第18章 全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪习题分解

第十八章全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪首页习题习题参考答案习题名词解释选择题简答题一、名词解释1．荧光标记引物法2．荧光标记终止底物法3．多色荧光标记引物法4．多色荧光标记终止底物法5．Edman降解法6．Sanger双脱氧链末端终止法7．平板电泳型DNA测序仪8．毛细管电泳型DNA测序仪9．缩微生物处理器二、选择题【A型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案（最佳答案）。

1. DNA的一级结构是指（）；A．DNA空间构象B．核苷酸序列C．碱基序列D．氨基酸序列E．DNA双螺旋结构2. 下列有关测序反应体系反应原理的叙述中，错误的是（）A．加入的核苷酸单体为2 -脱氧核苷三磷酸B．低温退火时，引物与模板形成双链区C．沿着3'-5'的方向形成新链D．DNA聚合酶结合到DNA双链区上启动DNA的合成E．形成的新生链与模板完全互补配对3. 双脱氧链末端终止法测序反应与普通体外合成DNA反应的主要区别是（）A．DNA聚合酶不同B．dNTP的种类不同C．dNTP的浓度不同D．引物不同E．双脱氧链末端终止法测序反应体系中还需加入ddNTP4. 下列荧光标记方法中，可以将A、C、G、T四个测序反应在同一管中完成而不影响测序结果的是（）A．单色荧光标记引物法B．单色荧光标记终止底物法C．多色荧光标记引物法D．多色荧光标记终止底物法E．多色荧光标记法5. 下列哪一荧光标记法，必需将A、T、C、G四个测序反应分管进行，但可以合并在一个泳道内电泳（）A．单色荧光标记引物法B．单色荧光标记终止底物法C．多色荧光标记引物法D．多色荧光标记终止底物法E．多色荧光标记法6. 毛细管电泳型测序仪电泳时仪器显示无电流，最常见的原因是由于（）A．电极弯曲B．电泳缓冲液蒸发使液面降低C．毛细管未浸入缓冲液中D．毛细管内有气泡E．测序样本未注入毛细管中7. 毛细管电泳型测序仪电泳时产生电弧，主要原因是（）A．电泳缓冲液漏出B．电泳缓冲液配有误C．电极、加热板或自动进样器上有灰尘沉积D．测序样本纯化不完全，含有盐性成份E．加热板温度过高8. 全自动DNA测序仪的主要应用范围，不包括（）A．人类遗传病、传染病和癌症的基因诊断B．法医的亲子鉴定和个体识别C．生物工程药物的筛选D．动植物杂交育种E．新蛋白质的鉴定9. 蛋白质测序仪的基本工作原理，主要是利用（）A．Edman降解法B．双脱氧链末端终止法C．化学降解法D．氧化－还原法E．水解法10. 蛋白质测序仪主要检测（）A．核苷酸序列B．核糖核酸序列C．碱基序列D．氨基酸序列E．脱氧核糖核酸序列11. 下列有关双脱氧链末端终止法测序原理的叙述中，不正确的是（）A．其基本原理是利用DNA的体外合成过程B．反应体系中需加入dNTP和ddNTPC．ddNTP可以形成磷酸二酯键而掺入到DNA链中D．dNTP掺入后可导致新合成链在不同的位置终止E．生成的反应产物是一系列长度不同的多核苷酸片段12. 下列有关多色荧光标记终止底物法的叙述中，不正确的是（）A．需将4种ddNTP分别用4种不同的荧光染料标记B．标记和终止过程在同一时间完成C．A、T、C、G四种反应可以在同一管中完成D．可在一个泳道内完成电泳测序E．荧光染料标记过程和延伸反应终止分别发生在同一DNA片段的两端13. 下列有关荧光标记DNA的检测原理的叙述中，不正确的是（）A．用于测序的产物绝大多数应为单链B．DNA片段上的荧光基团可吸收激光束提供的能量而发射出特征波长的荧光C．两极间的电势差推动DNA片段从正极向负级泳动并达到相互分离D．不同颜色的荧光与不同的碱基信息相对应E．测序结果中，纵轴表示荧光波长种类和强度14. 下列有关Edman降解法基本原理的叙述中，错误的是（）A．PTC－多肽的生成是在弱碱性条件下B．PTC－多肽的生成反应需用过量的试剂使有机反应完全C．在无水强碱的作用下，可使靠近PTC基的氨基酸环化，形成ATZ衍生物和一个失去末端氨基酸的剩余多肽D．剩余多肽链可以进行下一次以及后续的降解循环E．ATZ衍生物经水溶酸处理转化为PTH氨基酸15. 毛细管电泳型DNA测序仪电泳时仪器显示无电流，最常见的原因为（）A．缓冲液配制错误B．毛细管内有气泡C．电泳缓冲液蒸发使液面降低，而未能接触到毛细管的两端D．电极弯曲而无法浸入缓冲液中E．加热板温度过高16. 在单纯以测定DNA序列为目的的全自动DNA测序仪中，广泛应用的原理是（）A．Edman降解法B．双脱氧链末端终止法C．化学降解法D．氧化－还原法E．水解法17. 双脱氧链末端终止法测序的基本原理是利用（）A．RT-PCRB．PCRC．Western BlotD．Southern BlotE．水解法18. 测序反应体系中加入的酶为（）A．限制性内切酶B．RNA聚合酶C．DNA聚合酶D．DNA水解酶E．反转录酶19. 在普通的体外合成DNA反应体系中，加入的核苷酸单体为（）A．dAMP，dCMP，dGMP，dTMPB．dADP，dCDP，dGDP，dTDPC．dATP，dCTP，dGTP，dTTPD．ddATP，ddCTP，ddGTP，ddTTPE．ddADP，ddCDP，ddGDP，ddTDP20. 双脱氧链末端终止法测序反应中除PCR反应体系成份外，还加入了（）A．DNA聚合酶B．dNTPC．dNDPD．ddNTPE．ddNDP21. 在DNA自动测序中广泛应用的示踪物是（）A．色素染料B．同位素C．电化学发光物质D．酶E．荧光素22. 下列有关多色荧光标记引物法标记引物的特性的叙述中，正确的是（）A．四种标记引物的序列相同，但5'端标记的荧光染料颜色不同B．四种标记引物的序列相同，但3'端标记的荧光染料颜色不同C．四种标记引物的序列不同，其5'端标记的荧光染料颜色也不同D．四种标记引物的序列不同，其3'端标记的荧光染料颜色也不同E．四种标记引物的序列不同，其2'端标记的荧光染料颜色也不同23. 下列有关多色荧光标记引物法的叙述中，不正确的是（）A．需将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的5'端B．四种引物的序列相同，但标记的荧光染料颜色不同C．A、T、C、G四个测序反应必需分管进行D．上样时需分别在不同泳道内电泳E．特定颜色荧光标记的引物则与特定的双脱氧核苷酸底物保持对应关系24. 一般来说，DNA测序图中，其横坐标和纵坐标的意义是（）A．横坐标代表荧光波长种类，纵坐标代表时间B．横坐标代表荧光波长种类和强度，纵坐标代表时间C．横坐标代表时间，纵坐标代表荧光波长种类D．横坐标代表时间，纵坐标代表荧光波长种类和强度E．横坐标代表荧光波长种类，纵坐标代表荧光波长强度25. 下列有关DNA自动测序仪自动进样器区功能的叙述中，不正确的是（）A．毛细管进入样品盘标本孔中进样依靠自动进样器的移动完成B．电极和毛细管一般均固定不动C．两级间极高的电势差可促进DNA分子在毛细管中很快泳动D．电极为电泳的正性电极E．样品盘有48孔和96孔两种，可一次性连续测试48或96个样本26. 下列有关DNA自动测序仪凝胶块区功能的叙述中，不正确的是（）A．电泳时缓冲液阀关闭B．电极为电泳的正性电极C．在分析每一个样品前，泵自动冲掉上一次分析用过的胶，灌入新胶D．注射器驱动杆可给注射器提供正压力，将注射器内的凝胶注入毛细管中E．玻璃注射器可储存凝胶高分子聚合物以及在填充毛细管时提供必要的压力27. 平板电泳型DNA测序仪的测序长度一般为（）A．600bp～900bpB．400bp～600bpC．200bp～400bpD．900bp～1000bpE．300bp～500bp28. 毛细管电泳型DNA测序仪的测序长度一般为（）A．600bp～900bpB．400bp～600bpC．200bp～400bpD．900bp～1000bpE．300bp～500bp【X型题】每题的备选答案中有两个或者两个以上正确答案。

