外科动物实验
外科动物实验
实验一无菌术操作 2学时
[目的与要求]
1、手术人员的手臂肥皂刷洗、碘伏涂擦消毒法
2、穿无菌手术衣、戴无菌手套法；
3、病人手术区消毒后的铺无菌巾法。[教学内容]
（一）手术人员的无菌准备技术
1、术前一般性准备：穿自备（相当于手术室）清洁鞋、戴口罩、帽子和穿洗手衣。
2、手臂洗刷与消毒（外科洗手）：重点训练肥皂刷手臂和碘伏涂擦手臂消毒法。
3、穿无菌手术衣
4、戴无菌手套（干手套）
（二）病人手术区皮肤消毒后的铺巾：重点训练腹部手术巾和手术洞巾单铺法。
[方法]
1.教师分组：教师分2个小组，每组2人，按
教学内容固定分工，各司其教；
2．学生分组：全班同学按学号划成4个大组，分头前往教师组进行单项目内容学习，每项内容约30分钟时，然后进行交叉轮换；
3．学习时，先由老师介绍操作过程，重点讲解正确操作要领和注意事项，同时要纠正初学者容易犯的错误；然后同学跟随老师的示范操作步骤进行模仿训练。训练期间，每个同学都要严格实施肥皂刷洗手臂及碘伏涂擦消毒操作全过程一次，必要时抽查同学进行洗手后的细菌培养；其他项目的训练则必须反复进行多次。[思考]
同学通过对外科总论实验室这样类似医院手术室内环境的适应以及相关设备的使用，初步建立起“在手术室工作”的理念。尤其通过教师示范介绍外科手术需做好的无菌术中的两项重要内容，即：①“手术人员的手臂刷洗和消毒、穿无菌手术衣、戴无菌手套”②“病人手术区消毒后的铺无菌巾”。然后由同学进行模仿操作训练，这样就使同学不仅可巩固大课所学过的无菌术理论知识，而且进一步学会手术人员如何进行自身相关术前无菌准备和在为病人手术区皮肤消毒后如何围绕切口周围铺无菌巾，从而扩大无
菌屏障范围。以上两项无菌术内容实际上是无菌操作中最重要的技术，要求每个同学都必须严格遵守并予以学会。
实验二识别及使用常用器械、练习外科打结法3学时
[目的与要求]
1、学会并熟练掌握外科手术基本操作之
一、打结法；
2、学会并一般掌握深部打结法和使用器械打结法；
3、了解结的种类，了解方结、三重结、以及外科结的应用，防止打假结、滑结；
4、熟悉常用手术包内手术器械的名称，了解常用手术器械的结构特点、基本性能和使用方法；
5、掌握手术刀片的正确上、下法；正确的握持血管钳法；左、右手松钳法；正确持剪、剪线法；正确持针钳夹针法、穿针引线法。
[内容]
1、外科常用手术器械的辨认与使用：手术刀、手术剪、血管钳、持针钳、手术镊、组织钳、拉钩、吸引器头(管)、肠钳、布巾钳等。
2、外科打结法练习：（1）结的种类：单结、方结、外科结、三叠结、滑结、假结。
（2）打结方法：单手打结、双手打结、深部打结方法、持钳打结。
[方法]
1、在外总实验室,全班同学先分成4个小组，每组由一名教师带教，准备一定数量打结教学用染有两种不同颜色的细绳及手术用丝线、常用手术包（含常用手术器械）一个。先由教师示教，讲解线结的种类、单手（左和右）打方结方法、双手打结方法、深部打结方法以及用持针钳或血管钳打结方法。接着，同学再分成若干小组，分别模仿练习，其中重点训练单手打方结，强调操作步骤正确，并要求当场达到一定的打结速度（15个/分钟以上）。同时，还必须强调课后继续坚持练习，练习时既要重视提高打结的速度（达到打方结25个/分钟以上），更要重视打结的正确性，达到每个结的质量均可靠。
2、初学者对于手术常用器械，如刀片、刀柄、各类血管止血钳、各类剪刀、各种缝针与缝线以及显露手术野的拉钩、吸引器等，不仅要能准确辨认并叫出其名称，同时还必须通过一般性了解其结构特点和性能，初步掌握各自正确的使用方法。先由教师向同学作出讲解和示教，之后由同学反复自行辨认和使用练习，重点是使每个同学正确掌握手术刀片的上、下法，血管钳的握持法，左、右手松钳法，持剪剪线法，针持钳持针法以及穿针引线法。教师在教学中要着重强调操作的正确性，纠正初学者容易犯的错误或不规范操作。
[思考]
1、经验证明：外科打结对初学者而言，是一项看似非常简单但实际上却需反复训练和仔细琢磨、认真进行动作纠错才能正确领会和掌握的外科手术基本操作技术。所以初学者从第一次时起就必须树立如何正确操作的观念，养成严肃认真训练和一丝不苟的科学习惯，把打结质量的好坏与手术成功与失败甚至关系病人生命安全相联系；
2、经验还证明：初学者对外科打结的正确掌握，不仅需要老师作规范化操作的示教和指点，还需要有正确操作步骤图解以指导其学习时作动作分解训练和模仿，特别是手术中应用最多的单手（左或右）打结法，是每个学习外科手术者所必须掌握的基本技术之一。练习中参照我院由杨建新、邱烺主编的《外科学基本技能指导》的图示方法进行练习。此图不仅示意准确，而且操作规范。
实验三清创术－练习消毒、铺巾、切开、止血、结扎、缝合 3学时
[目的与要求]
1、严格无菌操作规则，熟悉清创术的适应证，练习消毒、铺巾、切开、止血、结扎、缝合的方法。
2、严格正确使用无菌器械
3、学会清创术的操作方法
[内容]
1、动物捕捉固定方法、麻醉方法。
2、消毒、铺巾、切开、止血、结扎、缝合的方法。
3、清创术的操作方法。
[方法]
1、学生分成两大组，每组先由两位教师配合在兔身上演示清创术及消毒、铺巾、切开、止血、结扎、缝合的各种操作技术，然后由学生在兔身上练习清创术及基本手术操作技术。
2、讲解轻重缓急，应首先处理危及生命的重要脏器创伤、损伤
3、处理如血管、神经、肌腱等特殊重要部位组织的清创原则
4、与现行临床接轨，如创口的碘伏消毒。[思考]
了解清创术是外科领域最常见的操作技术，其手术质量高低，方法正确与否可直接影响组织的愈合、功能和外形的恢复，通过此手术练习消毒、铺巾、切开、止血、结扎、缝合的方法。实验四动物犬的综合性体验性手术 8学时[总体目标]
1、学习剖腹术的操作方法，熟练切开、止血、游离、暴露、结扎。
2、学会胃穿孔修补、肠段切除吻合术、阑尾切除术、静脉切开置管补液术、气管切开插管术的基本操作步骤与方法。
3、进一步加强理论与实际相联系，体验外科手术的基本氛围，强化无菌观念。
[整体思路]
1、通过教师的动物手术示教以及同学的动物实验仿效，初步使同学建立起外科手术学的基础，使所学的外科总论中的无菌术与外科手术基本操作技术能密切联系并协调起来，以为将来进行临床各论教学及实践外科手术学打下基础。
2、教学方法：在教师进行动物手术示教之后，同学即以每6～8人为一手术组，每组施行一台手术。按主刀、第一、二助手、麻醉师、器械护士分工，在术中可轮流任职，直至手术结束。教师在实验室进行巡回指导同学手术，一般由一名教师负责指导同学3台手术。
[手术人员准备]
1、教师：教师4人，每人负责辅导3～４台手术组,作好随时处置各种应急情况。
2、学生准备：按每6人一组组成手术组，按主刀、第一、二助手、麻醉师、器械护士分工，在术中可轮流任职的原则进行各自术前准备。[动物准备]
1、犬是凶猛动物，应在动物饲养人员的协助下完成捕捉、固定，在老师指导下进行股静脉穿刺麻醉（3%戊巴比妥娜1ml/kg）或腹腔内麻醉。
2、严格按照无菌操作原则进行各部位的消毒、铺巾等。
[实验内容]
（一）剖腹探查术
[目的和要求]
1、熟悉剖腹探查术的适应症和注意事项。
2、熟练切开、止血、游离、暴露、结扎、缝合技术。
[方法]
1、术者对手术区域消毒后，铺巾。
2、取上腹部正中切口，切开皮肤、皮下、肌层、腹膜，注意结扎止血，切开腹膜时注意保护切口，避免损伤内脏。
（二）胃穿孔修补术
[目的和要求]
⒈掌握胃肠穿孔修补术的适应证、禁忌证；
⒉掌握胃肠穿孔修补术的方法和操作要领；
⒊熟悉术中注意事项。
[方法]
