食品微生物检验
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食品微生物检验名词解释
食品微生物检验是指通过检测食品中存在的微生物种类、数量、活性等指标,来判断食品是否受到微生物污染,并保证食品安全。
在食品微生物检验中,常用的名词包括:
1. 细菌:指能够在食品上生长、繁殖的微生物,如沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。
2. 病毒:指能够在食品中生长、繁殖的微生物,如流感病毒、艾滋病病毒等。
3. 真菌:指能够在食品上生长、繁殖的微生物,如霉菌、酵母菌等。
4. 寄生虫:指能够在食品中生长、繁殖的微生物,如阿米巴原虫、肠道蠕虫等。
5. 酶:指能够参与微生物代谢过程的微生物,如乳酸杆菌、嗜酸乳杆菌等。
6. 指示剂:指用于指示微生物生长和活性的化学物质,如葡萄糖、乳糖、氨基酸等。
7. 培养基:指用于培养微生物的混合物,如蛋白质培养基、淀粉培养基等。
8. 采样:指从食品中提取样品的过程,常用的采样方法包括口腔采样、鼻腔采样、皮肤采样等。
9. 检验方法:指用于检测食品微生物的方法,包括分子生物学、免疫学、光学显微镜等。
10. 检验结果:指食品微生物检验过程中获取的检测结果,包括细菌总数、大肠杆菌计数、沙门氏菌鉴定等。
食品微生物检验对于保障食品安全至关重要。
在进行食品微生物检验时,需要严格遵守相关规定和标准,保证检测结果的准确性和可靠性。
同时,也需要不断
提高检验水平和技术,以应对不断变化的食品安全形势。
食品微生物检验标准食品微生物检验是食品安全监管的重要环节,通过对食品中微生物的检测,可以及时发现和控制食品中可能存在的微生物污染,保障食品的安全和卫生。
食品微生物检验标准是指对食品中微生物指标的要求和检测方法的规定,为食品生产企业和监管部门提供了操作指南和依据。
首先,食品微生物检验标准包括了对食品中常见微生物指标的要求,如大肠菌群、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等。
这些微生物指标的存在与否直接关系到食品是否受到污染,对人体健康是否构成危害。
因此,食品微生物检验标准对这些指标的限定值和检测方法都有详细的规定,以确保食品的安全性。
其次,食品微生物检验标准还包括了对检验方法的规定。
不同的微生物指标需要采用不同的检验方法,这些方法包括了培养基法、PCR法、荧光法等。
对于不同的食品样品,也有相应的检验方法要求,比如液体食品和固体食品的检验方法可能会有所不同。
食品微生物检验标准对这些检验方法的操作步骤、仪器设备、质量控制等都有详细规定,以保证检验结果的准确性和可靠性。
此外,食品微生物检验标准还对样品的采集、保存和运输等环节进行了规定。
样品的采集方法直接关系到检验结果的准确性,而样品的保存和运输则关系到样品是否受到污染或者变质。
因此,食品微生物检验标准对这些环节也有严格的要求,以确保样品的完整性和真实性。
总的来说,食品微生物检验标准是食品安全监管的重要依据,它的制定和执行对于保障食品安全和卫生具有重要意义。
食品生产企业应当严格按照食品微生物检验标准的要求进行生产和检验,监管部门也应当加强对食品微生物检验标准的执行和监督,共同维护食品安全和公众健康。
在实际操作中,食品生产企业应当建立健全的食品微生物检验体系,配备专业的检验人员和设备,严格按照食品微生物检验标准的要求进行检验,并及时采取控制措施,确保产品质量和安全。
监管部门则应当加强对食品微生物检验标准的宣传和培训,提高食品生产企业和从业人员的法规意识和技术水平,共同维护食品安全。
