碱性成纤维细胞生长因子在 P 物质诱导肉芽组织成纤维细胞增殖中的作用

简述肉芽组织的组成和主要功能肉芽组织是一种在伤口愈合过程中形成的新生组织，它由多种细胞和细胞外基质组成，具有丰富的生物活性物质和多种功能。

肉芽组织在创伤修复和炎症反应中起着重要的作用。

肉芽组织的组成主要包括血管、炎性细胞、成纤维细胞和基质。

当组织受到损伤后，机体会通过血液供应新生血管，这些新生血管在伤口周围形成一个网状结构，以供应营养和氧气。

血管内皮细胞能够释放多种生物活性物质，如细胞因子和生长因子，这些物质能够促进细胞增殖和组织修复。

炎性细胞是肉芽组织中的关键成分，它们包括中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞等。

炎性细胞的主要功能是清除伤口附近的细菌和死亡的组织细胞，防止感染的发生。

同时，炎性细胞还能够释放多种细胞因子，调节炎症反应和创伤修复过程。

成纤维细胞是肉芽组织中的主要成分之一，它们具有合成胶原蛋白和细胞外基质的能力。

胶原蛋白是组织修复和愈合的主要结构蛋白，能够提供创伤部位的力学支持和结构稳定性。

成纤维细胞还能够合成和分泌多种生长因子，促进血管生成和细胞增殖。

基质是肉芽组织的主要组成部分之一，它由胶原、弹力纤维、蛋白多糖和其他细胞外分子组成。

基质具有支持和维持细胞生存的功能，同时还能够参与细胞信号传导和调节细胞行为。

基质中的蛋白多糖能够吸附和储存多种生长因子，为组织修复提供必要的生长因子。

肉芽组织的主要功能是促进创伤修复和伤口愈合。

它能够提供新生血管和营养，为创伤部位提供氧气和营养物质，促进组织修复和再生。

肉芽组织中的炎性细胞能够清除伤口附近的细菌和死亡细胞，防止感染的发生。

同时，炎性细胞还能够释放多种细胞因子，促进细胞增殖和修复过程。

肉芽组织中的成纤维细胞能够合成胶原蛋白和细胞外基质，提供力学支持和结构稳定性。

同时，它们还能够合成和分泌多种生长因子，促进血管生成和细胞增殖。

基质中的蛋白多糖能够吸附和储存生长因子，为组织修复提供必要的生长因子。

肉芽组织是一种在伤口愈合过程中形成的新生组织，它由血管、炎性细胞、成纤维细胞和基质组成。

碱性成纤维细胞生长因子促进皮肤创伤修复机制的研究进展作者：丁子文陈茜茜连燚沛唐倩男朱忠欣来源：《健康周刊》2017年第29期【摘要】碱性成纤维细胞生长因子（Basic Fibroblast Growth Factor， bFGF）是成纤维细胞生长因子家族（FGFs）的成员，其在创伤愈合及组织再生过程中发挥着重要作用。

本文从bFGF对于伤口愈合几个阶段的作用机理、信号通路入手，初步阐明bFGF促进皮肤创伤修复机制的研究进展。

【关键词】bFGF；创伤修复机制；信号通路1 创伤愈合的过程伤口愈合是一个复杂的生理过程，涉及各种相互作用的细胞，生长因子，细胞外基质（ECM）组分和蛋白酶0。

在正常伤口愈合过程中，主要有炎症期，增殖期和成熟期，三个阶段连续发生，有时会有重叠0。

1.1炎症期创伤发生后，血小板第一时间到达伤口，许多生长因子从活化血小板中释放，包括表皮细胞生长因子（EGF）、胰岛素样生长因子（IGF-1）、血小板源生长因子（PDGF）、转化生长因子（TGF-α、TGF-β）[2，3]。

这些生长因子扩散到周围组织，并趋化性地吸引嗜中性粒细胞和单核细胞到达伤口0。

同时，单核细胞分化成巨噬细胞，巨噬细胞吞噬并去除细菌和碎片，经吞噬作用后，释放出一系列能够刺激增殖期细胞分裂和迁移的细胞因子，促进胶原蛋白的合成0。

普通伤口炎症期一般持续1-2天0。

1.2增殖期增殖期的特征是肉芽组织的形成和起始血管发生0。

肉芽组织由成纤维细胞、新生血管、巨噬细胞、纤连蛋白、透明质酸（HA）和松散的胶原基质组成，填补伤口区域0。

在这个阶段，炎症细胞的数量减少，PDGF和TGF-β从炎症细胞释放，趋化性地诱导成纤维细胞进入伤口区域0。

成纤维细胞迁移和扩散发生在损伤后2-3天。

然后成纤维细胞释放胶原蛋白和糖胺聚糖，如硫酸软骨素-4-硫酸盐，硫酸皮肤素，硫酸肝素和HA0，成无定形凝胶。

其中，胶原蛋白和纤连蛋白形成细胞外基质（ECM），对于形成肉芽组织是必需的0。

皮肤中的P物质及其作用吴胜，吴仲敏*，傅磊冕（台州学院医学院解剖学教研室，浙江台州，318000）摘要：P物质是一种高活性的神经肽类物质，广泛地分布于神经系统和其他外周组织器官内，具有多种生理功能。

在皮肤，P物质主要由感觉神经末梢释放, 它通过趋化免疫细胞、调节细胞因子的产生以及舒张微血管等参与皮肤局部免疫炎症反应; 还可促进皮肤内多种细胞的分裂、增殖以及细胞DNA勺合成，参与皮肤创伤的修复；此外, P物质作为一种重要的瘙痒介质，与多种瘙痒性皮肤疾病的发生和发展有关。

关键词：P物质；皮肤；组织修复；炎症；瘙痒1 P物质的生物学特点P物质（substanee P, SP）是世界上发现最早的神经肽。

由Von Euler和Gaddum于1931 年在马肠中提取乙酰胆碱时发现，因当时不知道其化学性质，故取名P物质。

1970年Cha ng 和Leeman将SP纯化，提出^一肽序列,，分子量为1340，1972年Tregear等Arg- Pro-Lys-Pro-GI n-GI n-P he-Phe-Gly-Leu-Met-NH2用化学方法成功地合成此1973年Powel建立了放射免疫分析测定SP的方法，将SP的肽。

