分为对照组,哮喘模型组和地塞米松下预组各6只,并培养各组气道平滑肌细胞.用免疫组织化学技术检测ASMC增殖细胞核抗原(PCNA)的表达;用RT-PCR及Western blot方法分别检测VEGF和Flk-1mRNA及蛋白质在不同组大鼠ASMC 的表达程度.结果 (1)哮喘模型组ASMC PCNA表达较对照组和嘎干预组显著增加(P<0.05).(2)哮喘模型组ASMC VEGF164,VEGF188mRNA和VEGF205mRNA的表达较对照组和干预组显著增加(P<0.05或P<0.01).(3)哮喘模型组ASMC VEGF 及Flk-1蛋白质在大鼠ASMC中的表达较对照组和干预组显著增加(P<0.05).直线相关性分析显示.大鼠ASMC PCNA表达与大鼠ASMC中VEGF205,188,164及Flk-1mRNA表达水平呈正相关(r分别为0.79,0.86,0.83,0.68;P<0.05);大鼠ASMC PCNA表达与大鼠ASMC中VEGF及Flk-1蛋白质表达水平也呈正相关(r 分别为0.80,0.77;P<0.05).结论哮喘模型大鼠ASMC中VEGF及其受体Flk-1表达上调,并与气道平滑肌细胞增殖有密切关系.该结果提示VEGF及其受体2可能参与了哮喘气道重建中气道平滑肌细胞增殖的过程.【总页数】6页(P321-326)【作者】邹晖;徐永健;张珍祥【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科,武汉,430030【正文语种】中文【中图分类】R322.34【相关文献】1.核因子κB在蛋白激酶C诱导哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用 [J], 许淑云;徐永健;张珍祥;倪望;陈士新2.核因子κB在支气管哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用 [J], 许淑云;徐永健;张珍祥;倪望;陈士新3.IL-19对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响 [J], 李年珍;张焕萍;柴景伟;张彬4.TGF-β1对不同阶段哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖的作用 [J], 蔺鹏翔;张焕萍;张爱芝5.TNF-α对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖及ERK1/2活性的影响 [J], 徐妍;张焕萍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

针刺对哮喘大鼠气道重建模型气道平滑肌细胞T型钙通道蛋白表达的影响的开题报告
本文旨在研究针刺对哮喘大鼠气道重建模型中气道平滑肌细胞T型
钙通道蛋白表达的影响，以探讨其在哮喘治疗中的潜在作用。

针刺作为一种传统医学疗法，在哮喘治疗中已得到广泛实践。

研究
表明，针刺可通过调节免疫系统、抑制炎症反应等多种途径来缓解哮喘
症状。

此外，T型钙通道在调节气道平滑肌细胞收缩中也发挥着重要作用。

因此，本研究将选取哮喘大鼠模型，建立气道重建模型，并通过免
疫荧光、Western blot等技术研究针刺对气道平滑肌细胞T型钙通道蛋白表达的影响，以期为其在哮喘治疗中的应用提供理论依据。

本研究预计将有以下亮点：第一，通过建立哮喘大鼠模型，可以更
好地模拟人体疾病，提高实验可靠性；第二，通过多种技术手段综合分析，可以较全面地了解针刺对气道平滑肌细胞T型钙通道蛋白表达的影响；第三，研究结果将为进一步探究哮喘治疗中针刺的作用机制提供基础。

在研究中，我们将注重实验的科学性和可靠性，并结合现有文献对
结果进行充分讨论和解释，以提高研究结果的说服力和应用价值。

《基于RNA-Seq的哮喘小鼠气管平滑肌组织转录组分析及小鼠气管平滑肌细胞的原代培养和鉴定》一、引言哮喘是一种常见的慢性呼吸道疾病，其发病机制复杂，涉及多种细胞和分子参与。

近年来，随着高通量测序技术的发展，RNA-Seq技术在哮喘研究中的应用越来越广泛。

本文旨在通过RNA-Seq技术对哮喘小鼠气管平滑肌组织进行转录组分析，并同时开展小鼠气管平滑肌细胞的原代培养和鉴定工作，以期为哮喘的发病机制研究提供新的思路和实验依据。

