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第一章1.简述酶与一般催化剂的共性以及作为生物催化剂的特点共同点：只能催化热力学所允许的的化学反应，缩短达到化学平衡的时间，而不改变平衡点：反应前后酶本身没有质和量的改变：很少量就能发挥较大的催化作用：其作用机理都在于降低了反应的活化能。
酶作为生物催化剂的特点：1.极高的催化率；2.高度专一性；3.酶活的可调节性；酶的不稳定性。
5.酶失活的因素和机理。
酶失活的因素主要包括物理因素，化学因素和生物因素物理因素1热失活：热失活是由于热伸展作用使酶的反应基团和疏水区域暴露，促使蛋白质聚合。
2冷冻和脱水：很多变构酶在温度降低是会产生构象变化。
在冷冻过程中，溶质（酶和盐）随着水分子的结晶而被浓缩，引起酶微环境中的pH和离子强度的剧烈改变，很容易引起蛋白质的酸变性。
3.辐射作用：电离辐射和非电离辐射都会导致多肽链的断裂和酶活性丧失。
4.机械力作用：化学因素1.极端pH：极端pH远离蛋白质的等电点，酶蛋白相同电荷间的静电斥力会导致蛋白肽链伸展，埋藏在酶蛋白内部非电离残基发生电离，启动改变。
交联或破坏氨基酸的化学反应，结果引起不可逆失活。
极端pH也容易导致蛋白质水解。
2.氧化作用：酶分子中所含的带芳香族侧链的氨基酸以及Met, Cys等，与活性氧有极高的反应性，极易受到氧化攻击。
3.聚合作用：加热或高浓度电介质课破坏蛋白质胶体溶液的稳定性，促使蛋白质结构发生改变，分子间聚合并沉淀。
4.表面活性剂和变性剂：表面活性剂主要改变酶分子正常的折叠，暴露酶分子疏水内核的疏水基团，使之变性；变性剂与酶分子结合，改变其稳定性，使之发生变性。
生物因素微生物或蛋白水解酶的作用使酶分子被水解。
6.简述酶活力测定方法的原理直接测定法：有些酶促反应进行一段时间后，酶底物或产物的变量可直接检测。
间接测定法：有些酶促反应的底物或产物不易直接检测，一次必须与特定的化学试剂反应，形成稳定的可检测物。
酶偶联测定法：与间接测定法相类似，只是使用一指示酶，使第一酶的产物在指示酶的作用下转变成可测定的新产物。
酶工程（山东联盟）知到章节测试答案智慧树2023年最新滨州医学院第一章测试1.酶工程的研究内容主要包括（）。
参考答案:酶的生产;酶的应用;酶的改造2.对于结合酶来说，与酶蛋白结合较为松散的是（）。
参考答案:辅酶3.以下关于酶的可逆抑制剂说法正确的一项是参考答案:非竞争性抑制剂与酶作用时，通常会引起酶催化反应的最大反应速率减小4.酶活力单位1kat是指特定条件下参考答案:每秒催化1mol底物转化为产物的酶量5.下列关于酶活性部位的描述，()项是错误的。
参考答案:不同肽链上的有关基团不能构成该酶的活性部位6.对于结合酶来说，决定反应特异性的是参考答案:酶蛋白7.竞争性抑制的特点是酶催化反应的最大反应速度Vm不变，而米氏常数Km减小。
参考答案:错8.非竞争性抑制剂的特点是最大反应速度Vm减少，而米氏常数Km不变。
参考答案:对9.反竞争性抑制剂的特点是最大反应速度Vm和米氏常数Km同时减小。
参考答案:对10.酶的改性研究内容主要包括（）。
参考答案:酶分子修饰;酶定向进化;酶的非水相催化;酶与细胞的固定化第二章测试1.培养基中常用的无机氮源主要有参考答案:硝酸铵2.酶生产中最理想的合成模式是参考答案:延续合成型3.下列不属于常用的物理诱变剂的是参考答案:8-AG4.属于微生物培养常用的微量元素是参考答案:铜5.细菌和放线菌生长的最适pH值为参考答案:pH 6.5～86.酶的合成与细胞生长同步进行，生长进入平衡期后，酶又延续合成一段时间，该产酶模式称为滞后合成型参考答案:错7.滞后合成型模式的特点是酶的合成不受分解代谢物或产物的阻遏;酶所对应的mRNA相当稳定。
参考答案:对8.表面活性剂可以与细胞膜相互作用，增加膜通透性，利于胞外酶分泌。
参考答案:对9.保藏的菌种用于发酵生产之前，需经过细胞活化，恢复生命活性。