研究和应用提高到一个新的高度。

用重组DNA技术研究SP的前体发现SP来源于前速激肽原，PPT），因此SP有速激肽类物质之称，PPT分成PPT-A和PPT-B两(pre-p ro-totchykinin种，PPT-A又分为a -PPT-A、3 -PPT-A和丫-PPT-A。

分子水平的研究进一步发现，PPT-A的mRNA含SP 片段。

与经典神经递质（如乙酰胆碱、单胺类、氨基酸类）的合成方式不同，SP不是在神经末梢内合成，无活性的SP前体首先在神经元胞体内的核糖体上边合成边进入粗面内质网,高尔基复合体的修饰加工后形成分泌囊泡，分泌囊泡在向神经末梢运输的过程中，仍可对其中的SP加工修饰，装配在大囊泡中运至神经末梢，当神经末梢受刺激时，囊泡中的SP即释放，并与其特异性受体结合以发挥作用。

血管平滑肌细胞的增殖因素及机制王智昊;吴扬;王英凯【摘要】血管平滑肌细胞(VSMC)增殖已成为目前心血管疾病研究领域里的热点,VSMC增殖、迁移及凋亡在冠状动脉粥样硬化(AS)、冠状动脉搭桥术、经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后血管再狭窄的发生和发展过程中起重要作用.本文作者对VSMC增殖及促增殖因素和机制进行综述.【期刊名称】《吉林大学学报（医学版）》【年(卷),期】2011(037)003【总页数】6页(P561-566)【关键词】血管平滑肌细胞;细胞增殖【作者】王智昊;吴扬;王英凯【作者单位】吉林大学第一医院急诊科,吉林,长春,130021;吉林大学第一医院急诊科,吉林,长春,130021;吉林大学第一医院胃肠内科,吉林,长春,130021【正文语种】中文【中图分类】Q25血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell，VSMC)增殖是动脉粥样硬化(arteriosclerosis，AS)和经皮冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention，PCI)术后血管再狭窄等疾病重要的病理改变，探讨VSMC增殖因素及机制，可为研究冠状动脉硬化的机制提供理论基础。

1 血管平滑肌的特点1.1 血管平滑肌组织结构特点及分布血管壁分为内膜、中膜与外膜3层。

内膜由内皮、内皮下层和内弹性膜组成；中膜由平滑肌、弹性纤维和胶原纤维组成；外膜为结缔组织。

平滑肌细胞(smooth muscle cell，SMC)分布于人体呼吸道、消化道、血管和泌尿及生殖等系统，通过缩短和产生张力使器官运动和变形，产生持续或紧张性收缩，使器官对所加负荷保持一定的形状。

1.2 VSMC的分型VSMC分收缩表型和合成表型。

收缩表型VSMC胞浆内主要是收缩纤维、游离核糖体及高尔基体，内质网很少，分布于核周区域，主要对机械刺激和化学物质起收缩反应并维持血管壁的张力；合成表型VSMC有少量肌纤维，大量的高尔基体、游离核糖体和粗面内质网，具有合成功能，主要参与细胞外基质的形成和合成血管活性物质，合成表型的VSMC见于生长和修复过程，2种表型在一定条件下可相互转变。

成肌纤维细胞在纤维化过程中的作用及其调控3高绪霞黄海长李晓玫(北京大学第一医院肾内科暨肾脏病研究所, 北京100034摘要成肌纤维细胞(myofibr oblast 是伤口愈合和各种组织纤维化中起主要作用的细胞, 成肌纤维细胞不能及时从病变处退出, 使细胞外基质持续过量分泌, 并发生重塑是组织纤维化的主要特征, 这一病理过程受诸多因素的调控, 研究成肌纤维细胞的分化增殖及凋亡的调控机制有助于寻找干预组织纤维化过程的关键环节, 从而为延缓或逆转组织纤维化提供理论基础。

关键词成肌纤维细胞; 纤维化; 分化; 增殖; 凋亡中图分类号R361. 3成肌纤维细胞(myofibr oblast 最早见于伤口的肉芽组织, 其特征界于成纤维细胞和平滑肌细胞之间, 属于间充质来源细胞肌肌动蛋白(2s , 特性, 例如, ———波形蛋白(vi m entin , 合成分泌细胞外基质(EC M :胶原Ⅰ和Ⅲ、纤粘连蛋白(fibr onectin, F N 等。

但成肌纤维细胞合成EC M 的能力远大于成纤维细胞, 是组织纤维化过程中产生过量EC M 的主要来源细胞。

对于成肌纤维细胞的认识虽然已有三十多年, 但有关成肌纤维细胞在纤维化中作用及其分化、增殖、凋亡的调控机制研究仍然方兴未艾, 本文对此作一综述。

一、成肌纤维细胞在纤维化过程中的作用成肌纤维细胞被认为是伤口愈合和各种组织纤维化过程中起核心作用的细胞。

正常的伤口修复过程中, 成肌纤维细胞短暂存在, 促使伤口收缩, 结缔组织修复。

但在纤维化病变的组织中, 成肌纤维细胞持续存在, 细胞外基质过量积聚, 组织结构发生重塑, 正常的组织结构和功能遭到破坏, 最终发生功能衰竭。

成肌纤维细胞在纤维化过程中的作用主要表现在:(1 成肌纤维细胞表达α2S MA, 具备收缩迁移的功能, 能够从分化及转分化部位到达它发挥作用的间质部位, 并使细胞外基质收缩变形; (2 成肌纤维细胞合成细胞外基质的能力明显增强, 合成胶原的量是成纤维细胞的4～5倍, 最先合成的糖蛋白———F N 成为其它细胞外基质沉积的“脚手架”和成纤维细胞的趋化剂, 进一步放大纤维化反应[1]; (3 成肌纤维细胞表达整合素增加, 与EC M 黏附增强[2], ( 、TGF 2β(I L , 。