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2019/4/2
第二节 氨基酸直接测序
肽段氨基酸序列的测定
目前，一般蛋白质分析最多能够分析至N端第50个氨基 酸左右，而对蛋白质全序列分析，首先需要将蛋白质裂 解为一系列肽段，对各个肽段进行分析后再拼接。 蛋白质样品中含有较多对Edman反应敏感的残基或肽 键时，由于肽键容易发生断裂，得到的裂解率将更低。
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2019/4/2 尺寸排阻
第二节 氨基酸直接测序
氨基酸组成分析
酸催化水解中，寻找理想水解条件比较困难，因为要 裂解所有肽键，必须对氨基酸残基的降解平衡进行综 合考虑； 碱催化水解一般用于特殊情况下，多肽在100℃条件 下与4MNaOH反应4～8小时，Arg、Cys、Ser、Thr被 分解，其它的氨基酸则被脱胺基和外消旋； 内肽酶和外肽酶具有高度专一性，可用作某些肽键水 解的催化酶，Asn、Gln、Trp 等含量的测定常常采用 酶法。
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2019/4/2
第二节 氨基酸直接测序
氨基酸组成分析
二硫键裂解后，需要对每个多肽链中氨基酸的组成进行 测定;
将分离纯化后的多肽链样品分为两部分，一部分样品经 过完全水解，测定其氨基酸组成，并计算出氨基酸各种 残基的含量；另一部分样品则进行N-端或C-端测序。
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2019/4/2
第二节 氨基酸直接测序
肽链的裂解
多肽片段太长，不能直接进行序列测定，必须通过特 定反应将裂解为更小的肽段； 通过两种或几种不同断裂方法（断裂点不同）将每条 多肽链样品降解成为两套或几套重叠肽段或肽碎片， 每套肽段分别进行分离、纯化， 再对纯化后的每一肽 段进行氨基酸组成和末端 残基分析。

第十八章全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪首页习题习题参考答案习题名词解释选择题简答题一、名词解释1．荧光标记引物法2．荧光标记终止底物法3．多色荧光标记引物法4．多色荧光标记终止底物法5．Edman降解法6．Sanger双脱氧链末端终止法7．平板电泳型DNA测序仪8．毛细管电泳型DNA测序仪9．缩微生物处理器二、选择题【A型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案（最佳答案）。

