2型糖尿病局灶性脑缺血大鼠海马组织iNOS的表达及原花青素的干预
- 格式：pdf
- 大小：354.92 KB
- 文档页数：4
ｍＩＪｌ００
总动脉，插管，先输注生理盐水约５０ ｍＬ，然后输注４％多 聚甲醛约５０ ｍＬ，断头取脑。甲醛固定，冠状脑片制备，选 择梗死中心（即最大层面），常规酒精脱水，石蜡包埋，制 成４—６ ｉｌｌｌｎ厚的切片，附片，行苏木素一伊红（ＨＥ）染 色，分别观察梗死中心区、梗死周边区脑组织（海马ＣＡＩ 区、ＣＡ３区），前述区域神经细胞和血管内皮细胞（每个观 察区选择具有代表性标本观察结果并记录）。 １．５免疫组化法检测缺血侧大脑海马ＣＡｌ区ｉＮＯＳ的表达 造模后２４ ｈ，大鼠以１０％水合氯醛３ ｍＩ．／ｋｓ腹腔注射麻醉 后固定，颈正中偏右切口，暴露右颈总动脉，用Ｎｓ约５０ ｍＬ灌注，然后用４℃４％多聚甲醛液约５０ ｍＬ灌注固定，
ＩＩｌＯｌ［℃ｏｂｖｉｏｕｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ＰＣ
Ｃａｌｌ
ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｍｅＵｉｔｕｓ
ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＞０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ
ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｌｏｗ—ｄｏｓｅ ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．０５），ｂｕｔ ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｒｅｄｕｃｅ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｐｒｏｃｙａｎｉｄｉｎ ｏｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｉＮＯＳ ｉｎ ｔｙｐｅ ２ ｄｉａｂｅｔｅｓ
ｆｏｒ２４ｈ，ｗｅ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ
ａｎｄ ｅｏｓｉｎ（ＨＥ）
ｗ鹞ｅ∞ａｍｉｎｅｄ ｂｙ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ＳＡＢＣ ｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ
Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ
ｓｈａｍ—ｏｐｅｒａｔｉｏｎ
ｍｅｄｉｕｍ—
ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｉＮＯＳ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ ｏｆ ｍｏｄｄ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ
连续１周，于大脑中动脉闭塞（ＭＣＡＯ）术前１ ｈ再灌胃１ 次。Ｐｃ低剂量、中剂量、高剂量组分别以Ｐｃ粉剂５０、
１００、２００
ｍｓ／ｋｓ，每次蒸馏水配制成悬浮液灌胃，其他各
ｍＬ／ｋｇ。
组以相同的给药方法给予生理盐水（ＮＳ）１
１．３型糖尿病大鼠局灶性脑缺血模型的制备第一步取ＳＤ 大鼠每笼５只，常规饲料适应性饲养１周，然后喂饲高脂 高糖饲料（１０％猪油，２．５％胆固醇，１．０％猪胆酸盐， ２０．Ｏ％蔗糖，６６．５％常规饲料＂１）。４周后，诱导出高胰岛 素血症和胰岛素抵抗，按２５ｍｇ／ｋｇ体重的剂量一次性尾静 脉注射ＳＴＺ溶液（临用前以ｏ．１
基金项目：辽宁省教育厅高等学校科学研究项目。编号：０５Ｌ１３７；锦州市科学技术计划项目，编号：０５Ａ１Ｅ３１。 作者简介：宋晓伟（１９８１），女。山东省微山人，住院医师，在读硕士研究生。主要研究方向为脑血管疾病的基础与临床研究。 通讯作者：闶连秋（１９６３），男，辽宁省西丰人，教授，硕士学位，主要研究方向为脑血管疾病的基础与临床研究。