优拓敷料联合重组人表皮生长因子治疗深Ⅱ度烧伤效果研究目的：探究优拓敷料联合重组人表皮生长因子治疗烧伤深Ⅱ度的临床效果。

方法：选取2017年1-12月期间本院收治的深Ⅱ度烧伤患者80例，按照入院顺序进行排号，采用随机数字法将其分为对照组和观察组，各40例。

对照组采用凡士林纱布加重组人表皮生长因子凝胶覆盖创面，而观察组在对照组的基础上加用优拓敷料联合重组人表皮生长因子凝胶覆盖创面。

比较两组治疗前、治疗后1、7、14 d患者的V AS评分变化、创面愈合时间及愈合速率、创面渗出物评分及周围炎症评分。

结果：治疗前两组的V AS评分比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；治疗后1、7、14 d观察组的V AS评分均明显低于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）；观察组治疗后1、7、14 d与治疗前比较，且对照组治疗后7、14 d 与治疗前比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。

观察组创面愈合时间明显短于对照组，7 d后创面渗出物评分和周围炎症评分均明显优于对照組，差异均有统计学意义（P＜0.05）。

结论：优拓敷料联合重组人表皮生长因子在改善烧伤深Ⅱ度创面的疼痛评分，改善创面恢复均具有较好的疗效，对于Ⅱ度烧伤的患者愈合具有积极的作用，值得推广。

烧烫伤是临床上常见的皮肤损伤性疾病之一，流行病学调查显示，每年有1 000万人次因火焰、沸水、热蒸汽等发生烧烫伤事故[1]。

目前，临床上对于Ⅱ烧伤治疗主要采用人工皮、油纱布或其他生物敷料覆盖、手术等，但寻求何种治疗方法最为理想尤为重要。

研究表明，表皮生长因子（EGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）通过与相关受体结合，在DNA合成和细胞增殖中发挥重要作用，通过对细胞的调控促进肉芽组织的生成，并可抑制瘢痕的过度增生，是创面愈合机制中不可或缺的重要生长因子[2]。

优拓是一种伤口新型换药敷料，已报道优拓具有促进伤口愈合、减轻疼痛及降低瘢痕形成等优点[3]，重组人表皮生长因子为一种由53个氨基酸残基组成的小肽，有较强的促进创面愈合的能力，但是对两者联合应用效果鲜有报道，本文进行初步探讨，现报道如下。