参考答案:对10.影响酶生物合成模式的一般规律为参考答案:mRNA稳定性差，酶的合成随着细胞停止生长而终止;受某些物质阻遏的，需在细胞生长一段时间或在平衡期后（解除阻遏），开始合成酶。
酶工程期末试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 酶工程中常用的酶固定化方法不包括以下哪种？A. 吸附法B. 共价结合法C. 包埋法D. 离心法答案：D2. 下列哪项不是酶的催化特性？A. 高效性B. 专一性C. 可逆性D. 需要高温答案：D3. 酶工程中，酶的来源不包括以下哪种？A. 植物B. 动物C. 微生物D. 无机物答案：D4. 酶的活性中心通常包含哪些元素？A. 金属离子B. 氨基酸残基C. 核酸D. 糖类答案：B5. 下列关于酶工程的描述，错误的是？A. 酶工程是生物技术的一部分B. 酶工程可以提高酶的稳定性C. 酶工程可以提高酶的催化效率D. 酶工程不能改变酶的催化特性答案：D6. 酶工程中，酶的固定化技术主要用于什么目的？A. 提高酶的稳定性B. 增加酶的催化效率C. 便于酶的回收和重复使用D. 以上都是答案：D7. 下列哪种酶在工业生产中应用最广泛？A. 淀粉酶B. 蛋白酶C. 纤维素酶D. 脂肪酶答案：A8. 酶的催化效率通常比无机催化剂高多少倍？A. 10倍B. 100倍C. 1000倍D. 10000倍答案：D9. 酶的专一性是由什么决定的？A. 酶的活性中心B. 酶的氨基酸序列C. 酶的三维结构D. 酶的浓度答案：A10. 酶工程中，酶的催化反应通常在什么条件下进行？A. 高温B. 高压C. 常温常压D. 真空答案：C二、填空题（每题2分，共20分）1. 酶工程是通过___________和___________技术，对酶进行改造和应用的一门学科。
答案：基因工程、蛋白质工程2. 酶的活性中心通常由___________和___________组成。
答案：氨基酸残基、金属离子3. 酶的催化作用是通过___________和___________来实现的。
答案：降低反应活化能、提供反应途径4. 酶工程中，酶的固定化方法主要有吸附法、___________和___________。
① 酶工程：由酶学与化学工程技术、基因工程技术、微生物学技术相结合而产生的一门新技术，是工业上有目的地设计一定的反应器和反应条件，利用酶的催化功能，在常温常压下催化化学反应，生产人类所需产品或者服务于其它目的地一门应用技术。
② 比活力：指在特定条件下，单位质量的蛋白质或者 RNA 所拥有的酶活力单位数。
③ 酶活力：也称为酶活性，是指酶催化某一化学反应的能力。
其大小可用在一定条件下，酶催化某一化学反应的速度来表示，酶催化反应速度愈大，酶活力愈高。
④ 酶活国际单位 : 1961 年国际酶学会议规定：在特定条件(25℃，其它为最适条件 )下，每分钟内能转化1 μmol 底物或者催化1 μmol 产物形成所需要的酶量为 1 个酶活力单位，即为国际单位(IU)。
⑤ 酶反应动力学:指主要研究酶反应速度规律及各种因素对酶反应速度影响的科学。
酶的研究简史如下：(1)不清晰的应用：酿酒、造酱、制饴、治病等。
(2)酶学的产生： 1777 年，意大利物理学家 Spallanzani 的山鹰实验； 1822 年，美国外科医生 Beaumont 研究食物在胃里的消化； 19 世纪 30 年代，德国科学家施旺获得胃蛋白酶。
1684 年，比利时医生Helment 提出 ferment—引起酿酒过程中物质变化的因素(酵素)；1833 年，法国化学家 Payen 和Person 用酒精处理麦芽抽提液，得到淀粉酶； 1878 年，德国科学家 K hne 提出 enzyme—从活生物体中分离得到的酶，意思是“在酵母中”(希腊文)。