1. DNA的一级结构是指（）；A．DNA空间构象B．核苷酸序列C．碱基序列D．氨基酸序列E．DNA双螺旋结构2. 下列有关测序反应体系反应原理的叙述中，错误的是（）A．加入的核苷酸单体为2 -脱氧核苷三磷酸B．低温退火时，引物与模板形成双链区C．沿着3'-5'的方向形成新链D．DNA聚合酶结合到DNA双链区上启动DNA的合成E．形成的新生链与模板完全互补配对3. 双脱氧链末端终止法测序反应与普通体外合成DNA反应的主要区别是（）A．DNA聚合酶不同B．dNTP的种类不同C．dNTP的浓度不同D．引物不同E．双脱氧链末端终止法测序反应体系中还需加入ddNTP4. 下列荧光标记方法中，可以将A、C、G、T四个测序反应在同一管中完成而不影响测序结果的是（）A．单色荧光标记引物法B．单色荧光标记终止底物法C．多色荧光标记引物法D．多色荧光标记终止底物法E．多色荧光标记法5. 下列哪一荧光标记法，必需将A、T、C、G四个测序反应分管进行，但可以合并在一个泳道内电泳（）A．单色荧光标记引物法B．单色荧光标记终止底物法C．多色荧光标记引物法D．多色荧光标记终止底物法E．多色荧光标记法6. 毛细管电泳型测序仪电泳时仪器显示无电流，最常见的原因是由于（）A．电极弯曲B．电泳缓冲液蒸发使液面降低C．毛细管未浸入缓冲液中D．毛细管内有气泡E．测序样本未注入毛细管中7. 毛细管电泳型测序仪电泳时产生电弧，主要原因是（）A．电泳缓冲液漏出B．电泳缓冲液配有误C．电极、加热板或自动进样器上有灰尘沉积D．测序样本纯化不完全，含有盐性成份E．加热板温度过高8. 全自动DNA测序仪的主要应用范围，不包括（）A．人类遗传病、传染病和癌症的基因诊断B．法医的亲子鉴定和个体识别C．生物工程药物的筛选D．动植物杂交育种E．新蛋白质的鉴定9. 蛋白质测序仪的基本工作原理，主要是利用（）A．Edman降解法B．双脱氧链末端终止法C．化学降解法D．氧化－还原法E．水解法10. 蛋白质测序仪主要检测（）A．核苷酸序列B．核糖核酸序列C．碱基序列D．氨基酸序列E．脱氧核糖核酸序列11. 下列有关双脱氧链末端终止法测序原理的叙述中，不正确的是（）A．其基本原理是利用DNA的体外合成过程B．反应体系中需加入dNTP和ddNTPC．ddNTP可以形成磷酸二酯键而掺入到DNA链中D．dNTP掺入后可导致新合成链在不同的位置终止E．生成的反应产物是一系列长度不同的多核苷酸片段12. 下列有关多色荧光标记终止底物法的叙述中，不正确的是（）A．需将4种ddNTP分别用4种不同的荧光染料标记B．标记和终止过程在同一时间完成C．A、T、C、G四种反应可以在同一管中完成D．可在一个泳道内完成电泳测序E．荧光染料标记过程和延伸反应终止分别发生在同一DNA片段的两端13. 下列有关荧光标记DNA的检测原理的叙述中，不正确的是（）A．用于测序的产物绝大多数应为单链B．DNA片段上的荧光基团可吸收激光束提供的能量而发射出特征波长的荧光C．两极间的电势差推动DNA片段从正极向负级泳动并达到相互分离D．不同颜色的荧光与不同的碱基信息相对应E．测序结果中，纵轴表示荧光波长种类和强度14. 下列有关Edman降解法基本原理的叙述中，错误的是（）A．PTC－多肽的生成是在弱碱性条件下B．PTC－多肽的生成反应需用过量的试剂使有机反应完全C．在无水强碱的作用下，可使靠近PTC基的氨基酸环化，形成ATZ衍生物和一个失去末端氨基酸的剩余多肽D．剩余多肽链可以进行下一次以及后续的降解循环E．ATZ衍生物经水溶酸处理转化为PTH氨基酸15. 毛细管电泳型DNA测序仪电泳时仪器显示无电流，最常见的原因为（）A．缓冲液配制错误B．毛细管内有气泡C．电泳缓冲液蒸发使液面降低，而未能接触到毛细管的两端D．电极弯曲而无法浸入缓冲液中E．加热板温度过高16. 在单纯以测定DNA序列为目的的全自动DNA测序仪中，广泛应用的原理是（）A．Edman降解法B．双脱氧链末端终止法C．化学降解法D．氧化－还原法E．水解法17. 双脱氧链末端终止法测序的基本原理是利用（）A．RT-PCRB．PCRC．Western BlotD．Southern BlotE．水解法18. 测序反应体系中加入的酶为（）A．限制性内切酶B．RNA聚合酶C．DNA聚合酶D．DNA水解酶E．反转录酶19. 在普通的体外合成DNA反应体系中，加入的核苷酸单体为（）A．dAMP，dCMP，dGMP，dTMPB．dADP，dCDP，dGDP，dTDPC．dATP，dCTP，dGTP，dTTPD．ddATP，ddCTP，ddGTP，ddTTPE．ddADP，ddCDP，ddGDP，ddTDP20. 双脱氧链末端终止法测序反应中除PCR反应体系成份外，还加入了（）A．DNA聚合酶B．dNTPC．dNDPD．ddNTPE．ddNDP21. 在DNA自动测序中广泛应用的示踪物是（）A．色素染料B．同位素C．电化学发光物质D．酶E．荧光素22. 下列有关多色荧光标记引物法标记引物的特性的叙述中，正确的是（）A．四种标记引物的序列相同，但5'端标记的荧光染料颜色不同B．四种标记引物的序列相同，但3'端标记的荧光染料颜色不同C．四种标记引物的序列不同，其5'端标记的荧光染料颜色也不同D．四种标记引物的序列不同，其3'端标记的荧光染料颜色也不同E．四种标记引物的序列不同，其2'端标记的荧光染料颜色也不同23. 下列有关多色荧光标记引物法的叙述中，不正确的是（）A．需将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的5'端B．四种引物的序列相同，但标记的荧光染料颜色不同C．A、T、C、G四个测序反应必需分管进行D．上样时需分别在不同泳道内电泳E．特定颜色荧光标记的引物则与特定的双脱氧核苷酸底物保持对应关系24. 一般来说，DNA测序图中，其横坐标和纵坐标的意义是（）A．横坐标代表荧光波长种类，纵坐标代表时间B．横坐标代表荧光波长种类和强度，纵坐标代表时间C．横坐标代表时间，纵坐标代表荧光波长种类D．横坐标代表时间，纵坐标代表荧光波长种类和强度E．横坐标代表荧光波长种类，纵坐标代表荧光波长强度25. 下列有关DNA自动测序仪自动进样器区功能的叙述中，不正确的是（）A．毛细管进入样品盘标本孔中进样依靠自动进样器的移动完成B．电极和毛细管一般均固定不动C．两级间极高的电势差可促进DNA分子在毛细管中很快泳动D．电极为电泳的正性电极E．样品盘有48孔和96孔两种，可一次性连续测试48或96个样本26. 下列有关DNA自动测序仪凝胶块区功能的叙述中，不正确的是（）A．电泳时缓冲液阀关闭B．电极为电泳的正性电极C．在分析每一个样品前，泵自动冲掉上一次分析用过的胶，灌入新胶D．注射器驱动杆可给注射器提供正压力，将注射器内的凝胶注入毛细管中E．玻璃注射器可储存凝胶高分子聚合物以及在填充毛细管时提供必要的压力27. 平板电泳型DNA测序仪的测序长度一般为（）A．600bp～900bpB．400bp～600bpC．200bp～400bpD．900bp～1000bpE．300bp～500bp28. 毛细管电泳型DNA测序仪的测序长度一般为（）A．600bp～900bpB．400bp～600bpC．200bp～400bpD．900bp～1000bpE．300bp～500bp【X型题】每题的备选答案中有两个或者两个以上正确答案。

全自动DNA测序仪的原理和应用1. 前言DNA测序技术是现代生物学、医学研究中的重要工具之一。

随着技术的不断进步，全自动DNA测序仪在DNA测序领域占据重要地位。

本文将介绍全自动DNA测序仪的原理和应用。

2. 原理全自动DNA测序仪基于Sanger测序技术，通过离心分离、扩增和合成等步骤来获取DNA序列信息。

其原理主要包括以下几个步骤：2.1 模板制备全自动DNA测序仪需要将待测的DNA样品进行模板制备。

一般采用PCR（聚合酶链式反应）技术来扩增目标DNA片段，以增加其浓度和复制数目。

2.2 扩增产物净化PCR扩增产生的扩增产物中会包含引物和杂质，需要进行净化处理。

常用的方法是利用凝胶电泳分离扩增产物，并使用各类商业化学试剂盒进行提取和净化操作。

2.3 DNA片段测序将净化后的DNA片段进行测序。

全自动DNA测序仪采用Dye-termination测序方法，使用一系列特殊的引物，通过DNA链延伸过程中的不同颜色发光来标记每个碱基。

之后，仪器会通过激光扫描读取每个碱基的发光信号。

2.4 数据分析与测序结果全自动DNA测序仪会生成一系列的发光数据，这些数据需要进行分析和处理。

通常会使用相关软件进行碱基识别、序列拼接和测序结果的校正等步骤，从而获得准确的DNA序列信息。

3. 应用全自动DNA测序仪广泛应用于各个领域，例如：3.1 生物学研究在生物学研究中，全自动DNA测序仪可以用于基因组测序、转录组测序、蛋白质相互作用的研究等。