食品微生物检验岗位工作内容食品微生物检验岗位是食品行业中非常重要的一环,主要负责对食品样品进行微生物检验,确保食品的卫生安全。
本文将从食品微生物检验的工作内容、意义及所需技能等方面进行详细介绍。
一、工作内容1. 样品处理:食品微生物检验岗位的首要任务是对食品样品进行处理。
这包括样品的接收、登记、分装等工作。
在样品接收过程中,要仔细核对样品的信息,确保样品的准确性和完整性。
接收完样品后,需按照规定对样品进行登记,记录样品的编号、来源、数量等信息。
接下来,将样品进行分装,确保每个样品都能被准确地检验。
2. 微生物检测方法选择:针对不同的食品样品,食品微生物检验岗位需要选择合适的检测方法。
常见的微生物检测方法包括培养法、快速检测法、PCR法等。
根据样品的特点和检测要求,选择合适的方法进行微生物检测。
3. 样品的制备和培养:在进行微生物检测之前,需要对样品进行制备和培养。
比如,对于液态食品,需进行预处理,使微生物更易于检测。
对于固态食品,需要进行样品的悬浮液制备,以便于后续的培养和检测。
4. 微生物培养和计数:微生物检验的关键环节是培养和计数。
将样品进行培养,使微生物在适宜的环境条件下进行繁殖。
培养时间和培养温度等条件需要根据具体微生物种类进行调整。
培养完成后,需要进行微生物计数,以确定样品中微生物的数量。
5. 结果判定和报告编写:根据微生物检测结果,进行结果判定。
如果样品中微生物数量超过卫生标准规定的限值,即为不合格。
合格的样品可以进行下一步的处理和销售。
检测结果需要进行报告编写,以便上级部门和其他相关人员参考。
二、意义和重要性食品微生物检验的工作内容具有重要的意义和价值。
首先,食品微生物检验能够对食品质量进行判定,保障食品的卫生安全。
微生物检验能够检测食品中是否存在致病菌、霉菌等有害微生物,及时发现和排除食品安全隐患。
食品微生物检验对于食品行业的合规性和法律法规的遵守具有重要意义。
根据国家相关法律法规,食品企业必须对食品样品进行微生物检验,以确保食品质量符合标准。
引言:食品微生物检验技术是食品安全保障的重要环节之一。
微生物在食品中的存在可以引起食源性疾病和质量问题。
因此,在食品生产和加工过程中进行微生物检验是非常重要的,可以确保食品的安全和质量。
本文将为您介绍食品微生物检验技术的相关概念、应用和方法。
概述:食品微生物检验技术包括食品样品的微生物分离、鉴定和计数。
主要目的是检测食品中存在的微生物类型和数量,评估食品的健康风险和质量问题。
食品微生物检验技术广泛应用于食品加工厂、餐饮业、农产品贸易和监管部门等领域。
正文内容:一、微生物检验技术的分类1.定性检验技术:用于确定食品样品中是否存在特定微生物,如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。
2.定量检验技术:用于测定食品样品中微生物的数量,通常使用平板计数法、膜过滤法等常见方法。
3.毒性检验技术:用于检测食品中的毒素产生菌和毒素,例如肉毒杆菌等。
二、微生物检验技术的应用领域1.食品生产过程监测:检验食品生产过程中的原材料、中间产品和最终产品,确保食品符合卫生标准。
2.食品安全监测:对市售食品进行抽检,检测其中的微生物污染情况,保障食品安全。
3.食品质量评估:通过微生物检验,评估食品的口感、卫生状况和营养价值等质量指标。
4.食品卫生监管:监督和检验餐饮企业、食品加工厂、超市等食品销售场所的卫生状况,保障公众健康。
5.食品出口检验:对出口食品进行微生物检验,确保符合国际标准,避免贸易纠纷。
三、微生物检验技术的方法1.平板计数法:将食品样品均匀布于富养液琼脂培养基上,通过培养和计数菌落形成单位数量,从而得到食品中微生物的数量。
2.膜过滤法:将食品样品过滤到成膜过滤器上,然后将膜培养于琼脂平板上进行培养和计数。
