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Smac、XIAP与细胞凋亡
孟令国; 张祥贵
【期刊名称】《《医学信息》》
【年(卷),期】2011(024)005
【摘要】细胞凋亡是由基因控制的细胞自主有序的死亡。
其过程涉及基因的激活、表达和调控等。
Smac是一种促凋亡因子，能与凋亡抑制蛋白家族中的XIAP相互作用，共同参与凋亡的调控。
本文就Smac和XIAP在细胞凋亡中的作用作一简要综述。
【总页数】2页(P1416-1417)
【作者】孟令国; 张祥贵
【作者单位】广东省珠海市斗门区遵义医学院第五附属（珠海）医院肾内科广东
珠海519100
【正文语种】中文
【中图分类】R735.7
【相关文献】
1.铅对发育期大鼠海马细胞凋亡的诱导和XIAP、Smac基因表达的影响 [J], 韩岱;霍霞;徐锡金;张玉琴;郑良楷;李燕;顾成武;陈刚建;陈松建;刘俊晓
2.苦参碱调节Caspase-3、Smac及XIAP蛋白表达对肿瘤细胞凋亡的诱导作用[J], 李国慧;闫红;黄晶;刘雪超;尹逸丛
3.Smac、XIAP与细胞凋亡 [J], 孟令国; 张祥贵
4.miR-24对过氧化氢诱导的HLE-B3细胞凋亡的影响及其与线粒体
Smac/Diablo-XIAP-caspase-9/3凋亡途径的关系 [J], 闫利霞;黄晓;张鑫;郑广瑛5.扇贝多肽经Smac-XIAP通路抑制UVB诱导HaCaT细胞凋亡的作用 [J], 张兰兰;苏爱;刘颖;孙谧;王春波;杜卫
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蛋白激酶C在大鼠重症急性胰腺炎中的表达/h1 ----本站首页免费课件免费试题整册教案教育资讯计划总结英语角幼儿教育文书写作海量教案免费论文网站地图设为首页收藏本站语文科数学科英语科政治科物理科化学科地理科历史科生物科中考备战高考备战高考试题中考试题教学论文作文园地教学论文经济论文理工论文管理论文法律论文行政论文艺术论文医学论文文史论文农科论文英语论文课程改革教育法规教育管理家长频道您现在的位置：3edu教育网免费论文医学论文基础医学论文正文3edu教育网,百万资源,完全免费,无需注册,天天更新！蛋白激酶C在大鼠重症急性胰腺炎中的表达【摘要】目的: 探讨蛋白激酶C(PKC)家族成员PKCα和PKCδ在重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺及肺脏中的动态表达情况和组织病理改变的关系. 方法: 胰胆管逆行注射牛黄胆酸钠制成大鼠SAP模型,观察胰腺及肺脏病理学变化,采用免疫组织化学方法分别检测PKCα,PKCδ在SAP大鼠胰腺和肺脏中的表达情况,并进行对比分析. 采用逆转录多聚酶链反应(RT PCR)检测96只大鼠胰腺组织中PKC mRNA的表达情况. 结果: 建模后1,6,12和24 h假手术(SO)组胰腺中PKCα表达分别为0.70±0.04,0.71±0.05,0.75±0.04和0.71±0.07;SAP 组分别为0.83±0.05, 0.95±0.09, 1.10±0.10和1.08±0.16,两组各时间点之间差异均有统计学意义(P0.01). 轻型急性胰腺炎(MAP)组大鼠建模后胰腺中PKCα表达分别为0.73±0.04, 0.73±0.03, 0.85±0.08和0.84±0.06,与SO组各时间点相比,在12 h和24 h差异具有统计学意义(P0.05),与PKCα相类似,PKCδ的表达在1 h开始增高,12 h达到高峰,且维持时间较长. MAP 组PKCδ在12 h达到高峰,但维持时间较短,24 h时有所减低. 结论: PKCα在SAP的病程发展中起重要作用. 监测PKCα水平可为SAP的早期诊断提供帮助. 【关键词】胰腺炎;信号传导;蛋白激酶C;逆转录聚合酶链反应0引言近年来,重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)的研究多集中在炎症因子通过信号传导引发全身炎性反应综合征(systemic inflammatory response syndrome, SIRS) ,并渐进发展成为多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrame, MODS)上,但对于SAP的早期诊断仍缺乏特异性指标. 已有研究证实蛋白激酶C(protein kinase C, PKC)可调控多种促炎因子(IL1,IL12,TNF和NFΚB 等)的活化,测定血清IL12水平能预测SAP的预后,对其早期诊断具有重要意义. 我们采用免疫组织化学法和RT PCR法测定PKC在SAP中的表达水平,以探讨PKC在SAP中的作用机制,为临床诊治SAP提供依据. 