第18章 全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪习题
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生物仪器试题题库及答案一、单项选择题1. 生物仪器中,用于测量细胞内离子浓度变化的仪器是()。
A. 流式细胞仪B. 荧光显微镜C. 离子选择性电极D. 质谱仪答案:C2. 以下哪种技术常用于蛋白质定量分析?()A. 凝胶电泳B. 质谱分析C. 酶联免疫吸附测定(ELISA)D. 核磁共振(NMR)答案:C3. 用于测定DNA序列的仪器是()。
A. PCR仪B. 凝胶成像系统C. 基因测序仪D. 离心机答案:C4. 以下哪种仪器不适合用于细胞培养?()A. 二氧化碳培养箱B. 显微镜C. 流式细胞仪D. 细胞计数器答案:C5. 用于测定细胞凋亡的常用生物仪器是()。
B. 酶标仪C. PCR仪D. 凝胶成像系统答案:A二、多项选择题6. 以下哪些仪器可用于蛋白质分离纯化?()A. 离心机B. 色谱仪C. 质谱仪D. PCR仪答案:A|B7. 生物仪器中,哪些可用于细胞形态观察?()A. 显微镜C. 酶标仪D. 凝胶成像系统答案:A|B8. 以下哪些技术可用于基因表达分析?()A. 实时定量PCRB. 北方印迹C. 西方印迹D. 质谱分析答案:A|B|C9. 以下哪些仪器可用于细胞信号传导研究?()A. 酶标仪B. 流式细胞仪C. 质谱仪D. 凝胶成像系统答案:A|B|C10. 用于测定细胞增殖的生物仪器包括()。
A. 酶标仪B. 流式细胞仪C. PCR仪D. 细胞计数器答案:A|B|D三、判断题11. 质谱仪可以用于蛋白质组学研究。
()答案:√12. PCR仪只能用于DNA扩增,不能用于RNA扩增。
()答案:×13. 凝胶电泳是一种用于分离DNA或蛋白质的常用技术。
()答案:√14. 流式细胞仪可以用于细胞周期分析。
()答案:√15. 二氧化碳培养箱的主要作用是提供无菌环境。
()答案:×四、简答题16. 请简述荧光显微镜在生物研究中的应用。
答案:荧光显微镜在生物研究中主要应用于观察细胞和组织的荧光标记,可以用于检测特定蛋白质或核酸的位置和表达量,以及研究细胞结构和功能的变化等。
临床医学检验:临床检验仪器预测题1、名词解释干化学技术正确答案:干化学技术是指将液体样品直接加到固定在特定载体的干试剂上,并以样品中的水作为溶剂,使样品中的待测成分与试剂进行化学反应,从而进行分析测定的方法。
2、(江南博哥)多选荧光定量PCR仪的荧光强度减弱或不稳定,可能的原因有()。
A.滤光片发霉B.光源损耗C.半导体模块故障D.荧光染料污染E.光电倍增管灵敏度下降正确答案:A, B, E3、多选毛细管电泳仪的主要结构有()。
A.高压源B.毛细管柱C.检测器D.缓冲液槽E.记录装置正确答案:A, B, C, D, E4、多选Sanger双脱氧链末端终止法和Maxam-Gilbert化学降解法的共同点包括()。
A.反应体系中均有ddNTPB.都是根据在某一固定的点开始核苷酸链的延伸,随机在某一个特定的碱基处终止C.均产生A、T、C、G四组不同长度的一系列核苷酸链D.均在变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳进行片段的分离和检测E.均可检测DNA的一级结构正确答案:B, C, D, E5、单选不属于全自动血凝仪的主要优点的是()。
A.智能化程度高、功能多B.自动化程度高、检测方法多C.通道多,速度快D.测量精度好、易于质控和标准化E.价格便宜正确答案:E6、单选进行尿液电泳分析时,对尿标本进行浓缩处理所要求的尿液中蛋白质的浓度是()。
A.3g/L~5g/LB.5g/L~10g/LC.10g/L~15g/LD.15g/L~20g/LE.20g/L~30g/L正确答案:D7、单选微量快速血糖仪的质量控制措施不包括下述哪一项()。
A.质控物的测定B.密码牌校准C.及时清洁终点法白参考片D.室间质量控制E.血糖仪与大生化仪结果的比对正确答案:C8、问答题连续流动式和分立式自动生化分析仪在结结构上有哪些区别?正确答案:分立式与连续流动式自动生化分析仪在结构上的主要区别为前者各个样品和试剂在各自的试管中起反应,而后者是在统一管道中起反应;前者采用由加样器和加液器组成的稀释器来加样和加试剂,而不用比例泵;前者一般没有透析器,如要除蛋白质等干扰,需另行处理。
2023-2024学年人教版高中生物单元测试班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________一、选择题(本大题共计13小题每题3分共计39分)1.若从洋葱根尖细胞中提取DNA 发现实验效果不好如看不到丝状沉淀物、鉴定时不显示颜色反应等其可能的原因是()①细胞中DNA含量低②研磨不充分③过滤不充分④洋葱根尖取材过多A. ①②B. ③④C. ①④D. ②③【答案】D【解析】解①植物细胞中DNA含量低则提取的DNA含量不足但是仍然有少量丝状沉淀物、二苯胺鉴定时也会出现蓝色①错误②研磨不充分导致DNA不能释放提取DNA太少可能出现看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时不显示颜色反应等②正确③过滤不充分导致滤液中DNA含量太少可能出现看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时不显示颜色反应等③正确④洋葱根尖取材过多可使DNA含量增加既能看见丝状沉淀物、鉴定时又能显示颜色反应④错误故选 D2.在PCR过程中一般进行自动控制的是()A. 引物的设计B. 反应成分的配制C. 移液器枪头的更换D. 温度由94\^circ C rightarrow 55\^circ C rightarrow 72\^circ C 的调整【答案】D【解析】解 PCR过程中一般进行自动控制的是温度即由 94^\circ C \rightarrow 55^\circ C \rightarrow 72^\circ C 的调整.故选 D.3.下列关于PCR技术的叙述不正确的是()A. 依据碱基互补配对原则B. 可用于基因诊断、法医鉴定、判断亲缘关系C. 需要合成特定序列的引物D. 需要DNA解旋酶、DNA聚合酶等酶类【答案】D【解析】解 A.PCR技术依据碱基互补配对原则 A正确B.PCR技术可用于基因诊断、法医鉴定、判断亲缘关系 B正确C.PCR技术需要合成特定序列的引物 C正确D.PCR过程中通过高温使DNA变性不需要解旋酶 D错误故选 D4.将搅拌好的混合液离心来分离血红蛋白溶液时第2层是()A. 甲苯B. 血红蛋白水溶液C. 脂溶性物质的沉淀层D. 其他杂质的沉淀【答案】C【解析】解 A、甲苯层位于第1层 A错误B、血红蛋白水溶液位于第3层 B错误C 、第2层是脂溶性物质的沉淀层 C正确D、其他杂质的沉淀物位于第4层 D错误.故选 C.5.以下关于猪血红蛋白提纯的描述不正确的是()A. 洗涤红细胞时使用生理盐水可防止红细胞破裂B. 猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核提纯时杂蛋白较少C. 在凝胶色谱法分离过程中血红蛋白比分子量较小的杂蛋白行程大D. 血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测【答案】C【解析】解 A、洗涤红细胞时洗涤的目的是去除杂蛋白以利于后续步骤的分离纯化加入的是生理盐水可防止红细胞破裂 A 正确B、哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核与众多的细胞器提纯时杂蛋白较少 B 正确C 、在凝胶色谱法分离过程中血红蛋白的分子量比杂蛋白大质量越大的通过凝胶色谱柱的速度越快 C错误D、血红蛋白是有色蛋白因此在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液(如果操作都正确 D正确故选 C.6.使用染色剂染色是生物学实验常用的方法某同学以香蕉为材料做了如下实验其中染色方法和实验结论均正确的是()A. AB. BC. CD. D【答案】B【解析】解 A.蔗糖不是还原糖本次实验只证明了香蕉中含有还原糖无法得出“不含有蔗糖”的结论 A错误B.在沸水浴的条件下 DNA遇二苯胺会被染成蓝色 B正确C.台盼蓝能将死细胞染成蓝色无法得出“原生质体有活性”的结论 C错误D.刚果红能将纤维素染成红色能分解纤维素的纤维素分解菌产生相应的酶因而菌落周围能形成透明圈而大肠杆菌不属于纤维素分解菌 D错误故选 B7.下列有关血液样品处理的操作正确的是()A. 洗涤红细胞时应采用低速长时间离心B. 红细胞释放出血红蛋白只需要加入甲苯即可C. 分离血红蛋白时离心后自上而下的第3层为红色D. 用蒸馏水洗涤红细胞的目的是去除细胞表面的杂蛋白【答案】C【解析】A.洗涤红细胞时应采用低速短时间离心故A项错误B.红细胞释放出血红蛋白需要加入甲苯和蒸馏水故B项错误C.分离血红蛋白时离心后至上而下有4层其中第3层为红色的血红蛋白溶液故C项正确D.应用生理盐水洗涤红细胞故D项错误故选C8.将搅拌好的混合液转移到离心管中离心后可以明显看到试管中的溶液分为4层其中第3层是()A. 无色透明的甲苯层B. 脂溶性物质的沉淀层C. 血红蛋白的水溶液D. 其他杂质的暗红色沉淀物【答案】C【解析】解 A、无色透明的甲苯层是第一层 A错误B、脂溶性物质的沉淀层是第二层 B错误C 、血红蛋白水溶液层是第三层 C正确D、其他质的暗红色沉淀物位于第四层 D错误.故选 C.9.将果蝇的某个精原细胞的染色体中所有DNA链都用 ^32P标记然后将该细胞置于不含 ^32P的特定培养基中培养完成减数分裂产生四个正常的子细胞含有放射性 ^32P的精子有()A. 1个B. 2个C. 3个D. 4个【答案】D【解析】10.在血红蛋白的整个提取过程中不断用磷酸缓冲液处理的目的是()①防止血红蛋白被氧气氧化②血红蛋白是一种碱性物质需要酸进行中和③防止色谱柱内产生气泡影响洗脱效果④让血红蛋白处在稳定的pH范围内维持其结构和功能A. ①②B. ②③C. ②④D. ③④【答案】D【解析】在血红蛋白的提取过程中不断用磷酸缓冲液处理的目的是防止色谱柱内产生气泡影响洗脱效果同时也为了让血红蛋白保持在体内所处的环境以维持其结构和功能故D项符合题意故选D11.红细胞中含有大量血红蛋白我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白下列对血红蛋白提取和分离的叙述错误的是()A. 血红蛋白提取和分离一般按照“样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定”的顺序进行B. 纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液C. 粗分离时透析的目的是去除相对分子质量较小的杂质D. 可经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定【答案】B【解析】解 A.