3.酶联免疫吸附试验(ELISA):通过特定抗体与细菌或其产生的毒素结合,形成特定反应,用于检测食品中的目标微生物或毒素。
4.PCR法:利用聚合酶链反应技术,直接在食品样品中扩增目标微生物的特定基因序列,从而进行检测和鉴定。
食品微生物检验标准食品微生物检验是指对食品中的微生物进行检测和分析,以评估食品的卫生安全性和质量。
微生物是一类微小的生物体,包括细菌、真菌、酵母菌和病毒等,它们对食品的卫生安全和品质都有着重要的影响。
因此,建立和执行食品微生物检验标准对于保障食品安全和质量至关重要。
食品微生物检验标准的制定应当基于科学依据和实际情况,旨在保障食品的卫生安全和品质。
一般来说,食品微生物检验标准包括对细菌总数、大肠菌群、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、霉菌和酵母菌等微生物的检测要求和限量标准。
这些标准可以根据不同食品的特点和加工方式进行调整,以确保食品的卫生安全和品质。
细菌总数是食品微生物检验中的重要指标之一,它反映了食品中细菌的总体水平。
细菌总数的高低直接影响着食品的新鲜度和卫生安全性。
通常情况下,食品微生物检验标准规定了不同食品中细菌总数的限量标准,以确保食品的卫生安全和品质。
大肠菌群是一类与粪便有关的细菌,其存在可能会导致食品中的致病菌污染。
因此,食品微生物检验标准一般会对大肠菌群的检测进行严格要求,以避免食品的致病菌污染,保障消费者的健康安全。
沙门氏菌是一种常见的致病菌,其存在可能导致食品中的食源性疾病。
因此,食品微生物检验标准通常会对食品中的沙门氏菌进行检测,并规定了其限量标准,以确保食品的卫生安全。
金黄色葡萄球菌是一种常见的食品中毒致病菌,其存在可能导致食品中毒事件的发生。
因此,食品微生物检验标准一般会对金黄色葡萄球菌的检测进行严格要求,以保障食品的卫生安全。
霉菌和酵母菌是一类常见的食品变质菌,其存在可能导致食品的变质和腐败。
因此,食品微生物检验标准一般会对霉菌和酵母菌的检测进行严格要求,以确保食品的新鲜度和品质。
总之,食品微生物检验标准的制定和执行对于保障食品的卫生安全和品质至关重要。
只有严格执行食品微生物检验标准,才能有效防止食品中微生物污染所带来的风险,保障消费者的健康安全。
希望各级食品监管部门和食品生产企业能够高度重视食品微生物检验标准,加强食品微生物检验工作,共同维护食品的卫生安全和品质。
食品微生物检验操作流程一、样品采集。
咱要做微生物检验,第一步当然是把样品弄到手啦。
这采集样品可是有讲究的。
比如说采集食品的时候,得注意代表性。
不能光挑看起来好的或者坏的,要随机从不同部位采集。
像一整箱苹果,那就得从上面、下面、中间,各个角落都挑几个。
如果是液体的食品,像牛奶之类的,得充分混匀了再取样。
而且采集的工具也要干净无菌的哦,不然就会影响检验结果啦。
要是用个脏兮兮的工具,那结果肯定不准,就像穿了双沾满泥巴的鞋子去参加舞会,格格不入还把场地搞脏啦。
二、样品运输和保存。
采好样品之后,怎么把它送到实验室也是个问题呢。
要尽快送过去,就像送个紧急的包裹一样。
如果不能马上检验,那就要好好保存。
有些微生物在不同的温度和环境下会死掉或者疯狂生长,这可不行。
比如一些需要低温保存的样品,就得赶紧放在冰盒里。
要是没保存好,就好比你精心照顾的小宠物,因为你没给它合适的居住环境,它就生病了,那咱这个检验也就白费功夫了。
三、实验室准备。
到了实验室,那得先把环境准备好。
实验室得干净整洁,各种仪器设备都要先检查检查,看看有没有问题。
比如说显微镜,得保证镜头是干净清晰的,不然就像你戴着一副脏眼镜看东西,模模糊糊啥也看不清。