通过测序获得的DNA序列信息可以帮助研究者了解生物体的遗传信息、功能和相互关系。

3.2 医学领域在医学领域，全自动DNA测序仪可以用于诊断遗传性疾病、癌症等疾病的基因突变。

通过测序可以快速准确地分析患者的基因组信息，从而为临床医生提供准确的诊断和治疗方案。

3.3 农业和食品安全全自动DNA测序仪在农业和食品安全领域也有广泛的应用。

它可以用于鉴定转基因作物、检测食品中的基因改造成分、追溯食品来源，保证食品安全和品质。

临床医学检验：临床检验仪器真题1、问答题常用的离心方法分几类？正确答案：常用的离心方法大致可分为平衡离心法、等密度离心法、经典式沉降平衡离心法等三类。

2、问答题简述蛋白质测序仪的主要应用。

正确答案：蛋白质测序仪（江南博哥）获得的蛋白质序列信息主要应用在以下三个方面。

（1）新蛋白质的鉴定：在凝胶电泳中出现的未知条带可以利用蛋白质测序仪来测定其序列，为探索蛋白质的功能提供线索。

（2）分子克隆探针的设计：是蛋白质序列信息的基本用途之一。

用蛋白质序列信息设计PCR引物和寡核甘酸探针。

可以利用这些探针进行cDNA文库或基因组文库的筛选。

（3）抗原的人工多肽合成：由合成多肽免疫产生的抗体常用来证实和纯化新发现的蛋白质。

此外，合成的多肽类似物能够揭示蛋白质重要结构特征和提示蛋白质的功能特性。

3、问答题第三代自动血培养仪有哪些性能特点？正确答案：（1）培养基营养丰富；（2）以连续、恒温、振荡方式培养，细菌易于生长；（3）培养瓶多采用不易碎材料制成，提高了使用的安全性；（4）采用封闭式非侵入性的瓶外监测方式，避免标本交叉感染，且无放射性污染；（5）自动连续监测，缩短了检测时间，阳性标本检测可快速、准确；（6）结果报告及时，85%以上的阳性标本能在48小时内被检出；（7）培养瓶多采用双条形码技术，只需用电脑上的条码阅读器扫描报告单上的条码，就可直接查询到病人的结果及生长曲线；（8）培养瓶可随时放入培养系统，并进行追踪检测；（9）数据处理功能较强，数据管理系统随时监测感应器的读数，依据数据的变化来判定标本的阳性或阴性，并可进行流行病学的统计分析；（10）设有内部质控系统，可保证仪器的正常运转；（11）可进行血液及所有无菌体液的细菌培养检测。

4、单选库尔特原理中血细胞的电阻与电解质溶液电阻的关系是OoA.相等B.大于C.小于D.大于或等于E.小于或等于正确答案：B5、问答题电泳技术根据分离原理如何分类？正确答案：根据分离原理可分为移界电泳、区带电泳、等速电泳、等电聚焦、免疫电泳等。

《国内外医疗器械原理图解与操作标准及维修技术实用全书》 本书作者:中国医科大学医学工程教授 图书册数:1380 出 版 社:中国知识出版社 定 现 价:1380 元 价:690 元《国内外医疗器械原理图解与操作标准及维修技术实用全书》 本店是实体店，坚决抵制各类盗版、劣质图书及附件，严格控 制图书进货渠道，遵守国家新闻出版、发行的相关规定，直接 从经过国家出版发行行政部门审核批准的出版社进货，与国图、 中华书局、三联书店、商务印书馆、人民文学、上海古籍、上 海世纪出版集团、中国社科、社科文献、电子工业、机械工业、 化学工业、科学、法律、上海外教、北大、清华、人大、复旦、 武大、南大、广西师大、北京出版集团、浙江少儿、江苏少儿、 21 世纪、作家、春风文艺、长江文艺、接力、漓江等全国知名 的 300 余家出版社建立了良好的合作关系，所采购的图书均经 所在地图书市场审读办公室审读合格后， 方上市发行， 100%正 版、优质，订购速度快，数据提供及时，加工全方位，能全面1 / 13符合客户的需求。

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内容介绍：商品简介商品编码：pdf94281 出版社：中国知识出版社 册   数： 作者:中国医科大学医学工程教授2 / 13出版时间:2013 年 3 月 印刷时间 2013 年 3 月 isbn： 版次：第二版 装帧：精装 纸张：胶版纸 印次：第二次 页数： 正文语种：中文 开本：16 开 目录 最新国内外医疗 器械原理图解与操作标准及维修技术实用全书 最新国内外医疗器械原理图解与操作标准及维修技术实用全书 第一篇 医疗电子仪器原理图解与操作标准及维修技术 第一章 概论 第二章 医用传感器 第三章 心电仪器 第四章 医用监护仪器 第五章 脑电图机 第六章 医用 CT 机3 / 13第七章 医用超声诊断仪器 第八章 核医学仪器 第九章 医用电子仪器操作安全第二篇 医疗电动仪器原理图解 与操作标准及维修技术 第一章 口腔科设备 第二章 离心机 第三章 呼吸机 第四章 麻醉机 第五章 血液透析机 第六章 血液分析仪器 第七章 体外循环机第三篇 临床医疗仪器原理图解与操作标准 及维修技术 第一章 医用遥测设备 第二章 医用激光器 第三章 医用 X 线电视 第四章 核磁共振成像设备 第五章 听力检查仪器 第六章 耳聋与康复设备 第七章 红外线探测器 第八章 血流量测量仪器第四篇 临床检验常规仪器原理图解与 操作标准及维修技术 第一章 自动生化分析仪4 / 13第二章 徽生物快速检测仪 第三章 生物安全柜 第四章 免疫分析仪 第五章 电化学临床分析仪器 第六章 尿液分析仪器第五篇 理疗、治疗仪器原理与操作标准 及维修技术 第一章 光线治疗机 第二章 电疗机 第三章 磁疗机 第四章 康复治疗仪器 第五章 人工心肺机 第六章 体外碎石机 第七章 放射治疗机第六篇 医用色谱仪、电泳仪、显徽镜原理 与操作标准及维修技术 第一章 色谱仪器 第二章 电泳仪 第三章 毛细管电泳仪 第四章 光学显徽镜 第五章 电子显徽镜第七篇 生化检验仪器原理与操作标准及维 修技术 第一章 GD—821 型光电比色计 第二章 DU 型临床生化分析仪5 / 13第三章 紫外—可见光光度计 第四章 质谱仪 第五章 酸度计 第六章 PC—603 型血细胞计数器 第七章 磁共振波谱分析仪 第八章 计数器 第九章 荧光分析仪器 第十章 原子光谱分析仪第八篇 医用 X 线检查设备原理与操作 标准及维修技术 第一章 医用 X 线检查设备的结构、基本原理 第二章 X 线发生器主要参量的检测与调校 第三章 X 线检查设备的维护和质量控制 第四章 X 线检查设备的故障及检修方法 第五章 X 线发生器低压系统 第六章 X 线发生器高压系统 第七章 工频 X 线发生器故障检修综合举例 第八章 中高频 X 线发生器故障检修 第九章 附属设备的故障检修 第十章 X 线影像增强、电视系统故障检修 第十一章 牙科 X 线机的故障检修 第十二章 口腔曲面体层 X 线机第九篇 细胞、分子生物学仪器 原理与操作标准及维修技术6 / 13第一章 培养箱 第二章 PCR 基因扩增仪 第三章 全自动 DNA 测序仪和蛋白质自动测序仪 第四章 流式细胞仪巨邦文化发展有限公司服务宗旨 让客户“买得放心、买得开心”是本公司的一贯服务宗旨，而 且，我们也会始终将这一宗旨贯彻到底，并赋与其更丰富的涵 义。

DNA测序模板的制备和测序引物设计中的相关问题王虎王晓健甄一松邹玉宝郑维越张芊核酸序列测定是基因研究的重要手段,本世纪60年代和70年代,科学家们一直致力于研究测定核酸序列的方法。

最初使用的方法只能测定RN A,主要是tRNA,一则因为它的链较短,通常只有74295个核苷酸,二则有可能分离单个tRNA分子。

而D NA的情况却大相径庭,人的染色体有大有小,每条染色体约含5千5百万到2亿5千万个碱基对,远远大于RNA 分子,如何将其切割并分离成500bp以下的片段成了D NA序列测定问题的关键。