二、材料与方法1. 实验动物与分组选用SPF级BALB/c小鼠，随机分为正常对照组和哮喘模型组。

2. 哮喘模型建立通过雾化吸入过敏原等方法建立哮喘模型。

3. RNA-Seq技术进行转录组分析提取哮喘小鼠和正常小鼠的气管平滑肌组织RNA，进行高通量测序，并对数据进行生物信息学分析。

4. 小鼠气管平滑肌细胞的原代培养和鉴定（1）原代培养：取小鼠气管平滑肌组织，进行消化、离心、接种等步骤，培养平滑肌细胞。

（2）鉴定：通过免疫荧光、Western blot等方法鉴定培养的细胞为平滑肌细胞。

三、实验结果1. RNA-Seq转录组分析结果通过对哮喘小鼠和正常小鼠的气管平滑肌组织进行RNA-Seq 分析，我们发现哮喘组中多个与炎症、免疫、细胞增殖等相关的基因表达发生显著变化。

这些基因的差异表达可能参与了哮喘的发病过程。

2. 小鼠气管平滑肌细胞的原代培养和鉴定结果（1）原代培养：成功培养出形态良好、生长旺盛的小鼠气管平滑肌细胞。

（2）鉴定：通过免疫荧光和Western blot等方法鉴定，确认培养的细胞为平滑肌细胞，且纯度较高。

四、讨论本研究通过RNA-Seq技术对哮喘小鼠气管平滑肌组织的转录组进行了分析，发现多个与炎症、免疫、细胞增殖等相关的基因表达发生显著变化。

这些结果提示我们，哮喘的发病可能与这些基因的表达异常有关。

同时，我们还成功培养了小鼠气管平滑肌细胞，并进行了鉴定。

这些细胞可以为后续的机制研究提供重要的实验材料。

细胞外信号调节蛋白激酶对哮喘大鼠气道平滑肌细胞周期的影响白晶;刘先胜;徐永健;谢敏;倪望【期刊名称】《中国呼吸与危重监护杂志》【年(卷),期】2010()1【摘要】目的探讨细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)通道调控支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)增殖中的细胞周期机制。

方法30只Wistar大鼠随机分为正常组和哮喘组,哮喘组采用卵清蛋白致敏和激发建立哮喘模型。

取两组大鼠叶支气管ASMC进行原代培养,采用ERK激动剂表皮生长因子(EGF)和抑制剂PD98059干预哮喘组ASMC。

用免疫组织化学法检测ASMC细胞周期蛋白CyclinD1和CDK2的表达;Western免疫印迹检测ERK1/2和磷酸化ERK1/2蛋白的表达,计算ERK活化率。

结果哮喘组大鼠ASMC中CyclinD1、CDK2的表达和ERK活化率[76.15±4.88、92.30±7.95和(82.37±5.78)%]均较正常组[54.17±6.11、61.04±4.09和(49.91±3.26)%]显著升高(P均<0.05)。

经EGF处理后上述指标进一步升高[119.28±8.14、134.77±9.26和(91.57±5.32)%,P均<0.05],经PD98059处理后显著降低[58.78±4.60、69.15±5.83和(54.01±4.12)%,P均<0.05]。

结论哮喘大鼠ASMC增殖活性增强。

ERK1/2可通过诱导ASMC中CyclinD1和CDK2蛋白高表达,使细胞从G1期向S期发展,促进细胞增殖。

【总页数】5页(P23-27)【关键词】细胞外信号调节蛋白激酶;气道;平滑肌细胞;细胞周期;哮喘【作者】白晶;刘先胜;徐永健;谢敏;倪望【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科;广西医科大学第一附属医院呼吸内科【正文语种】中文【中图分类】R338.26;R-332【相关文献】1.翘芩清肺剂对哮喘大鼠气道平滑肌细胞外信号调节激酶通路的影响 [J], 张秋玲;韩超;徐俊;杨柳;梁慧玲;杨洁颖2.转化生长因子β1对不同阶段支气管哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞外信号调节激酶通道的影响 [J], 蔺鹏翔;张焕萍3.蛋白激酶C在支气管哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖中的信号转导机制研究[J], 许淑云;徐永健;张珍祥;倪望;陈士新4.细胞外信号调节激酶信号转导途径在哮喘大鼠气道重塑中作用及糖皮质激素的调控 [J], 李昌崇;蔡晓红;张正霞;管小俊;张维溪;郑仰明;赵伟;叶乐平;陈小芳;罗运春;董琳5.细胞外信号调节激酶活化在慢性支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用(英文) [J], 白晶;刘先胜;徐永健;张珍祥;谢敏;倪望因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