(3)酶学的迅速发展(理论研究)： 1926 年,美国康乃尔大学的”独臂学者”萨姆纳博士从刀豆中提取出脲酶结晶，并证明具有蛋白质的性质;1930 年，美国的生物化学家 Northrop 分离得到了胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶结晶，确立了酶的化学本质。
I.酶工程发展如下：①1894 年，日本的高峰让吉用米曲霉制备淀粉酶，酶技术走向商业化：②1908 年，德国的Rohm 用动物胰脏制得胰蛋白酶，皮革软化及洗涤；③1911 年， Wallerstein 从木瓜中获得木瓜蛋白酶，用于啤酒的澄清；④1949 年，用微生物液体深层培养法进行－淀粉酶的发酵生产，揭开了近代酶工业的序幕；⑤1960 年，法国科学家 Jacob 和 Monod 提出的控制子学说，阐明了酶生物合成的调节机制，通过酶的诱导和解除阻遏，可显著提高酶的产量；⑥1971 年各国科学家开始使用“酶工程”这一位词。
大学酶工程考试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 酶的催化作用机制主要依赖于酶分子的哪个部分？A. 蛋白质B. 氨基酸C. 活性中心D. 辅酶答案：C2. 下列哪种酶在生物体内不参与代谢过程？A. 氧化还原酶B. 转移酶C. 水解酶D. 核酸酶答案：D3. 酶工程中常用的固定化酶技术包括哪些？A. 吸附法B. 包埋法C. 交联法D. 所有以上答案：D4. 酶的热稳定性通常与以下哪个因素有关？A. 酶的来源B. 酶的结构C. 酶的活性中心D. 所有以上答案：D5. 下列哪种方法可以提高酶的稳定性？A. 改变pH值B. 添加金属离子C. 添加稳定剂D. 所有以上答案：D6. 酶的催化效率通常比非生物催化剂高多少倍？A. 10倍B. 100倍C. 1000倍D. 10000倍答案：C7. 酶的活性中心通常含有哪种类型的氨基酸残基？A. 酸性氨基酸B. 碱性氨基酸C. 疏水性氨基酸D. 所有以上答案：D8. 酶的Km值代表什么？A. 酶的最大活性B. 酶的半饱和浓度C. 酶的饱和浓度D. 酶的抑制浓度答案：B9. 酶的协同性是指什么？A. 酶的活性随底物浓度增加而增加B. 酶的活性随底物浓度减少而减少C. 酶的活性随底物浓度变化而变化D. 酶的活性随底物浓度达到一定值后不再变化答案：A10. 酶的抑制作用可以分为哪两类？A. 竞争性抑制B. 非竞争性抑制C. 反竞争性抑制D. 所有以上答案：D二、填空题（每空1分，共20分）1. 酶的催化作用是通过降低反应的______来实现的。
答案：活化能2. 酶的专一性是指酶只能催化特定的______或______。
答案：底物；反应类型3. 酶的活性可以通过改变______、______或______来调节。
答案：底物浓度；pH值；温度4. 酶的固定化技术可以提高酶的______和______。
答案：稳定性；重复使用性5. 酶的Km值是酶促反应中底物浓度与______的比值。
大学酶工程考试题及答案一、单项选择题（每题2分，共20分）1. 酶工程中，酶的固定化方法不包括以下哪一项？A. 吸附法B. 包埋法C. 共价结合法D. 离心法答案：D2. 下列哪种酶在食品工业中应用最为广泛？A. 蛋白酶B. 淀粉酶C. 脂肪酶D. 纤维素酶答案：B3. 酶的催化作用具有高度的专一性，这种特性称为：A. 底物专一性B. 区域专一性C. 立体专一性D. 反应专一性答案：A4. 酶的活性中心通常包含以下哪种金属离子？A. 钠离子B. 钾离子C. 镁离子D. 铁离子答案：C5. 酶促反应的速率受温度影响，通常在什么温度范围内酶的活性最高？A. 0-20°CB. 20-40°CC. 40-60°CD. 60-80°C答案：C6. 酶工程中，哪种方法可以提高酶的稳定性？A. 基因突变B. 蛋白质工程C. 酶的固定化D. 酶的纯化答案：C7. 下列哪种物质不是酶的辅因子？A. 金属离子B. 辅酶C. 底物D. 辅基答案：C8. 酶的动力学研究中，Michaelis-Menten方程描述的是：A. 酶的合成过程B. 酶的降解过程C. 酶促反应的速率D. 酶的纯化过程答案：C9. 酶的活性测定中，通常使用哪种单位来表示酶的活性？A. 摩尔每分钟B. 千克每分钟C. 国际单位D. 克每分钟答案：C10. 酶工程中，哪种技术可以用于生产手性药物？A. 基因编辑B. 蛋白质工程C. 酶的固定化D. 酶的定向进化答案：D二、填空题（每题2分，共20分）1. 酶工程中，酶的纯化过程通常包括_______、_______和_______三个步骤。