基因克隆(gene cloning)和多聚酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术使从染色体中分离特定D N A片段的难题迎刃而解,快速高效的测序技术因此产生。

1977年,基于链终止和化学降解的D N A测序法研究成功,略经改善后很快就被推广到世界各国的分子生物学实验室,成为80年代和90年代序列测定革命的基础。

但此种测序法的缺点也是显而易见的,一方面操作步骤繁琐,可测样本量小,另一方面同位素的使用也明显限制了该方法的应用。

八十年代末期,美国加州一位科学家发明了世界上第一台D N A全自动测序仪,随着此后技术的不断成熟与完善,D NA的测序已经实现了高通量、产业化。

由美、英、日、德、法、中六国参与的人类基因组计划(Human Genome Project,HGP),是人类文明史上最伟大的科学创举之一,其核心内容是人类基因组序列图的绘制)))测定人类基因组的全部D NA序列,该计划启动于1990年,原定15年完成,由于技术的成熟与基因组测序的规模化运作,人类基因组工作框架图构建已于2001年6月全部完成。

一、测序的原理D NA测序方法主要有双脱氧链终止法(Sanger法)和化学降解法(M axa m2Gilbert法)。

目前,传统的手工测序方法及仪器自动测序方法均使用双脱氧链终止法。

出了890C, 890M.型.
篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
每次测定的样品用量从最初的250nmol到二十世纪九十年 代只需几十pmol左右。仪器工作的基本原理主要经过以下 几步： (1) 将待测的蛋白质加入到仪器的旋转杯中。 (2) 在一定的条件下进行Edman降解, 经偶联－裂解－获得 ATZ氨基酸。 (3) 旋转杯一边旋转，一边抽真空，除去Edman降解时残 留的溶剂后, 降解的蛋白质和从蛋白质N末端断裂下来的 ATZ—氨基酸形成薄膜, 贴在旋转杯内壁上。 (4) 从蛋白质N—末端断裂下来的ATZ—氨基酸经氯丁烷 抽提出来。
(1)
高负的，因此，篮球比赛的计时计分系统是一种得分类型的系统
将PTH-氨基酸, 通过高效薄层层析(如聚酰胺薄膜层析)分离, 每一种
PTH—氨基酸在一定的展层剂的条件下，其迁移率是一定的，在薄
膜上的坐标的位置就可以确定。然后与标准的PTH—氨基酸在薄膜
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1.2蛋白质序列测定的重要意义 蛋白质序列测定主要可以提供以下几种参数:
(1) 为DNA 序列分析找出探针， (2) 作为蛋白质和肽类纯度鉴定 (3) 研究蛋白质的结构及功能之间的关系及蛋白质结构的 同源性。 (4) 确定蛋白质生物活性部位，酶与底物结合及催化位点 (5) 确定核酸密码中与蛋白质序列的起始位点及结束位点 (5) 可以科学的解释蛋白质晶体结构, 蛋白质分子进化的分 支点, 分子遗传疾病发病机理，分子免疫的机理。
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第十四章全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪首页习题习题名词解释选择题简答题一、名词解释1．荧光标记引物法2．荧光标记终止底物法3．多色荧光标记引物法4．多色荧光标记终止底物法5．Edman降解法6．Sanger双脱氧链末端终止法7．平板电泳型DNA测序仪8．毛细管电泳型DNA测序仪9．缩微生物处理器二、选择题【A型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案（最佳答案）。

