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2014年～2018年辽宁省水产养殖过程中氯霉素使用及监测情况分析陈静; 耿红卫; 林军; 刘永兴; 王兴博【期刊名称】《《吉林农业》》【年(卷),期】2019(000)022【总页数】1页(P59)【关键词】氯霉素; 水产养殖; 使用及监测【作者】陈静; 耿红卫; 林军; 刘永兴; 王兴博【作者单位】辽宁省农业发展服务中心辽宁大连116015【正文语种】中文【中图分类】TS254.7氯霉素是一类广谱抗生素，我国在20世纪80年代开始用于水产养殖病害防治。
毒理学研究表明，氯霉素对人的造血系统、消化系统具有严重的毒性反应，有可能引发人的再生障碍性贫血；同时还会引起视神经炎、皮疹等不良反应。
另外，该药物理化性质极为稳定，可通过食物链在人体内蓄积，从而对人体健康造成严重的损害。
2002年农业农村部正式公布氯霉素为动物源性食品中“不得检出”的药物，十几年来，渔用违禁药物的监查力度逐年加强。
本文结合工作实际，对近五年辽宁省水产养殖过程中氯霉素使用和监测情况进行了分析。
1 近五年辽宁省水产养殖中氯霉素使用执法检查情况五年来，辽宁省认真贯彻农业农村部总体安排部署，严格执行《农产品质量安全监测管理办法》和《产地水产品质量安全监督抽查工作暂行规定》的要求，采取专项执法检查、交叉执法监督检查、创建质量安全执法示范单位等方式大力开展水产品质量安全监管工作。
2014年出动执法人员40人次，检查生产企业158家；2015年出动执法人员1115人次，检查生产企业359家；2016年出动执法人员2771人次，检查生产企业1179家；2017年出动执法人员4745人次，检查生产企业1426家；2018年出动执法人员1859人次，检查生产企业934家。
在各项监督检查过程中未发现一例水产养殖投入品有氯霉素违法添加和使用情况。
2 近五年辽宁省水产品产地抽检过程中氯霉素监测情况为保障水产品的质量安全，保护生产者及消费者的权益，我省始终把水产品质量安全做为重大的民生问题来抓，根据农业农村部文件要求全系统高度重视、全力以赴，认真圆满完成了各项水产品监测工作。
利用酶联免疫法检测水产品中氯霉素残留的结果分析作者：刘万学来源：《黑龙江水产》 2015年第5期刘万学（黑龙江省水产技术推广总站黑龙江哈尔滨 150018）随着水产养殖业的快速发展，人们对水产品质量安全日益关注。
滥用抗生素、激素等药物防治水产动物疾病，导致水产品的质量下降，使用禁用渔药而导致水产品药物残留超标。
国家投入大量的人力物力对食品安全进行监督抽查，确保餐桌上的安全。
氯霉素就是水产品质量安全监督抽查中的重要一项抗生素。
氯霉素最初是由委内瑞拉链丝菌（Streptomyces Venezuela）的培养液中提取制得，是一种常用的广谱抗生素，曾在畜牧业中广为应用，治疗畜禽肠道感染有特效，至今已有50年的使用历史。
但氯霉素有较强的副作用和毒性作用，如果氯霉素在食用动物中残留，可通过食物链传给人类。
长期微量摄入氯霉素会引起多种疾病，氯霉素抑制骨髓造血功能造成过敏反应，对人体的造血系统危害很大，容易引起再生障碍性贫血。
此外该药还可引起肠道菌群失调及抑制抗体的形成，还会引起视神经炎、皮疹等不良反应，对人类的健康造成危害。
氯霉素已在国外较多国家禁用，是禁用抗生素。
世界上许多国家禁止此药用于生产食品动物，并规定了在畜产品中氯霉素不得检出。
中国农业部已将氯霉素从2000年版《中国兽药典》中删除并将其列为禁药。
而欧盟的进口食品卫生标准规定氯霉素含量标准为不得检出。
目前的氯霉素的检测方法是依据《水产品中氯霉素残留量的测定气相色谱法》使用气相色谱仪进行检测，其检测结果可靠，但是分析速度较慢。
因此，大都先使用酶联免疫法进行筛选，筛选结果为阳性的样品再使用气相色谱法进行确定。
酶联免疫法具有灵敏度高、特异性强、高通量、成本低等优点，因而适合于水产品中氯霉素日常检测。
但是在使用过程中，由于使用不同厂家的试剂盒和其精密度和灵敏度不同，而检测出的阳性结果比率不同，阳性结果过多，这样需要经过气相色谱法进行确定，最终确定为假阳性。