1材料和方法 1.1材料清洁级SD大鼠96只(雌雄各半),体质量220~260 g,(甘肃省中医学院实验动物中心),实验前12 h禁食,自由饮水. 牛黄胆酸钠(美国Sigma公司);一步法总RNA提取试剂Trizol(美国Invitrogen公司);一步法反转录聚合酶链式反应(RT PCR)试剂盒(大连宝生物公司);即用型SABC免疫组化染色试剂盒,兔抗PKCα,鼠抗PKCδ和DAB显色试剂盒(武汉博士德公司). 1.2方法1.2.1实验分组96只SD 大鼠随机分为假手术(sham operation,SO)组、轻型急性胰腺炎(mild acute pancreatitis,MAP)组和SAP组,每组动物32只. 1.2.2模型制作MAP组大鼠术前禁食12 h,自由饮水,戊巴比妥钠30 mg/kg腹腔麻醉,无菌条件下上腹正中切口进腹,于十二指肠内侧见片状分布的胰腺,肝门部胆胰管用无损伤动脉夹夹闭,从胆胰管开口十二指肠系膜缘对侧肠壁穿刺插入导管,导管进入肠腔后对准膨大壶腹中心插入胆胰管约1 cm,用微量泵以0.1 mL/min速度推注20 mL/L牛磺胆酸钠1 mL/kg,推注完毕后无损伤动脉夹夹闭胰胆管壶腹部观察10 min后拔管,去除动脉夹,缝合十二指肠穿刺口并关腹. SAP组用微量泵以0.1 mL/min速度推注50 mL/L牛磺胆酸钠1 mL/kg, 其余步骤同MAP组. SO组开腹仅轻轻翻动胰腺,关腹后皮下注射40 mL/kg生理盐水. 1.2.3取材和评分各组动物在建模后于1,6,12和24 h四个时间点,(各时间点8只动物)以戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,经原切口入腹,无菌条件下取胰腺和肺脏,分别保存于40 g/L甲醛及-80℃冰箱,按文献的方法,由病理医师对大鼠胰腺及肺脏组织在光镜下按水肿、出血、感染和坏死四方面的轻重程度进行盲法病理评分. 1.2.4免疫组织化学染色切片脱蜡至水,pH 6.0的枸橼酸盐缓冲液微波抗原修复,室温下3 g/L H2O2孵育30 min,山羊血清封闭背景,加兔抗PKCα多克隆抗体及鼠抗PKCδ mAb(1∶50) 4℃过夜,滴加二抗37℃孵育1 h,加链酶亲和素生物素过氧化物酶复合物,室温孵育1 h,DAB显色,苏木素复染细胞核,乙醇脱水. 阴性对照以PBS代替一抗.1.2.5RT PCR检测取组织100 mg匀浆后加入1 mL总RNA提取试剂,抽提组织总RNA,紫外分光光度仪测定标本RNA纯度,以甘油醛3磷酸脱氢酶(GAPDH)为内参照扩增PKCα及PKCδ. 所有引物均由上海生物工程公司合成,PKCα引物序列: 上游5′gggatgaaatgcgacacc 3′,下游5′ctctgagacgccgaagga 3′, 退火温度56℃,共循环30次,产物长度300 bp;PKCδ引物序列:上游5′ctgtggcactttgctctg 3′下游5′ttctgggtcacttggttc 3′退火温度54℃,共30个循环,产物长度153 bp;内参照GAPDH引物序列:上游5′tacagatcacgaaagcatagagga 3′下游5′tccattcgttcctgaacagcgaca 3′退火温度54℃,共30个循环,产物长度411 bp;取RT PCR 扩增产物4 μL,加上样缓冲液1 μL,在15 g/L琼脂糖凝胶上电泳,电泳条件为电压100 V, 60 min,凝胶图像分析系统分析,以目的基因与内参照GAPDH产物比值代表该样品PCR产物的相对含量. 统计学处理:采用SPSS11.5统计软件进行数据的统计分析,各组计量资料以x±s表示,组间比较用单因素方差分析,P0.05为差异具有统计学意义. 2结果2.1大鼠胰腺和肺脏组织中PKC阳性细胞的表达SO组中可偶见PKCα和PKCδ阳性细胞,且主要在细胞浆中表达. MAP组PKCα和PKCδ阳性细胞在胰腺和肺泡胞浆及胞膜中均有表达. SAP组PKCα和PKCδ在胰腺及肺泡细胞膜中表达均呈强阳性. SAP组1,6,12和24 h四个时间点PKCα表达分别为766.00±9.79,799.13±12.80,821.38±15.81和816.13±24.48;PKCδ表达分别为747.14±10.23,775.91±14.30,797.50±11.32和794.35±14.71,较SO组明显升高,而MAP组低于SAP组,三组各时间点差异均具有统计学意义(P0.05). MAP组中PKCα和P KCδ于6 h开始升高,12 h达到高峰,此后有所下降. SAP组PKCα和PKCδ于1 h即开始升高,12 h达到高峰(图1,2). 