1.DNA的一级结构是指（）A．DNA空间构象B．核苷酸序列C．碱基序列D．氨基酸序列E．DNA双螺旋结构2.下列有关测序反应体系反应原理的叙述中，错误的是（）A．加入的核苷酸单体为2'-脱氧核苷三磷酸B．低温退火时，引物与模板形成双链区C．沿着3'-5'的方向形成新链D．DNA聚合酶结合到DNA双链区上启动DNA的合成E．形成的新生链与模板完全互补配对3.双脱氧链末端终止法测序反应与普通体外合成DNA反应的主要区别是（）A．DNA聚合酶不同B．dNTP的种类不同C．dNTP的浓度不同D．引物不同E．双脱氧链末端终止法测序反应体系中还需加入ddNTP4.下述荧光标记方法中，可以将A、C、G、T四个测序反应在同一管中完成而不影响测序结果的是（）A．单色荧光标记引物法B．单色荧光标记终止底物法C．多色荧光标记引物法D．多色荧光标记终止底物法E．多色荧光标记法5.下述哪一荧光标记法，必须将A、T、C、G四个测序反应分管进行，但可以合并在一个泳道内电泳（）A．单色荧光标记引物法B．单色荧光标记终止底物法C．多色荧光标记引物法D．多色荧光标记终止底物法E．多色荧光标记法6.毛细管电泳型测序仪电泳时仪器显示无电流，最常见的原因是由于（）A．电极弯曲B．电泳缓冲液蒸发使液面降低C．毛细管未浸入缓冲液中D．毛细管内有气泡E．测序样本未注入毛细管中7.毛细管电泳型测序仪电泳时产生电弧，主要原因是（）A．电泳缓冲液漏出B．电泳缓冲液配制有误C．电极、加热板或自动进样器上有灰尘沉积D．测序样本纯化不完全，含有盐性成分E．加热板温度过高8.全自动DNA测序仪的主要应用范围，不包括（）A．人类遗传病、传染病和癌症的基因诊断B．法医的亲子鉴定和个体识别C．生物工程药物的筛选D．动植物杂交育种E．新蛋白质的鉴定9.蛋白质测序仪的基本工作原理，主要是利用（）A．Edman降解法B．双脱氧链末端终止法C．化学降解法D．氧化-还原法E．水解法10.蛋白质测序仪主要检测（）A．核苷酸序列B．核糖核酸序列C．碱基序列D．氨基酸序列E．脱氧核糖核酸序列11.下列有关双脱氧链末端终止法测序原理的叙述中，不正确的是（）A．其基本原理是利用DNA的体外合成过程B．反应体系中需加入dNTP和ddNTPC．ddNTP可以形成磷酸二酯键而掺入到DNA链中D．dNTP掺入后可导致新合成链在不同的位置终止E．生成的反应产物是一系列长度不同的多核苷酸片段12.下列有关多色荧光标记终止底物法的叙述中，不正确的是（）A．需将4种ddNTP分别用4种不同的荧光染料标记B．标记和终止过程在同一时间完成C．A、T、C、G四种反应可以在同一管中完成D．可在一个泳道内完成电泳测序E．荧光染料标记过程和延伸反应终止分别发生在同一DNA片段的两端13.下列有关荧光标记DNA的检测原理的叙述中，不正确的是（）A．用于测序的产物绝大多数应为单链B．DNA片段上的荧光基团可吸收激光束提供的能量而发射出特征波长的荧光C．两极间的电势差推动DNA片段从正极向负极泳动并达到相互分离D．不同颜色的荧光与不同的碱基信息相对应E．测序结果中，纵轴表示荧光波长种类和强度14.下列有关Edman降解法基本原理的叙述中，错误的是（）A．PTC-多肽的生成是在弱碱性条件下B．PTC-多肽的生成反应需用过量的试剂使有机反应完全C．在无水强碱的作用下，可使靠近PTC基的氨基酸环化，形成ATZ衍生物和一个失去末端氨基酸的剩余多肽D．剩余多肽链可以进行下一次以及后续的降解循环E．ATZ衍生物经水溶酸处理转化为PTH氨基酸15.毛细管电泳型DNA测序仪电泳时仪器显示无电流，最常见的原因为（）A．缓冲液配制错误B．毛细管内有气泡C．电泳缓冲液蒸发使液面降低，而未能接触到毛细管的两端D．电极弯曲而无法浸入缓冲液中E．加热板温度过高16.在单纯以测定DNA序列为目的的全自动DNA测序仪中，广泛应用的原理是（）A．Edman降解法B．双脱氧链末端终止法C．化学降解法D．氧化-还原法E．水解法17.双脱氧链末端终止法测序的基本原理是利用（）A．RT-PCRB．PCRC．Western BlotD．Southern BlotE．水解法18.测序反应体系中加入的酶为（）A．限制性内切酶B．RNA聚合酶C．DNA聚合酶D．DNA水解酶E．反转录酶19.在普通的体外合成DNA反应体系中，加入的核苷酸单体为（）A．dAMP，dCMP，dGMP，dTMPB．dADP，dCDP，dGDP，dTDPC．dATP，dCTP，dGTP，dTTPD．ddATP，ddCTP，ddGTP，ddTTPE．ddADP，ddCDP，ddGDP，ddTDP20.双脱氧链末端终止法测序反应中除PCR反应体系成分外，还加入了（）A．DNA聚合酶B．dNTPC．dNDPD．ddNTPE．ddNDP21.在DNA自动测序中广泛应用的示踪物是（）A．色素染料B．同位素C．电化学发光物质D．酶E．荧光素22.下列有关多色荧光标记引物法标记引物的特性的叙述中，正确的是（）A．四种标记引物的序列相同，但5'端标记的荧光染料颜色不同B．四种标记引物的序列相同，但3'端标记的荧光染料颜色不同C．四种标记引物的序列不同，其5'端标记的荧光染料颜色也不同D．四种标记引物的序列不同，其3'端标记的荧光染料颜色也不同E．四种标记引物的序列不同，其2'端标记的荧光染料颜色也不同23.下列有关多色荧光标记引物法的叙述中，不正确的是（）A．需将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的5'端B．四种引物的序列相同，但标记的荧光染料颜色不同C．A、T、C、G四个测序反应必须分管进行D．上样时需分别在不同泳道内电泳E．特定颜色荧光标记的引物与特定的双脱氧核苷酸底物保持对应关系24.一般来说，DNA测序图的横坐标和纵坐标的意义是（）A．横坐标代表荧光波长种类，纵坐标代表时间B．横坐标代表荧光波长种类和强度，纵坐标代表时间C．横坐标代表时间，纵坐标代表荧光波长种类D．横坐标代表时间，纵坐标代表荧光波长种类和强度E．横坐标代表荧光波长种类，纵坐标代表荧光波长强度25.下列有关DNA自动测序仪自动进样器区功能的叙述中，不正确的是（）A．毛细管进入样品盘标本孔中进样依靠自动进样器的移动完成B．电极和毛细管一般均固定不动C．两级间极高的电势差可促进DNA分子在毛细管中很快泳动D．电极为电泳的正性电极E．样品盘有48孔和96孔两种，可一次性连续测试48或96个样本26.下列有关DNA自动测序仪凝胶块区功能的叙述中，不正确的是（）A．电泳时缓冲液阀关闭B．电极为电泳的正性电极C．在分析每一个样品前，泵自动冲掉上一次分析用过的胶，灌入新胶D．注射器驱动杆可给注射器提供正压力，将注射器内的凝胶注入毛细管中E．玻璃注射器可储存凝胶高分子聚合物以及在填充毛细管时提供必要的压力27.平板电泳型DNA测序仪的测序长度一般为（）A．600～900bpB．400～600bpC．200～400bpD．900～1000bpE．300～500bp28.毛细管电泳型DNA测序仪的测序长度一般为（）A．600～900bpB．400～600bpC．200～400bpD．900～1000bpE．300～500bp【X型题】每题的备选答案中有两个或者两个以上正确答案，请选择正确答案。

2.一般介绍全自动DNA测序仪、蛋白质测序仪的结构及功能，常见故障及排除
3.一般介绍全自动DNA测序仪、蛋白质测序仪的应用及研究进展
五、实验教学目标与内容
（一） 可见分光光度计的使用和调校
目标
1.掌握可见分光光度计常见故障产生的原因的分析及检修
2.熟悉各种分光光度计的原理与结构，学会分光光度计的正确使用方法和调校方法
3.一般介绍生物安全柜的安装注意事项
第十单元 培养箱及相关技术
目标
1.掌握电热恒温培养箱和二氧化碳培养箱的结构、原理及正确使用方法
2.熟悉厌氧培养箱的结构及工作方式
3.了解其他类型培养箱的结构及工作原理
内容
1.重点阐述电热恒温培养箱和二氧化碳培养箱的结构原理及使用方法
2.详细讲解厌氧培养箱的结构原理及使用
3.一般介绍流式细胞仪的临床应用实例
第十六单元 全自动DNA测序仪和蛋白质测序仪及相关技术
目标
1.掌握全自动DNA测序仪、蛋白质测序仪的工作原理、结构及功能
2.了解测序仪主要应用、常见故障及维护
3.了解全自动DNA测序仪、蛋白质测序仪研究进展
内容
1.重点阐述全自动DNA测序仪、蛋白质测序仪的工作原理
（二）基本技能
通过理论学习和实验，掌握临床常见检验仪器的基本原理和结构，从理论到实践的转换和结合，学会一般仪器的正确使用方法、日常保养维护和简单故障的排除。
（三）本素质
本课程为医学检验专业学生开设的一门应用性很强的专业课，通过理论课程的讲授，使学生掌握常见临床检验仪器的工作原理、仪器结构、性能指标的评价方法，学会正确地选择与使用仪器；通过实验，让学生了解构成仪器的基本元件、简单电路的识别，学会正确地调试仪器，能够正确地进行日常维护、保养，掌握常见故障的处理方法。使学生能够理论联系实际，增强动手、动脑能力。

临床医学检验：临床检验仪器必看题库知识点真题1、名词解释常液洗脱正确答案：是在样品的分离过程中从始至终采用相同的流动相和相同的流量来帮助样品的分离。

2、多选采用葡萄糖氧化酶生物传感器技术的手持式血糖仪所使用的（江南博哥）试纸顶层，由亲水层、粘附层、酶层、绝缘层、碳层、塑料支撑层等组成，其中关于各层的主要作用，下面的说法中正确的是（）。

A.酶层内含葡萄糖氧化酶B.绝缘层可以限定电极的大小C.碳层内包括工作电极和参考电极D.顶层是透明的，便于确认血量E.亲水层和粘附层则有助于控制和引导小样品的血样正确答案：A, B, C, D, E3、问答题简述毛细管等速电泳的工作原理。

正确答案：同等电聚焦电泳一样，等速电泳在毛细管中的电渗流为零，缓冲系统由前后两种不同浓度的电解质组成。

毛细管内首先导入具有比被分离各组分高电泳淌度的前导电解质，然后进样，随后再导入比各分离组份低电泳淌度的尾随电解质，在强电场的作用下，各被分离组分在前导电解质与尾随电解质之间的空隙中发生分离。