㊀第43卷㊀第1期2023年㊀1月㊀辐㊀射㊀防㊀护Radiation㊀ProtectionVol.43㊀No.1㊀㊀Jan.2023㊃辐射生物效应㊃神经肽P 物质对放射损伤皮肤成纤维细胞周期及凋亡的影响刘晓明,党旭红,张睿凤,李晓臻,原雅艺,刘红艳,柴栋良,任㊀越,张忠新,左雅慧(中国辐射防护研究院,太原030006)㊀摘㊀要:为探讨神经肽P 物质(substance P ,SP )对放射损伤皮肤成纤维细胞凋亡及周期的影响,将人皮肤成纤维细胞(human foreskin fibroblasts ,HFF -1)分为0Gy 组(对照组)和12Gy 组㊁18Gy 组㊁12Gy +SP 组㊁18Gy +SP 组4个实验组㊂实验组经12Gy ㊁18Gy 的电子束照射,其中12Gy +SP 组㊁18Gy +SP 组于照射前1h 给予10-7mol /LSP 干预㊂照射后48h ,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡率;实时荧光定量PCR 检测Bcl -2㊁Bax 表达情况㊂细胞周期检测显示,与0Gy 组相比,12Gy 和18Gy 组细胞G 2期百分比显著增加;18Gy +SP 组与18Gy 组相比,细胞G 2期百分比显著降低㊂细胞凋亡检测显示,与0Gy 组相比,12Gy 和18Gy 组细胞凋亡率显著升高;SP 干预组(12Gy +SP 组㊁18Gy +SP 组)较照射组(12Gy 组㊁18Gy 组)的细胞凋亡率显著降低㊂实时荧光定量PCR 对Bcl -2和Bax 表达检测显示,与0Gy 组相比,12Gy 和18Gy 照射组细胞Bax 基因表达显著升高,Bcl -2基因表达显著降低;SP 干预组(12Gy +SP 组㊁18Gy +SP 组)较照射组(12Gy 组㊁18Gy 组),Bcl -2基因表达显著升高,Bax 基因表达差异不显著㊂上述结果揭示,电子束照射可诱发人皮肤成纤维细胞的凋亡及细胞G 2期阻滞;SP 可抑制放射损伤人皮肤成纤维细胞的凋亡及G 2期阻滞㊂关键词:神经肽P 物质;人皮肤成纤维细胞;放射损伤;细胞凋亡;细胞周期中图分类号:Q7文献标识码:A㊀㊀收稿日期:2022-01-29作者简介:刘晓明(1980 ),男,2007年毕业于中国辐射防护研究院放射医学专业,获理学硕士学位,2011年毕业于南方医科大学解剖与组织胚胎学专业,获理学博士学位,副研究员㊂E -mail:lxmsxqx@㊀㊀随着核技术在社会各领域的广泛应用,放射性皮肤损伤亦相应增多并且逐渐成为临床的一种常见疾病㊂放射性皮肤损伤主要是表皮和真皮的损伤,基本病变是上皮层细胞的破坏和血管内皮细胞的损伤,其创伤愈合延迟,是经典的难愈伤口模型㊂肉芽组织形成和上皮化过程是创面愈合的关键,成纤维细胞是形成肉芽组织的主要来源[1-2]㊂放射损伤过程中,皮肤成纤维细胞功能状态的认知对创伤愈合具有重要的意义㊂神经肽P 物质(SP )是11个氨基酸的直链多肽,广泛分布于周围和中枢神经系统中[3],大部分在脊髓背侧神经节合成,然后由轴浆运输至感觉神经纤维末梢贮存,少部分由组织细胞自身合成,如成纤维细胞㊁肥大细胞㊁血管内皮细胞㊂该物质属于速激肽家族,介导外周神经元和表皮角质形成细胞之间的通讯,通过与高亲和力的神经肽受体NK1㊁NK2和NK3结合或直接激活细胞内的G -蛋白级联反应作用于皮肤细胞,调节皮肤免疫和炎症反应[4-10],被认为是周围神经参与局部伤口愈合的重要介导因子㊂已知多种组织细胞上都有NK1受体的分布,如成纤维细胞㊂P 物质可通过受体的介导,进而促进皮肤成纤维细胞增殖[11]㊂研究显示,糖尿病足溃疡患者边缘皮肤SP 表达的减少可能是引起创面修复受损的原因[12]㊂而作为难愈创伤类型的放射性皮肤损伤,SP 在其创面的表达情况及其对创面愈合关键细胞的作用研究对于解决放射性皮肤损伤创面破溃难愈具有重要意义㊂本研究试图观察电子束照射对皮肤成纤维细胞周期及凋亡的影响,进一步探讨外源神经肽P㊃38㊃㊀辐射防护第43卷㊀第1期物质对放射损伤皮肤成纤维细胞周期及凋亡的抑制作用㊂1㊀材料与方法1.1㊀细胞株㊀㊀人皮肤成纤维细胞HFF-1购买自中国科学院细胞库㊂1.2㊀主要试剂及仪器㊀㊀神经肽P物质(Sigma-Aldrich公司,美国); DMEM培养基(GIBCO公司,美国),小牛血清(Biological Industries,以色列);胰蛋白酶(生工生物工程(上海)股份有限公司,中国);二甲基亚砜(DMSO)(Sigma-Aldrich公司,美国);Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒(江苏凯基生物技术股份有限公司,中国);细胞周期检测试剂盒(江苏凯基生物技术股份有限公司,中国),RNAsimple 总RNA提取试剂盒(天根生化科技(北京)有限公司,中国);实时荧光定量PCR试剂SYBR Premix Ex Taq TMⅡ(Perfect Real Time)(宝生物工程有限公司,大连);流式细胞仪(贝克曼库尔特公司,美国);实时荧光定量PCR仪器(ABI公司,美国)㊂1.3㊀细胞培养与分组㊀㊀在含10%胎牛血清㊁100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素的DMEM培养基中,于37ħ㊁5% CO2条件下培养HFF-1细胞至对数生长期㊂取对数生长期的HFF-1细胞分组传代培养㊂细胞分为未照射组(0Gy)㊁照射组(12Gy㊁18Gy)㊁照射前神经肽SP干预组(12Gy+SP㊁18Gy+SP)㊂各实验组细胞传代培养,实验前接种于6孔细胞培养板中,待贴壁生长后,于照射前12h更换为含有0.5%胎牛血清的培养基㊂照射前1h,向12Gy+ SP实验组和18Gy+SP实验组细胞培养基中加入神经肽P物质水溶液,至培养基中SP终浓度为10-7mol/L㊂1.4㊀细胞照射㊀㊀在冰浴下用医用直线加速器产生的4MeV电子束照射细胞,吸收剂量率为4Gy/min,源距100 cm,照射野为20cmˑ20cm㊂照射剂量分别为0 Gy㊁12Gy㊁18Gy㊂1.5㊀流式细胞术检测细胞凋亡㊀㊀本研究采用Annexin-V-PI复染法进行细胞凋亡检测㊂于照射后48h收集各实验组HFF-1细胞,每个样品收集2ˑ105个细胞,用PBS洗涤细胞二次,用500μL的Binding Buffer悬浮细胞,加入5μL Annexin V-FITC,混匀后加入5μL PI (Propidium Iodide),混匀,室温避光反应15min后1小时内利用流式细胞仪进行细胞凋亡检测,激发波长E x=488nm,发射波长E m=530nm㊂1.6㊀流式细胞术检测细胞周期㊀㊀细胞周期检测采用PI(Propidium Iodide)单染法进行㊂于照射后48h收集各实验组HFF-1细胞㊂调整每个样品细胞浓度为1ˑ106/mL㊂取1mL单细胞悬液,离心后去上清后加入体积分数为70%的冷乙醇500μL,于4ħ固定2h㊂固定好的细胞经PBS清洗2次,并用200目筛网过滤;离心弃上清后加入提前配制好的500μL PI/ RNase A染色工作液,室温避光60min后利用流式细胞仪进行细胞周期检测,记录激发波长488 nm处红色荧光㊂1.7㊀Bax、Bcl-2基因的实时荧光定量PCR检测㊀㊀照射后48h收集各组HFF-1细胞㊂利用RNAsimple总RNA提取试剂盒进行细胞总RNA 的提取,并反转录合成cDNA,利用实时荧光定量PCR进行各实验组细胞中Bax㊁Bcl-2基因表达情况的检测分析㊂具体采用比较C t相对定量法,以看家基因GAPDH为内参,相对定量照射后样品靶基因的表达水平,即对照组样品的靶基因表达量为1,照射组样品靶基因定量均为对照组样品的n 倍㊂每个样品重复3次,取平均值表征靶基因的表达水平㊂实时荧光定量PCR引物设计列于表1㊂具体反应条件为:25μL反应体系中加入SYBR Premix Ex Taq TMⅡ(2ˑ)12.5μL,cDNA 模板1~2.5μL,上下游引物各1μL㊂反应条件为95ħ㊁10s,95ħ㊁5s,60ħ㊁20s(40个循环)㊂表1㊀实时荧光定量PCR引物设计Tab.1㊀Primer sequence of Real-timefluorescence quantitative PCR㊃48㊃刘晓明等:神经肽P 