桦褐孔菌甲醇提取物抗氧化及抗炎作用研究

桦褐孔菌的药用功能概述张蕾;王雪【摘要】桦褐孔菌(Inonotus obliquus)是主要产于俄罗斯的一种药用型真菌,包含多种活性物质如羊毛甾醇三萜类、桦褐孔菌醇、桦褐孔菌素、多糖、木质素、生物碱、栓菌酸和黑色素等.桦褐孔菌被应用于各种疑难杂症,其入药部位主要是菌核,大量药理实验表明其有抗氧化、调节血脂、抗癌症(肝癌、胃癌、肺癌、宫颈癌、乳腺癌、直肠癌)、治疗糖尿病、抗病毒、抗衰老和增强免疫力等作用.主要对桦褐孔菌的药用功能进行概述,并对其未来发展进行展望.【期刊名称】《中国林副特产》【年(卷),期】2018(000)004【总页数】4页(P83-86)【关键词】桦褐孔菌;真菌;药用功能【作者】张蕾;王雪【作者单位】牡丹江师范学院生命科学与技术学院 ,黑龙江牡丹江 157012;牡丹江师范学院生命科学与技术学院 ,黑龙江牡丹江 157012【正文语种】中文【中图分类】R282.71;R965桦褐孔菌 (Phaeoporus obliquusJ. Schroet)，也称作桦树茸、白桦茸，被赞誉为“西伯利亚灵芝”，是一种非常珍稀而名贵的药用真菌，生长在温度相对较低的俄罗斯西伯利亚地区的原始森林中，不能人工栽培，非常稀少，颜色呈现出深栗色，常在树皮破损及伤节处形成肉瘤状菌核，菌块性状为近球形或不定形块状。

近年来随着人们生活质量的提高，更多的人开始了解天然食品和保健药物，由此引起世界各国学者对桦褐孔菌的广泛关注。

1 桦褐孔菌的药理活性1.1 抗氧化、降血脂作用抗氧化全称为抗氧化自由基，人体在与外界密切接触的过程中，具有强氧化性的自由基会不断的在体内产生并累积。

大量研究表明，某些疾病、细胞癌变以及癌症的发生和机体衰老常常伴随着过量自由基的蓄积。

常见的合成抗氧化剂可能具有生物毒性，以至于近年来新型抗氧化剂的开发热点主要为天然活性物质。

梁丽雅等[1]的研究结果表明桦褐孔菌提取物在生物的体内和体外都具有强还原性，一方面可以有效清除氧化自由基，另一方面能提高机体消除超氧阴离子、羟自由基的活性，其中以乙酸乙酯作为萃取剂效果最为突出。

2019.36科学技术创新桦褐孔菌的药理作用研究进展李建华（黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨150040）桦褐孔菌（Inonotus obliquus ）为多孔菌科褐卧孔菌属，别名白桦茸，是一种生于白桦树上的食药真菌，其子实体呈炭黑色的块状形态，表面有不规则沟痕，质地坚硬[1]。

主产于主要分布于俄罗斯，日本北海道，中国黑龙江和吉林地区[2]。

主要用来治疗糖尿病和癌症，我国有关研究表明桦褐孔菌对糖尿病和癌症有较好的疗效[3]，据此对桦褐孔菌的药理作用进行归纳、总结，为桦褐孔菌的进一步研发和临床使用安全提供参考。

1药理作用桦褐孔菌在近些年成为国外研究的热潮，对其药理的研究更为深入，现代药理研究表明，白桦茸主要有降血糖、降血脂、抗氧化、抗肿瘤、抗炎和免疫作用等[4]。

对桦褐孔菌的药理作用研究较为丰富，但很多作用机制尚不清楚。

1.1降血糖作用随着人们生活水平的提高，饮食不规律等原因，导致糖尿病人群逐渐升高。

徐正哲等[5]研究发现，通过高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素的方法建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型,给药发酵桦褐孔菌发现空腹血糖水平和肝糖原含量明显降低，可显著改善Ⅱ型糖尿病大鼠血糖水平，此研究给予发酵桦褐孔菌，很难确定出桦褐孔菌发挥降血糖的活性成分。

王飞雪等[6]研究发现，注射链脲佐霉素（STZ ）诱导糖尿病小鼠模型，其结果表明能有效降低糖尿病小鼠血糖，其机制可能包括修复胰岛素β细胞,促进胰岛素分泌,促进肝糖原的合成,降低血乳酸含量五个方面。

此类研究为桦褐孔菌治疗糖尿病的活性成分和作用机制等提供了一定的参考。

1.2降血脂作用血脂升高会引起高脂血症。

梁丽雅等[7]研究发现，通过喂饲高脂饲料建立高脂血症大鼠模型给予大鼠桦褐孔菌醇提物，结果表明能显著降低高脂血症大鼠的血清总胆固醇（TC ）、高三酰甘油（TG ）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C ）水平，其机制可能通过提高大鼠血清、肝脏和心脏中的SOD 和GSH-Px 活力、降低MDA 含量有关。

桦褐孔菌醇提物抗氧化和降血脂功能的研究梁丽雅;闫师杰;张泽生【摘要】研究桦褐孔菌醇提物的体内抗氧化和降血脂保健功能.选用雄性SD大鼠进行动物实验,随机分成5组,正常对照组喂饲普通饲料,其余各组喂饲高脂饲料.结果表明:桦褐孔菌醇提物能提高大鼠血清、肝脏和心脏中的SOD和GSH-Px活力、降低MDA含量;能显著降低高脂血症大鼠的血清TC、TG和LDL-C水平.为桦褐孔菌资源利用及保健品开发提供理论参考.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2012(033)010【总页数】4页(P162-165)【关键词】桦褐孔菌醇提物;抗氧化活性;降血脂作用【作者】梁丽雅;闫师杰;张泽生【作者单位】天津农学院食品科学系,天津300384;天津农学院食品科学系,天津300384;天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津300457【正文语种】中文近年来，随着分子生物学、医学、食品科学等领域的发展，以及人们生活水平的提高和健康意识的增强，对药用真菌桦褐孔菌的生物活性及活性成分的研究都取得了显著成果。