4、多选红外和远红外分光光度技术用于制作多种无创检测仪器，包括（）。

A.无创伤自测血糖仪B.血红蛋白检测仪C.无创（经皮）胆红素检测仪D.血小板聚集仪E.无创全血细胞测定仪正确答案：A, B, C, E5、单选离子选择性电极法测得的是血清样本中离子的（）。

A.电位差B.浓度C.电量D.数量E.电流正确答案：B6、单选密度梯度离心法又称为（）。

A.分离离心法B.组份分离法C.区带离心法D.低速离心法E.高速离心法正确答案：C7、多选下列有关DNA自动测序仪自动进样器区功能的叙述中，正确的是（）。

A.毛细管进入样品盘标本孔中进样依靠自动进样器的移动完成B.电极和毛细管一般均固定不动C.DNA分子在毛细管中泳动的动力来自于两级间极高的压力差D.电极为电泳的正性电极E.样品盘有48孔和96孔两种，可一次性连续测试48或96个样本正确答案：A, B, E8、单选生物安全柜内的空气需经HEPA过滤器过滤后再排放到大气中，其主要目的是（）。

临床医学检验：临床检验仪器试题预测真题1、单选电解质分析仪长期使用后，电极内充液下降最严重、需要经常调整内充液浓度的电极是OOA.钠电极B.钾电极C.氯电极D.钙电极E.参比电极正确答案：A2、羲（江南博哥）尿干化学试剂带测定尿酮体，下列说法中错误的是OOA.本法对酮体各组分的灵敏度相同B.测定时硬是用新鲜尿液C.试剂带受潮，可使尿酮体检测出现假阳性结果D.尿中苯丙酮可出现假阳性结果E.干化学尿酮检测采用硝基铁氟化钠法正确答案：A3、多选原子吸收光谱仪在工作过程中出现分析结果偏低的故障时，常见的原因有OOA.试样挥发不完全，细雾颗粒大，在火焰中未完全离解B.被测试样浓度太高，仪器工作在非线性部分C.标准溶液变质D.试样污染E.假吸收正确答案：A,B,C,D4、问答题简述血沉自动分析仪的安装注意事项。

正确答案：仪器的安装：一般血沉分析仪的安装都比较简单，严格按照说明书安装即可。

仪器安装的条件如下：避免安装在有水分、潮湿的地方，应安装在清洁、通风处，（室内温度应在15°C~32°C,相对湿度应W85%）的地方。

应安装在稳定的水平实验台上（最好是水泥台），禁止安装在高温、阳光直接照射处；远离高频、电磁波干扰源的地方。

5、单选按照美国NSF49标准，一般将11级生物安全柜划分成的等级是OoA3个B.4个C.5个D.2个E6个正确答案：B6、多选采用化学多层涂膜技术制成的干片组成包括OoA.参比层B.支持层C.试剂层D.指示剂层E.分布层正确答案：B,C,D,E7、单选瑞典科学家ATiSeIiUS首先利用U形管建立移界电泳法的时间是OOA.1920年B.1930年C.1937年D.1940年E.1948年正确答案：C8、判断题离心转头参数K值越大，离心效率越高。

正确答案：错9、单选光路与流路校正的主要目是确保OoA.激光光路稳定B.样品流稳定C.激光光路与样品流处于正交状态D.荧光光光路与样品流处于正交状态E.散射光光路与样品流处于正交状态正确答案：C10、问答题简述尿液分析仪的结构。

二、选择题【A型题】1．B 2．C． 3．E 4．D 5．C． 6．B 7．C． 8．E 9．A 10．D11．D 12．E 13．C． 14．C． 15．C 16．B 17．B 18．C． 19．C． 20．D21．E 22．A 23．D 24．D 25．D 26．A 27．A 28．E【X型题】1．BC． 2．BCE 3．ABC． 4．ABCD 5．ABCD6．ABCD 7．ABCD 8．ACD 9．ABCD 10．BCDE11．BDE 12．ABDE 13．ABE 14．ACDE 15．BCDE三、问答题1．简述双脱氧链末端终止法测序原理。

答：双脱氧链末端终止法测序原理是利用DNA的体外合成过程。

反应体系中的核苷酸单体除了4种dNTP外，还有ddNTP。

反应过程中ddNTP虽然可以与正在延伸的DNA链的末端形成磷酸二酯键而掺入到DNA链中，但它们本身没有3'-OH，不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键，从而使正在延伸的DNA链在此终止。

据此原理分别设计四个反应，每一反应中存在相同的DNA模板、引物、四种dNTP和一种ddNTP(如ddATP)，则新合成的DNA链在可能掺入正常dNTP的位置都有可能掺入ddNTP而导致新合成链在不同的位置终止。

由于存在ddNTP与dNTP的竞争，生成的反应产物是一系列长度不同的多核苷酸片段。

通过PAGE对长度不等的新生链进行分离后，就可根据片段大小直接读出新生DNA链的序列。

2. 简述多色荧光标记引物法的原理。

答：荧光标记引物法是指将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的5'端。

当相同碱基排列的寡核苷酸链作为骨架分别被4种荧光染料标记后，便形成了一组（4种）标记引物。

这四种引物的序列相同，但5'端标记的荧光染料颜色不同。

在测序反应中，模板、反应底物、DNA聚合酶及标记引物等按A、T、C、G编号被置于4支微量离心管中，A、T、C、G四个测序反应分管进行，上样时合并在一个泳道内电泳。

1.全自动测序仪：原理：在DNA片段中加入4种被荧光分别标记的ddNTP做为引物，ddNTP的作用是链终止剂，当进行PCR时，遇到ddNTP便会停止，因此会形成链长度不一的一系列片段，由于每个片段末端标记的荧光不同用激光探头扫描电泳后形成的按大小顺序跑出的条带，即可读出核苷酸序列。

①在片段中需加入4种不同的ddNTP②加入PCR 需要的模板，Tap聚合酶，缓冲液，及dNTP，进行单向PCR，产生长度不同的一系列片段。

③将PCR扩增出的片段进行PAGE电泳，其电泳后只跑出一个带④用激光探头扫描条带，即可读出相应序列。

2.（blue-white screening）蓝白斑筛选：是一种可以在同一转化板上完成重组质粒的筛选方法。

次方法涉及基因的插入失活，利用一种蓝色化合物的形成作为指示剂，在这种情况下失活的基因是lacZ，该基因编码β-半乳糖甘酶，受到启动子的调控，当大肠杆菌菌株表达lac阻抑物，则载体那个的lacZ基因由IPTG诱导表达，表达形成的酶可以利用底物X-gal形成蓝色化合物，重组质粒中lacZ的插入失活导致不能形成蓝色菌落而形成白色菌落。

色氨酸操纵子转录的衰减作用：色氨酸与色氨酸阻抑物结合形成复合物才能结合到操纵子基因上。

该阻抑物转录的起始减少了大约70杯，色氨酸操纵子的RNA序列含有4个互补区，1、2、3、4，通常情况下形成1：2，3：4的互补，在色氨酸含量高时，核糖体迅速在两个色氨酸密码子处插入色氨酸，这样翻译可以直达前导肽末端，当RNA聚合酶到达终止序列时，核糖体封闭了2，3：4形成弱化发夹结构，转录终止。