滨蒿内酯对大鼠哮喘模型气道平滑肌增殖及PKC-α蛋白表达的影响易震南;黄仁清;宋泽庆【期刊名称】《中国现代医药杂志》【年(卷),期】2009(11)1【摘要】目的观察滨蒿内酯对哮喘大鼠气道壁平滑肌增殖及PKC-α(protein kinase C-α,蛋白激酶C-α)表达的影响.探讨滨蒿内酯治疗哮喘的作用机制.方法 40只雄性人鼠随机分成4组:正常对照组(N组)、哮喘组(A组)、地塞米松治疗组(D 组)及滨蒿内酯治疗组(S组),以卵清蛋白致敏和激发方法建立哮喘人鼠动物模型并给予相应治疗.测定各组肺功能.检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及嗜酸粒细胞(EOS)计数;用免疫组化法检测PKC-α蛋白表达水平、光镜下测定平滑肌层厚度及内外径.结果大鼠致敏2周及诱发哮喘4周后,肺功能测定表现为呼气时间延长,呼气峰压明显增大;A组BALF中的白细胞总数及Eos计数均较N组明显升高.哮喘模型组气道壁PKC-α蛋白含量和平滑肌层厚度较正常组均显著增加(均为P<0.001),气道内外径比值较正常组减小(P<0.001).气道壁平滑肌层厚度与PKC-α.蛋白表达呈正相关(rs=0.771,P<0.01).结论滨蒿内酯能减轻哮喘大鼠气道壁平滑肌层的增厚并抑制PKC-α的表达.【总页数】4页(P6-9)【作者】易震南;黄仁清;宋泽庆【作者单位】524001,广东省湛江市,广东医学院呼吸疾病研究所;524001,广东省湛江市,广东医学院呼吸疾病研究所;524001,广东省湛江市,广东医学院呼吸疾病研究所【正文语种】中文【中图分类】R9【相关文献】1.滨蒿内酯对原代和传代培养豚鼠气道平滑肌细胞内钙的影响 [J], 滕赞;封瑞;魏文娟;赵金生;于秀华;王嫘;李智2.滨蒿内酯剂量依赖性降低培养的豚鼠气道平滑肌细胞内钙 [J], 滕赞;封瑞;魏文娟;李智3.滨蒿内酯对ryanodine介导哮喘豚鼠气道平滑肌细胞内钙释放的抑制作用 [J], 滕赞;王嫘;李智4.IL-19对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响 [J], 李年珍;张焕萍;柴景伟;张彬5.TNF-α对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖及ERK1/2活性的影响 [J], 徐妍;张焕萍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

【摘要】目的：探讨哮喘大鼠气道平滑肌细胞培养方法，了解其生长特性。

方法：制作慢性哮喘大鼠模型，用酶解离法、组织贴块法分别培养哮喘大鼠气道平滑肌细胞，倒置相差显微镜观察其生长情况，用免疫组化SP法分析SMα-action抗原的表达。

结果：以酶解离法培养2～3 d可见细胞贴壁，7～9 d 可融合；以贴块法培养7～10 d组织块周围有细胞长出，10～14 d融合，传代后细胞“谷峰”生长明显。

SMα-action免疫组化SP法染色均呈阳性。

结论：两种方法均能培养出纯度较高的哮喘大鼠平滑肌细胞，其中酶解离法细胞产量高，纯度高，生长速度快，能为气道疾病细胞实验提供可靠的细胞模型。

【关键词】大鼠哮喘气道平滑肌细胞培养支气管哮喘(简称哮喘）是儿童最常见的一种慢性炎症性疾病，气道重塑是引起慢性哮喘患者气道不可逆或部分不可逆阻塞的病理基础[1]，是诱发气道高反应性和哮喘慢性化的主要原因。

平滑肌增生肥大是气道重塑的病理学特点之一[2]，故体外气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells，ASMC)培养是研究哮喘发病机制的重要手段。

ASMC培养常用的培养方法有贴块法和酶解离法[3-4]。

本研究用以上两种方法培养哮喘大鼠气道平滑肌细胞，观察其生长特点，并进行比较。

1 材料和方法1.1 实验动物和试剂 4～6周龄雄性SD大鼠，购自上海动物中心。

DMEM 高糖培养基、0.25%胰蛋白酶/0.02% EDTA溶液、特级胎牛血清购自法国Biowest 公司；D-Hanks液、青链霉素购自杭州吉诺生物医药技术有限公司；I型胶原酶、木瓜蛋白酶、牛血清白蛋白（BSA)购自美国Biosharp公司；大鼠抗α-actin单克隆抗体购自武汉博士德公司；SP免疫组化试剂盒(二抗)购自上海晶美生物工程有限公司。