研究发现桦褐孔菌粗多糖具有体外抗氧化和清除自由基[1]、抗癌[2-7]、降血糖[8]等多项生理功能，崔鹤松等[9]初步研究了桦褐孔菌粗多糖对实验性高脂血症模型大鼠血脂的影响。

也有研究者发现桦褐孔菌醇提物也同样具有抗突变[10]、抗炎[11]、抗氧化等多种功能[12-14]。

梁丽雅等[15-16]研究表明，桦褐孔菌醇提物，尤其是乙酸乙酯萃取物具有在体外清除DPPH自由基、超氧阴离子、羟自由基等活性，以及较强的还原性；并具有较好的体内抗氧化活性。

本实验拟采用高脂高胆固醇诱导雄性SD大鼠高脂血症模型，探讨桦褐孔菌醇提物在生物体内对血脂代谢与过氧化状态的功能作用，为明确桦褐孔菌提取物降血脂的物质基础和相关机理提供理论参考。

1 材料与方法1.1 试验原料桦褐孔菌菌核：由吉林省延边真菌研究所提供。

桦褐孔菌醇提物（IOE）的制备：菌核经粉碎后过40目筛，加20倍60%乙醇，在80℃下提取3 h，将2次提取液合并、浓缩、冷冻干燥得醇提物干粉。

桦褐孔菌提取物体外抗氧化活性评价研究马思慧;程萍;方研;王萍【摘要】用不同浓度的乙醇、丙酮和异丙醇提取桦褐孔菌中的活性成分,筛选出高效抗氧化活性成分.分别用苯酚-硫酸法、福林酚法、氯化铝显色法测定粗提物中多糖、多酚和黄酮的含量,并测定粗提物对DPPH·的清除能力和FRAP值.用SPSS软件分析活性成分含量和抗氧化性的相关性,确定高抗氧化活性成分为多糖,与DPPH·清除率和FRAP总还原力的相关系数分别为为0.851和0.706.【期刊名称】《中国林副特产》【年(卷),期】2014(000)001【总页数】4页(P4-7)【关键词】桦褐孔菌;提取;抗氧化;多糖【作者】马思慧;程萍;方研;王萍【作者单位】东北林业大学林学院,哈尔滨150040;东北林业大学林学院,哈尔滨150040;东北林业大学林学院,哈尔滨150040;东北林业大学林学院,哈尔滨150040【正文语种】中文桦褐孔菌［Inonotus obliques（Fr.）Pilát］是来自西伯利亚原始森林中的药用真菌，具有预防心血管疾病、神经细胞衰老、癌症、糖尿病等疾病的功效［1-5］。

这些功能的发挥与其抗氧化活性密不可分。

因此相关领域的研究主要集中在其抗氧化活性，但对于其提取物中哪种物质的抗氧化性较好鲜有报道。

鉴于此，本实验通过对不同溶剂的提取物体外抗氧化活性的评价，分析各活性物质含量与抗氧化指标的相关性，确定高效抗氧化活性成分，为以后对桦褐孔菌的进一步利用提供参考。

1 材料与方法1.1 材料与试剂桦褐孔菌，黑龙江省哈尔滨市东北林副特产专营店；DPPH，Sigma Aldrich公司；总抗氧化能力检测试剂盒（FRAP法），碧云天生物技术研究所；2-硫代巴比妥酸，上海源叶生物科技有限公司；2-脱氧-D-核糖，上海拜力生物科技有限公司；槲皮素标准品，中国药品生物制品检定所。

1.2 仪器与设备722 型可见光分光光度计上海光谱仪器有限公司；JA2003型电子天平上海良平仪器仪表有限公司；RE-52A型旋转蒸发仪上海亚荣生化仪器公司；DK-98-1型电热恒温水浴锅天津市泰斯特仪器有限公司；TGL-16G高速台式离心机上海安亭科学仪器厂；SHB-B循环水式真空泵郑州长城科工贸公司；DG3022型酶标仪华东电子管厂。