血红蛋白提取和分离一般按照“样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定”的顺序进行 A 正确B.纯化过程中要用缓冲溶液充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液 B错误C.粗分离时透析的目的是去除相对分子质量较小的杂质 C正确D.可经SDS−聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定 D正确故选 B12.如图表示在微生物M产生的脂肪酶作用下植物油与甲醇反应能够合成生物柴油的过程下列相关叙述中错误的是()A. 用于生产生物柴油的植物油不易挥发宜选用压榨法或萃取法从油料作物中提取B. 筛选产脂肪酶的微生物M时选择培养基中添加的植物油为微生物的生长提供碳源C. 为降低生物柴油的生产成本可利用固定化酶技术使脂肪酶能够重复使用D. 若需克隆脂肪酶基因可应用耐热DNA聚合酶催化的蛋白质工程技术【答案】D【解析】解 A.由于植物油不易挥发所以可以用压榨法和萃取法从油料作物中提取 A正确B.筛选能合成脂肪酶的微生物需要使用选择培养基选择培养基中要将植物油作为唯一的碳源 B正确C.将酶固定后可以重复使用从而降低生产成品 C正确D.克隆基因的技术是PCR技术而不是蛋白质技术 D错误故选 D13.利用PCR技术从某种生物的基因组DNA中获取目的基因的前提是()A. 有目的基因的DNA片段作为模板进行复制B. 有一段已知目的基因的核苷酸序列以便根据这一序列合成引物C. 有足够的脱氧核苷酸作为原料D. 加入足够数量的DNA连接酶进行指数式扩增【答案】B【解析】解利用PCR技术从某种生物的基因组DNA中获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成引物.故选 B.二、解答题(本大题共计8小题每题10分共计80分)14.(1)甘蔗大多数同学喜欢吃也是制造蔗糖的原料而蔗糖没有还原性他们用甘蔗汁进行还原性糖的鉴定结果出现了砖红色沉淀由此得出结论甘蔗汁中的糖类除了蔗糖外还有________14.(2)他们利用花生种子进行脂肪的鉴定试验如图是他们在光学显微镜下观察到的被________染液染成橘黄色脂肪颗粒的图象14.(3)他们利用猕猴桃进行DNA的粗提取实验提取了一团絮状物他们把部分絮状物溶于物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液的试管中同时设置对照试验分别加入________试剂沸水浴几分钟后加入絮状物的试管溶液的颜色变为________ 说明絮状物含有DNA成分他们又把部分絮状物溶于蒸馏水中加入双缩脲试剂溶液颜色变为紫色说明絮状物还含有________成分【答案】还原性糖(或葡萄糖)【解析】斐林试剂可用于鉴定还原糖在水浴加热的条件下产生砖红色沉淀用甘蔗汁进行还原性糖的鉴定结果出现了砖红色沉淀说明甘蔗汁中的糖类除了蔗糖外还有还原性糖(如葡萄糖、麦芽糖、果糖)【答案】苏丹Ⅲ【解析】脂肪需要使用苏丹Ⅲ(苏丹Ⅳ)染色使用50%酒精洗去浮色以后在显微镜下观察可以看到橘黄色(红色)的脂肪颗粒【答案】二苯胺, 蓝色, 蛋白质【解析】在沸水浴条件下 DNA遇二苯胺会被染成蓝色因此二苯胺可以作为鉴定DNA 的试剂蛋白质可与双缩脲试剂产生紫色反应15.(1)据图1可知在向导RNA(sgRNA)的引导下 Cas9利用其具有的________个内切酶活性位点水解目标DNA的________15.(2)科研人员通过突变得到内切酶活性全部消失的dCas9 建构的CRISPR/dCas9系统保留向导RNA(sgRNA)引导进入基因组的能力当dCas9与VP64、P65等转录激活因子融合形成的dCas9﹣SAM可进行基因调控等研究①图2示意将OCT4、KLF4、MYC及SOX2四个基因的sgRNA序列串联成的sgRNA质粒和dCas9﹣SAM质粒与磷脂等混合(形成包埋DNA脂质体结构)将脂质体加入到细胞系MCF7的细胞培养皿中能实现基因转移的原理是________ 24h后通过添加________筛选并进行单细胞培养即可得到基因编辑后细胞此过程须在37℃气体环境为________的细胞培养箱中进行②转染好的细胞用裂解液消化后使用RNA提取试剂盒提取总RNA 取1μg提取的RNA 使用反转试剂盒进行操作即得到________ 然后将其进行实时荧光定量PCR PCR操作时通常________5分钟变性30秒再复性、延伸循环等③该实验通过4种sgRNA对MCF7细胞进行编辑可实现多基因________的目的【答案】2, 磷酸二酯键【解析】【答案】生物膜的流动性, 抗生素G418和嘌呤霉素, 95%空气加5%CO_2的混合气体, cDNA, 预变性, 同时调控【解析】16.(1)利用PCR技术进行新冠病毒核酸检测的前提是________ 新冠病毒是RNA病毒所以需对样本进行________处理后再PCR扩增如果样本存在目标病原体则会因为________的特异性扩增出相应的目标基因片段由此判断是否为阳性16.(2)荧光PCR法又称qPCR法是指在在反应体系中加入________ 通过专门仪器实现实时荧光检测以________来测定PCR循环后产物中核酸水平16.(3)IgM和IgG均属于免疫球蛋白家族是机体在抗原物质刺激下由浆细胞产生的抗体 lgM/lgG检测试剂盒的原理是________ 通过检测人体内相应抗体间接证明感染与否被病毒感染后机体会产生一系列的变化来抵御这种入侵其中IgM 和IgG的含量会发生如图所示变化要通过对COVID-19患者研究发现病毒侵入人体后大约需要5~7天产生IgM抗体 IgG 抗体在感染后10~15天时产生通过检测外周血中IgM和IgG 不仅可以鉴别感染与否还可以辨别检测者是近期感染或者是既往感染当核酸检测结果为阳性 lgM(+)lgG(-)时可判断检测者为________ 已治愈的患者检测结果应为________【答案】(1)新冠病毒的核酸序列已知, 反(逆)转录, 引物【解析】解(1)PCR扩增技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列则利用PCR技术进行新冠病毒核酸检测的前提是新冠病毒的核酸序列已知新冠病毒为RNA病毒需要先通过逆转录处理获得目的基因再进行PCR扩增若样本存在目标病原体根据引物的特异性扩增相应目的基因片段由此判断是否为阳性【答案】(2)荧光物质, 荧光强度【解析】(2)荧光PCR法是指在反应体系加入荧光物质通过专门仪器实现实时荧光检测以荧光强度来测定PCR循环后产物中核酸水平【答案】(3)抗原抗体特异性结合, 近期感染, 核酸检测为阴性 lgM(-)和lgG(+)【解析】(3)根据题述 lgM/lgG联合检测是新冠病毒抗体检测试剂盒主要技术其原理是抗原抗体特异性结合当核酸检测为阳性 lgM(+)lgG(-)时可判断出患者体内有病毒存在为近期感染已治愈的患者核酸检测为阴性 lgM(-)和lgG(+)17.(1)血红蛋白粗分离阶段透析的目的是___________________ 若要尽快达到理想的透析效果可以__________________________(写出一种方法)17.(2)血红蛋白的纯化是通过____________法将相对分子质量大的杂质蛋白除去图乙中往色谱柱中加样的正确操作顺序____________(用序号表示)在进行④操作前应该等样品____________ 且要____________(填“打开”或“关闭”)下端出口17.(3)电泳利用了待分离样品中各种分子的_________________________等的差异而产生不同迁移速度实现各种分子的分离17.(4)一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如图所示由图可知携带者有____________种血红蛋白从分子遗传学的角度作出的解释是___________________________________________【答案】(1)除去小分子杂质, 增加缓冲液的量或及时更换缓冲液【解析】解(1)血红蛋白粗分离阶段透析的目的是除去小分子杂质若要尽快达到理想的透析效果可以增加缓冲液的量或及时更换缓冲液【答案】(2)凝胶色谱, ②③④①, 完全进入凝胶层, 关闭【解析】(2)血红蛋白的纯化是通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去图乙中往色谱柱中加样的正确操作顺序②③④① 在进行④操作前应该等样品完全进入凝胶层且要关闭下端出口【答案】(3)带电性质以及分子大小、形状【解析】(3)电泳利用了待分离样品中各种分子的带电性质以及分子大小、形状等的差异而产生不同迁移速度实现各种分子的分离【答案】(4)2, 携带者具有一对等位基因可以控制合成两种不同的蛋白质【解析】(4)由图示信息可知正常人和镰刀型细胞贫血症患者都只有1种血红蛋白但其携带者有2种血红蛋白因而从分子遗传学的角度作出的解释是携带者具有一对等位基因可以控制合成两种不同的蛋白质18.(1)要想构建基因组文库必须获得该生物体内的全部DNA 用________对全部DNA 进行片段化将获得的片段与________连接起来通常导入到原核细胞中最常用的受体细胞是________ 最常用的方法是________ 再通过________鉴别和筛选含目的基因的受体菌18.(2)如果用某种生物发育的某个时期的所有mRNA反转录产生的多种互补DNA片段构建成cDNA文库一般只包含该生物的部分基因原因是________________________________________________18.(3)构建了基因文库并不等于完成了目的基因的分离因此必须用各种方法将目的基因从文库中筛选出来下列不能为筛选目的基因提供依据的是________18.(4)利用PCR技术扩增目的基因这一过程中需要加入一种特殊的酶即________ 【答案】(1))限制酶, 运载体, 大肠杆菌, 感受态转化法, 标记基因【解析】解(1)基因文库包括基因组文库和部分基因文库要想构建基因组文库必须获得该生物体内的全部DNA 用限制酶对全部DNA进行片段化将获得的片段与运载体连接起来通常导入到原核细胞中最常用的受体细胞是大肠杆菌最常用的方法是感受态转化法标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因从而将目的基因筛选出来故可通过标记基因鉴别和筛选含目的基因的受体菌【答案】(2)基因的选择性表达在某个时期只表达了部分基因【解析】(2)由于基因的选择性表达在某个时期只表达了部分基因所以如果用某种生物发育的某个时期的所有mRNA反转录产生的多种互补DNA片段构建成cDNA文库一般只包含该生物的部分基因【答案】C【解析】(3)筛选目的基因可以依据目的基因的功能、目的基因的mRNA及目的基因表达产物蛋白质的氨基酸序列由于碱基种类并没有特异性所以不能作为筛选目的基因的依据故选 C【答案】(4)热稳定DNA聚合酶(或Taq酶)【解析】(4)PCR过程包括变性、复性和延伸三步变性过程需要用90℃以上的高温使双链DNA解聚为单链故利用PCR技术扩增目的基因需要加入热稳定DNA聚合酶(或Taq酶)19.