2.2PKCα mRNA,PKCδ mRNA的表达水平结果显示,RT PCR所得到的PKCα,PKCδ和GAPDH产物长度分别为PKCα 300 bp,PKCδ 153 bp和GAPDH 411 bp. PKCα mRNA和PKCδ mRNA表达量MAP组高于SO组,SAP组高于MAP组,三组间各时间点差异具有统计学意义(P0.05,表1,图3). A: SO组; B: MAP组; C: SAP组. 图124 h PKCα在大鼠胰腺中的表达SABC ×400(略) A: SO组; B: MAP组; C: SAP组. 图224 h PKCδ在大鼠肺脏中的表达SABC ×400(略) 表1RT PCR法检测胰腺中PKCα mRNA,PKCδ mRNA表达(略) aP0.05,bP0.01 vs SO; dP0.01 vs MAP. SO: 假手术; MAP: 轻型急性胰腺炎; SAP: 重症急性胰腺炎. M: marker; 1~4: SO组1,6,12,24 h; 5~8: MAP组1,6,12,24 h; 9~12: SAP组1,6,12,24 h. A: 各组胰腺组织中PKCα和GAPDH的RT PCR产物电泳结果; B: 各组胰腺组织中PKCδ和GAPDH的RT PCR产物电泳结果. 图3各组胰腺组织中的RT PCR产物电泳图(略) 3讨论PKC调控炎症因子的作用近年来逐渐受到重视. Lallena等研究发现在静息细胞内,PKC与IκB激酶相结合,PKC是IκB激酶的直接激活剂,推测PKC很可能激活IκB的激酶,后者使IκB磷酸化而与NFκB解离,同时激活NFκB. PKC在TNFα信号转导中起关键作用, TNFα可通过磷脂酶产生脂质第二信使,并引发一系列信号转导. 刘刚等发现急性胰腺炎患者血中PKC的水平明显较对照组增高,这与我们的研究结果相一致. Miriam Horovitz Fried的研究指出抑制PKCδ会减少IκB的磷酸化和NFκB的激活,进一步减少炎症因子的释放,而且PKCα可以影响PKCδ的表达. 我们的实验结果提示,在造模后各组间PKCδ变化略慢于PKCα,强度上也弱于PKCα,我们推测PKCδ可能在SAP发病的早期过程中并不起主要作用. 我们观察到SAP组PKCα的激活较早,而且24 h仍维持较高水平,MAP组PKCα在12 h才开始升高,且活性变化有自限性. 据此我们推测: MAP早期PKCα不激活或者激活很少,从而不会引发SIRS反应,在SAP发生早期,大量激活的PKC引起炎症因子的级联瀑布效应导致全身感染是SAP患者死亡的主要原因. 因此,PKCα的监测可以较早的反映SAP病程的进展,PKCα或许可以成为SAP早期诊断的指标. 另外,PKC抑制剂在一些炎症性疾病中起治疗作用,有研究表明蛋白激酶抑制剂可以减轻重症胰腺炎肺损伤程度,这些可能与PKC对中性粒细胞的调节相关联. 有关抑制PKC是否有治疗重症胰腺的作用有待进一步研究. 【参考文献】王孝养,熊维宁,徐永健,等. 核因子κB和蛋白激酶C对哮喘Th类细胞因子表达的调控. 中华结核和呼吸杂志,2001, 24(6): 355-359. Tando Y, Algul H , Wagner M, et al. Caerulein induced NF kappa B/Rel activation requires both Ca2+ and protein kinase C as messengers. Am JPhysiol, 1999, 277:678-686. 马东瑞,李伟,张晓华,等. 白介素IL2与大鼠急性坏死性胰腺炎严重程度的关系. 第四军医大学报,2005,26(20):1885-1887. 秦兰芬,吴建新,袁耀宗,等. 大鼠急性坏死型胰腺炎病理特征评定方法的研究. 中国实验动物学报,2002,10(4):210-213. Lallena MJ, Diaz Meco MT, Bren G, et al. Activation of IkappaB kinase beta by protein kinase C isoforms. Mol Cell Biol, 1999 ,19(3):2180-2188. 刘刚,周朝霞,姬新才,等. 急性胰腺炎患者血浆D二聚体含量及外周血淋巴细胞蛋白激酶C活性的变化及意义. 中国急救医学,2005, 25(18):550-553. Horovitz Fried M, Sampson SR. Involvement of PKC alpha in insulin induced PKC delta expression: Importance of SP 1 and NFkappaB transcription factors. Biochem Biophys Res Commun, 2007,352(1):78-83. Shi C, Zhao X, Wang X, et al. Potential effects of PKC or protease inhibitors on acute pancreatitis induced tissue injury in rats. Vascul Pharmacol, 2007,46(6):406-411.。