桦褐孔菌的功效与作用桦褐孔菌（Trametes versicolor），又名七彩云芝、多色拟革菌等，是一种珍贵的中药和食用菌。

它的菌盖呈扇形，表面形似树皮，颜色多样，因此得名“七彩云芝”。

桦褐孔菌生长在桦木、柳木等树上，具有丰富的营养成分和多种功效，被广泛应用于医学、保健、美容等领域。

本文将详细介绍桦褐孔菌的功效与作用。

一、化学成分分析桦褐孔菌含有丰富的生物活性物质，其中包括多糖类、蛋白质、多酚类、有机酸、生物碱等。

研究发现，桦褐孔菌多糖是其主要的活性成分，具有较强的抗氧化、抗肿瘤、免疫调节、抗炎、降血糖、降血脂、抗衰老等生物活性。

此外，桦褐孔菌还含有丰富的维生素、矿物质和氨基酸等，具有保健作用。

二、抗氧化作用氧化反应是人体新陈代谢的必然产物，但当氧化反应发生过程中产生过多的自由基时，会引发氧化应激，导致细胞膜的脂质过氧化、DNA断裂、蛋白质氧化等。

桦褐孔菌中的多酚类化合物能够清除自由基，抑制过氧化反应，减少氧化应激损伤，对于预防和改善慢性疾病具有重要的作用。

三、抗肿瘤作用桦褐孔菌可提高机体自身免疫功能，增强机体对肿瘤细胞的识别和杀伤能力，抑制肿瘤的生长和转移。

多糖类化合物是桦褐孔菌抗肿瘤作用的主要活性成分，其通过激活巨噬细胞、NK细胞和T淋巴细胞等免疫细胞，增强机体的免疫力，从而抑制肿瘤的发生和发展。

四、免疫调节作用桦褐孔菌中的多糖类化合物具有显著的免疫调节功能，能够增加人体免疫球蛋白的合成和释放，提高机体的免疫力。

此外，它还能调节T细胞的活性和功能，调节巨噬细胞的吞噬能力，促进抗体的生成和释放，增强人体的免疫功能。

五、抗炎作用炎症是一种免疫反应，是机体对损伤、感染等刺激的防御性反应。

桦褐孔菌中的多酚类化合物具有较强的抗炎作用，能够抑制炎症反应的发生和发展。

研究表明，桦褐孔菌中的多酚类化合物能够抑制炎性细胞因子的生成，减轻炎症反应，缓解炎症引起的疼痛和肿胀。

六、降血糖作用桦褐孔菌中的多糖类化合物能够降低血糖水平，对于预防和治疗糖尿病具有一定的效果。

桦褐孔菌中的小分子酚醛类物质的抗氧化活性摘要桦褐孔菌是一种药用真菌，他在俄罗斯的民间药方中具有广泛的应用，并且据说对人体的健康具有很多益处，比如说桦褐孔菌具有免疫调节和抗肿瘤活性。

在本研究中，我们将桦褐孔菌的水提取物与其他几种药用真菌（姬松茸，灵芝和桑子菇）的水提取物的抗氧化作用进行了精确地对比，结果发现桦褐孔菌具有最强的过氧化物和羟自由基的清除能力。

然后我们将桦褐孔菌的子实体与菌核分开，分别用80%的甲醇进行提取，结果显示桦褐孔菌子实体的抗氧化能力要远远高于菌核。

最后，我们从桦褐孔菌子实体80%甲醇提取物中分离出了7种抗氧化成分，经过鉴定他们是以下几种小分子的酚醛类物质：4-羟基-3，5-二甲氧基苯甲酸乙酯2-羟基-1-羟甲基酯(丁香酸乙酯-2羟基-1-羟甲基酯，BAEE)，原儿茶酸（PCA），咖啡酸（CA），原儿茶醛（DB），2,5-二羟基对苯二甲酸（DTA），丁香酸（SA）和3，4-二羟基苯丁烯（DBL)。

值得注意的是，BAEE是第一次从天然产物中分离并鉴定出来。

桦褐孔菌是一种分布于欧洲高纬度地区，朝鲜和日本的真菌，它通常寄生在白桦树的树枝上，一些黑色的，不成形的桦褐孔菌可以在树干上寄生10--15年，不过大部分的桦褐孔菌还是生长在白桦树的树枝上，也被称为白桦茸，已经被应用于传统的药方之中。

近几年好多文献报道桦褐孔菌具有提升健康的作用，例如，保护DNA免受氧化应激的伤害，抗炎，止疼，抗肿瘤活性等。

然而，除了一些萜类物质外，迄今为止还没有文献报道桦褐孔菌水提取物中活性成分的化学结构。

另一方面，众所周知，氧化应激反应会造成各种各样的疾病，如癌症，高血压，神经性疾病（阿尔茨海默氏症和帕金森氏症），以及一些自身免疫疾病。

因此许多来源于食物等天然产物中的抗氧化性物质被用来治疗疾病。

在这些文献中，提到最多的就是白桦茸的抗氧化特性，尽管由文献报道说桦褐孔菌中的多酚片段具有抗氧化活性，但是这些物质抗氧化的原理仍然少有报道。

朱彦彬，徐鑫婷，黎燕冰，等. 桦褐孔菌醇抑制LPS 诱导RAW264.7细胞炎症反应[J]. 食品工业科技，2023，44（19）：401−409. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2022100017ZHU Yanbin, XU Xinting, LI Yanbing, et al. Effect of Inotodiol on LPS-induced Injury of RAW264.7 Cells[J]. Science and Technology of Food Industry, 2023, 44(19): 401−409. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022100017· 营养与保健 ·桦褐孔菌醇抑制LPS 诱导RAW264.7细胞炎症反应朱彦彬，徐鑫婷+，黎燕冰，赵成铭，黄庆年，陈志宝*（广东海洋大学滨海农业学院，广东湛江 524088）摘　要：探究桦褐孔菌醇（INO ）对LPS 诱导小鼠单核巨噬细胞（RAW264.7）炎症反应的影响。

实验采用CCK-8实验检测RAW264.7细胞活力；利用Hoechst33342和PI 检测细胞凋亡；应用酶联免疫吸附法、Griess 法测定细胞白介素-6（IL-6）、白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-18（IL-18）分泌及细胞中一氧化氮（NO ）含量；利用荧光探针和试剂盒检测活性氧（ROS ）生成及细胞中丙二醛（MDA ）、过氧化氢（H 2O 2）含量和超氧化物歧化酶（SOD ）、过氧化氢酶（CAT ）、谷胱甘肽（GSH ）活性。

结果表明20 μmol/L 的INO 能抑制LPS 诱导的RAW264.7细胞活力下降，阻止细胞凋亡，能极显著抑制IL-6、IL-1β、TNF-α、IL-18和NO 的分泌（P <0.01），极显著降低细胞中MDA 、H 2O 2的含量（P <0.01），能极显著提高细胞中SOD 、CAT 、GSH 活性（P <0.01）。