1.2 慢性哮喘大鼠气道重塑模型的建立参考李昌崇等 [5-6]的方法复制哮喘慢性模型，致敏阶段：第1天和第8天腹腔注射OVA/Al(OH)3混合液1.5 mL[内含OVA 1 mg和Al(OH)3 100 mg]；激发阶段：第15天开始以1% OVA生理盐水溶液雾化吸入，隔天一次，每次30 min，共60 d。

布地奈德吸入对哮喘气道重塑大鼠气道平滑肌细胞MMP-9及TIMP-1表达的影响李淼;尚云晓;魏兵【摘要】Objective To investigate the effect of budesonide on the expression of MMP-9 and TIMP-1 mRNA in asthmatic rats ASMC. Methods Sixty wistar rats were randomly divided into 3 groups: control group, model group and treatment group. In the model group, airway remodeling was made with the conventional method. HE staining was used to measure the wat and was in different groups; primary culture ASMC of different groups; real-time PCR analyzed the expression of MMP-9 and TIMP-1 mRNA in ASMCs of different groups. SPSS 17. 0 and One-way ANOVA were used to analyze the difference among groups. F<0. 05 was considered significant. Results Wat/Pbm and Was/Pbm in model group increased when compared with those in normal group; Wat/Pbm and Was/Pbm in the treatment group was higher increased than in the control group but lower than in the model group. The expression of MMP-9 mRNA in the treatment group was lower than in the model group but higher than in the control group, with significant differences. The expression of TIMP-1 mRNA in the treatment group was lower than in the control group, but higher than in the model group, with significant differences. Conclusion Budesonide alleviates airway remodeling in asthma by decreasing the expression of MMP-9 mRNA and increasing the expression of TIMP-1 mRNA in ASMC of asthmatic rats .%目的探讨布地奈德气雾剂对哮喘气道重塑大鼠气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cell,ASMC)中MMP-9(金属基质蛋白-9)及TIMP-1 mRNA(组织抑制因子1)表达的影响.方法将60只wistar大鼠按照随机分组原则分为正常组、模型组及治疗组.模型组采用Wistar大鼠哮喘模型制作方法制作哮喘气道重塑大鼠模型;HE染色图像分析测量各组大鼠肺组织中气道壁面积(Wat)及平滑肌层面积(Was),并用气道基膜周长(Pbm)进行标准化；原代培养各组大鼠ASMC；实时定量PCR检测比较各组大鼠ASMC中MMP-9及TIMP-1 mRNA表达含量,用SPSS 17.0统计软件进行统计学分析,组间比较采用单因素方差分析,P＜o.05为差异有统计学意义.结果模型组大鼠肺组织中Wat/Pbm及Was/Pbm明显较正常对照组增加,治疗组大鼠肺组织中Wat/Pbm及Was/Pbm较正常对照组增加,但较模型组明显降低,差异均有统计学意义(F＜0.05).模型组大鼠ASMC中MMP-9 mRNA表达较正常对照组增加,差异有统计学意义(P＜0.05)；但治疗组大鼠ASMC中MMP-9 mRNA表达较模型组减少,差异有统计学意义(P＜0.05)；但较正常对照组大鼠ASMC中含量增加(P＜0.05).模型组大鼠ASMC中TIMP-1 mRNA表达较正常对照组降低;但治疗组大鼠ASMC中TIMP-1 mRNA表达较哮喘组增加,但较正常对照组降低(P＜0.05).结论布地奈德通过降低哮喘大鼠ASMC中MMP-9 mRNA,增加TIMP-1 mRNA表达,从而减轻哮喘大鼠ASMC细胞间质增厚.【期刊名称】《中国组织化学与细胞化学杂志》【年(卷),期】2012(021)002【总页数】4页(P142-145)【关键词】布地奈德;哮喘气道重塑;ASMC;MMP-9;TIMP-1【作者】李淼;尚云晓;魏兵【作者单位】中国医科大学附属盛京医院小儿呼吸内科,沈阳110004;中国医科大学附属盛京医院小儿呼吸内科,沈阳110004;中国医科大学附属盛京医院小儿呼吸内科,沈阳110004【正文语种】中文【中图分类】R176.4气道重塑是慢性哮喘气道的重要病例特点。