大鼠重症急性胰腺炎脾脏核因子κB表达的意义的开
题报告
胰腺炎是一种严重的疾病，其重症急性胰腺炎变异性高，预后不良，有很多因素导致疾病的发生和发展。
核因子κB是一种重要的转录因子，
能够调控多种基因的表达，对炎症反应、免疫应答等方面起着关键作用。
因此，本研究旨在探讨大鼠重症急性胰腺炎脾脏核因子κB表达的意义。
具体的研究内容如下：
1.研究目的
通过观察大鼠重症急性胰腺炎模型中脾脏核因子κB表达的情况，探讨其在炎症反应和免疫应答中的作用，为疾病的治疗和预防提供理论基础。
2.研究方法
采用大鼠重症急性胰腺炎模型，将大鼠随机分为对照组和实验组，
对照组注射等量生理盐水，实验组注射胆汁酸和乙酰胆碱混合液。
采用
实时荧光定量PCR和免疫印迹技术检测脾脏核因子κB mRNA和蛋白表达的变化，明确其在炎症反应和免疫应答中的作用。
3.研究意义
本研究的结果有助于揭示重症急性胰腺炎发生和发展的机制，指导
临床治疗的手段和措施。
另外，核因子κB在其他炎症相关疾病中也有广
泛的应用前景，本研究对于其他相关疾病的研究具有借鉴意义。
4.研究预期结果
预期发现重症急性胰腺炎大鼠的脾脏核因子κB mRNA和蛋白表达水平明显上调，证实核因子κB在其炎症反应和免疫应答中具有重要作用。
文章编号:100025404(2005)1521569204论著重症急性胰腺炎大鼠肺脏i N O S m RNA表达及丹参的干预效应张 莹1,石承先1,别 平2,任娟娟1,李玉祥3,黄 平3 (1贵州省人民医院普通外科,贵阳550000;2第三军医大学西南医院全军肝胆外科研究所,重庆400038;3遵义医学院组织与胚胎学教研室,遵义563003) 提 要:目的 探讨重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,S AP)大鼠肺脏诱导型一氧化氮合酶(i N OS)mRNA 的表达及其与肺组织损伤的关系和丹参的治疗效应。
方法 45只W istar大鼠随机分为3组。
S AP模型组、丹参组均以5%牛磺胆酸钠经胰管内逆行注射(1m l/kg)复制S AP模型,丹参组则在制模后立即肌肉注射丹参(2m l・kg-1・d-1),每6h1次,共给药4次。
对照组仅行假手术。
各组动物在术后24h测血一氧化氮(NO)、淀粉酶(AM Y)和腹水量。
使用原位杂交和图像分析检测肺i N OS mRNA的表达强度,并观察其病理变化。
结果 AP模型组血中NO、AM Y、腹水量和肺脏i N OS mRNA表达显著高于丹参组和对照组(P<0105,P<0101);丹参组病理改变较模型组减轻。
结论 S AP 时肺组织i N OS mRNA高表达导致NO过度生成并与肺脏损伤有关;丹参能抑制肺组织i N OS mRNA的过度表达,从而对肺组织起保护作用。
关键词:重症急性胰腺炎;肺脏;i N OS mRNA;丹参;保护 中图法分类号:R282.71;R563;R576.02 文献标识码:AEffect of s a lv i a m ilti orrh i za on i n duc i ble n itr i c ox i de syn tha se m RNA expressi on i n lungs of ra ts w ith severe acute pancrea titisZHANG Ying1,SH ICheng2xian1,B I E Ping2,RE N Juan2juan1,L I Yu2xiang3,HUANG Ping3(1Depart m ent of General Sur2 gery,Guizhou Peop le’s Hos p ital,Guiyang550000,2I nstitute of Hepat obiliary Surgery,South west Hos p ital,Third M ilitaryMedical Univer2 sity,Chongqing400038,3Depart m ent of H ist ol ogy and E mbryol ogy,ZunyiM edical College,Zunyi563003,China) Abstract:O b j ec ti ve T o investigate the exp ressi on of inducible nitric oxide synthase(i N OS)mRNA in lungs and the effect of