桦褐孔菌多酚的提取及抗氧化活性研究杨明明;彭永刚;张宏丽;陈培斌;谭文英【摘要】利用溶剂浸提法提取桦褐孔菌中的多酚,并对提取液中多酚的抗氧化活性进行评价.进行了桦褐孔菌多酚的体外抗氧化活性实验,结果表明,桦褐孔菌多酚的总还原能力是随着桦褐孔菌多酚浓度的增大而增强,与Vc对比表明显著高于Vc;桦褐孔菌多酚对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基的清除效果也十分显著.由此可见,桦褐孔菌多酚具有一定的抗氧化性.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2019(047)009【总页数】3页(P115-117)【关键词】桦褐孔菌;多酚;DPPH;抗氧化活性【作者】杨明明;彭永刚;张宏丽;陈培斌;谭文英【作者单位】东北林业大学材料科学与工程学院, 黑龙江哈尔滨 150040;东北林业大学材料科学与工程学院, 黑龙江哈尔滨 150040;东北林业大学材料科学与工程学院, 黑龙江哈尔滨 150040;东北林业大学材料科学与工程学院, 黑龙江哈尔滨150040;东北林业大学材料科学与工程学院, 黑龙江哈尔滨 150040【正文语种】中文【中图分类】TQ917桦褐孔菌是一种食药两用型的真菌，属于真菌门、层菌纲、担子菌亚门、多孔菌科、非褐菌目、褐卧孔菌属[1]，它的主要分布是北纬45°～50°[2-4]。

桦褐孔菌在东欧以及俄罗斯等地当作一种民间的用药，已被用于消化系统疾病、结肠癌、肝癌、胃癌、糖尿病、心血管疾病和病毒性疾病等的治疗[2-3]。

据报道，桦褐孔菌多酚和萜类化合物作为桦褐孔菌重要的活性成份之一，此外桦褐孔菌还具有多种生物活性的有效成份，如桦褐孔菌素、桦褐孔菌醇、木脂素、多糖等，其中，因其具有免疫调节能力、抗病毒作用、抗氧化作用、抗肿瘤功效及降低血糖等多种功效而备受关注[2-4]。

本实验采用浸提法对桦褐孔菌进行提取，并研究其体外抗氧化活性。

1 实验1.1 材料与试剂桦褐孔菌购自御参坊特产有限公司。

桦褐孔菌对人体健康的作用作者僧狼摘要：本文概述了国内外桦褐孔菌的生物学特性及其资源分布，介绍了桦褐孔菌的化学组分及其药用价值的研究现状，并总结了在桦褐孔菌人体健康生活中的应用现状，表明了桦褐孔菌在其药理作用和临床药用价值方面具有重要作用，相信桦褐孔菌将在医药和保健领域有着更加广泛的应用前景，也将为人类的健康做出更大的贡献。

关键词：桦褐孔菌；生物学特性；药理活性；桦褐孔菌[Inonotus obliquus (Fr.) Pilat]是一种具有巨大药用价值的真菌。

从16世纪以来，桦褐孔菌常被民间作为治疗治疗癌症、糖尿病和心脏病等疑难杂症的药物。

其引起世界广泛的关注是由于前苏联诺贝尔文学奖获得者Aleksandr IsayevichSolzheni Tsyn在1968年发表的小说《Rakovy Kovpus》中描述一个俄罗斯村庄由于经常引用桦褐孔菌茶而无一人得肠胃病及癌症[1]。

在20世纪50年代初期，世界各国许多专家学者才开始关注研究桦褐孔菌的生态学特性、化学成分及其功能作用。

目前，国内外有众多研究报道桦褐孔菌具有的生物碱类、三蔽类及留醇类等化学成分对肿瘤细胞有明显的抑制作用，在治疗抗糖尿病、高血压、艾滋病及皮肤病等方面也表现出良好的应用效果[2]。

此外，在桦褐孔菌本身食用和药用的基础上，国内外有公司已经将其开发研制成保健品(如保健饮料、保健茶等)，使其在增强人体免疫力，保障人类的健康生活等方面表现出良好效果。

因此，桦褐孔菌对人体健康具有重要作用，其应用前景十分广阔。

1 桦褐孔菌的生物学特性及其资源分布桦褐孔菌是一种在桦树等活立木的树皮下或砍伐后树木的枯干上野生存活的真菌，其菌核呈瘤状，菌核无柄，一般直径25-40cm，外表黑褐色或黑色，内部呈黄褐色或茶褐色，老后表面深裂，硬而脆[3]。

桦褐孔菌目前国内外学者大多认为其属真菌门，担子菌亚门，菌纲非褐菌目，多孔菌科，褐卧孔菌属，但是也有学者将其归为锈革孔菌科。

桦褐孔菌提取物抗氧化活性研究黄纪国;余雄涛;谢意珍;潘鸿辉;蓝宇虹;吕静【摘要】以乙酸乙酯和甲醇为提取剂,采用索氏提取法,剩余残渣采用热水浸提,最终得到桦褐孔菌不同极性提取物,对其 DPPH 自由基、羟基自由基及超氧阴离子自由基清除活性作用进行了研究,确定桦褐孔菌的抗氧化能力,为深入研究和开发桦褐孔菌功能性食品奠定理论基础。

实验结果表明桦褐孔菌具有较好的抗氧化活性,其中乙酸乙酯提取物的 DPPH 自由基清除率、羟基自由基清除率和超氧阴离子自由基清除率均高于其他两组分及 BHT,桦褐孔菌提取物有望成为功能性食品组分中合成抗氧化剂的天然替代品。