当色氨酸含量低时，缺乏氨酰tRNA，核糖体将在两个色氨酸密码子滞留封闭1，形成2：3抗终止子，使3：4弱化子不能形成，转鹿得以延续到其下游。

3.五种重要的工具酶：①碱性磷酸酶：从DNA或RNA的5`端去除磷酸基。

②DNA连接酶：5`-磷酸与3`-羟基相结合。

③DNA聚合酶1：沿5 `至3`的方向合成与DNA模板互补的DNA。

专题5测评(时间:60分钟,满分:100分)一、选择题(每小题2.5分,共50分)1.下列关于DNA在NaCl溶液中的溶解度的叙述,正确的是( )A.随着NaCl溶液浓度的增大,DNA在NaCl溶液中的溶解度也增大B.随着NaCl溶液浓度的减小,DNA在NaCl溶液中的溶解度也减小C.DNA在NaCl溶液中的溶解度与NaCl溶液的浓度呈正相关D.当NaCl溶液的浓度为0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低0.14mol/L的NaCl溶液中,DNA的溶解度最低;高于或低于此浓度,DNA的溶解度都会升高。

2.下列是有关DNA鉴定实验的1管(对照组)与2管(实验组)示意图,图示中恰当的选项是( )3.下列叙述错误的是( )A.改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出B.在沸水浴中,DNA与二苯胺试剂反应,冷却后呈现蓝色C.用电泳法可分离带电性质、分子大小和形状不同的蛋白质D.用透析法可去除蛋白质样品中的小分子杂质NaCl溶液的物质的量浓度为0.14mol/L时,DNA溶解度最小,可析出。

4.下列有关PCR技术的说法,不正确的是( )A.PCR是在细胞内完成的B.PCR技术是一种在生物体外复制特定DNA的技术C.PCR技术的原理与DNA复制的原理相同D.PCR技术的前提是有一段已知核苷酸序列的DNA技术是在生物体外进行DNA复制的技术,其原理与DNA复制的原理相同,但前提是必须要有一段已知核苷酸序列的DNA和根据核苷酸序列合成的引物。

5.DNA粗提取实验中,应尽可能避免DNA断裂和降解。

相关操作正确的是( )A.以菜花为材料进行研磨时,可以适当加热以促进DNA溶解B.向DNA溶液中迅速加入蒸馏水,快速搅拌,使DNA快速析出C.将丝状物溶解到物质的量浓度为2 mol/L NaCl溶液中后,过滤后弃去滤液D.向DNA溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌DNA时,研磨过程中加热,会使细胞裂解液降解溶出的DNA;向DNA溶液中加蒸馏水使DNA析出时,应缓慢加入,并沿一个方向轻轻搅拌,以防止DNA断裂;丝状的DNA 溶解到物质的量浓度为2mol/LNaCl溶液中,过滤后DNA存在于滤液中,不能弃掉滤液。

学院：______ 班级:_______ 学号:_________ 姓名:__________ 成绩：______ 实验二引物设计及测序结果分析目的：1、掌握常规引物设计的原则及操作流程。

2、熟悉简并引物设计的原理及操作方法。

3、熟悉引物设计软件及在线引物设计工具的操作方法。

4、掌握使用相关软件及在线工具分析测序结果的方法。

内容：1、使用Primer Premier、Oligo、BLAST等软件及在线工具进行常规引物设计，并对引物扩增效率、特异性进行评价。

2、使用DNAMAN软件进行常规引物快速设计。

3、使用NCBI中的在线引物设计工具Primer-BLAST快速设计引物。

4、使用在线工具CODEHOP设计简并引物。

5、使用Chromas、BioEdit软件查阅测序结果峰图文件。

6、使用DNAMAN软件对测序序列进行编辑，进行序列拼接。

软硬件要求：联网计算机，预装Windows 7操作系统，预装IE或Chrome浏览器、英汉电子词典（有道词典或金山词霸），预装DNAMAN7、Primer Premier5、Oligo7、Chromas、BioEdit等生物信息学分析软件。

操作及问题：一、Primer Premier5、Oligo7、BLAST常规引物设计本部分操作将使用Primer Premier5、Oligo7、BLAST等软件及工具设计拟南芥AtBADH基因编码区全长特异引物。

（参考“第四章引物设计及测序结果分析”课件）（一）使用Primer Premier5搜索引物1、在NCBI数据中查找登录号为NM_001198470的序列记录，查阅相关信息，并下载序列将其保存为fasta格式文件。

问题1：该序列是什么类型的序列？该序列编码区在什么位置？2、打开Primer premier5软件，点击键ctrl+V将上一步中下载的序列粘贴入弹出的GeneTank窗口中（或者点击。

3、点击GeneTank窗口中左上角的Primer premier窗口中点击Search Criteria窗口中根据要求选择合适选项及参数，选定后，点击Search Progress窗口中有Search Results窗口；如没有出现数重新搜索引物。

《临床检验仪器学》教学大纲课程类别：专业核心课程课程性质：必修英文名称：Clinical Laboratory Instruments总学时：36 讲授学时：28 见习学时：8学分：2先修课程：临床生物化学检验、临床免疫学检验、临床基础检验、临床病原生物学检验、临床血液学检验适用专业：医学检验技术开课单位：医学院一、课程简介临床检验仪器学主要介绍临床检验常规仪器的基本构造、原理、功能和应用。

通过学习本课程，使学生掌握临床检验主要仪器的原理和应用，了解临床检验主要仪器的基本结构和性能及常见故障的排除。

二、教学内容及基本要求第一章概论（2学时）教学内容：1.1 学习临床检验仪器课程的目的1.2 临床检验仪器的特点、分类和常用性能指标1.3 临床检验仪器的主要部件、维护和选用标准1.4 临床检验仪器的进展和发展趋势教学要求：1.了解临床检验仪器的特点、分类和常用性能指标。

2.了解临床检验仪器的主要部件、维护和选用标准。

3.了解临床检验仪器的进展和发展趋势。

授课方式：讲授第二章显微镜技术和显微镜（2学时）教学内容：2.1光学显微镜2.2光学显微镜的分类及其应用2.3电子显微镜2.4显微镜的维护、常见故障及排除2.5 时间分辨荧光免疫分析仪显微摄影术教学要求：1.掌握显微镜的应用。

2.了解显微镜的基本结构和性能。

授课方式：讲授第三章微生物检测技术和相关仪器（2学时）教学内容：3.1自动血培养仪3.2 微生物自动鉴定及药敏分析系统教学要求：1.掌握微自动血培养仪和微生物自动鉴定及药敏分析系统的应用。

2.了解微自动血培养仪和微生物自动鉴定及药敏分析系统的基本结构和性能。

授课方式：讲授第四章生物安全柜（1学时）4.1生物安全柜的工作原理和分类4.2 生物安全柜的结构与功能4.3 生物安全柜的实际应用教学要求：1.掌握的生物安全柜的应用。

2.了解生物安全柜的基本结构和性能。

授课方式：讲授第五章细胞培养技术和培养箱（1学时）教学内容：5.1细胞培养技术5.2 培养箱的分类、结构和使用教学要求：1.掌握培养箱的应用。