salvia m ilti orrhiza on lung injury in rats with severe acute pancreatitis(S AP).M e tho d s A t otal of45W istar rats were random ly divided int o3gr oup s:S AP model gr oup(SP,n=15),salvia m ilti2orrhiza gr oup(S M,n=15)and sha m operati on gr oup(S O,n=15).Severe acute pancreatitis was induced by intraductal injecti on of5%s odium taur ocholate(110m l/kg)in SP gr oup and S M gr oup.Sha m operati on was only made in S O gr oup.Salvia m ilti orrhiza(2m l・kg-1・d-1)was intra muscularly injected i m mediately after S AP was induced in S M gr oup,and the sa me dose was adm inistrated every6h.The sa me volu me of physi ol ogi2 cal saline was ad m inistrated in SP gr oup and S O gr oup.The volu me of ascites and seru m nitric oxide(NO)anda mylase(AMY)were deter m ined.i N OS mRNA exp ressi on in lung were exa m ined by in situ hybridizati on.Thepathol ogic changes of lung was observed after24h of rat model establishment.R e su lts The volu me of ascites and seru m levels of AMY and NO and the exp ressi on of i N OS mRNA in lung in SP gr oup were higher than in S M gr oup and S O gr oup(P<0105,P<0101).The pathol ogic changes of lung in S M gr oup were less than in SP gr oup.Co nc lu s i o n Over2exp ressi on of i N OS mRNA in lung p lays an i m portant r ole in lung injury in S AP rat models and salvia m ilti orrhiza inhibits the exp ressi on of i N OS mRNA and a meli orate the lung injury. Key words:severe acute pancreatitis;lung;i N OS mRNA;salvia m ilti orrhiza;p r otecti on 基金项目:贵州省优秀科技教育人才省长基金资助项目(黔科教办2001206) Supported by the No march Funds f or Excellent Sci&Tech Teachers of Guizhou Pr ovince(2001206) 作者简介:张 莹(1974-),男,陕西省铜川市人,博士研究生,医师,主要从事肝移植和重症胰腺炎的实验与临床方面的研究。
胰腺腺泡细胞凋亡在大鼠急性胰腺炎病程中的作用及凋亡调控基因的表达尚东;关凤林;杨佩满;辛毅;陈海龙;刘忠【期刊名称】《肝胆胰外科杂志》【年(卷),期】2001(013)003【摘要】目的:探讨胰腺腺泡细胞凋亡及凋亡调控基因 --Bax的表达情况及其与急性胰腺炎严重度的关系. 方法: 在胰胆管共同通道内逆行注射不同浓度的脱氧胆酸钠,制备不同重症程度的急性胰腺炎模型 .24只SD大鼠随机分为对照组(假手术组)、APⅠ组(0.75%剂量组)和APⅡ组(1.5%剂量组).分别于造模后6小时处死各组存活大鼠.用TUNEL法分析腺泡细胞凋亡情况,用免疫组化及Western Blotting检测Bax的表达情况. 