还有培养箱,温度要调整好,要是温度不对,那些微生物在里面就像住在了一个不舒服的房子里,要么不生长,要么就长得乱七八糟的。
四、样品处理。
样品送到实验室了,可不能直接就检验,得先处理一下。
固体的食品可能要切碎、研磨之类的,把它变成均匀的状态。
这就像把一大块肉切成小块,这样才能让微生物均匀地分布在里面,方便我们检测。
要是处理不好,可能有些微生物就躲在角落里,我们就发现不了它们了。
五、微生物培养。
处理好样品之后,就到了培养微生物的环节啦。
根据不同的微生物种类,我们要选择合适的培养基。
这就像不同的小动物要吃不同的食物一样。
把样品接种到培养基上,然后放在合适的环境下培养。
有的微生物喜欢有氧的环境,那就放在有空气的地方培养;有的微生物喜欢无氧的环境,那就得创造无氧的条件。
食品中的微生物检测方法食品安全一直备受人们关注,食品中的微生物检测方法是确保食品质量和安全的关键。
微生物检测是指通过检测食品中的微生物存在和数量来评估食品是否安全。
本文将介绍几种常见的食品中的微生物检测方法。
一、传统培养方法传统培养方法是最为常见的微生物检测方法之一,它可以直接检测食品中的细菌和真菌等微生物。
这种方法的原理是将食品样品接种于适当的培养基上,通过培养后的菌落形态和数量来判断微生物的存在和数量。
传统培养方法简单易行,但耗时较长,需要数天甚至数周才能得到结果。
二、荧光定量PCR法荧光定量PCR法是一种基于聚合酶链式反应(PCR)原理的微生物检测方法。
它可以快速准确地检测食品中的微生物,例如大肠杆菌、沙门氏菌等致病菌。
该方法通过扩增微生物特定基因的DNA,然后使用荧光染料标记,最后通过荧光信号的强度来定量微生物的存在和数量。
荧光定量PCR法具有高效、高灵敏度和高特异性的优点,适用于快速检测大批量样品。
三、基因芯片技术基因芯片技术是一种高通量的微生物检测方法,它可以同时检测多种微生物种类和数量。
该技术利用芯片上的探针与目标微生物的核酸序列发生特异性反应,然后通过荧光标记来检测微生物的存在和数量。
基因芯片技术具有快速、高通量和高灵敏度的特点,可以在较短时间内检测多个微生物。
四、质谱法质谱法是一种高效的微生物检测方法,它可以通过检测微生物代谢产物或特定标记物来判断微生物的存在和数量。
该方法广泛应用于食品中的致病菌检测,如耐药菌的检测和鉴定。
质谱法具有高灵敏度、高选择性和准确性的优势,可以在非常短的时间内完成微生物检测。
五、免疫层析法免疫层析法是一种简便快速的微生物检测方法,它通过检测微生物的抗原或抗体来判断其存在和数量。
该方法常用于食品中常见的细菌检测,如金黄色葡萄球菌和沙门氏菌等。
免疫层析法操作简单、迅速,不需要复杂的设备,适用于野外和实验室环境。
综上所述,食品中的微生物检测方法多种多样,每种方法都有其特点和适用范围。
食品微生物检验是通过检测食品中的微生物数量和种类,以评估其卫生状况和质量。
微生物检验是确保食品安全的重要手段之一,因为食品中的微生物不仅可能引起腐败,还可能导致食源性疾病。
以下是食品微生物检验的一般步骤和一些常见的检测项目:
一般步骤:
1. 样品采集:从食品样品中取得代表性的样本,确保样本的收集方式和过程不会引入外部微生物。
2. 样品制备:对采集到的样品进行适当的处理和制备,以获得可检测的微生物。
3. 培养:将样品在适当的培养基上进行培养,以促使微生物生长。
4. 计数:利用计数方法,例如表面计数法或液体培养法,来确定样品中微生物的数量。
5. 鉴定:对培养后的微生物进行鉴定,确定它们的种类。
常见的检测项目:
1. 总菌落计数:评估食品中的总微生物数量,常用于评估食品的卫生状况。
2. 大肠菌群检测:大肠菌群是一类与粪便相关的微生物,其检测可以作为食品中病原菌的指标。