物质对放射损伤皮肤成纤维细胞周期及凋亡的影响㊀1.8㊀数据处理㊀㊀本文数据表示为平均值ʃ标准差( x ʃs ),应用SPSS 21软件对数据进行独立样本t 检验的统计分析,p <0.05为差异有统计学意义㊂2㊀结果2.1㊀神经肽P 物质对放射损伤皮肤成纤维细胞周期的影响㊀㊀图1为人皮肤成纤维细胞经电子束照射后48h,流式细胞术检测细胞周期结果㊂由图1可见,与未照射组(0Gy)相比,12Gy 和18Gy 实验组细胞G 2期百分比显著增加,细胞周期呈现G 2期的阻滞㊂图2和图3分别为外源神经肽P 物质对12Gy㊁18Gy 电子束照射组皮肤成纤维细胞周期的影响结果㊂由图2和图3可见,与18Gy 实验组相比,照射前给予神经肽P 物质干预的18Gy +SP 实验组细胞G 2期百分比显著降低;12Gy +SP实验组与12Gy 相比,细胞G 2期百分比差异不显著㊂上述结果揭示,电子束照射可诱发人皮肤成纤维细胞G 2期的阻滞,而外源神经肽P 物质可一定程度逆转细胞G 2期的阻滞㊂图1㊀电子束照射对皮肤成纤维细胞周期的影响Fig.1㊀Effects of irradiation by electron beamon cell cycle of skin fibroblasts2.2㊀神经肽P 物质对放射损伤皮肤成纤维细胞凋亡的影响㊀㊀图4为人皮肤成纤维细胞经电子束照射后48h,流式细胞术检测细胞凋亡结果㊂由图4可见,与未照射组(0Gy)相比,12Gy 和18Gy 照射组人皮肤成纤维细胞凋亡率显著增加,揭示电子束照射可诱发人皮肤成纤维细胞凋亡的发生㊂照射前给予神经肽P 物质的干预,与照射组(12Gy和18Gy)相比,神经肽P 物质干预组(12Gy +SP㊁图2㊀外源神经肽P 物质对12Gy 电子束照射组细胞周期的影响Fig.2㊀Effects of exogenous neuropeptide substance Pon cell cycle of skin fibroblastsirradiated by 12Gy electronbeam图3㊀外源神经肽P 物质对18Gy 电子束照射组细胞周期的影响Fig.3㊀Effects of exogenous neuropeptide substance Pon cell cycle of skin fibroblastsirradiated by 18Gy electron beam18Gy +SP)细胞凋亡率显著降低,揭示外源神经肽P 物质可抑制12Gy 及18Gy 放射损伤皮肤成纤维细胞凋亡的发生㊂2.3㊀神经肽P 物质对放射损伤皮肤成纤维细胞凋亡相关基因Bcl -2和Bax 表达的影响㊀㊀图5和图6分别为电子束照射及外源神经肽P 物质干预对人皮肤成纤维细胞Bax 和Bcl -2基因表达的影响结果㊂由图5和图6可见,与0Gy 未照射组相比,12Gy 和18Gy 电子束照射组细胞Bax 基因表达量显著升高,Bcl -2基因表达量显著降低,最终导致基因表达比例Bax /Bcl -2的显著升高㊂照射前给予神经肽P 物质的干预,与照射组(12Gy 和18Gy)相比,外源神经肽P 物质诱发照射组细胞Bcl -2基因的高表达,对Bax 基因表㊃58㊃㊀辐射防护第43卷㊀第1期注:∗与0Gy 组相比差异显著(p <0.05);#与12Gy 或18Gy 照射组相比差异显著(p <0.05)㊂图4㊀电子束照射及外源神经肽P 物质对人皮肤成纤维细胞凋亡的影响Fig.4㊀Effects of electron beam irradiation andexogenous neuropeptide substance Pon apoptosis of human skinfibroblasts图5㊀电子束照射及外源神经肽P 物质对人皮肤成纤维细胞Bax 表达的影响Fig.5㊀Effects of electron beam irradiation andexogenous neuropeptide substance P onBax expression in human skin fibroblasts达影响不显著,最终导致Bax /Bcl -2基因表达比例显著降低㊂3㊀讨论㊀㊀放射性皮肤损伤主要见于恶性或良性疾病的放射治疗㊁职业照射㊁辐射事故及战时核辐射㊂皮肤受到一定剂量电离辐射照射可发生一系列进行性改变,一旦受到外界刺激导致皮肤破溃,创面经久不愈,逐渐发展成严重放射性溃疡㊂创伤愈合是以成纤维细胞增殖㊁迁移㊁肉芽组织形成㊁胶原分泌㊁创口胶原化瘢痕形成及改建为特点的过程,成纤维细胞作为关键愈合细胞参与了创伤愈合的注:∗与0Gy 组相比差异显著(p <0.05);#与12Gy 或18Gy 照射组相比差异显著(p <0.05)㊂图6㊀电子束照射及外源神经肽P 物质对人皮肤成纤维细胞Bcl -2表达的影响Fig.6㊀Effects of electron beam irradiation andexogenous neuropeptide substance P onBcl -2expression in human skin fibroblasts全过程[13-14]㊂成纤维细胞的功能状态对于创伤愈合至关重要㊂然而放射性皮肤损伤过程中,组织修复细胞难免受到辐射损伤,导致修复功能抑制,使得整个愈合网络发生紊乱㊂本研究利用4MeV的电子束照射人皮肤成纤维细胞,发现12Gy㊁18Gy 的电子束可诱发人皮肤成纤维细胞发生G 2期阻滞及细胞凋亡率的升高㊂细胞周期与细胞凋亡是细胞生命活动的基本过程㊂细胞周期阻滞是细胞修复的重要调节机制,防止损伤信息随着细胞的不断分裂向下传递以至于出现突变表型,是基因组稳定性的重要维护途径㊂细胞在周期进程中主要通过两个检查点,即G 1/S 检查点和G 2/M 检查点㊂在正常情况下,细胞受损伤后会活化相关的调控基因,促发一系列蛋白磷酸化,暂时性地阻断细胞周期进程,从而提供足够的时间对错误进行修复,防止错误复制或非对称性分裂事件的发生㊂当细胞损伤严重到无法正确修复时,细胞将启动凋亡程序来避免受损细胞的大量增殖,进而维持基因组的稳定性[15-16]㊂电离辐射达到一定剂量时,可诱导细胞周期阻滞㊁凋亡甚至坏死[17]㊂神经肽在神经系统和损伤组织之间起着重要的桥接作用,参与对修复细胞增殖㊁迁移㊁分化的调控㊂其中,神经肽P 物质具有多种生物学活性,被认为是周围神经参与局部伤口愈合的重要介导㊃68㊃刘晓明等:神经肽P物质对放射损伤皮肤成纤维细胞周期及凋亡的影响㊀因子[13]㊂神经肽P物质在多种细胞中都具有抗凋亡作用[18]㊂如,神经肽P物质可通过AKT/ GSK-3β信号通路参与高尿素条件下HCEC细胞的抗凋亡作用[19];在病理性瘢痕成纤维细胞中,神经肽P物质可以提高瘢痕疙瘩成纤维细胞㊁增生性瘢痕成纤维细胞的PCNA㊁Bcl-2表达,而抑制Bax的表达,进而促进病理性瘢痕成纤维细胞增殖并抑制其凋亡[20]㊂此外,神经肽P物质参与骨髓间充质干细胞增殖与凋亡的平衡调控,参与了辐射损伤骨髓间充质干细胞的凋亡调节,在血清剥夺诱导骨髓间充质干细胞凋亡中具有抗凋亡作用[21]㊂本研究显示,与单独照射组相比,照射前给予神经肽P物质的干预可降低G2期皮肤成纤维细胞的比例,且细胞凋亡率显著降低,揭示神经肽P物质可能参与放射损伤皮肤成纤维细胞周期检查点及细胞凋亡的调控㊂进一步发现,电子束照射可诱发Bax/Bcl-2比例的升高,而照射前给予神经肽P物质的干预,可逆转皮肤成纤维细胞中Bax/Bcl-2的比例,导致Bax/Bcl-2基因表达比例显著降低㊂Bax和Bcl-2为线粒体介导凋亡调控途径中的重要调节蛋白,Bax与Bcl-2表达的比值决定细胞在凋亡刺激信号作用下是否发生凋亡[22-24]㊂本研究结果揭示,神经肽P物质通过抑制Bax/Bcl基因的表达,进而参与放射损伤皮肤成纤维细胞凋亡发生的调节㊂参考文献:[1]㊀刘霞.c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞抗辐射作用的影响[J].中华放射医学与防护杂志,2006,26(02):141-143.DOI:10.3760/cma.j.issn.0254-5098.2006.02.011.[2]㊀张静,刘丽波.放射性皮肤损伤的机制研究进展[J].辐射研究与辐射工艺学报,2015,(02):3-8.DOI:10.11889/j.1000-3436.2015.rrj.33.020101.