%Inonotus obliquus belongs to the family Hymenochaetaceae of Basidiomycetes,is mainly distributed in Rus-sia,North America,Europe,Japan and northeastern China.It has been used traditionally as a folk medicine and with other herbs to reduce infammation in the nasopharynx and facilitate breathing.Different extracts were based on ethyl acetate(EA),methanol and water as extraction solvent and using Soxhlet extraction method to Inonotus obliquus ,re-spectively.Reducing and radical scavenging abilities against DPPH radica,hydroxyl radical,superoxide radical and re-ducing power of ethyl acetate(EA),methanol extracts and water extracts were measured by means of photometric method,then compared with BHT.The results showed that ethyl acetate(EA)extract from the fruit of Inonotus obliquus had the highestantioxidant activity,and its antioxidant activity was better than that of BHT.It was corre-spond with the contents of various kinds oftriterpenes,lignins and polyphenols in the different extracts.EA extracts would be good natural antioxidant,and have good development value.【期刊名称】《广西植物》【年(卷),期】2014(000)004【总页数】6页(P515-519,496)【关键词】桦褐孔菌;抗氧化;DPPH【作者】黄纪国;余雄涛;谢意珍;潘鸿辉;蓝宇虹;吕静【作者单位】广东省微生物研究所，省部共建华南应用微生物国家重点实验室，广州 510070; 广东粤微食用菌技术有限公司，广州 510663;广东省微生物研究所，省部共建华南应用微生物国家重点实验室，广州 510070; 广东粤微食用菌技术有限公司，广州 510663;广东省微生物研究所，省部共建华南应用微生物国家重点实验室，广州 510070; 广东粤微食用菌技术有限公司，广州 510663;广东省微生物研究所，省部共建华南应用微生物国家重点实验室，广州 510070; 广东粤微食用菌技术有限公司，广州 510663;广东省微生物研究所，省部共建华南应用微生物国家重点实验室，广州 510070;广东粤微食用菌技术有限公司，广州 510663【正文语种】中文【中图分类】S646桦褐孔菌(Inonotus obliquus）属于真菌门、担子菌亚门、层菌纲、非褐菌目(无褐菌目）、多孔菌科、褐卧孔菌属(纤孔菌属）.主要生长在俄罗斯北部、中国吉林省长白山及日本北海道等寒冷地区,其广泛用于防治消化道疾病、肿瘤、糖尿病等(黄年来, 2002；Mizuoet al.,1996；梁青乐等,2005；Wasseretal.,2002）.目前,国内外研究人员对其抗肿瘤、抗炎症、增强机体免疫力、降血糖等功效已经进行了研究,并从有效成分中提取分离出大量的萜类,黄酮类和多酚类化合物(Leeaet al.,2007；Hyunet al., 2010）,其中绝大多数为含有羊毛脂烷型四环三萜类化合物,并且绝大多数都具有3 OH·和△8或△8,24的结构(刘迎秋等,2008）.据Leeetal.(2005）和Parket al.(2004）报道,桦褐孔菌子实体的水提物能防止细胞间核酸的氧化,并且桦褐孔菌可保护内源性DNA不被H2O2破坏,因此有很强的抗氧化活性.对于桦褐孔菌多糖,三萜类和类固醇等提取物也有相关的强氧化性(Cuietal.,2005；Zhanget al.,2013；Zhaoet al.,2012）.另外Songet al.(2004）等证实了桦褐孔菌的菌丝体提取物是一种能有效清除氧化剂的因子,对人体皮肤有NF-.vkappa.B抑制作用.目前对于桦褐孔菌提取物的抗氧化性能研究主要是桦褐孔菌粗多糖上,提取方式为热水浸提与萃取相结合的方法,而索氏提取具有提取效果高等优点.本试验以桦褐孔菌各个组分为研究对象,对桦褐孔菌不同极性溶剂萃取物的抗氧化活性与BHT进行比较研究,为深入研究和开发桦褐孔菌提供依据.1.1 材料和仪器材料：桦褐孔菌购自广东粤微食用菌技术有限公司,并经广东省微生物研究所食用菌研究发展中心鉴定.试剂：二苯代苦味酰自由基(DPPH）(Sigma公司）；过氧化氢叔丁基(BHT）(上海盈元化工有限公司）；邻二氮菲,连苯三酚(上海国药集团化学试剂有限公司）；磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、硫酸亚铁氨、双氧水、铁氰化钾、三氯乙酸、三氯化铁、三羟甲基氨基甲烷、浓盐酸、95%乙醇等(广州化学试剂二厂）.所有溶剂均为分析纯；实验用水均为蒸馏水.