3. 霉菌和酵母检测:评估食品中霉菌和酵母的数量,特别是对于易腐食品。
4. 致病菌检测:检测食品中是否存在常见的致病菌,例如沙门氏菌、大肠埃希氏菌等。
5. 菌落形态鉴定:对培养的微生物进行形态学和生理学鉴定,以确定其种类。
6. 抗生素敏感性测试:针对检测到的致病菌,进行抗生素敏感性测试,以评估其对抗生素的敏感性。
食品微生物检验的目标是确保食品的卫生和安全,防止因食用受污染的食品而引发食源性疾病。
检验的具体项目和方法可能因地区、国家和食品种类而异。
在实施检验时,通常需要遵循相关的法规和标准。
食品微生物检验学习本章的意义和内容:掌握光学显微镜的运用方法,掌握细菌染色标本的制造技术。
掌握样品的采集和处置方法。
掌握菌落总数的测定方法与步骤。
掌握大肠菌群的测定方法与步骤。
学会乳糖胆盐发酵管培育基的制备。
掌握革兰氏染色方法。
本章习题内容主要触及:食品微生物检验的范围;食品微生物检验的目的;细菌染色的基本方法和步骤;常用染色方法及染色液;食品微生物学普通检验技术。
一、食品微生物检验的意义食品微生物检验方法为食品监测必不可少的重要组成局部。
(1)它是权衡食品卫生质量的重要目的之一,也是判定被检食品能否食用的迷信依据之一。
(2)经过食品微生物检验,可以判别食品加工环境及食品卫生环境,可以对食品被细菌污染的水平做出正确的评价,为各项卫生管理任务提供迷信依据,提供传染病和人类、植物和食物中毒的防治措施。
(3)食品微生物检验是以贯彻〝预防为主〞的卫生方针,可以有效地防止或许增加食物中毒人畜共患病的发作,保证人民的身体安康;同时,它对提高产质量量,防止经济损失,保证出口等方面具有政治上和经济上的重要意义。
二、食品微生物检验的范围食品微生物检验的范围包括以下几点:(1)消费环境的检验:车间用水、空气、空中、墙壁等。
(2)原辅料检验:包括食用植物、谷物、添加剂等一切原辅资料。
(3)食品加工、贮藏、销售诸环节的检验:包括食品从业人员的卫生状况检验、加工工具、运输车辆、包装资料的检验等。
(4)食品的检验:重要的是对出厂食品、可疑食品及食物中毒食品的检验。
三、食品微生物检验的目的我国卫生部公布的食品微生物目的有菌落总数、大肠菌群和致病菌三项。
(1)菌落总数菌落总数是指食品检样经过处置,在一定条件下培育后所得1g或1mL检样中所含细菌菌落的总数。
(2)大肠菌群大肠菌群是旅居于人及温血植物肠道内的肠居菌,它随着的大便排出体外。
食品中假设大肠菌群数越多,说明食品受粪便污染的水平越大。
(3)致病菌致病菌即可以惹起人们发病的细菌。
对不同的食品和不同的场所,应该选择一定的参考菌群停止检验。
(4)霉菌及其毒素我国还没有制定出霉菌的详细目的,鉴于有很多霉菌可以发生毒素,惹起疾病,故应该对产毒霉菌停止检验。
(5)其它目的微生物目的还应包括病毒,肝炎病毒、猪瘟病毒、鸡新城疫病毒、马立克氏病毒、口蹄疫病毒,狂犬病病毒,猪水泡病毒等;另外,从食品检验的角度思索,寄生虫也被很多学者列为微生物检验的目的。
四、染色细菌标本反省法微生物中细菌、致病菌是很小的生物体,必需经过染色的方法,在显微镜下才干看得清楚,并且还可以经过染色的方法鉴别革兰氏染色特性,以及能否长有鞭毛、周毛、荚膜和芽孢等。
1、染料细菌染色用的染料多为有色泽的无机酸或许无机碱,由于其溶解度有限,普通运用其盐类。
可分为以下四类。
(一)酸性染料染色离子带阴电,因此,又叫做阴离子染料。
它能与带阳电的物质结合,使之着色。
降低菌液的pH而使细菌带阳电时,就可用酸性染料染色。
如伊红、刚果红等。
(二)碱性染料染料离子带正电,也叫做阳离子染料。
它能与带负电的物质结合。
细菌普通带负电,所以细菌染色所用的染料,常用碱性染料,如美蓝、碱性复红等。
一局部碱性染料,如碱性复红、美蓝等具有与氢结合的才干,结合后双键饱和,色基不再存在。