1选择切口：胃十二指肠穿孔一般选择上腹部正中切口或经腹直肌切口，肠穿孔时选择中下腹部经腹直肌切口。
2、探查腹腔：开腹后可见气体溢出，穿孔部位附近常有胃肠内容物及渗出物积聚，用吸引器吸净，找到穿孔部位（在胃窦部行切开1cm模拟穿孔）。
3、修补：最好将穿孔部位提至腹壁切口外，于穿孔的两侧用丝线作缝合，缝线方向应与胃肠的长轴平行，以防因缝合而导致狭窄。
⑴两层缝合修补：第一层缝合胃肠壁全层，可作间断内翻或间断单纯缝合。第二层为浆肌层缝合加固，多采用间断垂直内翻缝合法。一般每层缝合3-4针，逐一结扎缝线，结扎时用力要轻柔，以免缝线割裂脆弱组织，浆肌层的缝线暂不剪断，可利用附近的大网膜覆盖修补处，用未剪断的结扎线结扎固定。
⑵一层修补：对于穿孔局部组织条件差如水肿明显、组织脆弱等无法行二层修补时，可选择一层修补法，即行单纯间断浆肌层或全层缝合，缝合3-4针，待全部缝完后在助手协助下一并完成缝合的结扎，可防止局部的撕裂，结扎后用大网膜覆盖修补处再次打结固定。如穿孔周围组织的水肿广泛，疤痕组织过多或穿孔过大，不易牢固缝合时，可先将带蒂大网膜填塞穿孔处，然后再间断缝合数针结扎固定。
4、修补完毕，应仔细清理腹腔，可行腹腔冲洗，必要时应留置腹腔引流管。
5、关闭腹腔，逐层缝合腹壁切口。（三）阑尾切除术
[目的与要求]
1、学习剖腹术的操作方法；
2、熟练切开、止血、游离、暴露、结扎、缝合技术，学会荷包缝合；
3、复习实验三所介绍过的外科手术基本操作内容。
[方法]
1、寻找并显露阑尾，以阑尾钳钳夹提起，显露系膜，用血管钳在阑尾根部的系膜上无血管处穿一小孔。
2、经小孔夹持两把血管钳，并于钳间切断，结扎阑尾系膜血管。为安全起见，近端系膜血管可结扎或缝扎二次。
3、阑尾根部用血管钳压挫，用4或7号丝线结扎，在其远端再夹一直血管钳。
4、用1号丝线在盲肠壁上距离阑尾根部基底0.5厘米处作一浆肌层荷包缝合，缝针不应穿透肠腔内，缝线暂不收紧。
5、于直血管钳和结扎线间切断阑尾，切断时用盐水纱布保护术野，小心勿使残端污染腹壁及腹内脏器。阑尾残端粘膜用石碳酸、酒精、盐水棉杆依次涂擦。
6、术者提起荷包缝线，（阑尾根部结扎后用直血管钳夹住结扎线。再在血管钳上侧剪去结扎残端。）以便助手将阑尾残端送入荷包缝合腔内，然后，结扎荷包缝线，包埋残端。如包埋不满意，可在荷包缝合外，再追加数针间断缝合。
7、然后用血管钳依次分段钳夹、切断、结扎阑尾系膜，直到阑尾切除。
8、检查阑尾残端和系膜无出血、腹腔内无异物存留后，用1号或4号丝线连续或间断外翻缝合腹膜。
（四）肠切除肠吻合术
[目的与要求]
1、学习肠吻合操作，使每个同学操作熟练，为在人身上作肠吻合术打好基础；
2、熟悉胃肠道吻合的两种缝合方法：间断全层内翻缝合（Connell’s法）和间断浆肌层缝合（Lembert’s法）。
[手术步骤]
1、切口选择：选择中腹部正中切口或右旁正中切口及右侧经腹直肌切口。
2、剖腹后确定病变性质，将准备切除的小肠托出腹腔外，用盐水纱布垫在切除肠段的四周。
3、游离肠系膜：计划好切除小肠段的范围，在预定切除肠管的肠系膜作扇形切开，用止血钳分离肠系膜分束钳夹，切断并结扎肠系膜及其血管，血管近端应双重结扎，必要时可贯穿缝扎，要逐钳分离每次不宜钳夹过多，将要切除的小肠
系膜呈V形断开。除肿瘤的切除外，一般不需将系膜游离至根部。
4、切断肠管：在小肠预定切断处，紧贴肠壁向两保留端分离系膜1cm，距预定切断线保留侧5cm处安置弹性肠钳，于切断侧安置有齿直血管钳，钳身向保留端的对系膜缘倾斜，与肠管纵轴呈60°，在病变肠管下垫一纱布，沿有齿直血管钳切断并移去病变肠管，勿使肠内容物污染手术野，吻合端肠管之对系膜缘应切除多一些，以保证吻合肠壁血运充足且扩大吻合口。断端用70%酒精或稀释活力碘纱布涂擦，重新垫一干净纱布准备吻合。
5、小肠部分切除后两断端必须吻合以重建通畅的肠道，吻合方法有三种：
（1）端端吻合法：最常用。
①吻合准备肠管切除后将两侧肠钳靠拢，使两端肠腔的轴线对齐，系膜置于同侧，不要扭曲，在肠管系膜缘和对系膜缘各作一针浆肌层缝合，并留线蚊式血管钳钳夹作为牵引。
②后壁全层吻合自后壁一端开始，行全层连续锁边缝合（可根据个人习惯选用单纯间断
或连续缝合），每针间距大约为0.3-0.5cm。全层缝合可采用丝线、肠线或Dexon线。
③前壁全层吻合当后壁缝线缝至另一端时，缝针由肠腔内穿出（可打结后继续缝亦可不打结）而后继行全层连续水平褥式内翻缝合，最后一针可自行结扎（线结留在肠腔外），或缝线自肠腔内穿出与后壁第一针线头结扎，然后将线结送入肠腔内。图6。
④前后壁浆肌层缝合松开两侧肠钳，用细丝线间断垂直褥式内翻缝合法缝合前后壁的浆肌层，缝完前壁后通过牵引线将后壁翻转以便进行后壁浆肌层缝合，缝合时应注意前后壁浆肌层与全层缝合进针部位应尽可能错开使呈交错状，以保证吻合的可靠，缝合后不应露出全层之缝线，但不宜缝合过密。
⑤关闭系膜裂孔用细丝线间断缝合肠系膜两侧切缘封闭系膜裂孔，以防内疝发生。缝合时勿剌伤系膜血管形成血肿。
⑥检查吻合口缝合完毕应常规检查是否有漏针以及吻合口大小，有漏针时应补缝，术者用拇指和食指对合检查吻合口大小，以能通过拇
指末节，两指能顺利对合为宜，检查满意后，将肠管还纳入腹腔。
端端吻合法缝合亦可采取先缝合后壁再缝前壁的顺序，第一层为后壁浆肌层，第二层为后壁全层缝合，后壁缝完后再进行前壁两层吻合，先缝全层，此时可放开肠钳然后行前壁浆肌层缝合。
（2）端侧吻合法：切除病变肠管后，一般以近段肠管断端对远段肠管侧壁，依据近端肠管粗细，将远段肠管的对系膜侧肠壁顺肠管纵轴全层切开相应长度，将两肠管靠拢，两端各缝一针牵引，一般按后壁浆肌层、后壁全层、前壁全层、前壁浆肌层的顺序进行吻合，也可先缝前后壁的全层，再缝浆肌层。浆肌层缝合多采用间断垂直褥式内翻，全层多采用间断或连续内翻缝合。吻合完毕，同法检查吻合口是否通畅，关闭系膜间裂隙。图10。
（3）侧侧吻合法：有两种情况，一种为小肠切除后按侧侧吻合法进行肠道重建，另一种为短路手术，不需切断小肠，将梗阻近端与远端肠管直接侧侧吻合。以前者为例，方法为：切除肠管后，将两保留端肠管全层间断缝合关闭，再行
浆肌层缝合包埋两断端。将两断端按肠管蠕动方向重叠靠拢，在对系膜缘将两肠壁浆肌层行间断缝合6-8cm长度，距此缝合线0.5cm处顺肠管纵轴方向切开两侧肠壁全层4-6cm，清除肠腔内容物，采用单纯间断缝合或连续锁边缝合法缝合后壁全层，用间断内翻或连续水平褥式内翻缝合法缝合前壁全层，间断垂直褥式内翻缝合包埋前壁浆肌层，吻合完毕，关闭系膜裂孔。
（五）气管切开置管术
[目的和要求]
⒈掌握气管切开置管术的适应证和术前准备；
⒉掌握气管切开置管术的方法；
⒊熟悉气管切开置管术的基本步骤。[方法]
1、动物选取
可选取狗模拟气管切开术，因狗的气管大小类似人的气管。
2、术前准备
手术所需器械包括：①切皮刀和气管切开弯刀片；②甲状腺拉钩；③气管撑开器；④气
管套管；⑤吸引器和吸引管。气管套管由外管、内管和管芯三部分组成，选择6mm-8mm型号。
3、手术方法：
（1）固定和调整动物姿势，暴露颈前部，剪毛，清洁术野。
（2）消毒、铺巾。
（3）切口：在第一和第三气管环之间的正前方皮肤作一长约1.5cm的横行或纵行直切口，皮下组织可用小指或气管扩张钳钝性分离。
（4）穿刺：注射器接穿刺套管针并抽吸生理盐水或2%利多卡因5ml，经切口于第一第二或第二第三气管环之间进行穿刺，回抽见气泡，即证实穿刺针在气管内。拔出针芯，送入穿刺套管。