结果: APⅠ组大鼠较APⅡ组胰腺坏死减少、出血减轻,血清淀粉酶、IL-6和IL-8水平明显下降 ;病变程度轻的APⅠ组大鼠腺泡细胞凋亡指数比病变程度重的APⅡ组高(6.36±2.41 vs 2 .34±1.15,P<0.05);正常腺泡细胞Bax的表达弱;产生急性胰腺炎时,腺泡细胞 Bax的表达增强,病变程度轻的大鼠腺泡细胞Bax 表达水平较病变程度重的强,与二者凋亡指数的差别相一致. 结论: 产生急性胰腺炎时,腺泡细胞凋亡与其病情严重程度呈负相关,腺泡细胞凋亡在急性期是一种保护现象;Bax的表达水平与腺泡细胞凋亡指数呈正相关,与胰腺炎的病变程度呈负相关.【总页数】4页(P152-155)【作者】尚东;关凤林;杨佩满;辛毅;陈海龙;刘忠【作者单位】大连医科大学附属第一医院普外科,;大连医科大学附属第一医院普外科,;大连医科大学附属第一医院普外科,;大连医科大学附属第一医院普外科,;大连医科大学附属第一医院普外科,;大连医科大学附属第一医院普外科,【正文语种】中文【中图分类】R657.5【相关文献】1.区域动脉灌注5-FU诱导大鼠急性胰腺炎腺泡细胞凋亡及Caspase-3表达 [J], 叶乐驰;郑春晓;金约朋;白永愉;李强;周蒙滔2.茵陈承气汤对大鼠急性出血坏死性胰腺炎腺泡细胞凋亡及调控基因的影响 [J], 尚东;关凤林;陈海龙;杨佩满;辛毅;刘忠;聂凤宇;胡爱萍3.胰腺腺泡细胞凋亡在大鼠急性胰腺炎病程中的作用 [J], 尚东;关凤林;杨佩满;辛毅;陈海龙;侯力4.白藜芦醇上调FasL表达对大鼠重症急性胰腺炎腺泡细胞凋亡的影响 [J], 李震东;马清涌;罗羽宏5.大鼠急性胰腺炎时胰腺腺泡细胞凋亡及Bax,Caspase-8的表达 [J], 陈海龙;张桂信;宫爱霞;张利因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
关于大鼠重症急性胰腺炎胰腺组织中NO生成及iNOS表达的变化【摘要】目的探讨重症急性胰腺炎(SAP)时胰腺组织一氧化氮(NO)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的变化。
方法36只健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为2组。
SAP组(n=18)以逆行胰胆管内加压注射5%牛磺胆酸钠的方法建立SAP模型;对照组(n=18)以同法注射等剂量生理盐水。
造模后6、12、24 h每组随机处死大鼠6只，检测血淀粉酶、胰腺组织病理组织学改变、胰腺组织NO水平及iNOS活性以及腺腺组织iNOS mRNA表达的变化。
结果与对照组相比，SAP组在6 h时间点上，胰腺组织中NO水平、iNOS活性明显升高(P<0.01)，免疫组化和RT-PCR结果也显示iNOS蛋白及iNOS mRNA表达增高(P<0.01);随时间延长，在12 h和24 h各指标到达高峰，24 h仍维持在较高水平(P<0.01)。
结论在SAP时，随着时间的延长，iNOS表达增高，从而产生高浓度的NO，加重胰腺组织的损伤。
【关键词】重症急性胰腺炎;一氧化氮;诱导型一氧化氮合酶Abstract: ObjectiveTo investigate the changes in the formation of nitric oxide (NO) and the expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) in pancreatic tissue in severe acute pancreatitis (SAP) in rats. MethodsThirty-six healthy male Sprague-Dawley (SD) rats were randomly allocated into sham-operated group (control group) and SAP group (n=18 each). The model of SAP was established by injection of 5% sodium taurocholate into the common choledocho-pancreatic duct in SD rats. The same dosage of normal saline was given to the control group in the same way. The rats were randomly sacrificed at 6 h， 12 h and 24 h，respectively (n=6 each)， and their blood samples were collected for analyses. The variation of serum amylase levels and the