２０１１年１０月第６卷第５期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｍｙｃｏｌ，Ｏｃｔｏｂｅｒ ２０１１，Ｖｏｌ ６，Ｎｏ．５
病原性丝状真菌的菌种保藏方法 ・技术与方法・
吴婧 ＇ 李东明 Ｇ．Ｓ．ｄｅ Ｈｏｏｇ。姚一建 （１．中国科学院微生物研究所真菌地衣系统学重点实验室，北京１００１０１；２．北京大学第三医院，北京
１００１９１：３．Ｃｅｎｔｒａａｌｂｕｒｅａｕ ｖｏｏｒ Ｓｃｈｉｍｍｅｌｃｕｌｔｕｒｅｓ，Ｕｔｒｅｃｈｔ，Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）
【摘要】 目的探讨常见病原性丝状真菌的菌种保藏方法。方法将７３株病原性丝状真菌经过纯化后，接种于马铃薯葡 萄糖琼脂斜面分别在４℃和一８０￣Ｃ冷冻管保存，均用１０％（ｖ／ｖ）的丙三醇作为保护剂。结果经过１ ａ左右的保存，将菌株 复活，发现４℃斜面保藏法菌株的存活率为１００％，一８０＂Ｃ冷冻管保藏法菌株的存活率为９８．６％，有些毛癣菌属的菌株不耐低 温而不适合一８０％保藏。结论病原真菌可以合理地结合上述２种方法保藏。若实验室配有低温冰箱，可以一８０℃冷冻管保 藏法为主，对于某些不耐低温的丝状真菌需要同时采用４￣Ｃ斜面保藏法，则可以保证菌种的存活率。 【关键词】 病原性真菌；菌种保藏；丝状真菌 【中图分类号】 Ｑ ９３９．５ 【文献标识码】 Ａ 【文章编号】 １６７３—３８２７（２０１１）０５－０３０５－０３
Ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｆｉｌａｍｅｎｔｏｕｓ ｆｕｎｇｉ
ｗＵ Ｊｉｎｇ ，ＬＩ Ｄｏｎｇ—ｍｉｎｇ ，Ｇ．Ｓ．ｄｅ Ｈｏｏｇ ，ＹＡＯ Ｙｉ—ｊｉａｎ ｆ １．Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｍｙｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｌｉｃｈｅｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｐｅｋｉｎｇ １００１０１，Ｃｈｉｎａ；２．Ｐｅｋｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｔｈｉｒｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｐｅｋｉｎｇ １００１９１，Ｃｈｉｎａ；３．Ｃｅｎｔｒａａｌｂｕｒｅａｕ ｖｏｏｒ Ｓｃｈｉｍｍｅｌｃｕｌｔｕｒｅｓ，Ｕｔｒｅｃｈｔ， Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）
第十九章 常见病原性真菌
第一节 皮肤感染真菌：侵犯人或动物体表角质组织的真菌（皮肤癣病，角层癣菌）
侵犯角化的皮肤、毛发、指（趾）甲；所致疾病：癣
浅部真菌致病特点：1、途径：接触传染；
2、一种癣病可由多种癣菌引起；
3、一种癣菌可引起多种癣病；
4、一般无疤痕（除黄癣菌所致头癣）
第二节 深部感染真菌：多为内源性；多侵犯皮肤深层、深部组织、内脏；多继发慢性、消耗性疾病。（致死原因）
一、新生隐球菌
1、半数继发于白血病、何杰金病、艾滋病
2、在自然界广泛，如土、鸽粪
3、单细胞，圆形
4、传染方式：吸入孢子、内源性
5、所致疾病：肺隐球菌病、隐球菌脑膜炎
6、微生物学检查：1）直接镜检；2）荚膜多糖抗原
二、白色念珠菌
1、单细胞，革兰阳性，属条件致病菌
2、健康人口腔、上呼吸道、肠道阴道有此菌