(1)利用PCR技术扩增干扰素基因时设计引物的前提是已知鸡干扰素基因两端的部分_______________________ 扩增所用的酶为______________________ 为保证鸡干扰素基因与农杆菌Ti质粒连接需要用相同的____________剪切鸡干扰素基因和_______________________19.(2)图中的抗四环素基因在步骤②中作为____________________ 步骤③中需先用_______________处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞19.(3)步骤④中科研人员证实鸡干扰素基因成功导入后可用____________________技术鉴定目的基因是否转录用____________________技术鉴定目的基因是否翻译【答案】(1)核苷酸序列, Taq酶(热稳定DNA聚合酶), 限制酶, 农杆菌Ti质粒【解析】解(1)利用PCR技术扩增干扰素基因时已知鸡干扰素基因两端的部分核苷酸序列是设计引物的前提扩增所用的酶为Taq酶(热稳定DNA聚合酶)为保证鸡干扰素基因与农杆菌Ti质粒连接需要用相同的限制酶剪切鸡干扰素基因和农杆菌Ti质粒【答案】(2)标记基因, \ Ca^2+【解析】(2)基因表达载体必需具备的成分有目的基因、标记基因、启动子、终止子和复制原点图中的抗四环素基因在步骤②中作为标记基因步骤③中需先用 Ca^2+处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞【答案】(3)分子杂交, 抗原—抗体杂交【解析】(3)步骤④中科研人员证实鸡干扰素基因成功导入后可用分子杂交技术鉴定目的基因是否转录用抗原—抗体杂交技术鉴定目的基因是否翻译20.(1)获得某种病毒的蛋白质外壳基因可以使用限制酶处理该酶的作用是____________________________________________________ 在获取病毒的蛋白质外壳基因后为了增加其数量可以采用_____________技术该技术的原理是_________________________20.(2)利用病毒的蛋白质外壳基因和农杆菌的________质粒构建基因表达载体在将病毒的蛋白质外壳基因导入马铃薯细胞之前可以在细胞周围施用酚类化合物该物质的作用是___________________________________________________________20.(3)在检测马铃薯细胞是否转入病毒的蛋白质外壳基因时可以采用如图所示的方法进行检测该检测方法称为______________技术所使用的基因探针为利用___________________基因的一条链进行放射性同位素标记如果出现图中所示的结果则说明_________________________________【答案】(1)能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开, PCR, DNA双链复制【解析】解(1)一种限制酶能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开在体外可以采用PCR技术对目的基因进行扩增【答案】(2)Ti, 吸引农杆菌移向马铃薯细胞以便农杆菌的Ti质粒上的T-DNA转移至受体细胞【解析】(2)农杆菌转化法是利用农杆菌的Ti质粒作为目的基因的载体酚类化合物能吸引农杆菌移向马铃薯细胞以便农杆菌的Ti质粒上的T-DNA转移至受体细胞【答案】(3)DNA分子杂交, 病毒的蛋白质外壳(或“目的”), 受体细胞中已经成功导入了病毒的蛋白质外壳基因【解析】(3)图示检测目的基因的方法为DNA分子杂交法21. (1)制备融合所需的B淋巴细胞时所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上则小鼠最少需要经过________次免疫后才能有符合要求的达到要求后的x、Y、z这3只免疫小献中最适合用于制备B淋巴细胞的是________小鼠理由是________21. (2)细胞融合实验过程中加入的化学诱导剂是________ 融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外可能还有________ 体系中出现多种类型细胞的原因是________ 21. (3)融合后需要2次筛选第1次筛选的目的是________ 第2次筛选的目的是________21. (4)杂交瘤细胞中有________个细胞核染色体数目最多是________条【答案】【解析】【答案】【解析】【答案】【解析】【答案】【解析】。
第十八章全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪首页习题习题参考答案习题名词解释选择题简答题一、名词解释1.荧光标记引物法2.荧光标记终止底物法3.多色荧光标记引物法4.多色荧光标记终止底物法5.Edman降解法6.Sanger双脱氧链末端终止法7.平板电泳型DNA测序仪8.毛细管电泳型DNA测序仪9.缩微生物处理器二、选择题【A型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案(最佳答案)。
1. DNA的一级结构是指();A.DNA空间构象B.核苷酸序列C.碱基序列D.氨基酸序列E.DNA双螺旋结构2. 下列有关测序反应体系反应原理的叙述中,错误的是()A.加入的核苷酸单体为2 -脱氧核苷三磷酸B.低温退火时,引物与模板形成双链区C.沿着3'-5'的方向形成新链D.DNA聚合酶结合到DNA双链区上启动DNA的合成E.形成的新生链与模板完全互补配对3. 双脱氧链末端终止法测序反应与普通体外合成DNA反应的主要区别是()A.DNA聚合酶不同B.dNTP的种类不同C.dNTP的浓度不同D.引物不同E.双脱氧链末端终止法测序反应体系中还需加入ddNTP4. 下列荧光标记方法中,可以将A、C、G、T四个测序反应在同一管中完成而不影响测序结果的是()A.单色荧光标记引物法B.单色荧光标记终止底物法C.多色荧光标记引物法D.多色荧光标记终止底物法E.多色荧光标记法5. 下列哪一荧光标记法,必需将A、T、C、G四个测序反应分管进行,但可以合并在一个泳道内电泳()A.单色荧光标记引物法B.单色荧光标记终止底物法C.多色荧光标记引物法D.多色荧光标记终止底物法E.多色荧光标记法6. 毛细管电泳型测序仪电泳时仪器显示无电流,最常见的原因是由于()A.电极弯曲B.电泳缓冲液蒸发使液面降低C.毛细管未浸入缓冲液中D.毛细管内有气泡E.测序样本未注入毛细管中7. 毛细管电泳型测序仪电泳时产生电弧,主要原因是()A.电泳缓冲液漏出B.电泳缓冲液配有误C.电极、加热板或自动进样器上有灰尘沉积D.测序样本纯化不完全,含有盐性成份E.加热板温度过高8. 全自动DNA测序仪的主要应用范围,不包括()A.人类遗传病、传染病和癌症的基因诊断B.法医的亲子鉴定和个体识别C.生物工程药物的筛选D.动植物杂交育种E.新蛋白质的鉴定9. 蛋白质测序仪的基本工作原理,主要是利用()A.Edman降解法B.双脱氧链末端终止法C.化学降解法D.氧化-还原法E.水解法10. 蛋白质测序仪主要检测()A.核苷酸序列B.核糖核酸序列C.碱基序列D.氨基酸序列E.脱氧核糖核酸序列11. 下列有关双脱氧链末端终止法测序原理的叙述中,不正确的是()A.其基本原理是利用DNA的体外合成过程B.反应体系中需加入dNTP和ddNTPC.ddNTP可以形成磷酸二酯键而掺入到DNA链中D.dNTP掺入后可导致新合成链在不同的位置终止E.生成的反应产物是一系列长度不同的多核苷酸片段12. 下列有关多色荧光标记终止底物法的叙述中,不正确的是()A.需将4种ddNTP分别用4种不同的荧光染料标记B.标记和终止过程在同一时间完成C.A、T、C、G四种反应可以在同一管中完成D.可在一个泳道内完成电泳测序E.荧光染料标记过程和延伸反应终止分别发生在同一DNA片段的两端13. 下列有关荧光标记DNA的检测原理的叙述中,不正确的是()A.用于测序的产物绝大多数应为单链B.DNA片段上的荧光基团可吸收激光束提供的能量而发射出特征波长的荧光C.两极间的电势差推动DNA片段从正极向负级泳动并达到相互分离D.不同颜色的荧光与不同的碱基信息相对应E.测序结果中,纵轴表示荧光波长种类和强度14. 下列有关Edman降解法基本原理的叙述中,错误的是()A.PTC-多肽的生成是在弱碱性条件下B.PTC-多肽的生成反应需用过量的试剂使有机反应完全C.在无水强碱的作用下,可使靠近PTC基的氨基酸环化,形成ATZ衍生物和一个失去末端氨基酸的剩余多肽D.剩余多肽链可以进行下一次以及后续的降解循环E.ATZ衍生物经水溶酸处理转化为PTH氨基酸15. 毛细管电泳型DNA测序仪电泳时仪器显示无电流,最常见的原因为()A.缓冲液配制错误B.毛细管内有气泡C.电泳缓冲液蒸发使液面降低,而未能接触到毛细管的两端D.电极弯曲而无法浸入缓冲液中E.加热板温度过高16. 在单纯以测定DNA序列为目的的全自动DNA测序仪中,广泛应用的原理是()A.Edman降解法B.双脱氧链末端终止法C.化学降解法D.氧化-还原法E.水解法17. 双脱氧链末端终止法测序的基本原理是利用()A.RT-PCRB.PCRC.Western BlotD.Southern BlotE.水解法18. 测序反应体系中加入的酶为()A.限制性内切酶B.RNA聚合酶C.DNA聚合酶D.DNA水解酶E.反转录酶19. 在普通的体外合成DNA反应体系中,加入的核苷酸单体为()A.dAMP,dCMP,dGMP,dTMPB.dADP,dCDP,dGDP,dTDPC.dATP,dCTP,dGTP,dTTPD.ddATP,ddCTP,ddGTP,ddTTPE.ddADP,ddCDP,ddGDP,ddTDP20. 双脱氧链末端终止法测序反应中除PCR反应体系成份外,还加入了()A.DNA聚合酶B.dNTPC.dNDPD.ddNTPE.ddNDP21. 在DNA自动测序中广泛应用的示踪物是()A.色素染料B.同位素C.电化学发光物质D.酶E.荧光素22. 下列有关多色荧光标记引物法标记引物的特性的叙述中,正确的是()A.四种标记引物的序列相同,但5'端标记的荧光染料颜色不同B.四种标记引物的序列相同,但3'端标记的荧光染料颜色不同C.四种标记引物的序列不同,其5'端标记的荧光染料颜色也不同D.四种标记引物的序列不同,其3'端标记的荧光染料颜色也不同E.四种标记引物的序列不同,其2'端标记的荧光染料颜色也不同23. 下列有关多色荧光标记引物法的叙述中,不正确的是()A.需将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的5'端B.四种引物的序列相同,但标记的荧光染料颜色不同C.A、T、C、G四个测序反应必需分管进行D.上样时需分别在不同泳道内电泳E.特定颜色荧光标记的引物则与特定的双脱氧核苷酸底物保持对应关系24. 一般来说,DNA测序图中,其横坐标和纵坐标的意义是()A.横坐标代表荧光波长种类,纵坐标代表时间B.横坐标代表荧光波长种类和强度,纵坐标代表时间C.横坐标代表时间,纵坐标代表荧光波长种类D.横坐标代表时间,纵坐标代表荧光波长种类和强度E.横坐标代表荧光波长种类,纵坐标代表荧光波长强度25. 下列有关DNA自动测序仪自动进样器区功能的叙述中,不正确的是()A.毛细管进入样品盘标本孔中进样依靠自动进样器的移动完成B.电极和毛细管一般均固定不动C.两级间极高的电势差可促进DNA分子在毛细管中很快泳动D.电极为电泳的正性电极E.样品盘有48孔和96孔两种,可一次性连续测试48或96个样本26. 下列有关DNA自动测序仪凝胶块区功能的叙述中,不正确的是()A.电泳时缓冲液阀关闭B.电极为电泳的正性电极C.在分析每一个样品前,泵自动冲掉上一次分析用过的胶,灌入新胶D.注射器驱动杆可给注射器提供正压力,将注射器内的凝胶注入毛细管中E.玻璃注射器可储存凝胶高分子聚合物以及在填充毛细管时提供必要的压力27. 平板电泳型DNA测序仪的测序长度一般为()A.600bp~900bpB.400bp~600bpC.200bp~400bpD.900bp~1000bpE.300bp~500bp28. 毛细管电泳型DNA测序仪的测序长度一般为()A.600bp~900bpB.400bp~600bpC.200bp~400bpD.900bp~1000bpE.300bp~500bp【X型题】每题的备选答案中有两个或者两个以上正确答案。