[3]㊀WU S,XU X,ZHANG Y,et al.Occurrence of substance P and neurokinin receptors during the early phase of spinalfusion[J].Molecular Medicine Reports,2018,17(05):6691-6696.DOI:10.3892/mmr.2018.8701.[4]㊀Luger T A.Neuromediators A crucial component of the skin immune system[J].Journal of Dermatological Science,2002,30(02):87-93.DOI:10.1016/s0923-1811(02)00103-2.[5]㊀O'Sullivan R L,Lipper G,Lerner E A.The neuro-immuno-cutaneous-endocrine network:relationship of mind and skin[J].Arch Dermatol,1998,134(11):1431-1435.DOI:10.1046/j.1529-8019.2003.01621.x.[6]㊀刘继勇,胡晋红,朱全刚.P物质受体在人表皮角质形成细胞和真皮成纤维细胞中的表达调控[J].中国药理学通报,2005,(06):667-670.DOI:10.3321/j.issn:1001-1978.2005.06.007.[7]㊀Delgado A V,Mcmanus A T,Chambers J P.Exogenous administration of substance p enhances wound healing in a novelskin-injury model[J].Experimental Biology&Medicine,2005,230(04):271-280.DOI:10.1111/j.1365-2362.2005.01494.x.[8]㊀Muangman P,Tamura R N,Muffley L A,et al.Substance P enhances wound closure in nitric oxide synthase knockoutmice[J].Journal of Surgical Research,2009,153(02):201-209.DOI:10.1016/j.jss.2008.03.051.[9]㊀Bucheli J C,Osorio N R,Rojas M R,et al.Substance P and Calcitonin gene-related peptide expression in humanperiodontal ligament after root canal preparation with Reciproc Blue,WaveOne Gold,XP EndoShaper and hand files[J].International Endodontic Journal,2018,51(12):1358-1366.DOI:10.1111/iej.12952.[10]㊀Guimar Es M Z P,Rodrigo D V,Gabriela V,et al.Generation of iPSC-derived human peripheral sensory neuronsreleasing substance P elicited by TRPV1agonists[J].Frontiers in Molecular Neuroscience,2018,11:277.DOI:10.3389/fnmol.2018.00277.[11]㊀邓云川,李世荣,丛林.P物质及其受体对成纤维细胞的作用[J].实用美容整形外科杂志,2002,13(06):317-320.DOI:10.3969/j.issn.1673-7040.2002.06.017.[12]㊀杨群英,曹瑛,高方,等.神经肽P物质在糖尿病足溃疡皮肤中的表达变化[J].中国糖尿病杂志,2014,22(12):1098-1101.DOI:10.3969/j.issn.1006-6187.2014.12.013.[13]㊀蒋伟,王正国,赖西南,等.P物质对肉芽组织成纤维细胞bFGF表达的调控作用及意义[J].中华烧伤杂志,2003,19(03):159-162.DOI:10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2003.03.010.㊃78㊃㊀辐射防护第43卷㊀第1期[14]㊀秦全红.成纤维细胞在皮肤创伤愈合中的作用及其调控[J].国外医学(创伤与外科基本问题分册),2000,(01):33-36+38.[15]㊀党旭红,左雅慧,原雅艺,等.RAN 基因沉默对辐射诱发基因组不稳定肝细胞HL -7702凋亡及细胞周期的影响[J].辐射防护,2014,34(06):361-365.DOI:10.3760/cma.j.issn.0254-5098.2014.07.006.[16]㊀党旭红,左雅慧,原雅艺,等.HAVCR2基因沉默对辐射诱发基因组不稳定肝细胞凋亡及细胞周期的影响[J].中华放射医学与防护杂志,2014,34(07):502-506.DOI:10.3760/cma.j.issn.0254-5098.2014.07.006.[17]㊀李忠秋,李超,赵德根,等.PIF1解旋酶在电离辐射诱发的细胞周期阻滞中的作用[J].军事医学,2017,41(03):169-173+177.DOI:10.7644/j.issn.1674-9960.2017.03.003.[18]㊀Hong H S,Kim S,Nam S,et al.Effect of substance P on recovery from laser-induced retinal degeneration[J].WoundRepair Regen,2015,23(02):268-277.DOI:10.1111/wrr.12264.[19]㊀WANG P,ME R,YUAN Y,et al.Substance P inhibits high urea-induced apoptosis through the AKT /GSK-3βpathway inhuman corneal epithelial cells[J].J Cell Biochem,2019,120(07):11342-11349.DOI:10.1002/jcb.28410.[20]㊀陈静,庄洪兴,何乐人,等.P 物质对病理性瘢痕成纤维细胞凋亡相关基因表达的影响[J].解放军医学杂志,2004(11):984-985.DOI:10.3321/j.issn:0577-7402.2004.11.020.[21]㊀SU F,DAN J,SONG L,et al.Protective effect of neuropeptide substance P on bone marrow mesenchymal stem cellsagainst apoptosis induced by serum deprivation [J ].Stem Cells International,2015,2015:1-11.DOI:10.1155/2015/270328.[22]㊀王达,闵倩,章乐怡.复方当归注射液对肌成纤维细胞bcl -2和bax 的表达影响[J].西部医学,2020,32(03):361-364.DOI:10.3969/j.issn.1672-3511.2020.03.012.[23]㊀郭晓彤,魏优蕾,雷加吉,等.藤黄酸对非小细胞肺癌A549细胞凋亡及Bcl -2㊁Bax㊁P53基因表达的影响[J].中国老年学杂志,2018,38(04):911-914.DOI:10.3969/j.issn.1005-9202.2018.04.059.