大鼠支气管哮喘模型的建立及其肺功能的改变潘慧云;朱元珏;王曾礼【期刊名称】《汕头大学医学院学报》【年(卷),期】1998(11)A12【摘要】通过建立稳定大鼠哮喘模型，观测其肺功能的变化。

方法：SD大鼠随机分4组，正常对照组；致敏组；即刻激发组；连续激发组。

分别测定肺功能变化。

结果：致敏组肺功能无改变，哮喘两组经卵蛋白激发后，肺功能均有显著性改变。

气道压力（P，cmH2O）增高111．93％－160.89％，气道阻力（Raw,cmH2O.mL/s）增加264．22％－241．93（P＜0．01），哮喘两组比较无显著性差异（P＞0．05）。

结论：本研究成功地建立大鼠哮喘模型，并对大鼠哮喘不同病情程度的肺功能有了新的认识。

【总页数】3页(P10-12)【关键词】哮喘;肺功能;疾病模型【作者】潘慧云;朱元珏;王曾礼【作者单位】汕头大学医学院第二附属医院呼吸内科;中国医学科学院,中国协和医科大学北京协和医院呼吸内科;成都华西医科大学医学院第一附属医院呼吸内科【正文语种】中文【中图分类】R562.250.2【相关文献】1.大鼠糖尿病模型的建立及其视网膜功能早期改变的研究 [J], 丁慰祖;姚慧萍;刘嫣;钱钧;许宇东;叶芳2.骨质疏松症大鼠动物模型的建立和研究/气管内灌注20-甲基胆蒽碘油溶液诱发大鼠肺癌的实验研究/实验小鼠念珠状链球杆菌和鼠痘病毒混合感染的诊断/D-半乳糖亚急性中毒大鼠拟衰老生理生化改变 [J],3.老年大鼠慢性阻塞性肺疾病模型建立后认知功能的变化 [J], 万朝晖;刘冰;景珩;吴苏宁4.冷刺激诱导弱精子症大鼠模型的建立与神经-内分泌功能改变的研究 [J], 斯依提·阿木提;童卓云;阿地力江·伊明;刘文娟;张盼盼;西尔艾力·买买提5.温阳化饮方对支气管哮喘病寒饮蕴肺证大鼠模型肺组织β-ARmRNA表达的影响[J], 孙广仁;臧笑薇;高博;苏新民;巩会利因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

哮喘大鼠模型肺组织平滑肌肌动蛋白-αmRNA的表达吴昭萍;罗凤鸣;王曾礼;刘小菁;刘春涛;王文志;章小红【期刊名称】《四川大学学报：医学版》【年(卷),期】2003(34)2【摘要】目的探讨平滑肌肌动蛋白 (SMA) -α m RNA的表达 ,以了解其在哮喘发病机制中的作用。

方法以卵蛋白雾化复制哮喘模型 ,在激发后 3d、1周及 2周用逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)检测肺部α- SMA m RNA表达 ,同时用图象分析法测量大鼠气道形态学参数。

结果大鼠哮喘激发后 2周开始出现气道平滑肌肌层增厚 ,而α-SMA m RNA在哮喘激发 1周表达升高 ,2周后更加明显,α- SMA m RNA表达与气道平滑肌肌层增厚具有一定相关性。

结论哮喘气道重构中既有气道平滑肌的增生肥大。

【总页数】3页(P330-332)【关键词】支气管哮喘;平滑肌肌动蛋白-α【作者】吴昭萍;罗凤鸣;王曾礼;刘小菁;刘春涛;王文志;章小红【作者单位】解放军452医院呼吸内科;四川大学华西医院呼吸内科;四川大学华西医院内科实验室【正文语种】中文【中图分类】R562.25【相关文献】1.哮喘大鼠肺组织CD44和α-平滑肌肌动蛋白mRNA的表达 [J], 李羚;杨莉;唐珩;金蕊2.氨茶碱对大鼠哮喘模型外周anon肺组织中IL-18,IL-13 mRNA表达的影响 [J], 李渠北;周远大;何海霞3.麻杏石甘汤对哮喘模型大鼠肺组织STAT4及其mRNA表达的影响 [J], 虞琳;潘建伟;叶乐平4.烟雾暴露对卵白蛋白致敏的急性支气管哮喘大鼠模型肺组织激活素A mRNA和蛋白表达的影响 [J], 陈衡华; 孙杰; 招轩娜5.哮喘大鼠肺组织CD_(44)和α-平滑肌肌动蛋白mRNA的表达 [J], 李羚;杨莉;唐珩;金蕊因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