dna自动测序基本原理概论试题及答案一、选择题1. DNA自动测序技术中,常用的测序方法是()。
A. Sanger测序B. Maxam-Gilbert测序C. 质谱测序D. 所有选项答案:D2. 在Sanger测序法中,使用的终止核苷酸是()。
A. dNTPsB. ddNTPsC. rNTPsD. aNTPs答案:B3. DNA测序中,用于标记DNA链的荧光染料通常附加在()。
A. 引物B. 模板DNAC. 终止核苷酸D. 酶答案:C二、填空题1. DNA自动测序技术能够快速准确地测定DNA序列,其基本原理是通过使用带有不同荧光标记的终止核苷酸来确定DNA链的________。
答案:末端碱基2. 在自动测序过程中,DNA聚合酶在模板DNA上合成新的DNA链,当遇到终止核苷酸时,合成停止,此时的终止核苷酸对应的荧光标记会被________。
答案:检测三、简答题1. 简述Sanger测序法的测序原理。
答案:Sanger测序法的原理是利用DNA聚合酶在模板DNA上合成新的DNA链,同时使用四种不同荧光标记的终止核苷酸(ddNTPs),每种终止核苷酸对应一种碱基。
当DNA聚合酶遇到终止核苷酸时,合成停止,根据荧光标记的不同,可以确定该位置的碱基类型。
2. 在DNA测序中,为什么需要使用终止核苷酸?答案:使用终止核苷酸的目的是为了在DNA合成过程中,在特定的位置终止链的延伸,从而产生一系列长度不同的DNA片段。
这些片段的末端碱基由终止核苷酸决定,通过检测这些终止核苷酸的荧光标记,可以确定DNA序列。
四、论述题1. 论述DNA自动测序技术在生物医学研究中的应用。
答案:DNA自动测序技术在生物医学研究中有着广泛的应用。
首先,它可以用于基因组测序,帮助科学家了解生物体的遗传信息和基因结构。
其次,在疾病诊断和治疗方面,通过测序技术可以识别与疾病相关的基因突变,为个性化医疗提供依据。
此外,测序技术还可以用于遗传病的筛查、病原体的鉴定、以及药物靶点的发现等。
全自动DNA测序仪的原理和应用1. 前言DNA测序技术是现代生物学、医学研究中的重要工具之一。
随着技术的不断进步,全自动DNA测序仪在DNA测序领域占据重要地位。
本文将介绍全自动DNA测序仪的原理和应用。
2. 原理全自动DNA测序仪基于Sanger测序技术,通过离心分离、扩增和合成等步骤来获取DNA序列信息。
其原理主要包括以下几个步骤:2.1 模板制备全自动DNA测序仪需要将待测的DNA样品进行模板制备。
一般采用PCR(聚合酶链式反应)技术来扩增目标DNA片段,以增加其浓度和复制数目。
2.2 扩增产物净化PCR扩增产生的扩增产物中会包含引物和杂质,需要进行净化处理。
常用的方法是利用凝胶电泳分离扩增产物,并使用各类商业化学试剂盒进行提取和净化操作。
2.3 DNA片段测序将净化后的DNA片段进行测序。
全自动DNA测序仪采用Dye-termination测序方法,使用一系列特殊的引物,通过DNA链延伸过程中的不同颜色发光来标记每个碱基。
之后,仪器会通过激光扫描读取每个碱基的发光信号。
2.4 数据分析与测序结果全自动DNA测序仪会生成一系列的发光数据,这些数据需要进行分析和处理。
通常会使用相关软件进行碱基识别、序列拼接和测序结果的校正等步骤,从而获得准确的DNA序列信息。
3. 应用全自动DNA测序仪广泛应用于各个领域,例如:3.1 生物学研究在生物学研究中,全自动DNA测序仪可以用于基因组测序、转录组测序、蛋白质相互作用的研究等。
通过测序获得的DNA序列信息可以帮助研究者了解生物体的遗传信息、功能和相互关系。
3.2 医学领域在医学领域,全自动DNA测序仪可以用于诊断遗传性疾病、癌症等疾病的基因突变。
通过测序可以快速准确地分析患者的基因组信息,从而为临床医生提供准确的诊断和治疗方案。
3.3 农业和食品安全全自动DNA测序仪在农业和食品安全领域也有广泛的应用。
它可以用于鉴定转基因作物、检测食品中的基因改造成分、追溯食品来源,保证食品安全和品质。
临床分子生物学检验智慧树知到期末考试答案章节题库2024年湖南师范大学1.人类基因计划的大部分测序工作是利用YAC实现的。
()答案:错2.线粒体病主要累及大脑和肌肉组织。
()答案:对3.HER2可作为早期诊断乳腺癌的参考依据。
()答案:对4.荧光原位杂交可同时检测多种靶序列。
()答案:对5.TPMT与嘧啶类药物的疗效和毒副作用密切相关。
()答案:错6.Northerm 杂交检测靶序列是RNA。
()答案:对7.高通量表面增强激光解吸电离飞行时间质谱可获得“癌症指纹”信息。
()答案:对8.葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症呈X染色体连锁不完全隐性遗传。
()答案:错9.PCR是已知突变检测的“金标准”。
()答案:错10.结核杆菌分子生物学检测包括特异性基因检测和耐药基因检测。
()答案:对11.电喷雾质谱技术是一种软电离技术。
()答案:对12.核糖体蛋白是基于MALDI-TOF-MS进行细菌鉴定的主要标志物。
()答案:对13.实时荧光定量PCR引物的最适长度为15~30nt。
()答案:错14.肺癌的诊断主要依靠分子生物学检验。
()答案:错15.逆转录病毒的基因组是单倍体。
()答案:错16.染色体的形态最典型和清晰的阶段是有丝分裂间期。
()答案:错17.PCR 技术的本质是核酸重组技术。
()答案:错18.双脱氧链终止法测序需要加入双脱氧核苷酸。
()答案:对19.Tm 主要与 A-T 含量有关。
()答案:错20.产前诊断的金标准是对羊水或脐带血细胞进行染色体核型分析。
()答案:对21.16SrRNA基因作为细菌分类鉴定的靶基因的优点有()答案:多信息###长度适中###多拷贝22.关于沙眼衣原体的分子生物学检验,正确的是()答案:RAPD技术不适用于血清学分型###PCR扩增靶基因序列主要有外膜蛋白基因、隐蔽性质粒DNA和16S rRNA基因序列###PCR-RFLP可用于CT分型###LCR技术适合于高危人群普查时大批量标本的检测23.SELDI-TOF-MS中蛋白质芯片系统的组成主要包括()答案:芯片###芯片阅读器###分析软件24.CYP450基因分型检测的分子生物学方法有()答案:实时荧光定量PCR###等位基因特异性PCR###基因芯片###PCR-RFLP25.临床分子生物学实验室检测方法的选择原则包括()答案:根据本地区患者的承受能力选择###根据实验室的技术特点选择###根据检测目的选择###根据实验室的实验条件选择26.PML-RARa融合基因常用的检测方法有()答案:RT-PCR###荧光原位杂交###荧光定量PCR27.原癌基因激活的机制包括()答案:易位激活###癌基因甲基化程度降低###原癌基因扩增###点突变28.法医物证学的主要内容有()答案:种族和种属认定###性别鉴定###个体识别###亲子鉴定29.关于DHPLC技术的描述正确的是()答案:灵敏度和特异性高###自动化程度高###是分析异质性突变的首选方法###可实现高通量检测30.理想的质控品应满足以下要求()答案:稳定、价廉、同一批次可大量获得###无已知的生物传染危害性###基质与待测样本一致###阳性质控品所含待测物浓度接近试验的决定性水平###靶值或预期结果已知31.乙型肝炎病毒的核酸类型是()答案:双股DNA32.TPMT是下列哪类药物在体内代谢的关键酶()答案:嘌呤类33.采集用于PCR检测的血清样本时,不宜选择使用的抗凝剂是()答案:肝素34.奥美拉唑在体内代谢主要受哪种药物代谢酶的影响?()答案:CYP2C1935.PCR的退火温度通常比引物的Tm值()答案:低约5℃36.HLAI类抗原的特异性取决于()答案:α重链37.可以用来分辨16SrRNA基因不能鉴别的非常接近的菌种和种内菌株的是()答案:16S-23S rRNA基因38.单细胞基因扩增一般采用下列哪项技术增加检测的敏感性和特异性()答案:巢式PCR39.Southern 印迹杂交中常用的核酸变性剂是()答案:氢氧化钠40.DNA指纹的分子遗传学基础是()答案:DNA的多态性41.新一代测序技术最显著的特点是()答案:高通量42.微卫星异常的检测方法有()答案:DNA测序43.PCR的引物Tm值的计算公式为()答案:Tm= 2(A+T)+4(G+C)44.PCR循环中的延伸时间取决于()答案:扩增产物的长度45.线粒体基因组22个tRNA可转录几种tRNA ()答案:20种46.保证结果准确可靠的先决条件是()答案:分析前质量控制47.肿瘤的分子诊断策略有()答案:检测肿瘤相关基因48.在PGD中诊断单基因疾病的主要手段是()答案:单细胞PCR技术49.焦磷酸测序法突出的优势是()答案:较长的读长50.寡核苷酸探针的最大优势是()答案:可以区分仅仅一个碱基差别的靶序列51.非整倍体筛选的诊断方法主要借助于下列哪项技术()答案:FISH52.乙型肝炎病毒可分为多少个基因型?()答案:853.TaqMan 探针技术要求扩增片段应为()答案:50~150bp54.目前对肺癌遗传易感性主要集中在如下哪几个领域()答案:DNA修复能力55.临床分子生物学检验的核心技术是()答案:核酸扩增技术56.临床分子生物学检验标准化的前提是()答案:标准品57.临床基因扩增检验实验室设计的原则主要包括()答案:分区设置###控制空气流向58.质量管理体系文件具有法规性、唯一性和时效性三大特性。
临床医学检验:临床检验仪器真题1、问答题常用的离心方法分几类?正确答案:常用的离心方法大致可分为平衡离心法、等密度离心法、经典式沉降平衡离心法等三类。