（5）置入导丝：用注射器再次证实穿刺套管位于气管内后，沿穿刺套管送入导丝，抽出穿刺套管。此时病人多有反射性咳嗽。
（6）扩张气管前壁：先用扩张器沿导丝扩开气管前组织及气管前壁，再用气管扩张钳顺导丝分别扩张气管前组织及气管前壁，拔出扩张钳。气管前壁扩张后气体可从皮肤切口溢出。
（7）放置气管套管：沿导丝将气管套管送入气管，拔出管芯和导丝，吸引管插入气管套管，
证实气道通畅后，将球囊充气，最后固定气管套管，包扎伤口，手术完毕。
（六）静脉切开置管术
[目的和要求]
⒈掌握静脉切开置管术的适应证（大量输液、输血时，静脉注射穿刺失败时）；
⒉掌握静脉切开置管术的方法和步骤；
⒊熟悉静脉切开置管术注意事项。
[手术方法]
1、术前准备：在狗一侧后肢根部腹面扪到股动脉搏动的部位剃毛5×5cm
2、静脉切开的步骤：
（1）在后肢根部腹面，扪股动脉博动其内侧1.0cm为静脉。
（2）戴上无菌手套后消毒铺巾。
（3）在其股动脉搏动内作一纵行切口，长约2cm。
（4）用蚊式止血钳在搏动内侧分离皮下组织寻找股静脉，找到后用止血钳平行于静脉周围钝性分离，游离出1.5cm以上的静脉。
（5）用血管钳在静脉下方穿出，挑起引出两根线，远侧结扎，近侧暂不打结。
第二章动物实验的基本知识和操作技术 第一节实验动物 药理学实验常用的动物有蛙、蟾蜍、小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔、猫和犬等。常根据实验目的和要求选用不同的实验动物。由于不同的动物具有不同的特点，故所选用的动物应能较好地反映试验药物的选择性作用，并符合节约的原则。 （一）、实验动物的选择原则 1、尽量选择与人体结构、机能、代谢及疾病特征相似的动物； 2、选用的实验动物的解剖、生理特点应符合实验目的； 3、根据人与实验动物对同一刺激的反应差异，选用具有明显反应的动物； 4、根据生物医学研究必须达到的精确度，选用结构功能简单又能反映研究指标的动物； 5、选用患有人类类似疾病的近交系或突变系动物； 6、选用与实验设计、技术条件、实验方法等相适应的标准化动物； 7、在不影响实验目的与结果的前提下，选择最易获得、最经济、便于操作管理的动物； 8、供实验用的动物应具备质量合格证。 （二）、常用实验动物的特点 1、蛙和蟾蜍 离体心脏能较持久地有节律地搏动，常用于观察药物对心脏的作用；坐骨神经和腓肠肌标本可用来观察药物对周围神经、神经肌肉或横纹肌的作用；蛙的腹直肌还可以用于鉴定胆碱能药物的作用。 2、小白鼠 是实验室最常用的一种动物。易于大量繁殖，且价廉，适用需要大量动物的实验，如药物筛选、半数致死量测定、药物效价比较、抗感染、抗肿瘤药物及避孕药物的研究等。 3、大白鼠 与小白鼠相似。一些在小白鼠身上不便进行的实验可选用大白鼠，如药物抗炎作用的实验常选用大白鼠踝关节制备关节炎的模型。此外，也可用大白鼠直接记录血压、作胆管插管，或用大白鼠观察药物的亚急性或慢性毒性。大白鼠的血压和人相近，且稳定，现常用于抗高血压药物实验。
常用实验动物介绍（一、大小鼠、豚鼠） 发布人:系统管理员发布时间:2010-3-15 阅读次数:1278 常用实验动物介绍 一、小鼠 1、〖名称〗：BALB/c小鼠 〖简介〗：1913年，贝格(Bagg)从美国商人欧希尔(Ohio)处购得的白化小鼠原种，以群内方法繁殖。麦克·多威尔(MacDowell)在1923年开始作近交系培育，至1932年达26代，命名为BALB/c品系。安德尔文特(Andervont)等人使BALB/c广为传播和应用。1985年我国从美国NIH引进到中国医学科学院实验动物研究所，为BALB/c第180代。 毛色：白化。 主要特性：①乳腺肿瘤自然发生率低，但用乳腺肿瘤病毒诱发时发病率高;卵巢、肾上腺和肺的肿瘤在该小鼠有一定的发生率。②易患慢性肺炎。 ③对放射线甚为敏感。④与其他近交系相比，肝、脾与体重的比值较大。20月龄的雄鼠脾脏有淀粉样变。⑤有自发高血压症，老年鼠心脏有病变，雌雄鼠均有动脉硬化。⑥对鼠伤寒沙门氏菌补体敏感，对麻疹病毒中度敏感。对利什曼原虫属、立克次氏体和百日咳组织胺易感因子敏感。 主要用途：广泛地应用于肿瘤学、生理学、免疫学、核医学研究，以及单克隆抗体的制备等。 2、〖名称〗：C57BL 〖简介〗：1921年立特(Little)用艾比·拉特洛坡(Abby Lathrop)的小鼠株，雌鼠57号与雄鼠52号交配而得C57BL1937年从C57BL分离出C57BL/6和C57BL/10两个亚系。1985年从Olac引到中国医学科学院实验动物研究所。 毛色：黑色。 主要特性：①乳腺肿瘤自然发生率低，化学物质难以诱发乳腺和卵巢肿瘤。②12%有眼睛缺损;雌仔鼠16.8%，雄仔鼠3%为小眼或无眼。用可的松可诱发腭裂，其发生率达20%。③对放射物质耐受力中等;补体活性高;较易诱发免疫耐受性。④对结核杆菌敏感。对鼠痘病毒有一定抵抗力。⑤干扰素产量较高。⑥嗜酒精性高，肾上腺素类脂质浓度低。对百日咳组织胺易感因子敏感。 ⑦常被认作"标准"的近交系，为许多突变基因提供遗传背景。 主要用途：是肿瘤学、生理学、免疫学、遗传学研究中常用的品系。 3、〖名称〗：BALB/c -nu裸小鼠 〖简介〗：1973年丹麦的C.W.Friis在BALB/cA近交系小鼠中发现自发性突变的无毛小鼠，该突变小鼠胸腺发育不良，免疫T细胞缺失，而培育成了BALB/cA-nu。 主要特性：①无毛、裸体、无胸腺。随着年龄增长，皮肤逐渐变薄、头颈部皮肤出现皱折、生长发育迟缓。②由于无胸腺而仅有胸腺残迹或
第一节实验动物的捉拿、固定和编号方法 在基础医学实验中，正确捉拿与固定动物，是实验工作的基础，也是实验顺利进行的保证。掌握正确捉拿、固定动物的目的就是防止实验者被动物咬伤抓伤，同时也是为了维持动物的正常生理活动，从而不影响实验观察结果。 一、实验动物的捉拿与固定方法 在基础医学实验中，最常用的动物有小鼠、大鼠、豚鼠、蟾蜍、蛙、家兔和犬，现分别就其捉拿与固定方法依次予以介绍。 1. 小鼠 捉拿时先用右手将鼠尾抓住提起，放在较粗糙的台面或鼠笼上，在其向前爬行时，右手向后拉尾(图5-1)，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和头颈部皮肤，将其置于左手心中，拉直四肢并用左手无名指压紧尾和后肢(图5-2)，右手即可作注射或其他实验操作。取尾血及尾静脉注射时，可将小鼠固定在金属或木制的固定器上(图5-11)。 图5-1 图5-2 2. 大鼠 方法基本与捉拿小鼠相同，但实验者事先应戴帆布防护手套。用右手将鼠尾抓住提起，放在较粗糙的台面或鼠笼上，抓住鼠尾向后轻拉，左手拇指和食指抓紧两耳和头颈部皮肤，余下三指紧捏鼠背部皮肤，如果大鼠后肢挣扎厉害，可将鼠尾放在小指和无名指之间夹住，将整个鼠固定在左手中，右手进行操作。若进行手术或解剖，则应事先麻醉或处死，然后用棉线活结缚四肢，用棉线固定门齿，背卧位固定在大鼠固定板上。需取尾血及尾静脉注射时，可将其固定在大鼠固定盒里，将鼠尾留在外面供实验操作。 3. 豚鼠 豚鼠具有胆小易惊的特性，因此抓取时要求快、稳、准。一般方法是：先用右手掌迅速、轻轻地扣住豚鼠背部，抓住其肩中上方，以拇指和食指环握颈部，对于体型较大或怀孕的豚鼠，可用另一只手托住其臀部(图5-3、图5-4)。