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｌｖｅ
ｒａｔｓ
Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ
ｃｏｎｔｅｎｔ
ｏｆ ｉｎｄｕｃｅｄ ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ ｓｙｎｔｈａｓｅ ｉｎ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ ｔｉｓｓｕｅ ｏｆ ｔｙｐｅ ２ ｄｉａｂｅｔｅｓ ｍｅｌｌｉｔｕｓ Ｔｈｉｒｔｙ ＳＤ
ｒａｔｓ ｗｅｒｅ
ｗｉｔｈ ｆｏｃａｌ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ ａｎｄ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ
２４
２结
２．１
果
大鼠海马ＣＡｌ区脑组织病理形态学ＨＥ染色（×
２００）光学显微镜下观察，除假手术组（图１）外各组均可 见正常神经元和损伤神经元，见正常神经元核圆形，边界 及核仁清楚；损伤神经元胞核肿大，偏位，核仁消失，胞 浆着色浅、苍白或核浓缩、深染，细胞呈三角形缺血性坏 死变化。损伤神经元上述特点在模型组表现得更明显（图 ２）；Ｐｃ组（图３、４、５）能不同程度的改善神经细胞的核 深染、核固缩程度，减少细胞及间质的水肿，使胞膜清楚， 形态正常，核仁清晰可见的神经细胞数目增多。 ２．２大鼠海马组织ＣＡｌ区ｉＮＯＳ表达与假手术组相比， 模型组ｉＮＯＳ免疫阳性细胞出现高表达，ｉＮＯＳ阳性细胞形态 呈椭圆形、三角形、胞质染色均匀，有显著性差异（Ｐ＜ ０．０１）；与模型组相比，原花青素各组均降低ｉＮＯＳ免疫阳 性细胞的数目（Ｐ＜０．０１），其中中、高剂量组较低剂量组 效果更明显（Ｐ＜０．０５），且两组间无明显差异（Ｐ＞ ０．０５），假手术组基本不表达。结果见表１。
Ｍｅｄｉｃａｌ Ｌ）２（０３． ｇｎｉｎｏａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ。 ｒｐ Ｊ辽孝压擘院学报？００９Ａ
Ｊ
１３１
２型糖尿病局灶性脑缺血大鼠海马组织ｉＮＯＳ 的表达及原花青素的干预
宋晓伟，阂连秋
（辽宁医学院附属第一医院神经内科，辽宁锦州１２１００１）
摘要：目的探讨２型糖尿病局灶性脑缺血大鼠脑组织中诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）含量的变化及原花青素（ｐｒｏ－ ｃｙａｎｉｄｉｎ，ＰＣ）对其表迭的影响。方法将３０例大鼠随机分为假手术组、２型糖尿病单纯脑缺血组及Ｐｃ低剂量组（５０ ｍ∥ ｌ【ｇ）、中剂量组（１００ ｍｇ／ｋｇ）及高剂量组（２００ ｍｓ／ｋＳ），于脑缺血后２４
Ｎ０３是催化Ｌ一精氨酸生成内源性ＮＯ的限速酶，根据
其存在部位及作用机制不同，分为内皮型（ｅＮＯＳ）、神经
参考文献：
［１】
张小郁，高明堂，李文广。等．葡萄耔提取物体外抗脂质过 氧化作用的研究［Ｊ］．自由基生命科学进展，１９９９，７ （４）：ｌｔ６—１２０．
元型（ｎＮＯＳ）和诱导型（ｉＮ０３）。ＮＯ在脑缺血性损伤的发
［２］Ｐｉａｏ
ＣＳ，Ｋｉｌｎ ＪＢ，Ｈａｒｔ ＰＬ，ｅｔ ａ１．Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ０ｆ ｔｈｅ ｐ３８
ＭＡＰＫ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ＳＢ２０３５８０ ａｆｆｏｎｔｓ
ｂｒａｉｎ脚ｔｉｏｎ
生和发展过程中有双重作用。在脑缺血早期，ｅＮＯＳ介导生 成的ＮＯ通过扩张血管改善缺血区的血液供应，具有短时 的保护作用，随着ＮＯ的大量产生，由ｎＮＯＳ和ｉＮＯＳ介导 的神经毒性效应很快占优势，分别在脑缺血进展期和晚期 介导神经毒性作用，造成神经元的损伤…。 Ｐｃ具有抗氧化、降低毛细血管通透性和对心血管具有
ＷａＳ
ｏｆ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｈｉ曲一ｄｏｓｅ ｇｒｏｕｐｓ’ｅｆｆｅｃｔｓ
ｔｗｏ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ
ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ＰＣ ｇｒｏｕｐｓ ｐｏｓｓｅｓｓｅｄ ｌｏｗｅｒ ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｅｌｌｓ ｏｆ
ｉＮＯＳ．ｎｅ
ｄｏｓｅ ａｎｄ
表ｌ原花青素对２型糖尿病局灶性脑缺血大鼠缺血侧海马ＣＡｌ区ｉＮＯＳ平均阳性细胞数的影响（ｉ：ｋＳ靠＝６）
与单纯缺血组相比，－：Ｐ＜ｏ．０１；与模型组相比，ｂ：Ｐ＜Ｏ．０１；与低剂量组相比，ｃ：Ｐ＜Ｏ．０５
３讨
论
多种药理作用¨－ｔｏｊ。Ｐｃ抗氧化活性使其可抑制诸如组织 胺、５羟色胺、前列腺素及白三烯等炎症因子的合成和释 放。在本实验中Ｐｃ组能够明显减少２型糖尿病局灶性脑缺
Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｐｒｏｃｙａｎｉｄｉｎ
ｏｎ
Ｍｅｌｌｉｔｕｓ
Ｒａｔｓ ｗｉｔｈ Ｆｏｃａｌ Ｃｅｒｅｂｒａｌ Ｉｓｃｈｅｍｉａ ＳＯＮＧ Ｘｉａｏｗｅｉ，ＭＩＮ Ｌｉａｎｑｉｕ
（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ
ｏｆ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ
Ａｆｆｄｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｌｉａｏｎｉｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉｎｚｈｏｕ １２１００１ Ｃｈｉｎａ）
ｃｅｒｅｂｒａｌ ａｒｔｅｒｙ ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ，
（辽）。实验动物级别：普通级。 １．２实验分组３６只大鼠随机分为假手术组、模型组（２ 型糖尿病大鼠单纯缺血组）、３个ＰＣ剂量组，每组６只大 鼠。Ｐｃ组在建立２型糖尿病模型后给予灌胃，１ ２ｋ／２４
ｈ，
ＭＣＡＯ）的制作０３平均阳性细胞表达数（Ｐ＜０．０１），
减轻神经元损伤，尤以中、高剂量组作用显著（Ｐ＜０．０１）， 推测Ｐｃ神经保护作用的机制可能是通过抗氧自由基作用抑 制炎症反应，降低ｉＮＯＳ含量，减少神经毒性ＮＯ的产生， 进一步发挥抗自由基作用，从而起到神经保护作用。 国内外关于ＰＣ的神经保护作用研究较少，尚未发现有 Ｐｃ对２型糖尿病局灶性脑缺血后海马组织ｉＮ０３表达影响 的相关报道。本研究从此角度研究Ｐｃ的保护作用，从而对 临床应用ＰＣ提供了证据。 （此文图１—５见附页７）
ｍｏｌ／Ｌ
１材料与方法
１．１实验动物选用健康雄性ｓＤ大鼠３６只，体重１８０—
２４０
ｐＨ值４．２的枸橼酸
ｇ（辽宁医学院实验动物中心提供）。许可证号：ＳＣＸＫ
一枸橼酸钠缓冲液配制成ｏ．５％的溶液）。７２ ｈ后取尾血测 血糖，超过１６．７ ｍｍｏｉ／Ｌ为２型糖尿病大鼠ｐｏ。第二步选 取２型糖尿病ｓＤ大鼠造模成功后２周后按照文献卜１进行进 行大鼠局灶性脑缺血模型（ｍｉｄｄｌｅ
ｗｉｔｈ ｆｏｃａｌ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ． ｍｅｌｌｌｔｕｓ；ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ；ｉＮＯＳ
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｐｒｏｃｙａｎｉｄｉｎ；ｄｉａｂｅｔｅｓ
原花青素（ｐｒｏｃｙａｎｉｄｉｎ，ＰＣ）是一类植物和食品中广泛 存在的多酚化合物的总称，由不同数量的儿茶素和表儿茶 素缩和而成，其含大量活性酚羟基使其具有很强的抗氧化 及清除各种活性氧自由基的能力…。本文进一步探讨了其 对２型糖尿病ｓＤ大鼠局灶性脑缺血模型海马组织中诱导型 一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）高表达的抑制作用，为其临床应用 提供理论依据。
万 方数据
１３２
辽宁医学院学报２００９年４月，３０（２） １．６统计学处理实验数据用均数±标准差（ｉ：ｋＳ）表示， 采用ＳＰＳＳｌ６．０统计软件进行单因素方差分析和ｑ检验等统 计分析。 ｍｇ）腹腔注射麻醉，打开颈部，暴露颈右