2、问答题简述蛋白质测序仪的主要应用。
正确答案:蛋白质测序仪(江南博哥)获得的蛋白质序列信息主要应用在以下三个方面。
(1)新蛋白质的鉴定:在凝胶电泳中出现的未知条带可以利用蛋白质测序仪来测定其序列,为探索蛋白质的功能提供线索。
(2)分子克隆探针的设计:是蛋白质序列信息的基本用途之一。
用蛋白质序列信息设计PCR引物和寡核甘酸探针。
可以利用这些探针进行cDNA文库或基因组文库的筛选。
(3)抗原的人工多肽合成:由合成多肽免疫产生的抗体常用来证实和纯化新发现的蛋白质。
此外,合成的多肽类似物能够揭示蛋白质重要结构特征和提示蛋白质的功能特性。
3、问答题第三代自动血培养仪有哪些性能特点?正确答案:(1)培养基营养丰富;(2)以连续、恒温、振荡方式培养,细菌易于生长;(3)培养瓶多采用不易碎材料制成,提高了使用的安全性;(4)采用封闭式非侵入性的瓶外监测方式,避免标本交叉感染,且无放射性污染;(5)自动连续监测,缩短了检测时间,阳性标本检测可快速、准确;(6)结果报告及时,85%以上的阳性标本能在48小时内被检出;(7)培养瓶多采用双条形码技术,只需用电脑上的条码阅读器扫描报告单上的条码,就可直接查询到病人的结果及生长曲线;(8)培养瓶可随时放入培养系统,并进行追踪检测;(9)数据处理功能较强,数据管理系统随时监测感应器的读数,依据数据的变化来判定标本的阳性或阴性,并可进行流行病学的统计分析;(10)设有内部质控系统,可保证仪器的正常运转;(11)可进行血液及所有无菌体液的细菌培养检测。
4、单选库尔特原理中血细胞的电阻与电解质溶液电阻的关系是OoA.相等B.大于C.小于D.大于或等于E.小于或等于正确答案:B5、问答题电泳技术根据分离原理如何分类?正确答案:根据分离原理可分为移界电泳、区带电泳、等速电泳、等电聚焦、免疫电泳等。
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内容介绍:商品简介商品编码:pdf94281 出版社:中国知识出版社 册 数: 作者:中国医科大学医学工程教授2 / 13出版时间:2013 年 3 月 印刷时间 2013 年 3 月 isbn: 版次:第二版 装帧:精装 纸张:胶版纸 印次:第二次 页数: 正文语种:中文 开本:16 开 目录 最新国内外医疗 器械原理图解与操作标准及维修技术实用全书 最新国内外医疗器械原理图解与操作标准及维修技术实用全书 第一篇 医疗电子仪器原理图解与操作标准及维修技术 第一章 概论 第二章 医用传感器 第三章 心电仪器 第四章 医用监护仪器 第五章 脑电图机 第六章 医用 CT 机3 / 13第七章 医用超声诊断仪器 第八章 核医学仪器 第九章 医用电子仪器操作安全第二篇 医疗电动仪器原理图解 与操作标准及维修技术 第一章 口腔科设备 第二章 离心机 第三章 呼吸机 第四章 麻醉机 第五章 血液透析机 第六章 血液分析仪器 第七章 体外循环机第三篇 临床医疗仪器原理图解与操作标准 及维修技术 第一章 医用遥测设备 第二章 医用激光器 第三章 医用 X 线电视 第四章 核磁共振成像设备 第五章 听力检查仪器 第六章 耳聋与康复设备 第七章 红外线探测器 第八章 血流量测量仪器第四篇 临床检验常规仪器原理图解与 操作标准及维修技术 第一章 自动生化分析仪4 / 13第二章 徽生物快速检测仪 第三章 生物安全柜 第四章 免疫分析仪 第五章 电化学临床分析仪器 第六章 尿液分析仪器第五篇 理疗、治疗仪器原理与操作标准 及维修技术 第一章 光线治疗机 第二章 电疗机 第三章 磁疗机 第四章 康复治疗仪器 第五章 人工心肺机 第六章 体外碎石机 第七章 放射治疗机第六篇 医用色谱仪、电泳仪、显徽镜原理 与操作标准及维修技术 第一章 色谱仪器 第二章 电泳仪 第三章 毛细管电泳仪 第四章 光学显徽镜 第五章 电子显徽镜第七篇 生化检验仪器原理与操作标准及维 修技术 第一章 GD—821 型光电比色计 第二章 DU 型临床生化分析仪5 / 13第三章 紫外—可见光光度计 第四章 质谱仪 第五章 酸度计 第六章 PC—603 型血细胞计数器 第七章 磁共振波谱分析仪 第八章 计数器 第九章 荧光分析仪器 第十章 原子光谱分析仪第八篇 医用 X 线检查设备原理与操作 标准及维修技术 第一章 医用 X 线检查设备的结构、基本原理 第二章 X 线发生器主要参量的检测与调校 第三章 X 线检查设备的维护和质量控制 第四章 X 线检查设备的故障及检修方法 第五章 X 线发生器低压系统 第六章 X 线发生器高压系统 第七章 工频 X 线发生器故障检修综合举例 第八章 中高频 X 线发生器故障检修 第九章 附属设备的故障检修 第十章 X 线影像增强、电视系统故障检修 第十一章 牙科 X 线机的故障检修 第十二章 口腔曲面体层 X 线机第九篇 细胞、分子生物学仪器 原理与操作标准及维修技术6 / 13第一章 培养箱 第二章 PCR 基因扩增仪 第三章 全自动 DNA 测序仪和蛋白质自动测序仪 第四章 流式细胞仪巨邦文化发展有限公司服务宗旨 让客户“买得放心、买得开心”是本公司的一贯服务宗旨,而 且,我们也会始终将这一宗旨贯彻到底,并赋与其更丰富的涵 义。
2023-2024学年人教版高中生物单元测试学校 __________ 班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________注意事项1.答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息;2.请将答案正确填写在答题卡上;一、选择题(本大题共计18小题每题3分共计54分)1.下列有关蛋白质提取和分离的叙述错误的是()A. 透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性B. 蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移动C. 差速离心法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离D. 采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来【答案】B【解析】解 A.透析的原理是透析袋是半透膜小分子杂质可以自由进出大分子蛋白质则留在袋内 A正确B.蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动因此通过电泳可以将带电性质不同的蛋白质分离 B错误C.差速离心法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离 C正确D.采用透析法可以使蛋白质与其他小分子化合物分离开来 D正确故选 B2.研究人员比较了不同储藏条件对棉叶DNA纯度及提取率(提取率越高获得的DNA越多)的影响实验结果如图所示下列有关叙述错误的是()A. 提纯DNA时可加入酒精去除蛋白质等物质B. 新鲜棉叶提取的DNA纯度最高提取DNA的量也最多C. 可利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同的原理进行提纯D. 用二苯胺试剂鉴定蓝色最深的是冷冻3d处理后提取的DNA【答案】B【解析】解 A.DNA不溶于酒精因此提纯DNA时可加入酒精去除溶于酒精的蛋白质等物质 A正确B.新鲜棉叶提取的DNA纯度最高但提取率不是最高的 B错误C.在不同浓度的NaCl溶液中DNA的溶解度不同因此不同浓度的NaCl溶液可用于提纯DNA C正确D.冷冻3d处理后提取的DNA量是最多的因此用二苯胺试剂鉴定蓝色最深的是冷冻3d 处理后提取的DNA D正确故选 B3.下列有关生物学实验的描述错误的是()A. 在DNA粗提取与鉴定实验中往试管中加入NaCl、丝状物和二苯胺试管震荡后会出现蓝色B. PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定当结果出现了不止一条带时可能是由于模板DNA出现污染C. 在菊花进行组织培养过程中接种时注意外植体的方向不能倒插D. 只要得到了2个及以上菌落数目在30~300的平板就说明系列稀释操作成功【答案】A【解析】解 A.DNA用二苯胺试剂鉴定时在沸水浴中加热2min后可观察到蓝色反应 A 错误B.PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定当结果出现了不止一条带时可能是由于模板DNA出现污染 B正确C.在菊花进行组织培养过程中接种时需要注意外植体的方向不能倒插 C正确D.只要得到了2个及以上菌落数目在30~300的平板就说明系列稀释操作成功 D正确故选 A4.PCR是一种体外扩增DNA的技术模拟了体内的DNA复制过程如图为PCR技术原理示意图对于图中物质和过程说明错误的()A. 物质a 游离的脱氧核苷酸B. 过程① 氢健断裂C. 过程② 边解旋边复制D. 过程③ 遵循碱基配对原则【答案】C【解析】A、PCR模拟了体内的DNA复制所以a是DNA复制的原料脱氧核糖核苷酸 A 正确B、在94℃高温条件下 DNA分子双螺旋解开形成单链此时氢键断裂 B正确C、体外模拟DNA的复制依据了DNA的热变性原理该过程DNA分子不是边解旋边复制的过程 C错误D、DNA复制需要遵循碱基互补配对的原则 D正确5.下列有关分离血红蛋白的操作错误的是()A. 色谱柱内不能有气泡存在一旦发现有气泡必须重装B. 凝胶用自来水充分溶胀后配成凝胶悬浮液C. 可将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热至沸腾以加快凝胶膨胀D. 加样后打开色谱柱下端的出口使样品渗入凝胶床内【答案】B【解析】解 A.气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序降低分离效果若有色谱柱内有气泡需重新装填 A正确B.凝胶应直接放在洗脱液中充分溶胀配成凝胶悬浮液 B错误C.为了加速凝胶膨胀可以将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热至接近沸腾这种方法可节约时间 C正确D.加样后打开色谱柱下端的出口使样品渗入凝胶内等样品完全进入凝胶层后关闭下端出口 D正确故选 B6.PCR技术作为基因工程中获取目的基因常用的方法在生产生活中得到广泛应用下列说法正确的是()A. 用PCR技术扩增目的基因时不必知道基因的全部序列B. PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应C. PCR技术中的变性是指DNA聚合酶的空间结构发生改变D. 利用PCR技术扩增形成的目的基因中一定没有启动子【答案】A【解析】解 A.只要设计出目的基因的引物接下来即可自动进行而不必知道其全部序列A正确B.PCR反应中温度的周期性改变是为了变性、复性、延伸而不是为了DNA聚合酶催化不同的反应 B错误C.变性过程中破坏的是DNA分子的空间结构 C错误D.