止喘胶囊对哮喘模型大鼠气道壁胶原和平滑肌影响的实验研究王丽新;刘芳;吴银根【期刊名称】《江苏中医药》【年(卷),期】2007(039)008【摘要】目的:探讨止喘胶囊对大鼠哮喘模型气道壁胶原和平滑肌细胞的影响.方法:通过长期反复的给予致敏大鼠吸入不同浓度的卵蛋白,建立大鼠慢性哮喘气道重塑模型.40只大鼠随机分为正常对照组、模型组、中药组、西药组、中西医结合组,分别给药治疗后处死,免疫组化技术检测气道壁MMP-9、TIMP-1、调宁蛋白calponin以及Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型胶原蛋白表达,计算机图像分析显微测定气道壁厚度.结果:模型大鼠气道上皮损伤、脱落,嗜酸性粒细胞浸润.治疗后大鼠气道壁厚度、胶原沉积、TIMP-1表达模型组明显高于正常对照组,中药组、西药组、中西医结合组明显低于模型组,其中中西医结合组疗效最佳:治疗各组大鼠调宁蛋白表达明显高于模型组,中西医结合组疗效最佳.结论:止喘胶囊能显著抑制TIMP-1的高表达,减少气道壁厚度和胶原沉积,上调调宁蛋白表达,抑制平滑肌过度收缩与增殖,从而阻抑气道重塑的发生和发展,与地塞米松有协同作用.【总页数】3页(P71-73)【作者】王丽新;刘芳;吴银根【作者单位】上海中医药大学附属上海市中医医院,上海,200071;上海中医药大学,上海,200032;上海中医药大学附属龙华医院,上海,200032【正文语种】中文【中图分类】R562.250.5【相关文献】1.止喘胶囊对大鼠哮喘模型气道壁胶原rn和纤维连接蛋白沉积的影响 [J], 要全保;李英博;赵秀华;李剑平;吴银根2.止喘汤对哮喘模型大鼠气道炎症的干预作用 [J], 王庆;霍博雅3.射麻止喘液对哮喘模型大鼠环核苷酸变化的影响 [J], 刘小虹;廖慧丽;梁直英;陈芝喜;周名璐4.止喘胶囊对哮喘大鼠气道重建转化生长因子β1和血小板源性生长因子蛋白及其mRNA表达的影响 [J], 王宏长;方泓;吴银根5.支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞表型转变及止喘胶囊的干预作用 [J], 刘芳;方泓;唐斌擎;王丽新;张英兰;吴银根因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

平喘宁对哮喘大鼠肺组织MEK1、MEK2、Ras mRNA表达的影响方向明;朱佳琪;邬锡琴【摘要】目的观察平喘宁对寒性哮喘大鼠气道形态学及肺组织中丝裂原活化蛋白激酶的激酶（mitogen-activated protein kinase kinase,MEK）1mRNA、MEK2mRNA及Ras mRNA表达水平的影响。

方法将105只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,桂龙咳喘宁组,地塞米松组,平喘宁高、中、低剂量组,每组15只。

以卵蛋白致敏及寒冷刺激复制大鼠哮喘模型,模型复制21d后,分别给予地塞米松组,桂龙咳喘宁组,平喘宁高、中、低剂量组大鼠相应药物灌胃,给予正常组和模型组大鼠等容量蒸馏水灌胃。

4周后取出肺组织,采用苏木精-伊红染色行病理形态学观察,采用逆转录-聚合酶链式反应半定量检测MEK1mRNA、MEK2mRNA及Ras mRNA表达水平。

结果与正常组比较,模型组发生明显炎性细胞浸润,气道平滑肌增厚;MEK1mRNA、MEK2mRNA以及Ras mRNA表达水平显著増高（P〈0.05）。

与模型组比较,地塞米松组、桂龙咳喘宁组、平喘宁组大鼠肺组织病理改变减轻;各治疗组MEK1mRNA、MEK2mRNA以及Ras mRNA表达水平显著降低（P〈0.05）。