醒时出现右侧前肢内收屈曲或爬行时向右侧划圈或倾倒为 造模成功。 １．４脑组织病理形态学采用ＨＥ染色大鼠以１０％水合氯 醛（ｏ．３
总动脉，插管，先输注生理盐水约５０ ｍＬ，然后输注４％多 聚甲醛约５０ ｍＬ，断头取脑。甲醛固定，冠状脑片制备，选 择梗死中心（即最大层面），常规酒精脱水，石蜡包埋，制 成４—６ ｉｌｌｌｎ厚的切片，附片，行苏木素一伊红（ＨＥ）染 色，分别观察梗死中心区、梗死周边区脑组织（海马ＣＡＩ 区、ＣＡ３区），前述区域神经细胞和血管内皮细胞（每个观 察区选择具有代表性标本观察结果并记录）。 １．５免疫组化法检测缺血侧大脑海马ＣＡｌ区ｉＮＯＳ的表达 造模后２４ ｈ，大鼠以１０％水合氯醛３ ｍＩ．／ｋｓ腹腔注射麻醉 后固定，颈正中偏右切口，暴露右颈总动脉，用Ｎｓ约５０ ｍＬ灌注，然后用４℃４％多聚甲醛液约５０ ｍＬ灌注固定，
ＩＩｌＯｌ［℃ｏｂｖｉｏｕｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ＰＣ
Ｃａｌｌ
ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｍｅＵｉｔｕｓ
ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＞０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ
ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｌｏｗ—ｄｏｓｅ ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．０５），ｂｕｔ ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｒｅｄｕｃｅ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｐｒｏｃｙａｎｉｄｉｎ ｏｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｉＮＯＳ ｉｎ ｔｙｐｅ ２ ｄｉａｂｅｔｅｓ
ｆｏｒ２４ｈ，ｗｅ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ
ａｎｄ ｅｏｓｉｎ（ＨＥ）
ｗ鹞ｅ∞ａｍｉｎｅｄ ｂｙ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ＳＡＢＣ ｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ
Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ
ｓｈａｍ—ｏｐｅｒａｔｉｏｎ
ｍｅｄｉｕｍ—
ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｉＮＯＳ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ ｏｆ ｍｏｄｄ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ
连续１周，于大脑中动脉闭塞（ＭＣＡＯ）术前１ ｈ再灌胃１ 次。Ｐｃ低剂量、中剂量、高剂量组分别以Ｐｃ粉剂５０、
１００、２００
ｍｓ／ｋｓ，每次蒸馏水配制成悬浮液灌胃，其他各
ｍＬ／ｋｇ。
组以相同的给药方法给予生理盐水（ＮＳ）１
１．３型糖尿病大鼠局灶性脑缺血模型的制备第一步取ＳＤ 大鼠每笼５只，常规饲料适应性饲养１周，然后喂饲高脂 高糖饲料（１０％猪油，２．５％胆固醇，１．０％猪胆酸盐， ２０．Ｏ％蔗糖，６６．５％常规饲料＂１）。４周后，诱导出高胰岛 素血症和胰岛素抵抗，按２５ｍｇ／ｋｇ体重的剂量一次性尾静 脉注射ＳＴＺ溶液（临用前以ｏ．１
基金项目：辽宁省教育厅高等学校科学研究项目。编号：０５Ｌ１３７；锦州市科学技术计划项目，编号：０５Ａ１Ｅ３１。 作者简介：宋晓伟（１９８１），女。山东省微山人，住院医师，在读硕士研究生。主要研究方向为脑血管疾病的基础与临床研究。 通讯作者：闶连秋（１９６３），男，辽宁省西丰人，教授，硕士学位，主要研究方向为脑血管疾病的基础与临床研究。
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｌｖｅ
ｒａｔｓ
Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ
ｃｏｎｔｅｎｔ
ｏｆ ｉｎｄｕｃｅｄ ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ ｓｙｎｔｈａｓｅ ｉｎ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ ｔｉｓｓｕｅ ｏｆ ｔｙｐｅ ２ ｄｉａｂｅｔｅｓ ｍｅｌｌｉｔｕｓ Ｔｈｉｒｔｙ ＳＤ
ｒａｔｓ ｗｅｒｅ
ｗｉｔｈ ｆｏｃａｌ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ ａｎｄ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ
２４
２结
２．１
果
大鼠海马ＣＡｌ区脑组织病理形态学ＨＥ染色（×
２００）光学显微镜下观察，除假手术组（图１）外各组均可 见正常神经元和损伤神经元，见正常神经元核圆形，边界 及核仁清楚；损伤神经元胞核肿大，偏位，核仁消失，胞 浆着色浅、苍白或核浓缩、深染，细胞呈三角形缺血性坏 死变化。损伤神经元上述特点在模型组表现得更明显（图 ２）；Ｐｃ组（图３、４、５）能不同程度的改善神经细胞的核 深染、核固缩程度，减少细胞及间质的水肿，使胞膜清楚， 形态正常，核仁清晰可见的神经细胞数目增多。 ２．２大鼠海马组织ＣＡｌ区ｉＮＯＳ表达与假手术组相比， 模型组ｉＮＯＳ免疫阳性细胞出现高表达，ｉＮＯＳ阳性细胞形态 呈椭圆形、三角形、胞质染色均匀，有显著性差异（Ｐ＜ ０．０１）；与模型组相比，原花青素各组均降低ｉＮＯＳ免疫阳 性细胞的数目（Ｐ＜０．０１），其中中、高剂量组较低剂量组 效果更明显（Ｐ＜０．０５），且两组间无明显差异（Ｐ＞ ０．０５），假手术组基本不表达。结果见表１。
Ｍｅｄｉｃａｌ Ｌ）２（０３． ｇｎｉｎｏａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ。 ｒｐ Ｊ辽孝压擘院学报？００９Ａ
Ｊ
１３１
２型糖尿病局灶性脑缺血大鼠海马组织ｉＮＯＳ 的表达及原花青素的干预
宋晓伟，阂连秋
（辽宁医学院附属第一医院神经内科，辽宁锦州１２１００１）
摘要：目的探讨２型糖尿病局灶性脑缺血大鼠脑组织中诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）含量的变化及原花青素（ｐｒｏ－ ｃｙａｎｉｄｉｎ，ＰＣ）对其表迭的影响。方法将３０例大鼠随机分为假手术组、２型糖尿病单纯脑缺血组及Ｐｃ低剂量组（５０ ｍ∥ ｌ【ｇ）、中剂量组（１００ ｍｇ／ｋｇ）及高剂量组（２００ ｍｓ／ｋＳ），于脑缺血后２４
Ｎ０３是催化Ｌ一精氨酸生成内源性ＮＯ的限速酶，根据
其存在部位及作用机制不同，分为内皮型（ｅＮＯＳ）、神经
参考文献：
［１】
张小郁，高明堂，李文广。等．葡萄耔提取物体外抗脂质过 氧化作用的研究［Ｊ］．自由基生命科学进展，１９９９，７ （４）：ｌｔ６—１２０．
元型（ｎＮＯＳ）和诱导型（ｉＮ０３）。ＮＯ在脑缺血性损伤的发
［２］Ｐｉａｏ
ＣＳ，Ｋｉｌｎ ＪＢ，Ｈａｒｔ ＰＬ，ｅｔ ａ１．Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ０ｆ ｔｈｅ ｐ３８
ＭＡＰＫ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ＳＢ２０３５８０ ａｆｆｏｎｔｓ
ｂｒａｉｎ脚ｔｉｏｎ
生和发展过程中有双重作用。在脑缺血早期，ｅＮＯＳ介导生 成的ＮＯ通过扩张血管改善缺血区的血液供应，具有短时 的保护作用，随着ＮＯ的大量产生，由ｎＮＯＳ和ｉＮＯＳ介导 的神经毒性效应很快占优势，分别在脑缺血进展期和晚期 介导神经毒性作用，造成神经元的损伤…。 Ｐｃ具有抗氧化、降低毛细血管通透性和对心血管具有
ＷａＳ
ｏｆ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｈｉ曲一ｄｏｓｅ ｇｒｏｕｐｓ’ｅｆｆｅｃｔｓ
ｔｗｏ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ
ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ＰＣ ｇｒｏｕｐｓ ｐｏｓｓｅｓｓｅｄ ｌｏｗｅｒ ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｅｌｌｓ ｏｆ
ｉＮＯＳ．ｎｅ
ｄｏｓｅ ａｎｄ
表ｌ原花青素对２型糖尿病局灶性脑缺血大鼠缺血侧海马ＣＡｌ区ｉＮＯＳ平均阳性细胞数的影响（ｉ：ｋＳ靠＝６）
与单纯缺血组相比，－：Ｐ＜ｏ．０１；与模型组相比，ｂ：Ｐ＜Ｏ．０１；与低剂量组相比，ｃ：Ｐ＜Ｏ．０５
３讨
论
多种药理作用¨－ｔｏｊ。Ｐｃ抗氧化活性使其可抑制诸如组织 胺、５羟色胺、前列腺素及白三烯等炎症因子的合成和释 放。在本实验中Ｐｃ组能够明显减少２型糖尿病局灶性脑缺
Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｐｒｏｃｙａｎｉｄｉｎ
ｏｎ
Ｍｅｌｌｉｔｕｓ
Ｒａｔｓ ｗｉｔｈ Ｆｏｃａｌ Ｃｅｒｅｂｒａｌ Ｉｓｃｈｅｍｉａ ＳＯＮＧ Ｘｉａｏｗｅｉ，ＭＩＮ Ｌｉａｎｑｉｕ
（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ
ｏｆ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ
Ａｆｆｄｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｌｉａｏｎｉｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉｎｚｈｏｕ １２１００１ Ｃｈｉｎａ）
ｃｅｒｅｂｒａｌ ａｒｔｅｒｙ ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ，
（辽）。实验动物级别：普通级。 １．２实验分组３６只大鼠随机分为假手术组、模型组（２ 型糖尿病大鼠单纯缺血组）、３个ＰＣ剂量组，每组６只大 鼠。Ｐｃ组在建立２型糖尿病模型后给予灌胃，１ ２ｋ／２４
ｈ，
ＭＣＡＯ）的制作０３平均阳性细胞表达数（Ｐ＜０．０１），
减轻神经元损伤，尤以中、高剂量组作用显著（Ｐ＜０．０１）， 推测Ｐｃ神经保护作用的机制可能是通过抗氧自由基作用抑 制炎症反应，降低ｉＮＯＳ含量，减少神经毒性ＮＯ的产生， 进一步发挥抗自由基作用，从而起到神经保护作用。 国内外关于ＰＣ的神经保护作用研究较少，尚未发现有 Ｐｃ对２型糖尿病局灶性脑缺血后海马组织ｉＮ０３表达影响 的相关报道。本研究从此角度研究Ｐｃ的保护作用，从而对 临床应用ＰＣ提供了证据。 （此文图１—５见附页７）
ｍｏｌ／Ｌ
１材料与方法
１．１实验动物选用健康雄性ｓＤ大鼠３６只，体重１８０—
２４０
ｐＨ值４．２的枸橼酸
ｇ（辽宁医学院实验动物中心提供）。许可证号：ＳＣＸＫ
一枸橼酸钠缓冲液配制成ｏ．５％的溶液）。７２ ｈ后取尾血测 血糖，超过１６．７ ｍｍｏｉ／Ｌ为２型糖尿病大鼠ｐｏ。第二步选 取２型糖尿病ｓＤ大鼠造模成功后２周后按照文献卜１进行进 行大鼠局灶性脑缺血模型（ｍｉｄｄｌｅ
ｗｉｔｈ ｆｏｃａｌ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ． ｍｅｌｌｌｔｕｓ；ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ；ｉＮＯＳ
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｐｒｏｃｙａｎｉｄｉｎ；ｄｉａｂｅｔｅｓ
原花青素（ｐｒｏｃｙａｎｉｄｉｎ，ＰＣ）是一类植物和食品中广泛 存在的多酚化合物的总称，由不同数量的儿茶素和表儿茶 素缩和而成，其含大量活性酚羟基使其具有很强的抗氧化 及清除各种活性氧自由基的能力…。本文进一步探讨了其 对２型糖尿病ｓＤ大鼠局灶性脑缺血模型海马组织中诱导型 一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）高表达的抑制作用，为其临床应用 提供理论依据。
万 方数据
１３２
辽宁医学院学报２００９年４月，３０（２） １．６统计学处理实验数据用均数±标准差（ｉ：ｋＳ）表示， 采用ＳＰＳＳｌ６．０统计软件进行单因素方差分析和ｑ检验等统 计分析。 ｍｇ）腹腔注射麻醉，打开颈部，暴露颈右
醒时出现右侧前肢内收屈曲或爬行时向右侧划圈或倾倒为 造模成功。 １．４脑组织病理形态学采用ＨＥ染色大鼠以１０％水合氯 醛（ｏ．３