氯霉素残留的检测方法研究进展摘要：氯霉素（CAP）是一种广谱、高效的抗生素，在水产养殖业中应用于各种疾病防治和细菌感染的治疗。
研究表明，残留氯霉素对人体有毒性副作用，严重者可致盲。
在现有检测方法的基础上，不断改进是时代的发展趋势。
从目前的研究和实际发展来看，发展更实用的检测方法是至关重要的。
电化学方法以其成本低、操作简单、速度快和灵敏度高的优点越来越受到人们的重视。
本文从动物源性食品中氯霉素的常规检测方法入手，在分析现有研究进展的基础上，探讨了传统检测方法的优缺点。
关键词：动物源性食品; 氯霉素; 检测方法；石墨烯复合材料：电化学检测0引言最近几年，肉类问题层出不穷，引起了世界公众对肉类产品安全的关注。
在水产养殖中，通常在饲料或饮用水中添加抗生素和兽药，残留的兽药会随食物链进入消费者体内，可能影响体内正常代谢、引发人体过敏反应、引起细菌耐药性、产生特殊毒性等，对个人和社会造成严重危害[1]。
氯霉素（CAP）是一种在水产养殖业中应用于各种疾病的预防和细菌感染的治疗的抗生素。
残留氯霉素对人体的毒性副作用不仅会损害人体造血系统，还会引起细菌耐药性的增加和机体菌群的失衡，严重时甚至会导致失明。
目前以后多种方法检测肉制品中的非食用物质。
1氯霉素检测常用方法1 .1色谱分析 ( chromatography and chromatographic analysis )高效液相色谱法（HPLC）采用高压注射器系统，以液体为流动相，将单个溶剂或混合溶剂、缓冲溶液和其他具有不同极性的流动相泵送至具有固定相的色谱柱。
1. 2 荧光探针技术( fluorescent probe technique)荧光探头使用荧光材料作为指示器，指示器被特定波长的光激发，以产生荧光并检测产生的荧光。
1. 3 免疫学技术( immunological technique)1. 3. 1 酶联免疫吸附法(ELISA)酶免疫测定的本质是将抗体与酶复合物结合，通过显色来检测它们。
FOOD INDUSTRY ·127水产品中氯霉素残留检测方法 李梓建 广东省汕头市食品检验检测中心 广东省汕头市质量计量监督检测所氯霉素是一种广谱抗生素，对很多不同种类的微生物均起显著作用。
近年来，在水产品养殖和运输过程中违规使用氯霉素的现象屡见不鲜，问题日益突出，严重威胁到了人民群众的健康。
本文简述了水产品中氯霉素残留的多种检测方法，包括色谱分析法、微生物法、免疫分析法以及生物传感器、生物芯片等新型检测技术，并对其优缺点进行了比较分析，以期为水产品中氯霉素残留检测提供参考。
最后本文还对氯霉素残留检测方法的发展趋势进行了展望。
氯霉素（ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ，ｃｈｌｏｒｏｍｙｃｅｔｉｎ）是白色或无色的针状或片状结晶，由委内瑞拉链丝菌产生的抗生素。
大卫·戈特利布于１９４７年从南美洲委内瑞拉的土壤内的委内瑞拉链霉菌成功分离，并于１９４９年合成并引入临床试验。
它属于抑菌性广谱抗生素，也是世界上首种完全由合成方法大量制造的广谱抗生素，对很多不同种类的微生物均起显著作用。
但是，由于它对造血系统有严重不良反应，需要慎重使用。
检测方法分析的必要性水产品营养丰富，品种繁多且风味各异，深受老百姓的喜爱，需求量也是与日俱增，这在很大程度上促进了我国水产品养殖业规模的发展。
然而，伴随着发展而来的是越来越多的抗生素类药物被应用其中，由于部分养殖户和商家不遵守国家有关规定及未合理使用药物，造成抗生素在水产品中残留居高不下。
其中，氯霉素药物的违规使用更是屡见不鲜，甚至让水产品成为食品安全的重灾区之一。
由于氯霉素药物存在严重的毒副作用，能够抑制骨髓造血功能、引发再生障碍贫血、粒状白细缺乏症和新生儿、早产儿灰色综合症等，美国、欧盟、日本等很多国家都禁止其在动物源性食品中检出。
依据中华人民共和国农业部公告第２３５号中《动物性食品中兽药最高残留限量》（发布日期：２００２年１２月２４日）的规定，氯霉素为禁止使用的药物，在动物性食品中不得检出。