仪器：DZF-150型数显小型真空干燥箱；SHBШ-循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司）；TGL-168高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂）；AR-1140/C型电子分析天平(上海金鹏分析仪器有限公司）；RE-52A旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂）；ZKW型电子恒温水浴锅(国华电器有限公司）；UV-1700紫外可见分光光度计(岛津国际贸易有限公司）；超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司）；微量连续可调移液器(上海江岳电子科技有限公司）等.1.2 桦褐孔菌提取物的制备取自然风干的桦褐孔菌子实体(300 g）,经粉碎机粉碎后,用滤纸包扎,置于索氏提取器中,分别加入乙酸乙酯(EA）(600 m L）、甲醇(MeOH）(600 m L）置于1 000 m L的圆底烧瓶中,进行回流提取,每种溶剂提取6 h,剩余残渣用水进行浸提24 h,得到水提部分.经真空浓缩干燥,得到乙酸乙酯提取物9.6 g、甲醇提取物4.1 g和水提取物部分13.7 g.1.3 实验步骤1.3.1 对DPPH自由基清除活性的测定参考鲁传华等(2011）中DPPH法,做出部分的修改,取0.008 mg/m L的DPPH溶液4 m L,分别加入不同质量浓度的桦褐孔菌提取物溶液(0.20～2.00 mg/m L,编号为1＃～10＃）0.5 m L,摇匀后在28℃水浴中恒温30 min,然后迅速测其517 nm处的吸光度A.同时测定空白样的吸光度A0,空白样品即用0.5 m L无水乙醇代替样液.以BHT作为人工对照,同时每份样品均测3次.按下式计算其清除率：式中,A样品为提取物试样的吸光度,A0为空白样品的吸光度.1.3.2 对羟基自由基(OH·）清除活性的测定羟基自由基(OH·）清除活性的测定参考金鸣等(1996）的方法：向10 m L比色管中依次加入0.4 m L 0.75 mmol/L的邻二氮菲无水乙醇溶液,1.0 m L p H＝7.4的磷酸缓冲溶液,0.3 m L 0.75 mmol/L 硫酸亚铁氨溶液和0.2 m L桦褐孔菌提取物溶液(或BHT）(浓度梯度为0.20～2.00 mg/m L,编号为1＃～10＃）,加入1.0 m L 0.01%的H2O2溶液,以蒸馏水定容至刻度.在37℃水浴中恒温60 min,于536 nm下测吸光度A.每加1次试剂均需混合摇匀,同时测定不含提取物的空白样品及人工合成对照样品(BHT）,并且每个样品重复3次.按下式计算样品对OH·的清除率：式中,A样为加样液的吸光度,A损为不加样液、样液用溶剂代替的吸光度,A未损为不加样液和H2O2的吸光度(三者均以蒸馏水空白为参比）.1.3.3 超氧阴离子自由基清除活性测定O－2·的清除活性测定参照孟庆繁等(2005）的方法,采用改良的邻苯三酚自氧化速率的测定,向10 m L比色管中依次加入4 mL p H＝8.0 Tris-HCl缓冲液(50 mmo1/L）,4.2 m L蒸馏水,混匀后在25℃水浴中恒温20 min.取出后立即加入温度为25℃,0.3 m L 3 mmol/L邻苯三酚溶液中(以10 mmo1/L HCl配制）,立刻计时并迅速摇匀,然后在波长325 nm下测定其光值,1 min后开始读数,每隔30 s记录1次,直至读满8 min,计算线性范围内整分钟吸光值的△A0.空白管用10 mmol/L HCl代替邻苯三酚的HCl溶液.样品对超氧阴离子自由基的清除能力测定：操作方法同上,在加入邻苯三酚前,先加入0.4 m L不同浓度的桦褐孔菌提取物样品溶液和人工对照BHT溶液(浓度梯度为0.20～2.00 mg/m L,编号为1＃～10＃）,然后按上述方法每个样品重复操作3次,计算线性范围内整分钟吸光值的△A,并计算抑制率.超氧阴离子自由基清除率按下列式子计算：邻苯三酚自氧化速率D0＝(第8分钟的△A0－第1分钟的△A0）/7式中,D0为未加样品时邻苯三酚的自氧化速率；D为加入样品溶液后邻苯三酚的自氧化速率(计算方法同D0）.2.1 桦褐孔菌各极性部位的提取产量为评价桦褐孔菌的抗氧化活性,依据图流程制备桦褐孔菌各极性部位提取物,桦褐孔菌3个不同极性部位的得率分别为水4.57%,乙酸乙酯3.20%,甲醇1.37%,其中水相得率最高,这可能与多糖等大分子主要存在于水相部位,弱极性、中极性小分子物质主要存在于乙酸乙酯和甲醇部位有关.2.2 桦褐孔菌各极性部位的DPPH自由基清除率根据表1数据得桦褐孔菌提取物清除DPPH自由基的浓度-清除率关系(图1,表4）.从表4中的相关系数R2值,说明各种样品所建立的方程非常可靠,解释了桦褐孔菌提取物浓度-清除率之间一一对应关系.从曲线方程看出,桦褐孔菌提取物对DPPH自由基的清除率随着浓度的增大而增大,最终趋向平稳.桦褐孔菌提取物对DPPH自由基清除活性的IC50值顺序为乙酸乙酯提取物＜BHT对照物＜甲醇提取物＜水提取物,因此乙酸乙酯提取物的活性高于BHT及其他极性提取物,其IC50为0.44 mg/ m L,是其他提取物的1/4.2.3 桦褐孔菌各极性部位的羟基自由基清除率根据表2数据得桦褐孔菌提取物清除DPPH自由基的浓度-清除率关系(图2,表5）.从表5中的相关系数R2值,说明各种样品所建立的方程可行,且非常可靠,能较好的解释桦褐孔菌提取物清除羟基自由基的浓度-清除率关系.从曲线方程看出,桦褐孔菌提取物对羟基自由基的清除率随着浓度的增大而增大,最终趋向平稳.桦褐孔菌提取物对羟基自由基清除活性的IC50值顺序为乙酸乙酯提取物＜BHT对照物＜甲醇提取物＜水提取物,因此乙酸乙酯提取物的活性高于BHT及其他极性提取物,其IC50为0.62 mg/m L,清除率最终达91%.2.4 桦褐孔菌各极性部位的超氧阴离子(·）自由基清除率根据表3数据得桦褐孔菌提取物清除超氧阴离子自由基的浓度-清除率关系(图3,表6）.从表6中的相关系数R2值,说明各种样品所建立的方程可行,解释了桦褐孔菌提取物清除超氧阴离子自由基的浓度—清除率之间的一一对应关系.从曲线方程看出,桦褐孔菌提取物对超氧阴离子自由基的清除率随着浓度的增大而增大,最终趋向平稳.桦褐孔菌提取物对超氧阴离子自由基清除活性的IC50值顺序为乙酸乙酯提取物＜BHT对照物＜甲醇提取物＜水提取物,因此乙酸乙酯提取物的活性高于BHT及其他极性提取物,其IC50为0.78 mg/m L.本研究分别测定了对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基的清除能力.