此时,化合韧杖恢复,成为无色的化合物,再经氧化即可显色。
(三)复合染料碱性染料与酸性染料的结合物,叫做复合染料,或叫中性染料。
例如wright染料中的伊红美蓝,Giemsa染料中的伊红天青等。
(四)单纯染料被染杖柒物生成盐类。
它的染色才干,视其能否溶于被染物而言。
它们大少数属于偶氮化合物,具有脂溶性而不溶于水,如苏丹类(Sudans)染料。
2、影响染色的要素不同细菌其细胞壁酌结构、细胞膜的通透性,膜孔的大小等有一定的羌别,用染料对其染色时.能够会有不同的结果。
此外,培育基的组成、菌龄、染色液中电解质含虽和pH、温度、药物等,都能够影响细的染色状况。
3、细菌染色的基本方法和步骤3.1基本方法3.1.1单染色法单染色法是用一种染料染色的方法。
例如用美蓝或稀释击炭酸复红等,使各种细菌染成间—种颜色。
故此法只显小细菌的形状和大小,对细菌鉴别价值较小。
在染色进程中常参与媒染剂如碘、石炭酸、明矾或许加热的方法,以添加染料对细菌的亲和力。
3.1.2复染色法复染色法是用两种以上染料染色的方法,此法除显示细菌形状大小外,不同类型的细菌可以染上不同的颜色,从而具合鉴别细菌种类的价值,因此也称鉴别染色法。
用复染色法染色时,所用的脱色剂如酒精、丙酮或酸类,用于反省染料和细菌结合的结实水平,最后用与初染色剂颜色有鲜明对比的染料停止复染,以便停止观察,区别细菌种类。
常用的复染色法有革兰氏染色法和抗酸染色。
3.1.3细菌持殊结构的染色法反省细菌的特殊结构,如鞭毛、英膜、异染颗粒等对鉴别细菌很有协助。
细菌特殊结构染色法不只能使特殊的结构着色,还可使特殊结构染成与菌体不同的颜色,有利于观察。
在细菌反省任务中,除异染颗粒染色法较常运用外,其他持殊结构染色法操作费时,且可用其他简易方法替代,故在日常检验任务中较少运用。
3.1.4荧光染色法荧光染料,如金胶等也可对细菌停止染色。
此类染料溶于水中,在紫外线照射下能激起出荧光,分为酸性染料及碱性染料两种。
细菌用荧光染料染色后在荧光显微镜下反省,可在黑的背景中观察到细菌收回明亮的荧光。
用荧光染色法反省细菌可加快反省速度和提高阳性率。
用荧光光源和普通光学显微镜配合起来,即可替代荧光显微镜停止荧光染色法反省。
3.2细菌染色的基本步骤涂片-枯燥一固定一染色-媒染一脱色-复染-镜检单染法不需求媒染一脱色-复染步骤。
染色过的细菌涂片标本在镜检时普通运用油浸镜。
假设需保管标本,可在镜检后,用拭镜纸沾二甲苯擦掉镜油。
临时保管在标本中央滴加一滴加拿大树胶,盖上一洁净的盖玻片,待其自然枯燥后,保管于玻片标本盒中。
4、常用染色方法及染色液4.1美蓝染色法4.1.1吕氏碱性美蓝染色液美蓝 0.3g95%乙醇 30mL0.01%氢氧化钾溶液 100mL将美蓝溶解于乙醇中,然后于氢氧化钾溶液混合。
4.1.2染色法将涂片在火焰上固定,待冷却后滴加染液,染1min~3min,水洗,待干,镜检。
4.1.3结果菌体呈蓝色。
4.2 革兰氏染色法4.2.1染色液(1) 结晶紫染色液结晶紫 1g95%乙醇 20mL1%草酸铵水溶液 80mL将结晶紫溶解于乙醇中,然后与草酸铵溶液混合。
(2)革兰氏碘液碘 1g碘化钾 2g蒸馏水 300mL将碘与碘化钾先停止混合,参与蒸馏水少许,充沛振摇,待完全溶解后,在加蒸馏水至300mL。
(3)沙黄复染法沙黄 0.25g95%乙醇 10mL蒸馏水 90mL将沙黄溶解于乙醇中,然后用蒸馏水稀释。
4.2.2染色法(1)将涂片在火焰上固定,滴加结晶紫染色液,染1min,水洗。
(2)滴加革兰氏碘液,作用1min,水洗。
(3)滴加95%乙醇脱色,约30s;或将乙醇滴满整个涂片,立刻倾去,再用乙醇滴满整个涂片,脱色10s。