各国动物实验法规 作者：https://www.doczj.com/doc/6611894601.html,发表日期：2012-03-15 动物实验法规 动物实验法规有两个关注对象：动物实验过程及实验动物关爱。动物实验过程即实验动物的选育、饲养及实验执照的获取、对实验过程的监督等；实验动物关爱是对实验动物福利的保护及其权益的维护。对于非业内人士而言，实验动物关爱的敏感度明显高于前者。动物福利与动物伦理成为对实验动物关注的焦点。为了避免人类以科学实验为借口，视实验动物于无生命的实验室工具，无视其感知痛苦的能力对其进行戏耍甚至虐待等诸多不道德行为，许多国家都订立了相关实验动物保护法规。 各国订立的实验动物法规各有不同，但于非技术层面的动物福利其基本立场是相似的。归根结底，动物实验法规规定了对待实验动物的三个准则，即：一、某动物个体被应用到某个实验项目中的次数； 二、某实验项目中应用实验动物的总数；三、实验中对未施用麻醉剂的动物所施加的疼痛程度。 欧洲 在药物开发的过程中，动物试验乃是不可或缺的一环。由于动物试验无可避免地将牺牲为数颇多的各类动物，因此，一直受到动物保护人士的诟病。在欧盟国家，以脊椎动物为对象的实验需遵从《实验性或研究用动物保护指令》(Directive 86/609/EEC)，该指令于1986 年被当时的欧共体采纳，致力于对实验及为其他科学目的而使用的动物的保护。在政策层面上提出控制实验动物的使用、对从业人员的培训以及对实验过程的监督。鼓励各欧盟国家寻求对动物实验的替代方式，即在可以使用替代实验方法的时候尽量减少涉及动物的实验。该指导条文依照国际惯例措词，没有强制力，且具有很大的解释空间，各成员国可以依据该指导来制定符合本国的法律法规。一些条文所具有的政治味道更甚于具体的法规。随着基因改造、克隆等技术的出现，该指导条文也有待修订。其后，欧盟理事会在1998 年又决议采纳《欧洲实验用及其它科学研究用脊椎动物之保护公约》(European Convention for the protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purposes)成为欧盟法律的一部份，以使脊椎动物在试验过程中可以受到更为人道的对待。 瑞典 下面以瑞典为例介绍欧盟框架内对实验室用动物的相关立法。瑞典的实验动物法律体系来自两部涉及动物福利的通用法律：《动物保护法案》(Animal Protection Act)及《动物保护条例》(Animal Protection Ordinance)。这两部法律都于1988 年通过。瑞典农业部下设有与动物实验相关的理事会：国家实验动物监管理事会。该理事会负责根据立法制定具体的条款以约束相关从业者。其下设有七个地区性的伦理委员会，成员一半是科学家或医生，另一半来自非专业领域。委员会由一位高级律师(通常为法官)领导，受理动物实验项目申报，权衡实验目标与动物所可能遭受到的痛苦，给出不可申诉的判决。而且被批准的项目只能得到最多3 年时间的动物实验执照。这些动物实验包括饲育研究，末梢麻醉状况下的动物实验，以及为了进行生物医学研究而必须杀死动物并取得其机体组织的实验。为了对其批准的动物实验项目进行监管，委员会聘任权威机构的兽医检验员对项目进行核查，并对违规者提出整改意见甚至罚款。不过项目负责人可以不服兽医检验员的决定并申诉到更高级机构。法案于1990年进行了修订，规定伦理委员会定决定高于兽医检验员，只要是经委员会核准的动物实验项目并履行协议委员会签署的协议，兽医检验员无权令其停业。国家实验动物监管理事会 (The National Board for Laboratory Animals)同样负责汇
实验动物手术及麻醉 一、概论 实验操作过程为减轻动物的疼痛及紧迫，常需给予止痛或麻醉。动物麻醉属医疗行为，因此不论是实验前对麻醉药物与方式的选择，或麻醉前中后对动物生理心理状态的评估，均需兽医师专业知识的建议。动物的麻醉必须兼顾：（1）不影响实验结果；（2）临床实际可行；（3）避免动物承受非必要的痛苦。适当的麻醉不但能减轻动物的痛苦，也能减少研究人员承受过多的精神压力。 1. 名词解释： ?Analgesia：止痛，对疼痛失去敏感性。 ?Tranquillization：精神安定，动物呈现一种行为改变状态，精神与动作迟缓，松懈，对周围环境的反应冷淡、对小疼痛常不在意。 ?Sedation：镇静，轻微程度的中枢神经抑制状态，保持醒觉，但安静。 ?Anesthesia：麻醉，以药物或其他方式抑制动物局部（周边性）或全体（中枢性）神经组织的活性，使动物部分或整个身体完全失去感觉作用。 ?Local anesthesia：局部麻醉。 ?General anesthesia：全身麻醉。完全无知觉与感觉（中枢性）。 ?Surgical anesthesia：外科手术麻醉。完全无知觉与感觉，并有充分的肌肉松弛和痛感消失。 2. 手术分类 实验动物的手术可分为存活手术（Survival surgery）和不存活手术（Nonsurvival surgery）两类，前者指麻醉后或所有手术结束后动物还需生存着，后者指麻醉后或所有手术结束后动物即给与安乐死。进行存活手术时，不论是剖腹、截肢或注射药物、处理伤口，皆需严格执行手术部位的剃毛消毒（beta-iodine scrub/alcohol），材料灭菌（autoclave）及无菌操作（surgical glove & aseptic operation）视实验需求动物可在术前注射抗生素以避免感染。如进行不存活手术，虽不需存活手术般严格无菌操作，但至少要行操作部位的剃毛消毒和戴手套。 存活手术依对动物的影响程度区分为Major与Minor。Major survival surgery指任何需将体腔暴露在外或严重影响动物正常身体与生理功能的手术，例如：胸腔手术、关节手术、截肢手术...等；Minor survival surgery则是指不需暴露体腔或者对动物生理影响很小的手术，例如：伤口缝合、安装周边血管的导管……基于人道考量单一动物不可执行重复的Major survival surgery，如有必要需于动物实验申请表内提出详细的说明，取得IACUC同意后才可执行。 二、术前照顾 犬、猫、灵长类与猪在进行麻醉前8至12小时需禁食。而小型啮齿类动物及兔不易发生呕吐，因此一般手术前不需禁食，天竺鼠的唾液分泌较多，需多加注意。任何怀孕或健康不良之动物皆须审慎评估麻醉对动物的影响。手术前也需有急救动物的概念，预先准备Atropine、CaCl2 10%、Dexamethasone、Dopamine、Doxapram、Epinephrineate 等急救药物。 (一) 麻醉前给药
课程编码：5401006 学时数：28 一、课程性质、目的和要求 动物学实验以动物进化主线的代表动物为实验材料，研究代表动物的外部形态、内部结构；对有些动物进行培养和分类。动物学实验课程的教学是实现由知识转化成能力的重要环节和有效途径。 通过实验课教学验证，加深理解和巩固课堂所学知识，熟悉动物学的基本操作技术，提高动手能力及观察分析问题的能力，培养科学，严谨，实事求是的学风。通过实验教学，使学生应掌握动物学的研究方法，学会使用检索表，熟悉动物的栖息环境，学会动物的标本采集，制作和保藏技术。 二、实验内容和课时安排 本实验在二年级第一学期开设。 本大纲包括16个实验，其中设计性实验1个，综合性实验1个，根据实验条件从以下实验中选做14个实验。 实验1 动物的细胞和组织（2学时） 【实验目的】 1.了解细胞的基本结构及有丝分裂各期的特点。 2.了解动物的4类基本组织的结构和功能。 【实验仪器与材料】 人口腔上皮复层扁平上皮透明软骨平滑肌及神经组织四种组织的切片幻灯机载玻片盖玻片解剖器吸管吸水纸牙签1%的亚甲蓝0.7%及0.9%NaCl溶液蒸馏水 【主要内容】 1.细胞 2.上皮组织 3.结缔组织 4.肌肉组织 5.神经组织 【实验步骤】 1.观察人口腔上皮细胞 2.观察疏松结缔组织 3.观察血液组织 4.观察肌肉组织 【作业】 （一）绘图： 1.人口腔上皮细胞 2.蝗虫横纹肌细胞，表示其结构 （二）思考题： 1.细胞的基本结构及其机能。细胞分裂各期有何特点？ 2.4类基本组织的结构特点与主要机能。 实验2 眼虫和变形虫（2学时） 【实验目的】 通过眼虫、变形虫及其他鞭毛虫、肉足虫的观察，了解鞭毛虫纲与肉足纲的主要特点，并认识一些有经济价值或常见的种类。 【实验仪器与材料】