[作者简介] 郭颖燕(1969-),女,硕士,副主任技师,主要从事公共卫生研究。
【短篇报道】海捕虾二氧化硫和氯霉素残留量检测结果分析郭颖燕(浙江省温岭市卫生监督所,浙江温岭 317500)[关键词] 海捕虾;二氧化硫;氯霉素;残留检测[中图分类号] R 155.5+5 [文献标识码] C [文章编号] 1004-8685(2008)11-2422-01 随着市场经济的不断发展,人民生活水平的不断提高,消费者对食品质量的要求也越来越高。
海捕虾中有毒有害物质超标不仅使食品质量受到影响,而且影响了渔民的经济收入,直接影响渔区的社会稳定。
其中常见的有氯霉素和二氧化硫残留量,焦亚硫酸钠是一种常用食品添加剂,在海产品捕捞和运输过程中常用作保鲜剂,通过生成亚硫酸,对水产品起保鲜作用,增加水产品的鲜艳色泽,抑制褐变和微生物繁殖。
规范使用食品保鲜剂,能增加水产品鲜度,延长存储时间,提高经济效益,但食用含有过量二氧化硫的食品会导致胃肠道反应[1],如恶心、呕吐,人体肠道存在一种嗜硫微生物,过量二氧化硫残留可促进嗜硫微生物的大量繁殖,导致肠壁受损,引起肠道溃疡与肠细胞癌变。
二氧化硫残留还可引起血液酸性化,消耗血钙,致使机体钙丢失。
氯霉素对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌具有很好的抑制作用,后来人们发现氯霉素对骨髓和新生儿有较大的毒性,易引起人体血中毒,导致不可逆的再生障碍性贫血等严重毒副作用,对人类健康存在巨大的潜在威胁,禁止在食品中使用氯霉素。
为了解海捕虾中二氧化硫和氯霉素残留情况,以便进一步加强监督管理,本文对海捕虾的二氧化硫和氯霉素残留量进行检测分析。
1 材料与方法1.1 采样采用随机抽样法直接从捕捞渔船上采集样品。
1.2 仪器M K 3酶标仪;7220型分光光度计。
1.3 方法1.3.1 二氧化硫残留量检测采用G B /T 5009-34-2003盐酸副玫瑰苯胺法1.3.1.1 原理:亚硫酸盐与四氯汞钠反应生成稳定的络合物,再与甲醛及盐酸副玫瑰苯胺作用生成紫红色络合物,与标准系列比较定量。
水产品肌肉组织中氯霉素残留量检测方法的对比分析引言：氯霉素是一种广谱抗生素，常用于水产养殖中的疾病治疗和预防。
然而，由于氯霉素在人体中可以引起苯甘氮类药物引起的无异位脂肪移植症，因此世界各国都对水产品中的氯霉素残留量有严格的限制。
针对水产品肌肉组织中氯霉素残留量的测试，现有许多不同的方法和技术。
本文将对其中一些常用的方法进行对比分析，并评估它们的优缺点。
方法一：高效液相色谱法（HPLC）检测氯霉素残留量HPLC是一种常用的分离和定量分析方法，可以快速准确地检测氯霉素残留量。
该方法通过将水产品肌肉组织样品提取液经过色谱分离，利用紫外或荧光探测器测量不同物质的峰值面积，从而定量检测氯霉素的含量。
该方法的优点是操作简便、准确性高，可以同时检测多种氯霉素类药物。
然而，HPLC方法的缺点是设备昂贵、操作复杂，对操作人员的技术要求较高。
方法二：酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测氯霉素残留量ELISA是一种常用的生物学分析方法，可以通过酶标记的抗体与目标物质结合来检测氯霉素残留量。
该方法操作简便，具有高通量性和准确性。
ELISA方法的优点是对样品处理较少，检测时间短，适用于大批量样品分析。
然而，ELISA方法的缺点是可能存在交叉反应和假阳性结果，对操作人员技术要求较高。
此外，ELISA方法只能定性或半定量检测氯霉素残留量，不能提供准确的定量结果。
方法三：气相色谱质谱联用法（GC-MS）检测氯霉素残留量GC-MS是一种常用的分析方法，可以通过将水产品肌肉组织样品提取液经过气相色谱分离，然后利用质谱检测器对不同物质进行鉴定和定量。
GC-MS方法准确性高，可以进行定量检测，具有良好的选择性和灵敏性。
然而，GC-MS方法的缺点是操作复杂，需要较长的分析时间，设备昂贵，对操作人员的技术要求较高。