(4)水洗,滴加复染液,复染1min,水洗,待干,镜检。
4.2.3结果革兰氏阳性菌呈紫色,革兰氏阴性菌呈白色。
注:亦可用1:10稀释石炭酸复红染色液作复染液,复染时间仅需10s。
4.3耐酸性染色法〔萎—倪二氏法〕4.3.1染色液(1)石炭酸品红染色液碱性品红 0.3g95%乙醇 10mL5%苯酚水溶液 90mL将品红溶解于乙醇中,然后与苯酚溶液混合。
(2)3%盐酸-乙醇浓烟酸 3mL95%乙醇 97mL(3)复染液吕氏碱性美蓝染色液4.3.2染色法(1)将涂片在火焰上固定,滴加石炭酸品红染色液,冉冉加热至有蒸汽出现,但切不可使沸腾。
染液因蒸发增加时,应随时添加。
染5min,倾去染液,水洗。
(2)滴加盐酸-乙醇脱色,直至无白色零落为止,〔所需时间视涂片厚薄而定,普通为1min~3min〕,水洗。
(3)加吕氏碱性美蓝染色液,复染30min,水洗,待干,镜检。
4.3.3结果耐酸性细菌呈白色,其他细菌、细胞等物质呈蓝色。
4.4柯氏染色法4.4.1染色液0.5%沙黄液0.5%孔雀绿液4.4.2染色法(1)将涂片在火焰上固定,滴加0.5%沙黄液,并加热至出现气泡,约2min~3min,水洗。
(2)滴加0.5%孔雀绿液,复染40s~50s,水洗,待干,镜检4.4.3结果布氏杆菌呈白色,其他细菌及细胞呈绿色4.5奥尔特氏荚膜染色法4.5.1染色液沙黄 3g蒸馏水 100mL用乳钵研磨溶解4.5.2染色法将涂片在火焰上固定,滴加染色液,并加热至发生蒸汽后,继续染3min,水洗,待干,镜检。
4.5.3结果炭疽芽孢杆菌菌体呈赤褐色,荚膜呈黄色。
4.6瑞氏染色法4.6.1染色液瑞氏色素 0.1g甲醇 60mL用乳钵研磨溶解4.6.2染色法(1)待涂片自然枯燥后,滴加染色液,固定1min。
(2)参与等量蒸馏水〔pH6.5〕,染色3min~5min。
(3)用蒸馏水冲洗,待干,镜检。
4.7鞭毛染色法4.7.1染色液的配制(1)甲液称丹宁酸5g、氯化高铁〔FeCl3〕1.5g,溶于100mL蒸馏水中,待溶解后参与1%的氢氧化纳溶液1mL和15%的甲醛溶液2mL。
(2)乙液称2g硝酸银溶于100mL蒸馏水中。
在90mL乙液中滴加浓氢氧化铵溶液,到出现沉淀后,继续滴加使其变为廓清,然后用其他10mL乙液小心滴加至廓清液中,至出现细微雾状为止〔此为关键性操作,应特别小心〕。
滴加氢氧化铵和用剩余乙液回滴时,要边滴边充沛摇荡,染液当天配,当天运用,2d~3d后基本有效。
4.7.2染色法在风干的载玻片上滴加甲液,4min~6min后,用蒸馏水悄然冲净,再加乙液,渐渐加热至冒汽,维持约半分钟〔加热时留意勿出现枯燥面〕,在菌体多的部位可呈深褐色到黑色,中止加热,用水冲净,干后镜检。
菌体及鞭毛为深褐色到黑色。
五、食品微生物学普通检验技术1、各类食品微生物检样样品的采集与制备实例1.1肉与肉制品样品的采集与制备1.1.1样品的采取(1)生肉及脏器检样如是屠宰场后的畜肉,可于开腔后,用无菌刀采取两腿内侧肌肉各50g〔或劈半后采取两侧背最长肌肉各50g〕;如是冷藏或销售的生肉,可用无菌刀取腿肉或其他部位的肌肉100g。
检样采取后放入无菌容器内,立刻送检;如条件不容许时,最好不超越3h。
送检时应留意冷藏,不得参与任何防腐剂。
检样送往化验室应立刻检验或放置冰箱暂存。
(2)禽类〔包括家禽和野禽〕鲜、冻家禽采取整只,放无菌容器内;带毛野禽可放清洁容器内,立刻送检,以下处置要求同上述生肉。
(3)各类熟肉制品包括酱卤肉、肴肉、方圆腿、熟灌肠、熏烤肉、肉松、肉脯、肉干等,普通采取200g,熟禽采取整只,均放无菌容器内,立刻送检,以下处置要求同上述生肉。
(4)腊肠、香肚等生灌肠采取整根、整只,小型的可采数根、数只,其总量不少于250g。