动物实验的基本操作技术 实验动物 实验动物(experimental animals)是指经过人工饲养、繁育，对其携带的微生物及寄生虫实行控制，遗传背景明确或者来源清楚，应用于科研、教学、生产和检定以及其他科学实验的动物。这些个体具有较好的遗传均一性、对外来刺激的敏感性和实验再现性。 一、常用实验动物的种类和特点 （一）狗(dog)属于哺乳纲、食肉目、犬科动物。其嗅觉、视和听觉均很灵敏，对外界环境的适应能力强。消化、循环和神经系统均发达，且与人类很相似。适用于各类实验外科手术学的教学和临床科研工作，是复制休克、DIC、动脉粥样硬化等动物模型首选的动物之一，由于其价格较昂贵，教学实验中不如某些中小动物常用。 （二）家兔(rabbit) 属于哺乳纲、啮齿目、兔科、草食类动物。品种有：青紫蓝兔（livor blue rabbit）、中国白兔（china white rabbit）、新西兰白兔和大耳白兔（maximus ear white rabbit）等。具有性情温顺，对温度适应敏锐和便于静脉注射等特点，是教学实验中最常用的动物之一。可用于血压、呼吸、泌尿等多种实验，还可用于体温实验和热原的研究与鉴定。 （三）大白鼠(rat) 属哺乳纲、啮齿目、鼠科类动物。其性情凶猛、喜欢啃咬、繁殖周期短、抗病能力较强、心血管反应敏锐。用于水肿、休克、炎症、心功能不全、肾功能不全和应激反应等实验。大鼠不能呕吐，故不能做催吐实验。 （四）小白鼠(mouse) 属哺乳纲、啮齿目、鼠科类动物。具有繁殖周期短、产仔多、生长快、体型小、温顺易捉、易于饲养等特点。广泛应用于各种药物的毒理实验、药物筛选实验、生物药效学实验，以及癌症研究、营养学、遗传学、免疫性疾病研究等项实验。 （五）豚鼠(cavy) 属哺乳纲、啮齿目、豚鼠科类动物。又名天丝鼠、荷兰猪。其性情温顺，嗅觉和听觉较发达。对某些病毒反应敏锐，易引起变态反应。适用于药理学、营养学、各种传染病的实验研究。细菌、病毒诊断学研究、过敏、变态反应性实验研究和内耳及听神经疾病研究。也常用于离体心脏实验研究。 （六）蛙和蟾蜍(frog and toad ) 均属两栖纲、无尾目类动物。常用于教学实验。其心脏在离体后仍可有节律地跳动。常用于心脏生理、药理和病生实验。蛙舌与肠系膜是观察炎症和微循环变化的良好标本。此外，蛙类还可用于水肿和肾功能不全的实验研究。 二、常用实验动物的品系
畜牧兽医系部分实验室简介 家畜病理学实验室简介 家畜病理学实验室是畜牧兽医系直属统一建立的实验室，2002年以来，根据专业与课程设置、学科建设等发展方向进行了改造建设。实验室现设1个实验室，总面积为54m i，实验器材和设备总额约10万元人民币。实验所用大体标本和病理组织切片都是学生实验自制。 实验室现有工作人员6人，其中专职教师兼主管1人、理论及实验教师4 人、管理人员1人。实验室工作人员名单：陶艳芳副教授、郑锦玲讲师、黄光红助讲、王荣琼助讲、施忠芬助讲、王昌梅中技工。 实验室现承担畜牧兽医系5个专业的家畜病理学和兽医基础（病理）2门实验课程，以及畜牧兽医系的动物防疫与检疫员和动物防疫治疗员的技能鉴定。 实验室注重培养学生的实验操作能力，提高和培养学生的独立工作、科学思维，以及观察问题、分析问题和解决问题的能力。实验课采取启发式、讨论式教学方法调动学生的学习积极性，强化了实验基本理论和技能的训练，取得了显著的教学效果。 动物生物化学实验室简介 动物生物化学实验室是畜牧兽医系于1996年建立的独立实验室。该实验的主要设备有：高速离心机、分光光度计、电子天平、酸度计、层析系统、电子天平、稳压稳流电泳仪、恒温水浴锅、组织捣碎机、台式PH测试仪；设备价值约 为65088元；实验室面积为75.6 m 2左右；管理指导教师有3名（中级职称2人，管理人员1人）。2006学年约接纳13960人时完成实验，使用率达99% ；实验能同时容纳40多名学生进行实验。主要开设实验项目有：生物化学基本操作技能和常用仪器使用方法；血液生化样品的采集及组织 匀浆的制备；牛乳中酪蛋白的提取与鉴定；蛋白质等电点的测定；双缩脲测定蛋白质含量；酶的特性一底物专一性；pH对唾液淀粉活性影响；维生素C的提取与含量测定；血清胆固醇的测定一一磷硫铁法等。动物生物化学实验室作用主要是巩固提高学生的理论知识，培养他们实验操作的基本技能，锻炼他们的独立思考能力与原始创新能力。
兽医外科手术学网上作业题参考答案 第一章外科手术概述 一、名词解释 1．术者：手术时执刀的人，是手术的主要操作者，手术的组织者。 2．外科素养：包括无菌素养、对待组织的素养和对待器械的素养。 3. 助手：协助手术者进行手术的人 4. 紧急手术:动物病情比较危急，为抢救动物生命而做的手术，如大出血、大创伤。 5．择期手术：手术时间的早晚可以选择，又不致影响治疗效果，如十二指肠溃疡的胃切除手术。 二、填空题 1. 外科学是建立在（解剖学、生理学、病理学、药理学和微生物学）基础上。 2. 手术课的学习方法是要（理论结合实践）。 3. 手术学习应注意（基本功）的训练。 4. 外科素养（无菌素养）（对待组织素养）（对待器械素养）。 5、实施某一手术的内容包括打打开手术通路、主手术、闭合切口 三、选择题 1、为了预防手术后可能发生破伤风，最好能在术前2周以上预先注射（B ） A、破伤风抗毒素 B、破伤风类毒素 C、青霉素和链霉素 D、破伤风毒素 3、术部剃毛时剃刀应（A ）剔去被毛。 A、逆着毛流 B、顺着毛流 C、垂直于毛流 D、上述三种都可以 三、简答题 1. 外科手术的意义和任务是什么？ 答：（1）意义：外科手术是外壳治疗和诊断的技术，是外科学的重要组成部分。 （2）任务：借助于手和器械进行动物疾病的治疗。 作为动物疾病的诊断手段如肿瘤的穿刺术、剖腹探查术等。 利用手术方法提高役畜的使用能力和保护人畜安全如截角术。 改善和提高肉产品的质量和数量如阉割术;限制劣种繁殖如去势术。 以经济为目的，利用手术技术创造财富，满足人类生活需要，如牛黄栽培术。 给宠物进行整容手术和生理手术，如断尾手术。 作为医学和生物学的实验手段，如试验手术中的脏器移植手术。 2. 手术计划的内容应包括那些？ 答：(1) 手术人员的分工。 （2）保定方法和麻醉种类的选择（包括麻前给药）。
高血压动物模型综述 班级：08食安一班 姓名：刘悦 学号：0809054117