综合对比分析：从操作简便性、准确性、成本和设备要求等方面考虑，HPLC方法适合进行氯霉素残留量的定量检测。
而ELISA方法适合进行大批量样品的快速筛查，但不能提供准确的定量结果。
中图分类号：中图分类号：S859.796; 文献标识码：A；文章篇号:1007-2764(2003)03-0028-66 养殖对虾中氯霉素残留的放射免疫分析徐美奕 孟庆勇(广东医学院分析中心 湛江 524023)摘 要：采用放射免疫分析法测定了湛江市水产市场3份新鲜养殖对虾及2份出口养殖对虾氯霉素残留量。
结果表明，本方法的检测限量为0.15ppb，3份新鲜养殖对虾体内氯霉素残留量均大于0.15ppb，2份出口养殖对虾氯霉素残留量均小于0.15ppb。
提示放射免疫分析法可作为水产品中氯霉素残留量的有效检测手段。
关键词：放射免疫分析法；氯霉素；养殖对虾Application of RIA Method for the Determination of RemainedChloramphenicol in Breed PrawnXu Meiyi, Meng Qingyong(Analysis Center of Guangdong Medical College, Zhanjiang 524023)Abstract: The content of remained chloramphenicol in 3 kinds of fresh breed prawn and 2 kinds of export of breed prawn from Zhanjiang aquatic products market was determined by RIA. The result showed that the limit of determination of RIA method was 0.15ppb. The content of remained chloramphenicol in 3 kinds of fresh breed prawn was higher than 0.15ppb, and it was lower than 0.15ppb in that of 2 kinds of export of breed prawn. It suggested that RIA could be regard as an efficacious method for determining on remained chloramphenicol in aquatic products.Key words: RIA; chloramphenicol; breed prawn氯霉素(Chloramphenicol, CAP)是一种有效的广谱抗生素，已广泛应用于动物各种传染性疾病的治疗。
CAP在被治疗动物中易造成残留，食用含CAP的动物食品后会引起机体再生障碍性贫血、粒状白细胞缺乏症等疾病，对人体健康构成潜在威胁[1,2]。
长期以来，动物性食品中CAP残留问题一直备受关注[3]，各国对氯霉素残留规定了最大允许限量(MRL)[4]：欧盟1ppb，美国、加拿大0.3ppb，日本50ppb。
因此，有效监测对虾中CAP的残留量，对于保障人体健康、保证外贸产品质量有着重要意义。
本文采用放射免疫法测定对虾体内氯霉素含量，检测限量可达0.15ppb，可应用于水产品中氯霉素残留量的痕量检测。
1 材料与方法1.1 材料从湛江市霞山水产批发市场购买的3份新鲜养殖对虾，剥壳取虾仁作为分析样品1#、2#、3#，2份出口养殖收稿日期:2003-5-15作者简介：徐美奕，男，1967,12,广东医学院分析中心实验师,从事实验核医学工作。
对虾虾仁为分析样品4#、5#，样品前处理及测定过程中戴一次性手套，防止引入氯霉素污染品。
1.2 仪器和试剂1.2.1 仪器LS-6000SC标准架液体闪烁系统(美国Beckman公司产)；高速匀浆机；高速冷冻离心机；电热恒温水浴箱；XW-80A漩涡混合器；微量可调加样器。