利用PCR技术扩增形成的目的基因中分为编码区和非编码区可能含有启动子 D错误故选 A7.关于血红蛋白分子组成的叙述正确的是()A. 两个alpha 肽链、两个beta 肽链、一个亚铁血红素基团B. 一个alpha 肽链、三个beta 肽链、四个亚铁血红素基团C. 两个alpha 肽链、两个beta 肽链、四个亚铁血红素基团D. 两个alpha 肽链、两个beta 肽链、两个亚铁血红素基团【答案】C【解析】解由以上分析可知血红蛋白分子由四条链(两条\alpha 链和两条\beta 链)和四个亚铁血红素基团组成.故选 C.8.下列有关PCR技术的叙述错误的是()A. 每一次循环后目的基因的数量可以增加一倍B. PCR反应过程中需要3个不同的温度范围C. PCR反应过程中加入的酶的显著特性是耐高温D. 模板DNA和引物能在每一次扩增中重复使用【答案】D【解析】解 A.PCR过程中DNA数量的增加呈指数增长所以一次循环可使目的基因的量增加一倍 A正确B.PCR反应过程中需要3个不同的温度范围 90℃~95℃使模板DNA变性、解链 55℃~60℃复性(引物与DNA模板链结合) 70℃~75℃引物链延伸 B正确C.PCR反应过程中加入的酶的显著特性是耐高温 C正确D.PCR中模板DNA序列可反复在每一次循环中用作模板而每一次循环用到的引物都会一直成为产物DNA中的一部分序列在下一个反应循环中作为模板DNA 所以不可重复作为引物 D错误故选 D9.关于DNA粗提取与鉴定实验的有关说法错误的是()A. 实验中提取较纯净的DNA利用了DNA溶于氯化钠但不溶于酒精的特点B. 实验加洗涤液的作用是使细胞膜破裂蛋白质变性蛋白质与DNA分离开来C. 对最后提取出的DNA用二苯胺鉴定时无需沸水水浴加热D. 提取得到的DNA与二苯胺反应后呈蓝色【答案】C【解析】A、实验中提取较纯净的DNA利用了DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同 NaCl溶液在0.14mol/L时溶解度最低 DNA不溶于酒精的特点 A正确B、实验加洗涤液的作用是瓦解细胞膜蛋白质变性蛋白质与DNA分离开来 B正确C、在沸水浴加热条件下 DNA与二苯胺反应呈现蓝色 C错误D、沸水浴加热条件下 DNA与二苯胺反应呈现蓝色 D正确10.实验室常用PCR技术对DNA进行体外扩增下列相关叙述正确的是()A. 95℃时DNA的磷酸二酯键断开B. 引物与模板结合后向引物的3′端延伸C. 反应过程包括变性→延伸→复性D. 需要解旋酶和耐高温的DNA聚合酶【答案】B【解析】A、95℃时DNA的氢键断开磷酸二酯键没有断裂 A错误B、引物与模板结合后向引物的3′端延伸 B正确C、反应过程包括变性→复性→延伸 C错误D、PCR操作过程中不需要解旋酶 D错误11.关于下列实验的叙述正确的是()A. DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最大在无水酒精中溶解度最小B. 可通过观察溴麝香草酚蓝水溶液是否变色来判断酵母菌的呼吸方式C. 鉴定花生子叶脂肪时苏丹Ⅲ染液染色前需先用50%的酒精对子叶进行处理D. 观察植物细胞有丝分裂实验 15%的盐酸和95%的酒精混合液使细胞相互分离开来【答案】D【解析】A、DNA在0.14mol/L Nl溶液中溶解度最小 A错误B、酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸都可以产生二氧化碳都可使漠麝香草酚蓝水溶液变色不可判断呼吸方式 B错误C、花生子叶脂肪鉴定实验中苏丹Ⅲ染液染色后需先用50%的酒精洗去浮色 C错误D、解离液由盐酸和酒精组成目的是使组织细胞相互分离 D正确故选D.12.聚合酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术下列有关PCR过程的叙述中不正确的是()A. 变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键B. PCR与细胞内DNA复制相比所需酶的最适温度较高C. 延伸过程需要的是耐高温的DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸D. 复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成【答案】C【解析】解 A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键使DNA双链得以打开 A正确B.PCR技术是在较高温度下进行的因此PCR与细胞内DNA复制相比所需要聚合酶具有更高的耐热性 B正确C.延伸过程需要加入热稳定DNA聚合酶(Taq酶)、ATP、四种脱氧核苷酸 C错误D.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的 D正确故选 C13.在DNA的粗提取过程中先后两次向烧杯加入蒸馏水的作用分别是()A. 稀释血液冲洗样品B. 使血细胞破裂降低NaCl浓度使DNA析出C. 使血细胞破裂增大DNA溶解量D. 使血细胞破裂提取含杂质较少的DNA【答案】B【解析】解在DNA粗提取的实验中先后两次向烧杯中加入蒸馏水的作用分别是使血细胞吸水涨破释放DNA 降低NaCl浓度使DNA析出故选 B14.凝胶色谱法是根据()分离蛋白质的有效方法A. 分子的大小B. 相对分子质量的大小C. 带电荷的多少D. 溶解度【答案】B【解析】解凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道路程长移动的速度慢相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道路程短移动的速度快因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离故选 B15.RT﹣PCR技术是确诊新冠肺炎患者的核酸检测手段(如图)该技术首先将病毒COVID﹣19的核酸通过逆转录形成DNA 然后以此DNA链为模板进行体外DNA复制反应体系中加入的荧光基团会使目标DNA发光从而被仪器检测到下列叙述错误的是()A. 病毒COVID﹣19的遗传物质中含有尿嘧啶核苷酸B. 检测过程中需要核糖核苷酸和脱氧核苷酸做为原料C. RT﹣PCR反应体系中含有逆转录酶和DNA聚合酶D. 相同反应时间内目标DNA含量与病毒含量呈正相关【答案】B【解析】A、病毒COVID﹣19的遗传物质是RNA 因此其中含有尿嘧啶核糖核苷酸 A正确B、检测过程中需要脱氧核苷酸做为原料不需要核糖核苷酸 B错误C、该技术首先将病毒COVID﹣19的核酸通过逆转录形成DNA(该过程需要逆转录酶)然后以此DNA链为模板进行体外DNA复制(该过程需要DNA聚合酶)因此RT﹣PCR反应体系中含有逆转录酶和DNA聚合酶 C正确D、相同反应时间内目标DNA含量与病毒起始含量呈正相关 D正确16.下列关于生物学实验正确的是()A. 探究不同类型土壤中小动物丰富度的实验取样器大小是无关变量使用不同的取样器会得到相同的结论B. DNA溶于酒精溶液而细胞中的蛋白质不溶于酒精溶液利用这一原理可以将DNA与蛋白质进一步分离C. 估测土壤浸出液中的细菌数量可采用稀释涂布平法直接统计出细菌数目D. 用纸层析法分离叶绿体中色素的结果中黄绿色色带距离点样处最近表明叶绿素b在层析液中含量最少【答案】A【解析】 A 、探究不同类型土壤中小动物丰富度的实验取样器大小是无关变量使用不同的取样器会得到相同的结论 A正确B、DNA不溶于酒精溶液而细胞中的蛋白质溶于酒精溶液利用这一原理可以将DNA与蛋白质进一步分离 B错误C 、估测土壤浸出液中的细菌数量可采用稀释涂布平板法但是统计出细菌数目需要乘以稀释的倍数再除以涂布溶液的体积 C错误D、用纸层析法分离叶绿体中色素的结果中黄绿色色带距离点样处最近表明叶绿素b 在层析液中的溶解度最小 D错误17.下列有关实验的叙述正确的是()A. 制作洋葱表皮细胞和口腔上皮细胞临时装片时都需要滴加清水B. 探究温度对唾液淀粉酶活性影响的实验各实验组pH只需要控制相同即可C. 选取经低温诱导的洋葱根尖制成的临时装片在显微镜下观察不到联会现象D. 酵母菌呼吸方式为兼性厌氧型改变培养液氧气供应对酵母菌种群的K值没有影响【答案】C【解析】 A 、制作口腔上皮细胞临时装片时都需要滴加生理盐水 A错误B、探究温度对唾液淀粉酶活性影响的实验中温度是自变量 pH为无关变量无关变量要相同且适宜因此各实验组pH不仅需要控制相同还要适宜 B错误C 、洋葱根尖细胞通过有丝分裂方式增殖而有丝分裂过程不会发生联会现象因此选取经低温诱导的洋葱根尖制成的临时装片在显微镜下观察不到联会现象 C正确D、酵母菌呼吸方式为兼性厌氧型改变培养液氧气供应会改变酵母菌的代谢和繁殖速度因此对酵母菌种群的K值有影响 D错误18.SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS的作用是()A. 增大蛋白质的相对分子质量B. 改变蛋白质的形状C. 掩盖不同种蛋白质间的电荷差别D. 减少蛋白质的相对分子质量【答案】C【解析】解 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS的作用是掩盖不同种蛋白质间的电荷差别使SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移速率完全取决于分子大小故选 C二、解答题(本大题共计6小题每题10分共计60分)19.(1)采集猪血时要加入________防止血液凝固19.(2)样品处理中红细胞的洗涤要用________反复冲洗、离心目的是________ 向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH7.0的缓冲液并充分搅拌可以破碎红细胞破碎细胞的原理是________19.(3)血红蛋白粗分离阶段透析的目的是________ 若要尽快达到理想的透析效果可以________19.(4)电泳利用了待分离样品中各种分子的________等的差异而产生不同迁移速度实现各种分子的分离19.(5)一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如上图所示由图可知携带者有________种血红蛋白从分子遗传学的角度作出的解释是________【答案】柠檬酸钠【解析】采集猪血时要加入柠檬酸钠防止血液凝固【答案】生理盐水, 去除杂蛋白, 渗透原理(当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时细胞吸水涨破)【解析】样品处理中红细胞的洗涤要用生理盐水反复冲洗、离心目的是去除杂蛋白根据渗透作用原理将红细胞置于低渗溶液中红细胞会吸水涨破释放出血红蛋白【答案】除去小分子杂质, 增加缓冲液的量或及时更换缓冲液【解析】血红蛋白粗分离阶段透析的目的是除去样品中的小分子杂质可通过增加缓冲液的量或及时更换缓冲液等方法缩短透析时间能尽快达到理想的透析效果【答案】带电性质以及分子大小、形状【解析】由于各种分子带电性质以及分子大小、形状等的差异在电泳过程中会产生不同的迁移速度从而实现各种分子的分离【答案】2, 携带者具有(控制血红蛋白的)一对等位基因可以控制合成两种不同的蛋白质【解析】根据图示可知镰刀型细胞贫血症的携带者含有两种血红蛋白原因是携带者具有(控制血红蛋白的)一对等位基因分别控制合成两种不同的蛋白质20.