高血压动物模型综述 1934年，Goldblatt曾证实，狭窄狗肾动脉可产生持续性高血压，这一实验研究引起了人们的普遍重视。随后，世界各地相继开展了高血压病的动物实验研究，建立了不同的高血压动物模型，并提出了各种有关高血压病病原的学说。 高血压是由多基因遗传和多种环境因素相互作用的结果，但其具体发病原因仍不明。高血压病是全身小动脉痉挛引起血管外周阻力增加的直接后果，小动脉的痉挛与遗传、精神刺激、应激、肾脏缺血、肾上腺皮质的作用及钠的作用等诸多因素有关，目前动物高血压模型的复制多以不同角度模拟高血压这些易患因素而形成。这一领域的发展十分迅速，人们试图制作犬、大鼠、兔等多种高血压动物模型。引起急性实验性高血压的方式很多，如直接刺激中枢神经系统、通过神经反射、外源性儿茶酚胺类或其它体液性加压物质的注射等。实验一般多在麻醉动物身上进行。 常用的动物模型有遗传性高血压动物模型：自发性高血压大鼠及其亚型、转基因高血压动物模型，环境性高血压动物模型即神经源性及应激性高血压动物模型，药物性高血压动物模型，手术型动物模型：实验性肾动脉狭窄性高血压，肾外包扎高血压肾外异物包扎动物模型、神经源性高血压动物模型等。 1 遗传性高血压动物模型 遗传性高血压动物模型，如SHR能模拟人类高血压的自然过程，可用作高血压发病机制、药物干预的研究。遗传性高血压大白鼠寿命明显缩短。 1.1 自发性高血压大鼠及其亚型：自发性动物模型的最大优点是其完全 在自然条件下发生的疾病，排除了人为的因素，疾病的发生、发展与人类相应的疾病很相似，其应用价值很高。 自发性高血压大鼠（SHR）及其亚系是目前国际上公认的最接近人类原发性高血压的动物模型。遗传性高血压大鼠有多种品系，如：遗传性高血压大鼠（GH）、自发性高血压大鼠（SHR）、Dahl 盐敏感大鼠（DS）、里昂株高血压大鼠（LH）、蒙特斯种高血压大鼠（SHM）和米兰种高血压大鼠（MHS）等［1］。其中具有使用价值，应用较广泛的是日本学者培育的突变系- SHR。它可产生脑血栓、梗死、出血、肾硬化、心肌梗死和纤维化等变化。 1.2 转基因高血压动物模型 1990 年德国科学家首先将一个高血压候选基因转入大鼠的生殖细 胞而制备携带该候选基因的转基因大鼠（TGR），由此而建立了一种新
兽医外科与外科手术学总结 手术分类：1、根据手术效果分根治、姑息。2、根据手术的紧急程度分紧急手术、非紧急（择期手术）。3、根据手术的污染情况分无菌、污染。4、据出血情况分观血、无血。5、手术目的分治疗、诊断、经济、实验。 保定：以人力、器械或药物控制家畜，限制其活动，以保障人畜安全，便于治疗工作的进行。要求高，要完全限制动物活动，上胸带、腹带、肩带，头部固定。保定原则：安全、迅速、简单、确实。 保定方法：1.柱栏：二、四、六柱栏保定，前肢转位，后肢转位。 2.倒卧保定：提肢倒牛法，二龙戏珠倒牛法，一条绳倒牛法，双抽筋倒马法。 3.猪倒立保定，猪仰卧保定。 无菌术：指在外科范围内防止创口（包括手术创）发生感染的综合预防性技术。它包括灭菌法、消毒法和一定的操作管理规程等。 灭菌法：通常指用物理方法消灭附着于手术所用物品上的一切细菌。常用高温消灭手术器械、手术衣、手术巾、敷料等的微生物；紫外线勇于室内东起灭菌；电离辐射用于药物塑料、缝线、药物的灭菌。金属制品常用高压，紧急时用化学法。 消毒法：又称抗菌法，指用化学方法来消灭细菌或抑制其生长、繁殖等的活动。常用于手术器械、手术室空气、手术人员手和臂消毒及动物术部皮肤消毒。 高压灭菌器使用方法：加水至电阻丝以上，合盖通电源，达到气压打开放气阀去除残留冷空气，关闭放气阀继续加热，达到气压安全阀第一次自动放气开始计算灭菌时间。关闭电源，开放气阀至气压为0，开盖。 高压灭菌注意事项：①压力表必须准确以保证使用安全，定期检验。②加水不宜过多以免沸腾后水向桶内流使物品被泡，不宜过少，否则不能形成一定蒸汽压力，影响灭菌效果，损坏电阻丝。③放气阀下的金属软管必须保留不得折损，否则放气不充分冷空气滞留在桶内会影响温度上升，有碍灭菌质量。④灭菌后应立即间断放气，待气压变为0开盖及时取出内容物，不可待其自然冷却降压，否则干燥物品会变湿妨碍使用。⑤应常测定高压灭菌器灭菌效果，化学指示剂法。 术前准备：1、术前检查2、手术计划的拟订：1）人员分工：术者、助手、器械助手、麻醉助手、保定助手。2）器械等材料的种类与数量3）保定、麻醉方法的选择4）应注意事项：术前、术中、术后5）手术方法6）手术并发症的预防和急救7）术后治疗和护理、饲养管理。 一、手术动物准备：1、检查动物病情。2、禁食24h、禁饮12h。3、补充营养。4、保持安静，减少动物的紧 张和恐惧。5、术部准备：⑴术部除毛：剪毛剃毛；电动推；除毛剂。⑵术部消毒：二次碘酊法：5%碘酊和70%酒精脱碘（感染创由外向内、非感染创由内向外）。⑶术部隔离：创布、洞巾、巾钳。 二、手术器械及物品准备：1、煮沸灭菌法：水、2％NaCO。（金属制品、注射器，30min，注意玻璃冷放入）2、化学消毒：0.1%新洁尔灭30-40min、70％酒精。3、高压蒸汽灭菌法。4.高热灭菌法。 三、手术人员的准备：1．手术计划的拟订。2．手术分工 3．手术人员消毒：剪指甲、锉指甲、洗手、消毒（两
一. 背景： 本次动物实验相关疾病介绍、国内外相关治疗及研究的现状及结果（含临床、基础）、相关引文摘要等。 二、实验所用器械简介： 三、实验目的 1、使用猪或其他适宜动物为实验模型, 按照临床要求对产品进行模拟 使用，对* *器械的* *性能、* *效应进行测试。 2、通过动物实验取得数据和经验, 以便为产品的临床使用撰写详尽的使 用指南。 3、确定* * 器械置入猪后的最长可回收天数, 以便为临床使用的最长 可回收时间提供参考。 4、研究* *器械置入* *天后的可回收性, 以回答以往实验中未能解决 的* * 器械在置入* * 天后是否可取出的问题。 四、实验模型和材料 1、实验模型 （1）.动物模型：猪，体重：25?35KG （2）.体外模型：拟采用透明塑料软管作成的20mm 25mm两 种直径的下腔静脉模型。 2、材料： （1）* *器械采用XX公司研发生产的器械。 （2）其他手术配套器械采用临床通用器械。 3.过程要求：
本实验开始前必须取得动物道德委员会的许可（注：国外 有此要求，国内仅少数几家大医院有动物伦理委员会） 五.实验设计 动物数量及分组方法：实验动物共22头，在置入器械后分为A和B两组.A组动物采用介入方法取出滤器，B组动物采用外科方法经腹切开方法取出滤器.下腔静 脉滤器置入后饲养观察时间为7、10、12、14、16、20、30、60和90天，具体分组方法见下表。 分组（头） 时间（天）- A B 7 1 1 10 1 1 12 3 1 14 3 1 16 1 1 20 3 1 30 0 2 60 0 1 90 0 1 六、实验方法： 1、随机选取实验动物以1:1的比例进行* *实验，并记录* * 总结出的操作要求。7?20天实验用以观察器械置入后的可回收期，30、60、90天实验用以观察器械置入后的长期通畅情况。 2、所有动物器械取出前应造影复查，并与器械置入时的资料进行对比，判断器
动物实验基本操作一（固定、性别判定、标识） 【实验目的】在做动物试验时，为确保给药、实验顺利进行，防止被动物咬伤、准确辨别动物性别、准确标识动物，要学会用正确方法捉拿实验动物、掌握辨别动物性别的方法以及掌握标识动物的方法。 【实验对象】SD大鼠，KM小鼠，雌雄各半，体重180-250g。 【实验器材和药品】 器材：鼠笼、大小鼠固定器、方木板、美式图钉、细绳、防护手套 药品：苦味酸80%~90%酒精饱和溶液、20%乌拉坦 【实验步骤】 一、小鼠的捉拿 1、徒手固定：用右手提起尾巴中部，放在鼠笼盖或其他粗糙面上。向后上方轻拉，此时，小鼠前肢紧紧抓住粗糙表面。左手拇指和食指迅速捏住小鼠颈背部皮肤，再置小鼠于左手心，并以左手掌心和中指夹住小鼠背部皮肤，无名指压住小鼠尾根部，将其固定于手中。右手可行注射或其它操作。 2、固定器固定：尾静脉注射或给药时，将小鼠放进固定器中或者大小和重量适当的容器（如烧杯），只露出尾巴，该类容器能够压住尾部，避免其活动。勿固定过紧造成窒息死亡。进行腹腔手术或心脏采血时，先准备一个15-20cm的方木板，边缘钉入五颗钉子。将小鼠四肢分别用20-30cm的线绳捆绑，线的另一头分别绑在方木板的钉子上，并且在头部上颚切齿牵引一根线绳，也固定在钉子上，达到完全固定。 二、大鼠的捉拿