1.2.2 试剂美国CHARM公司的Charm II Test for Chloram -phenicol 3H-氯霉素放射免疫试剂盒；溶水性闪烁液：PPO 4.0g、POPOP 0.1g、无水乙醇150ml、Triton X-100 50ml加二甲苯至1000ml，PPO、POPOP、Triton X-100均为进口试剂，无水乙醇、二甲苯均为分析纯试剂。
1.2.3 试剂配制按试剂盒说明书[5]溶解、配制有关试剂。
1.3 测定方法[5]1.3.1 实验原理[6]放射免疫分析(Radioimmunoassy, RIA)是建立在免疫反应基础上的核技术，最基本的原理是放射性核素标记的抗原和被测抗原(或标准品)对有限量的抗体66进行可逆性的竞争结合反应。
Ag(不定量)+Ab（有限量）⇔Ag-Ab(非标记复合物) Ab（有限量）+*Ag (一定量) ⇔*Ag-Ab(标记复合物)*Ag是放射性核素标记的抗原，与Ag为同种抗原，对抗体(Ab)具有相同的特异结合能力，*Ag、Ag与Ab 以相同的结合率生成复合物，复合物的多少取决于Ag、*Ag的浓度。
当[Ag]高时，生成的[Ag-Ab]也多。
有限量的Ab被Ag结合多了，与*Ag结合生成的[*Ag-Ab]就少，表现为*Ag-Ab的放射性计数率降低。
反之，系统内[Ag]低时，与*Ag结合生成的[*Ag-Ab]多，放射性计数率则升高。
因此，*Ag-Ab的放射性(cpm)与待测Ag的含量呈逆相关关系。
1.3.2 样品前处理取50ml塑料离心管，称取虾仁20g置于离心管中，加入20ml MSU提取缓冲液。
用匀浆机将虾仁搅碎、匀浆，虾仁匀浆后将离心管置于80℃水浴45min，然后取出离心管进行冰水浴10min。
冰水浴完毕立即进行3300rpm离心10min，吸取上清液于10ml干净试管中，并用M2缓冲液调节其pH为7.5作为样品提取液备用。
1.3.3 氯霉素放免分析程序取11支10ml试管编号：1~3#为阴性对照，4~6#为阳性对照，7~11#为样品。
分别往试管中放进1粒氯霉素抗体药片(白色)，加入0.3ml双蒸馏水，振荡溶解。
在1~3#试管中分别加入5ml阴性对照液，4~6#试管中分别加入5ml阳性对照液，7~11#试管中各加入5ml样品提取液，振荡混合15s，加盖上下翻转混匀15次。
将各试管置于50℃水浴3min后，将试管移出振荡混合15s，并上下翻转15次，然后又将试管置于50℃水浴中3min。
水浴完毕将试管移出，分别加入1粒3H标记的氯霉素抗原药片(绿色)，振荡混合15s，加盖上下翻转15次，将试管置于50℃水浴中3min。
温育反应完毕，3300rpm 离心10min，迅速弃去上清液，分别往各试管中加入0.3ml双蒸馏水破坏、溶解抗原抗体复合物。
用3ml溶水性闪烁液将抗原抗体复合物溶解液洗净移入闪烁瓶中，旋紧盖子轻轻摇匀，避光4h，待测。
1.3.4 计数率测量用液体闪烁计数器测定氯霉素试剂阴性对照、阳性对照及样品的cpm。
试剂阳性对照氯霉素含量为0.15ppb，根据计数率判断样品浓度范围。
2 结果与分析2.1 测量数据试剂阴性对照、阳性对照、待测样品液闪计数率及氯霉素含量见表1。
2.2 结果分析根据试剂盒说明书，取试剂阴性对照计数率的85%作为零控制点，若样品计数率大于零控制点，则样品为阴性(即样品氯霉素含量<0.15ppb)；阳性对照计数率小于零控制点，符合试剂盒质控要求；样品计数率小于或等于阳性对照的，则样品为阳性，即样品氯霉素含量≥0.15ppb；样品计数率介于阳性对照和零控制点之间的，则样品为假阳性，需重新测定。
从表1可见，1~3#样品为阳性，其氯霉素含量均>0.15ppb，5#样品为阴性，其氯霉素含量<0.15ppb，4#样品为假阳性，需重测，重新测量(重复整个测定步骤，而不是简单的重复进行液闪计数)后，测得4#样品氯霉素含量<0.15ppb。
也即说，从水产批发市场购买的3份新鲜养殖对虾体内氯霉素含量均大于0.15ppb，2份出口养殖对虾内氯霉素含量均小于0.15ppb。