结论平喘宁可明显减轻哮喘大鼠的气道炎性反应,抑制哮喘大鼠肺组织中MEK1mRNA、MEK2mRNA以及Ras mRNA的表达,延缓气道重塑而治疗哮喘。

【期刊名称】《安徽中医药大学学报》【年(卷),期】2015(034)006【总页数】5页(P57-61)【关键词】哮喘平喘宁 MEK1 MEK2 Ras【作者】方向明;朱佳琪;邬锡琴【作者单位】[1]安徽中医药大学,安徽合肥230038;[2]合肥工业大学,安徽合肥230009【正文语种】中文【中图分类】R562.2支气管哮喘是一种多种炎性细胞和细胞因子参与调节的复杂慢性炎症过程，进而造成了气道的高反应性和炎性阻塞病变[1]。

P27kip-1蛋白对支气管哮喘大鼠模型气道平滑肌细胞凋亡的影响吴斌;王秀芬;戴元荣;叶永青;闫刚【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2009(38)10【摘要】目的探讨P27kip-1对哮喘大鼠模型气道平滑肌细胞凋亡的影响.方法清洁级(SPF)雄性SD大鼠30只,随机分成对照组、哮喘4周组、哮喘6周组,每组10只.用卵清蛋白(OVA)致敏与激发建立大鼠哮喘模型,HE染色观察和测量气道形态学变化;末端转移酶介导的dUTP切口末端标记法(TUNEL)检测ASMCs凋亡并计算凋亡指数(AI);免疫组化法检测P27kip-1蛋白表达.结果哮喘4周和6周组支气管壁厚度、支气管平滑肌厚度均显著高于对照组(P＜0.01),且6周组高于4周组(P＜0.01);哮喘4周和6周组凋亡指数均显著低于对照组(P＜0.01),且6周组低于4周组(P＜0.01);哮喘4周和6周组P27kip-1蛋白表达显著低于对照组(P＜0.05).结论哮喘大鼠模型气道平滑肌细胞凋亡减少,可能与 P27kip-1蛋白表达减少有关.【总页数】4页(P28-30,封3)【作者】吴斌;王秀芬;戴元荣;叶永青;闫刚【作者单位】237005,安徽医科大学第五临床学院;安徽省六安市人民医院呼吸内科;237005,安徽医科大学第五临床学院;安徽省六安市人民医院呼吸内科;温州医学院附属第二医院呼吸内科;237005,安徽医科大学第五临床学院;安徽省六安市人民医院呼吸内科;237005,安徽医科大学第五临床学院;安徽省六安市人民医院呼吸内科【正文语种】中文【中图分类】R5【相关文献】1.转化生长因子β1对不同阶段支气管哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞外信号调节激酶通道的影响 [J], 蔺鹏翔;张焕萍2.罗红霉素通过上调P27kip-1蛋白表达诱导离体哮喘大鼠气道平滑肌细胞凋亡[J], 吴海亚;戴元荣;应斌宇3.周期蛋白D1在香烟提取物促进支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用[J], 张晓宇;马利军;徐永健;刘先胜;张珍祥4.P27KiP-1蛋白对支气管哮喘大鼠气道平滑肌增生的影响 [J], 吴斌;戴元荣5.滨蒿内酯对大鼠哮喘模型气道平滑肌增殖及PKC-α蛋白表达的影响 [J], 易震南;黄仁清;宋泽庆因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

黄芩苷对哮喘大鼠气道重塑作用的实验研究韩超;杨柳;张秋玲;潘竞锵;徐俊【期刊名称】《中国临床药理学与治疗学》【年(卷),期】2017(22)7【摘要】目的:初步探讨黄芩苷对支气管哮喘气道重塑的防治作用及其作用机制。

方法:用卵清白蛋白(OVA)致敏大鼠制备支气管哮喘气道重塑动物模型,经黄芩苷干预治疗,用免疫组化法检测各组大鼠肺组织匀浆中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(pERK1/2)及气道组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白的表达量;用RT-PCR检测气道平滑肌(ASM)中p-ERK1/2的mRNA水平。

结果:实验结果显示,p-ERK1/2、α-SMA、TGF-β1蛋白的表达量在模型组中有明显的增加,地塞米松组、黄芩苷高剂量组和低剂量组的p-ERK1/2、α-SMA、TGF-β1蛋白的表达量均低于模型组(P<0.05,P<0.01)。