4-5周内的大鼠，方法同小鼠。周龄较大的，则：1、首先戴好防护手套。2、用右手拇指和食指抓住大鼠尾巴中部将大鼠提起，放在大鼠饲养盒的面罩上。3、左手顺势按、卡在大鼠躯干背部，稍加压力向头颈部滑行。4、以左手拇指和食指捏住大鼠两耳后部的头颈皮肤，其余三指和手掌握住大鼠背部皮肤，完成抓取保定。三、性别判定 小鼠、大鼠性别判定 （1）幼鼠外生殖器与肛门间隔短的是♀，外生殖器与肛门间隔长的是♂。 （2）成年动物可直接肉眼辨认，雄性有膨起的阴囊和阴茎，雌性动物有阴道口。四、动物的标记 小鼠的短期标记法：苦味酸80%~90%酒精饱和溶液（黄色），标出属于自己的编号【注意事项】 1、实验人员要有精神准备：掌握方法，胆大心细，做好防护。 2、动物兴奋的时候不要抓取，待其安静下来。 3、根据受试动物的给药部位或采血方法的不同，事先选择徒手固定还是固定器固定。 4、固定时把握好力度，过分用力会使小鼠颈椎脱臼或窒息死亡，若用力过轻头部能反转过来咬伤实验者的手。 【思考题】 1.在固定实验动物时如何才能快、准、稳？
实验动物手术基本操作技术 1. 动物实验手术常用的器械或设备 手术刀:准备不同型号的手术刀和手术刀柄。用于切开皮肤和脏器。 外科剪:准备直剪和弯剪。用于软组织剪断和组织分离。 手术镊:准备有齿镊和无齿镊。用于挟持皮肤、筋膜、肌腱等较坚硬组织或血管、神经、黏膜等脆弱组织。 止血钳:准备直、弯、蚊三种。用于夹住浅层血管止血或分离组织、牵引缝线等,或者夹住深部组织或内脏的血管出血点或者用于精细的止血和组织分离。 注射器:准备不同容量的注射器。用于补充麻醉或药物注射。 持针钳:用于缝合致密组织或深部组织。 缝合针:准备不同长短、粗细、弯度、针尖圆形或菱形的缝合针。 用于缝合不同的组织。 缝合线:准备丝线、肠线、金属线等不同种类缝合线。用于不同组织的缝合。 医用监护仪:准备呼吸、心跳、脉搏、血压及温度等医用监护仪。用于手术的操作监护。 医用气体:准备氧气、压缩空气、二氧化碳等医用气体。用于动物实验手术的应急需要。 2.动物实验手术器械的消毒方法 消毒对于防止手术伤口感染和保证伤口愈合极为重要,可以减少手术并发症和提高手术愈合效果,主要包括手术环境和手术器械的消毒。其中手术器械的消毒方法如下。 煮沸法:该法适合于金属、玻璃器械、缝合材料或橡皮手套等的灭菌,一般煮沸时间为20～30min。注意金属器械应在沸水时放入以防生锈,玻璃器械应在冷水时放入以防爆炸。 高压蒸汽灭菌法:该法适合于布类、敷料、手术衣帽及器械的灭菌, 灭菌条件为121OC、15min 。注意敷料包装应松紧适宜,待冷却后取出。 化学药品消毒法:主要的化学消毒液灭菌流程有三合液(甲醛2Oml+碳酸钠15g+石碳酸3g+蒸馏水100Oml)浸泡30min;新洁尔灭溶液(0.1%新洁尔灭100Oml+亚硝酸钠5g)浸泡1h;酒精溶液(70%酒精)浸泡1h;来苏水溶液(3～5%)浸泡1h；石炭酸(3%)浸泡1h;福尔马林(2%主要用于缝合线的消毒)浸泡30min;酒精溶液(75%主要用于缝合线的消毒)浸泡30min。 3.动物手术部位的消毒 实验动物手术部位处理一般包括除毛、皮肤消毒、手术部位隔离三个步骤。消毒顺序为:除毛→2%来苏水洗刷手术部位皮肤及周围皮肤→灭菌纱布擦干→70%酒精脱脂→5%碘酊擦抹→75%酒精脱碘→手术部位隔离→手术。 4. 手术人员手臂的消毒
动物实验 ●动物的选择 选择的原则：一切实验动物应具有个体间的均一性，遗传的稳定性和容易获得三个基本要求。 1.从研究目的和实验要求选择，尽量选择与研究对象的机能，代谢，结构，疾病性质 的动物。 2.是否易获得，是否经济，是否容易饲养。 ●实验动物 本实验室常用的实验动物多为小鼠和家兔 1.小鼠(Mus musculus) 实验小鼠是目前教学，医学科学研究工作中经常应用的，使用量最大的一种动物。其性成熟早，产仔多，繁殖快，体型小，便于管理，价格低廉，应用极广，特别使用于需要大量动物进行的实验，如药物筛选，半数致死量，药物的效价比较等。用人工接种或化学致癌物方法可以导致生长各种响应肿瘤，因此也很适应抗癌药物的研究。 我国医学实验中常用的小鼠是野生鼷鼠的变种，属于哺乳纲，啮齿目，鼠科，鼠属。小鼠1.5-2 月龄体重达20g以上，可供实验使用。常用的实验小鼠，尤其是纯品系小鼠，经过人们长期的定向培育与纯化之后，一般具有与野生动物或家畜不同的独有特性（对实验的敏感性和实验结果的一致性，个体动物遗传的均一性），这些都是衡量实验小鼠质量好坏的重要标志。 我国常用的实验小鼠品种有：Balb/c鼠，昆明鼠等。 2．家兔(Oryctolagus cunieulus Rabbits) 兔形目，兔科。常用的家兔为真兔属，由欧洲野生穴兔驯化而成，目前已有五十多个品种。生物医学研究中常用的家兔均为欧洲兔的后代，使用最多的有新西兰兔，大耳白兔，青紫兰兔，荷兰兔，弗莱密西兔。 ●抗原剂量的选择 不同抗原的免疫原性强弱不同，取决于其分子量，化学活性基团，立体结构，物理性状和弥散速度等。抗原的免疫剂量依照给予抗原的种类，免疫次数，注射途径以及受体动物的种类，免疫周期及所要求的抗体特性等而不同。剂量过低不能形成足够强的免疫刺激，剂量过高，又有可能造成免疫耐受。在一定范围内，抗体效价随注射抗原的剂量而增高。蛋白质抗原的免疫剂量比多糖类抗原宽。一般而言，小鼠首次抗原剂量为50-400μg/次，大鼠为100μg-1mg/次，加强免疫的剂量为首次剂量的1/5-2/5。如需制备高度特异性的抗血清，可选用低剂量抗原短程免疫法，反之，欲获得高效价的抗血清，宜采用大剂量抗原长程免疫法。 ●佐剂的应用 对可溶性抗原常需加用佐剂，以增强抗原的免疫原性或改变免疫反应的类型，以刺激机体产生较强的免疫应答。如用可溶性蛋白质抗原内免疫家兔或山羊，在加用佐剂时一次注入量一般为0.5-1mg/kg.，不加佐剂，则抗原剂量应加大10-20倍。 佐剂有福氏（Freund’s）佐剂，脂质体佐剂及氢氧化铝佐剂等。其中最常用的福氏佐剂，根据其组成分为完全福氏佐剂(complete Freund’s adjuvant ,CFA)和不完全佐剂
外科动物实验
外科动物实验 实验一无菌术操作 2学时 [目的与要求] 1、手术人员的手臂肥皂刷洗、碘伏涂擦消毒法 2、穿无菌手术衣、戴无菌手套法； 3、病人手术区消毒后的铺无菌巾法。[教学内容] （一）手术人员的无菌准备技术 1、术前一般性准备：穿自备（相当于手术室）清洁鞋、戴口罩、帽子和穿洗手衣。 2、手臂洗刷与消毒（外科洗手）：重点训练肥皂刷手臂和碘伏涂擦手臂消毒法。 3、穿无菌手术衣 4、戴无菌手套（干手套） （二）病人手术区皮肤消毒后的铺巾：重点训练腹部手术巾和手术洞巾单铺法。 [方法] 1.教师分组：教师分2个小组，每组2人，按 教学内容固定分工，各司其教；
