Mobius CellReady 3升的一次性生物反应器

GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A GMS60072.2 v.A GENMED酵母细胞壁完全可溶性总蛋白制备试剂盒产品说明书（中文版）主要用途GENMED酵母细胞壁完全可溶性总蛋白制备试剂是一种旨在使用化学去垢和物理方法相结合，快速且充分裂解酵母细胞壁，通过生物酶的萃取，获得完整而纯化的可溶性细胞壁蛋白成分的权威而经典的技术方法。

该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。

可直接用于后续二维电泳、蛋白分离、结构分析、质谱分析、蛋白组学图谱分析等。

产品即到即用，性能稳定，操作便捷，萃取完整。

技术背景酵母细胞壁在细胞生长和分裂时，决定着细胞的形态和完整性。

酵母细胞壁是一种动力结构，由多糖和蛋白，例如葡聚糖（glucan）、甘露聚糖（mannan）、甲壳素（chitin）等构成的超分子网络，适应酵母生理和形态变化，包括单倍体细胞接合（conjugation）、孢子形成（sporulation）或假菌丝形态（pseudohyphal growth）等。

酵母细胞壁蛋白约占5％的细胞壁成分，含有400多种蛋白分子。

采用化学法和生物酶解法，可以获得100％完整的胞壁蛋白成分。

产品内容GENMED平衡液（Reagent A）毫升GENMED裂解液（Reagent B）毫升GENMED活性液（Reagent C）微升GENMED酸珠液（Reagent D）毫升GENMED清理液（Reagent E）毫升GENEMD净化液（Reagent F）毫升GENMED萃取液（Reagent G）毫升GENMED酸性液（Reagent H）毫升GENMED水解液（Reagent I）毫升GENMED中和液（Reagent J）毫升GENMED酶解液（Reagent K）微升产品说明书1份保存方式保存GENMED裂解液（Reagent B）、GENMED活性液（Reagent C）、GENMED萃取液（Reagent G）和GENMED酶解液（Reagent K）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；GENMED水解液（Reagent I）避免光照，有效保证6月用户自备50毫升锥形离心管：用于细胞收集后离心操作的容器15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器1.5毫升离心管：用于样品操作和保存的容器2毫升离心管：用于样品操作的容器烧杯：用于样品煮沸台式离心机：用于细胞收集和去除杂质微型台式离心机：用于胞壁蛋白收集和去除杂质分光光度仪：用于测定酵母细胞浓度涡旋震荡仪：用于裂解酵母细胞壁实验步骤1．准备好50毫升新鲜酵母样品（注意：通过选择性培养液培养获得酵母细胞）2．在分光光度仪上测定OD600（注意：建议达到1 OD，即1 X 107细胞/毫升；总量为5 X 108细胞） 3．转移到预冷的50毫升锥形离心管4．放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为3000g5．小心抽去上清液6．加入 毫升GENMED平衡液（Reagent A），混匀7．放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为3000g8．小心抽去上清液9．重复实验步骤6至8二次10．加入 微升GENMED裂解液（Reagent B）11．加入 微升GENMED活性液（Reagent C）12．加入 微升GENMED酸珠液（Reagent D）13．在4℃环境下，持续强力涡旋震荡2分钟，间歇1分钟14．重复实验步骤12三次15．放进4℃台式离心机离心5分钟，速度为300g16．小心移取上清液（500微升）到新的15毫升锥形离心管（收集管）17．加入 微升GENMED裂解液（Reagent B）到上述含有GENMED酸珠液（Reagent D）的锥形离心管18．涡旋震荡15秒19．放进4℃台式离心机离心5分钟，速度为300g20．小心移取上清液（500微升）合并到上述收集管21．重复实验步骤16至19二次22．将收集管（总量为2毫升上清液）放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为3000g23．小心抽掉上清液，保留沉淀颗粒――此为细胞壁成分24．加入 微升4℃预冷的GENMED清理液（Reagent E），混匀25．转移到新的2毫升离心管26．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为5000g27．小心抽掉上清液28．加入 微升4℃预冷的GENMED净化液（Reagent F），混匀29．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为5000g30．小心抽掉上清液31．加入 微升4℃预冷的GENMED清理液（Reagent E），混匀32．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为5000g33．小心抽掉上清液34．加入 微升GENMED萃取液（Reagent G），混匀35．置于沸水中，煮沸孵育10分钟36．置于冰槽里5分钟37．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为16000g（或13000RPM；例如eppendorf 5415） 38．小心移取上清液到新的1.5毫升离心管39．放进－70℃的冰箱里备用或冻干――此为90％可溶性胞壁蛋白40．加入 微升4℃预冷的GENMED清理液（Reagent E），混匀上述沉淀颗粒41．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为10000g42．小心抽掉上清液43．重复实验步骤39至41一次44．加入 微升4℃预冷的GENMED酸性液（Reagent H），混匀45．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为10000g46．小心抽掉上清液47．重复实验步骤43至45一次48．加入 微升GENMED水解液（Reagent I），混匀49．室温下孵育48小时，避免光照50．加入 微升GENMED中和液（Reagent J），混匀51．加入 微升GENMED酶解液（Reagent K），混匀52．室温下孵育24小时53．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为10000g54．移取上清液到新的1.5毫升离心管――此为10％难溶性胞壁蛋白（例如葡聚糖、甘露聚糖、甲壳素类糖蛋白）55．放进－70℃的冰箱里备用或冻干56．（选择步骤）合并上述可溶性胞壁蛋白和难溶性胞壁蛋白到1管――此为完全胞壁蛋白注意事项1．本产品为20次操作2．所有操作均须在无菌和4℃状态下进行，除步骤中规定的之外3．操作时须戴手套4．GENMED水解液（Reagent I）含有毒物质，注意操作安全5．细胞生长切莫过度，否则影响蛋白表达和细胞裂解6．50毫升（0D600＝1）菌液湿重约1克7．50毫升（0D600＝1）菌液可获得约250毫克湿重的胞壁成分，其中94％为多糖，5％为蛋白8．本产品可萃取约400多种胞壁蛋白，其中10％为难以萃取的β－葡聚糖和甲壳素链接的甘露糖蛋白成分9．制备产物如果放在－70℃冰箱里储存备用，避免反复冻融10．用户可以根据需求，浓缩或冻干蛋白溶液：建议使用GENMED三氯醋酸小量蛋白浓缩沉淀试剂盒（GMS30001）11．本公司提供系列酵母试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定无蛋白酶污染使用承诺杰美基因秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。