(1)叶绿体基因工程的核心是构建基因表达载体表达载体中除目的基因外还必须有启动子、终止子、复制原点、________等启动子的作用是________ 叶绿体DNA上的基因在结构和表达方式等方面有原核细胞基因的特性若目的基因来源于真核生物则往往选用目的蛋白对应的cDNA片段而不是基因组DNA片段作为目的基因原因是________20.(2)将目的基因导入烟草细胞叶绿体时要穿过多层生物膜因而常将包裹在金属颗粒表面的表达载体轰击进入叶绿体提高转化效率该方法称为________20.(3)检测目的基因是否成功导入受体细胞的叶绿体时实验组以待测的样本DNA为模板使用目的基因的特异性引物进行PCR扩增同时将以目的基因片段为模板的组别作为阳性对照组将以________为模板的组别作为阴性对照组若________ 则说明目的基因导入成功20.(4)转入叶绿体中的基因________(填“会”或“不会”)随花粉传递给子代理由是________【答案】(1)标记基因, RNA聚合酶识别和结合的位点驱动基因转录, cDNA无内含子在结构和表达方式等方面与原核细胞基因相似【解析】解(1)基因表达载体包括且的基因、终止子、启动子、标记基因等启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点驱动基因转录叶绿体DNA上的基因在结构和表达方式等方面有原核细胞基因的特性若目的基因来源于真核生物则往往选用目的蛋白对应的cDNA片段而不是基因组DNA片段作为目的基因因为cDNA无内含子在结构和表达方式等方面与原核细胞基因相似【答案】(2)基因枪法【解析】(2)基因枪法是用压缩气体动力产生一种冷的气体冲击波进入轰击室把粘有DNA的细微金粉打向细胞穿过细胞壁、细胞膜、细胞质等层层构造到达细胞核完成基因转移【答案】(3)导入空载体的叶绿体DNA, 实验组与阳性对照组的结果一致且阴性对照组无扩增产物【解析】(3)如果其将目的基因导入了受体那待测DNA中就会含有目的基因就可以通过PCR扩增形成相应的条带同时将以目的基因片段为模板的组别作为阳性对照组将以导入空载体的叶绿体DNA为模板的组别作为阴性对照组若实验组与阳性对照组的结果一致且阴性对照组无扩增产物则说明目的基因导入成功【答案】(4)不会, 叶绿体基因属于细胞质基因只通过母本遗传给后代【解析】(4)叶绿体基因属于细胞质基因只通过母本遗传给后代转入叶绿体中的基因不会随花粉传递给子代21.(1)人体内血红蛋白呈现红色的原因是四条肽链均含有________欲对血红蛋白进行提取和鉴定需经过样品处理、________、纯化和纯度鉴定四步样品处理过程中分离血红蛋白溶液时用需过滤除去________ 分离出的红色透明液体需进行透析透析的目的是________或用于更换样品的缓冲液21.(2)血红蛋白的释放需要用到试剂________和________在凝胶色谱分离蛋白质过程中如果________ 说明色谱柱制作成功在判断纯化的蛋白质是否达到要求需要对蛋白质进行纯度鉴定在鉴定的方法中使用较多的是________ 其中用到的SDS的作用是________【答案】血红素, 粗分离, 脂溶性沉淀, 除去样品中分子量较小的杂质【解析】血红蛋白由四条肽链组成每一条肽链环绕一个亚铁血红素基团故人体内血红蛋白呈现红色的原因是四条肽链均含有血红素欲对血红蛋白进行提取和鉴定需经过样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定四步样品处理过程中分离血红蛋白溶液时用需过滤除去脂溶性沉淀分离出的红色透明液体需进行透析透析的目的是除去样品中分子量较小的杂质或用于更换样品的缓冲液【答案】蒸馏水, 甲苯, 红色区带均匀一致地移动, SDS﹣聚丙烯酰胺凝胶电泳, SDS能与各种蛋白质形成蛋白质﹣SDS复合物 SDS所带负电荷的量大大超过蛋白质分子原有的电荷量因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差别使电泳迁移速率完全取决于分子大小【解析】血红蛋白的释放需要用到试剂蒸馏水和甲苯在蒸馏水和甲苯作用下红细胞破裂释放出血红蛋白在凝胶色谱分离蛋白质过程中如果红色区带均匀一致地移动说明色谱柱制作成功在判断纯化的蛋白质是否达到要求需要对蛋白质进行纯度鉴定在鉴定的方法中使用较多的是SDS﹣聚丙烯酰胺凝胶电泳其中用到的SDS的作用是SDS能与各种蛋白质形成蛋白质﹣SDS复合物 SDS所带负电荷的量大大超过蛋白质分子原有的电荷量因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差别使电泳迁移速率完全取决于分子大小22.(1)引物是PCR技术中的关键物质利用PCR技术扩增某个致病基因时所设计的一对引物必须具备___________________________________________和__________________________________的特点22.(2)将PCR所需的物质准备完毕后在PCR仪上用94~96℃的温度预热5min 其目的是_______________________________ 温度降低到50~60℃后发生___________________________ 将温度回升至72℃反应体系中的______________酶催化________________________________合成双链 DNA22.(3)多重PCR技术在一个反应体系中使用两对以上的引物可应用于检测食品中的多种致病菌原因是___________________________________________________________________________ ______________________________________________________________【答案】(1)两种引物分别与致病基因的两条单链配对, 两种引物间不能互补配对【解析】解(1)利用PCR技术扩增某个致病基因时引物之间不能互补配对且两种引物应分别与目的基因的两条链互补配对【答案】(2)利用高温使DNA变性形成单链片段, 引物与模板链的结合, 热稳定DNA聚合(或Taq), dNTP(dATP、dTTP、dCTP、dGTP)(或4种脱氧核苷酸)【解析】(2)PCR 包括变性、复性、延伸 94~96℃条件下DNA变性解旋形成单链温度降到50~60℃后发生复性引物与模板链结合延伸过程中由Taq酶催化4种脱氧核苷酸合成双链DNA【答案】(3)待测样品存在多种致病菌每对引物用于扩增某种致病菌的特异性基因多对引物可同时扩增出多种目的基因【解析】(3)多重PCR技术在反应体系中加入了多对不同的引物每对引物都可扩增一种目的基因多对引物可同时扩增多种目的基因因此可以检测出多种致病菌23.(1)要想构建基因组文库必须获得该生物体内的全部DNA 用________对全部DNA 进行片段化将获得的片段与________连接起来通常导入到原核细胞中最常用的受体细胞是________ 最常用的方法是________ 再通过________鉴别和筛选含目的基因的受体菌23.(2)如果用某种生物发育的某个时期的所有mRNA反转录产生的多种互补DNA片段构建成cDNA文库一般只包含该生物的部分基因原因是________________________________________________23.(3)构建了基因文库并不等于完成了目的基因的分离因此必须用各种方法将目的基因从文库中筛选出来下列不能为筛选目的基因提供依据的是________23.(4)利用PCR技术扩增目的基因这一过程中需要加入一种特殊的酶即________ 【答案】(1))限制酶, 运载体, 大肠杆菌, 感受态转化法, 标记基因【解析】解(1)基因文库包括基因组文库和部分基因文库要想构建基因组文库必须获得该生物体内的全部DNA 用限制酶对全部DNA进行片段化将获得的片段与运载体连接起来通常导入到原核细胞中最常用的受体细胞是大肠杆菌最常用的方法是感受态转化法标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因从而将目的基因筛选出来故可通过标记基因鉴别和筛选含目的基因的受体菌【答案】(2)基因的选择性表达在某个时期只表达了部分基因【解析】(2)由于基因的选择性表达在某个时期只表达了部分基因所以如果用某种生物发育的某个时期的所有mRNA反转录产生的多种互补DNA片段构建成cDNA文库一般只包含该生物的部分基因【答案】C【解析】(3)筛选目的基因可以依据目的基因的功能、目的基因的mRNA及目的基因表达产物蛋白质的氨基酸序列由于碱基种类并没有特异性所以不能作为筛选目的基因的依据故选 C【答案】(4)热稳定DNA聚合酶(或Taq酶)【解析】(4)PCR过程包括变性、复性和延伸三步变性过程需要用90℃以上的高温使双链DNA解聚为单链故利用PCR技术扩增目的基因需要加入热稳定DNA聚合酶(或Taq酶)24.(1)做DNA的粗提取和鉴定实验时一般不选用猪血的原因是__________________________ 若实验材料为鸡血则会在血液中添加一定量的柠檬酸钠目的是________ 若实验材料为植物细胞则还需要做的处理是_________________________。
十八章全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序首页习题习题参考答案习题名词解释选择题简答题一、名词解释1.荧光标记引物法2.荧光标记终止底物法3.多色荧光标记引物法4.多色荧光标记终止底物法5.Edman降解法6.Sanger双脱氧链末端终止法7.平板电泳型DNA测序仪8.毛细管电泳型DNA测序仪9.缩微生物处理器二、选择题【A型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案(最佳答案)。