2．学生分组：全班同学按学号划成4个大组，分头前往教师组进行单项目内容学习，每项内容约30分钟时，然后进行交叉轮换； 3．学习时，先由老师介绍操作过程，重点讲解正确操作要领和注意事项，同时要纠正初学者容易犯的错误；然后同学跟随老师的示范操作步骤进行模仿训练。训练期间，每个同学都要严格实施肥皂刷洗手臂及碘伏涂擦消毒操作全过程一次，必要时抽查同学进行洗手后的细菌培养；其他项目的训练则必须反复进行多次。[思考] 同学通过对外科总论实验室这样类似医院手术室内环境的适应以及相关设备的使用，初步建立起“在手术室工作”的理念。尤其通过教师示范介绍外科手术需做好的无菌术中的两项重要内容，即：①“手术人员的手臂刷洗和消毒、穿无菌手术衣、戴无菌手套”②“病人手术区消毒后的铺无菌巾”。然后由同学进行模仿操作训练，这样就使同学不仅可巩固大课所学过的无菌术理论知识，而且进一步学会手术人员如何进行自身相关术前无菌准备和在为病人手术区皮肤消毒后如何围绕切口周围铺无菌巾，从而扩大无
2015-动物实验基本操作动物实验 基本操作一（固定、性别判定、标 识）【实验目的】在做动物试验 时，为确保给药、实验顺利进 行，防止被动物咬伤、准确辨别动 物性别、准确标识动物，要学会 用正确方法捉拿实验动物、掌握 辨别动物性别的方法以及掌握标识 动物的方法。 【实验对象】SD大鼠，KM小鼠，雌雄各半，体 重180-250g。 【实验器材和药品】 器材：鼠笼、大小鼠固定器、方木板、美式图钉、细绳、防护手套 药品：苦味酸80%?90酒精饱和溶液、20%乌拉坦【实验步骤】 一、小鼠的捉拿 1、徒手固定：用右手提起尾巴中部，放在鼠笼盖或其他粗糙面上。向后上方轻拉，此时，小鼠前肢
紧紧抓住粗糙表面。左手拇指和食指迅速捏住小鼠颈背部皮肤，再置小鼠于左手心，并以左手掌心和中指夹住小鼠背部皮肤，无名指压住小鼠尾根部，将其固定于手中。右手可行注射或其它操作。 2、固定器固定：尾静脉注射或给药时，将小鼠放进固定器中或者大小和重量适当的容器（如烧杯），只露出尾巴，该类容器能够压住尾部，避免其活动。勿固定过紧造成窒息死亡。进行腹腔手术或心脏采血时，先准备一个15-20cm的方木板，边缘钉入五颗钉子。将小鼠四肢分别用20-30cm的线绳捆绑，线的另一头分别绑在方木板的钉子上，并且在头部上颚切齿牵引一根线绳，也固定在钉子上，达到完全固定。 二、大鼠的捉拿 4-5 周内的大鼠，方法同小鼠。周龄较大的，^V: 1、首先戴好防护手套。2、用右手拇指和食指抓住大鼠尾巴中部将大鼠提起，放在大鼠饲养盒的面罩上。3、左手顺势按、卡在大鼠躯干背部，稍加压力向头颈部滑行。4、以左手拇指和食指捏住大鼠两耳后部的头颈皮肤，其余三指和手掌握住大鼠背部皮肤，完成抓取保定。 三、性别判定小鼠、大鼠性别判定 (1)幼鼠外生殖器与肛门间隔短的是早，夕卜生殖器与肛门间隔长的是￡。 (2)成年动物可直接肉眼辨认，雄性有膨起的阴囊和阴茎，雌性动物有阴道口。
常用实验动物的实验基本操作技术 第一节常用实验动物的生物学特征 1．蛙（或蟾蜍）的生物学特点是什么？主要用于哪些实验？ 属于两栖变温动物，皮肤光滑湿润，有腺体无外鳞。蛙的心脏有两个心房，一个心室，心房与心室区分不明显，动静脉血液混合，有冬眠习性。生存环境比哺乳动物简单，在机能学实验中有多种实验选择该动物。如：①离体蛙心实验，常用来研究心脏的生理功能及药物对心脏活动的影响。②蛙的腓肠肌和坐骨神经可用于观察外周神经及其肌肉的功能，以及药物对周围神经、骨骼肌或神经肌肉接头的影响。③缝匠肌可用于记录终板电位。脊休克、脊髓反射、反射弧分析、肠系膜微循环等。在临床检验中，可用雄蛙作妊娠反应实验。 2．小白鼠的生物学特征是什么？主要用于哪些实验？ 小白鼠性情温顺，易于捕捉，胆小怕惊，对外来刺激敏感。它胃容量小，不耐饥渴，随时采食。在机能学实验中常选用该动物。故适用于大量的实验动物，如：某些药物的筛选实验、半数致死量（LD50）测定、药效比较、毒性实验、妊娠期20天左右，常用于避孕药实验及抗癌药实验。 3．大白鼠的生物学特征是什么？主要用于哪些实验？ 大白鼠性情温顺，行动迟缓，易于捕捉，但受惊吓或粗暴操作时，会紧张不安甚至攻击人。大鼠嗅觉发达，对外界刺激敏感，抵抗力较强。大鼠无胆囊，肾单位表浅，肝再生能力强。大鼠的血压反应比兔稳定，可用它作血压实验，也可用于慢性实验、抗炎、降脂、利胆、子宫实验及心血管系统的实验。药典规定该动物为催产素效价测定及药品指控中升压物质检查指定动物。 4．豚鼠生物学特征是什么？主要用于哪些实验？ 豚鼠性情温和，胆小，饲养管理方便，可群养。豚鼠耳蜗管发达，听觉灵敏，存在可见的普赖厄反射（听觉耳动反射），乳突部骨质薄弱。豚鼠对组织胺、人型结核杆菌很敏感。能耐受腹腔手术，使用于肾上腺机能的研究。其自身不能制造维生素C，是研究实验性坏血症的唯一动物。 5．家兔生物学特征是什么？主要用于哪些实验？ 家兔属于草食性动物，性情温顺但群居性差，听觉、嗅觉十分灵敏，胆小易惊，具夜行
动物外科手术记录 年级：系别：班级：姓名： 手术日期：2012年4月10日动物种类：雄 手术名称：剖腹探查术、盲肠部分切除术、胃穿孔修补术、肠切除及肠端端吻合术、脾切除术 手术者：第一助手：第二助手：器械护士： 手术开始时间：14:30 结束时间：17:30 共计：3小时 麻醉药品：戊巴比妥钠方法：腹腔注射用量：15—20mg/kg 手术步骤如下： 一、体位：仰卧位 二、铺巾方法：用4块无菌巾，每块的一边双折少许，在切口每侧铺盖一块无菌巾，盖 住手术切口周围。顺序为一下二上三左四右。然后用布巾钳将无菌巾交角处夹住，以防止移动。再铺大单，头端应盖过麻醉架，两侧和足端部位应垂下超过手术台边30cm。 三、切口部位：剑突下至耻骨联合间上腹部正中切口，约10—15cm。 四、止血结扎皮下出血点：皮肤切开后，随即用止血钳钳夹出血点，手术者和第一助手 分别钳夹对侧。必须先用干纱布迅速吸干出血，随即迅速用止血钳对准出血点进行钳夹，钳夹组织应少，但又要能钳夹住出血点。钳夹后用丝线结扎出血点，要求术者和第一助手协调配合。彻底止血后，用无菌巾把切口皮缘的皮肤隔开，并用巾钳固定，以保护伤口。 五、开腹层次：切开皮肤、皮下组织→切开肌层→切开腹膜 六、腹膜切开方法：用两把血管钳钳夹住后鞘和腹膜。用手指检查提夹部位，确定没有 内脏被钳夹时，用刀切开一小口。然后，手术者和第一助手分别用血管钳夹住对侧腹膜边缘，将其提起，用剪刀剪开腹膜直至切口两端。切开腹膜时，可用左手食指和中指插入腹腔，保护内脏。 七、腹膜探查次序及探查所见：腹膜、网膜、肝、胆囊、脾、胰腺、胃、小肠、回盲部。 八、检查腹腔内有无异物及出血点，清点器械和敷料的数目与手术开始前计数是否相符。 九、手术具体操作步骤： （一）剖腹探查术： 1.手术前一般准备：麻醉后，将狗固定于仰卧位。脱毛，腹部常规消毒（范围距 切口15cm以上，消毒范围上至剑突水平上方，下至耻骨联合水平，双侧到贴 床的腰部），铺巾。 2.切开皮肤及皮下组织：做上腹部正中直切口，长10—15cn，用75%酒精棉球消 毒切口部皮肤，用纱布隔离周围皮肤，手术者和第一助手均用左手四指经隔离 纱布将切口皮肤压住并向两侧绷紧，第二助手在切口头端经隔离纱布压紧，手 术者右手执弓式持刀，使刀刃与皮肤垂直切开至预定的长度，要求一次切开， 创缘要整齐，如一刀未能切开，可以补切，但必须原切痕切开。将皮肤、皮下 组织切开后，随即用止血钳钳夹并结扎止血点。 3.切开腹直肌前鞘：用刀在腹直肌前鞘做一小切口，用剪刀上、下延伸，分离剪 开。要求剪开的腹直肌前鞘与皮肤切开等长，且在同一矢状切面上。 4.裂开腹直肌：沿腹直肌肌纤维方向插入刀柄并上下移动，造成一裂隙，然后插 入左手食指，与刀柄共同沿腹直肌肌纤维方向全层向两侧分开，至皮肤切开长 度，暴露腹直肌后鞘。裂分肌肉时，如遇血管作钳间切断结扎。肌肉中出血点 作贯穿结扎。