[化学发光]美国Beckman公司UniCel DxI800免疫分析仪迎接PG级超微量检测时代的来临免疫定量分析的发展历程1960年代以前人工免疫检测阶段1960-70年代非标记免疫发展阶段放射标记免疫发展阶段1970-80年代免疫分析新项目不断产生临床应用领域迅速拓展荧光免疫发展阶段1980-90年代免疫检测逐渐常规化检测原理发展阶段化学发光，电化学发光1990-2000年标记免疫检测原理日臻成熟优化系统均衡，清洗分离手技术的发展2000-2003年免疫自动化发展阶段；进一步吸收大生化检测的自动化技术成就，采用系统叠加的方式以寻求更快的检测速度免疫分析技术的自动化智能化发展，是临检领域继生化全自动分析时期的又一个标志性的重要阶段。

其推动力源自一些大型实验室在免疫检测应用方面的进一步拓展和规模化，对免疫分析系统的检测速度、自动化和智能化性能提出了更高的要求。

智能化方面提高了系统流程管理的智能化程度，将系统的自动化性能推进到了一个新的智能化阶段，并进一步强化了全方位的系统监控功能，保证了自动化的可控性。

自动化方面进一步完善系统的自动化性能，加强系统的简便性、灵活性和前赡性，例如多种的进样方式、尽可能简洁的日常保养程序等，并提高了与轨道自动化的顺应性。

系统化方面改变了原有检测仪器将系统进行简单并连组合以提高检测速度的做法，在继承原有分系统的独立性优点的基础上，采用同一套分析和探测系统，保证系统的整体性和结果的统一性。

UniCel TM DxI 800 展现自动化非凡成就引领智能免疫时代DxI 800智能化整系统运行，突破分系统简单组合的传统方式，采用分立一体化整系统的专利设计分立的4个进样通道1.加快进样速度，减少样品的机上滞留时间；2.任何一个进样通道出现故障，不影响其他通道的进样操作，提供了整系统操作的灵活性；3.根据需要可以任意指定某个通道用于特定检测的进样，以保证整系统的流程优化；4.可以独立的对任何一个进样通道进行配件更换或维修。