[24]㊀ZHOU J,FENG J Y,WANG Q,et al.Calcitonin gene-related peptide cooperates with substance P to inhibitmelanogenesis and induces apoptosis of B16F10cells [J ].Cytokine,2015,74(01):137-144.DOI:10.1016/j.cyto.2015.01.034.Effects of substance P on cell cycle and apoptosis of irradiated skin fibroblastsLIU Xiaoming,DANG Xuhong,ZHANG Ruifeng,LI Xiaozhen,YUAN Yayi,LIU Hongyan,CHAI Dongliang,REN Yue,ZHANG Zhongxin,ZUO Yahui(China Institute for Radiation Protection,Taiyuan 030006)Abstract :To explore the effects of substance P on cell cycle and apoptosis of irradiated skin fibroblasts,HumanForeskin Fibroblasts (HFF -1)in logarithmic growth phase were divided into five experimental groups:0Gy group,12Gy group,18Gy group,12Gy +SP group and 18Gy +SP group.The experimental groups were irradiated with electron beam at doses of 12Gy and 18Gy,while the 12Gy +SP group and 18Gy +SP groupwere treated with 10-7mol /L SP one hour before irradiation.After 48hours of irradiation,cell cycle andapoptosis were detected by flow cytometry.The expression of apoptosis-related genes Bcl -2and Bax in cells ofeach experimental group was quantitatively detected by real-time quantitative PCR.Cell cycle detection showed that the percentage of cells in G 2phase in 12Gy and 18Gy experimental groups was significantly higher thanthat in 0Gy group.And,compared with the 18Gy experimental group,the percentage of cells in G 2phase inthe 18Gy +SP experimental group was significantly lower than that in the 18Gy group.Apoptosis detectionshowed that compared with 0Gy experimental group,the apoptosis rate of 12Gy and 18Gy irradiation group㊃88㊃刘晓明等:神经肽P物质对放射损伤皮肤成纤维细胞周期及凋亡的影响㊀increased significantly,while the apoptosis rate of substance P intervention group(12Gy+SP,18Gy+SP)was significantly lower than that of radiation group(12Gy,18Gy).Real-time fluorescence quantitative PCR detection of Bcl-2and Bax expression showed that compared with0Gy experimental group,Bax gene expression was significantly increased and Bcl-2gene expression was significantly decreased in12Gy and18 Gy irradiated groups.And,the expression of Bcl-2gene in substance P intervention group(12Gy+SP and18 Gy+SP)was significantly higher than that in radiation group(12Gy and18Gy),but there was no significant difference in Bax gene expression.The above results suggest that electron irradiation can induce apoptosis and cell G2phase arrest of human skin fibroblasts.Substance P can inhibit the apoptosis and G2phase arrest of human skin fibroblasts damaged by radiation.Key words:substance P;human skin fibroblasts;radiation injury;cell apoptosis;cell cycle㊃消㊀息㊃IAEA对废弃密封放射源管理的同行评议服务㊀㊀废弃密封放射源(DSRS)的管理 包括表征㊁包装㊁移除和其他方面 是一项需求量很大的服务㊂为了支持资源和能力有限的国家进行DSRS管理,国际原子能机构(IAEA)在第66届原子能机构大会的一个会外活动上启动了一项新的同行评议服务㊂废弃密封放射源技术中心的同行评议(DSRS TeC)的目的是增加和扩大可获得的资源池,并为DSRS 的可持续管理提供支持㊂鼓励具有良好设施和训练有素人员,能够在本国和国外提供技术服务的国家和组织参加新的同行评议服务㊂DSRS技术委员会将评议一个设施的技术水平㊁操作程序㊁质量管理和能力,以便在区域和区域以外的级别上运作㊂希望通过加强国家能力,扩大对可持续管理DSRS的支持,同时加强各国的现有能力㊂国际原子能机构副总干事兼原子能司司长米哈伊尔㊃丘达科夫在开幕式上说: 几十年来,密封放射源在会员国的工业㊁医药和研究领域得到广泛应用㊂ DSRS技术委员会同行评议团将评估各组织在会员国DSRS管理技术领域的能力㊂含有放射源的仪表和设备有成千上万种不同的型号,有时设备或放射源的信息或文档会丢失㊂此外,损坏或腐蚀的设备会导致污染风险㊂正确处理每一个问题都需要从日常实践经验中获得知识和技能㊂这就是原子能机构新的同行评议服务的价值所在㊂DSRS技术中心网络可以在本国和国外提供DSRS服务,从而提高全球管理DSRS的能力㊂目前,我们收到了许多关于DSRS的支持和指导请求,并定期派出团队进行实地任务,以恢复和调试它们㊂但世界上DSRS的绝对数量意味着我们的服务已经超负荷了, 国际原子能机构废物管理技术部门的诺拉㊃扎卡里亚说㊂ 这项新的同行评议服务将通过利用技术中心的专业知识,帮助我们增加对各国的支持 ㊂同原子能机构领导的其他同行评议服务一样,DSRS TeC将由IAEA和外部专家组成一个小组㊂活动参与者获悉,2022年5月在摩洛哥国家能源和核科学与技术中心(CNESTEN)开展了一项试点任务㊂CNESTEN核设施主任Bouzekri Nacir介绍了访问团的主要调查结果㊂Nacir说: CNESTEN在区域和国际层面提供DSRS管理培训方面有着良好的记录,并通过此次评审继续加强我们的高水平胜任能力㊁能力和能力㊂ CNESTEN准备在区域一级继续提供支持㊂(来源:IAEA网站)㊃98㊃。