结果表明,桦褐孔菌各提取物对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基均有一定的清除能力,且随浓度的增大而逐渐增强,其中乙酸乙酯提取物的抗氧化活性最强,其对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基的清除率都高于85%,明显优于人工合成抗氧化剂BHT.桦褐孔菌乙酸乙酯提取物抗氧化活性最强.本研究结果为开发利用桦褐孔菌丰富的自然资源提供理论依据,为桦褐孔菌植物更广泛的应用于药理、保健品、化妆品等行业提供科学依据.Cui Y,Kim DS,Park KC.2005.Antioxidant effect ofInonotusobliquus[J].Ethnopharmacol,96(1）：79－85Hyun KJ,Ha WC,Soon SH,et al.2010.Effect of steam treatment on soluble phenolic content and antioxidant activity of theChaga mushroom(Inonotus obliquus）[J].Food Chem, 119(2）：619－625Huang NL(黄年来）.2002.Fuscoporia obliqua－a mysterious folk medicinal mushroom in Russia(俄罗斯神秘的药用真菌—桦褐孔菌）[J].Edible Fungi Chin(中国食用菌）,21(4）：7－8Lee HB,Jung HS,Kang MH,et position ofInonotus obliquuswith anti-oxidation for inhibiting DNA damage caused by inter-cellular oxidation[M].Korean Kongkae Taeho KongboLeea IK,Kima YS,Janga YW,et al.2007.New antioxidant polyphenols from the medicinal mushroomInonotus obliquus[J].Bioorganic&Med Chem Letters,17(15）：6 678－6 680Liang QL(梁清乐）,Wang QY(王秋颖）,Fan JH(樊锦海）,et al.2005.A survey ofInonotus obliquus(桦褐孔菌的研究概况）[J].Chin Tradit&Herbal Drugs(中草药）,4(36）：623－625Liu YQ(刘迎秋）,Bao HY(包海鹰）.2008.Chemical components andpharmacological actions ofInonotus obliquus(桦褐孔菌Inonotus obliquus 化学成分及药理作用）[J].Edible Fungi Chin(中国食用菌）,27(4）：34－39Lu JH(鲁俊华）,Chen YY(陈月圆）,Huang RS(黄荣韶）,et al.2011.Study on the antioxidant activity of extracts from the leaves ofAlchornea trewioides(红背叶提取物的体外抗氧化活性） [J].Guihaia(广西植物）,31(1）：134－138Jin M(金鸣）,Cai YX(蔡亚欣）,Li JR(李金荣）,et al.1996.邻二氮菲-Fe2＋氧化法检测H2O2/Fe体系产生的羟自由基[J].Progr Biochem Biophys(生物化学与生物物理进展）,23(6）：553－555Meng QF(孟庆繁）,Yu XK(于笑坤）,Xu MY(徐睦芸）,et al.2005.Extraction ofacanthopanacis senticosipolysaccharides and their antioxidative effect(刺五加多糖的提取及其抗氧化性）[J].J Jilin Univ：Sci Edit(吉林大学学报·理学版）,5：683－686Mizuo T,Zhuang C,BE A,et al.1996.Studies on the hostmediated antitumor polysaccharides.PartⅦ[J].Mushroom Sci Biotechnol,3(2）：53－60Park YK,Lee HB,Jeon EJ,et al.2004.Chaga mushroom extract inhibits oxidative DNA damage in human lymphocytes as assessed by comet assay[J].Biofactors,21：109－112Song HS,Lee YJ,Kim SK,et al.2004.Downregulatory effect of AGI-1120(-glucosidase inhibitor）and Chaga mushroom(Inonotusobliquus）on cellular NF-.vkappa.bactivation and their antioxidant activity[J].Saengyak Hakhoechi,35(1）：92－97Wasser SP.2002.Medicinal mushrooms as a source of antitumor and immunmodulating polysaccharrides[J].Apple Microbool Biotechnol,60：258－260Zhang N,Chen HX,Ma LS,et al.2013.Physical modi fications of polysaccharide fromInonotus obliquusand the antioxidant properties[J].Int J Biol Macromol,54：209－215Zhao FQ,Yan L,Cui XH,et al.2012.Triterpenoids fromInonotus obliquusprotect mice against oxidative damage induced by CCl4[J].Acta Pharm Sin,47(5）：680－684。