答案：沉淀、层析、电泳2. 酶的催化机制中，_______是酶活性中心的重要组成部分，它能够结合底物并促进反应的进行。
答案：活性位点3. 在酶的固定化技术中，_______法是一种通过物理吸附将酶固定在载体上的方法。
答案：吸附4. 酶的_______是指酶在一定条件下催化反应的能力，通常用单位时间内底物的转化率来表示。
第五章酶工程习题答案一、填空题1.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是酶分子结构，二是反应条件。
2. Km是米氏常数。
它与酶的种类和反应条件有关。
3..对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是致病菌，二是能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高，三是菌种不易退化，四是最好选用能产生胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。
4.酶制剂有四种类型即液体酶制剂固体酶制剂纯酶制剂固定化酶制剂5.通常酶的固定化方法有吸附法，共价键结合法，交联法，包埋法。
6. 酶分子的体外化学修饰又可分为酶的表面修饰和内部修饰。
经化学修饰的酶热稳定性有较大提高，这是因为修饰剂的多个功能基团与酶分子上的的多个基团（如氨基、羧基、咪唑基等）相互交联，增加了酶分子构象的稳定性。
7. 生物酶工程主要包括三个方面：基因工程方法大量生产酶（克隆酶）；对酶基因修饰产生遗传修饰酶（突变酶）；设计新的酶基因，合成新的酶。
二、问答题1．解释下列名词：核酶：具有催化功能的RNA，包括剪切型核酶和剪接型核酶两类。
克隆酶：通过基因工程手段，克隆各种天然的蛋白质或酶基因，并将其与适当的调节信号连接，再通过一定的载体（质粒）导入能够大量繁殖的微生物体内，使之高效表达。
突变酶：利用有控制地对天然酶基因进行剪切、修饰或突变，从而改变这些酶的催化特性、底物专一性或辅酶专一性，使之更加符合人们的需要。
进化酶：创造特殊的进化条件，模拟自然进化机制（随即突变、基因重组和自然选择），在体外改造酶基因，并定向选择（或筛选）出所需性质的突变酶。
人工酶：又称模拟酶或酶模型，指利用有机化学、生物化学等方法设计和合成一些较天然酶简单的非蛋白质分子或蛋白质分子，以这些分子作为模型来模拟酶对其作用底物的结合和催化过程。
固定化酶：指在一定空间内呈闭锁状态存在的酶，能连续地进行反应，反应后的酶可以回收重复使用。
细胞固定化技术：将细胞限制或定位于特定空间位置的技术称为细胞固定化技术。
酶工程考试复习题及答案一、选择题1. 酶工程是指对酶进行改造和利用的科学，其主要目的不包括以下哪一项？A. 提高酶的稳定性B. 增强酶的催化效率C. 改变酶的底物专一性D. 降低酶的生产成本答案：D2. 在酶工程中，下列哪一项技术不属于酶的改造方法？A. 基因工程B. 蛋白质工程C. 酶的固定化D. 酶的纯化答案：D3. 固定化酶技术的优点不包括以下哪一项？A. 可重复使用B. 提高酶的稳定性C. 便于酶的分离和纯化D. 增加酶的底物专一性答案：D二、填空题4. 酶工程中常用的酶固定化方法包括_______、_______和_______。
答案：吸附法、包埋法、共价结合法5. 酶的催化效率通常用_______来表示，它是酶催化反应速率与_______的比值。