结论:黄芩苷可降低TGF-β1、α-SMA的蛋白表达,并影响ERK信号传导通路,下调pERK1/2 mRNA含量,从而减轻气道炎症,延缓气道重塑。

【总页数】6页(P749-754)【关键词】黄芩苷;气道重塑;ERK信号通路;TGF-β1;α-SMA【作者】韩超;杨柳;张秋玲;潘竞锵;徐俊【作者单位】广州市中医医院;暨南大学药学院【正文语种】中文【中图分类】R965.2【相关文献】1.活血化瘀法对哮喘大鼠气道重塑模型的调控作用研究 [J], 陈静;夏永辉;谭丽萍;程羽2.哮喘大鼠气道细胞DNA合成和气道重塑关系的实验研究 [J], 孔祥永;栾斌;郭杰;冯建飞;贾天明;徐灵敏;郭铭玉3.骨桥蛋白在COPD大鼠气道重塑中的作用及阿奇霉素干预效应实验研究 [J], 樊梅;邓俊;王宋平4.健脾益肺汤抑制NF-κB/STAT3信号通路改善哮喘模型大鼠气道炎症及气道重塑作用研究 [J], 张文斌;王杰;王玮;魏恩垚;刘煌;李芹5.加味茵陈蒿汤对湿热哮喘大鼠气道重塑的作用及机制研究 [J], 卢立伟;李燕宁;吴金勇;周朋;季旭明;张桂菊因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

哮喘豚鼠气管平滑肌主要碱性蛋白表达的变化及地塞米松对其表达的影响史亮;罗雅玲;赖文岩;罗亮【期刊名称】《广东医学》【年(卷),期】2006(27)1【摘要】目的探讨哮喘豚鼠气管平滑肌主要碱性蛋白MBP mRNA的表达以及地塞米松对其表达的影响.方法30只健康豚鼠随机分为3组:正常对照组、哮喘组和地塞米松治疗组.后两组制作成哮喘豚鼠模型,再激发用药.测定BALF的细胞总数及细胞分类,观察肺组织的病理改变,进行气管平滑肌的MBP mRNA RT-PCR半定量分析.结果各组BALF的Eos计数,地塞米松治疗组(11.0±3.1)较正常组(2.8±3.0)和哮喘组(29.2±7.3)有显著差异(P＜0.01).地塞米松治疗组肺组织充血水肿明显,但Eos肺组织浸润较哮喘组有明显减少.气管平滑肌的MBPmRNART-PCR半定量分析显示,地塞米松治疗组MBPmRNA(0.88±0.197)与正常组(0.25±0.089)及哮喘组(1.46±0.208)比较均有显著差异(P＜0.01),哮喘组MBP mRNA与正常组比较有显著差异(P＜0.01).结论哮喘豚鼠MBP表达增加;地塞米松治疗可以通过抑制Eos浸润等炎症反应,抑制MBP表达,治疗哮喘.【总页数】3页(P52-54)【作者】史亮;罗雅玲;赖文岩;罗亮【作者单位】南方医科大学南方医院,呼吸内科,广州,510515;南方医科大学南方医院,呼吸内科,广州,510515;南方医科大学南方医院,心内科实验室,广州,510515;广州军区广州总医院急诊科,广州,510010【正文语种】中文【中图分类】R5【相关文献】1.碱性成纤维细胞生长因子对谷氨酸毒性损伤豚鼠视网膜内突触小泡蛋白表达的影响 [J], 石运芝;魏丽华;魏佑震;王新成;李亚鲁2.地塞米松对哮喘动物模型支气管平滑肌MLCK表达的影响 [J], 桂淑玉;王勇生;李永怀;周青;胡向阳;吴强;汪渊3.地塞米松对哮喘豚鼠气管平滑肌毒蕈碱受体mRNA的表达及肺泡灌洗液嗜酸性粒细胞浸润的影响 [J], 史亮;罗雅玲;赖文岩;罗亮4.哮喘豚鼠嗜酸性粒细胞神经趋化及气管平滑肌毒蕈碱受体、主要碱性蛋白的异常表达 [J], 史亮;罗雅玲;陈剑莉5.滨蒿内酯对哮喘豚鼠气管平滑肌细胞RyR2mRNA表达影响 [J], 柳春;王艳杰;藤赞;于秀华;李智因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。