肉芽组织的名词解释简答题肉芽组织是一种生理过程，它是由于损伤、感染或其他病理因素导致的组织修复和再生过程中的重要步骤。

肉芽组织通常形成在受损的组织或器官周围，它是一种红色或淡红色的柔软肉质物质，由成纤维细胞、新生血管和炎症细胞组成。

肉芽组织的形成代表着体内的修复机制已经被启动，它旨在修复受损组织、恢复正常结构和功能。

肉芽组织的形成是一个复杂而精确的生物学过程，分为多个连续的阶段。

首先，在组织受损后的短时间内，炎症反应会迅速发生。

这是机体对损伤或感染的一种防御反应，目的是清除病原体、坏死组织和异物。

炎症反应中，血液中的白细胞和炎症介质会聚集到受损区域，形成炎性渗出液。

这个过程会导致组织肿胀、发红、疼痛和功能障碍。

随着炎症反应的发生，肉芽组织的形成开始。

在受损区域，成纤维细胞开始增生和迁移，并合成胶原蛋白。

胶原蛋白是肉芽组织的主要成分，它提供了支撑和结构支持，为组织修复提供了基础。

同时，新生血管也会形成，这是为了为肉芽组织提供氧气和营养物质。

肉芽组织生长的过程中，内皮细胞和炎症细胞会释放细胞因子和生长因子，这些物质促进了组织修复和再生的进程。

生长因子能够刺激成纤维细胞增殖和合成胶原蛋白，促进血管新生和组织重建。

同时，它们还有助于吸引和激活其他细胞类型，如间质细胞和干细胞，这些细胞也参与了肉芽组织的形成和修复。

肉芽组织通常在创伤或感染愈合后逐渐减少，最终被新生的肌肉、骨骼或其他特定组织所取代。

这个过程被称为再生或重塑。

但在某些情况下，肉芽组织的过度生长可能会导致瘢痕形成或纤维化，这可能会对受损组织的功能产生不利影响。

因此，控制和调节肉芽组织的形成是非常重要的。

了解肉芽组织的形成过程和机制对于临床医学和病理学都具有重要意义。

它们为创伤修复、感染治疗以及组织工程和再生医学的发展提供了基础。

有效地控制肉芽组织的形成和发育可以帮助促进受损组织的正常修复，最大限度地恢复其功能。

总而言之，肉芽组织是组织修复和再生过程中的一个重要步骤。

感觉神经肽P物质在损伤修复中的作用及分子机制（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）【摘要】为探讨感觉神经肽P物质（SP）在损伤修复中的作用，围绕感觉神经与修复进程中创面/伤口SP代谢的关系、SP在修复细胞表达生长因子及受体、表皮干细胞迁移、分化等方面的作用开展了研究。

研究证实感觉神经释放的SP可上调成纤维细胞表达神经肽，诱导成纤维细胞表达生长因子及受体，调控表皮干细胞迁移、分化的作用，进入肉芽组织内的表皮干细胞可跨胚层向血管内皮细胞和成纤维细胞分化，提示感觉神经肽SP参与介导感觉神经调控损伤修复。

【关键词】感觉神经肽损伤修复P物质Effect of sensory neuropeptide SP on wound healing and its molecular mechanismAbstract：To investigate the effect of sensory neuropeptide substance P(SP) on wound healing and relatedmolecular mechanism.The research was carried out on the relationship between sensory nerves and metabolism of sensory neuropeptide SP in the wounds,the role of SP in the expression of growth factors and those receptors by repair cells,and participation in migration and differentiation of epidermal stem cells.The results were as follows: SP released from sensory nerves in skin wounds up regulated neuropeptide expression of the fibroblast cells,induced fibroblast cells to express some growth factors and those receptors,played an important role in migration and differentiation of epidermal stem cells,which can transdifferentiate into fibroblast or endothelial cells if the stem cells migrated into graduration tissue.The results suggest that SP as a mediator of sensory nervers participates in the regulation of wound healing.Key words:sensory neuropeptide;wound repair;substance P感觉神经肽为感觉神经元胞体合成的一类神经肽，包括P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)、神经肽Y(NY)、K物质等，其中SP与损伤修复关系最为密切。