答案：kcat、底物浓度三、简答题6. 简述酶工程在工业生产中的应用。
答案：酶工程在工业生产中的应用主要包括食品加工、制药、生物燃料生产、环境保护等领域。
通过酶的改造和固定化技术，可以提高生产效率，降低成本，实现绿色生产。
7. 描述酶的改造方法之一——蛋白质工程的基本过程。
答案：蛋白质工程的基本过程包括：(1) 确定目标酶的氨基酸序列；(2) 设计预期的氨基酸序列变化；(3) 通过基因突变或基因合成技术实现氨基酸序列的改变；(4) 表达改造后的酶蛋白；(5) 评估改造酶的性能，如稳定性、催化效率等。
四、论述题8. 论述固定化酶在生物反应器中的应用及其优势。
答案：固定化酶在生物反应器中的应用主要包括连续流反应器和批式反应器。
固定化酶的优势包括：(1) 酶的稳定性提高，延长使用寿命；(2) 易于从反应体系中分离，便于回收和再利用；(3) 可以提高底物转化率，减少副反应；(4) 有助于实现工业化大规模生产。
五、案例分析题9. 某制药公司希望通过酶工程提高一种药物前体的合成效率。
请分析可能采取的策略，并讨论这些策略的潜在优势和局限性。
答案：可能采取的策略包括：(1) 利用基因工程技术改造酶的基因，提高酶的催化效率；(2) 通过蛋白质工程技术改变酶的结构，提高其稳定性和底物专一性；(3) 采用固定化技术，使酶在反应过程中易于分离和重复使用。
共三套《酶工程》试题一：一、是非题（每题1分，共10分）1、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。
（）2、酶的分类与命名的基础是酶的专一性。
（）3、酶活力是指在一定条件下酶所催化的反应速度，反应速度越大，意味着酶活力越高。
（）4、液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。
（）5、培养基中的碳源，其唯一作用是能够向细胞提供碳素化合物的营养物质。
（）6、膜分离过程中，膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过，而把大于其孔径的颗粒截留。
（）7、在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对，在酶的亲和层析分离中，可把分子对中的任何一方作为固定相。
（）8、角叉菜胶也是一种凝胶，在酶工程中常用于凝胶层析分离纯化酶。
（）9、α－淀粉酶在一定条件下可使淀粉液化，但不称为糊精化酶。
（）10、酶法产生饴糖使用α－淀粉酶和葡萄糖异构酶协同作用。
（）二、填空题（每空1分，共28分）1、日本称为“酵素”的东西，中文称为__________,英文则为__________,是库尼（Kuhne）于1878年首先使用的。
其实它存在于生物体的__________与__________。
2、1926年，萨姆纳（Sumner）首先制得__________酶结晶，并指出__________是蛋白质。
他因这一杰出贡献，获1947年度诺贝尔化学奖。
3、目前我国广泛使用的高产糖比酶优良菌株菌号为__________,高产液化酶优良菌株菌号为___________。
在微生物分类上，前者属于__________菌，后者属于__________菌。
4、1960年，查柯柏（Jacob）和莫洛德（Monod）提出了操纵子学说，认为DNA分子中，与酶生物合成有关的基因有四种，即操纵基因、调节基因、__________基因和__________基因。
5、1961年，国际酶委会规定的酶活力单位为：在特定的条件下（25oC，PH及底物浓度为最适宜）__________,催化__________的底物转化为产物的__________为一个国际单位，即1IU。
一、名词解释
1透析是将含有小分子杂质的蛋白质溶液装在半透膜（玻璃纸、火绵纸等）制的透析袋里放在蒸馏水中进行，可不断更换蒸馏水，直至杂质被除去。