1. DNA的一级结构是指();A.DNA空间构象B.核苷酸序列C.碱基序列D.氨基酸序列E.DNA双螺旋结构2. 下列有关测序反应体系反应原理的叙述中,错误的是()A.加入的核苷酸单体为2 -脱氧核苷三磷酸B.低温退火时,引物与模板形成双链区C.沿着3'-5'的方向形成新链D.DNA聚合酶结合到DNA双链区上启动DNA的合成E.形成的新生链与模板完全互补配对3. 双脱氧链末端终止法测序反应与普通体外合成DNA反应的主要区别是()A.DNA聚合酶不同B.dNTP的种类不同C.dNTP的浓度不同D.引物不同E.双脱氧链末端终止法测序反应体系中还需加入ddNTP4. 下列荧光标记方法中,可以将A、C、G、T四个测序反应在同一管中完成而不影响测序结果的是()A.单色荧光标记引物法B.单色荧光标记终止底物法C.多色荧光标记引物法D.多色荧光标记终止底物法E.多色荧光标记法5. 下列哪一荧光标记法,必需将A、T、C、G四个测序反应分管进行,但可以合并在一个泳道内电泳()A.单色荧光标记引物法B.单色荧光标记终止底物法C.多色荧光标记引物法D.多色荧光标记终止底物法E.多色荧光标记法6. 毛细管电泳型测序仪电泳时仪器显示无电流,最常见的原因是由于()A.电极弯曲B.电泳缓冲液蒸发使液面降低C.毛细管未浸入缓冲液中D.毛细管内有气泡E.测序样本未注入毛细管中7. 毛细管电泳型测序仪电泳时产生电弧,主要原因是()A.电泳缓冲液漏出B.电泳缓冲液配有误C.电极、加热板或自动进样器上有灰尘沉积D.测序样本纯化不完全,含有盐性成份E.加热板温度过高8. 全自动DNA测序仪的主要应用范围,不包括()A.人类遗传病、传染病和癌症的基因诊断B.法医的亲子鉴定和个体识别C.生物工程药物的筛选D.动植物杂交育种E.新蛋白质的鉴定9. 蛋白质测序仪的基本工作原理,主要是利用()A.Edman降解法B.双脱氧链末端终止法C.化学降解法D.氧化-还原法E.水解法10. 蛋白质测序仪主要检测()A.核苷酸序列B.核糖核酸序列C.碱基序列D.氨基酸序列E.脱氧核糖核酸序列11. 下列有关双脱氧链末端终止法测序原理的叙述中,不正确的是()A.其基本原理是利用DNA的体外合成过程B.反应体系中需加入dNTP和ddNTPC.ddNTP可以形成磷酸二酯键而掺入到DNA链中D.dNTP掺入后可导致新合成链在不同的位置终止E.生成的反应产物是一系列长度不同的多核苷酸片段12. 下列有关多色荧光标记终止底物法的叙述中,不正确的是()A.需将4种ddNTP分别用4种不同的荧光染料标记B.标记和终止过程在同一时间完成C.A、T、C、G四种反应可以在同一管中完成D.可在一个泳道内完成电泳测序E.荧光染料标记过程和延伸反应终止分别发生在同一DNA片段的两端13. 下列有关荧光标记DNA的检测原理的叙述中,不正确的是()A.用于测序的产物绝大多数应为单链B.DNA片段上的荧光基团可吸收激光束提供的能量而发射出特征波长的荧光C.两极间的电势差推动DNA片段从正极向负级泳动并达到相互分离D.不同颜色的荧光与不同的碱基信息相对应E.测序结果中,纵轴表示荧光波长种类和强度14. 下列有关Edman降解法基本原理的叙述中,错误的是()A.PTC-多肽的生成是在弱碱性条件下B.PTC-多肽的生成反应需用过量的试剂使有机反应完全C.在无水强碱的作用下,可使靠近PTC基的氨基酸环化,形成ATZ衍生物和一个失去末端氨基酸的剩余多肽D.剩余多肽链可以进行下一次以及后续的降解循环E.ATZ衍生物经水溶酸处理转化为PTH氨基酸15. 毛细管电泳型DNA测序仪电泳时仪器显示无电流,最常见的原因为()A.缓冲液配制错误B.毛细管内有气泡C.电泳缓冲液蒸发使液面降低,而未能接触到毛细管的两端D.电极弯曲而无法浸入缓冲液中E.加热板温度过高16. 在单纯以测定DNA序列为目的的全自动DNA测序仪中,广泛应用的原理是()A.Edman降解法B.双脱氧链末端终止法C.化学降解法D.氧化-还原法E.水解法17. 双脱氧链末端终止法测序的基本原理是利用()A.RT-PCRB.PCRC.Western BlotD.Southern BlotE.水解法18. 测序反应体系中加入的酶为()A.限制性内切酶B.RNA聚合酶C.DNA聚合酶D.DNA水解酶E.反转录酶19. 在普通的体外合成DNA反应体系中,加入的核苷酸单体为()A.dAMP,dCMP,dGMP,dTMPB.dADP,dCDP,dGDP,dTDPC.dATP,dCTP,dGTP,dTTPD.ddATP,ddCTP,ddGTP,ddTTPE.ddADP,ddCDP,ddGDP,ddTDP20. 双脱氧链末端终止法测序反应中除PCR反应体系成份外,还加入了()A.DNA聚合酶B.dNTPC.dNDPD.ddNTPE.ddNDP21. 在DNA自动测序中广泛应用的示踪物是()A.色素染料B.同位素C.电化学发光物质D.酶E.荧光素22. 下列有关多色荧光标记引物法标记引物的特性的叙述中,正确的是()A.四种标记引物的序列相同,但5'端标记的荧光染料颜色不同B.四种标记引物的序列相同,但3'端标记的荧光染料颜色不同C.四种标记引物的序列不同,其5'端标记的荧光染料颜色也不同D.四种标记引物的序列不同,其3'端标记的荧光染料颜色也不同E.四种标记引物的序列不同,其2'端标记的荧光染料颜色也不同23. 下列有关多色荧光标记引物法的叙述中,不正确的是()A.需将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的5'端B.四种引物的序列相同,但标记的荧光染料颜色不同C.A、T、C、G四个测序反应必需分管进行D.上样时需分别在不同泳道内电泳E.特定颜色荧光标记的引物则与特定的双脱氧核苷酸底物保持对应关系24. 一般来说,DNA测序图中,其横坐标和纵坐标的意义是()A.横坐标代表荧光波长种类,纵坐标代表时间B.横坐标代表荧光波长种类和强度,纵坐标代表时间C.横坐标代表时间,纵坐标代表荧光波长种类D.横坐标代表时间,纵坐标代表荧光波长种类和强度E.横坐标代表荧光波长种类,纵坐标代表荧光波长强度25. 下列有关DNA自动测序仪自动进样器区功能的叙述中,不正确的是()A.毛细管进入样品盘标本孔中进样依靠自动进样器的移动完成B.电极和毛细管一般均固定不动C.两级间极高的电势差可促进DNA分子在毛细管中很快泳动D.电极为电泳的正性电极E.样品盘有48孔和96孔两种,可一次性连续测试48或96个样本26. 下列有关DNA自动测序仪凝胶块区功能的叙述中,不正确的是()A.电泳时缓冲液阀关闭B.电极为电泳的正性电极C.在分析每一个样品前,泵自动冲掉上一次分析用过的胶,灌入新胶D.注射器驱动杆可给注射器提供正压力,将注射器内的凝胶注入毛细管中E.玻璃注射器可储存凝胶高分子聚合物以及在填充毛细管时提供必要的压力27. 平板电泳型DNA测序仪的测序长度一般为()A.600bp~900bpB.400bp~600bpC.200bp~400bpD.900bp~1000bpE.300bp~500bp28. 毛细管电泳型DNA测序仪的测序长度一般为()A.600bp~900bpB.400bp~600bpC.200bp~400bpD.900bp~1000bpE.300bp~500bp【X型题】每题的备选答案中有两个或者两个以上正确答案。
1. 目前DNA测序仪的工作原理,主要是利用()A.Edman降解法B.双脱氧链末端终止法C.化学降解法D.氧化-还原法E.水解法2. 下列有关多色荧光标记引物法的叙述中,正确的是()A.需将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的3 端B.四种引物的序列相同,但标记的荧光染料颜色不同C.A、T、C、G四个测序反应必需分管进行D.上样时需分别在不同泳道内电泳E.特定颜色荧光标记的引物则与特定的双脱氧核苷酸底物保持对应关系3. 下列哪些荧光标记法必需将A、T、C、G四个测序反应分管进行()A.单色荧光标记引物法B.单色荧光标记终止底物法C.多色荧光标记引物法D.多色荧光标记终止底物法E.多色荧光标记法4. 下列有关单色荧光标记法原理的叙述中,正确的是()A.需将A、G、C、T四管反应分管进行B.上样时需在不同泳道电泳C.可用于标记ddNTP,也可用于标记引物D.有可能因泳道间迁移率不同而影响测序精度E.仅适用于标记ddNTP,而不能标记引物5. 平板电泳型DNA测序仪电泳时仪器显示无电流,可能原因有()A.电极导线未接好或损坏B.电泳缓冲液配制不正确C.正极或负极铂金丝断裂D.正极或负极的胶面未浸入缓冲液中E.倒胶时有气泡形成6. 采用荧光标记终止底物法的测序反应体系中,包含()A.DNA模板B.引物C.dNTPD.ddNTPE.水解酶7. 毛细管电泳型DNA测序仪电泳时仪器显示无电流,可能原因有()A.电泳缓冲液蒸发使液面降低,而未能接触到毛细管的两端B.毛细管内有气泡C.毛细管未浸入缓冲液中D.电极弯曲而无法浸入缓冲液中E.加热板温度过高8. 导致毛细管电泳型DNA测序仪电极弯曲的原因有()A.测序时未进行电极定标操作就直接执行电泳命令B.自动进样器上有灰尘沉积C.运行前未将样品盘归位D.进行电极定标操作时X/Y轴归位尚未结束就运行Z轴归位E.凝胶干燥而阻塞毛细管9. 平板电泳型DNA测序仪电泳时仪器显示无电流,可能原因有()A.电泳缓冲液配制不正确B.电极导线未接好或损坏C.正极或负极铂金丝断裂D.正极或负极的胶面未浸入缓冲液中E.电泳缓冲液蒸发使液面降低,而未能接触到毛细管的两端10. Sanger双脱氧链末端终止法和Maxam-Gilbert化学降解法的共同点包括()A.反应体系中均有ddNTPB.都是根据在某一固定的点开始核苷酸链的延伸,随机在某一个特定的碱基处终止C.均产生A、T、C、G四组不同长度的一系列核苷酸链D.均在变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳进行片段的分离和检测E.均可检测DNA的一级结构11. 在Sanger双脱氧链末端终止法测序反应体系中,ddNTP与dNTP相比的异同点有()A.ddNTP在脱氧核糖的5'位置上缺少一个羟基B.ddNTP在脱氧核糖的3'位置上缺少一个羟基C.DNA链在掺入dNTP的位置终止链的延伸D.均可与正在延伸的DNA链的末端脱氧核糖3'-OH发生反应E.ddNTP不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键12. 下列有关Sanger双脱氧链末端终止法测序反应体系反应原理的叙述中,正确的是()A.加入的核苷酸单体包括dNTP和ddNTPB.低温退火时,引物与模板形成双链区C.沿着3'-5'的方向形成新链D.DNA聚合酶结合到DNA双链区上启动DNA的合成E.形成的新生链与模板完全互补配对13. 下列有关DNA自动测序仪自动进样器区功能的叙述中,正确的是()A.毛细管进入样品盘标本孔中进样依靠自动进样器的移动完成B.电极和毛细管一般均固定不动C.DNA分子在毛细管中泳动的动力来自于两级间极高的压力差D.电极为电泳的正性电极E.样品盘有48孔和96孔两种,可一次性连续测试48或96个样本14. 下列有关DNA自动测序仪凝胶块区功能的叙述中,正确的是()A.电泳时缓冲液阀打开B.电极为电泳的负性电极C.在分析每一个样品前,泵自动冲掉上一次分析用过的胶,灌入新胶D.注射器驱动杆可给注射器提供正压力,将注射器内的凝胶注入毛细管中E.玻璃注射器可储存凝胶高分子聚合物以及在填充毛细管时提供必要的压力15. 下列有关缩微生物处理器结构和功能特点的叙述中,正确的是()A.基本结构为2层玻璃薄片和2层聚二甲基硅氧烷薄片B.其形状为圆盘状,直径仅10厘米C.可完成纳升级标本的Sanger DNA测序D.微瓣膜的功能包括在热循环反应时封闭反应小室,为反应提供封闭的空间E.毛细管电泳通道由上下来回迂回的U型管道构成,总长度为30cm三、问答题1.简述双脱氧链末端终止法测序原理。