桦褐孔菌品质鉴定及抗氧化活性研究
常明珠;李亭昱;崔云鹤;刘腾达;郭笑;母润红
【期刊名称】《北华大学学报(自然科学版)》
【年(卷),期】2024(25)1
【摘要】目的确定桦褐孔菌多糖的最佳提取工艺,并对桦褐孔菌多糖的抗氧化活性进行评价。

方法应用水提法、超声法、微波法和酶法分别对桦褐孔菌多糖进行3次提取;以VC为对照,测定桦褐孔菌多糖对FRAP、DPPH·、·OH和ABTS·的还原能力。

结果超声法在料液比m(g)∶V(mL)=1∶20、超声功率400 W、提取温度80℃、提取时间90 min时,多糖提取率最高,为10.35%;抗氧化活性研究结果显示,当桦褐孔菌的多糖浓度为400μg/mL时,其总抗氧化能力相当于244.04μmol/L的FeSO_(4),对DPPH·的清除率较弱,对·OH和ABTS·的清除率均可达80%以上。

结论超声法提取桦褐孔菌多糖效果最好,其抗氧化活性较高。

【总页数】5页(P35-39)
【作者】常明珠;李亭昱;崔云鹤;刘腾达;郭笑;母润红
【作者单位】北华大学基础医学院;北华大学药学院
【正文语种】中文
【中图分类】R284
【相关文献】
1.桦褐孔菌提取物抗氧化活性研究
2.桦褐孔菌提取物体外抗氧化活性评价研究
3.桦褐孔菌多酚的提取及抗氧化活性研究
4.桦褐孔菌多糖复合运动饮品的制备及抗氧化活性研究
5.桦褐孔菌多糖的分离纯化及体外抗氧化活性研究
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Edible and medicinal mushrooms2021，29（3）：202～207桦褐孔菌及其药理作用研究进展杨珺尧孟利（黑龙江大学生命科学学院农业微生物技术教育部工程研究中心，黑龙江省普通高等学校分子生物学重点实验室，哈尔滨150080）摘要桦褐孔菌是一种珍贵的天然食药兼用真菌，富含桦褐孔菌醇、羊毛甾醇、黑色素等多种活性成分。

在抗肿瘤、治疗糖尿病等方面效果突出，被大量应用于医药和临床，致使野生资源被大量利用而极度匮乏。

参考有关文献综述桦褐孔菌的生物形态特征、生长环境、主要化学成分和药理作用等；对国内外桦褐孔菌的作用机制、活性成分和药理作用的研究进展及在治疗肿瘤和糖尿病、人工培养技术等方面的现状进行综述、述评。

并展望其未来发展趋势。

关键词桦褐孔菌；形态特征；生长环境；化学成分；药理作用中图分类号：S646文献标识码：B文章编码：2095-0934（2021）03-202-06 Research progress on the general situation and pharmacological actionof Inonotus obliquusYang Junyao Meng Li(Engineering Research Center of Agricultural Microbiology Technology,Ministry of Education,Heilongjiang University,Key Laboratory of Molecular Biology of Higher Education Institutions of Heilongjiang Province,Harbin150080,China)Abstract Inonotus obliquus is a kind of precious natural edible and medicinal fungus which contains rich inotodiol, lanosterol,melanin and many kinds of active ingredients.Because I.obliquus shows outstanding effects on anti-tumor and treatment of diabetes,it has always been deeply used at home and abroad and has been widely used in medical and clinical fields.resulting in a large number of wild resources are used and extremely scarce.In this paper,the biological characteristics,growth environment,main chemical constituents and pharmacological action of the I.obliquus were reviewed with reference to relevant literatures.The research progress of the mechanism,active ingredients and pharmacological action of I.obliquus at home and abroad,as well as the current situation in the treatment of tumor and diabetes,and artificial culture technology were reviewed and reviewed.In addition,the future development trend of I.obliquus was prospected.基金项目：黑龙江省高校基本科研业务费黑龙江大学专项资金项目“基于免疫纳米金标记-表面增强拉曼光谱技术测定食品中呋喃丹”（KJCX201817）作者简介：杨珺尧（1997—），在读硕士，主要从事食品微生物与食品安全检测研究。

桦树皮甲醇提取物的体外抗氧化活性研究目的：测定桦树皮甲醇提取物的体外抗氧化活性。

方法：以2，6-二叔丁基对甲酚（BHT）和维生素C 为对照，测定桦树皮甲醇提取物对1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）的清除率，并用铁离子还原法（FRAP）分析了桦树皮甲醇提取物的抗氧化活性。

结果：桦树皮甲醇提取物、2，6-二叔丁基对甲酚（BHT）和维生素C对DPPH的IC50分别为0.43、0.09和0.21mg/ml，FRAP值分别为1.54±0.012、4.54±0.028.和5.76±0.041mmol/g。

结论：桦树皮甲醇提取物对DPPH 自由基有良好的清除作用，对铁离子的还原性较强，具有良好的抗氧化活性。

标签：桦树皮；抗氧化；1，1-二苯基-2-三硝基苯肼法；铁离子还原法桦树皮为桦树科植物白桦（Betula platyphylla Suk）的柔软树皮，具有清热利湿、解毒的功效[1]。

以往报道鲜见桦树皮的抗氧化活性研究，因此研究桦树皮甲醇提取物的抗氧化活性，为进一步探讨桦树皮药理作用奠定基础[2-3]。

天然药物的抗氧化能力评价主要采用化学测定法和细胞测定两类方法[4-5]。

研究采用FRAP法和DPPH法分别对桦树皮甲醇提取物进行体外抗氧化活性检测，为桦树皮的抗氧化活性及相关应用开发提供实验基础。

1 仪器与试剂1.1 仪器UV-MODEL752型可见-紫外分光光度计（上海现科分光仪器有限公司）；SB-5200D超声波清洗器；N-1100V-WD型旋转蒸发仪；四两装高速中药粉碎机；PL203电子分析天平；OSB-2100水浴锅。

1.2 试剂桦树皮药材购自大兴安岭，粉碎后过二号筛干燥备用；水为双蒸水；甲醇、乙醇均为分析纯，购自科特试剂有限公司；TPTZ（2，4，6-反式2-吡啶基三嗪）、BHT（2，6-二叔丁基对甲酚）和VC等均购自上海柏卡试剂有限公司。

2 实验方法2.1 桦树皮提取物的制备取干燥的桦树皮5g，用甲醇200ml于索氏提器中水浴恒温85℃提取60min，过滤，液滤浓缩干燥成浸膏。