2超滤 (ultrafiltration，UF ) 一种动态过程，由泵提供推动力，在膜表面产生两个分力：一个是垂直于膜面的法向分力，使水分子透过膜面，另一个是于膜面平行的切向力，把膜面截流物冲掉。
在蛋白质溶液除盐、浓缩及分离纯化中有广泛的应用。
3离子交换层析利用离子交换剂上的可解离基团（活性基团）对各种离子的亲和力不同而达到分离目的
4凝胶层析以各种多孔凝胶为固定相，利用流动相中所含各种组分的相对分子质量不同而达到物质分离
5亲和层析利用生物分子与配基之间所具有的专一而又可逆的亲和力，使生物分子分离纯化
6盐析在盐浓度达到某一界限后，酶的溶解度随盐浓度升高而降低，这称为盐析现象。
7分段盐析在一定的温度和pH值条件下（β为常数），通过改变离子强度使不同的酶或蛋白质分离的方法称为Ks分段盐析；而在一定的盐和离子强度的条件下（KsI为常数），通过改变温度和pH 值，使不同的酶或蛋白质分离的方法，称为β分段盐析
8离心离心分离是借助于离心机旋转所产生的离心力，使不同大小、不同密度的物质分离的技术过程。
9密度梯度离心（density gradient centrifugation）样品在密度梯度介质中进行离心，使沉降系数比较接近的组分得以分离的一种区带分离方法。
10 氨基酸置换修饰氨基酸或核苷酸的置换修饰可以采用化学修饰方法，例如，Bender等成功地利用化学修饰法将枯草杆菌蛋白酶活性中心的丝氨酸转换为半胱氨酸，修饰后，该酶失去对蛋白质和多肽的水解能力，却出现了催化硝基苯酯等底物水解的活性。
但是化学修饰法难度大，成本高，专一性差，而且要对酶分子逐个进行修饰，操作复杂，难以工业化生产。
现在常用的氨基酸置换修饰的方法是定点突变技术。
定点突变（site directed mutagenesis）是20世纪80年代发展起来的一种基因操作技术。
是指在DNA序列中的某一特定位点上进行碱基的改变从而获得突变基因的操作技术。
是蛋白质工程（Protein Engineering）和酶分子组成单位置换修饰中常用的技术。
定点突变技术，为氨基酸或核苷酸的置换修饰提供了先进、可靠、行之有效的手段。
11 酶化学修饰通过对酶蛋白分子的主链进行“切割”、“剪切”以及在侧链上进行化学修饰来达到改造酶分子的目的。
这种应用化学方法对酶分子施行种种“手术”的技术称为酶化学修饰
酶的体外定向进化，又称实验分子进化，属于蛋白质的非合理设计，它不需事先了解酶的空间结构和催化机制，通过人为地创造特殊的条件，模拟自然进化机制(随机突变、重组和自然选择)，在体外改造酶基因，并定向选择出所需性质的突变酶。
二、简答题
1、有机溶剂沉淀法的优缺点
优点：1）分辨率比盐析法高 2）沉淀不需脱盐 3）溶剂易蒸发，沉淀易离心
缺点：1）容易引起蛋白质变性失活 2)有机溶剂易燃、易爆，对安全要求较高。
2、常用的分离提纯酶的方法有哪些？
酶的主要提取方法
盐溶液提取。
酸溶液提取。
碱溶液提取。
有机溶剂提取
酶的分离方法
沉淀分离。
离心分离。
过滤与膜分离。
层析分离。
电泳分离。
萃取分离
3、请列举三种根据分子大小进行酶分离纯化的方法，并简述其原理。
过滤与膜分离
过滤是借助于过滤介质将不同大小、不同形状的物质分离的技术过程。
过滤介质多种多样，常用的有滤纸、滤布、纤维、多孔陶瓷、烧结金属和各种高分子膜等，可以根据需要选用。
（1）微滤(Microfiltration，MF)
一种静态过滤，随过滤时间延长，膜面上截流沉积不溶物，引起水流阻力增大，透水速率下降，直至微孔全被堵塞
（2）超滤 (ultrafiltration，UF )
一种动态过程，由泵提供推动力，在膜表面产生两个分力：一个是垂直于膜面的法向分力，使水分子透过膜面，另一个是于膜面平行的切向力，把膜面截流物冲掉。
在蛋白质溶液除盐、浓缩及分离纯化中有广泛的应用。
（3）反渗透（Reverse osmosis，RO）利用反渗透膜选择性地只能透过溶剂(通常是水)的性质，对溶液施加压力，使溶剂通过反渗透膜而从溶液中分离出来的过程