3、致病条件：免疫功能下降、菌群失调
4、所致疾病：1）粘膜：鹅口疮、口角炎、外阴、阴道炎
2）皮肤：指间糜烂症
3）内脏：（1）支气管肺念珠菌病；（2）中枢神经系统念珠菌感染；（3）肠炎、脑膜炎
5、微检：直接镜检
真菌中毒
有毒真菌：如磨菇类
真菌毒素中毒：无传染性，一般药物与抗生素治疗无效，与特定食物、饲料、农作物有关
主要侵害肝、肾、神经系统
致癌性真菌（如黄曲霉素）
第十三章 主要病原性真菌及其他微生物
一、名词解释
1．支原体
2．立克次体
3．原体
二、填空题
1．钩端螺旋体病的传染源和储存宿主主要是 和 。
2．对人有致病作用的螺旋体主要有 、 、 、 等。
3．钩端螺旋体的致病物质主要有 、 、 。
4．支原体缺乏 结构，故在形态上呈 。
5．支原体的细胞膜由 层结构组成，中层为 成分。
6．支原体在含有 的培养基上可形成 菌落。
7．菌落呈荷包蛋状的微生物有 、 。
8．培养立克次体的方法有 、 和动物接种。
9．衣原体是一类专性 寄生、并有独特发育周期的 细胞型微生物。
10．衣原体属分为 、 和 三个种。
11．衣原体的繁殖方式是 ，其增殖型颗粒是 。
12．衣原体的发育周期有 、 两个阶段。其中 有传染性。
三、选择题
1．培养钩端螺旋体的最佳温度是（）
A．37℃ B．35℃ C．28℃ D．24℃ E．20℃
2．人畜共患的螺旋体病是（）
A．钩端螺旋体病 B．梅毒 C．回归热 D．雅司病 E．奋森咽喉炎
3．下列观察螺旋体最好的方法是（）
A．革兰氏染色法； B．抗酸染色法； C．Giemsa染色法； D．暗视野显微镜法； E．悬滴法；
4．支原体与病毒的相同点是（）
A．能在无生命培养基上生长繁殖 B．个体微小 ，能通过滤菌器
C．胞膜中含大量胆固醇 D．对抗生素敏感 E．有两种核酸
5．能在无生命培养基上生长繁殖的最小的原核细胞型微生物是（） A．细菌 B．衣原体 C．支原体 D．立克次体 E．病毒
细菌和真菌的分布
本节内容是人教版八年级上册第五单元《生物圈中的其他生物》第四章《细菌和真菌》第一节的内容，本章内容主要涉及课程标准的具体内容“细菌和真菌的主要特征”“细菌和真菌与人类生活的关系”和“细菌和真菌在生态系统中的作用”。本章教材按照“宏观—微观—宏观”的顺序呈现，第一节内容先让学生感知细菌和真菌的存在、探究它们的分布。
本节的“想一想，议一议”利用“现代化养鸡场中的饲养员为什么像医生一样穿着白大褂工作”这样的环境，引出讨论内容，引导学生关注生产生活实践中细菌和真菌可能造成的影响，使学生对细菌真菌的分布特点有初步的认识。
细菌和大部分真菌形态微小，肉眼通常看不到。为了使学生对细菌和真菌获得直观认识，本节介绍了在培养基上培养细菌和真菌可以形成肉眼可见的菌落。通过观察菌落的形态、大小、颜色，可以区分细菌和真菌以及它们的种类。虽然微生物的培养不是初中教学的内容，但是要让学生了解细菌和真菌的菌落是怎样形成的，又离不开微生物的培养，因此教材中科学方法中介绍了培养细菌真菌的一般方法。可以让学生完成“检测不同环境中的细菌和真菌”培养基准备。本节的教学重点就是通过这个探究活动，由此让学生认识细菌真菌的分布特点。教材中创设了让孩子知道手上就有细菌真菌，饭前必须洗手这一情境，突出了“教育即生活”的观念。考虑到生物教学的实际情况，教材中把指导重点放在探究思路的引导、实验过程的提示及对实验过程和结果的分析讨论上。实验结果用学生作品的形式呈现出来，希望起到参考和借鉴作用。
在探究活动后，教材呈现了“深海热泉中的部分生物”图片，使学生了解在深海热权重有硫细菌存在，目的是让学生了解到细菌分布的广泛性，并结合探究活动总结出细菌和真菌的生存需要的条件，使学生对细菌、真菌的特点有所认识。