表1 养殖对虾中氯霉素含量名称计数率均值(cpm) 氯霉素含量(ppb)阴性标准542.7 -零控制点461.3 -阳性标准366.1 0.151#样品98.0 >0.15 2#样品214.5 >0.15 3#样品338.7 >0.15 4#样品460.7 >0.15 5#样品656.7 <0.15 4#样品(重测) 482.1 <0.15 2.3 回收率试验取5份虾仁样品各20g经样品前处理后，加入适量的试剂阳性对照液，按放免分析程序进行温育、计数率测量，测得回收率分别为93.4%、102.3%、104.8%、98.4%、97.3%，平均回收率为99.24%。
3 讨论氯霉素残留分析主要方法有微生物法、化学法(包括气相色谱法、液相色谱法等)及免疫检测法[7]。
微生物法虽经济、简单，但灵敏度不高(>10ppm)，且缺乏特异性[8]；化学法虽在灵敏度和特异性上有不同程度的提高，检测限量为5~10ppb，但需要繁琐的前处理[9]；免疫检测法主要有放射酶分析法、酶联免疫法和放射免疫分析法，都具有灵敏、特异、简便的优点，但放射酶分析法的放射性物质量较大，易产生放射性污染，酶联免疫法在灵敏度上不及放射免疫分析法[10]。
放射免疫分析法灵敏度高、特异性强、检测限量低、操作简便。
用Charm II Test for Chloramphenicol 3H 标记的氯霉素放射免疫试剂盒检测对虾、鱼等水产品中氯霉素含量，具有放射性活度低、放射毒性低、对环境污染少的特点，测定时间约7h，能短时间内检测几十个样品，样品预处理简单，灵敏度高，结果可靠，检测限量达0.15ppb，能满足对出口水产品氯霉素残留的检测要求，可作为水产品氯霉素残留量的检测手段。
6768参 考 文 献1 张龙主编.兽医药物化学.中国农业出版社,1999，280~282 2 刘智宏.酶标免疫测定法(EIA)在检测动物性食品中氯霉素残留的英应用.中国兽医杂志,1995，29(2)：47~48 3Meyer L. Polak B C P . Shut D. et al. Blood dyerasias attributed to chloramphenicol residues in milk, eggs, and tissues from foot producing animals. J Assic Off Anal Chem., 1995, 8(5): 990~9994 施冰,陈委玲,吴抒怀等. 水产品中氯霉素残留的ELISA 检测法.国外分析仪器,2003,3：31~345Operator’s Manual Lot Number A TBLoo2. Charm II Test For Chloramphenicol in Tissue (beef, swine, poultry, fish and shrimp). Charm Sciences Inc6 程绍钧主编. 检验核医学.重庆:重庆大学出版社,1999, 62~907胡顶飞,沈建忠.氯霉素类抗生素的残留分析.中国兽药杂志,2001,35(5)：55~578 Schwarm E et al. Non-specificity of published assays forchloramphenicol solution. J Pham Sci, 1986, 55: 744~7459WalJet al. High performance liquid chromatographic determination of chloramphenicol in milk. J Assoc Off Anal Chem., 1980, 63: 1044~104810 Arnold D et al. Trace analysis of chloramphenicol residues ineggs, milk, and meat: Comparison of gas chromatography and radio immunoassay. J Assoc Off Anal Chem., 1985, 68: 984~990。