4、酶分离纯化技术中哪些与它的等电点有关？试述这些技术分离纯化的原理
电泳分离
带电粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的过程称为电泳。
电泳方法按其使用的支持体的不同，可以分为：纸电泳薄层电泳薄膜电泳凝胶电泳自由电泳等电聚焦电泳
颗粒在电场中的移动速度主要决定于其本身所带的净电荷量，同时受颗粒形状和颗粒大小的影响。
此外，还受到电场强度、溶液pH 值、离子强度及支持体的特性等外界条件的影响。
等电点沉淀法利用两性电解质在等电点时溶解度最低，以及不同的两性电解质有不同的等电点这一特性，通过调节溶液的pH值，使酶或杂质沉淀析出，从而使酶与
5简述酶分子修饰的意义
通过酶分子修饰，可以使酶分子结构发生某些合理的改变
提高酶的活力 activity
增强酶的稳定性 stability
降低或消除酶的抗原性 immunological property
研究和了解酶分子中主链、侧链、组成单位、金属离子和各种物理因素对酶分子空间构象的影响 structure ，可以进一步探讨其结构与催化特性之间的关系，所以酶分子修饰在酶学和酶工程研究方面具有重要意义。
6、酶分子修饰的主要方法有哪些？
1、金属离子置换修饰, 2大分子结合修饰(共价/非共价) 3侧链基团修饰4肽链有限水解修饰5氨基酸置换修饰 6酶分子的物理修饰7、酶定点突变的概念、特点和应用
8、酶分子修饰技术应用与展望
酶分子修饰技术是通过各种方法使霉分子的结果发生某些改变，从而改变霉的某些特性和功能技术的过程。
通过酶分子修饰技术技术可以使酶分子结构发生某些变化，就有可能提高酶的活力，增强酶的稳定性，降低或消除酶的抗原性等，同时通过酶分子修饰，研究和了解酶分子中主连、侧链、组成单位、金属离子和各种物理因素对酶分子空间构想的影响，可以进一步探讨其结构与功能之间的关系，所以酶分子修饰技术在酶学和基因工程研究方面有着重要的意义。
尤其是20世纪80年代以来，已将酶分子修饰与基因工程技术结合在一起，通过PCR技术改变DNA中的碱基序列，使酶分子修饰技术的信息储存在DNA分子中，这样酶分子修饰展现出更加广阔的前景。
酶分子修饰技术的应用存在于我们生活的各个方面。
如工业、食品、农业、医药、环保……
在医药方面的应用，人类疾病的治疗效果好坏与否，在很大程度上决定于诊断的准确性。
疾病诊断的方法很多，其中酶学诊断特别引人注目。
酶在疾病的诊断、治疗和药物的应用的生产方面有广泛的用途，然而由于酶在体内不稳定，具有抗原性、半衰期短，严重影响其使用效果，通过酶分子修饰技术可以显著提高酶的稳定性，减少或者消除抗原性、延长期半衰期，大大扩展酶的应用范围、提高应用的价值。
由于酶具有专一性强、催化效率高、作用条件温和等显著的催化特点，酶学诊断已经发展成为可靠、简便又快捷的诊断方面，具有广阔的应用前景。
酶学诊断方法包括两个方面，一方面是根据体内原有酶活力的变化来诊断某些疾病，另一方面是利用酶来测定体内某些物质的含量，从而诊断某些疾病。
另外在现代社会中，随着工业的发展，环境污染也愈来愈严重，空气污染，水污染到处可见。
在循环水系统漏入大量油品时以及装置在检修后的开工阶段，常规水处理工艺是采用杀菌剥离、酸洗预摸膜、排污置换处理。
而采用生物酶水处理技术可在不置换、不排污的条件下，对设备及管网进行除油、净化、清洗和保护处理，在满足系统的缓蚀、阻垢要求的条件下，运行费用约为常规处理方法的3%，并且可节省大量的清洗、置换用水。
酶分子修饰技术已经成为酶工程中具有重要意义和广阔应用前景的
研究开发领域。
酶分子修饰技术在酶学和基因工程研究方面有着重要的意义。
尤其是近些年来，已将酶分子修饰与基因工程技术结合在一起，通过基因定位突变和聚合酶链反应技术改变DNA中的碱基序列，使酶分子修饰技术的信息储存在DNA分子中，通过基因克隆和表达，就可以通过生物合成不断获得新的特性和功能的酶，这样酶分子修饰展现出更加广阔的前景。