pathohistological changes of the pancreas were detected by colorimetric method. The expression of iNOS proteins and iNOS mRNA in the pancreas were determined by immunohistochemistry and reverse transcriptase polymerase chain reaction method (RT-PCR)， respectively. ResultsThe NO level and the activity of total iNOS in the pancreas at 6 hsignificantly increased in the SAP group as compared to the control group (P<0.01). Immunohistochemistry and RT-PCR also revealed an increase in the expression of pancreatic iNOS protein and mRNA in the pancreas (P<0.01). Each parameter increased with time and reached the peak at 12 h and still retained a high level at 24 h (P<0.01). ConclusionIn SAP， the iNOS expression was upregulated with time and thus the high concentration of NO was produced， which aggravated the lesion of pancreatic tissue.Key words： severe acute pancreatitis; nitric oxide; induciblenitric oxide synthase重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis， SAP)临床表现凶险，常发生局部或全身并发症;目前对SAP的治疗虽有所进展，但如何防治SAP仍无特异手段，导致SAP的病死率居高不下。
实验性重症急性胰腺炎Caspase-1激活的细胞因子的表达张晓华;屠振兴;李兆申;许国铭;龚燕芳;满晓华【摘要】目的研究实验性重症急性胰腺炎(SAP)Caspase-1激活的细胞因子的表达.方法SD大鼠32只,随机分4组:正常对照组(HC组)、SAP 6 h组、SAP 12 h 组、SAP 18 h组.采用5%牛磺胆酸钠逆行注入胰胆管诱发大鼠SAP模型.通过HITACHI-7150型自动生化分析仪检测大鼠血清淀粉酶;采用ELISA法测定血清IL-1β水平;酶化学法测定胰腺MPO活性;半定量RT-PCR检测胰腺Caspase-1、IL-1β及IL-18 mRNA的表达;免疫组织化学方法检测胰腺IL-1β蛋白的表达.结果SAP各组血清淀粉酶和IL-1β水平显著升高,并伴有胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)显著增加,与HC组相比,其差异均具有显著性意义(P＜0.01).HC组胰腺组织内可见Caspase-1 mRNA表达,但IL-1β及IL-18 mRNA的表达较弱SAP各组胰腺组织内Caspase-1、IL-1β及IL-18 mRNA的表达显著上调(P＜0.01).SAP各组IL-1β蛋白表达显著增强,与HC组比较差异具有显著意义(P＜0.01),而且与SAP严重程度相一致.结论Caspase-1激活的细胞因子IL-1β及IL-18的过度表达在SAP发病机制中发挥重要的作用.【期刊名称】《中华胰腺病杂志》【年(卷),期】2003(003)004【总页数】5页(P207-211)【关键词】胰腺炎;Caspase-1;白细胞介素1;白细胞介素18;基因表达【作者】张晓华;屠振兴;李兆申;许国铭;龚燕芳;满晓华【作者单位】南京军医学院附属第414医院消化内科;200433,上海,第二军医大学长海医院消化内科;200433,上海,第二军医大学长海医院消化内科;200433,上海,第二军医大学长海医院消化内科;200433,上海,第二军医大学长海医院消化内科;200433,上海,第二军医大学长海医院消化内科【正文语种】中文【中图分类】R576重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)死亡率在10%以上[1]，其发病机制尚未完全阐明。
